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FACULTAD DE INGENIERÍA
PROGRAMA DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
CAMPUS BERÁSTEGUI
INTEGRANTES:
Las bacterias psicotrofas alteran la leche cruda y pasteurizada son principalmente bacilos
aerobios Gram negativos de la familia pseudomonadaceae con algún representante de las
Neisseariaceae y de los géneros Flavobacterium y Alcaligenes. Típicamente el 65-70% de
los aislamientos psicotrfos de la leche cruda pertenece al género Pseudomonacions. Aunque
la leche cruda pueden haber otros géneros como Bacillus, Micrococcus, Aerococcus y
Staphylococcus de la familia Enterobacteriaceae de algunos psicotrofos, cuando la leche se
conserva entre 3 y 7 °C, corrientemente son sobrepasado en crecimiento por los aerobios
obligados Gram negativos( especialmente especies de Pseudomonas ) la microflora
psicotrofa alterante de la leche generalmente es proteolítica y micho de sus aislamientos
producen lipasas extracelulares, fosfolipasas, y otras enzimas hidrolíticas pero son capaces
de aprovechar la lactosa. La bacteria de más frecuentemente origina defectos de flavor en la
leche refrigerada es Pseudomonas fluorescens habiéndose encontrado a menudo P.fragi,
P.putida y P.aeruginosa. Jaspe et al. Observaron que incubando la leche cruda por tres días
a 7 °c se seleccionaban una población de especies de pseudomonas cuya velocidad de
crecimiento era 10 veces mayor a 7 °c y bastante más lenta a 21 °c que la población inicial
de este mismo género. Esta cepas también tenía una actividad proteolíticas mil veces mayor
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que la población inicial de Pseudomonas; la actividad lipolíticas también fue 280 veces
mayor que la inicial. Las bacterias psicotrofas que se encuentran generalmente en la leche
cruda se inactivan en la pasteuriza.
El suelo, el agua, los animales y la materia vegetal constituyen el hábitat natural de las
bacterias psicotrofas encontradas en la leche. La materia vegetal, como la hierba y el heno
utilizados en alimentación animal pueden contener más de 10 8 bacterias psicotrofas por
gramos. Se ha visto que el agua utilizada en las granas de producción de leche contiene
bacterias psicotrofas, incluso si ha sido clorada. Aunque el agua de las granjas lecheras
corrientemente solo contiene recuentos bajos de microorganismos psicrotrofos, su empleo
para limpiar y enjuagar el equipo de ordeño constituye una vía directa de entrada a la leche.
Las bacterias psicotrofas aisladas del agua son productoras de enzimas extracelulares y
crecen rápidamente a temperaturas de refrigeración. En consecuencia, el agua es una buena
fuente de bacterias alterantes de la leche. Los pezones y la zona mamaria de las vacas pueden
albergar grandes cantidades de bacterias psicotrofas incluso después de lavarlo y
desinfectarlo. Estos psicotrofos probablemente provienen del suelo.
El equipo de ordeño como los utensilios y los tanques de almacenamiento de la leche son la
principal fuente de contaminación psicotrofos de este alimento crudo. Un buen lavado y las
medidas higiénicas reducen mucho la contaminación de este origen. Los restos de leche en
el equipo sucio son un buen nicho para las bacterias psicotrofas que penetran con el agua de
enjuagado o de la leche de las ordeñadoras, tuberías de conducción y tanques de
mantenimiento. El equipo de ordeño se fabrica generalmente con acero inoxidable que se
limpia y desinfecta fácilmente, sin embargo, para ciertas partes del mismo se utilizan gomas
u otros materias no metálicos que son difíciles de desinfectar dado que un uso moderado de
los mismos les origina poros o grietas microscópicos. Las bacterias adheridas a estas partes
son difíciles de inactivar mediante higienización química.
las especies psicotroficas de Pseudomonas aisladas de la leche que más rápidamente crecen
tienen unos tiempos de generación de este alimento de 8 a 12 horas a 3 °c y de 5,5, a 10,5
horas a3-5 °c cuando la leche contiene inicialmente una UFC/ml estas velocidades de
crecimiento son suficientes para alcanzar alteraciones unos 5 días. Sin embargo, la mayor
parte de las pseudomonas psicotrofas de la leche cruda se desarrolla mucho más lento
produciendo la alteración de la leche refrigerada de 10-20 días.
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Proteasas
Dado que las Pseudomonas son aerobios obligados, es natural que necesite oxígeno para la
producción de proteasas.
Myhara y Skura indican que la producción optima de proteasa por P. fragi tiene lugar en un
medio con 7.4 ug de oxígeno disuelto por ml, cantidad ligeramente menor que los 8.4 ug/ml
contenidos en el agua saturada.
Las mayorías de las pruebas disponibles indican que P. fluorecens regula la producción d
proteasas más para proporcionar carbono a la célula bacteriana que aminoácidos para la
síntesis proteica. La producción de proteasas la inducen varios productos de degradación
proteica de bajo peso molecular y está sometida a represión catabólica. La asparagina es el
aminoácido inductor más efectivo y el ácido cítrico un activo inhibidor de su síntesis. La
producción de proteasas de P. fluorecens va precedida en la leche del agotamiento de la
glucosa, galactosa, lactato glutamina y acido glutámico. La suplementación de la leche con
estos compuestos retrasa o inhibe la producción de proteasas.
Defectos del producto inducidos por la proteasa: las proteasas de las bacterias psicrotrofas
originan defectos en el producto bien cuando aparecen en ellos, bien como resultado de
superveniencia al tratamiento térmico. La mayoría de los investigadores han observado que
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Lipasas
La actividad lipasica requiere calcio iónico, ya que la inhibición por EDTH revierte con la
adición de Ca2+.
Loa agentes activos de superficies como los polisacáridos y lecitina, estimulan a menudo la
liberación de lipasas de la superficie bacteriana.
depende mucho de los componentes de la leche: las sales aumentan su sensibilidad mientras
que la caseína incrementa su estabilidad.
Defectos de los productos inducidos por la lipasa: los triglicéridos de la leche cruda se
encuentran en forma de globos que se protegen con una membrana de su degradación
enzimática. La leche se hace sensible a la lipolisis cuando la membrana del glóbulo se rompe
por una fuerza de cizalla excesiva. La leche cruda contiene una lipasa animal que actúa
rápidamente en la grasa si está rota la membrana. La mayoría de rancidez de la leche cruda
y de la pasteurizada se debe más a este proceso que al desarrollo de los microorganismos
productos de lipasas. En la leche cruda puede originarse suficiente lipasa bacteriana para que
se produzca defectos en los productos fabricados con ella. Puesto que las actividades
enzimáticas residuales son generalmente bajas y el ambiente de la reacción dista mucho del
optimo, solo se afecta corrientemente los productos que se almacenan mucho tiempo a
temperaturas altas. Entre estos productos se incluye la leche UHT, algunos quesos, la
mantequilla y la leche entera en polvo. Las bacterias productoras de lipasas también pueden
descontaminar la leche y la crema pasteurizada y desarrollarse en ella durante su
almacenamiento en refrigeración. El flavor y el olor a rancio debido a la acción de la lipasa
corrientemente se deben a la liberación de ácidos grasos de C4, a C8. Los ácidos grasos de
mayor peso molecular producen un flavor descrito como jabonoso. Los bajos niveles de
ácidos grasos insaturados liberados por la actividad enzimática pueden oxidarse acetonas y
aldehídos produciendo flavores extraños. La rancidez de la mantequilla puede deberse al
crecimiento de microorganismos lipolíticos durante su almacenamiento, a lipasa microbiana
termoestable residual originada por el desarrollo de bacterias psicrotrofas en la leche o en la
crema y a la lipasa de la leche o de la crema cruda cuando se elabora mantequilla con crema
rancia los ácidos grasos libres de bajo peso molecular se eliminan con la porción acuosa de
la crema; en consecuencia la mantequilla obtenida no tiene un flavor típicamente rancio si
no otro jabonoso menos pronunciado, asociado a los ácidos grasos libres. De C10 a C12 . Sin
embargo, el olor típico de la mantequilla rancia se debe a los ácidos grasos de bajo peso
molecular. Las lipasas microbianas que hay en la mantequilla son activas e incluso cuando
se almacenan a -10 °c.
Leche cruda.
las vacas antes y después del ordeño y limpieza y desinfección de equipos. La eliminación
de extracto seco residual de la leche, depositado en la superficie de contacto, es crítica para
el control de microorganismos psicrotrofos ya el residuo protege a las células bacteriana de
los desinfectantes químicos. El crecimiento en los días subsiguientes da a la formación de
una biopelicula, de alto número de baterías. El rápido enfriamiento después del ordeño evita
el crecimiento de psicrotrofos. La leche recién ordeñada pasa a la granja a unos tanques de
almacenamiento entre 30-37ºC. Puesto que las leches se recogen cada 48 horas, tres ordeños
se recolectan previamente. El segundo ordeño, no debe calentar el primer ordeño a más de
10ºC. Como se había indica los psicrotrofos se inactivan a 2ºC, por eso es importante
implementar enfriamiento rápido después del ordeño.
Productos pasteurizados.
Las bacterias lácticas se encuentran normalmente en la piel y en el canal del pezón de las
vacas. Por lo tanto, toda la leche cruda contiene amenos un pequeño número de estos
microorganismos. También hay bacterias lácticas en el ensilado, en otros piensos animales y
en las heces. En la piel de la ubre hay coliformes procedentes de su contaminación con heces;
por tanto, una limpieza deficiente de esta zona, antes del ordeño, contribuirá a que halla en
la leche grandes poblaciones de coliformes; los coliformes de la leche cruda se deben también
al acumulo de restos de leches en el equipo de ordeño que no se limpia convenientemente.
Los defectos fermentativos de los lácteos líquidos es la acidez, por bacterias lácticas. El ácido
láctico tiene un sabor y olor «ácidos» por cantidades pequeñas de ácido acético y ácido
propionico. El crecimiento de Lactococcus lactis, subespecies lactis, variedad maltigenes da
lugar a la aparición de un flavor a malta, esta cepa es única entre los lactococos por su
capacidad de producir 2-metil-propanal, 3-metilbutanal y sus alcoholes correspondientes.
Los aldehídos se producen por la descarboxilaciòn de los ácidos cetoisocaproico y
cetoisovalèrico. Ambos se utilizan para sintetizar la leucina y valina por transmisión con el
ácido glutámico. Los alcoholes correspondientes se forman a partir de los aldehídos por
acción d la alcoholdeshidrogenasa en presencia de 𝑁𝐴𝐷𝐻2 .
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Otros defectos son la estructura filamentosa. Las mayoría de las bacterias acido lácticas
producen filamentos formados por polímeros, originando un defecto conocido como leche
filante. El producto de los defectos lácteos líquidos sin fermentar se debe generalmente a
cepas concretas de lactococos. El polisacárido posiblemente se asocia con las proteínas.
Bacterias lácticas: algunas cepas de bacterias lácteas producen en los quesos defectos del
aroma y del aspecto. Los lactobacilos forman normalmente partes de la microflora
dominantes del queso Cheddar maduro. Si dominan los lactobacillus estos quesos están
predispuestos al desarrollo de textura y fisuras debido a la producción de grasas durante el
envejecimiento y maduración. Los aromas extraños también se han asociado con el
crecimiento de estos microorganismos. Los defectos gaseosos de los quesos Cheddar
madurados se asocian más frecuentemente al desarrollo de lactobacillus que al de coliformes,
levaduras y esporulados.
Bacterias coliformes: desde el 1885 se sabe que las bacterias coliformes originan defectos
gaseosos en el queso Cheddar y e otras variedades parecidas. Su crecimiento acaece
generalmente durante la elaboración o durante los primeros días de almacenamiento y por lo
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tanto se conocen como defecto de gasificación temprana. En los quesos duros como el
Cheddar, se presentan ese defecto cuando ocurra una fermentación acido láctica lenta,
incapaz de bajar rápidamente el pH, o cuando se utiliza una leche acida cruda muy
contaminada. Las variedades de queso en las que se retrasa voluntariamente la producción
de ácido por lavado de la cuajada, son muy sensibles al crecimiento de coliformes los quesos
blandos, madurados con mohos, como el Camenbert aumenta su pH durante la maduración,
con los que resulta más sensible al crecimiento de coliformes. La formación de gas en el
queso mozzarella de venta al detalle se ha atribuido al desarrollo de Klebsiella pneumoniae.
El crecimiento de coliformes en el queso de venta al detalle se manifiesta frecuentemente por
el hinchamiento del envase plástico.
Las cremas ácidas y el queso, debe su sabor a mantequilla a la producción de diacetilo durante
la fermentación. Estos productos pierden la atracción al desaparecer su flavor a la reducción
del diacetilo a acetonina y 2, 3-butanodiol. Los lactococos crecen a 7ºC para producir
diacetilreductasa suficiente para destruir el diacetilo de la leche fermentada. Otras
contaminaciones son por levaduras y coliformes.
Estas se controlan por buenas prácticas durante el ordeño manteniendo la leche cruda a
temperaturas por debajo de los 7ºC, con la pasteurización y los productos pasteurizados.
Estos crecen a velocidades lentas en comparación a las bacterias psicrotrofas. El control de
los coliformes en el queso se reduce por la pasteurización y conservando una buena higiene
durante la elaboración. Los defectos generados durante la elaboración del queso y leche
fermentada es más difícil porque en estas se implementan las bacterias acido láctica. Las
cepas de bacteria lácticas no deseadas se aíslan fácilmente del ambiente de fabricación por
lo que su control exige prestas atención la limpieza de la planta y proteger el producto durante
la manufactura.
Bacterias esporuladas
Pueden encontrarse en productos lácteos líquidos de baja acidez, conservados por calor
donde exista poca oportunidad para las bacterias vegetativas. Se incluyen productos de leche
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envasada asépticamente, leches concentradas enlatadas tanto azucaradas con o sin azúcar.
Los quesos duros, especialmente aquellos cuyas concentraciones internas de sal son bajas
también están expuestas a las alteraciones por bacterias esporuladas.
Las bacterias esporuladas generalmente alteran productos lácteos de leche cruda. Las
bacterias esporuladas de la leche cruda son principalmente las especies del genero Bacillus
siendo B. lichenifromis, B. cereus, B. subtilis, B. megaterium los que más frecuentemente se
han aislado (68, 98). Las especies de Clostridium de la leche cruda son tan escasas para su
cuantificación que deben emplearse técnicas de enriquecimiento y del número más probable.
Estas varían estacionalmente, en climas templados Bacillus y Clostridium son más
abundantes en el invierno (leche cruda) que en el verano lo que se debe a que en esta estación
decansan en yacijas contaminadas de esporas. La presencia de Bacillus en leche cruda no
sigue siempre esta estacionalidad.
La mayor parte de las esporas encontradas en la leche cruda son moderadamente termolábiles
y se destruye con los tratamientos UHT. La especie más termoresistente de la leche es
Bacillus stearohtermophilus.
Control de los defectos de los productos líquidos debidos a las bacterias esporuladas:
los métodos para controlar el crecimiento de las bacterias esporuladas en los productos
líquidos implican fundamentalmente el empleo de tratamientos térmicos adecuados. Los
tratamientos UHT originan productos microbiológicamente estables a temperatura ambiente.
Sin embargo, Cuando se aplican tratamientos sub-UHT más severos que los requeridos para
la pasteurización, la vida útil de la crema y la leche se acortan, lo que se ha atribuido a la
inactivación esporulado. La utilización de un doble tratamiento térmico el primeo es para
activar a las esporas y el segundo para destruirla, no ha dado lugar al aumento esperado de la
vida útil. La adición de la leche cruda, antes del tratamiento térmico, de ácido hipúrico, es un
estimulante natural de la germinación, no produjo la germinación de suficientes esporas para
conseguir un aumento manifiesto de la vida útil.
Levaduras y mohos
El crecimiento de los mohos en los quesos es un problema que todavía tiene un gran interés
a pesar de que se remonta a la prehistoria. Los mohos más corrientes de los quesos son las
especies de Penicillium y otras de Aspergillus, Alternaria, Mucor, Fusarium, Cladosporium
y Geotrichum, a veces se han encontrado especies de Hormodentrum. Las especies más
frecuentemente aisladas de los quesos fundidos son Penicillium roqueforti, P. Cyclopium, P.
veridicatum y P. crustosum. Del queso evasado a vacio también se han aislado especies de
levaduras del género Candida.
Para un control exitoso hay que comenzar limitando la exposición de los productos
pasteurizados a estas fuentes. Las esporas fúngicas no sobreviven a la pasteurización. Si el
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nivel de contaminación inicial es limitado, es más fácil tener éxito con las técnicas aplicadas,
entre las cuales se incluyen envasado para reducir oxígeno, almacenamiento en frio y el
empleo de anti fúngicos químicos como el sorbato, propionato y la natamicina. Ninguna de
estas medidas es plenamente eficaz. El envasado vacío del queso puede trasmitir este defecto
si los mohos crecen en fisuras de la película del plástico. Del queso tratado con sorbato se
han aislado mohos sorbato resistentes pero no de los quesos sin tratar, no obstante algunas
especies de Penicillium no son resistentes al sorbato. El sorbato puede utilizarlo como fuente
de carbono y oxidar a dióxido de carbono y agua.
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