Metodología

Extraccion de ADN bacteriano y de levadura.

Se tomo una muesta de células y se supendio en 500 µl de agua esteril, después se centrifugo
durante 5 min a 10000 RPM y una vez terminado el proceso se decanto la parte acuosa de la parte
superior, se le agregaron perlas de lisis y 200 µl de buffer y 200 µl de fenol:cloroformo:alcohol
isoamilico. Después se procedio con la ruptura celular con un pistilo de vidrio seguido de una
centrifugación durante 5 min a 10000 RPM, se elimino la fase acuosa y se agrego 1 ml de etanol
frio y se mezclo por inversión, después se centrifugo durante 2 min a 10000 RPM, una vez
terminado se agrego 400 µl de TE y se incubo a 37 °c por 30 min, después se realizo una extracción
con cloroformo, se mezclo invirtiendo e incubo por 1 hora a -20 °C después se centrifugo por 2 min
a 10000 RPM se decanto la parte liquida y se le agrego 50 µl de TE y se guardo a -20°C.

Después se prepararon los geles al 1% y se colocaron en los moldes con sus respectivos peines se
dejaron secar por 15 min y se procedio a retirar los peines y colocar las muestras en los posillos,
una vez colocadas las muestras se colocaron en las cámaras de electroforesis y se realizo la
operación durante 30 min, una vez terminada la elctroforesis se retiraron los geles y se colocaron
en la cámara de luz UV para observar las bandas.

Electroforesis de ADN vegetal y animal

Se prepararon los geles al 1% de agarosa y se colocaron en los moldes de los geles, se dejo reposar
por 15 min junto con sus peines, una vez pasado el tiempo se retiraron los peines y se procedio a
colocar las muestras para posteriormente colocarlos en la cámara de electroforesis llenando las
cámaras con buffer y se inicio dejándolo 30 min, después se sacaron los geles y se revelaron el luz
UV.