Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
06 Cap04 PDF
06 Cap04 PDF
AGUA
Marco conceptual
El agua constituye gran parte de las plantas (Kramer y Boyer 1995; Taiz y Zeiger
2006). En solución acuosa ocurre la mayor parte de las reacciones metabólicas,
además de procesos necesarios como el crecimiento celular, la fotosíntesis y por
tanto la misma productividad (Taiz y Zeiger 2006). Por esta razón, la escasez de
agua en el ambiente de la planta origina respuestas en su crecimiento y
productividad. Para saber acerca del estado hídrico de la planta se pueden realizar
mediciones como el potencial hídrico, el contenido hídrico relativo, la tasa de
transpiración, la conductancia estomática, entre otros.
El potencial hídrico es un indicador utilizado como medida del estado hídrico en las
plantas. El potencial hídrico se basa en el potencial químico del agua que es una
expresión cuantitativa de la energía libre; es el trabajo que se debe realizar para
llevar una unidad de masa de agua ligada a un tejido o al suelo, hasta un estado de
referencia cero, que es el agua pura. Debido a que el estado de referencia es el punto
cero, los valores de potencial hídrico son negativos. El potencial hídrico de una
célula vegetal está dado por Ψw= ψs + ψm + ψp. El potencial osmótico ψs, depende de
los solutos disueltos en el agua los cuales disminuyen el potencial hídrico de la hoja
1
Contribución por igual en la preparación de este tema.
2
Autor para correspondencia: lmmelgarejom@unal.edu.co
Otra medida del estado hídrico de la planta se realiza por medio del contenido
hídrico relativo, que es un indicador del balance hídrico de la planta porque expresa
la cantidad absoluta de agua que necesita la planta para alcanzar una saturación total
(Gonzáles y Gonzáles-Vilar 2001). El contenido hídrico relativo expresa el
porcentaje de contenido de agua en un momento y tejido dado. Este valor es relativo
a la turgencia o saturación total y se halla normalmente en hojas o discos foliares de
área conocida (Smarth y Bingham 1974).
Donde:
mf= masa fresca de la hoja o disco foliar
ms= masa seca de la hoja o disco foliar
mt= masa a plena turgencia
El paso crucial para obtener el CHR es el peso turgente, para esto se recomienda
hacer una curva de imbibición de las hojas o discos foliares dado a que en un punto,
debido a la saturación hídrica, se pueden comenzar a afectar las paredes celulares,
pigmentos y otras estructuras de tal manera que las hojas comenzarán a perder agua.
A partir de la curva de imbibición se determinará el tiempo necesario para que las
hojas absorban agua hasta su punto de saturación y turgencia total (Yamasaki y
Rebello 1999).
Cada planta tiene una densidad estomática específica que influye directamente en su
tasa transpiratoria. La densidad estomática es función del número de estomas más el
tamaño de las células epidermales; por esta razón se ve afectada por la apertura de
los estomas y la expansión de las células epidermales la cual depende de muchas
El agua del suelo es de gran importancia dentro del balance hídrico porque de él la
planta extrae lo necesario para mantener los procesos metabólicos, compensando la
pérdida por transpiración. Además del suelo se extraen minerales. En el suelo el
agua se mueve sobre todo por fuerza mátrica, dada por los poros y capilares
Fase experimental
Metodología
Seleccionar tres plantas homogéneas de una misma especie, trasladarlas al
laboratorio lo más breve posible bajo cámara húmeda, limpiar las raíces y retirarlas
del tallo, igualmente separar cada uno de los demás órganos y determinar la masa
fresca de cada una de las partes, posteriormente envolver en papel periódico y
marcar; colocar en estufa con aire circulante, a temperatura de 70ºC, dejar allí por 24
horas, pasado este tiempo, retirar el material de la estufa y determinar la masa seca.
Calcular el porcentaje de agua en los diferentes tejidos en función de la biomasa
seca.
Metodología
Seleccionar una especie vegetal y retirar 10 hojas homogéneas, evitar perder el
pecíolo conservando la mayor proporción del mismo (mínimo 5mm), evitar que las
hojas se deshidraten. Tomar cinco hojas de las seleccionadas, pesarlas y determinar
el área foliar con un planímetro.
Después de pesar las hojas, colocarlas en una cámara húmeda, la cual se puede
preparar utilizando un recipiente de vidrio. En el fondo de la cámara colocar algodón
o papel absorbente húmedo dejando una capa de agua lo suficiente para que los
pecíolos queden sumergidos. Posteriormente, introducir las hojas en el recipiente,
revisar que el pecíolo quede sumergido y tapar la cámara, colocarla en un lugar con
baja iluminación, y dejar allí por dos horas. Pasado el tiempo retirar las hojas y secar
el exceso de agua, luego pesar. De esta manera se determina la masa en estado de
saturación o turgencia. Posteriormente empacar y llevar a secado en estufa por 24
horas a 70ºC. Luego de esto pesar las hojas secas.
Con las cinco hojas restantes realizar el mismo procedimiento pero trabajando con
secciones de área foliar conocida. Estas secciones foliares (mínimo 30) pueden ser
obtenidas con un sacabocados, posteriormente colocar a hidratar en flotación.
Metodología
Pesar tres cilindros o recipientes metálicos, para toma de muestras de suelo, con sus
tapas. Una vez seleccionado el sitio de muestreo retirar la vegetación superficial.
Tomar muestras de suelo a nivel superficial, a 20 y a 30 cm de profundidad, una en
cada cilindro, no compactar manualmente el suelo y cuidar que los cilindros queden
completamente ocupados por el suelo. Registrar la masa de los recipientes con las
respectivas muestras y tapas.
Para evaluar el agua de saturación en el suelo, cubrir la base de los cilindros con
papel de filtro, posteriormente con la malla plástica, y finalmente ajustar con una
banda elástica. Retirar la tapa superior de los recipientes y colocarlos en una cubeta
que tenga un nivel de agua de aproximadamente 1 cm, dejar saturar el suelo por dos
a tres horas, posteriormente colocar las tapas y registrar la masa en saturación.
Colocar el montaje en estufa con aire circulante durante 24h a 70ºC y al cabo del
tiempo hallar la masa seca. Calcular en función de la masa seca el porcentaje de
agua actual y en estado de saturación.
Metodología
Tomar tres materas con plantas sembradas con anterioridad y cubrir la superficie de
suelo con arena. Determinar el peso y regar con abundante agua. Colocar las materas
sobre sustrato suelo o gravilla o arena y a las 24 horas, luego que se ha drenado el
agua gravitacional, hallar el peso en capacidad de campo. Colocar nuevamente las
materas sobre el sustrato y cuando se observen los primeros síntomas de
marchitamiento de las plantas, pasar las materas a las respectivas cámaras húmedas
y observar si se recuperan, repetir el proceso hasta el día en el cual se alcanza la
marchitez permanente. Hallar la biomasa de las plantas, la masa del suelo y de las
materas. Pasar el suelo a secar en estufa a 70ºC por 24h y determinar su masa.
Calcular el contenido de agua del suelo en capacidad de campo y en el punto de
marchitez permanente. Determinar el contenido de agua del suelo en función de su
masa seca. Determinar el contenido de agua del suelo en función de su masa seca
deñ mismo modo que se realizó con el contenido de agua del suelo y saturación.
Metodología
El muestreo se realizará durante un día, iniciando en prealba (al amanecer).
Registrar datos cada tres horas de los factores ambientales, y de los potenciales
hídricos del suelo y de la planta. El día anterior al experimento ubicar los
tensiómetros, y termo-higrómetros o estación microclimática. El día del ensayo, en
las respectivas horas, tomar hojas con pecíolo (3 hojas) del tercio medio de la
especie seleccionada (3 plantas) y determinar el potencial hídrico con la bomba de
presión.
Luego de finalizado el día y con los datos de T y HR determinar el potencial hídrico
de la atmósfera (Azcón-Bieto y Talón 2000, Larcher 2003).
T en ºK
Todos los datos llevarlos a unidades de MPa, posteriormente graficar los potenciales
hídricos de suelo, planta, atmósfera. Analizar los resultados obtenidos. Ver caso de
estudio en la especie Abatia parviflora (Capítulo 8 de este libro)
Metodología
El muestreo se realizará durante un día, iniciando muy temprano y con toma de
datos cada hora. Seleccionar cinco hojas del tercio medio de la especie seleccionada
(tres plantas) y realizar las mediciones de tasa de transpiración y conductancia
estomática con un porómetro estado-estable. Posteriormente, graficar los datos
obtenidos, analizar y discutir los resultados teniendo en cuenta los registrados por la
estación microclimática o por termo-higrómetros.
Metodología
Tomar una rama no muy grande de una planta leñosa o en lo posible utilizar una
planta completa (el ensayo se realiza por triplicado). Colocar la rama o la planta en
una cubeta de agua para evitar cavitación y deshidratación; además de la planta
Laboratorio de fisiología y bioquímica vegetal. Departamento de biología. Universidad Nacional de Colombia
75
sumergir una pipeta con un tapón insertado. Posteriormente introducir la rama o la
planta a través del tapón y verificar que dicha muestra vegetal haya traspasado 1cm
de la longitud del tapón. Llenar un Erlenmeyer con agua desgasificada hasta rebozar,
procurar que no queden burbujas y colocar el tapón con la rama y la pipeta haciendo
presión para que el agua ascienda por la pipeta (Figura 1). Garantizar hermeticidad
en los orificios del tapón. Marcar el volumen inicial de la pipeta, evitar que queden
burbujas de aire, y con una jeringa, en la parte superior de la pipeta, incorporar una
burbuja de aire marcando su localización. Registrar su desplazamiento en función
del tiempo en intervalos de cinco minutos; este tiempo puede variar dependiendo de
la especie. Realizar una gráfica y hacer el cálculo de regresión y correlación
correspondiente.
Metodología
Determinar el área foliar y observar los estomas de tres especies vegetales, verificar
su presencia en el haz y en el envés, y cuantificar. i) Realizar observación directa de
la epidermis, para ello rasgar la hoja, tomar los bordes más delgados donde se
muestra la epidermis, realizar el montaje para observación bajo microscopio y
cuantificar. ii) realizar observación de la impresión de los estomas sobre películas de
esmalte; para ello colocar en el haz y envés de la hoja una capa de esmalte
transparente, dejar secar por tres a cinco minutos, colocar una nueva capa de esmalte
y permitir secar, repetir el procedimiento una vez más, posteriormente para retirar la
impresión colocar cinta pegante transparente sobre las capas de esmalte, retirar la
cinta y realizar el montaje para observación bajo microscopio y cuantificación de
estomas. Si la hoja presenta alta densidad de tricomas es necesario depilar y
posteriormente realizar el procedimiento de impresión de los estomas.
Es necesario observar la epidermis superior e inferior y calcular el número de
estomas por cm2. Realizar la cuantificación en diez campos visuales para
posteriormente calcular el valor en toda la superficie de la hoja.