El glucógeno es la forma de almacenamiento de la glucosa en los tejidos animales. Se
encuentra principalmente en el hígado y en el músculo representando hasta un 10% y un 1-2% de su peso húmedo, respectivamente. (Bohinski, 2001) Las propiedades físicas y químicas de muchos polisacáridos neutros difieren lo bastante de las de otras biomoleculas, para permitir su fácil aislamiento. Esta experiencia tiene como propósito aislar el glucógeno de la muestra de hígado por calentamiento con una base fuerte (KOH), hasta la destrucción total del tejido. Al añadir ácido tricloroacético al homogeneizado anterior, precipitaron numerosas sustancias de peso molecular elevado, como las proteínas y los ácidos nucleicos, en tanto que el glucógeno continúa disuelto. El glucógeno puede separarse de los monosacáridos y otros compuestos hidrosolubles por precipitación con alcohol, porque los polisacáridos son mucho menos solubles en alcohol acuoso que los monosacáridos. La determinación del glucógeno se dio mediante la prueba de molish la cual dio positivo para carbohidratos (glucosa). Objetivos
Extraer el glucógeno presente en una muestra de hígado de pollo.
Caracterizar mediante pruebas químicas el glucógeno extraído. Marco teórico El glucógeno es un polisacárido de la célula animal, que se encuentra en el hígado (10%) y músculos (2%). La estructura del glucógeno y los polisacáridos similares se puede describir como una ramificación en forma de abanico de moléculas de gucopiranosa, por medio de enlaces 1-6 en los puntos de ramificación. Presenta ramificaciones cada 8-12 glucosas con una cadena muy larga (hasta 300.000 glucosas). Se requiere dos enzimas para su hidrólisis (Glucogenofosforilasa) y alfa (1- 6) glucosidasas, dando lugar a unidades de glucosa. Dado que los seres vivos requieren una parte constante de energía, una parte importante de metabolismo de los azucares está relacionado con los procesos de formación de almidón y glucógeno y su posterior degradación, Bohinski, 1991. La importancia de que el glucógeno sea una molécula tan ramificada es debido a que:
La ramificación aumenta su solubilidad.
•La ramificación permite la abundancia de residuos de glucosa no reductores que van a ser los lugares de unión de las enzimas glucógeno fosforilasa y glucógenosintetasa, es decir, las ramificaciones facilitan tanto la velocidad de síntesis como la de degradación del glucógeno.
El glucógeno por medio de distintos procesos se convierte en ATP que es la forma de
energía más básica. Si el proceso requiere de gran cantidad de energía se realizara por la glucólisis y parte se convertirá en ácido láctico, para este proceso no hace falta oxígeno. Por el contrario si el proceso es menos intenso el glucógeno o glucosa pasara por el ciclo Krebs y será necesaria la utilización del oxígeno, esto es lo denominado ejercicio aeróbico, Mathews, 2002. Gracias a la capacidad de almacenamiento de glucógeno, se reducen al máximo los cambios de presión osmótica que la glucosa libre podría ocasionar tanto en el interior de la célula como en el medio extracelular. Materiales y Reactivos Baño térmico, baño de hielo, centrifuga, balanza, policial, tubos de ensayo, tubos de centrifuga cónicos plásticos con tapón, guantes de látex, hígado de pollo, solución de KOH, Solución de tricloroacético, solución de sulfato de sodio, etanol. Nombre Descripción Toxicidad Apariencia: Sólido en fragmentos, terrones, barras, lentejas o escamas con fractura cristalina o rombohedral, sin olor, de color blanco - amarillo claro, delicuescente. Tener precaución en dosis Punto de Ebullición (ºC): 1370 Solución de KOH elevadas Punto de Fusión (ºC): 360 pH: 13.5 (Solución 0.1 M). Solubilidad: Apreciable en agua (>10%). Soluble en alcohol y glicerina, insoluble en amonio y éter. Tener precaución en dosis elevadas Tras contacto con la piel: irritaciones de ATC aparición local. Tricloroacético C2HCl3O2 / CCl3COOH Tras ingestión: trastornos Masa molecular: 163.4 gástricos e intestinales. Información adicional: Posible sensibilización en personas predispuestas. Contacto con la piel: Puede Sinónimos : Sulfato disodio, sal causar irritación de la piel. disodio, Sulfato sódico Causa irritación a los ojos. Formula Química : (Na2SO4) Inhalación: La sustancia es Peso Molecular : 142.04 g/mol irritante para las Uso: Utilizado como desecante Sulfato de sodio membranas mucosas y el en el laboratorio o la industria tracto respiratorio superior. química. Se utiliza en la Ingestión. La ingestión de fabricación de la celulosa y grandes cantidades puede como aditivo en la fabricación irritar el estómago con del vidrio. nausea y vómito. El etanol es un líquido incoloro, Contacto con ojos: Se volátil, con un olor presenta irritación. característico y sabor picante. Contacto con la piel: El Etanol También se conoce como líquido puede afectar la piel, alcohol etílico. Sus vapores son produciendo dermatitis más pesados que el aire. caracterizada por Se obtiene, principalmente, al resequedad y tratar etileno con ácido sulfúrico agrietamiento. concentrado y posterior Hidrólisis.