Año 3, Nº 4 - 2013

ISSN 1853 -7677

CIENCIA Y TECNOLOGIA
DE LOS CULTIVOS INDUSTRIALES

Tabaco
Coordinador Programa Nacional de Cultivos Industriales:
Ing. Agr. (MSc.) Alejandro Valeiro

Director Centro Regional Salta-Jujuy

Ing. Agr. (MSc) Mario De Simone

Editor Ejecutivo:
Ing. Agr. (MSc) Alejandro M. Rago (IPAVE, CIAP, Córdoba

Editores Adjuntos:
Ing. Agr. (Dr) Luis Erazzú (EEA Famaillá, Tucumán).
Ing. Agr. (MSc) Diana Piedra (CR Chaco-Formosa, Chaco).
Ing. Agr. (PhD) Rodolfo Bongiovanni (EEA Manfredi, Córdoba).
Ing. Agr. (MSc) Roberto Sopena (EEA Famaillá, Tucumán).
Ing. Agr. (MSc) Valeria Etchart (Instituto de Genética, CICVyA, Buenos Aires).
Ing. Agr. (Dr) Martin Acreche (EEA Famaillá, Tucumán).
Ing. Agr. (MSc) Marcelo Mayol (EEA Cerro Azul, Misiones).
Ing. Agr. (Dra) Eva Cafrune (IPAVE, CIAP, Córdoba)
Ing. Agr. (MSc) Mario Mondino (EEA Santiago del Estero, Santiago del Estero)
Ing. Agr. (MSc) Mariano Cracogna (EEA Reconquista, Santa Fe)
Ing. Agr. Guillermo J. March (CIAP, Córdoba)
Ing. Agr. (MSc) Alejandro Valeiro (PNIND)

INTA – CIAP. Av. 11 de septiembre 4755 (5020), Córdoba, Argentina

Impresión: Biglia Impresores, Corrientes 3362, Córdoba

Diseño de tapa: Mariano Matías
Fotos de tapa: Rodolfo Bongiovanni, Adriana Ortega y Guadalupe Mercado Cárdenas.
Diagramación de texto: Enrique Biglia

La información que consta en los distintos artículos es de responsabilidad exclusiva de los autores
de los trabajos, los que no necesariamente manifiestan el punto de vista del Instituto Nacional de
Tecnología Agropecuaria.
El contenido puede reproducirse dejando expresa constancia de la fuente.

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 1

2 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
 CONTENIDO
SECCIONES Página

OPINIÓN/REVISIÓN

Problemas ambientales y coaliciones sociales. 5

Cristina Biaggi y Alejandro Valeiro.

INVESTIGACIÓN

Nutrición del tabaco en condiciones variables de humedad edáfica y materia orgánica. 13

Josefina Diez, María E. Toncovich y Mónica B. Rodriguez.

Herramientas moleculares para la caracterización de Rhizoctonia spp. causales de patologías 17

en tabaco Tipo Virginia, en Salta y Jujuy (Argentina).
Guadalupe Mercado Cárdenas, Marta Galván y Marcela Rodriguero.

Variabilidad genética en germoplasma de tabaco Tipo Virginia empleando marcadores 24

moleculares.
Daniela Cuellar, Mónica Aparicio, Guadalupe Mercado Cárdenas, Marta Galván, Gisel Taboada,
Juan Galli, Mario Martínez, Luis Ibarra, María del Carmen Menéndez Sevillano y María Elena Toncovich.

Aportes para el manejo del corcovo del tabaco en la región del NOA. 29
Ana C. Ramallo, Paola López Lambertini, Daniel Ducasse.

INFORMES ESPECIALES y TECNOLOGÍAS

Estimación del tamaño óptimo de parcela experimental para ensayos de rendimientos 35

de tabaco tipo Virginia.
Adriana Elina Ortega.

Comportamiento de variedades de tabaco Virginia en la localidad de Chicoana (Salta). 40

María Elena Toncovich, Juan Galli, Josefina Diez, José Sulca y Alejandra Guaymás.

Desarrollo de sustratos para almácigos flotantes de tabaco. 46

Carlos Herrando, Susana Krieger, Silvia Gómez, María E. Acosta y Fernando Lacci.

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 3

4 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
 OPINIÓN/REVISIÓN
Problemas ambientales y coaliciones sociales
Cristina Biaggi y Alejandro Valeiro
INTA, Estación Experimental Agropecuaria Famaillá
Correo-e: biaggi@correo.inta.gov.ar
INTRODUCCION
La magnitud y gravedad creciente de los
problemas ambientales en relación con el
cambio climático, la pérdida de diversidad
biológica y la degradación de los servicios de
los ecosistemas provocan reacciones de la
sociedad tanto a nivel local como global.
Estas reacciones repercuten en los Estados
Nacionales y derivan en una nueva gober-
nanza ambiental expresándose -en lo glo-
bal- en numerosos acuerdos multilaterales
(Convenciones y Protocolos) firmados y ra-
tificados durante los últimos 30 años por la
mayoría de los países Algunos ejemplos son:
la Convención sobre la Biodiversidad Bioló-
gica (1992-93) y su Protocolo de Cartagena;
la Convención Marco de Naciones Unidas
sobre los Cambios Climáticos (1992-94) y el
Protocolo de Kyoto; la Convención de Na-
ciones Unidas sobre el combate contra la
desertificación (1994-96), etc.. Muchos de
estos acuerdos establecen compromisos
concretos de cambio en los comportamien-
tos de las sociedades nacionales respecto del
ambiente. A nivel nacional, los compromisos
se concretan en legislación y reglamentacio-
nes que intentan asegurar esos cambios. Por
otro lado, la conciencia cada vez mayor del
problema, hace que las sociedades locales
también presionen por un mayor cuidado en
el uso de los recursos naturales y una mejor
calidad del ambiente en el que viven (5).
Los productores agropecuarios –entre otros
sectores- reciben el impacto de esas presio-
nes para modificar sus prácticas, la tecnolo-
gía que usan o los insumos que consumen en
el proceso productivo.
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Este artículo intenta desarrollar la pregunta
“¿qué ocurre en los territorios cuando se im-
pone realizar cambios en las prácticas o tec-
nologías agrícolas por los impactos ambien-
tales que estas generan, y sin que surjan de
una necesidad de los/as productores/as?”.
El caso que se analiza para intentar respon-
derla es el de la eliminación del bromuro de
metilo en los almácigos de tabaco, un agro-
químico responsable del adelgazamiento de
la capa de ozono.
A través de este ejemplo, se intenta sinte-
tizar el trabajo que el Instituto Nacional de
Tecnología Agropecuaria (INTA) desarrolla
desde hace más de diez años en la búsqueda
de una mayor sustentabilidad ambiental en
la producción de los cultivos industriales en
el norte de Argentina (4).
1. LA ELIMINACIÓN DEL BROMURO DE ME-
TILO EN LOS ALMÁCIGOS DE TABACO
En 1987, el reconocimiento de que el cloro
y el bromo tenían el potencial de destruir el
ozono estratosférico llevó a las naciones del
mundo a firmar el “Protocolo de Montreal
sobre las Sustancias que Agotan la Capa de
Ozono”, con el objetivo de reducir la produc-
ción y consumo mundial de esas sustancias.
En el sector agrícola, el único producto de
extendido uso a nivel mundial, en un listado
de más de 100 gases a ser controlados, es el
bromuro de metilo. A partir del Protocolo
de Montreal, se estableció un calendario de
eliminación de este producto que definía el
fin de la producción y consumo en los países
desarrollados en 2005 y para los países en
desarrollo en 2015 (3).
5
Independientemente de los plazos acorda-
dos inicialmente, muchos países en desa-
rrollo -entre ellos la Argentina- realizaron
importantes esfuerzos en el ajuste y difusión
de alternativas y se comprometieron frente
a la comunidad internacional a anticipar la
eliminación, realizando un aporte fundamen-
tal para la recuperación de la capa de ozono.
En nuestro país, el INTA inició su trabajo en
este tema en 1998, en el marco del Proyecto
INTA PROZONO para la eliminación de bromu-
ro de metilo en los almácigos de tabaco (6).
Las propuestas para el reemplazo del bro-
muro de metilo en los almácigos de tabaco
fueron las bandejas flotantes y el metam so-
dio. Ambas alternativas controlan o evitan
eficientemente las plagas, enfermedades y
malezas en los almácigos de tabaco, adap-
tándose -al mismo tiempo- a las específicas
condiciones climáticas de las provincias taba-
caleras y a los tipos de productores/as de las
diferentes regiones.
Las actividades del proyecto se desarrolla-
ron en siete provincias del norte argentino
-Jujuy, Salta, Catamarca, Tucumán, Chaco,
Corrientes y Misiones-, que se caracterizan
porque los sistemas productivos tabacaleros
están en su mayor parte a cargo de peque-
ños/as productores/as y de agriculturas cam-
pesinas, aunque existe un porcentaje menor
pero muy importante de productores/as em-
presariales capitalizados en las provincias de
Salta y Jujuy.
Hacia el final del proyecto, en términos de
eliminación concreta del uso de bromuro de
metilo los logros pueden resumirse de la si-
guiente forma:
a) el consumo de bromuro de metilo en el
sector disminuyó en un 94%;
b) 20.200 productores de tabaco (93,7%
del total) dejaron de utilizar bromuro y
adoptaron las alternativas propuestas;
c) se generaron nuevas tecnologías que
permitieron reducir los costos de las al-
ternativas; y
d) cuatro provincias prohibieron -en el
6 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
marco de sus leyes provinciales de agro-
químicos- el uso de bromuro de metilo en
tabaco (Corrientes y Tucumán) y para to-
dos los usos (Salta y Misiones) a partir de
del 2007.
2. LA RESISTENCIA DE LOS/AS PRODUCTO-
RES/AS
Los cambios tecnológicos o de prácticas agrí-
colas por externalidades ambientales se ca-
racterizan por no surgir como una necesidad
de los/as productores/as. Por lo tanto, estos/
as no priorizan las mudanzas indispensables
para una producción más sustentable, sobre
todo cuando sus economías son precarias. El
cambio “les viene de afuera” perciben los/as
agricultores/as, y por un tema que es nuevo:
el cuidado del ambiente.
En el caso de la eliminación del bromuro de
metilo, existieron resistencias desde varios
frentes durante los diez años de vida del pro-
yecto.
Desde el sector de las empresas que im-
portaban y comercializaban el bromuro en
el mercado, las resistencias fueron muy im-
portantes hasta casi el final del proyecto. Sin
embargo, fue en la primera etapa cuando or-
ganizaron un fuerte “lobby” con algunos pro-
ductores de tabaco, frutilla y hortalizas para
que no se adelantara la fecha del reemplazo
del bromuro de metilo.
La principal tecnología propuesta por el pro-
yecto -los almácigos flotantes- presentó al-
gunas resistencias específicas. Por un lado,
porque la producción de plantines sin sue-
lo implica un cambio tecnológico de enver-
gadura para el sector. Por otro, por algunas
experiencias previas fallidas en las provincias
del noroeste, por deficiencias en la transfe-
rencia de la tecnología y porque la calidad
del agua en algunas zonas no era la más ade-
cuada para el sistema.
Las estrategias para modificar estas resisten-
cias fueron numerosas, y no solo desde INTA
PROZONO. Por ejemplo, en Catamarca don-
de se demoró en aceptar la necesidad del
cambio por parte de todos los sectores invo-
lucrados, el gobierno de la provincia impulsó
una medida para premiar con un subsidio a
aquellos/as productores/as que reemplaza-
ran el BM. De esa manera se dinamizó el pro-
ceso logrando un 100 % de sustitución (2).
3. ESTRATEGIAS PARA LA ELIMINACION DEL
BROMURO DE METILO
Aunque el universo de productores/as es
especialmente amplio en este cultivo (tanto
por la cantidad y tipología de explotaciones
como por la diferencias entre las regiones), el
hecho de que el sector estuviera organizado
favoreció el trabajo en terreno. En todas las
provincias existen cámaras, asociaciones y/o
cooperativas de productores/as de tabaco
con una amplia trayectoria.
Desde el comienzo del proyecto, fue necesa-
rio tomar decisiones estratégicas. Las princi-
pales son presentadas a continuación:
1.Se firmaron convenios entre el INTA y los
gobiernos de cada una de las siete pro-
vincias tabacaleras para la implementa-
ción del proyecto. Como parte de estos
convenios, se debía constituir un Comité
Coordinador Provincial conformado por
representantes de los productores/as
(cooperativas, cámaras y gremios), de los
ministerios o secretarías de producción
provinciales y, en algunos casos, de las em-
presas tabacaleras. Estos comités tomaron
las principales decisiones estratégicas del
proyecto en cada provincia.
2.Las tecnologías de reemplazo del bromu-
ro de metilo se decidieron en cada una
de las provincias, según las características
de los sistemas productivos locales. Por lo
tanto, aunque el INTA había investigado
y experimentado previamente las mejo-
res opciones para el cambio, la selección
de las alternativas para cada provincia se
dió en el seno de cada uno de los comités.
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Esto trajo aparejado que en algunas zonas
se sustituyera con solo una opción de las
promovidas por el proyecto; en otras, con
dos; y en Salta, por ejemplo, se innovó con
tecnologías no planteadas originalmente
como opciones.
3.Los recursos que el proyecto tenía para fa-
vorecer el cambio fueron entregados a los/
as productores/as en forma de insumos. La
distribución de insumos subsidiados por el
proyecto aseguró -al menos- la prueba
inicial de las nuevas tecnologías por par-
te de los productores. Ellos/as reconocen
que éste fue un incentivo muy importan-
te, sobre todo porque los insumos fueron
acompañados de asistencia técnica para
asegurar un uso correcto. También se va-
loró como muy acertada la estrategia del
proyecto de no entregar recursos en efec-
tivo sino en insumos, hecho que aportó
a generar transparencia y confiabilidad
respecto del manejo y administración de
los fondos. El aporte complementario de
empresas, cooperativas e instituciones gu-
bernamentales como contrapartes, permi-
tió que los insumos alcanzaran a la mayor
parte de productores/as, ya que los fon-
dos de la donación internacional no eran
suficientes para abarcar toda la superficie
en cuestión.
Los Comités Coordinadores Provinciales
La conformación de los Comités tenía como
objetivo que el sector se articulara para lle-
var adelante este proceso en cada territorio
de una manera ajustada a las características
particulares de sus sistemas productivos.
Además, que se lograra una coordinación
desde la cual productores/as y otros actores
del sector pudieran utilizar los recursos de
INTA PROZONO (2).
El funcionamiento de cada comité en las dis-
tintas provincias reflejó las particularidades
socio-organizativas propias de cada territorio.
En los casos de Misiones, Tucumán y Chaco,
7
existían previamente entidades que reunían
a la pluralidad de actores con relevancia y
participación en las respectivas áreas ta-
bacaleras provinciales. Por lo cual, en lugar
de generarse un espacio específico a partir
de la llegada del proyecto, los equipos del
INTA PROZONO convergieron en aquellas
instituciones y desde allí se asumieron las
funciones correspondientes a los comités.
En la provincia de Misiones, por ejemplo, la
actuación se dio en el seno de la Comisión
Técnica de Tabaco de la Provincia de Misio-
nes (COTTAPROM), en Tucumán en el ámbi-
to de la Unidad Ejecutora Provincial (UEP), y
en Chaco dentro de la Unidad Coordinadora
Provincial (2).
En cambio, en las provincias de Salta, Jujuy,
Corrientes y Catamarca los comités se con-
formaron en función de la implementación
del proyecto. Se convocó en cada caso a la
multiplicidad de actores necesaria para ga-
rantizar que todas las partes tuvieran una
participación lo más directa posible en el de-
sarrollo de la propuesta de sustitución.
A excepción de Misiones y Jujuy, en los res-
tantes casos y por voluntad de los delegados
de las organizaciones e instituciones repre-
sentativas de los productores/as- se resolvió
no incluir en el seno de los comités la par-
ticipación de las empresas acopiadoras de
tabaco. Esta resolución se fundamentó en
que la toma de decisiones hacia el interior de
los comités podía verse influenciada por los
intereses específicos que atañen a las com-
pañías tabacaleras, y que éstos podían coli-
sionar con los de las cámaras y gremios de
los productores/as.
Las principales decisiones de los comités
giraron en torno a cómo sería el uso de los
fondos que el proyecto subsidiaba en cada
provincia en forma de insumos. Esto implicó
discutir qué era necesario comprar (bande-
jas, sustrato, etc.), qué cantidades era po-
sible adquirir con los fondos del proyecto y
cuáles serían las formas y criterios de distri-
bución entre los beneficiarios/as.
8 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Estas decisiones implicaron la discusión de
cuáles eran las tecnologías más adecuadas
para el reemplazo del bromuro de metilo,
más allá de lo que el proyecto recomendaba.
Por ejemplo, el Comité de Misiones decidió
que la única tecnología de reemplazo en su
territorio sería el almácigo flotante. Salta,
que se presentó como la provincia más inno-
vadora, promovió una producción de plan-
tines concentrada en la cooperativa local y
sumó el metam sodio y otras alternativas
originales, como el uso del vapor para la des-
infección de los suelos.
Un tema que era importante resolver era
cómo obtener más recursos para el cambio
tecnológico, que complementaran los del
proyecto. Fueron muy variadas las estrate-
gias en cada una de las provincias: en Tucu-
mán INTA PROZONO subsidiaba las bandejas
para los almácigos flotantes y el gobierno de
la provincia -con recursos provenientes del
mismo sector tabacalero- compraba el sus-
trato y lo entregaba a los productores/as en
forma de fondo rotatorio (2).
Otra de las acciones que trabajaron algunos
de los comités, fue la promoción de instru-
mentos legales que restringieran el uso del
bromuro de metilo a nivel local. Misiones fue
la primera provincia del país que prohibió su
comercialización a partir del 1 de enero de
2005. Más tarde y con este antecedente, en
Salta también se firmó un decreto que pro-
hibió todos los usos del bromuro de metilo,
mientras que en Corrientes y en Tucumán se
vedó su utilización específica en tabaco. Ju-
juy recién promulgó la prohibición en 2013.
Otras decisiones que tomaron los comités y
que favorecieron al desarrollo del proyecto
fueron las que se presentan a continuación:
•El proyecto tenía una propuesta para la
transferencia de las tecnologías y recursos
para llevarla adelante. Sin embargo, algu-
nos comités decidieron modificarla. Por
ejemplo, mientras que Tucumán contrató
un equipo de extensionistas durante toda
la vida del proyecto, los comités provincia-
 les de Corrientes, Chaco y Salta lo hicieron
únicamente en el primer año, y en el caso
de Misiones se decidió que la transferen-
cia de la tecnología fuera realizada por téc-
nicos de las empresas tabacaleras.
• Independientemente de como fue desa-
rrollada la transferencia, en la mayoría de
las provincias se consiguió -a partir de la
articulación dada en los comités- que hu-
biera un “discurso único” entre los profe-
sionales de las empresas, cooperativas, ex-
tensionistas del gobierno y del INTA, tanto
en la necesidad de eliminar el bromuro
de metilo como en cómo implementar las
alternativas de reemplazo, en especial la
tecnología de almácigos flotantes que era
la más innovadora.
• El funcionamiento y la periodicidad del tra-
bajo realizado por cada comité tomaron
distintas dimensiones y características en
cada caso, ajustándose a las actividades
y al desarrollo del proyecto en los territo-
rios. En Misiones la sostenibilidad del es-
pacio respondió a su convergencia dentro
de la COTTAPROM, comisión que reporta-
ba un mecanismo de trabajo y una agenda
de encuentros que existía previamente y
más allá de lo planteado en el marco del
proyecto.
En Salta el comité se conformó como un
espacio técnico que tenía como objetivo
discutir y decidir los aspectos más específi-
cos de las alternativas de sustitución. Pero
luego se fue transformando en un ámbito
de reflexión, decisión y acción sobre estra-
tegias más extensivas y/o políticas inhe-
rentes al desarrollo del sector tabacalero.
El fortalecimiento del comité requirió de
un trabajo permanente de relaciones pú-
blicas y articulación. Según algunos testi-
monios de quienes participaron del espa-
cio, se generó un proceso de aprendizaje
que devino en la construcción de mecanis-
mos de consenso para compartir decisio-
nes, “abriendo el juego” a la participación
e intentando integrar las diferencias en la
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
búsqueda de intereses comunes. Esto per-
mitió una mayor apropiación del proyecto
por parte de los actores intentando inte-
grar las diferencias en la búsqueda de inte-
reses comunes. En este caso, el comité se
reunía como mínimo una vez al mes, pero
en determinadas épocas lo hizo quincenal
y hasta semanalmente.
En los casos de Tucumán, Catamarca y Ju-
juy, los comités se reunieron con periodi-
cidad durante los primeros años del pro-
yecto (2002-2006). En esas instancias se
discutían y buscaban acuerdos sobre las
estrategias para eliminar el bromuro de
metilo, y a partir de ellos se decidía el des-
tino de los recursos que llegaban desde
el proyecto a cada una de las provincias.
Luego de este primer período, se fueron
disolviendo hasta desaparecer.
ANALISIS Y CONCLUSIONES
La experiencia del caso analizado muestra
que los cambios necesarios para alcanzar
una mayor sustentabilidad se encuentran
con un escenario donde confluyen resisten-
cias de los/as productores/as, la presencia de
una institucionalidad muy heterogénea en
los diferentes territorios y una desigualdad
de los sistemas productivos que implican, en
algunos casos, diferentes proyectos de desa-
rrollo territorial.
Por otro lado, también expresan un cambio
de paradigma: no se ofrece una tecnología
que los productores/as hayan expresado
como necesidad; y tampoco se espera que
sólo la adopten los/as interesados/as en las
mismas, sino todos. Tampoco es posible es-
perar que cada predio realice los cambios en
lapsos de tiempo indefinidos, ni se ofrece a
cambio una promesa de mejora en sus ren-
dimientos y/o ingresos por las nuevas inver-
siones realizadas.
Todo lo contrario: se trata de un cambio tec-
nológico “obligado” que deben hacerlo to-
dos/as los/as productores/as en un lapso de
9
tiempo establecido.
Para poder superar estos obstáculos es, en-
tonces, un requisito fundamental la confor-
mación de coaliciones sociales consistentes
en los territorios, que permitan transformar
esas restricciones en oportunidades de desa-
rrollo por medio de: la oferta de tecnologías
innovadoras, la diversificación económica de
sus productos, el ingreso a nuevos merca-
dos, y el mejoramiento de la imagen de estos
sectores productivos.
Las coaliciones sociales que surgieron de
esta experiencia –los Comités Provinciales
para la eliminación del bromuro de metilo-
muestran además los siguientes aspectos:
• Constituyeron un espacio privilegiado en
la concertación intereses para la solución
del problema ambiental que se planteaba.
Las actividades vinculadas con la gestión
ambiental implican una mirada en tiempo
y espacio que no todos/as ponen en consi-
deración, ya que en general se privilegian
los resultados y beneficios del corto plazo.
Este espacio colectivo permite una mirada
a con más largo alcance y orientada a la
protección de la fuente de producción y
no solo del “propio bolsillo”.
• Pueden convertirse en espacios de fortale-
cimiento de la institucionalidad local, que
es casi un requisito imprescindible para
el desarrollo territorial porque significa la
existencia de una red social con actores de
muy diversa procedencia (gubernamen-
tales, empresas privadas, instituciones de
atención a la sociedad, etc.) que se conoce,
que se tiene confianza, que discute y que
construye dentro del conflicto. Además,
puede lograr una identidad y convertirse
en un “responsable de origen social” para
solucionar los problemas ambientales del
territorio.
• Sin embargo, para asegurar que todos los
actores del territorio se beneficien de los
logros de estas coaliciones es necesario
que la participación sea lo más amplia po-
10 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
sible, sobre todo incluyendo a los sectores
con menos oportunidades.
A la vez, es necesario que estén presentes en
las coaliciones los actores con poder de deci-
sión. En el caso del proyecto INTA PROZONO,
la no participación de las empresas tabacale-
ras en algunos Comités Provinciales en parte
obstaculizó las acciones relacionadas con la
provisión de insumos (2).
• Los cambios son más factibles cuando hay
participación no sólo de la parte de la so-
ciedad del territorio directamente vincula-
da a agricultura, sino también la que será
beneficiada cuando el cambio se produz-
ca. No sólo como una manera “de presión”
hacia los/as productores/as, sino también
para que la sociedad conozca y reconozca
el esfuerzo que el sector realiza para me-
jorar la salud ambiental”.
• Finalmente, que estas coaliciones sociales
terminaron teniendo un poder –simbólico
o no, dependiendo de los casos- que no se
esperó cuando se organizaron.
Además, como lo mostraron los Comités con-
formados para la eliminación del bromuro de
metilo, las pautas y capacidades construidas
en ese marco instalaron nuevos dispositivos
y herramientas replicables a la hora de enca-
rar otros procesos.
Por ejemplo, en algunas provincias surgieron
con posteridad al proyecto nuevas comisio-
nes de trabajo, luego de capitalizar positiva-
mente la experiencia de articulación y fun-
cionamiento de los comités. Por ejemplo, la
articulación para la eliminación del uso del
bromuro de metilo se continúo con la discu-
sión para enfrentar otras problemáticas am-
bientales locales, como la implementación
del Manejo Integrado de Plagas y Enferme-
dades y la centralización de plásticos residua-
les provenientes de la producción (Proyecto
“Punto Limpio”).
Sin embargo, es importante destacar que
las capacidades de estas coaliciones socia-
les no fueron iguales en los diferentes terri-
torios. Los Comités conformados en Salta y
Misiones resultaron más consistentes y más
innovadores al momento de buscar estrate-
gias para lograr el reemplazo del bromuro de
metilo. Podría decirse que el factor humano
(quien motorizó la conformación del Comité
en Salta y quien se sumó al Comité que ya
funcionaba en Misiones) y la institucionali-
dad existente en cada caso (en comparación,
por ejemplo, a la presente en Jujuy) tuvieron
influencia en el éxito del proyecto en cada
territorio (1).
Estas diferencias entre las coaliciones deter-
minaron que no todos los territorios tuvieran
la misma capacidad para convertir el reem-
plazo del bromuro de metilo en una oportu-
nidad.
El caso del bromuro también muestra la im-
portancia que la legislación ambiental tiene
en estas situaciones. Los decretos y leyes de
prohibición del uso de este agroquímico sur-
gieron durante el desarrollo del proyecto y
con el aval de los Comités. Es decir, hubo un
apoyo de las coaliciones sociales para asegu-
rar la sustentabilidad del cambio por medio
de una legislación que se adecuó a cada te-
rritorio (tal como se explicó anteriormente).
Estos cambios en las reglas de juego con el
fin de preservar el ambiente también pue-
den tener consecuencias no buscadas rela-
cionadas –por ejemplo– con la exclusión de
la pequeña producción, sobre todo si este
sector no logra acceder a las innovaciones
propuestas. Es por esto que ambas expe-
riencias tienen una “mirada” especial a la
agricultura familiar. En el proyecto de reem-
plazo del bromuro, en todos los territorios
se priorizó que los insumos subsidiados por
los recursos del Protocolo de Montreal fue-
ran siempre destinados, en primer término,
a los pequeños/as productores y que además
existiera un más estrecho acompañamiento
técnico de los mismos durante el proceso de
transferencia.
En este caso, resulta importante señalar que
los pequeños productores/as vieron en el
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
acceso a las tecnologías de reemplazo (almá-
cigos flotantes) una “vía de modernización”,
como ellos/as mismos dicen. En efecto, los/
as pequeños productores/as que accedieron
a los almácigos flotantes dijeron al finalizar el
proyecto que veían el cambio como un sím-
bolo de mayor status, que habían implemen-
tado una tecnología moderna que parecía
exclusiva para los productores/as capitaliza-
dos apoyados por las empresas privadas (2).
En este caso -donde “la capa de ozono queda
tan lejos”- es verdad que el cambio fue más
motivado por razones económico-producti-
vas (calidad del plantín, desarrollo del culti-
vo, tiempo de trabajo y ocupación de mano
de obra) y por expectativas materiales-tec-
nológicas (cambio modernizador) antes que
por la preocupación ambiental.
Las dinámicas territoriales que desencadenó
esta experiencia lograron que fueran modifi-
cadas acciones o prácticas usadas desde ha-
cía décadas, y las actividades desarrolladas
con estos fines dinamizaron los territorios
porque aumentaron los espacios y eventos
de discusión, las demostraciones, visitas a
campo e instancias de capacitación. Además,
hubo oferta de tecnologías relacionadas con
las propuestas de reemplazo y se abrieron
posibilidades de nuevos mercados y de uti-
lizar las innovaciones para otras actividades
productivas (1).
Sin embargo, para que ocurra lo anterior es
una condición necesaria que exista concien-
cia en los diferentes sectores de que la acti-
vidad principal del territorio (en este caso ta-
baco) debe ser producida sustentablemente
para mantenerse en los mercados actuales.
Si no hubiera existido este convencimiento
tanto en el sector privado como público de
la producción de tabaco del norte de Argen-
tina no hubiera sido posible conformar las
coaliciones sociales descriptas ni obtener los
resultados mencionados.
Del proyecto de eliminación de bromuro de
metilo, al ser un proceso finalizado, se pue-
den rescatar además otros aspectos:
11
1.Por un lado, la posibilidad de pactar con
los actores la fecha tope para el cambio
tecnológico. Esto facilitó el trabajo con el
sector y lo comprometió al reemplazo, so-
bre todo cuando esta información era co-
nocida por la sociedad local.
2.La entrega de insumos a los productores/
as fue fundamental para dinamizar el cam-
bio propuesto (es posible decir que “aho-
rró muchas horas de capacitación y de
extensión” y que “acortó” el tiempo ne-
cesario para el logro de la eliminación del
BM). Los/as tabacaleros/as fueron curio-
sos, probaron la tecnología a partir de los
insumos subsidiados y, aunque no exenta
de problemas, fue la mejor manera de in-
sertarla en los territorios.
3.Se trabajó con el sector solo el problema
del bromuro de metilo. Es decir, no se
pretendió ejecutar acciones ni implemen-
tar estrategias integrales de producción,
comercialización y/u organización para la
actividad tabacalera. Esto resultó de fun-
damental importancia, ya que permitió
establecer una intervención puntual en el
seno de un sector estructurado por diná-
micas preexistentes y altamente institu-
cionalizadas.
4.Se respetaron las entidades preexistentes
para conformar las coaliciones sociales en
el territorio.
5.Resultó fundamental la complementarie-
dad de recursos en insumos, técnicos y
humanos que se planteó en los Comités,
sobre la base de una concertación general
de no suministrar más bromuro de meti-
lo por un lado, y en otros casos sobre la
coincidencia de visualizar al reemplazo por
almácigos flotantes como un símbolo de
modernidad.
Para finalizar es importante señalar que en
este tipo de casos, las coaliciones sociales re-
12 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
sultan imprescindibles para la construcción
de un nuevo “sentido común” en el territorio,
donde la sustentabilidad forme parte del ac-
cionar cotidiano de la producción agrícola y
donde el discurso de desarrollo sostenible se
vaya legitimando y difundiendo, sobre todo
cuando los procesos de cambio son lentos o
necesitan un lapso de tiempo importante.
BIBLIOGRAFIA CITADA
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Metilo en almácigos de tabaco y hortalizas
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no y el bromuro de metilo. In: Informe final
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gentino. Proyecto PNUD/ARG/98/G63 INTA.
Argentina. pp. 9-19.
 INVESTIGACION
Nutrición del tabaco en condiciones variables de humedad edáfica y
materia orgánica
Josefina Diez1, María E. Toncovich1 y Mónica B. Rodriguez2
1- INTA EEA Salta. 2- Cátedra de Fertilidad y Fertilizantes, Facultad de Agronomía, Universi-
dad de Buenos Aires.
Correo-e: jdiez@correo.inta.gov.ar
INTRODUCCIÓN
Diagnósticos realizados en el departamento
Chicoana (Salta) sugieren que el aprovecha-
miento de los nutrientes y el agua en lotes
de pequeños productores tabacaleros puede
ser optimizado (4, 5, 9). Para lograr dicho ob-
jetivo es preciso ajustar los niveles apropia-
dos de nutrientes y agua en base a criterios
desarrollados para suelos de la zona. Sin em-
bargo, la respuesta a la fertilización puede
verse afectada por factores como la mate-
ria orgánica del suelo y la disponibilidad de
agua que, en dicha zona varían de un modo
particular.
El tabaco es considerado tolerante a la se-
quía y sensible al exceso de agua. Es por ello,
que el agua debe ser aplicada en el momen-
to oportuno y en la cantidad apropiada para
una respuesta óptima del cultivo y máximo
beneficio económico para el productor (12).
En Chicoana, el riego del cultivo es de tipo
complementario, convirtiéndose en ocasio-
nes en un factor crítico que influye en el ren-
dimiento y calidad del cultivo. Por otra parte,
el nivel de materia orgánica en el suelo pue-
de condicionar la capacidad de retención de
agua útil (6) además de incidir en la dispo-
nibilidad de nutrientes. En Chicoana, los ni-
veles de materia orgánica son considerados
adecuados a medios-bajos acorde a los nive-
les de interpretación para tabaco Flue Cured
propuestos por Ballari (1). No se dispone de
datos que aseguren que la variación de la
MO del suelo dentro de Chicoana sea sufi-
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
cientemente amplia como para condicionar
significativamente la respuesta.
El objetivo del trabajo fue establecer la res-
puesta del cultivo de tabaco a la fertilización,
calculada en base a un modelo desarrollado
en la zona, bajo dos niveles de materia orgá-
nica inicial del suelo y disponibilidad de agua.
MATERIALES Y MÉTODOS
Descripción general del ensayo
Durante la campaña 2007/08 se realizó en la
Estación Experimental Agropecuaria de INTA
Salta (24º 54´ Sur, 65º 29´ Oeste) un experi-
mento bajo cubierta. Las plantas de tabaco
tipo Virginia variedad K326 fueron cultiva-
das en macetas plásticas de 27,5 kg. Se se-
leccionaron dos suelos del departamento
Chicoana cuyos niveles de materia orgánica
(MO) fueron medio-bajo (1,4 %) y adecua-
do (2,2 %) para el cultivo del tabaco (1). Los
suelos fueron mezclados con arena en una
relación de 3:1 (8). A principios de octubre
se trasplantó una plántula por maceta (10).
Las macetas se regaron al trasplante con un
nivel de agua equivalente a la capacidad de
campo (CC). Para asegurarse este nivel se re-
garon las macetas hasta saturación y se las
pesó una vez que dejó de drenar agua.
Diseño experimental y tratamientos
Se aplicó un diseño en bloques al azar con
experimentación factorial (2x2x2) con cuatro
repeticiones por cada tratamiento, el cual
permitió respetar el marco de plantación del
13
cultivo a campo (1,20m x 0,40m). La unidad
experimental fue una maceta con una plan-
ta. Los tres factores evaluados fueron, 1)
contenido de MO en el suelo (Medio-bajo:
MOm y Adecuado: MOa); 2) dosis de fertili-
zante NPK calculado por modelo (testigo sin
fertilizar: f y fertilizado: F) y 3) disponibilidad
hídrica (media: H y baja: h). Para evaluar el
efecto del riego y de la fertilización se con-
tó con los testigos correspondientes de cada
tipo de suelo seleccionado.
Durante el período de adaptación, la dispo-
nibilidad hídrica se mantuvo por encima del
umbral para los dos niveles evaluados, hasta
el establecimiento de las plantas. A partir del
período de rápido crecimiento, las láminas
de agua aplicadas comenzaron a diferenciar-
se con el objetivo de mantener dos niveles
de disponibilidad hídrica: media (H: por en-
DDT
0 50 100
Agotamiento de la lámina (mm)
20
40
60
Figura 1. Agotamiento en la zona radical para niveles de
riego medio y bajo (línea llena oscura y clara respectiva-
mente), LFU- lámina fácilmente utilizable (líneas puntea-
da), lámina total utilizable (línea cortada)
cima o en el nivel del umbral o de la lámina
fácilmente utilizable o LFU) y baja (h: por de-
bajo del umbral o LFU) (Figura 1).
Las fuentes de fertilizantes utilizadas fueron
nitrato de amonio (sólido, granulado, 32-0-
0), nitrato de potasio (sólido, granulado, 13-
0-44) y superfosfato triple (sólido, granulado,
0-46-0) en 2 momentos: base (al trasplante)
y repique (30DDT). En cada momento, se
aplicó una mezcla física seca cuyas dosis fue-
ron calculadas según el modelo propuesto
por Ballari (1) para la zona (Cuadro 1).
14 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Cuadro 1. Dosis de N, P y K según materia orgánica
en suelo.
B: base, R: repique, MOa: materia orgánica adecuada,
Mom: materia orgánica media a baja.
Determinaciones
La cosecha del ensayo se realizó de forma es-
calonada y al final de la misma se registró el
peso seco total de hojas. y se determinó:
a) Materia seca (MS) acumulada (secado en
estufa gravimetría a 70 ºC hasta constancia
en peso) (3).
b) Nutrientes: N total (micro-Kjeldahl), P to-
tal (extracción “vía húmeda” y cuantificación
colorimétrica), K total (extracción “vía húme-
da” y cuantificación por fotometría de llama)
150 200 250
(11).
Análisis estadístico
LTU (mm)
LFU (mm)
Los efectos de tratamientos sobre los pará-
Bajo metros analizados se determinaron por aná-
Medio lisis de la varianza (ANOVA). Las medias de
los tratamientos fueron comparadas por el
test de mínima diferencia significativa (LSD;
p< 0,05) (7).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los niveles de MS y K absorbido mostraron
diferencias significativas entre suelos con
diferente contenido inicial de MO. La inte-
racción entre los efectos de nivel de riego y
fertilización fue significativa para todas las
variables estudiadas Dado que no se detectó
interacción entre los diferentes contenidos
de MO, la fertilización y los niveles de dispo-
nibilidad hídrica, se evaluó la interacción en-
tre la disponibilidad hídrica y la fertilización,
teniendo en cuenta el efecto del nivel inicial
de materia orgánica del suelo por separado.
Los valores de MS y absorción de K en hoja
 mostraron diferencias significativas entre
ambos suelos con diferente contenido inicial
de MO las cuales (10% MS hoja y K absorbi-
do) (Figura 2).
60 1,2
(a) a
a
Hoja (g/pl) a niveles hídricos cercanos al umbral. Además,
40 0,8
b
Hoja (g/pl)
20 0,4
a a
0 0
MS N P
Figura 2. Materia seca (a) y nutrientes absorbidos en hoja
(b) (g/pl) para dos tipos de suelo con adecuados ( ) y
medio-bajo ( ) contenido de materia orgánica.
Letras diferentes indican diferencias significativas (p<0,05).
El nivel de K absorbido es un parámetro que
depende más de la presencia de iones con
los cuales puede mantener interacciones,
tales como carbonatos de Ca y Mg, que del
nivel de MO del suelo. En este experimento,
los suelos con moderados contenidos de MO
mostraron también mayores niveles de Ca
y Mg, lo cual produjo una disminución en la
absorción de K, situación que se acentúa en
suelos con baja disponibilidad de agua (1).
La producción de MS y la absorción de nu-
trientes en hoja fueron superiores para
aquellas plantas fertilizadas con niveles de
disponibilidad hídrica media. La aplicación de
fertilizantes resultó en un incremento de la
MS en hoja de 1,2 a 1,8 veces para los dos ni-
veles de disponibilidad hídrica, mientras que
el incremento de la disponibilidad hídrica en
las plantas fertilizadas aumentó la produc-
ción de MS de hoja en un 40 % (Figura 3.a.).
Resultados similares fueron observados por
(13) quienes informaron aumentos en la MS
del tabaco entre 1,4 a 2,7 veces en respuesta
a la aplicación del N solo al ser regado.
De manera similar a la MS, la absorción de
N en hoja fue dos veces superior para las
plantas fertilizadas y con disponibilidad hí-
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
drica media con respecto a las de disponibi-
lidad baja (Figura 3.b.). Similares resultados
se observaron para tabaco Virginia, donde la
absorción de N en hoja se duplicó para los
diferentes tratamientos de riego en compa-
ración con el testigo no regado (14).
a (b)
b
La absorción de P en hoja fue mayor para los
la fertilización incrementó en 1,5 veces la ab-
sorción de P (Figura 3.c.). La menor absorción
observada en los niveles con menores conte-
nidos hídricos pudo deberse a la disminución
de la disponibilidad de P en razón de la for-
K mación de fosfatos de Ca (14). Nuestros datos
corresponden a valores de pH cercanos 7,8 y
8 para ambos suelos en correspondencia con
la presencia de carbonatos de Ca y Mg.
La absorción de K en hoja presentó la misma
tendencia que el N, siendo sus valores supe-
riores en aquellas plantas fertilizadas y con
disponibilidad hídrica media, mientras que el
contenido de K en tallo y raíz se vio reduci-
do (Figura 3.d.). Estos resultados coinciden
con Hudson (6) quienes observaron que el
aumento de la cantidad de K absorbido fue
explicado por el incremento en la disponibi-
lidad hídrica en razón del aumento en la tasa
de difusión del K y por lo tanto su absorción.
CONCLUSIONES
Independientemente del nivel de MO se ob-
servó que el nivel de disponibilidad hídrica en
combinación con la fertilización incrementó
el crecimiento de la planta, la producción de
MS y la absorción de N, P y K en hoja de taba-
co tipo Virginia variedad K326. La respuesta
del cultivo a la aplicación del fertilizante no
dependió del nivel de MO para ninguno de
los 2 niveles de humedad estudiados ya que
no se detectó interacción entre los factores:
nivel de MO del suelo, fertilización y disponi-
bilidad hídrica.
Los resultados obtenidos muestran que las
dosis de nutrientes ajustadas en base a un
modelo de fertilización calculado en función
15
 80 2
(a) (b)
a
a
60 1,5
MS hoja (g/pl)

N hoja (g/pl)
b

40 1
b
c
d 0,5
20 c c

0
0
FH fH Fh fh
FH fH Fh fh
Fertilización*Nivel de riego Fertilización*Nivel de riego

0,25 2
(c) a (d)
0,2
a 1,5
P hoja (g/pl)

K hoja (g/pl)

0,15
b 1
b
0,1 b
c c
c 0,5
0,05

0 0
FH fH Fh fh FH fH Fh fh
Fertilización*Nivel de riego Fertilización*Nivel de riego
Figura 3. Materia seca de hoja (a), N (b), P (c) y K (d) absorbido en hoja (g/pl) de tabaco para las combinaciones entre los
factores de fertilidad (fertilizada: F, sin fertilizar: f) y nivel de riego (medio: H y bajo: h).
Letras diferentes indican diferencias significativas (p<0,05).

de las características del suelo y en combina-
ción con un riego suficiente y sincronizado con
el ciclo del cultivo permitieron incrementar la
producción de MS en un 40%. Estos datos su-
gieren que existe un potencial para mejorar
el aprovechamiento de los recursos hídricos
y nutricionales en los lotes tabacaleros de los
pequeños productores de Chicoana.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen al grupo de Horticul-
tura de la Estación Experimental del INTA Ce-
rrillos por su gran colaboración en el armado
del invernáculo y a los señores José Luis Ba-
rrios, Federico Chocobar y Matías Zavaleta
por su participación en la parte experimental.
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Herramientas moleculares para la caracterización de Rhizoctonia spp.

causales de patologías en tabaco Tipo Virginia, en Salta y Jujuy
(Argentina)
Guadalupe Mercado Cárdenas1, Marta Galván2 y Marcela Rodriguero3
1- Sanidad Vegetal, INTA EEA Salta, Argentina. 2- CONICET-Biotecnología, INTA EEA Salta,
Argentina.3- Laboratorio de Genética Evolutiva, Departamento de Ecología, Genética y Evo-
lución, FAUBA, Buenos Aires, Argentina.
Correo-e: gmercado@correo.inta.gov.ar

INTRODUCCIÓN de raíces con podredumbre, y muchas veces

Desde fines de los años noventa el cultivo
de tabaco se encuentra afectado por una
enfermedad que se manifiesta con síntomas
como: marchitamiento de la parte aérea de
la planta, amarillamiento y posterior necro-
sis de los tejidos que puede terminar con la
muerte de la planta. Coincidente con los sín-
tomas en la parte aérea, en el sistema radi-
cular se observa escaso desarrollo, presencia
necrosis total o parcial del cuello.de la planta
En las campañas 2008/09/10 en las provin-
cias de Salta y Jujuy se relevaron 80 lotes
comerciales de tabaco en cada ciclo de pro-
ducción, diagnosticándose Rhizoctonia sola-
ni como agente causal de la podredumbre
radicular, como la enfermedad con mayor
prevalencia e incidencia, siendo este pató-
geno uno de los responsables del complejo
del amarillamiento en tabaco (3, 10).

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 17

En sus comienzos esta enfermedad se mani-
festaba en forma aislada, pero en los últimos
años se diseminó por toda la zona tabacalera
transformándose en uno de los problemas fi-
tosanitarios más importantes de este sector
productivo, por lo cual surge la necesidad de
implementar medidas de manejo para miti-
gar esta dolencia.
Uno de los pilares más importantes para el
manejo de una enfermedad, es el diagnós-
tico correcto del agente causal y su caracte-
rización. El sistema de clasificación para los
aislamientos de R. solani está basado en la
capacidad de anastomosis o fusión de las hi-
fas, siendo el criterio más usado para sepa-
rarlo en grupos relativamente homogéneos.
Se ha clasificado a este hongo en 14 grupos
de anastomosis y varios subgrupos (5). En ta-
baco los grupos de anastomosis AG1, AG2.2,
AG4 y AG5 causan damping off en plantines
bajo almácigo y en plantas jóvenes posterior
al transplante al campo y podredumbre radi-
cular en planta adulta (14, 8). Mientras que
AG2.2 y AG3 producen la mancha foliar o
target spot (17, 12, 18).
Por otra parte, es importante tener en con-
sideración que muchos aislamientos de R.
solani de otros hospedantes causan tizón de
plántulas y podredumbre radicular en taba-
co, por lo cual es de interés un análisis que
incluya aislamientos de otros hospedantes
que se incluyen en rotaciones de la región
para determinar si los aislados de Rhizocto-
nia de esos hospedantes pueden ser pato-
génicas de tabaco (16). La técnica de rutina
utilizada en fitopatología en las ultimas dé-
cadas para la determinación de grupos de
anastomosis es la reacción de anastomosis
hifal que consiste en enfrentar el asilamiento
desconocido con un tester (patrón de AG co-
nocido), existiendo diferentes terminologías
según que autor se tome para su estudio (2).
Recientemente los marcadores molecula-
res y estudios de secuenciación de ADN de-
mostraron ser herramientas de gran utilidad
para la caracterización de aislamientos en
18 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
AG permitiendo una caracterización más rá-
pida y precisa que los tests de anastomosis
convencionales ya que estos últimos pueden
dar falsos positivos (15). Entre los métodos
moleculares más utilizados para la clasifica-
ción de Rhizoctonia spp. se destaca el análi-
sis de secuencias ITS o espaciadores internos
transcritos (internal transcribed spacers).
Los ITS son regiones de ADN no codificantes
que separan las regiones que codifican las
unidades de ADN ribosómico. Estas regiones
muestran mayor polimorfismo de secuencia
que las regiones codificantes y por lo tanto
son útiles como fuente de marcadores gené-
ticos y se utilizaron para estudios filogenéti-
co en Rhizoctonia spp. (15, 19, 7).
El objetivo de este trabajo fue caracterizar
aislamientos de Rhizoctonia spp. colectados
en diferentes lotes comerciales de tabaco
desde suelo y plantas que presentaban las
sintomatologías descriptas en las provincias
de Salta y Jujuy empleando marcadores ITS-
rDNA.
MATERIALES Y MÉTODOS
Material biológico
En las campañas 2009/10/11 se realizaron
muestreos aleatorios de 80 lotes de cultivo
de tabaco georeferenciados en diferentes lo-
calidades de las provincias de Salta y Jujuy.
En los lotes se extrajeron plantas con sínto-
mas de la enfermedad y muestras de suelo
(rizósfera). Las plantas se procesaron por
técnicas de aislamientos de rutina en Agar
Papa Glucosado (APG) pH=5 para obtener
aislamientos del patógeno. Para las mues-
tras de suelo se utilizó el método de cebo
cuali-cuantitativo para Rhizoctonia spp. (1).
Posteriormente se transfirieron puntas hifa-
les a nuevas placas con medio, las cuales se
incubaron cinco días en oscuridad a 25±2ºC.
De estas se tomaron discos de 1cm de diá-
metro y se depositaron en tubos de 1,5 ml
con glicerol al 50% y se llevaron a -20ºC para
su conservación. Además se realizaron aisla-
mientos provenientes de otros hospedantes
(poroto, sorgo, maní y garbanzo).
Prueba de patogenicidad
Para cada aislamiento se realizó una prueba
de patogenicidad empleando plantines de
8 semanas de la variedad susceptible K326.
Las plantas se mantuvieron en cámara de
crecimiento con control de temperatura 25
± 2°C y 12 h de fotoperíodo. Por cada aisla-
miento fueron inoculadas 10 plantas, depo-
sitando en la base del cuello y en hoja granos
de trigo colonizados. Plantas sin el patógeno
se utilizaron como control. Las plantas se as-
perjaron con agua destilada estéril y se man-
tuvieron cubiertas con bolsas de polietileno
a fin de simular una cámara húmeda. A las
24 h se removieron las bolsas y las plantas
fueron llevadas a invernadero. A los cinco
días se evaluó la severidad (% de tejido afec-
tado) para mancha en hoja y damping off,
empleando a escala, 0 (sin infección), 1 (1-
25%), 2 (26-50%), 3 (51-75%) y 4 (76-100%).
Amplificación y secuenciación de regiones
ITS-rDNA
La extracción de ADN se realizó a partir de
micelio empleando el protocolo con bromu-
ro de cetil-trimetil amonio (CTAB). A partir
del ADN extraído se amplificaron las regiones
ITS-rDNA mediante PCR utilizando los pri-
mers ITS1 e ITS4. Dichos primers fueron utili-
zados por diferentes autores para la identifi-
cación molecular de grupos de anastomosis
en Rhizoctonia spp (15, 16, 17).
Las reacciones de PCR se realizaron en un vo-
lumen final de 10 µl, utilizando 50 ng de ADN
genómico, 3 mM Cl2Mg, 0,2 µM de cada pri-
mer (forward y reverse), 20 mM de Tris-HCl,
50 mM de ClK, 0,2 mM de dNTP y 0,4 U de
Taq polimerasa. Los ciclos de amplificación
consistieron en una desnaturalización inicial
de 1 min a 94°C seguida de 30 ciclos de 15
seg a 94°C, 15 seg a 58°C y 15 s a 72°C, con
una extensión final de 7 min a 72°C. Los frag-
mentos amplificados se separaron mediante
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
electroforésis en geles de agarosa 1,5% teñi-
dos con GelRedTM. Se realizó la purificación
de los productos de PCR para su posterior se-
cuenciación empleando el kit QIAquick®PCR
Purification Kit (Qiagen).
Análisis de datos
Los fragmentos secuenciados se analizaron
utilizando el programa BioEdit y se deposita-
ron en el GenBank (Cuadro 1). Las secuencias
se compararon con secuencias de R. solani
de diferentes grupos de anastomosis dispo-
nibles en la base de datos del NCBI (Natio-
nal Center for Biotechnology Information). A
partir del análisis de las secuencias se gene-
ró un árbol de Neighbour Joining (NJ) utili-
zando el programa PAUP v. 4.0 y se visuali-
zó empleando TreeView v. 1.6.6. El análisis
incluyó un total de 107 taxa. El soporte de
los grupos fue evaluado mediante bootstrap
con 1000 repeticiones, indicándose única-
mente los valores superiores a 50.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
A partir del relevamiento en los diferentes
lotes comerciales tabacaleros de Salta y Ju-
juy, se obtuvo un total de 110 aislamientos
que forman parte de la colección de hon-
gos conservada en el Laboratorio de Sani-
dad Vegetal del INTA, Estación Experimental
Agropecuaria Salta. Del total de aislamientos
obtenidos se destinaron 49 para el análisis
filogenético (Cuadro 1).
Para todos los aislamientos se obtuvieron
patrones de bandas amplificadas entre los
650 y 800 pb (Figura 1).
La técnica de análisis de secuencias ITS resul-
tó una herramienta de utilidad para la identi-
ficación de la mayoría de los aislamientos de
Rhizoctonia analizados como fue reportado
en otros estudios (11, 12, 13).
En el árbol de Neighbour Joining construido
a partir de las secuencias ITS-rDNA se obser-
vó que el 61% de los aislamientos analizados
fueron identificados como Rhizoctonia sola-
ni AG2, AG4 y AG6 (Figura 2). El resto de los
19
Cuadro 1. Aislamientos de Rhizoctonia spp. de Salta y Jujuy (Argentina) caracterizados empleando secuencias ITS (inter-
nal transcribed sequences).

AGa Aislamiento Síntomas/Origen/ Localidad/provincia Severidadc N°

b
Hospedante GenBank
AG2-1 Rs66 MH/hoja/N. tabacum Cerrillos/Salta 3.1 JQ616852
AG2-1 Rs67 MH/hoja/N. tabacum Cerrillos/Salta 0.0 JQ616853
AG2-1 Rs59 MH/hoja/N. tabacum La Silleta/Salta 4.2 JQ616867
AG2-1 RS59b MH/hoja/N. tabacum La Silleta/Salta 4.2 JQ616874
AG2-1 RS68 MH/hoja/N. tabacum Cerrillos/Salta 3.1 JQ616870
AG2-1 RS69 MH/hoja/N. tabacum Cerrillos/Salta 1.1 JQ616871
AG2-1 RS70 MH/hoja/N. tabacum Cerrillos/Salta 1.2 JQ616872
AG2-1 Rs59c MH/hoja/N. tabacum La Silleta/Salta 4.2 -
AG2-1 RS25 PR/raíz/N. tabacum La Merced/Salta 0.1 JQ616864
AG2-1 Rs25b PR/raíz/N. tabacum La Merced/Salta 1.1 JQ616849
AG2-1 RS36 PR/raíz/N. tabacum La Merced/Salta 0.0 JQ616865
AG2-1 RS36b PR/raíz/N. tabacum La Merced/Salta 0.1 JQ616854
AG2-1 RS58 DO/raíz/N. tabacum La Silleta/Salta 2.4 JQ616866
AG4-HGI RS46 PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 0.1 JQ616862
AG4-HGI RS46b PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 0.1 JQ616868
AG4-HGI RS47 PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 1.4 JQ616860
AG4-HGI Rs47b PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 1.4 JQ616855
AG4-HGI RS79 PR/raíz/N. tabacum El Carmen/Jujuy 1.0 JQ616856
AG4-HGI RS80 PR/raíz/N. tabacum El Carmen/Jujuy 0.0 JQ616857
AG4-HGI Rs44 PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 0.4 -
AG4-HGI RS60 -/suelo/- Cerrillos/Salta 1.0 JQ616850
AG4-HGI RS61 -/suelo/- Cerrillos/Salta 1.0 JQ616848
AG4-HGI RS63 -/suelo/- Cerrillos/Salta 1.1 JQ616851
AG4-HGI RS12 caja/Arachis hypogaea Las Lajitas/Salta 0.0 JQ616861
AG4-HGIII RS74 DO/raíz/N. tabacum Coronel Moldes/Salta 0.1 JQ616869
AG4-HGIII Rs75 DO/raíz/N. tabacum Coronel Moldes/Salta 0.0 JQ616859
AG4-HGIII RS81 RR/raíz/Sorghum sp. Guachipas/Salta 1.0 JQ616858
AG4-HGIII RS72 -/suelo/- Rosario de Lerma/Salta 1.1 JQ616873
AG4 RS49 RR/raíz/Cicer arietinum Cerrillos/Salta 1.2 JQ616863
AG6 Rs77 PR/raíz/N. tabacum Ovejería/Jujuy 0.0 -
NI RS1 DO/raíz/N. tabacum Cerrillos/Salta 0.1 -
NI RS6 DO/raíz/N. tabacum La Caldera/Salta 0.0 -
NI RS6b DO/raíz/N. tabacum La Caldera/Salta 0.0 -
NI RS10 DO/raíz/N. tabacum Puesto Viejo/Jujuy 0.0 -
NI RS26 PR/raíz/N. tabacum Monterrico/Jujuy 0.0 -
NI RS53 PR/raíz/N. tabacum Cerrillos/Salta 2.2 -
NI RS53b PR/raíz/N. tabacum Cerrillos/Salta 2.3 -
NI RS54 PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 2.4 -
NI Rs73 PR/raíz/N. tabacum Rosario de Lerma/Salta 0.1 -
NI RS57 -/semilla/Phaseolus vulgaris Cerrillos/Salta 1.4 -
NI RS12b caja/Arachis hypogaea Las Lajitas/Salta 0.0 -
NI RS22a -/suelo/- Los Lapachos/Jujuy 0.0 -
NI Rs22b -/suelo/- Los Lapachos/Jujuy 0.0 -
NI RS34 -/suelo/- Monterrico/Jujuy 0.1 -
NI RS35 -/suelo/- Los Lapachos/Jujuy 0.0 -
NI RS65 -/suelo/- Cerrillos/Salta 0.0 -
NI RS71 -/suelo/- Rosario de Lerma/Salta 2.0 -
NI Rs71b -/suelo/- Rosario de Lerma/Salta 2.0 -
NI Rs56 -/semilla/Phaseolus vulgaris Cerrillos/Salta 1.0 -

a
AG: Grupos de anastomosis determinados a partir de las secuencias ITS. NI: especies de Rhizoctonia no identificadas.
b MH: mancha en hoja (leaf spot), PR: podredumbre radicular (sore shine), DO: damping off.
c Para mancha en hoja y damping off, escala 0-4 (0, sin infección; 1, 1-25% ; 2, 26-50%; 3, 51-75%; and 4, 76-100%).

20 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

Figura 2. Arbol de Neibour Joining de 49 aislamientos de Rhizoctonia spp. de Salta y Jujuy.

aislamientos correspondieron a Rhizoctonia mancha en hoja y damping off en almácigo y

spp.
En la provincia de Salta se identificaron aisla-
mientos pertenecientes a los grupos AG2.1,
AG4-HGI, AG4-HGIII. Mientras que en la pro-
vincia de Jujuy los grupos fueron AG4-HGI y
AG6. En ambas provincias se identificaron
aislamientos de Rhizoctonia spp.
Se observó asociación entre enfermedad
y grupo de anastomosis. Los aislamientos
pertenecientes al grupo AG2.1 causaron
podredumbre radicular en plantación. Estos
aislamientos fueron los que mostraron ma-
yor severidad en la prueba de patogenicidad
(Cuadro 1). Este representó el primer repor-
te a nivel mundial del grupo AG2.1 causando
mancha en hoja en tabaco (18) ya que sólo
existen referencias de esta enfermedad cau-
sada por el grupo AG3 (6, 8, 19).
Los aislamientos pertenecientes al grupo
AG4-HGI causaron podredumbre radicular

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 21


Figura 1. Amplificación de secuencias ITS-rDNA a partir de
ADN de aislamientos de Rhizoctonia spp. de Salta y Jujuy.
mientras que los del grupo AG4-HGIII se en-
contraron asociados a damping off. Resul-
tados similares fueron reportados por (13)
sin embargo este sería el primer reporte de
AG4-HGIII infectando tabaco.
El 64% de los aislamientos obtenidos a partir
de muestras de suelo mostraron resultados
positivos en las pruebas de patogenicidad
con baja virulencia. De los mismos el 43%
correspondió al grupo AG4-HGI, el 14% a
AG4-HGIII y el resto a Rhizoctonia spp. Estos
resultados indican que se estaría trasladan-
do inóculo desde almácigo al campo ya que
AG4-HGIII se lo encontró asociado a dam-
ping off.
El grupo de anastomosis que mostró los
mayores valores de virulencia para mancha
foliar fue AG2.1. Además se observó mayor
severidad en los aislamientos provenientes
de hoja y menor en los de raíz.
Para damping off AG4-HGI fue el grupo más
virulento de los aislamientos obtenidos a
partir de raíz. (13) a partir del análisis de 19
aislamientos provenientes de Turquía repor-
tó altos niveles de virulencia para damping
off en todos los grupos de anastomosis en-
contrados (AG2.1, AG4-HGI y AG4-HG-II).
Del total de los aislamientos identificados
como Rhizoctonia spp. el 53% resultó virulen-
to para mancha en hoja y damping off, mos-
trando mayores valores para esta última.
22 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Los aislamientos Rs81, Rs49 y Rs56 obteni-
dos a partir de otros hospedantes (sorgo,
garbanzo y poroto) resultaron virulentos
para plantas de tabaco, mientras que Rs12 y
Rs12b obtenido de maní no mostraron viru-
lencia. Cabe mencionar que los tres prime-
ros aislamientos virulentos corresponden a
rotaciones en lotes de tabaco en el Valle de
Lerma, mostrando el amplio rango de hospe-
dante del patógeno.
CONCLUSIÓN
Estos resultados representan el primer aná-
lisis molecular del patógeno en el noroeste
argentino y revelan la existencia de gran va-
riabilidad en los aislamientos analizados. Los
mismos representan una importante una he-
rramienta para el manejo integrado de en-
fermedades, dado que los grupos de anasto-
mosis de Rhizoctonia solani difieren en su
sensibilidad a fungicidas (20) y pueden tener
diferente rango de hospedante.
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tonia spp. causing root and hypocotyl rot in
Phaseolus vulgaris in Cuba. Journal of Phyto-

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 23

 Variabilidad genética en germoplasma de tabaco Tipo Virginia
empleando marcadores moleculares
Daniela Cuellar1, Mónica Aparicio1,5, Guadalupe Mercado Cárdenas2, Marta Galván1,5, Gisel
Taboada1,5, Juan Galli4, Mario Martínez4, Luis Ibarra3, María del Carmen Menéndez Sevilla-
no3 y María Elena Toncovich4.
1- EEA INTA Salta, Laboratorio de Biotecnología. 2- EEA INTA Salta, Sanidad Vegetal. 3- EEA
INTA Salta, Banco de germoplasma. 4- EEA INTA Salta, Grupo Tabaco y diversificación. 5- CO-
NICET.
Correo: martazgalvan@gmail.com

INTRODUCCIÓN últimos años se expandió por toda la zona

Dentro de la actividad agraria de la provincia
de Salta, el cultivo de tabaco (Nicotiana ta-
bacum L.), tiene una apreciable participación
en la economía regional, tanto desde el pun-
to de vista de la producción y exportaciones
provinciales, como por su relevancia en la
generación de empleo.
Desde fines de los años noventa la actividad
tabacalera se vio afectada por una sintoma-
tología que se visualiza con distintas mani-
festaciones externas como: marchitamien-
to de la parte aérea de la planta, clorosis o
amarillamiento y posterior necrosis de los te-
jidos, que puede terminar con la muerte de
la planta. Coincidente con aquella manifesta-
ción aérea, el sistema radicular se presenta
con escaso desarrollo y en su mayoría con
presencia de raíces con podredumbre, visua-
lizándose muchas veces en el cuello necrosis
total o parcial (7).
Recientemente se detectaron diferentes pa-
tógenos que desencadenan enfermedades
radicales, además de la presencia de nemato-
dos y gusano minador como vectores (produc-
tores de heridas) de las mismas. El marchita-
miento bacteriano (Ralstonia solanacearum)
y podredumbre radicular (Rhizoctonia sola-
ni), son las enfermedades con mayor preva-
lencia e incidencia que conforman el comple-
jo del amarillamiento en tabaco (11).
En sus comienzos esta sintomatología se
manifestaba en forma aislada, pero en los
tabacalera transformándose en uno de los
problemas fitosanitarios más importantes de
este sector productivo. Además, entre otros
factores la manifestación de esta patología
es atribuida a la degradación de los suelos
producto del sistema de labranza convencio-
nal y monocultivo (12). La estrecha base ge-
nética de los cultivares comerciales también
condiciona el estado sanitario del cultivo.
Las variedades comerciales que se utilizan en
la producción tabacalera del NOA tienen ori-
gen en Brasil y EE.UU, por lo cual presentarían
baja adaptación a las condiciones agroeco-
lógicas de la zona. El manejo sanitario que
comúnmente se realiza es la aplicación de
agroquímicos, que además de encarecer la
producción, contaminan el medio ambiente.
Por lo tanto, la incorporación de resistencia
genética en las variedades comerciales es
una estrategia de interés para incrementar
la producción en el marco de un desarrollo
agrícola sustentable.
Actualmente el mejoramiento genético con-
vencional para resistencia a factores bióticos
y abióticos puede ser asistido por técnicas
moleculares que hacen más eficiente y con-
fiable al proceso. El desarrollo de las técnicas
empleadas actualmente en Biología Molecu-
lar permite a genetistas y mejoradores rea-
lizar estudios de variabilidad a nivel de ADN
de una manera sistemática. Los marcadores
moleculares basados en la amplificación del
ADN mediante PCR (reacción en cadena de la

24 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

polimerasa) demostraron ser herramientas
de utilidad para la identificación y estudios
de similitud genética entre variedades, con la
ventaja de no ser afectados por el medio am-
biente. Diferentes marcadores moleculares
fueron utilizados para estudios de diversidad
genética y caracterización de variedades en
tabaco, como ser RAPD (Random Amplified
Polymorphic DNA)(18, 14) y AFLP (Amplified
Fragment Length Polymorphism) (19, 17, 8).
La técnica de SSR o microsatélites consiste
en la amplificación de regiones del ADN que
contienen secuencias simples (1 a 4 nucleóti-
dos) repetidas y adyacentes. Para ello se uti-
lizan “primers” de una secuencia específica
de 20 a 30 bases, que son complementarios
a las secuencias únicas que flanquean al mi-
crosatélite (15). Actualmente se dispone de
numerosas secuencias de SSR que fueron re-
cientemente reportadas para N. tabacum las
cuales son de dominio público y pueden ser
de gran utilidad para estudios de variabilidad
genética y caracterización de variedades (1,
2). Los marcadores ISSR (inter simple sequen-
ce repeats), que utilizan secuencias de micro-
satélites como primers y amplifican regiones
inter-microsatelitales, también demostraron
ser una técnica altamente reproducible para
el análisis de variabilidad genética en N. ta-
bacum (16). La técnica de ISSR emplea un
único primer que hibrida en múltiples sitios
Cuadro 1. Variedades de tabaco Tipo Virginia analizadas en el presente trabajo. TMV: Tobacco Mosaic Virus; PVY: Potato
Virus Y; R: Resistente; T: tolerante; S: Susceptible; nd: dato no disponible.
del genoma y permite la amplificación de
segmentos de ADN de distinta longitud (20).
El objetivo del trabajo fue conocer la variabi-
lidad genética existente entre variedades de
tabaco Virginia conservadas en el Banco de
germoplasma del NOA (BANOA) y variedades
comerciales para aportar nuevos materiales
a los programas de mejoramiento.
MATERIALES Y MÉTODOS
Material biológico
Se analizaron 12 variedades comerciales de
tabaco Tipo Virginia de importancia para la
región (Cuadro 1) y 5 variedades conserva-
das en el BANOA: BANOA29 (INTA Güemes
74), BANOA33 (Virginia San Pedro INTA), BA-
NOA49 (INTA Cerrillos 90A), BANOA50 (INTA
Cerrillos 91B) y BANOA51 (INTA Cerrillos 69).
Estas últimas fueron generadas como resul-
tado de 30 años de trabajo (entre 1960 y
1990) en el programa de mejoramiento de
tabaco del INTA EEA Salta por el Ing. Agr. Da-
río Fernandez de Ulivarri.
Para el análisis se emplearon plántulas de ta-
baco de 100-120 días, mantenidas en almáci-
go flotante.
Análisis molecular
La extracción de ADN se realizó a partir de
hojas de plántulas de tabaco empleando el

Variedades TMV PVY Black Shank Nematodos Marchitez Bacteriana

Comerciales P. parasitica M. incognita R. solanacearum
MB 47 nd nd nd T T
PVH 2299 R S T R T
MB 37 nd nd nd T T
PVH 2248 nd nd nd nd nd
NC 567 R R T R T
K 394 S S R S T
K 149 S S T R R
PVH 2291 S S S R R
K 326 S S T R T
PVH 2241 R S T R T
K 346 S S R R R
PVH 2254 R S T R T

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 25

protocolo de CTAB de Doyle y Doyle (5) mo- sa (INBIO, Tandil). La amplificación del ADN
dificado (3). La calidad y cantidad de ADN se consistió en una desnaturalización inicial de
midió en geles de agarosa 0.8% utilizando un 7 min. a 94° C seguida de 33 ciclos de 1 min.
marcador de peso molecular (DNA Ladder, a 94° C, 1 min.15 seg. a T° de annealing del
Genbiotech). A partir del ADN extraído se primer y 4 min. a 72° C, con una extensión
realizó la amplificación mediante PCR em- final de 7 min. a 72° C.
pleando marcadores ISSR y microsatélites Se analizó un total de 24 marcadores micro-
distribuidos en todo el genoma de tabaco (2). satélites distribuidos en todos los grupos de
Se probaron 8 primers ISSR con bases selec- ligamiento de N. tabacum según el mapa
tivas en los extremos 5` (anclaje 5`) o 3` (an- publicado por Bindler et al. (2). Las reac-
claje 3`) y sin anclaje (Cuadro 2). Las reaccio- ciones de PCR se realizaron en un volumen
nes de ISSR-PCR se realizaron en un volumen final de 10 µl utilizando 20 ng de ADN genó-
final de 25 µl utilizando 20-50 ng de ADN ge- mico, 2,5 mM Cl2Mg, 0,2 µM de cada primer
nómico, 2,5 mM Cl2Mg, 0,7 µM de primer, 10 (forward y reverse), 10 mM de Tris-HCl (pH
mM de Tris-HCl (pH 7.2), 50 mM de ClK, 200 7.2), 50 mM de ClK, 125 µM de cada dNTP
µM de cada dNTP y 1,25 U de Taq polimera- y 1 U de Taq polimerasa (INBIO, Tandil). La
amplificación consistió en una desnaturali-
Cuadro 2. Primers ISSR y miscrosatélites utilizados para el
análisis de 17 variedades de tabaco Tipo Virginia. zación inicial de 7 min. a 94° C seguida de 30
ciclos de 1 min. a 94° C, 1 min. a 62-65° C y
Primer Secuencia (5’-3’) Tº annealing (ºC) 2 min. a 72° C, con una extensión final de 7
ISSR min. a 72° C.
Los productos de amplificación se separaron
AA3 (AC)8TA 52 por electroforesis en geles de agarosa 1,5%
para los marcadores ISSR y de poliacrilami-
C (AG)8CG 52
da 10% (29:1 acrilamida: bis-acrilamida) para
LA5 CAG(AAC)5 53 los microsatélites, utilizando para el revela-
do la tinción con GelRedTM. Los geles fueron
G GAG(CAA)5 58 fotografiados para la documentación y ge-
BA5 GAG(GAA)5 53
notipado de los materiales con cada uno de
los marcadores probados. El tamaño de las
FA5 TAC(GA)8 56 bandas amplificadas se determinó utilizando
como patrón de comparación un marcador
microsatélites
de peso molecular (Marcador de ADN, INBIO,
50610 F: CACATTTGACCGTTCAACCA 62 Tandil). Se realizaron repeticiones tanto de
R: CTACACGGTAACTGCTCCAAA las extracciones de ADN como de las reaccio-
51838 F: TTGCTGTGAGTAGCTGCTGAG 64
nes de PCR.
R: TTGAGACATGCCATAACCACA
52260 F: GCCAACAAATAAGGTACGGG 64
R: CCACTTGGCGAAATGAGAAT Análisis de datos
61512 F: TCGGACCCAAAGTTTAAGAAA 63 Con los patrones de bandas obtenidos se
R: CAAATGACGACCAGGGAAAT
60209 F: TGCACAAATTAAAGGCAACTCA 64 construyó una matriz que fue utilizada para
R: ACGACAAGACGTCAAACGAA generar un árbol de Neighbor-Joining usando
52643 F: ACAGGGCATCAGAATTGTTT 64 el programa Powermarker (9) y la distancia
R: CATGACATACTACAGGTGACCCA
52858 F: TGAATTATGCGGTGCACATT 65 de Cavalli-Sforza y Edwards (4). Para deter-
R: ATATTCCAACGTGGGCTGAA minar la robustez de los agrupamientos se
52838 F: CCATTTCGATTGTGATGCAA 65 generó un arbol consenso a partir de 1000
R: AACATCATCCGAGGCCTAAA
repeticiones de bootstrap (7).

26 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

RESULTADOS Y DISCUSIÓN Cuadro 3. Polimorfismo detectado por cada marcador mi-
crosatelite utilizado en el análisis de 17 variedades de ta-
baco Tipo Virginia del NOA.
Se analizó un total de 17 variedades de taba-
co Tipo Virginia empleando marcadores ISSR Marcador Grupo de Nro de Alelo más PIC
y microsatélites. ligamiento alelos frecuente
Los mismos mostraron patrones de bandas 51838 3 2 0.5294 0.37
repetibles con tamaños entre 250 pb y 3 Kb. 61512 7 3 0.5882 0.48
El promedio de bandas amplificadas por pri- 52260 8 3 0.5882 0.50
mer fue de ocho. Sin embargo no se observa- 60209 11 4 0.3750 0.67
ron patrones polimórficos que permitieran 50610 13 3 0.8824 0.20
mostrar diferencias entre los materiales ana- 52643 17 3 0.6667 0.41
lizados (Figura 1). Por ello se optó por utilizar 52838 21 2 0.6471 0.35
marcadores SSR para el análisis ya que se ca- 52828 24 3 0.7500 0.37
racterizan por mostrar elevado polimorfismo Media 3 0.6284 0.42
debido a la variación en el número de repeti-
ciones de los microsatélites y permitir la de- mitieron diferenciar a todas las variedades
tección de individuos heterocigotas para los estudiadas mostrando la existencia de varia-
diferentes loci. Tales características hacen bilidad genética entre las mismas (Figura 2).
que los microsatélites sean muy útiles como La existencia de una estrecha base genética
marcadores genéticos, aún en materiales al- en las variedades de tabaco comúnmente
tamente relacionados. utilizadas a nivel mundial fue reportada por
El tamaño de las bandas amplificadas em- diferentes autores (13, 19, 17). Es probable
pleando marcadores SSR varió entre 100 que una gran proporción de germoplasma
y 250 pb. En todos los casos se obtuvieron de tabaco se haya perdido por la mayor po-
bandas del tamaño esperado según la bi- pularidad de ciertas variedades comerciales
bliografía. Del total de primers analizados y la constante selección artificial (19). Para
el 33% mostró polimorfismo entre las varie- ampliar la base genética de los cultivares
dades estudiadas (Figura 1). El promedio de elite es necesario realizar cruzamientos con
alelos amplificados por primer fue de tres y variedades genéticamente distantes o espe-
los valores de PIC (contenido de información cies silvestres (10). Por esto la variabilidad re-
polimórfica) variaron entre 0,20 y 0,67 con velada entre las variedades estudiadas en el
un promedio de 0,42, evidenciándose que el presente trabajo es un gran aporte para los
marcador 50610 fue el menos polimórfico programas de mejoramiento.
(Cuadro 3). Los marcadores utilizados per- El árbol de Neighbor-Joining generado em-

Figura 1. Amplificación de ADN de variedades de tabaco Tipo Virginia del NOA empleando marcadores moleculares.
a) ISSR AA3, b) microsatélite 51838. Para la nomenclatura ver Cuadro 1.

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 27

 I PVH2291
PVH2241
MB 47
PVH2248
K149
II
PVH2254
BANOA49
PVH2299
NC567
K394
BANOA29
BANOA51
BANOA33
K346
III
K326
MB37
0.1 BANOA50
Figura 2. Árbol de Neighbor-Joining de 17 variedades de
tabaco Tipo Virginia analizadas empleando marcadores
microsatélites.
pleando los datos moleculares agrupó a las
variedades con buen rendimiento a campo y
conservación de calidad en estufado (K326,
K346) en el mismo grupo o cluster (cluster
III) (Figura 2). Mientras que el resto de las
variedades que presentan mediano a bajo
rendimiento, pero son resistentes a nema-
todos, virosis y enfermedades radiculares, se
agruparon en clusters separados (clusters I y
II). BANOA 49 y BANOA 51 mostraron gran
divergencia genética con el resto de las va-
riedades revelado por la mayor longitud de
las ramas del árbol. Las mismas evidenciaron
mayor tolerancia a Rhizoctonia solani en en-
sayos de patogenicidad utilizando diferentes
variedades comerciales (com. pers. Mercado
Cárdenas). El empleo de las variedades BA-
NOA en programas de mejoramiento (princi-
palmente en cruzamientos con K326 y K346)
sería de gran interés para generar materiales
con probada adaptación a las condiciones
del NOA y a las exigencias del mercado.
El presente trabajo representa el primer re-
porte de marcadores moleculares aplicados
al análisis de variedades de tabaco Tipo Vir-
ginia en el país.
28 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
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Aportes para el manejo del corcovo del tabaco en la región del NOA R

Ana C. Ramallo1, Paola M. López Lambertini2, Daniel A. Ducasse2

1-GEA Agronegocios S.R.L. 2-Instituto de Patología Vegetal (IPAVE), CIAP-INTA (ex-IFFIVE).
Correo-e: ana.ramallo@gea-ide.com.ar

INTRODUCCIÓN wilt virus (TSWV), Groundnut ringspot virus

El corcovo del tabaco o “vira-cabeça” como
también se denomina a esta enfermedad, es
uno de los principales problemas sanitario de
este cultivo en la Argentina y está causado
por diferentes especies virales pertenecien-
tes al género Tospovirus. Sus síntomas más
conspicuos son amarillamiento, detención
de crecimiento, estrías necróticas en tallos,
dibujos necróticos en hojas y un encorva-
miento característico del cogollo.
Actualmente, existen por lo menos 24 espe-
cies de tospovirus citadas a nivel mundial (1,
19). En la Argentina han sido reportados cin-
co especies de tospovirus: Tomato spotted
R Datos extraídos del trabajo de Tesis Doctoral de la primera autora: Relevamiento y evaluación de la variabilidad de Tospo-
(GRSV), Tomato chlorotic spot virus (TCSV),
Impatiens necrotic spot virus (INSV) e Iris ye-
llow spot virus (IYSV) (4, 7, 12, 13). Con excep-
ción del IYSV, las demás especies presentes
en Argentina tienen capacidad de infectar
tabaco, ya sea natural o experimentalmente.
El corcovo del tabaco ha sido reportado en
Argentina desde la primera mitad del siglo
pasado (3, 5). Estudios posteriores deter-
minaron al TSWV como el agente causal de
esta virosis (23) y a los trips Thrips tabaci y
Frankliniella paucispinosa, como sus vectores
(24). Actualmente esta última especie se de-
nomina Frankliniella schultzei (9). En el 2002,
se confirmó al GRSV como el nuevo agente

virus en cultivos comerciales y malezas más comunes de Tucumán, Argentina.2008.

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 29

causal del corcovo del tabaco (22).
Los resultados de un relevamiento efectua-
do en lotes de tabaco tipo Burley durante las
campañas 2001 al 2004 en Tucumán, esta-
blecieron una incidencia promedio del cor-
covo del 36,2%, variando entre el 8 y el 83%
en los diferentes lotes según el manejo del
cultivo, independientemente de las varieda-
des plantadas (21).
El incremento de la prevalencia del corcovo
del tabaco en diferentes regiones produc-
toras de la Argentina motivó el objetivo del
presente trabajo: realizar un relevamiento
de TSWV, GRSV y TCSV y de la o las especies
de trips vectoras de los mismos en cultivos
de tabaco y malezas aledañas como aporte
para el desarrollo de estrategias de manejo
de esta enfermedad.
MATERIALES Y MÉTODOS
Recolección de muestras de tabaco y rele-
vamiento del TSWV, GRSV y TCSV
Entre los años 2000 y 2004 se muestrearon
plantas con síntomas típicos de tospovirus
en cultivos comerciales de tabaco (Nicotiana
tabacum) ubicados en diferentes localidades
de las provincias de Tucumán, incluyéndose
también muestreos en Salta y Jujuy (Tabla 1).
La toma de muestras se realizó durante los
meses de producción del tabaco, desde el
transplante hasta la cosecha (septiembre a
enero). Se recolectaron 282 muestras corres-
pondientes a tabaco tipo Burley (variedades
TN 90, TN 86, Ky 14 y 8959) en Tucumán y tipo
Tabla 1. Localidades incluidas en el relevamiento de plan-
tas con síntomas producidos por tospovirus por provincias
durante el período 2000-2004.
Zona Provincias Departamentos (Localidades)
Valle Jujuy El Carmen (El Carmen, Perico)
de
Salta General Güemes (Güemes);
Lerma Metán (Metán)
Centro Tucumán La Cocha (La Invernada,
de Alto el Puesto, La Florida, La Cruz)
Tucumán Alberdi (Los Arroyos, Marapa, La Calera).
30 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Virginia (en las localidades de Salta y Jujuy).
Si bien la manifestación de síntomas está
condicionada por la especie o variedad, las
condiciones ambientales, el estado de desa-
rrollo o nutrición de la planta y la co-infec-
ción con otros agentes virales, los síntomas
considerados fueron los siguientes: amarilla-
miento y retorcimiento del brote apical (co-
gollo); en hojas adultas, presencia de lesiones
cloróticas y necróticas en forma de anillos o
diseños arabescos que bordean las nervadu-
ras primarias y secundarias; deformación y
asimetría del limbo foliar y necrosis. En ta-
llos, estrías necróticas que avanzan hacia las
nervaduras con depresiones en el envés de
las hojas.
Se tomaron muestras de hojas y/o brotes
tiernos de las plantas que presentaron la sin-
tomatología descripta, total o parcialmente.
Se colocaron en bolsas plásticas, se identi-
ficaron según hospedante y localidad, y se
realizó una breve descripción de los sínto-
mas. Las muestras se refrigeraron hasta su
análisis en laboratorio.
Las muestras recolectadas se analizaron me-
diante DAS-ELISA empleando antisueros po-
liclonales producidos contra la proteína de la
nucleocápside (N) del TSWV, GRSV y TCSV.
Los antisueros contra TSWV y GRSV fueron
producidos por este grupo de trabajo (11,
25), mientras que el antisuero contra TCSV
fue gentilmente cedido por el Dr. C. A. De
Ávila (CNPH-EMBRAPA, Brasil).
Debido a que los antisueros contra las tres
especies de tospovirus relevados presentan
reacciones cruzadas y con la finalidad de in-
crementar la especificidad de las identifica-
ciones, se utilizó un diseño de placa optimi-
zado para tal fin (26). Cada muestra se analizó
en la misma placa contra los tres antisueros
para determinar con cuál de ellos presenta
el mayor valor de absorbancia determinando
así la identidad de la especie problema.
Las concentraciones de las IgG fueron:
TSWV(1:1500), GRSV (1:1500) y TCSV (1:1000)
y de los conjugados enzimáticos TSWV
(1:2000), GRSV (1:1500) y TCSV (1:500). La di-
lución de las muestras en tampón extracción
fue de 1g en 10ml.
Las placas se leyeron a los 45 minutos en lec-
tor de placas Metrolab 980 con filtro de 405
nm. Las muestras se consideraron positivas
cuando los valores de absorbancia fueron su-
periores a tres veces el valor promedio de los
controles negativos.
Recolección de malezas aledañas a cultivos
de tabaco y relevamiento de TSWV, GRSV y
TCSV en las mismas
Durante los años 2002 a 2004 se recolecta-
ron muestras de malezas de diferentes lotes,
donde la infección de tospovirus había sido
previamente confirmada.
En cada lote relevado se seleccionaron las
cinco malezas más frecuentes, según recuen-
to visual, tanto del interior de cultivo como
de los terrenos o caminos adyacentes a los
mismos, y por cada especie se colectaron al
azar 100 muestras de hojas (1 hoja/planta)
y se separaron en 10 sub-muestras en una
combinación de 10 hojas/muestra (8). En
algunos casos la presencia de síntomas en
determinadas malezas fue el criterio de se-
lección prevaleciente a pesar de que su fre-
cuencia en el campo fuera baja.
Las malezas fueron clasificadas mediante el
empleo de manuales para la identificación
de las malezas (14) y la colaboración de la Cá-
tedra de Botánica Sistemática de la Facultad
de Agronomía y Zootecnia de la Universidad
Nacional de Tucumán.
Las malezas muestreadas fueron analizadas
para el diagnóstico de TSWV, GRSV y TCSV me-
diante la técnica de DAS-ELISA con los reactivos
y metodología descriptas en el punto anterior.
Recolección e identificación de especies de
trips vectores de tospovirus
Los trips se recolectaron directamente de
plantas y de flores de lotes de Tucumán. Fue-
ron conservados y montados según protoco-
los descripto en la bibliografía (18, 20).
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
Para facilitar las tareas de identificación y re-
cuento de los especímenes se los agrupó en
morfo-especies según los siguientes caracte-
res: sexo, color, tamaño y estadio observa-
dos bajo lupa 10-20X. Por cada morfo-espe-
cie se seleccionaron algunos individuos que
fueron clarificados para remover los conte-
nidos corporales y facilitar su caracterización
taxonómica. Las preparaciones semiperma-
nentes fueron observadas en microscopía
para identificación de las especies en base a
claves taxonómicas (2, 15, 16, 18).
RESULTADOS
El 79,1% de las muestras de tabaco recolecta-
das resultaron positivas para GRSV mediante
DAS-ELISA. No se detectó TSWV ni TCSV en
ninguna de las muestras analizadas y conse-
cuentemente tampoco infecciones mixtas
de dos o más especies de tospovirus (Tabla
2). Un 20,9% de muestras sintomáticas no
reaccionó contra ninguno de los anticuerpos
empleados en el relevamiento. En Tucumán
se presentó durante los años en que reali-
zaron los muestreos, una alta incidencia de
corcovo, lo que condujo a un relevamiento
más intensivo de la enfermedad respecto de
Salta y Jujuy.
Tabla 2. Número de plantas positivas y negativas para las
especies de tospovirus analisadas en las distintas provin-
cia del NOA ( 2001-2004).
Provincia Departamentos Totales TSWV GRSV TCSV
(Lotes)
TABACO
Tucumán 4 (45) 257 0 214 0
Salta 3 (3) 13 0 4 0
Jujuy 1 (7) 12 0 5 0
282 0 223 0
Se confirmó mediante DAS-ELISA la presencia
de GRSV en 5 de las 13 especies de malezas
colectadas aledañas a los cultivos de taba-
co. Estas fueron: Portulaca oleracea, Croton
lobatus, Canna sp., Solanun chacoënse y Eri-
chtites hieracifolia (Tabla 3). P. oleracea (ver-
31
Tabla 3. Especies de malezas evaluadas como potenciales hospedantes alternativos de tospovirus. Tucumán. 2002-2004.
(*) Plantas con síntomas característicos de virosis. (+) resultados de DAS ELISA positivos contra GRSV.
dolaga) fue la maleza más frecuente en el
cultivo de tabaco y presentó una incidencia
de GRSV del 50% (132 plantas positivas/265
plantas analizadas). Esta elevada incidencia
podría indicar a esta maleza como un hospe-
dante alternativo del GRSV con un importan-
te rol epidemiológico en la aparición de co-
rocovo en tabaco. Sin embargo, para asignar
dicho rol, deberían haberse encontrado trips
o colonias de trips en las plantas infectadas,
lo cual no ocurrió al momento de realizarse
el muestreo. Este papel de hospedante alter-
nativo está mejor justificado en el caso de
Solanun chacoënse, que resultó positiva para
GRSV y a su vez presentó un promedio de en-
tre 1 y 50 individuos de trips colonizando las
plantas analizadas.
Del total de trips recolectados e identificados
en cultivos de tabaco en los departamentos
de La Cocha y Alberdi, un 55,4% resultó F.
schultzei.
DISCUSIÓN
Los resultados de este relevamiento con-
firman al GRSV como la única especie de
tospovirus causal del corcovo del tabaco y
32 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
consecuentemente la responsable de las se-
veras pérdidas causadas por esta virosis en
la región del NOA mientras que las citas ori-
ginales (3, 5, 23, 24) señalaban al TSWV como
responsable del corcovo del tabaco. Este
cambio en la etiología del corcovo se corres-
ponde con una distribución diferencial de
especies de tospovirus en la Argentina, que
ya ha sido reportada para tomate (26) y que
señala que la especie de tospovirus presen-
te en la región central y del NOA es el GRSV.
Este predominio casi absoluto de GRSV en
detrimento del TSWV en las provincias del
noroeste argentino coincide con una situa-
ción similar a la observada en Brasil, donde
también se determinó una rápida expansión
de GRSV, siendo hoy considerada una de las
especies más ampliamente distribuida y per-
judicial en las regiones del centro y noroeste
brasilero (10).
En toda el área tabacalera relevada, la es-
pecie vectora de tospovirus predominante
fue F. schultzei. Esta especie presenta una
alta eficiencia en la transmisión de GRSV y
una muy baja eficiencia en la transmisión de
TSWV (17), lo cual la señala como responsa-
ble de la alta frecuencia de infecciones con
GRSV en detrimento del originalmente pre-
sente TSWV. Estas características en la trans-
misión de tospovirus por F. schultzei fueron
confirmados en la Argentina con especies
locales de trips y tospovirus, determinándo-
se que este vector transmite GRSV con una
eficiencia del 61, 7% al 75% mientras que no
transmite TSWV (20).
Otro aporte de este trabajo está relaciona-
do con las malezas hospedantes del GRSV.
Se sumaron cinco malezas hospedantes de
GRSV a las citadas por Feldman et al. (6). A
pesar de que Portulaca oleracea fue la male-
za con más alta incidencia de GRSV, no se en-
contraron trips colonizándola. A fin de con-
firmar su rol en el ciclo de esta enfermedad,
sería necesario establecer la presencia de co-
lonias de F. schultzei sobre dicho hospedante
alternativo. Diferente es el caso de Solanun
chacoënse, la cual además de resultar positi-
va para GRSV, fue encontrada colonizada por
F. schultzei. Esta maleza es perenne lo cual
implica su permanencia en el campo durante
todo el año. Esta característica le permitiría
actuar de puente entre cultivos mantenien-
do el inóculo y proveyendo vectores virulí-
feros a los cultivos de tabaco. De cualquier
manera esta hipótesis debe ser confirmada,
y su rol epidemiológico evaluado en compa-
ración por ejemplo, con el cultivo de lechu-
ga, el cual es abundante en la misma zona
durante la época invernal, es susceptible al
GRSV y abundantemente colonizada por F.
schultzei.
CONCLUSIONES
Se determinó al GRSV como la especie de
tospovirus causante del corcovo del tabaco
en la región del NOA y a F.schultzei como la
especie de trips vector predominante.
Portulaca oleracea, Solanum chacoënse, Cro-
ton lobatus, Canna sp. y Erichtites hieracifolia
fueron las únicas malezas en las que se de-
tectó la infección de GRSV en los cultivos de
tabaco en Tucumán. De estas malezas, mere-
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
ce una atención especial Solanum chacoënse
por su potencial importancia epidemiológica.
Como aportes para el manejo del corcovo
del tabaco en la región del NOA merece des-
tacarse que el GRSV es el único agente cau-
sal lo cual es importante en el momento de
establecer programas de mejoramiento para
generar resistencia genética a este patógeno
deben profundizarse los estudios sobre ma-
lezas como hospedantes alternativos y estra-
tegias de manejo contra F. schultzei que sería
el principal responsable de la dispersión de
la enfermedad.
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 INFORMES ESPECIALES Y TECNOLOGIA
Estimación del tamaño óptimo de parcela experimental para
ensayos de rendimientos de tabaco tipo Virginia
Adriana Elina Ortega
INTA, EEA Salta.
Correo-e: aortega@correo.inta.gov.ar
INTRODUCCIÓN
Los experimentos de campo son el método
biológico más utilizado y pertinente para dar
respuestas al estudio de los problemas teóri-
cos y prácticos agrícolas; estos deben garan-
tizar datos precisos y veraces. En experimen-
tos de tabaco (Nicotiana tabacum L.) tipo
Virginia en el área tabacalera del noroeste
argentino, se utilizan parcelas netas de eva-
luación de rendimiento que generalmente
tienen dimensiones que oscilan entre 24 y 36
m2, dos surcos distanciados a 1,2 m de 10 a
15 m de longitud y entre 50 y 75 plantas para
ensayos en manejos convencionales. Con
el fin de promover la sustentabilidad de los
sistemas productivos ha surgido una nueva
tecnología de manejo conservacionista de
suelo, con plantación directa de tabaco, en
la cual se están realizando experimentacio-
nes que tienen parcelas muy variables que
van de 24 a 150 m2, dos surcos distanciados
a 1,2 m o 1,5 m (surcos dobles) de 10 m a 50
m de longitud y entre 24 a 250 plantas (13,
9). Las variedades y el manejo de cultivo han
variado a través del tiempo pero las parce-
las experimentales, en términos generales,
siguen siendo las mismas.
En experimentación agrícola es necesario de-
terminar el tamaño y la forma adecuados de
la parcela que permita obtener datos de bue-
na calidad y precisión. Desde los inicios del
presente siglo se han ensayado una serie de
técnicas y procedimientos estadísticos para
la determinación de la unidad experimental
(6, 11). Los métodos disponibles establecen
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
el tamaño de parcela útil pero no el área de
bordes (1) y su determinación debe ser hecha
para cada condición de cultivo y no puede ser
generalizada para otras situaciones (2).
El empleo de parcelas demasiados pequeñas,
con un pequeño número de plantas, tiende
a ofrecer resultados sesgados con una in-
fluencia mayor de la heterogeneidad propia
del cultivo. El empleo de parcelas grandes
trae como consecuencia la necesidad de una
gran extensión de terreno y, por lo tanto, un
predominio mayor de la heterogeneidad del
suelo que hace disminuir la exactitud del ex-
perimento (12). El tamaño óptimo de parcela
varía con la variable de estudio evaluada en
cada cultivo (7)
El tamaño de la parcela se puede determinar
utilizando varios métodos como el del error
probable, curvatura máxima, procedimiento
de Smithy el procedimiento de Hatheway y
Williams. Varios investigadores al calcular el
tamaño de parcelas han usado sus propios
métodos basados en modificaciones de es-
tos (6, 10, 2).
El tamaño de la parcela experimental tiene
mayor influencia que la forma sobre el va-
lor del coeficiente de variación. Frolov et al.
(1977) citado por Pérez Cabrera y Redonet
Ferret (12) proponen, por la comodidad de
realizar los trabajos, parcelas rectangulares
con proporciones múltiplo de 1:4 a 1:10. Se-
gún Federer (1963) citado por Escobar Soto
et al. (5) cuando el gradiente en el terreno es
desconocido, las parcelas rectangulares pro-
ducen en promedio una varianza por parcela
más pequeña que las parcelas cuadradas del
35
mismo tamaño Para determinar la forma de
la parcela estadísticamente se puede usar la
prueba de homogeneidad de la variancia de
Bartlett y la prueba de F (6).
Los ensayos de uniformidad son los más re-
comendables para el estudio de tamaños óp-
timos de parcela en diversos cultivos (6)
Para la estimación del tamaño óptimo de
parcela experimental Escobar Soto (5) em-
pleó la metodología empleada por Pablos
y Castillo (1976) y por Briseño y Castillo, la
cual consiste en estimar una ecuación de re-
gresión, de la forma CVij= b0 + b1Li + b2Aj
+ b11Li2 + b22Aj2 + b12 LiAj, a partir de los
arreglos de parcelas de diferentes tamaños,
en términos de unidades básicas del ensayo
en blanco. En esta ecuación de regresión, la
variable dependiente es el coeficiente de va-
riación (CVij) y las variables independientes
son el largo (L) y el ancho (A) de las parcelas
de cada arreglo. Para valores fijos del coefi-
ciente de variación y de número de surcos
(ancho de parcela) se calculó la longitud de
la parcela experimental, empleando la me-
todología de superficie de respuesta. Esta
metodología es una variación del método de
curvatura máxima.
Pérez Cabrera y Redonet Ferret (12) estudia-
ron el tamaño de las parcelas de experimen-
tación de tabaco en Cuba, obteniendo como
resultado que entre 8 y 120 m2 de tamaño de
parcela se encontraba por debajo del 10% el
coeficiente de variación (CV), que había una
zona de estabilidad comprendida entre 27
y 90 m2 con un mínimo del 4% de CV y que
fuera de esta zona, con parcelas más chicas
o más grandes se aumentaba el CV. El tabaco
usado fue criollo y con distancia de planta-
ción de 0,75 m entre surcos y 0,25 m entre
plantas.
En varios ensayos realizados en la EEA Salta
de INTA (8) se han evaluado diferentes tec-
nologías a través del peso verde y del peso
estufado clasificado y siempre estas varia-
bles de respuesta se encontraron correlacio-
nadas. Así, el peso verde de hoja cosechada
36 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
puede ser una variable de respuesta válida
y mejor por la capacidad de detectar meno-
res diferencias entre los tratamientos y hacer
más económicos y fáciles los ensayos. Cuando
la evaluación se hace sobre hoja estufada y/o
clasificada, los CV obtenidos fueron mayores.
Se realiza el presente trabajo con el fin de es-
tablecer la forma y el tamaño óptimo de la
parcela experimental para llevar a cabo en-
sayos comparativos de rendimiento de taba-
co tipo Virginia, en manejos convencionales
y conservacionistas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizaron dos ensayos en el campo ex-
perimental de la EEA Salta del INTA, en el
sitio que se realizan los estudios de tabaco
en plantación directa de tabaco (PD) y junto
a los de fertilización en cultivo convencional
(CC).
En PD se estudió un lote de 12 surcos dobles
y plantas a tres bolillos separados a 1,56 m
(Figura 1) y en CC de 12 surcos de ancho se-
parados a 1.2 m y en ambos casos de 33 m
de largo. Fueron divididos en unidades bási-
cas (UB) de 1 surco de 1.5 m de largo. Cada
UB se identificó y se cosechó por separado,
en total fueron 264 UB en cada tipo de ma-
nejo.
Se plantó el cultivar PVH09 y el tipo de suelo
Ustocrepte udico serie Cerrillos.
La variable medida fue el peso verde de
hojas cosechado por UB transformado en
rendimiento por hectárea usando un factor
medio de 13.7 (% peso de hojas estufadas/
peso de hojas verdes) obtenido a partir de
pruebas pilotos del mismo ensayo en cada
cosecha (muestras estufadas).
Se generaron diferentes tamaños y formas
de parcelas reuniendo UB contiguas en arre-
glos desde 1x1 (matriz original) hasta 11 x 12
(entre 1,8 y 237,6 m2), y se les asignó a cada
parcela el rendimiento que resultó de la su-
matoria de las UB correspondientes y sin su-
perponer parcelas en la sumatoria (siempre
 d a= 10 cm d
a b= 30 cm a
b b
c
c= 51 cm c
d= 39 cm

Diseño: Dr. José Luis Arzeno

Dibujo: Ing. Agr. Josefina Diez
1.20 m

1.56 m

Figura 1. Distribución de plantas y surcos dobles en la parcela experimental de tabaco tipo Virginia en cultivo de planta-
ción directa

fueron unidades independientes). largo (L, en m) y ancho (A, en número de

Para cada uno de los tamaños y formas de
parcelas generadas se calculó el coeficiente
de variación (CVij en porcentaje) y se estimó
el tamaño óptimo de la parcela experimental
utilizando la ecuación de regresión de Esco-
bar Soto (5), Ecuación 1.
CVij= b0 + b1 Li + b2 Aj + b11 Li2 + b22 Aj2
+ b12 LiAj Ecuación 1
Donde: Li: Largo de las parcelas (m)
Aj: Ancho de las parcela (números de surcos)
Se realizó la prueba de F del rendimiento en
relación a la forma de la parcela para cada
tamaño particular evaluado y para cada ma-
nejo de cultivo.
Los análisis estadísticos se realizaron con el
programa CoHort Software (3).
RESULTADOS
surcos) de la parcela experimental de taba-
co tipo Virginia en plantación directa con la
Ecuación 2 (R2= 0.78) y en plantación con-
vencional con la Ecuación 3 (R2= 0.79).
CV (%)PD = 42.90-1.55*L-4.94*A+0.027*(L)2
+0.202*(A)2+0.0394*A*L Ecuación 2
C V (%)CC = 14.77-0.55*L-1.556*A+0.011*(L)2
+0.081*(A)2+0.0009*A*L Ecuación 3
A partir del modelo de regresión encontra-
do, para valores constantes del coeficiente
de variación y número de surcos se estimó
la longitud de los mismos y con todos estos
datos generó una familia de curvas, de tal
manera que para un valor deseado de CV se
puede escoger entre varias alternativas de
tamaño de parcela, dependiendo de factores
como disponibilidad de terreno, de semilla o
presupuesto.

Los resultados se presentan en las Ecuacio- DISCUSIÓN

nes 2 y 3, Cuadro 1 y en las Figuras 2, 3, 4 y 5.
No se encontraron diferencias significativas
en la variabilidad del rendimiento en relación
a la forma de la parcela para cada tamaño
particular evaluado (P>0,05) y para cada ma-
nejo de cultivo Se estimó la relación entre el
coeficiente de variación (CV) y las variables
Se determinó que no hay cambios significa-
tivos en la variabilidad del rendimiento en
relación a la forma de la parcela para cada
tamaño particular evaluado (P>0,05) y para
cada manejo de cultivo.
A medida que aumenta el tamaño de la par-

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 37

Cuadro 1. Rendimiento, población de plantas y cantidad de hojas de tabaco tipo Virginia. INTA EEA Salta, campaña
2006-07

Variables Unidades PD CC
Rendimiento Kg/ha 2484 ± 1073 4274 ± 803
Plantas/ha 17385 ± 5754 22722 ± 3667
Población de plantas Plantas/1 surco de 4.07 ± 1.35 4.09 ± 0.66
1.5 m
Cantidad de hojas Hojas /planta 23.7 ± 2.7 23.7 ± 2.7

40 14

35 12

30
10

25
8
CV (%)

CV (%)
20 1
1
6
15 2
2
3 3
10 4
4 4
12 5 5
6
5 7 2 7 12 6
8 8 11
9 9 10
11 10
0 0
0 5 10 15 20 25 30 35 0 5 10 15 20 25 30 35
Largo de surco (m) Largo de surco (m)

Figura 2. Coeficiente de variación (CV) para el rendimiento
de tabaco tipo Virginia obtenido en parcelas de diferentes
tamaños en un ensayo de plantación directa, INTA, EEA
Salta, campaña 2006-07. Los números de las líneas en las
figura corresponden al número de surcos
Figura 3 Coeficiente de variación (CV) para el rendimiento
de tabaco tipo Virginia obtenido en parcelas de diferentes
tamaños en un ensayo de plantación convencional, INTA,
EEA Salta, campaña 2006-07. Los números de las líneas en
las figura corresponden al número de surcos

Figura 4. Rango de coeficientes de variación (CV) para el Figura 5. Rangos de coeficientes de variación (CV) para el
rendimiento de tabaco tipo Virginia obtenido en parcelas rendimiento de tabaco tipo Virginia obtenido en parcelas
de diferentes tamaños en un ensayo de plantación direc- de diferentes tamaños en un ensayo de plantación con-
ta, INTA, EEA Salta, campaña 2006-07. vencional, INTA, EEA Salta, campaña 2006-07.

38 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

cela disminuye el CV. Con las dimensiones
estudiadas de la parcela se llegó a la estabi-
lización del mismo tanto para el número de
surcos como para su longitud a los 21 m de
largo y a los 9 surcos de ancho. En el caso de
PD el CV fue de alrededor de 4.5 % y para el
cultivo convencional de 1.8 %.
Se observó mayor variabilidad en los rendi-
mientos para el ensayo de PD. En la parcela
comúnmente utilizada en CC, con un tamaño
de 2 surcos de 10 m de longitud, se estima
un CV de 7.56% para convencionales y 21.8
% para PD si se evaluaran lo ensayos en peso
verde de hojas. La variabilidad relativa resul-
tó cerca de 2,6 veces mayor en PD que en CC.
La parcela en PD debe ser más grande que la
de CC para obtener el mismo coeficiente de
variación en los ensayos.
El tamaño de las parcelas de experimenta-
ción que se encontraba por debajo del 10%
CV en PD fueron las de 4 o más surcos y ma-
yores a 40 y 93 m2 (12 a 4 surcos respectiva-
mente) y en CC fueron las de 3 o más surcos y
mayores a 7,2 m2 y las de menos de 3 surcos
mayores a 10,8 m2.
Valores similares fueron encontrados por
Pérez Cabrera y Redonet Ferret (12) para CC
pero con valores más del doble para el mí-
nimo del CV; valores éstos, semajantes a los
de PD.
Con las ecuaciones obtenidas en el presente
trabajo el experimentador podrá estimar los
CV % esperados según los diferentes anchos
y largos de parcelas seleccionadas. Esto per-
mite trabajar flexiblemente, fijando su máxi-
mo nivel de variación aceptado y obtenien-
do varias combinaciones de forma y tamaño
de parcela para estimar rendimiento. A esta
parcela se le deberán agregar las borduras
consideradas necesarias según los factores
en estudio.
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Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
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gional INTA, EEA Salta, SALJU09.
Comportamiento de variedades de tabaco Virginia en la localidad de
Chicoana (Salta)
María Elena Toncovich1, Juan Galli1, Josefina Diez1, José Sulca1 y Alejandra Guaymás2
1-INTA, EEA Salta. 2-Productora tabacalera
Correo-e: mtoncovich@correo.inta.gov.ar
INTRODUCCIÓN
El tabaco es el cultivo industrial no alimen-
tario líder en el mundo, debido a su gran
adaptabilidad a las diferentes condiciones
climáticas y de suelos. Por ello, se cultiva en
más de cien países distribuidos en todos los
continentes (3). En Argentina, la industria del
tabaco representa una importante actividad
en términos productivos, económicos y so-
ciales para las distintas economías regiona-
les. En la campaña 2009/10 el ingreso bruto
por ha de tabaco fue 2,91 veces superior al
poroto blanco y 9,51 veces más que la soja. El
72.53% del tabaco producido es de tipo Vir-
ginia y se cultiva principalmente en las pro-
vincias de Salta y Jujuy (8).
40 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
AGRADECIMIENTOS
Se agradece al Ing. Agr. Manuel Alfaro por el
cultivo de tabaco, al Agr. Gregorio Viñabal y
a los auxiliares de campo por su dedicación
en las tareas de toma de datos y al Ing. Agr.
Fernando Ledesma por su colaboración en
las evaluaciones y en la organización de da-
tos. Se agradece al Dott. Giampaolo Zanin de
la Universidad de Padua por su ayuda para
realizar el análisis estadístico de los datos. Se
agradece el apoyo como Jefa de Grupo a Ma-
ría Elena Toncovich, a Silvia Sühring por la co-
rrección del escrito y a Carolina Sánchez por
el asesoramiento en el diseño experimental.
Financiado por INTA – Proyecto Regional de
Tabaco (SALJU 09)
En la cadena de valor tabacalera la primera
clasificación del producto se realiza a nivel
de finca, luego que la hoja ha sido cosechara
y estufada. El tabaco tipo Virginia comienza
a madurar cuando las hojas verdes pierden
color y se transforman en hojas amarillo-
verdosas. A medida que las hojas maduran
son cosechadas en lotes de 3 a 5 hojas por
planta por cosecha (12). La cosecha es una la-
bor que debe realizarse respetando la opor-
tunidad para obtener una buena calidad de
producto. Implica un elevado costo en mano
de obra, empleándose 26 jornales/ha por lo
que generalmente se debe contratar mano
de obra extrapredial (7).
Una vez cosechada la hoja se inicia el proce-
so de curado, el mismo tiene dos objetivos
principales. Primero, crear condiciones de
temperatura y humedad para ayudar a que
se produzcan en la hoja los cambios químicos
y biológicos deseados. Segundo, conseguir
que la hoja, por medio de un secado ade-
cuado, pueda mantener su calidad potencial.
Curar es algo más que un simple secado, im-
plica cambios químicos y físicos, que son ne-
cesarios para obtener tabaco de alta calidad
(4). El primer proceso de curado realizado
por el productor tiene como objetivo preser-
var las hojas de tabaco al generar, vía calor,
condiciones organolépticas adecuadas para
conservar la calidad potencial de la hoja (8).
Posteriormente el productor realiza una pre-
clasificación de las hojas y las dispone en
fardos de 45/50kg según calidad y posición
foliar que serán entregados en las acopiado-
ras (4). El precio de cada fardo va a depender
de la calidad del mismo de acuerdo al patrón
tipo establecido por el Ministerio de Agricul-
tura Ganadería y Pesca en la Resolución Nº
1102-1994. En dicho patrón se consideran
diferentes grados de calidad de acuerdo al
color de la hoja, intensidad del mismo, la es-
tructura foliar, cantidad de aceite, cuerpo y
largo de la hoja, porcentaje de tolerancia en
manchas, % de faltante de lámina y unifor-
midad.
Existe escasa información disponible con res-
pecto a la respuesta de variedades en cuan-
to a su rendimiento y calidad, la mayoría de
las evaluaciones realizadas con diferentes
variedades de tabaco estudian la resistencia
o tolerancia a diferentes factores bióticos y
formas de curado (1, 11, 12). Las especies
cultivadas llevan información, adquirida du-
rante su evolución y mejora, que definen su
comportamiento en campos agrícolas (6).
Esta información está contenida en el ma-
terial genético, es por ello que el presente
trabajo tiene como objetivo evaluar el ren-
dimiento cultural, económico y la adaptación
de un conjunto de variedades y selecciones
de germoplasma bajo determinadas condi-
ciones ambientales en Chicoana (Salta).
Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
MATERIALES Y MÉTODOS
Descripción general del ensayo
Dentro de la serie de Ensayos de Variedades
con tabaco tipo Virginia se realizó por segun-
do año consecutivo, campaña 2009-2010, la
evaluación de variedades en la localidad de
Chicoana (Finca Los Los).
De las 11 variedades ensayadas (Cuadro 1),
dos son variedades de INTA conservadas en
el Banco de Germoplasma del INTA EEA Sal-
ta (BANOA) y nueve son comerciales (9). Las
variedades comerciales utilizadas represen-
tan el 90 % de las cultivadas por los produc-
tores en la campaña 2009/10.
Cabe destacar que en la mencionada campa-
ña se continuó evaluando la variedad PVEH
206, con el nombre de PVH 2248. Este cam-
bio de nombre se debió a que dejó de ser
una variedad experimental para ser una va-
riedad comercial. Se dejó de trabajar con las
variedades NC 471, NC 196 y PVEH 189, en
el caso de ésta última el semillero de origen
dejó de desarrollarla.
Las plántulas utilizadas para el transplante
fueron realizadas en almácigos flotantes en
el INTA EEA Salta, siguiendo el cronograma
operativo y el protocolo de almácigos flotan-
tes (2). El transplante se realizó el 6/10/09.
El ensayo fue fertilizado con 800 kg/ha de
Hidrocomplex (12-11-18) como base al mo-
mento de rayar y el repique se aplicó al mo-
mento del trasplante con 300 kg/ha utilizan-
Cuadro 1. Variedades de tabaco tipo Virginia.
Variedad
IC 69 (BANOA 51)
IC 91 A (BANOA 50)
PVH 2299
PVH 2248
PVH 2241
PVH 2254
PVH 2291
MB 47
MB 37
K 394
K 326
41
do el mismo fertilizante, de acuerdo a los
resultados obtenidos en el análisis de suelo.
Cuando las variedades llegaron al estado de
botón floral se realizó el desflore manual
acompañado con aplicaciones de desbrota-
dor y aceite graso.
La cosecha del ensayo se realizó de manera
escalonada en función de la madurez del cul-
tivo en cada tratamiento.
Las hojas cosechadas se curaron en las es-
tufas del productor Esteban Pérez Kralik y la
clasificación y pesado se realizó en el predio
del INTA EEA Salta.
Diseño experimental
El diseño fue en bloques completos al azar
con tres repeticiones (Figura 1). Las unidades
experimentales correspondientes a cada va-
riedad fueron dos surcos separados a 1,20 m
entre ellos y de 12 m de largo. El marco de
plantación utilizado fue de 1,20 m por 0,40
m entre plantas, totalizando 60 plantas por
unidad experimental. La superficie total del
ensayo, incluyendo borduras y pasillos fue de
2.433,6 m2.
Muestreos, determinaciones y estimacio-
nes
Muestreos y determinaciones en planta
Se realizaron mediciones fenométricas sobre
cinco plantas de cada unidad experimental.
Se les midieron entre otras variables, la altu-
ra del tallo principal (desde la base hasta la
inserción de la última hoja de 15 cm de lar-
go) y el número de hojas. Estas mediciones
se realizaron cuando el 20 % de las plantas
de la unidad experimental presentaron bo-
tón floral.
La cosecha se realizó en forma escalonada
semanalmente. Cada corte fue pesado en
verde y luego curado. Los diferentes cortes
fueron clasificados según las reglamentacio-
nes del Patrón Oficial y las clases obtenidas
fueron pesadas cada una por separado.
Estimación
Para el cálculo del ingreso bruto de las dife-
rentes variedades se consideraron los distin-
tos cortes realizados para determinar la po-
sición de cada uno de ellos. Se detalla en el
cuadro 2, la posición que se estableció para
cada corte.

Altura de planta (cm) Nº de hojas

200
Altura
a Nº de hojas 30
150 b b b b b
b b b b
b 20
100 a
d b b
c d b b c c b b b
c c d c 10
50 d d
d d

0 0
IC91A PVH K 394 PVH PVH MB 47 PVH PVH MB 37 K 326 IC69
2291 2254 2299 2241 2248

Variedades

Figura 1. Altura de planta y número de hojas para diferentes variedades de tabaco tipo Virginia en el departamento Chi-
coana, Salta.
Letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas entre variedades (p<0,05).

42 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

Cuadro 2. Posición de hojas de tabaco y número de cortes RESULTADOS Y DISCUSIÓN
durante la cosecha de la campaña 2009/10

La variedad PVH2299 fue la que presentó

Posición de la hoja Cortes
Bajera 1, 2 y 3
Mediana 4, 5 y 6
Superior 7y8
Se utilizó la tabla de precios de la campa-
ña 2009-2010 para calcular el ingreso bruto
por venta del tabaco cosechado (incluyendo
el negro y gris). Se tomó como referencia el
precio de la clase B1F de $13,38/kg de taba-
co Virginia. En el caso del scrap, que no reci-
ben las empresas acopiadoras, se consideró
como valor indicativo $ 2,40 por kg.
Análisis estadístico
El comportamiento de las diferentes va-
riedades se evaluó mediante un análisis de
varianza (ANOVA), teniendo en cuenta en
las variables fenométricas el submuestreo
y considerando como covariable el número
de plantas por unidad experimental. Las me-
dias de los tratamientos fueron comparadas
por el test de mínima diferencia significativa
(LSD) (p<0,05). El programa utilizando para el
análisis fue Infostat (5).
mayor altura y número de hojas (, dentro
de los híbridos de Profigen es uno de los
que ofrece el más alto potencial para la pro-
ducción de ésta última variable (10). Si bien
entre las restantes variedades se observa-
ron diferencias significativas en la altura de
plantas, el número de hojas fue similar para
todas (Figura 1).
Con respecto al peso fresco, las variedades
PVH2299 y PVH2291 fueron las de mayor
producción, aunque también se destacaron
las variedades PVH2241, PVH2254, K394,
K326 e INTA Cerrillos 69 (IC69) (Figura 2).
Las variedades evaluadas presentaron simi-
lar rendimiento (Figura 3), a pesar de que en
peso fresco se observó que las variedades
PVH2299 y PVH2291 superaron a las otras
en un 15% aproximadamente. Teniendo en
cuenta que la hoja curada presenta aproxi-
madamente un 16% de humedad se puede
inferir que las hojas de estas dos variedades
presentan mayor contenido de agua.
La producción de hojas naranjas no se dife-
renció entre los diferentes materiales genéti-

Peso fresco (kg/ha)

40000

a
30000 a ab
ab
b b ab ab ab b
b
20000

10000

0
MB 37 PVH PVH K 394 PVH IC69 PVH PVH MB 47 K 326 IC91A
2248 2241 2254 2299 2291
Variedades

Figura 2. Peso fresco para diferentes variedades de tabaco tipo Virginia en el departamento Chicoana, Salta.
Letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas entre variedades (p<0,05).

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 43

 Rendimiento(kg/ha)

8000
Limón
Naranja
Rendimiento
Ingreso

6000 a a a
a
a a a
a a
a a

4000
a a
a a a
a a a
a a a

a
2000 bc ab
bc b bc bc
bc bc bc c
a a a
a a a
a a
a a a

0
MB 37 PVH PVH K 394 PVH IC69 PVH PVH MB 47 K 326 IC91A
2248 2241 2254 2299 2291

Variedades
Figura 3. Rendimiento, producción de hojas naranja y limón e ingreso para diferentes variedades de tabaco tipo Virginia
en el departamento Chicoana, Salta.
Letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas entre variedades (p<0,05).

MB 47
100
IC91A PVH 2299
80

60

IC69 MB 37
40

20

K 326 PVH 2248

PVH 2291 PVH 2241

PVH 2254 K 394

Figura 4. Cosecha acumulada para los distintos cortes (%) de diferentes variedades de tabaco tipo Virginia en el departa-
mento Chicoana

44 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013

cos, mientras que en hojas limón la variedad
IC69 fue la que se destacó. Estos resultados
muestran que esta variedad sigue destacán-
dose por la producción de este tipo de hoja
(Figura 3).
El ingreso económico entre variedades no
presentó diferencias significativas (Figura 3),
sin embargo se debe destacar que las medias
de las variedades de mayor ingreso llegan a
superar en un •30% a las de menor ingreso.
La proporción de hojas entregadas en los di-
ferentes cortes muestra que la variedad IC69
es la que se entrega más rápidamente ya que
en el quinto corte se cosechó aproximada-
mente el 65% de la producción. El comporta-
miento de las restantes variedades fue simi-
lar (Figura 4). En la zona de estudio el período
de cosecha coincide con las precipitaciones
estivales, por lo que esta característica po-
dría beneficiar el ingreso por ser este cultivo
muy sensible al exceso de humedad.
Los resultados obtenidos representan un
aporte de una campaña evaluada de la red
de ensayos del comportamiento de Varieda-
des de Tabaco Virginia en diferentes locali-
dades del área de influencia de la EEA Salta.
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos la colaboración de los auxilia-
res de campo por su buena disposición en la
toma de datos y seguimiento del cultivo.
BIBLIOGRAFÍA CITADA
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Torrecilla Guerra G. 2012. Comportamiento
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International Development & Education in
Agricultural and Life Sciences (Maryland,
USA). 753pp.
45
 Desarrollo de sustratos para almácigos flotantes de tabaco
Carlos Herrando1, Susana Krieger1, Silvia Gómez1, María E. Acosta1 y Fernando Lacci2
1-UNSa Facultad de Ciencias Naturales, Salta. 2- EEA INTA-Cerrillos Salta.
Correo-e: herrando@unsa.edu.ar
INTRODUCCIÓN
De las exportaciones de productos primarios
correspondientes a la provincia de Salta, el
tabaco ocupa el tercer lugar luego de la soja
y las legumbres (4).
Los sustratos utilizados para la obtención de
plantines de tabaco en almácigos flotantes,
están formulados en base a turba, material
no renovable y de elevado costo (1,12). Ac-
tualmente se trabaja en la búsqueda de ma-
teriales locales renovables, de buena calidad
y de costo accesible, que permitan sustituirla
parcial o totalmente. Los compost en base a
fibra de coco, cáscara de arroz, chips de ma-
dera, lombricompuesto y corteza de pino,
representan alternativas viables para la for-
mulación de sustratos (11).
El compostaje es una técnica amigable con
el ambiente, que permite transformar los re-
siduos orgánicos en un producto que puede
ser usado en la agricultura principalmente
como abono orgánico, enmienda orgánica, o
sustrato de cultivo. El contenido de nutrien-
tes, materia orgánica, pH y conductividad
eléctrica de los compost son parámetros va-
riables, pero fundamentales para determinar
su uso en la formulación de sustratos. Por
otro lado, la presencia de microorganismos
incrementa y favorece el desarrollo de la ac-
tividad biológica y el efecto supresor de algu-
nos patógenos (2,5).
Los sustratos usados en la producción de
plantas en recipientes tienen la función de
proveer soporte físico, a la vez de proporcio-
nar agua, aire y nutrientes para el apropiado
funcionamiento de las raíces. El equilibrio
46 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
entre el agua retenida y la aireación en el
medio de crecimiento, es un aspecto esen-
cial. Por otra parte el sustrato debe ser lo
suficientemente pesado (densidad aparente)
para mantener la planta en posición vertical,
y al mismo tiempo sin exceso de peso que
dificulte el manipuleo de las plantas e incre-
mente los costos de transporte (6). Desde
el año 2007 se investiga la utilización de los
compost de bagazo y cachaza provenientes
de la industrialización de la caña de azúcar,
y en mezclas combinados con otros abonos
(urea, vermicompuesto), para la formulación
de sustratos alternativos en la producción de
plantines sin suelo, o como componentes de
sustratos orgánicos, en bandejas flotantes o
apoyadas (7,8).
El objetivo de este trabajo fue comparar el
crecimiento y desarrollo de plantines de ta-
baco en sustratos formulados en base a com-
post de bagazo y cachaza, frente a un testigo
comercial de turba.
MATERIALES Y MÉTODOS
La preparación de los compost se realizó con
bagazo y cachaza, cuyas características físicas,
químicas y biológicas constan en el cuadro 1.
Se compostaron los residuos de bagazo y
mezclas de bagazo con cachaza en diferentes
proporciones, en pilas de volteo de 3 m3 cada
una, cuatro por cada compost, formando un
cuadro equidistante a fin que en cada volteo
que se realiza cada 10 a 15 días, se unan de
a dos. Esto se debió a que la pila decrece en
tamaño (de 1,5 m de alto, se reduce a 1 m
aproximadamente) debido a su descomposi-
Cuadro 1. Propiedades físico-químicas de las materias Luego de la caracterización físico-química de
primas del compost
los diferentes compost obtenidos en la plan-
Propiedades Bagazo Cachaza ta de compostaje de la Universidad Nacional
Físicas de Salta (UNSa), se seleccionó el compost ba-
Da (g /cm3) 0,07 0,5 gazo 100% y las mezclas de bagazo-cachaza
Químicas 90:10 y 95:5 por presentar características or-
M. O. (%) 64 21 ganolépticas adecuadas, una conductividad
Nitrógeno (%) 0,24 1,73
Fósforo (%) 1,82 0,14
eléctrica y un pH posibles de ser corregidos
Potasio (%) 0,28 1,20 dentro de los valores extremos de bagazo
Sodio (%) 0,02 0,02 100% y bagazo-cachaza 85:15. Cuadro 2.
Calcio (%) 0,45 1,75 Maduración
Magnesio (%) 0,18 1,70
Relación C:N 133:1 6:1 Cuadro 2. Propiedades físico, químicas y biológicas de
CE* (mS/cm.) 0,5 7,7 compost extremos en pH y CE
pH 7,6 7,5
Propiedades Bagazo 100% Ba-Ca 85:15 %
ción, mediante la cual se eliminan gases a la Físicas
atmósfera, como dióxido de carbono (CO2), Da (g /cm3) 0,10 0,20
vapor de agua (H2O) y amoníaco (NH3). CHS* (%) 620 110
Químicas
Esta técnica (cuatro pilas del mismo com-
Materia Org. (%) 82,9 62,1
post) facilitó el volteo, homogeneizó el ma- Nitrógeno total (%) 0,51 0,75
terial compostado parcialmente, mezclando Fósforo total (%) 0,15 1,02
las partes expuestas a la superficie frías, con Potasio total (%) 0,30 1,02
las del núcleo (termófilo) y con aquellas zo- Sodio total (%) 0,01 0,02
nas bajas con características indeseables por Calcio total (%) 1,31 1,77
Magnesio total (%) 0,34 1,34
exceso de humedad. Luego del primer volteo Relación C:N 81:1 61:1
de las pilas, durante el segundo y tercero se CE** (mS/cm.) 0,5 1.20
unieron de a dos, de manera de mantener pH 7,5 8.0
una pila única de 3 m3. Biológicas
Las proporciones de materias primas a com- Coli. tot (NMP/g) 4 90
Coli fecal (NMP/g) Ausencia Ausencia
postar fueron:

1. Bagazo 100 % Los compost mezclas se almacenaron en dis-

2. Bagazo 95 % + Cachaza 5 %
3. Bagazo 90 % + Cachaza 10 %
4. Bagazo 85 % + Cachaza 15 %
5. Bagazo 100 % + Urea (4 kg en la pila)
6. Bagazo 90 % + Vermicompuesto 10%
Manejo del compostaje
Se basó en el monitoreo del proceso durante
las etapas mesofílica y termofílica, con vol-
teos, humectación y aireación. Se siguió la di-
námica del proceso térmico observando las
poblaciones microbianas en sus diferentes
etapas, las que aseguran la “pasteurización”
termófila.
tintos estados de maduración para su uso es-
pecífico en bandejas flotantes.
Estabilización, corrección pH y conductividad
eléctrica
Una vez obtenidos los compost, se corrigie-
ron el pH y la conductividad eléctrica por
medio de lavados con agua y ácido fosfórico
(H3PO4) a valores aptos para el crecimiento y
desarrollo de los plantines. Se colocaron en
la mezcladora, en una proporción de 50 l de
compost mezclas con 60 l de agua (conducti-
vidad eléctrica conocida). Se agregó entre 10
a 20 cm3 de H3PO4 por cada lavado, según el
pH medido hasta lograr un pH aproximado

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 47

de 6 a 6,5 y una conductividad eléctrica por
debajo de 0,40 dS/m. Cuadro 3.
Luego de 15 a 20 min. de batido, se vació la
Cuadro Nº 3. Conductividad eléctrica y pH inicial - final del
compost corregido.
Compost Conductividad eléctrica
mS/cm pH
INICIAL FINAL INICIAL FINAL
Ba 100% 0,50 0,48 7,5
Ba-Ca 90:10 0.90 0.54 7.8
Ba-Ca 95:5 0.75 0.50 7.6
mezcladora filtrando con una malla de 2 mm.
Posteriormente se colocó el compost mezcla
en una centrífuga para eliminar el excedente
de agua, hasta lograr un 50% de humedad.
Formulación de sustratos
Se procedió a formular los sustratos con
(inertes) perlita expandida (20%), vermiculi-
ta media (10%) y gruesa (10%), para conseguir
las características físicas, químicas y biológi-
cas que permitieron utilizarlos en ensayos co-
merciales en la EEA INTA Salta y COPROTAB.
Se formularon los sustratos con inertes, en las
siguientes proporciones (Tratamientos):
1. Bagazo 100 % (60 % + Inertes 40%)
2. Bagazo 100 % (60 % + Inertes 40%) tra-
tado con vapor
3. Bagazo 95 % + Cachaza 5 % (60 % + Iner-
tes 40 %)
4. Bagazo 90 % + Cachaza 10 % (50 % +
Inertes 50 %)
5. Testigo turba comercial
Ensayo
El ensayo comparativo para evaluar la in-
fluencia de distintos sustratos en el creci-
miento y desarrollo de plantines de tabaco
se realizó en el invernadero de la EEA INTA
Salta, en el marco del convenio UNSa-INTA,
Previamente los sustratos fueron inocula-
dos con un microorganismo promotor del
crecimiento vegetal (Azospirillum brasilense)
PGPM y un biocontrolador (Trichoderma viri-
de), ambos productos comerciales del Labo-
48 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
ratorio San Pablo. Se semillaron las bandejas
flotantes con semilla peleteada de tabaco
Virginia variedad K 394.
El ensayo fue llevado a cabo en un diseño
de bloques completos al azar, con seis tra-
tamientos y tres repeticiones, dónde cada
unidad experimental estaba compuesta por
bandejas de 288 celdas cada una. El manejo
6.0 de las piletas fue llevado a cabo según proto-
6.4 colo EEA INTA (9), sin aplicaciones fitosanita-
6.2 rias de base, procurando mantener la recir-
culación continua del agua.
Se evaluaron las siguientes variables de res-
puesta:
1. Celda seca: indica problemas físicos del
sustrato (formulación).
2. Raíz espiralada: indica problemas de
conductividad eléctrica y pH del sustra-
to.
3. Malezas: indica problemas de manejo
del compost (pasteurización)
4. Altura al cogollo: indica uniformidad del
plantín al desmoche.
5. Diámetro de tallo: indica grosor del tallo
(resistencia del plantín al trasplante).
6. Altura de planta: indica apariencia del
plantín al desmoche.
7. Número de hojas al trasplante: indica
crecimiento y desarrollo del plantín.
8. Peso seco total de planta útil: la materia
seca total nos indica mayor masa vege-
tal por PGPM
9. Plantas útiles: plantas por bandeja aptas
para el trasplante.
Las variables que expresan cantidad, como
celda seca, raíz espiralada, malezas y plantas
útiles al transplante, se cuantificaron en por-
centajes.
Para las variables que expresan calidad de
plantín, se llevó a cabo el análisis de la va-
rianza (ANOVA) y para las comparaciones en-
tre tratamientos se utilizó el test de Tukey,
con un nivel de significancia de α= 0,05. El
software utilizado fue el Infostat.
RESULTADOS
Celda seca. Los sustratos en base a bagazo
100 % (3,47%) y tratado con vapor (3,93%)
junto a la turba comercial (3,01%), presenta-
ron valores de celdas secas similares entre si,
e inferiores al bagazo-cachaza 90:10 (5,78%)
y 95:5 (4,51%) (Figura 1).
Raíz espiralada. Se verificó que en los sustra-
tos ensayados el número de plantas con raíz
espiralada fue diferente. El bagazo-cachaza
90:10 presentó el menor valor (1,27%) con
respecto al resto de los sustratos (Figura 1).
Malezas. El sustrato bagazo 100 % tratado
con vapor no registró aparición de malezas,
mientras que los porcentajes en el resto de
los sustratos fueron relativamente bajos
(0,12% a 1,50%) (Figura 1).
Plantas útiles. El total de plantas útiles al
trasplante de todos los sustratos ensayados,
fue mayor al 94% en relación al número de
plantas posibles (Figura 1).
Altura de planta. Existen diferencias signifi-
cativas entre los sustratos (α=0,05). El sustra-
to bagazo-cachaza 90:10 y la turba comercial
presentaron una altura promedio significati-
vamente mayor con respecto a los otros sus-
tratos (Figura 2).
Diámetro de tallo. Existen diferencias signifi-
cativas entre los sustratos; el bagazo-cachaza
90:10 y testigo comercial presentan valores
superiores a bagazo 100% y bagazo-cachaza
95:5 (Figura 2).
Altura al cogollo. El bagazo-cachaza 90:10 y
la turba comercial no presentan diferencias
significativas entre sí (α=0,05), aunque se ob-
servan diferencias con respecto a los sustra-
tos bagazo 100%, bagazo tratado con vapor
y bagazo-cachaza 95: 5 (Figura 2).
Número de hojas. No existen diferencias sig-
nificativas entre los sustratos (α=0,05) (Figu-
ra 2).
Peso seco total. No hay diferencias signifi-
cativas (α=0,05) entre los sustratos bagazo
100%, bagazo-vapor, bagazo-cachaza 95:5 y
90:10. El peso seco total de los plantines de
la turba comercial es significativamente infe-
rior a los sustratos de bagazo (Figura 2).

100.0 96.5 96.1 95.5 97.0

94.2
90.0
80.0

70.0
60.0

50.0
40.0

30.0
20.0
8.7 6.8
10.0 3.5 3.9 4.1 4.5 5.8 3.0 3.4
0.3 0.0 1.5 1.3 1.3 0.1
0.0
Bagazo 100 % Bagazo 100 % Ba95%+Ca5% Ba90%+Ca10% Turba comercial
Vapor

Celdas secas Raiz espiralada Maleza Planta útiles

Figura 1. Plantas útiles de tabaco al trasplante según sustratos.

Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013 49

 16.0
14.0
12.0
b
10.0
a a
8.0
6.0 a a
a b
4.0 ab
a
2.0
b b
0.0
Bagazo 100 % Bagazo 100 %
Vapor
Altura de planta Diámetro de tallo
* Medias seguidas con una misma letra en cada columna no son significativamente diferentes (p≤0,005)
Figura 2. Altura de plantas, diámetro de tallo, altura al cogollo, número de hojas y peso seco total de plantas de tabaco, en
función de los tratamientos (sustratos).
DISCUSIÓN
Los trabajos de compostaje con residuos
derivados de la industria azucarera para la
formulación de sustratos para almácigos flo-
tantes en la obtención de plantines de taba-
co, representan una alternativa nueva, por
lo que es difícil encontrar antecedentes; por
lo tanto nuestra discusión se centrará en el
análisis de las variables evaluadas en esta
primera fase de experimentación.
La variable cualitativa peso seco total me-
dido en gramos es mayor en los sustratos
inoculados con PGPM que en el testigo co-
mercial en base a turba, lo cual coincide con
Carrizo de Bellone et al (3); sin embargo, se
desconoce si estas diferencias se deben a la
acción benéfica de los microorganismos pro-
motores del crecimiento vegetal usados, y/o
a la acción preventiva de los biocontrolado-
res, o bien a un aspecto de la nutrición.
La altura al cogollo es una variable cualitativa
que nos define la uniformidad del plantín al
trasplante, luego de haber realizado los des-
moches necesarios, que robustecen y engro-
san el cuello haciéndolos resistentes al estrés
de plantación. Son muchos los aspectos que
50 Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 3 Nº 4 - 2013
c c
c
a a a
bc bc c
a
a
ab b a
Ba95%+Ca5% Ba90%+Ca10% Turba comercial
Altura al cogollo Número de hojas Peso seco
podrían retrasar el desarrollo del plantín
(energía germinativa, nutrición, pH, conduc-
tividad eléctrica, compactación, condiciones
ambientales y mal manejo entre otros), por
lo que la diferencia encontrada del sustrato
bagazo-cachaza 90:10 se puede atribuir al
mayor porcentaje de cachaza que provee de
nitrógeno, fósforo y potasio.
Respecto a las variables celda seca, raíz espi-
ralada, malezas y plantas útiles, si bien existen
valores superiores de celda seca en el sustra-
to bagazo-cachaza 90:10 y raíz espiralada en
el bagazo-cachaza 95:5, los que en un primer
momento pudieron retrasar el desarrollo del
plantín, no implicaron una disminución sobre-
saliente del número de plantas útiles al tras-
plante. Estos resultados contrastan con los
valores encontrados en sustratos comerciales
en base a turba por Mayol y Molina (10)
Si bien se comprobaron diferencias significa-
tivas en algunas de las variables estudiadas
entre los sustratos, como peso seco total,
celda seca y raíz espiralada, esto no se com-
probó al considerar el desarrollo y cantidad
de plantas útiles al transplante. No obstan-
te, no encontrar diferencias significativas en
esta variable, nos está señalando que es fac-
tible y promisorio la utilización de sustratos
formulados en base a bagazo y cachaza prin-
cipalmente en la proporción 90:10 y 95:5.
Si bien se ha avanzado en la formulación de
sustratos para almácigos flotantes de tabaco,
es necesario continuar trabajando para me-
jorar el manejo del compostaje para corre-
gir la aparición de malezas, la conductividad
eléctrica y el pH durante el proceso formu-
lación, para disminuir el número de plantas
con raíz espiralada, y por último la porosi-
dad, para reducir el número de celdas secas
en algunos de los sustratos.
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