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Muestras Agricolas y Pecuarias PDF
Muestras Agricolas y Pecuarias PDF
GOBERNACIÓN DE ANTIOQUIA
CONVENIO ICA- SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL
MEDELLÍN, 2009
La propiedad intelectual de este material pertenece a la
Gobernación de Antioquia, Secretaría de Agricultura y
Desarrollo Rural. Prohibida la reproducción total o parcial,
por cualquier medio o con cualquier propósito, sin la
autorización escrita de estos.
Financiación de la publicación:
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Colaboradores
Funcionarios Instituto Colombiano Agropecuario ICA
Área Pecuaria
Fotografías
Todas las fotografías utilizadas en la impresión de esta cartilla,
fueron aportadas por funcionarios de la Secretaría de Agricultura
y Desarrollo Rural de Antioquia
Medellín, 2009.
TOMA, CONSERVACIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS
PECUARIAS Y AGRÍCOLAS AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO
Preparado por:
Gobernación de Antioquia
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Medellín, 2009
ÍNDICE
1. Diagnóstico pecuario_____________________________________________ 13
1.1 Factores básicos en la toma y envío de muestras al centro de diagnóstico_________ 13
1.1.2 Calidad de la muestra________________________________________________ 13
1.1.3 Cantidad de la muestra_ _____________________________________________ 13
1.1.4 Tiempo en la ruta crítica de la muestra___________________________________ 14
2. Recomendaciones generales para el envío de
muestras al centro de diagnóstico_________________________________ 16
2.1 Pruebas diagnósticas solicitadas al centro de diagnóstico_____________________ 17
2.2 Sugerencias para toma de muestras de sangre_____________________________ 18
2.2.1 Sugerencias para hematología_________________________________________ 18
2.2.2 Anticoagulantes mas usados_ _________________________________________ 18
2.2.3 Sugerencias para química sanguínea, suero o plasma________________________ 19
2.3 Sugerencias en toma y envío de muestras para bacteriología_ _________________ 20
2.3.1 Secrecion de oidos__________________________________________________ 20
2.3.2 Secreciones oculares_ _______________________________________________ 21
2.3.3 Secreciones vaginales _______________________________________________ 21
2.3.4 Líquido cefalorraquídeo ______________________________________________ 21
2.3.5 Liquidos diferentes al cefalorraquídeo____________________________________ 22
2.3.6 Hemocultivos______________________________________________________ 22
2.3.7 Urocultivos_ ______________________________________________________ 23
2.3.8 Sugerencias en cultivo bacteriológico de leches_ ___________________________ 23
2.4 Recuento de celulas somáticas en leche (rcs)_ _____________________________ 24
2.5 Sugerencias en la toma y envío de muestras para un estudio parasitológico_______ 24
2.5.1 Coprológicos_ _____________________________________________________ 24
2.5.2 Hemoparasitos – parásitos en sangre____________________________________ 25
2.5.3 Ectoparasitos - parásitos externos______________________________________ 26
2.5.4 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico en pelos__________________ 27
2.5.5 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico_ _______________________ 27
2.6 Recomendaciones para el estudio de patología_____________________________ 28
2.7 Recomendaciones para examen de citologías______________________________ 30
2.8 Procedimiento frente a una patología (enfermedad) en un predio_______________ 30
2.9 Equipo básico en oficinas de sanidad para la toma de muestras pecuarias_________ 32
3. Diagnóstico agrícola _____________________________________________ 44
3.1 Factores básicos en la toma y envío de muestras agrícolas_ ___________________ 45
3.1.1 Calidad de la muestra________________________________________________ 45
3.1.2 Cantidad de la muestra ______________________________________________ 46
3.1.3 Tiempo en la ruta crítica de la muestra___________________________________ 46 5
3.2 Toma de diferentes tipos de muestras____________________________________ 46
3.2.1 Plantas grandes____________________________________________________ 47
3.2.2 Plantas pequeñas___________________________________________________ 47
Ha sido para el centro de diagnóstico agropecuario del convenio una gran preocupación el
poco uso que se da al laboratorio para el diagnóstico de enfermedades y plagas, principalmente
en el área agrícola y es su deseo motivar el uso de una herramienta tan importante como el
laboratorio para la obtención de diagnósticos acertados, con lo cual se puedan hacer manejos y
controles mas efectivos disminuyendo así los riesgos de perdidas económicas en la producción
agropecuaria en un alto porcentaje . Por esta razón el equipo técnico de este centro Agropecuario
Convenio Ica – Secretaria de Agricultura, se dio a la tarea de elaborar una cartilla en forma
ordenada, clara y práctica, con criterios precisos en lo técnico a fin de que se convierta en una
guía para los procedimientos a nivel de campo en el correcto manejo, toma, conservación y
envió del material vegetal y muestras pecuarias al centro de diagnóstico.
Se espera que esta cartilla sea un manual de procedimientos que permita a profesionales,
técnicos y productores del sector agropecuario prevenir, corregir o mitigar los impactos negativos
generados por plagas, enfermedades y sustancias nocivas de la manera mas amigable y racional
con el medio ambiente, procurando la seguridad alimentaría, obtención de productos inocuos,
la investigación y el desarrollo tecnológico, haciendo así mas eficientes las actividades agrícolas
y pecuarias de Antioquia.
Los servicios que brinda el Centro de Diagnóstico agrícola y pecuario del convenio ICA-SECRETARIA
DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL, dan a los profesionales del sector herramientas para
desarrollar su trabajo de asistencia técnica y asesoría a los diferentes productores. Los resultados
del laboratorio son valiosos siempre que se valide la información en campo.
11
• Calidad de la muestra
• Cantidad de la muestra
• Tiempo transcurrido en la ruta crítica
La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparición del problema,
para evitar contaminación, principalmente por bacterias, hongos o microorganismos del medio
ambiente.
El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos
que permitan alterar la muestra.
Igualmente, se debe tener presente de no maltratar al animal cuando se vaya a tomar la muestra
ya que nos puede alterar los resultados, por lo tanto sujetar bien y adecuadamente el animal,
sin causarle traumas.
Los instrumentos para tomar las muestras como: Tubos, agujas, pinzas, tijeras, jeringas y otros,
al igual que los recipientes a usar deben ser estériles y cerrados herméticamente. La muestra
debe ser transportada al laboratorio en el menor tiempo posible, toda muestra debe ser remitida
con la mayor información posible, ya que los datos allí consignados son vitales para un buen
diagnóstico y una buena recomendación.
Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad, y que
permite al laboratorio identificar su causa. Esta puede ser: Fluidos corporales, sangre, suero, 13
semen, orina, secreciones, materia fecal, órganos y tejidos.
El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser útiles para el
diagnóstico.
SIGNOS Y SÍNTOMAS
14
LESIONES MACROSCÓPICAS
15
• Cuando el animal lleve más de dos horas de muerto y no se le ha dado refrigeración adecuada,
no deben enviarse muestras al laboratorio para el análisis microbiológico, ya que puede
haber contaminación por otros microorganismos diferentes al agente causal.
• Los animales denominados “colas” (pobre condición física) no deben ser enviados para
exámenes, excepto si son los únicos animales enfermos.
• Cuando no se tenga conocimiento sobre que muestras tomar en caso de una enfermedad, se
debe llamar al Centro de Diagnóstico preferiblemente para solicitar la asesoría e información
requerida.
• Siempre utilice instrumental y recipientes estériles, limpios y secos para microbiología, así
como para los otros tipos de muestras.
16 Tejidos separados en bolsas plásticas Transporte de tejidos separados Transporte de tejidos en bolsa plástica
y tubos plásticos estériles bien en bolsas plásticas y termo con con refrigeración en caja de cartón
identificados refrigeración y su respectivo protoloco herméticamente cerrada y su respectivo
protocolo
• Aislamiento e identificación del agente patógeno de las muestras tomadas del animal, como:
Bacterias, virus, hongos, parásitos y otros.
• Determinación de las variaciones cualitativas en muestras como orina, sangre, materia fecal
(aspecto, olor, color, otros) y cuantitativas como (densidad, pH, hemoglobina, hematocrito,
huevos por gramo), con respecto a los niveles establecidos según la especie animal.
Aborto en bovinos, es de las principales manifestaciones observadas en enfermedades reproductivas por causas infecciosas y
estos se presentan generalmente después de los 45 días de gestación.
ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Abortos y momificaciones en bovinos
17
Abortos en porcinos
Inserción de la aguja en el Toma de sangre en bovino Separación del suero Empaque, conservación e
capuchón con vacutainer en vena identificación del suero en
caudal, previa desinfección viales
del sitio
EDTA (sales de potasio o de sodio en concentración de 1mg / 1 ml de sangre), valido en todas las
18 especies. Heparina (0.5 Mg. por 4.5 ml de sangre), oxalatos (potasio y sodio) y citrato de sodio
al 3.8%
• La posición adecuada y sujeción afectiva del animal son esenciales para un muestreo con
éxito, un tiempo adicional para ganar confianza del animal es generalmente de gran utilidad.
• Minimizar manejo físico humano, ya que un animal asustado, adrenalizado puede originar
resultados equivocados en varios análisis, por ejemplo, la glucosa.
• La asepsia debe realizarse en sentido contrario al crecimiento del pelo del animal y en forma
circular del centro hacia la periferia .Después de la punción el sitio debe dejarse seco, limpio
y libre de sangre, ya que cualquiera humedad o materia orgánica favorece las infecciones.
• Las técnicas y sitios de punción varían de una especie a otra, según la localización de los
vasos sanguíneos convenientes y el espesor y dureza de la capa de la piel, por ejemplo la
vena yugular, mamaria, caudal y radial ( alar) .La cantidad máxima de sangre a extraer será
la estrictamente necesaria para las pruebas, mas o menos 2 mililitros.
Sujeción e inmovilización de porcinos en toma de sangre en la vena cava, previa desinfección del sitio
Las muestras para estudio deben ser lo más frescas posibles, conservadas en refrigeración (no
congelar), tomadas asépticamente y antes del tratamiento con antibióticos. En caso de ser
hisopados, conservar en medio de mantenimiento.
• En las secreciones y exudados la interpretación del examen directo es difícil, tanto por la
contaminación que generalmente se produce durante la obtención, como por el escaso
numero de microorganismos en la muestra, por esta razón el examen definitivo es el cultivo
y para la toma de la muestra deberán emplearse técnicas de asepsia rigurosa.
• La secreción de oído se obtiene con escobillones estériles con el cual se toma la cantidad
mayor posible de ambos oídos en caso de que esta este seca o muy escasa se impregna los
escobillones con solución salina estéril en ambos casos la muestra se toma mediante el frotis
del conducto auditivo externo sin profundizar el tímpano.
BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA
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Hisopado nasal en porcinos Hisopado traqueal en aves Hisopados y medio de conservación para cultivo
bacteriológico o viral
• Las muestras de úlceras cornéales las debe obtener el médico veterinario, quien lo hace
raspando la lesión muy cuidadosamente con una espátula estéril, se debe realizar en ambos
ojos y hacer extendido en placa estéril para ambos casos.
• El volumen de la muestra debe ser representativo, el algodón del escobillón impregnado del
material; la muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte (Stuart).
Materiales: Especulo estéril, escobillones estériles, porta objetos estériles, medio de transporte
y guantes.
• En caso de sospechar hongos o tricomonas colocar una muestra en solución salina estéril
para la realización del directo.
2.3.6 HEMOCULTIVOS
Materiales: Alcohol yodado y antiséptico, jeringa estéril, mechero, algodones estériles y frascos
con el medio de cultivo.
• Los recipientes en que se toman las muestras directamente, deben colocarse por debajo del
sitio de la punción, para evitar el reflujo de la sangre. La aguja se introduce directamente en
la vena, si esta se pierde o hay que efectuar una segunda punción debe usarse una nueva
aguja o un nuevo equipo para la toma de la muestra, estas precauciones deben tenerse en
cuenta para reducir el riesgo de contaminación de la muestra con flora normal de la piel. Las
muestras deben mezclarse cuidadosamente e inmediatamente enviarla al laboratorio.
2.3.7 UROCULTIVOS
Materiales: Sondas estériles, catéteres estériles, guantes, frascos estériles de boca ancha y
alcohol yodado y antiséptico.
• Recolección de la muestra: En general todos los animales para la toma hay que realizar un
lavado riguroso de los genitales externos con el fin de remover los organismos contaminantes,
se debe utilizar jabón y abundante agua limpia.
• En grandes especies la muestra de orina se puede recolectar por micción limpia y debe ser
de la mitad del chorro de la orina, la muestra se debe tomar en un frasco estéril el cual no
se debe destapar hasta el momento de la toma de la muestra, no tocar la boca de este y
tomarla directamente en el frasco con una cantidad apropiada para el procedimiento de esta,
enviar inmediatamente al laboratorio de lo contrario se debe refrigerar. Otros métodos muy
utilizados en pequeños animales son la utilización de sondas catéter y punción vesical, siendo
esta ultima la más utilizada. Después de localizar la vejiga lavar y desinfectar, puncionar con
jeringa estéril y tomar aproximadamente 5 ml, y enviarla al laboratorio.
• El catéter es considerado uno de los mejores métodos pero no se ha tenido en cuenta que
este puede introducir infecciones. La muestra por ningún motivo debe ser guardada en
nevera ya que los cambios de temperatura afectan la viabilidad de los microorganismos.
• No recoger muestras del suelo porque estas llevan consigo bacterias contaminantes que se
encuentran allí y pueden llevar a un diagnóstico errado.
• L a muestra debe llegar al laboratorio antes de las 2 horas, si no es posible se debe refrigerar
hasta su procesamiento.
• Existe una variación en los recuentos celulares según el momento del ordeño, las muestras
más útiles son las obtenidas inmediatamente antes del ordeño del atardecer.
24 2.5.1 COPROLÓGICOS
Con guante o funda plástica introducir la mano en el recto del animal y estimular mediante
masajes el esfínter anal.
• Si la muestra tardara más de 2 horas en llegar al laboratorio, pasar una parte de la muestra
a un recipiente con formalina al 10% y otra sin formalina, ni refrigeración, especialmente
cuando se desea investigar parásitos pulmonares (identificación de larvas) y coccidias.
• El sitio de punción debe estar limpio; esto incluye, recorte de pelo, desinfección con solución
yodada por 2 veces y finalmente limpiar con alcohol.
• Las placas para el extendido de sangre deben ser nuevas, libres de rayas y grasas.
• Una vez secados los extendidos se envuelven en papel absorbente o papel higiénico en placas
separadas y se envían al laboratorio.
• También puede hacerse un montaje en fresco y hacer micro hematocrito para observar
tripanosomas en movimiento.
• Utilizando una gasa impregnada en glicerina y sostenida por una pinza, limpiar la zona,
separando las costras poco adheridas y las escamas que se encuentren sobre o alrededor de
la lesión que se va a investigar.
26 • Con la hoja de un bisturí raspar la parte superior del doblez varias veces hasta lograr algo de
sangrado en la zona.
• Tener en cuenta que los raspados se deben hacer cerca de los bordes de las lesiones activas,
evitando incluir costras secas, pelos o lanas.
Materiales: Pinzas estériles, papel de aluminio nuevo, guantes, formato de laboratorio, tijeras,
cajas de Pietri y mechero.
• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada y en un lugar libre de humedad y seco.
• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada en un lugar libre de humedad y seco
o en la jeringa haciendo uso del tapón envíela al laboratorio inmediatamente por no tener 27
medio de transporte.
• Recolección de la muestra: Estas lesiones pueden ser fistulas y úlceras entre otras. Para
obtener la muestra limpie la zona afectada con agua destilada estéril, nunca use alcohol
yodado porque este lesiona los tejidos y afecta los resultados de los cultivos.
VIROLOGÍA
Cerebro hemorrágico en bovio y signos nerviosos. Conservar un fragmento en refrigeración y otro en formol al 10%
Selección del especímen: Los siguientes son los parámetros para una adecuada remisión de
los tejidos.
• Seleccione los tejidos con lesiones y muestras de órganos que tengan lesiones, si no hay
evidencia de lesiones, seleccionar tejidos, órganos y sistemas que den cuenta de los signos
clínicos del animal.
• Manipulación de los tejidos: La manipulación de los tejidos debe ser cuidadoso y delicado.
• Empacar las muestras con el formol lo más pronto posible después de la remoción.
• Colocar los especímenes de diferentes sitios anatómicos en frascos separados y con el fijador
adecuado.
• Hacer una lista de las muestras enviadas y descripción de cada una (Forma, color, aspecto,
tamaño y otros).
Cabeza de bovino con médula Tallo cerebral con médula Obex con tallo encefálico Médula oblonga en formalina
oblonga al 10%
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Transporte y conservación de tejidos separados en refrigeración y formol al 10% para identificación de patógenos y lesiones,
se adjunta protocolos
• Envió: Pueden fijarse de dos maneras: Fijador líquido que puede ser alcohol absoluto,
isopropanol, etanol o alcohol al 96%.
• Fijación al aire.
Resultados:
Los informes de patología son leídos por patólogos veterinarios y en ellos se incluye:
Descripción.
Diagnostico.
Notas o comentarios.
Notas: El procesamiento de las muestras en el laboratorio de patología una vez estén fijados los
especímenes es largo por lo cual los resultados pueden entregarse en un lapso de 4 a 10 días
hábiles.
El tiempo máximo para la entrega de resultados de citología es de 48 horas.
• Notificación
• Visita a la finca:
Comience diligenciando el protocolo del caso a atender, “trate de definir el origen del problema
30 y los riesgos de difusión” según la información recolectada.
Comience inspeccionando los animales sanos o aparentemente sanos, observe síntomas y signos
clínicos de todos los animales y obtenga un “DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO”, de lo que está
sucediendo en la finca.
• Toma de muestras
• Limpieza y desinfección
Limpie y desinfecte antes y después de la toma de la muestra los elementos, equipo y lugar
donde se tomo la muestra. Cambie la ropa utilizada en el procedimiento
Los resultados reportados en el laboratorio, son una herramienta fundamental para la toma de
decisiones.
• Determine el área de riesgo focal (finca o predio) y peri focal (predios alrededor donde se 31
presento la enfermedad).
Recipiente: Frasco, tubo estéril o cuando se especifique se puede usar bolsa plástica estéril.
33
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Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLÓGICOS
ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN OBSERVACIONES
Recipiente o bolsa plástica Tomar directamente del
Materia fecal para
estéril. Refrigeración recto.
Coprocultivo.
Enteritis
Tubos con medio nutritivo Refrigeración No tomar muestras del
Hisopos estériles.
Caryblair ó Tioglicolato. suelo.
Previo lavado del área
Semen. Recipiente estéril. Refrigeración
prepucial.
Infertilidad
Recipiente estéril con medio Previo lavado de la zona
Secreciones vaginales Refrigeración
BHI vaginal
Enviar 20-30 mililitros
de orina, tomar por Enviar inmediatamente.
Problemas Renales sonda ó punción vesical. Recipiente estéril Refrigeración Previo lavado con agua y
jabón de las zonas.
Uro cultivo.
Enviar inmediatamente.
Enviar 100 mililitros de
Enfermedades Hídricas Recipiente estéril Refrigeración
agua Tomar muestras de
diferentes sitios.
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Tabla 2. MUESTRAS PARA EXAMENES DE VIROLOGÍA
ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN OBSERVACIONES
Buscar títulos de
Leucosis, IBR, DVB,
10 mililitros de sangre sin Refrigeración o Anticuerpos. Historia de
EEV, Neosporosis y Recipiente estéril
Anticoagulante (Suero). Congelación (Sueros). vacunación.
otras.
Evitar hemólisis
Tejidos, líquidos con
Refrigeración o Transportar
Aislamiento de Virus antibióticos (Penicilina y/o Recipiente estéril
Congelación. Inmediatamente.
Estreptomicina).
Epitelio mamario, padal Recipiente estéril con Refrigeración o Transporte inmediato
y/o lingual. glicerina tamponada o congelación.
Enfermedades
Solución saturada de azúcar
vesiculares
Liquido vesicular. Jeringa Congelación Transporte inmediato
Cerebro entero o la Transporte inmediato
Recipiente hermético (bolsa Refrigeración -
Rabia bovina cabeza del animal que Precaución de bioseguridad.
plástica) Congelación
murió. Zoonosis.
NOTA: En general para enfermedades virales enviar: Sangre, cerebro, ganglios linfáticos, hígado, bazo, tonsilas o amígdalas, riñón, pulmón;
siempre por separado y congelado. Igualmente se puede usar el medio de Hanks, glicerina tamponada más antibióticos.
Papilomas ó Verrugas
10 gramos de papiloma Bolsa plástica ó frasco Sin preservativos Muestras individuales
(Autovacunas)
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Tabla 5. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ECTOPARÁSITOS (PARÁSITOS EXTERNOS)
ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN OBSERVACIONES
Adicionar 1-2 ml de Tapar herméticamente
Sarna Raspado profundo de la piel. Frasco estéril de boca ancha.
glicerina o aceite.
Raspado de piel, folículos Raspado del área
Dermatofitos (Hongos). Papel o porta objetos No usar preservativos
pilosos (pelos). periférica de la lesión.
NOTA: Para análisis de productos garrapaticidas, enviar garrapatas vivas en frasco tapado y con orificios en la tapa y para la identificación o
clasificación, enviar en recipientes con alcohol etílico al 70%.
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Tabla 11. MUESTRAS PARA EXÁMENES DE TOXICOLOGÍA
ITEM MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN OBSERVACIONES
Sangre con anticoagulante,
Fosforados Orgánicos y Carbamatos orina, hígado, riñón, lavado Frasco estéril Refrigeración
gástrico.
Alimento, contenido Todas estas muestras
Congelación o
Urea estomacal, hígado, riñón y Frasco estéril deben empacarse
refrigeración
orina. por separado y
Mercurio Hígado y riñón. Frasco estéril Refrigeración transportarse de
Plomo Orina, hígado y riñón. Frasco estéril Refrigeración inmediato.
Pelo, contenido gástrico, orina
Talio Frasco estéril Refrigeración
y riñón.
Cianuro Alimento, contenido ruminal. Frasco estéril Refrigeración
OBSERVACIÓN: En tejidos se debe enviar por separado una cantidad no inferior a 100 gramos.
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1. Calidad de la muestra
2. Cantidad de la muestra
3. Tiempo en la ruta crítica de la muestra
La muestra debe ser fresca y seleccionada de plantas o de las estructuras de estas que presenten
la afección en diferentes estados de evolución.
La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparición del problema,
para evitar contaminación, principalmente por bacterias, hongos o insectos secundarios.
El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos
que permitan alterar la muestra.
Al enviar una muestra, se debe proteger para que no se reseque o dañe por calor, no es posible
hacer diagnósticos correctos sobre muestras marchitas, maltratadas o en estado avanzado de
descomposición, esto conduce a diagnósticos erróneos.
Tome las muestras a media mañana o media tarde cuando la intensidad del sol no sea muy
fuerte, evite tomar muestras inmediatamente después de una lluvia o de aplicar algún producto
por vía foliar. 45
Toda muestra debe ser remitida con la mayor información posible, ya que los datos allí
consignados son vitales para un buen diagnóstico y una buena recomendación.
Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad o plaga,
que permite al laboratorio identificar su causa.
La muestra vegetal puede estar constituida por hojas, frutos, tallos, raíces, si las plantas son
de gran tamaño se toma parte del tejido afectado del órgano correspondiente y si son plantas
pequeñas en lo posible enviar la planta completa y varias de ellas en las que se pueda observar
diferentes estados de avance de la enfermedad o plaga.
La muestra, debe estar constituida de tejidos u órganos tanto de las partes sanas como de las
enfermas.
Tome un número suficiente de plantas que sean representativas del lote en estudio. Traslade la
muestra al laboratorio el mismo día que la tome, de lo contrario manténgala en refrigeración
para evitar que el tejido se deteriore ó se formen hongos, es recomendable que se manejen las
muestras en bolsas de papel.
El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser útiles para el
diagnóstico y recomendación
Por su gran tamaño, se hace necesario enviar las partes afectadas que sean más
representativas
• Raíces
Se debe enviar cuando se sospeche daño por nemátodos, hongos del suelo, bacterias o por
insectos que atacan raíces. La sintomatología se puede presentar como quemazón en las puntas
de las hojas, defoliación, marchitez, clorosis, enanismo, agallas, nódulos o presencia de insectos
a nivel de raíz. Envié la muestra acompañada de raicillas, enviar suelo y los insectos que se
encuentren presentes en frascos con suelo.
• Hojas
Cuando se observen manchas foliares, deformación de las hojas, engrosamiento de venas, agallas,
aclaramiento de venas, ampollas, clorosis, corte de hojas, raspaduras y perforaciones.
47
Consiste en determinar el insecto que por su comportamiento o sus hábitos causa un daño
directo o indirecto en la producción (calidad o cantidad) de una especie vegetal de interés para
el hombre.
Luego de que se ha identificado el insecto que esta causando el daño se procede a dar las
recomendaciones, que consisten en seleccionar los diferentes componentes de manejo que se
deben realizar para disminuir la incidencia de éstos en el cultivo.
Una adecuada recomendación se fundamenta no solo en la identificación del insecto sino que es
necesario el análisis de las condiciones en que se presenta el problema, en especial el manejo del
cultivo y las interacciones planta - insecto - organismos benéficos - condiciones agroclimáticas,
es decir, se requiere de un análisis integral que conlleva a un acertado juicio sobre la causa del
problema y los factores que lo favorecen.
Es de suma importancia tener presente que para tomar la decisión del envió de una muestra al
laboratorio, no se debe esperar hasta que todo el cultivo presente los síntomas del deterioro,
dado que en estos casos se logra realizar la determinación del causante del daño pero es muy
complicado recuperar los cultivos o plantaciones.
Cuando un cultivo presenta daños causados por insectos es necesario realizar una observación
detallada de las estructuras vegetales, esto debido a algunas características especiales de los
insectos como:
Estas características hacen que los insectos, que están causando el daño puedan pasar
desapercibidos o no se encuentren en el tejido al momento de tomar la muestra. Por esto en
un laboratorio de diagnóstico vegetal se presentan dos tipos de situaciones con las muestras
48
entomológicas enviadas, la primera, cuando el insecto causante del daño se encuentra presente
y la segunda cuando el daño se observa pero el insecto causante no se encuentra.
Este es un tipo de muestra común. Para obviar esta situación se sugiere recoger todo material
representativo del problema en el campo.
Para el caso de plantas de PORTE BAJO (plantas pequeñas) enviar de 2 a 3 plantas completas
y para plantas de gran tamaño enviar las estructuras o partes de la planta que muestren los
síntomas más característicos en los diversos estados de desarrollo del problema.
Es básico realizar una observación detenida de las plantas para tratar de buscar y capturar
los insectos asociados al problema, para esto se puede entrar al cultivo y quedarse un tiempo
quieto, para que los insectos reinicien su actividad, igualmente sacudir fuertemente la planta
colocando en la parte baja de la misma una hoja blanca grande, una carpeta o algo similar que
facilite la recolección de los insectos que caigan para su envío al laboratorio.
49
Es la muestra ideal dado que a través de la determinación o identificación del insecto se establece
el agente causal del problema. En este caso, se debe procurar enviar el mayor número de insectos
adultos o larvas (gusanos) y la parte de la planta que presenta la lesión.
• Adultos
Se deben depositar en frascos con alcohol comercial al 70%, el recipiente debe quedar lleno, bien
tapado y sellado con cinta. Los insectos guardados en alcohol, pueden quedar en un lugar fresco
por varios días. Pero debemos tener presente que entre más rápido se envíen al laboratorio con
toda la información, más pronto se obtendrán los resultados y las recomendaciones del caso.
• Las mariposas, polillas o insectos de cuerpo delicado no se deben depositar en frascos con
alcohol ni manipular demasiado, para éstos se trabaja en empaques transitorios que consiste
en hojas de papel, cartulina o papel mantequilla, dobladas en forma de triangulo. En cada
una coloque un solo ejemplar.
50
Depositar en frascos con alcohol al 70%. Si el número de larvas o ninfas es alto, se deposita
una parte en un frasco con alcohol y el resto en otro frasco con el substrato o material de
donde se encontró. Esto permite hacerles a los insectos vivos un seguimiento en cámaras de
cría, encontrándose en muchos casos sus enemigos naturales ya sean parasitoides u hongos
entomopatógenos.
Para recolectar muestras de insectos que atacan frutos como por ejemplo moscas, recoja las
frutas puede constatar la presencia de larvas, pero evite enviar las frutas partidas. Puede observar
primero las frutas caídas que posean larvas de mayor tamaño y próximas a empupar, estas frutas
se depositan en bolsas o frascos con un poco de aserrín, suelo o papel.
Cuando las frutas tienen tejidos suculentos (muy acuosos) deposite una buena cantidad de
aserrín o papel para evitar que los jugos de la fruta produzcan encharcamiento en la bolsa o frasco.
• Pupas
51
Manifestaciones visibles:
Se debe recolectar la mayor cantidad de insectos, tanto los que se sospecha están enfermos o
tienen los síntomas y signos específicos como los que están aparentemente sanos.
52 Este material se debe enviar al laboratorio en el medio donde se encontró (suelo, hojas, troncos,
etc.) o en frascos con tul o una tapa perforada, que garanticen la llegada de los insectos vivos al
laboratorio, se deben transportar lo más rápido posible. Si los insectos se encuentran muertos se
envían en frascos sin adicionar ninguna sustancia.
• Horas de recolecta
Depende de la actividad particular de cada insecto (hábitos) de manera muy general para los
insectos diurnos a partir de la 10 de la mañana y para los de hábitos crepusculares y nocturnos
a partir de la 6 de la tarde.
Sin embargo hay que tener en cuenta que las condiciones ambientales como lluvias, vientos
excesivos, granizadas, bajas temperaturas, entre otros, pueden reducir la actividad de muchos
insectos, lo que hace difícil visualizarlos y recolectarlos.
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Estos síntomas pueden ser causados por otros organismos como hongos, bacterias, micoplasma,
virus, nematodos o problemas abióticos ver diagnóstico de daños causados por enfermedades.
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A continuación se presentan una serie de síntomas típicos, para los cuales se determinan algunos
de sus agentes causales en orden de importancia.
Entre paréntesis se indica como clave la primera letra de las siguientes causas:
Hongo(H), Bacteria(B), Micoplasma(M), Virus(V), Nematodo(N) y Abiótica(A).
Cloróticas (A,B,H,M,V), oscuras (H,N), mosaicos(V), traslúcidas (B), venales (V,H), intervenales
(H,B,V,A), redondas (H,B), angulares (H,B), alargadas (H,N), corchosas (V), necróticas (H,B,V),
gomosas (V), pústulas (H), y chancros (H,B). Ocurren en necrosis terminal (H,B,A): destruyen la
punta de crecimiento en tallo, tubérculo o raíz y matan un órgano como la flor, órganos sexuales
y frutos.
En este caso colecte al menos 15 hojas representativas de todos los estadíos de infección. Para
plantas con hojas pequeñas, corte una rama con sus hojas intactas. Empaque en papel toalla
y luego en bolsa plástica sellada. Para las hojas muy suculentas limpie el exceso de humedad y 57
empáquelas individualmente en doble papel toalla seco y colóquelas en una bolsa de plástico.
Adjunte información sobre aplicación de pesticidas y condiciones ambientales que precedieron
la toma de la muestra.
En este caso colecte toda la planta, de ser posible, con raíz y suelo. Extraiga las plantas herbáceas
cuidadosamente del suelo, de tal forma que las raíces se mantengan intactas con su rizósfera
(suelo alrededor de las raíces), Coloque las raíces con su rizósfera en una bolsa plástica; y
empaque la parte aérea con papel toalla y bolsa plástica sellada.
En el caso de plantas perennes colecte un manojo generoso de las raíces alimenticias (las más
delgadas) con su rizósfera y empaque en una bolsa plástica sellada; incluya además raíces largas
que muestren pudrición con suelo.
En este caso colecte además varias ramas o ramillas con follaje mostrando un rango de síntomas,
empaque con papel toalla y bolsa plástica sellada. Describa correctamente la sintomatología
observada como decoloración de raíces, chancros, etc.
• PUDRICIÓN (B,H):
La desintegración de tejidos ocurre por acción de patógenos. Mas común en órganos de reserva
(frutos, raíces, tubérculos)
Envíe el material en un empaque a prueba de choque (nevera de icopor y papel toalla de relleno).
Para evitar la maceración de los tejidos.
Colecte buena cantidad de flores y frutillos con pedúnculos y ramas, empaque en papel toalla y
luego en bolsa plástica sellada, evite que la muestra esté húmeda.
• CRECIMIENTO ANORMAL:
• CHANCROS Y AGALLAS:
Seleccionar ramas o ramillas con agallas jóvenes. Cortar ramas sanas y afectadas. Colocar
las muestras sin humedad en un papel grueso sellado o en un envase hermético, no en bolsa
plástica.
Colecte el suelo circundante al pie de la planta y empaque en una bolsa plástica sellada.
Colecte varias espigas (cereales, pastos, forrajes, caña de azúcar, etc.) y frutos (mazorcas de
maíz, tubérculos de papa, etc.) y envuélvalos individualmente en papel toalla y luego en bolsa de
plástico selladas. Empaque la muestra en el sitio de infección del cultivo dado que este patógeno
se distribuye fácilmente y contamina el resto del cultivo.
59
60
Los factores del ambiente no biótico (temperatura, humedad, toxicidad, deficiencias nutricionales
etc.), pueden afectar las plantas directamente o predisponerlas al ataque de agentes causantes
de enfermedades.
• CAUSAS ABIÓTICAS
Recolecte: todos los detalles de la afección, especifique humedad del suelo y las condiciones
ambientales precedentes, anote la distribución de la sintomatología en la planta y en el campo,
así como las labores culturales realizadas (aplicaciones de plaguicidas, herbicidas, fertilizantes etc.).
• FACTORES DE PREDISPOSICIÓN
Los factores ambientales que favorecen la incidencia y afección por los patógenos son
temperaturas y humedades desfavorables a la planta y favorables al patógeno; deficiencias
nutricionales o excesos de fertilización favorables para el crecimiento de patógenos; acumulación
de sustancias metabólicas en condiciones de almacenaje; carencia de oxígeno (por exceso de
agua); carencia o exceso de radiación solar; efecto residual de herbicidas usados para otros
cultivos no susceptibles; prácticas culturales inapropiadas (daño a la deshierba, riegos o podas
inoportunas y suelos compactos).
61
Algunos patógenos son reconocidos a simple vista sobre las plantas afectadas. El aspecto
algodonoso o pulverulento de otros, los delata. Los picnídios de algunos hongos, en cambio, son
apenas perceptibles, pero con una lupa de 10X se observa su presencia. Las hembras de algunos
nemátodos forman quistes o agallas característicos en ciertos cultivos, que pueden ser reconocidos
a simple vista por los especialistas. Las bacterias pueden formar exudados característicos, pero
los micoplasmas y virus, solo se pueden ver con equipos especializados. Cuando las causas del
daño fitopatológico no pueden determinarse en forma directa, es necesario seguir una serie de
técnicas de laboratorio que nos permitan llegar a la conclusión del diagnóstico.
Se requiere:
Para el diagnóstico de hongos antagónicos, se recomienda observar en el cultivo que esta siendo
afectado, las plantas que aparentemente se encuentran más sanas o que muestren tolerancia a
la enfermedad, de estas se debe tomar en diferentes partes una cantidad de aproximadamente
500 gramos del suelo que esta alrededor de las raíces, el cual se empaca y envía al laboratorio,
para que los hongos sean diagnosticados, aislados y repicados masivamente.
Colecte tres o cuatro hojas del cogollo (hojas más jóvenes) y otras dos o tres con la expresión de
los síntomas representativos, las hojas deben ir envueltas en papel aluminio o papel toalla y con
bolsa plástica sellada. Si el envío va tardar más de un día debe enviarse refrigerado evitando a
toda costa que la muestra se moje, en caso de que el envío se haga el mismo día puede enviarse
las hojas en un sobre de Manila.
El mantenimiento de muestras frescas es esencial para el diagnóstico de virus.
63
La visita del técnico, en este caso es importante dado que realiza una observación integrada de
la problemática como el estado del cultivo, área afectada, estado de las malezas, revisión de la
sintomatología, tanto en el cultivo como en las malezas de hoja ancha.
Cuando se toman este tipo de muestras se deben hacer observaciones a nivel de campo que
pueden ayudar al diagnóstico como son: encrespamiento de hojas nuevas, engrosamiento de
venas, la lamina foliar aparece encorvada hacia arriba o hacia abajo, observar si la sintomatología
es generalizada o en focos, si los potreros cercanos están quemados o no, si la sintomatología es
mas fuerte en las orillas del cultivo, si las malezas dentro del cultivo se encuentran afectadas.
Aclarar si la toxicidad es por una aplicación o por la utilización de abono orgánico no madurado
y con residuos de herbicidas.
Para el diagnóstico se debe recolectar material de planta severa, mediana y levemente afectadas
y enviar material suficiente de hojas, tallos a fin de determinar el producto que causó la
toxicidad.
Fototoxicidad
64
Las semillas son las estructuras responsables de perpetuar la especie, éstas se encuentran
biológicamente en reposo, contienen un embrión con actividad metabólica.
Poseen la facultad de germinar, emerger y dar origen a plantas sanas y vigorosas. Para lo cual
deben estar intactos sus componentes, de manera que le permitan mantenerla no solo viva, sino
con altos índices de vitalidad.
La semilla tiene 3 partes básicas: el embrión, tejidos de reserva alimenticia y la cubierta. La cual
va siendo modificada durante el desarrollo, en la madurez presenta una apariencia característica,
generalmente seca, endurecida, engrosada y de color café. La envoltura proporciona a la semilla
protección mecánica para el embrión, haciendo posible manejar la semilla sin dañarla, pudiendo
así ser almacenada por períodos considerables de tiempo.
La cantidad de muestra a enviar es de más o menos 100 gramos de semilla. La prueba tiene una
duración de 18 a 24 horas. Esta prueba no diferencia semillas vivas de semillas latentes.
65
No.
SERVICIO NACIONAL DE DIAGNÓSTICO VETERINARIO
FORMATO ÚNICO DE RECEPCIÓN DE MUESTRAS USO DIAGNÓSTICO
Y PROCESAMIENTO
1. OFICINA RECEPTORIA
FECHA DE RECEPCIÓN:
D M A
2. IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN
PROPIETARIO: PREDIO: TELÉFONO:
3. MOTIVOS DE SOLICITUD
4. TPO DE EXPLOTACIÓN
5. NOTIFICACIÓN 6. CRONOLOGÍA
Día Mes Año
Predios vecinos afectados
SÍ NO Primer enfermo
Notificación
CUÁNTOS Primera visita Méd. Vet.
9. DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO:
66
TRATAMIENTO:
12. POBLACIÓN
POBLACIÓN POBLACIÓN
ESPECIE ESPECIE
Enfermos Muertos(1) Total Enfermos Muertos(1) Total
Terneros (as)< 1 año C Hembras 1-2 años
B A
O Hembras 1-2 años N Hembras>2 años
V I
Hembras>2 años N Machos 1-2 años
I O Machos>2 años
N Machos 1-2 años S
O Machos>2 años TOTAL
S Hembras 1-2 años
TOTAL F
E
P Lactantes<2 meses L Hembras>2 años
I
O
R Machos 2-6 meses N Machos 1-2 años
O
C Hembras 2-6 meses
S Machos>2 años
I
N Machos>6 meses TOTAL
O
S Hembras>6 meses S Hembras 1-2 años
I
TOTAL L
V
Hembras>2 años
OVI-CAPRINOS
E
S Machos 1-2 años
T
EQUINOS R Machos>2 años
E
<4 semanas TOTAL
A 4-7semanas OTROS
V 8-22semanas
E
S >22 semanas
TOTAL
(1) Los muertos se consideran que enfermaron, inclúyalos en los enfermos.
14. RESULTADOS
67
Seccional: ANTIOQUIA
1. INFORMACIÓN GENERAL
2. INFORMACIÓN FINCA
PROPIETARIO:
PROCEDENCIA DE LA SEMILLA
5.1 Semilla 5.2 Raíz 5.3 Tallo 5.4 Hojas 5.5 Ramas
Cuales:
6.1 Marchitez 6.2 Con áreas muertas 6.3 Amarillamiento 6.4 Quemazón
Cuales:
Estado:
Distribución:
8.1 General 8.2 Por Zonas 8.3 Plantas aisladas 8.4 Pendiente
8.5 Plano 8.6 Zonas altas 8.7 Zonas bajas 8.8 Zonas húmedas
Severidad:
8.9 Alta 8.10 Media 8.11 Baja
10. RESULTADOS 69