FACULTAD DE CIENCIAS – ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA

BIOQUÍMICA

TITULO: CICLO DE KREBS

1. DATOS GENERALES:

ESTUDIANTES: CÓDIGOS:

o Ximena Fray 983553

o Jerry Mena 983602
o Edison Ortiz 983590
o Richard Rojas 983615

DOCENTE: Ing. Cristina Calderón Tapia, MSc.

NIVEL/PARALELO: Sexto-A

PERIODO ACADÉMICO
ABRIL – AGOSTO 2018
 1. TEMA : CICLO KREBS
2. OBJETIVOS:
GENERAL:
ESPECÍFICOS:
3. INTRODUCCIÓN:
El ciclo de Krebs, llamado así gracias a su descubridor Hans Adolf Krebs (1900-1981), quien la
descubrió en 1937, también se denomina ciclo del ácido cítrico o ciclo de los ácidos tricarboxílicos.
Es una ruta metabólica que forma parte de lo que se conoce como la respiración celular típica de
los organismos aeróbicos. El ciclo de Krebs, es parte de la vía catabólica que realiza la oxidación
de las moléculas de acetil-CoA proveniente de monosacáridos, ácidos grasos y aminoácidos hasta
producir CO2, liberando gran cantidad de energía química, sobre todo en forma de poder reductor
que, gracias a la cadena transportadora de electrones y de la fosforilación oxidativa, será utilizada
en la síntesis de ATP. El acetil-CoA suele venir de la β-oxidación de los ácidos grasos o del
piruvato, a través de la descarboxilación oxidativa. El piruvato suele originarse como producto de
la glucólisis, o bien como consecuencia de la actuación de las transaminasas. Aparte de este papel
catabólico, el ciclo de Krebs también presenta una parte anabólica, ya que proporciona precursores
para muchas rutas biosintéticas de diferentes biomoléculas como, por ejemplo, la biosíntesis de
aminoácidos, aunque también suministra intermediarios para la biosíntesis de ácidos grasos o
azúcares. Por ello, se considera como una vía anfibólica, es decir, catabólica y anabólica al mismo
tiempo. [ Feduchi, Blasco, Romero, Yánez. (2010)].
El hecho de que varios intermediarios del ciclo de Krebs sean la base para formar diversas
biomoléculas tiene un papel importantísimo a nivel celular, ya que permite interconectar las
principales rutas metabólicas de los hidratos de carbono, de los lípidos y de los aminoácidos; de
tal forma que un tipo de biomolécula puede servir de precursor para otros tipos de biomoléculas,
lo cual supone optimizar los recursos disponibles por la célula y depender en menor medida de los
aportes exógenos, procedentes principalmente de la dieta. El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz
mitocondrial de las células eucariotas. Por ello, determinados tipos celulares carentes de
mitocondrias, como pueden ser los glóbulos rojos, no pueden realizar el ciclo de Krebs ni la cadena
transportadora de electrones, y dependen, casi exclusivamente, de la energía formada en la
glucólisis para cubrir sus necesidades energéticas, lo cual implica una mayor dependencia de los
niveles de glucosa. [T. M. Devlin (2004)].
El proceso es realizado por enzimas específicas que controlan una serie de reacciones de óxido
reducción en las que las moléculas combustibles son oxidadas y degradas, liberan protones que
son captados por coenzimas. La respiración celular consiste en varias fases y ocurren en distintas
estructuras celulares. La primera fase llamada glucólisis, ocurre en el citoplasma. La segunda fase
dependerá de la ausencia o presencia de O2, si hay ausencia la respiración será anaeróbica, esto
ocurre en el citoplasma. Si hay oxígeno la respiración será aeróbica y ocurre en las mitocondrias.
La fase de la glucólisis ocurre en el citoplasma de las células, durante esta fase la molécula de
glucosa compuesta con seis carbonos se transforma en varios compuestos para dividirse en dos
con tres carbonos cada uno (piruvato). En este proceso se consumen dos moléculas de ATP pero
se sintetizan cuatro, por lo que la ganancia es de dos ATP. En esta fase también se produce NADH,
esta molécula se utiliza después en el sistema de transporte de electrones. Las moléculas de
piruvato obtenidas en la glucólisis son transformadas en acetil coenzima A (Acetil-CoA) en el
citoplasma, después entran a la mitocondria liberando CO2. La molécula de acetil.CoA se divide
en dos, acetil y coenzima A, el acetil es transferido a una molécula de oxalacetato que pertenece
al ciclo de Krebs.En el ciclo de krebs se llevan a cabo una serie de reacciones en las que hidrógenos
y electrones son transferidos a moléculas NAD+ y FAD, para producir NADH y FADH2. Se
produce ATP y la molécula de oxalacetato se encuentra libre, lista para aceptar a otra molécula de
acetil-CoA. [C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.G. Ahern (2012)].

4. DESARROLLO:

4.1. Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs (también llamado ciclo del ácido cítrico o ciclo de los ácidos tricarboxílicos) es
una ruta metabólica, es decir, una sucesión de reacciones químicas, que forma parte de la
respiración celular en todas las células aeróbicas. En organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es
parte de la vía catabólica que realiza la oxidación de glúcidos, ácidos grasos y aminoácidos hasta
producir CO2, liberando energía en forma utilizable (poder reductor y GTP).
El metabolismo oxidativo de glúcidos, grasas y proteínas frecuentemente se divide en tres etapas,
de las cuales, el ciclo de Krebs supone la segunda. En la primera etapa, los carbonos de estas
macromoléculas dan lugar a moléculas de acetil-CoA de dos carbonos, e incluye las vías
catabólicas de aminoácidos (p. ej. desaminación oxidativa), la beta oxidación de ácidos grasos y
la glucólisis. La tercera etapa es la fosforilación oxidativa, en la cual el poder reductor (NADH y
FADH2) generado se emplea para la síntesis de ATP según la teoría del acomplamiento
quimiosmótico.
El ciclo de Krebs también proporciona precursores para muchas biomoléculas, como ciertos
aminoácidos. Por ello se considera una vía anfibólica, es decir, catabólica y anabólica al mismo
tiempo. El ciclo proporciona α-cetoglutarato y oxalacetato para la síntesis de glutamato y aspartato
respectivamente, entre otras moléculas fundamentales para la célula. (Mathews y Holde, 1999)

Figura 1. Visión panorámica de la convergencia de las vías catabólicas de glúcidos, aminoácidos

y ácidos grasos al ciclo de Krebs. Los hidrógenos presentes en esas moléculas son los que
abastecen a la cadena respiratoria desde el NAD o FAD, hasta combinarse con el oxígeno y formar
agua. Los carbonos se eliminan como CO2. (Mathews y Holde, 1999)

4.2. El piruvato genera la principal molécula abastecedora del ciclo: la acetil

coenzima A
a. La reacción de oxidación - decarboxilación del piruvato es el nexo entre la glucólisis y el ciclo
de Krebs. Esta reacción irreversible es catalizada por un complejo enzimático (piruvato
deshidrogenasa) localizado en la matriz mitocondrial de eucariotas, y en el citosol de procariotas
(figura 2).
b. El piruvato pierde el grupo carboxilo como CO2, y los dos carbonos restantes unidos a la CoA
conforman la acetil-CoA (figura 2). En la reacción se reduce un NAD a NADH.H que a su vez
cede los H a los otros transportadores de cadena respiratoria, con la consecuente formación de 3
ATP. (Monza, Doldan, Signorelli)

Figura 2. Reacción resumen de la descarboxilación oxidativa del piruvato. PDH (piruvato

deshidrogenada). (Monza, Doldan, Signorelli)
4.3. Reacciones del Ciclo de Krebs
El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz mitocondrial eucariotas.

Figura 3. Ciclo de Krebs. (Monza, Doldan, Signorelli)

El acetil-CoA (Acetil Coenzima A) es el principal precursor del ciclo. El ácido cítrico (6 carbonos)
o citrato se regenera en cada ciclo por condensación de un acetil-CoA (2 carbonos) con una
molécula de oxaloacetato (4 carbonos). El citrato produce en cada ciclo una molécula de
oxaloacetato y dos CO2, por lo que el balance neto del ciclo es:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O → CoA-SH + 3 (NADH + H+) + FADH2 + GTP + 2 CO2

Los dos carbonos del Acetil-CoA son oxidados a CO2, y la energía que estaba acumulada es
liberada en forma de energía química:
GTP y poder reductor (electrones de alto potencial): NADH y FADH2. NADH y FADH2 son
coenzimas (moléculas que se unen a enzimas) capaces de acumular la energía en forma de poder
reductor para su conversión en energía química en la fosforilación oxidativa.
El FADH2 de la succinato deshidrogenasa, al no poder desprenderse de la enzima, debe oxidarse
nuevamente in situ. El FADH2 cede sus dos hidrógenos a la ubiquinona (coenzima Q), que se
reduce a ubiquinol (QH2) y abandona la enzima. (Monza, Doldan, Signorelli)

Reacciones:
a. Reacción 1: Condensación del oxalacetato con la acetil CoA
La enzima citrato sintasa condensa a la acetil-CoA (2C) con el oxalacetato (4C) para dar una
molécula de citrato (6C). Como consecuencia de esta condensación se libera la coenzima A
(HSCoA). La reacción es fuertemente exergónica: es irreversible. (Mathews y Holde, 1999)

Figura 4. Reaccion de condensacion del oxalacetato con la acetil CoA. (Monza, Doldan,
Signorelli)
b. Reacción 2: Isomerización del citrato a isocitrato
La isomerización del citrato en isocitrato ocurre por dos reacciones, que se resumen en una. La
aconitasa cataliza la isomerización del citraro a isocitrato, por la formación de aconitato, la enzima
cataliza también la reacción inversa, pero en el ciclo de Krebs la reacción es unidireccional a causa
de la ley de acción de masa: las concentraciones (en condición estándar) de citrato (91%), del
intermediario cis-aconitato (3%) y de isocitrato (6%), empujan decididamente la reacción hacia la
producción de isocitrato.
En el sitio activo de la enzima esta presente un cluster hierro-azufre que, junto a algunos residuos
de aminoácidos polares, liga el sustrato. En concreto, la unión al sustrato se asegura por la
presencia de un resto de serina, de arginina, de histidina y de aspartato, que permiten solo la unión
estereospecifica del citrato 1R, 2S, rechazando la forma opuesta. (Mathews y Holde, 1999)
Figura 5. Reaccion de isomerización del citrato al isocitrato. (Monza, Doldan, Signorelli)

c. Reacción 3: Oxidación y decarboxilación del isocitrato

El isocitrato es sustrato de la isocitrato deshidrogenasa, enzima que tiene como cofactor un NAD,
que forma parte de la cadena respiratoria. En la reacción 3 se resumen dos reacciones a partir de
las cuales el isocitrato forma α-cetoglutarato (5C). Para lograr ese producto ocurre una
decarboxilación, es decir la liberación de una molécula de CO2, y la reducción de un NAD que
permite la formación de 3 ATP. El grupo hidroxilo del isocitrato es oxidado hasta un grupo
carbonilo, con la correspondiente perdida de dos atomos de hidrogena y un par electrones; par que
es “recibido” y transportado por la coenzima NAD+, por medio de la acción de la enzima “isocitrato
hidrogenasa”. La molecula de NAD se reduce por el atomo de hidrogeno y el grupo hidroxilo, e
NAD se une al atomo de hidrogeno y se lleva el atomo de hidrogeno dejando un grupo inestable,
en consecuencia se debilita el enlace con el grupo carbonil central y la molecula, pierde este grupo
en forma de CO2. El producto obtenido es el acetoglutarato, también llamado “oxalosuccinato”
que es una molecula con cinco (5) atomos de carbono. (Mathews y Holde, 1999)
Figura 6. Reaccion de oxidación y decarboxilacion del isocitrato. (Monza, Doldan, Signorelli)

Enzimas: La enzima isocitrato deshidrogenasa (IDH) es una enzima importante del metabolismo
de los carbohidratos participante en el ciclo de Krebs que cataliza la descarboxilacion oxidativa
del isocitrato en 2-oxoglutarato. La IDH es dependiente del NAD+ o NADP+. Inicialmente, la
enzima cataliza la oxidación del isocitrato a oxalsuccinato, lo que genera una molécula de NADH
a partir de NAD+.
Función del NAD+: Su función principal es el intercambio de electrones e hidrogeniones en la
producción de energía de todas las células. Es una coenzima encontrada en células vivas y
compuestas por un dinucleotido, ya que esta formada por dos nucleótidos unidos a través de sus
grupos fosfatos. (Mathews y Holde, 1999)

d. Reacción 4: El α-cetoglutarato se transforma en succinil-CoA

Este paso implica la segunda decarboxilación oxidativa, catalizada por la α-cetoglutarato
deshidrogenasa, que lleva a la formación de succinil-CoA (4C). El NAD es la coenzima de la
deshidrogenasa, de manera que se formarán 3 ATP como consecuencia de la actividad de cadena
respiratoria. (Mathews y Holde, 1999)
Figura 7. Reaccion del α-cetoglutarato se transforma en succinil-CoA. (Monza, Doldan,
Signorelli)

e. Reacción 5: La succinil-CoA rinde succinato y GTP

La succinil-CoA, es un tioéster de alta energía con un ∆G°′ de hidrólisis de -33.5 KJ.mol-1
aproximadamente. La energía liberada por la ruptura de ese enlace se utiliza para generar un enlace
fosfoanhidro entre un fosfato y un GDP para dar 1GTP por fosforilación a nivel de sustrato. En la
reacción se libera HSCoA. (Mathews y Holde, 1999)
El GTP se puede convertir en ATP según la siguiente reacción; para lo cual se usa un nucleótido
y enzima denominada difosfoquinasa:
GTP + ADP ↔ GDP + ATP ∆G°′ = 0 KJ.mol-1

Figura 8. Reaccion de la succinil-CoA rinde succinato y GTP. (Monza, Doldan, Signorelli)

 f. Reacción 6: El succinato se transforma en fumarato
El succinato es oxidado a fumarato por la succinado deshidrogenasa, enzima que tiene como
cofactor al FAD: se producen 2ATP en la cadena respiratoria. La enzima usa FAD porque la
energía asociada a la reacción no es suficiente para reducir al NAD.
El complejo enzimático de la succinato deshidrogenasa es el único del ciclo que está asociado a la
membrana mitocondrial de eucariotas, mas no en la matriz mitrocondrial y en la membrana
plasmática de procariotas. Esta oxidación implica la formación de un doble enlace, proceso que
genera electrones de alta energía, pero de energía menor que los que se requieren para reducir al
NAD+, por ello esta enzima emplea como cofactor al FAD para obtener FADH2, ya que la enzima
se halla asociada a la membrana interna mitocondrial, los electrones obtenidos pasan directamente
a la cadena respiratoria, proceso metabolico para la obtención de ATP, como la mayoría de
enzimas es especifica solo cataliza la formación de trans-fumarato y no el cis-fumarato. (Mathews
y Holde, 1999)

Figura 9. Reaccion del succinato se transforma en fumarato. (Monza, Doldan, Signorelli)

g. Reacción 7: El fumarato se hidrata y genera malato

La fumarasa cataliza la adición de agua, es decir la hidratación del fumarato. El producto de la
reacción es el malato. (Mathews y Holde, 1999)
Figura 10. Reaccion del fumarato se hidrata y genera malato. (Monza, Doldan, Signorelli)

h. Reacción 8: El malato se oxida a oxalacetato

Dada la naturaleza cíclica de la vía, las reacciones en su conjunto conducen a la regeneración del
oxalacetato. La malato deshidrogenasa cataliza la oxidación del malato a oxalacetato, con la
reducción de un NAD: se forman 3 ATP en la cadena respiratoria. (Mathews y Holde, 1999)

Figura 11. Reaccion del malato se oxida a oxalacetato. (Monza, Doldan, Signorelli)
Figura 12. Ciclo de Krebs. (Monza, Doldan, Signorelli)

4.4. Regulación del Ciclo de Krebs

La regulación del ciclo hace posible la producción de moléculas de acuerdo a las necesidades
celulares, y asegura que no ocurra sobre o sub producción en un momento dado. La regulación del
ciclo se da en diferentes puntos, porque puede alimentarse o ser abastecido a través de cualquiera
de sus intermediarios. La regulación es compleja en comparación con la de vías catabólicas como
la glucólisis, y se considerarán situaciones de regulación relacionadas al estado energético celular.
 La regulación de las enzimas es por modulación alostérica, por modificación covalente y
por acumulación de productos. La “lógica” de la regulación se rige principalmente por la
relación ATP/ADP y NADH.H/NAD, así como por las concentraciones de algunos
intermediarios del ciclo.
 Las relaciones entre ATP/ADP y NADH.H/NAD están relacionadas entre sí a través de la
fosforilación oxidativa que ocurre en la cadena respiratoria, y ambas son señales del estado
energético de la célula. (Curi, Lagranha, Rodrigues, Pithon-Curi,Lancha, Pellegrinotti,
2003)
A continuación se presentan tres situaciones regulatorias, relacionadas a la energía celular
momentánea.

Situación 1: regulación de la principal reacción abastecedora del ciclo

El complejo piruvato deshidrogenasa (PDH) de vertebrados, que cataliza la transformación de
piruvato en acetilCoA, es un punto de regulación clave porque la acetilCoA es la principal
molécula abastecedora del ciclo. La regulación se logra por dos mecanismos: alosterismo y
modificación covalente de la enzima.

Figura 13. Esquema de la regulación de la actividad de la piruvato deshidrogenasa (PDH) a través

de la fosforilación/desfosforilación de serinas de la subunidad E1 de esta enzima. La quinasa es
inhibida alostéricamente por el ATP, de manera que cuando los niveles de este son elevados el
complejo PDH es inactivado por fosforilación. Cuando desciende la concentración de ATP celular,
la actividad quinasa decrece y la actividad fosfatasa se incrementa y elimina el fosfato de la
subunidad E1 convirtiendo a la enzima en su estado activo. (Lopez, Ramos, Villarroel, Montaño,
Hernandez, 2007)

Situación 2: regulación de la enzima citrato sintasa

La actividad de la enzima citrato sintasa (reacción 1, figura 4) está regulada por disponibilidad de
sus sustratos: la acetil-CoA y el oxalacetato, cuya concentración varía y determina la velocidad de
formación de citrato. El ATP es un modulador alostérico negativo de la enzima citrato sintasa, que
aumenta la KM de la enzima por el acetil CoA. Así, cuanto mayor sea la concentración de ATP
menor será la actividad de la enzima. Lo mismo produce el aumento de la concentración de
NADH.H
Situación 3: regulación de las deshidrogenasas NAD
Los pasos catalizados por las deshidrogenadas NAD dependientes (reacciones 3, 4 y 8) regulan la
velocidad del ciclo según la relación NADH.H/NAD. Cuando la concentración de NADH.H
aumenta la actividad de las deshidrogenasas desciende. El ATP tiene el mismo efecto inhibidor
sobre las enzimas, mientras el ADP es un activador. (Lopez, Ramos, Villarroel, Montaño,
Hernandez, 2007)

Figura 14. Reacciones y enzimas participantes en el ciclo de Krebs. (Lopez, Ramos, Villarroel,
Montaño, Hernandez, 2007)
Rendimiento del proceso:
 El ciclo consume netamente 1 acetil-CoA y produce 2 CO2. También consume 3 NAD+ y
1 FAD, produciendo 3 NADH + 3 H+ y 1 FADH2.
 El rendimiento de un ciclo es (por cada molécula de piruvato): 1 GTP, 3 NADH, 1 FADH2,
2CO2.
 Cada NADH, cuando se oxide en la cadena respiratoria, originará 2,5 moléculas de ATP
(3 x 2,5 = 7,5), mientras que el FADH2 dará lugar a 1,5 ATP. Por tanto:
7,5 + 1,5 + 1 GTP = 10 ATP por cada acetil-CoA que ingresa en el ciclo de Krebs.
 Cada molécula de glucosa produce (vía glucólisis) dos moléculas de piruvato, que a su vez
producen dos acetil-CoA, por lo que por cada molécula de glucosa en el ciclo de Krebs se
produce: 4CO2, 2 GTP, 6 NADH + 6H + 2 FADH2; total 36 ATP. (Curi, Lagranha,
Rodrigues, Pithon-Curi,Lancha, Pellegrinotti, 2003)

Figura 15. Eficiencia en el ciclo de Krebs. (Lopez, Ramos, Villarroel, Montaño, Hernandez,
2007)
 5. CONCLUSIONES:

6. BIBLIOGRAFIA:
 Mathews y Van Holde. (1999). Bioquimica. McGraw Hill – Interamericana.pp,356-370.
 J. Monza, S. Doldán y S. Signorelli. Recuperado el 08/07/2018 de:
http://cleuadistancia.cleu.edu.mx/cleu/flash/PAG,24/lecturas/estudios/CICLO%20DE%2
0KREBS.pdf
 Curi, R., Lagranha, C. J., Rodrigues Jr, J. G., Pithon-Curi, T. C., Lancha Jr, A. H., &
Pellegrinotti, I. L. (2003). Ciclo de Krebs como fator limitante na utilização de ácidos
graxos durante o exercício aeróbico. Arq Bras Endocrinol Metab, 47(2),pp 135-143.
 López, M. G., Ramos, L., Villarroel, O., Montaño, N., & Hernández, Y. (2007).
Experiencia en la Construcción de un Objeto de Aprendizaje sobre el Ciclo de Krebs para
favorecer el proceso de Enseñanza Aprendizaje en Bioquímica. In SPDECE.pp 145-150.
 Feduchi, Blasco, Romero, Yánez. (2010) Bioquímica. Conceptos esenciales. Editorial
Médica Panamericana.pp 108-135.
 T. M. Devlin (2004) Bioquímica. Libro de Texto con Aplicaciones Clínicas. 4ª edición.
Editorial Reverté S.A. pp,179-194.
 C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.G. Ahern (2012) Bioquímica. 3ª Edición. Pearson
Educación. pp,784-810.
7. ANEXOS: