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INTRODUCCION
Los modelos experimentales son herramientas biológicas que han permitido el
estudio de procariotes y eucariotes, facilitando el conocimiento de los procesos
de la vida tanto naturales como patológicos, por lo cual, es adecuado conocer su
manejo, respetando los derechos de los animales de acuerdo a los tratados de
Helsinki.
Los resultados de un experimento dependen en gran parte del manejo de los
animales, al grado que un mal manejo puede invalidar un experimento. También
es importante señalar que existen otros factores que pueden alterar el resultado
de un experimento entre ellos destacan la constitución física y el estado
inmunológico del animal, de tal forma que el manejo adecuado de los reactivos
biológicos (fármacos) depende de factores subjetivos y objetivos que actúan en
forma diferente en cada sujeto de experimentación. Para comenzar a hablar de
técnicas del manejo adecuado de los animales de laboratorio, debemos
considerar el manejo de éstos, con la finalidad de respetar el derecho a buen
trato de los animales.
Principios de los tratados de Helsinki.
* Diseño científico y experiencias previas en animales.
* Principio de la proporcionalidad entre riesgos predecibles y beneficios posibles.
* Respeto a los derechos del sujeto, prevaleciendo su interés por sobre los de la
ciencia y la sociedad.
* Consentimiento informado y respeto por la libertad del individuo que los riesgos
sean razonables frente a los beneficios previstos.
* que el diseño de la investigación sea acertado.
* que los investigadores sean competentes.
* Es la obligación ética de lograr los máximos beneficios y de reducir al mínimo
el daño y la equivocación.
Desde tiempos antiguos los griegos y romanos colocaban señales o marcas en
los animales para su fácil identificación.
Todos los métodos utilizados deben gozar de selectividad, aplicación rápida y
ser preferentemente indoloros. En ocasiones cuando lo requiere se debe aplicar
anestesia local.
MÉTODOS DE MARCAJE.
Los métodos de marcaje generalmente utilizados son:
Físicos: Directo: Corte de pelo, perforaciones y muescas en orejas, mutilación,
tatuaje eléctrico.
Indirecto: Libretas, tarjetas, aretes, collares, pulseras, chips.
Químicos: Tatuaje, colorantes, fotografías.
Biológicos: Especie, marcas naturales, sexo, color edad.
Las tarjetas se utilizan principalmente para colocarlas en las jaulas o cajas.
Como marcas naturales se consideran las características fenotípicas que sean
fácilmente detectables.
Aunque sea una tentación el usar fórceps o guantes de cuero cuando se trate de
sujetar un animal extraño para el sujetador, estos deberían de ser usados
solamente cuando haya peligro de ser mordido. Esto es porque el sujetador debe
ser muy sensitivo de la fuerza usada para sujetar un animal y es difícil de sentir
esta fuerza cuando se usan guantes o fórceps, particularmente cuando se
sujetan animales pequeños.
La mayoría de los animales pequeños se tranquilizan rápidamente facilitándose
la sujeción cuando ésta se hace de una manera firme sin apretar demasiado.
Esto les da una sensación de seguridad. Si un animal se siente inseguro,
incómodo o atemorizado, es casi seguro que luchará para librarse, lo que
usualmente puede causar heridas al animal o al que lo sujeta. Rata.
Es un animal dócil y menos nervioso el macho que la hembra, para extraerlo de
la jaula, se debe abrir previamente la rejilla, dejar que los animales tomen
confianza y posteriormente se realiza una sujeción de todo el cuerpo, con los 5
dedos, en forma gentil.
Una de las técnicas más recomendadas para su sujeción consiste en apoyar la
nuca del animal en el borde interno del dedo índice, si se sujeta con la mano
derecha, el dedo pulgar pondrá el miembro anterior izquierdo del animal frente a
su hocico, el miembro anterior izquierdo quedará sujeto entre el dedo índice y
medial, de manera que la cabeza quede inmóvil.
VIAS DE ADMINISTRACIÓN PARA RATA Y RATÓN:
Las vías más frecuentes para estos animales son: intramuscular (IM),
intraperitoneal (IP), subcutánea (SC), intravenosa (IV), y esofágica (PO).
Intramuscular: Se realiza en los miembros posteriores, previa sujeción del ratón
o rata, introduciendo la aguja en forma paralela al fémur. Las agujas de elección
son la de calibre 25 o 27.
Intraperitoneal: Consiste en aplicar por vía abdominal el medicamento o inóculo,
para lo cual la cavidad abdominal se divide imaginariamente en cuatro secciones,
aplicándose la inyección en cualquiera de las dos regiones posteriores,
inclinando al animal hacia el cráneo e introduciendo la aguja en un ángulo de 35º
aproximadamente para no tocar las vísceras y causar una peritonitis mortal.
Subcutánea: Se jala la piel del dorso o abdomen del animal y se introduce la
aguja para realizar la administración.
OBJETIVOS
1. El alumno aprenderá a manipular correctamente roedores pequeños.
2. Medirá adecuadamente algunos parámetros biofísicos como:
* Temperatura
* Frecuencia cardiaca
* Frecuencia respiratoria
* Peso
3. Conocerá las vías de administración en animales de laboratorio más usuales.
Material
Roedores pequeños
Balanza para roedores
Estetoscopio
Termómetro clínico
Sonda de alimentación para prematuro
Jeringa de 5 ml
Jeringa de insulina
Guantes de cirujano de látex
Pentobarbital sódico
Solución salina isotónica
Procedimiento
1.- Pesar a los roedores utilizando la balanza para roedores, sujetando al roedor
de la
base de la cola para colocarlo en la canastilla.
2.- Determinar los siguientes valores fisiológicos:
a) Sexo
b) Peso
c) Edad aproximada
d) Frecuencia cardiaca
e) Frecuencia respiratoria
f) Temperatura
3.- Administrar por vía oral 1 ml de solución fisiológica por medio de una sonda
de alimentación para prematuros o bien con una aguja de dosificación.
La rata puede ser tomada poniendo la palma de la mano sobre la espalda del
animal con los dedos alrededor del cuello y tórax. El dedo pulgar debe ser
colocado debajo del brazo derecho del animal. Los dedos restantes son
colocados alrededor del tórax y abdomen del animal. Si la rata es sujetada de
esta manera, existe poco peligro de herir al animal o de ser herido por la rata. Se
debe tener cuidado de no poner mucha presión ya que podría ahogar al animal
o romperle las costillas. Todas las técnicas usadas en la rata pueden ser
utilizadas en el ratón.
Una vez que el animal esta en posición asegurándose que la cabeza, cuello y
espalda están en línea recta se inserta la sonda o la aguja de dosificación en la
boca del animal empujándola para colocarla en el esófago con un leve
movimiento rotatorio para facilitar el pasaje hacia el estómago. Enseguida se
administra la sustancia lentamente para evitar el reflujo del líquido y esto cause
error en la dosificación. Por último debe ser sacada la sonda o la aguja
lentamente.
4. Administrar por vía intramuscular 0.5 ml de solución fisiológica. Esta ruta es
poco común en los ratones. Este tipo de inyección debe ser administrada en las
grandes masas musculares de la región femoral, la aguja hipodérmica debe ser
insertada aproximadamente en el centro de la masa muscular. El músculo debe
ser masajeado para distribuir la sustancia inyectada.
5. Administrar por vía intraperitoneal 40 mg de pentobarbital sódico por Kg de
peso. La rata debe ser sujetada con la parte ventral hacia la persona que va
administrar. La inyección debe ser administrada en el cuadrante abdominal
inferior derecho del animal para minimizar el peligro de perforar el hígado, bazo
o la vejiga del animal. La aguja debe ser insertada en un ángulo de
aproximadamente 30 a 45º dentro de la cavidad abdominal para facilitar la
penetración de la misma.
6. Administrar por vía subcutánea 0.5 ml de solución fisiológica. Esta inyección
es administrada en la región que se encuentra inmediatamente bajo la piel donde
haya una mayor proporción de pliegues (lomo o dorso del animal). Se estira la
piel en dirección a la persona, se inyecta y el sitio de la inyección debe ser
presionado para evitar la salida de la sustancia inyectada.
7. Obtener un mililitro de sangre por vía intra cardiaca.
Hacer una punción entre el tercer y cuarto espacio intercostal izquierdo del tórax
RESULTADOS
Conclusión
CUESTIONARIO
1. ¿Cómo se clasifican las vías de administración?
Via oral, sublingual, tópica, transdérmica, oftalámica, ótica, intranasal,
inhalatoria rectal, vaginal, parenteral,
2. Menciona cada una de ellas.
ORAL: El medicamento se administra por la boca. Es la vía más habitual,
ya que es una forma cómoda y sencilla de tomar la medicación.
También es segura (en caso de sobredosificación se puede efectuar un
lavado gástrico o inducir el vómito). Como inconvenientes destacaremos
que la absorción no es rápida (el intestino delgado es la zona de absorción
más importante), que parte el fármaco puede sufrir procesos de
biotransformación en el aparato digestivo por acción de los jugos gástricos
o por inactivación hepática y la posible irritación de la mucosa gástrica.
Las formas farmacéuticas que se toman por vía oral son los comprimidos,
cápsulas, grageas, jarabes, soluciones, suspensiones y granulados.
PRACTICA DISECCION
INTRODUCCION
Muchas de las investigaciones científicas son realizadas en animales de
experimentación, dentro de los cuales se incluyen el mono, las cabras y los
borregos. Sin embargo, en la mayoría de los experimentos se emplean especies
pequeñas de mamíferos como los roedores; entre éstos están los conejos, los
hamsters y, principalmente las ratas.
Esta práctica de laboratorio da la oportunidad a nosotros los estudiantes de
Ciencias Biológicas de conocer y/o reconocer los órganos que integran los
diferentes sistemas del organismo de los mamíferos, como son: el sistema
digestivo, circulatorio, respiratorio muscular, nervioso y endócrino
principalmente.
El objetivo principal de esta practica fue que el alumno identificará
macroscópicamente los órganos que integran cada uno de los diferentes
sistemas que constituyen a los mamíferos en uno de sus representantes: la rata
de laboratorio.
Lo que se utilizo de material en la practica fue una rata,estuche de
diseccion,anestecia,charola,bisturi e hilo biodegradable con la aguja concava asi
como guantes, cubrebocas,eter etilico y gasas.
METODO PARA LA DISECCION:
Tomar a la rata rasurarla en la parte donde se haria el corte. Inyectarle 0.5 ml.
de anestecia.
La rata se colo sobre la tabla de disección y se sujetan las cuatro patas con el
hilo grueso acordonado. Observar los órganos que componen los diferentes
sistemas de los sentidos: oído, vista, olfato, gusto y tacto. Con la ayuda del bisturí
se abre a la rata por la línea media ventral; se separa la piel y el músculo para
exponer la cavidad abdominal. Observar e identificar los órganos abdominales,
lo mismo que algunas de las glándulas que componen el sistema endócrino, así
como algunos de los nervios y vasos más importantes localizados en la cavidad
abdominal. Posteriormente, identificar el músculo diafragmático y cortarlo, lo
mismo que las costillas, para dejar al descubierto la cavidad torácica. Identificar
los órganos localizados en ella.
Este tipo de practicas se deben realizar con demasiado cuidado y
responsabilidad estar mentalizado al 1000% y tener bastante valor ya que en
nosotros esta la vida de un ser.
OBJETIVOS
El alumno aprenderá a realizar la disección de un animal vertebrado en el
laboratorio para
familiarizarse con su manejo, la manera correcta de sacrificarlo, abrigarlo y
localizar
órganos, sistemas y ramas nerviosas importantes.
El alumno aprenderá a hacer una preparación de nervio ciático. Observando sus
características funcionales como son:
a) Características de excitabilidad (estímulos físicos y eléctricos)
b) Características eléctricas
El alumno realizará una preparación de placa neuromuscular observando sus
características funcionales (contracción y sacudida muscular simple).
El alumno aislará el corazón de rata para realizar lo siguiente:
a) Primera ligadura de Stannius
b) Segunda ligadura de Stannius
c) Localización del nodo S-A
d) Demostrar la sincronía cardiaca
e) Demostrar el automatismo cardiaco.
HIPÓTESIS
MATERIAL
Rata Wistar
Anestésico
Equipo de disección: 2 pinzas, 2 tijeras rectas
Algodón
Tabla de disección
Hilo resistente
1 Caja de Petri desechable
Guantes
Cubre bocas
PROCEDIMIENTO
1. Pese y marque una rata por equipo.
2. Calcule la dosis Pentobarbital sódico que administrará por vía intraperitoneal
y anestesia la rata.
3. Una vez anestesiado proceda a la disección.
4. Abra sobre la línea media la piel.
5. Hacer una incisión en el músculo para dejar descubiertos los órganos
toráxicos abdominales. Observar el latido del corazón.
6. Pase un hilo por debajo del corazón a la altura de la línea media que divide
aurículas del ventrículo (línea amarilla) atando fuertemente el hilo.
7. Anote sus observaciones.
8. Localice siguiendo el procedimiento anterior la zona donde se encuentra el
nodo seno auricular. Anote sus observaciones.
9. Estimule los diferentes músculos para probar si las sinapsis se mantienen
funcionales. Anote sus observaciones.
Discusión de resultados:
Conclusiones:
Se puede concluir de esta practica una disección efectiva , puesto que el calculo
para suministrar el pentobarbital fue correcto , además de que el tiempo de
realización estuvo en lo debido , se logró reconocer el nodo seno auricular , así
como una extracción exitosa de los órganos como , cerebro, hígado , corazón.
Bibliografía:
http://highered.mcgraw-hill.com/sites/0072349034/student_view0/zoology_timeline.html
CUESTIONARIO
1. ¿Para que sirve la primera ligadura de Stannius?
En sus estudios fisiológicos con ranas, estableció el procedimiento que lleva su
nombre ("ligadura de Stannius") para ilustrar cómo se transmite el impulso
cardiaco desde el seno venoso a las aurículas y después a los ventrículos.
se coloca la primera ligadura de Stannius entre seno venoso y aurículas y se
observa lo que sucede
2. ¿Para que sirve la segunda ligadura de Stannius?
En sus estudios fisiológicos con ranas, estableció el procedimiento que lleva su
nombre ("ligadura de Stannius") para ilustrar cómo se transmite el impulso
cardiaco desde el seno venoso a las aurículas y después a los ventrículos.
se coloca la primera ligadura de Stannius entre seno venoso y aurículas y se
observa lo que sucede. Finalmente se coloca la segunda ligadura entre las
aurículas y el ventrículo y se observa nuevamente qué ocurre con la frecuencia.
3. ¿Cuál es la composición de la solución Ringer?
Cada 100 ml de solución contiene: Cloruro de Sodio 0.85 g; Cloruro de Potasio
0.04 g; Cloruro de Calcio Dihidrato 0.034 g.
4. ¿Cuál es la composición de la solución Hartman?
Cada 100 ml de solución contiene: Cloruro de Sodio 0.6 g; Cloruro de Potasio
0.03 g; Cloruro de Calcio x 2H2O 0.02 g; Lactato de Sodio 0.31 g.
5. ¿Cuál es la composición de la solución Tyrode?
La modificación de la solución de Locke que se utiliza en experimentos
fisiológicos, cultivos de tejidos, preservado de órganos e irrigaciones de la
cavidad peritoneal. Los ingredientes son: NaCl; KCl; CaCl2·6H2O; MgCl2·6H2O;
NaHCO3; NaH2PO4; glucosa y agua destilada.
6. ¿Cuál es la importancia de las soluciones Ringer, Hartman y
Tyrode?
Solución de Hatman: Aporte electrolítico en deshidrataciones, para reporner
fluidos y los electrolitos correspondientes, en acidiosis ligeras o moderadas de
uso parental.
Solución de Ringer: Electrolitoterapia.
Solucion de Tyrode: se utiliza en experimentos fisiológicos, cultivos de tejidos,
preservado de órganos e irrigaciones de la cavidad peritoneal.
7. ¿Cómo está constituida una placa neuromuscular?
La unión neuromuscular o sinapsis neuromuscular es la unión entre
el axón de una neurona (de un nervio motor) y un efector, que en este
caso es una fibra muscular
1. Terminal presináptico o botón
sináptico
2. Sarcolema
3. Vesícula sináptica
4. Receptor nicotínico
5. Mitocondria
excitabilidad o batmotropismo
Se denomina así a la facilidad con la que puede ser activada una célula cardíaca.
Se puede cuantificar midiendo la cantidad de corriente eléctrica necesaria para
generar un potencial de acción (Va). Los cambios en la excitabilidad de las
células cardíacas son el origen de las arritmias cardíacas.