INTRODUCCIÓN

Los bioindicadores de contaminación son sistemas biológicos que responden a los tóxicos ambientales con cambios específicos y
más o menos duraderos. Complementan y superan la medición directa del tóxico en el ambiente por dos motivos: (1) guardan
memoria de la emisión tóxica, ya que aunque ésta sea de muy corta duración, los cambios producidos en el bioindicador son
duraderos; y (2) porque muchos bioindicadores son también bioconcentradores, lo que permite detectar el tóxico en ellos con más
facilidad que en el medio, y aun después que el tóxico haya desaparecido del ambiente.

El presente informe de laboratorio se basa en la evaluación de la calidad del agua con distintos productos, por ello se evaluó la
toxicidad de las muestras utilizando lejía, detergente, bicloruro de mercurio y pinesol para observar a los alevinos (Oncorhynchus
mykiss) y su reacción durante el paso del tiempo. Esto reafirma la necesidad del uso de técnicas como esta para prever el
impacto de agentes químicos sobre los organismos acuáticos y tomar conciencia sobre los daños que ocasionamos al medio
ambiente.

El grupo
I. OBJETIVOS:

GENERAL:

 Utilizar a la trucha (Oncorhynchus mykiss) como bioindicador de la calidad del agua en muestras con HgCl2,
pinesol, detergente y lejía.

ESPECÍFICOS:

 Observar la reacción de los alevinos de truchas, cuando se encuentran expuestos a las soluciones ya
mencionadas, durante un tiempo determinado.
 Determinar la muestra de agua más toxica, de acuerdo al tiempo de muerte de la trucha y el efecto que se produzca
en el alevino.
 Generar conciencia ambiental como resultados de las observaciones obtenidas en las distintas pruebas.
II. FUNDAMENTO TEORICO:

2.1. ECOSISTEMAS ACUÁTICOS.

Los ecosistemas acuáticos son el centro de interacción de un gran número de factores bióticos y abióticos que
pueden ser modificados drásticamente. Estos ecosistemas incluyen las aguas de los océanos (ecosistemas
marinos) y las aguas continentales dulces (ríos, lagos, pantanos y demás fuentes acuáticas) o saladas. Los
ecosistemas de agua pueden considerarse entre los más importantes de la naturaleza y su existencia depende
totalmente del régimen que tengan.

Acerca del agua dulce de los ríos, es preciso tener en cuenta que presenta una enorme variedad de
composición. Como esta composición química depende, en primer lugar, de lo que el agua pueda disolver del
suelo por el que discurre, o de los lugares a donde se dirige, es el suelo lo que determina la composición química
del agua. (BARROS SANTIAGO 2008).

2.2. BIOENSAYOS:
Los bioensayos sirven para evaluar los efectos nocivos que producen sobre los seres vivos diferentes tipos de
agentes externos que estén presentes en el ambiente. Así estos permiten evaluar, entre otras cosas, la toxicidad
de sustancias químicas aisladas o mezclas de estas que estén presentes en el ambiente (agua, suelo o aire) en
niveles dañinos. Permiten así, determinar por ejemplo, si la contaminación de un río es potencialmente capaz de
producir un daño a los seres vivos que estén en contacto con sus aguas. (Alvarez 1996)
2.3. TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus mykiss)
Trucha es el nombre común dado a varias especies de peces de agua dulce pertenecientes a la familia del
salmón, Salmonidae. La trucha arcoíris o cabeza de Acero (Oncorhynchus mykiss) presenta cuerpo alargado,
fusiforme y cabeza que termina en una boca grande puntiaguda hendida hacia el nivel de los ojos y con una fila de
dientes fuertes en cada una de las mandíbulas que le permiten aprisionar las presa. Oncorhynchus significa nariz
ganchuda, característica que se manifiesta con mayor énfasis en los machos en la época de reproducción .
(BARROS SANTIAGO 2008)

Tabla 1. Generalidades de la Trucha Arcoíris (Oncorhynchus mykiss)

NOMBRE CIENTÍFICO Oncorhynchus mykiss

FAMILIA Salmonidae/Salmoninae
ORDEN Salmoniformes
CLASE Actinopterígios (peces con aletas radiadas)
PESO MÁX 10 kg
LONGITUD MÁX 70 cm
LONGEVIDAD 10 años
Fuente: Investigación de campo. Escuela José María Morelos. Michoacán, México. Año 2002.

Tabla 2. Características de las aguas apropiadas para Oncorhynchus mykiss.

 Fuente:GUITIERRES LOPEZ, Samir. Investigación de
campo Esc. Jose Maria Morelos, Michoacan. 2002.

2.4. PRUEBAS DE TOXICIDAD

El propósito de las pruebas de toxicidad es obtener información útil para lograr la protección de los organismos
acuáticos de una especie determinada o, de todas las comunidades que integran la biota de un ecosistema, de
los peligros ocasionados por las substancias peligrosas arrojadas al ambiente por el hombre. En el caso de
peces, cuando el tóxico se encuentra disuelto en el agua, en lugar de la dosis se reporta la concentración del
 tóxico en el agua y, esta es la variable contra la cual se gráfica la respuesta tóxica. A las exposiciones a
concentraciones que producen la muerte en 96 horas o menos se les denominan exposiciones agudas, mientras
que las exposiciones de mayor duración a concentraciones subletales se les denomina exposiciones crónicas. La
duración de estas exposiciones crónicas experimentales puede ser por un período del desarrollo, ser vitalicias o
extenderse por períodos de más de una generación.

Desde el punto de vista de la protección del ambiente, el parámetro que se trata de determinar en los estudios de
toxicología acuática es la concentración del tóxico que se puede permitir en un cuerpo de agua, sin que cause
daño significativo a la biota residente o a una especie determinada de ese consorcio. Este parámetro
normalmente se determina en exposiciones crónicas y es la base para el establecimiento de las normas o
criterios de calidad del agua. (2010)

2.5. COMPUESTOS UTILIZADOS

2.5.1. AGUA DESTILADA

Este líquido se consigue de forma artificial a través de una destiladora, que produce la evaporación del
agua natural para después enfriar el vapor para convertirlo en agua 100 % pura, exenta de sales, químicos
o microorganismos, que en exceso son perjudiciales para el organismo humano, este líquido se utiliza para
 el uso de la plancha, para el radiador del coche o el acumulador de la batería ya que no produce sarro.
Como medida higiénica, también se utiliza en los hospitales y laboratorios.(Waterline 2014)

2.5.2. BICLORURO DE MERCURIO (HgCl2)

Es el compuesto químico de mercurio y cloro con la fórmula HgCl2. Es un reactivo cristalino blanco sólido y
un compuesto molecular. Fue utilizado como un tratamiento para la sífilis, pero ahora ya no se utiliza con
fines medicinales debido a la toxicidad del mercurio y la disponibilidad de tratamientos mejores. Los
síntomas que presentan son: Dificultad respiratoria, Disminución de la diuresis, Diarrea (sanguinolenta),
Babeo, Vómitos, etc. (Wikipedia 2012).

2.5.3. DESINFECTANTE PINESOL

Pine-Sol es una marca registrada de Clorox para una línea de productos de limpieza para el hogar, que se
utiliza para limpiar la grasa y las manchas pesados del suelo. La composición química es 8-12% de aceite
de pino , 7.3% alquil etoxilatos de alcohol , el 1-5% de petróleo de sodio sulfonato y 1- 5% de alcohol
isopropílico. (Wikipedia 2014)

2.5.4. LEJIA
La lejía (conocido como cloro, límpido o lavandina) es el nombre utilizado para una variedad de sustancias
que en disolución acuosa, son un fuerte oxidante, frecuentemente utilizada como desinfectante, como
 decolorante y en general como solvente de materia orgánica. El elemento cloro es la base para los
blanqueadores más comúnmente utilizados, por ejemplo, la solución de hipoclorito de sodio (NaClO).
2.5.5. DETERGENTE
Químicamente es una sal alcalina de un ácido graso de cadena larga. Los detergentes son una mezcla de
muchas sustancias. El componente activo de un detergente es similar al de un jabón, su molécula tiene
también una larga cadena lipófila y una terminación hidrófila. Suele ser un producto sintético normalmente
derivado del petróleo.

El poder contaminante de los detergentes se manifiesta en los vegetales acuáticos inhibiendo el proceso
de la fotosíntesis originando la muerte de la flora y la fauna acuáticas. A los peces les produce lesiones en
las branquias, dificultándoles la respiración y provocándoles la muerte.
¿Cómo funciona un detergente?
Cuando se añade detergente al agua, sus cabezas hidrofílicas se proyectan hacia el agua, mientras que
las largas cadenas hidrofóbicas se unen a las partículas de grasa y permanecen en el interior (escapando
del agua). De esa forma, se forman grupos circulares llamados micelas, con el material graso absorbido
dentro y atrapado. Se origina entonces una emulsión de aceite en agua, lo cual significa que las partículas
de aceite quedan suspendidas en el agua y son liberadas de la ropa. Con el aclarado, la emulsión es
eliminada. En resumen, el detergente limpia actuando como emulsificante, permitiendo que el aceite y el
agua se mezclen, eliminándose las manchas durante el aclarado. Hay más aspectos envueltos en este
proceso, pero ésta es la idea general. (Democritus 2011)
III. MATERIALES Y REACTIVOS:

Muestra.
 Truchas.

Materiales.
 Probeta.
 Matraz de fondo redondo.
 Botella de polietileno (1Lt).
 Vaso de precipitado.
 Pinza.
 Pipeta y propipeta.
 Piseta.

Reactivos
 Agua destilada.
 Pinesol.
 Lejia Clorox.
 Detergente Opal.
  Bicloruro de Mercurio (HgCl2).

IV. PROCEDIMIENTO Y EXPERIMENTACION

Metodología.

La técnica usada para lograr los objetivos planteados fue muestra- experimental con los alevinos (truchas) de la
piscicultura del Ministerio, con un peso aproximado de 5-8 g y una longitud estándar de 4-5 cm. Se recolectaron
muestras sanos, que fueron trasladados en un envase descartable de 1 litros hasta el laboratorio de Biotecnología
Ambienta y debido a que el material en el que fueron transportados no fue el adecuado por falta de oxígeno algunas de
estas llegaron dañadas; Las truchas mencionadas fueron evaluadas en base a su comportamiento que manifestaban
ante cada uno de los reactivos usados.

1. Preparación de las soluciones antes de la prueba.

 reactivo Concentración Descripción del reactivo
(%)

HgCl2 0.2 Es un tipo de sal de mercurio y es una forma muy

tóxica de este elemento. Los síntomas que presentan
son: Dificultad respiratoria, Disminución de la
diuresis, Alteraciones en el sistema nervioso, Diarrea
(sanguinolenta), Babeo, Vómitos, etc.

Detergente 0.5 Tienen en su molécula un extremo iónico soluble

en agua y otro extremo no polar que desplaza a
los aceites. Los detergentes forman sulfatos de
calcio y de magnesio solubles en agua, por lo que
no forman coágulos al usarlos con aguas duras.

Pinesol 1.5 Es un desinfectante con propiedades germicidas y

bactericidas. Deben su acción a los ingredientes
activos que contienen. Entre los principales
tenemos: El fenol, cresol, aceite de pino, Alcohol
isopropilico, etc. Los ingredientes activos son
complementados emulsificantes y otros
ingredientes inertes como el agua, colorantes,
fijadores, etc.

Lejía 4.8 Es un producto corrosivo, Su acción corrosiva

puede dañar el acero inoxidable si se emplea en
concentraciones elevadas y por largo tiempo.
 También malogra la ropa si se utiliza como
blanqueador de manera muy frecuente,
llegando a convertir el color blanco en grisáceo.

2. Preparación de los contaminantes en disolución con agua destilada y la Bioensayo con los Alevinos (truchas).

 HgCl2

1. Rotular el matraz de fondo redondo.

2. Verter 500 mL de agua destilada al matraz de fondo redondo (cantidad acordada por el docente quien realizo los
cálculos de cantidades) Con 0.5 gr del reactivo y disolverlo.
3. Tomar al alevino y colocarla dentro de la disolución y observar su comportamiento.
 Pinesol.
1. Verter 10mL de pinesol matraz de fondo redondo que deberá estar debidamente rotulada. Seguidamente agregar
500 mL de agua destilada.

2. Colocar a un alevino dentro de la disolución y observar su comportamiento.

 Lejía

1. Verter 5 ml de lejía al matraz de fondo redondo que deberá estar debidamente rotulada y añadir 1L de agua
destilada.
2. Colocar a un alevino dentro de la disolución y observar su comportamiento.
 Detergente Opal.
1. Verter 2.5 gramos de detergente seguidamente agregar 500 mL de agua destilada al matraz de fondo redondo
que deberá estar debidamente rotulada. Finalmente disolver la mezcla lavando el recipiente de detergente por
lo menos unas 3 veces.

2. Colocar a un alevino dentro de la disolución y observar su comportamiento.

 V. RESULTADOS

Para el desarrollo y análisis de las pruebas de toxicidad con los diferentes agentes tóxicos, se adoptó el método del Bioensayo. A
continuación se expresan los resultados obtenidos en la práctica de laboratorio.

Cuadro 1. Resultados de la prueba de toxicidad de los alevinos de Trucha

 Tiempo de Imagen
Dosis o
N° Compuestos Observación muerte
concentración
(min.)
1 -El alevino se desespera
-pierde equilibrio,
hinchazón de la barriga,
carencia de oxígeno,
vomita, daño al sistema
digestivo.
Lejia 5mL a 4.8% 2’50’’
2 - El mercurio afecta el
sistema nervioso central
del alevino y causa su
desequilibrio y
descoordinación.
Bicloruro de -A medida que transcurre
Mercurio el tiempo el alevino
0.5 gr al 0.2% 2’2’’
(control pierde su color y se torna
positivo). claro.
3

- El alevino se arquea, los

ojos se muestran
saltones y sufre una
hemorragia en las
Pinesol. 10 ml al 1.5% agallas. 30’’

-El alevino a excretado

4 - El detergente actúa
sobre la mucosa
protectora
desprendiéndola de su
cuerpo.

- Las agallas se ponen

coloradas.
Detergente. 2.5 gr al 0.5% 1’50’’
 VI. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 En la práctica se consideró dos controles, el Agua de rio (de donde se

sacaron los alevinos) como control no variable porque en él no se
manifiestan ningún efecto o alteración en el comportamiento y aspecto
físico de los alvinos; y el Bicloruro de Mercurio como control positivo
debido a que este si presenta efectos perjudiciales en los seres vivos
(alvinos), por más cristalina que sea.
 En el Bicloruro de mercurio la muerte es más lenta. El mercurio es un
neurotóxico que afecta al sistema nervioso central y dificulta la
respiración, razón por la cual muere asfixiado.
 En el Pinesol, por ser un desinfectante está compuesto de sustancias
toxicas que provocan la disminución de disponibilidad del oxígeno en el
agua y lesiones internas en el alevino, provocándole hemorragia para
posteriormente fallecer.
 Las altas concentraciones de nitrato y fosfato en la composición del
detergente hacen que remueva la capa mucosa protectora del alevino,
secándola completamente, dejándola propensa a una muerte segura.
 VII. CONCLUSIONES

 Se demostró que el alevino, es un bioindicador de la calidad del agua,

debido a la sensibilidad que presenta frente a las diferentes sustancias
que alteran la composición natural del agua a las que es sometida.
 Se pudo determinar que el pinesol es el compuesto más toxico debido a
que el alevino muere de manera casi inmediata.
 Al realizar este bioensayo hemos podido comprobar que las aguas con
sustancias toxicas no tratadas pueden generar daños letales en los
ecosistemas acuáticos.
VIII. BIBLIOGRAFIA

 julio de 2010.
http://www.fcm.uncu.edu.ar/jornadas2010/index.php/articulos/view/96
(último acceso: 14 de octubre de 2014).

 Dic. de 2010. http://pmep.cce.cornell.edu/profiles/extoxnet/24d-

captan/acephate-ext.htm.

 Ene. de 2011. http://foro.acuarios.es/ecosistema/3785-ph-kh-gh-que-

siginifican.html.

 Alvarez, Gerardo Suarez. METODOLOGIA DE BIOENSAYOS Y

EFECTOS TOXICOS DE ALGUNOS CONTAMINANTES SOBRE
ORGANISMOS DE INTERES ECOLOGICO PESQUERO. La Habana,
1996.

 BARROS SANTIAGO, Carmen Patricia y Vilma Enrique GAMEZ ROJAS.

Determinacionla concentracion letal media (Cl 50-60) del glifosato
roundupr 747SG, por medio de bioensayos utilizando alvinos de Trucha
arco iris (Oncorhynchus mykiss). Bogotá: Universidad de la Salle, 2008.

 Democritus. Jul de 2011.

http://democritus.me/2007/08/04/%C2%BFcomo-funciona-un-
detergente/.

 Wikipedia. Feb de 2012. http://en.wikipedia.org/wiki/Mercury(II)_chloride.

 Wikipedia. Jul de 2014. http://en.wikipedia.org/wiki/Pine-Sol.

 Wikipedia. Ene de 2005. http://es.wikipedia.org/wiki/Relave.