9/12/2017 BIOQUMICA : PUNTO ISOELCTRICO

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Michell Llerena

Blog Archive PUNTO ISOELCTRICO

1. Objetivos
2014 (11)
1.1 General
julio (5) Realizar la precipitacin de la casena por efecto del Punto Isoelctrico.
CROMATOGRAFIA DE 1.2 Especficos:
AMINOACIDOS Comprender la causa de la neutralizacin de la casena.
Determinar el punto isoelctrico de la casena, mediante el uso de un ph-metro
PUNTO ISOELCTRICO

REACCIN DE BIURET 2. Marco Terico

OBTENCIN DE CASENA CASENA

CROMATOGRAFA DE AZCARES La casena es una protena conjugada de la leche del tipo fosfoprotena que se separa de la leche por
acidificacin y forma una masa blanca. Las fosfoprotenas son un grupo de protenas que estn
junio (6) qumicamente unidas a una sustancia que contiene cido fosfrico. En la casena la mayora de los
grupos fosfato estn unidos por los grupos hidroxilo de los aminocidos serina y treonina. La casena
en la leche se encuentra en forma de sal clcica (caseinato clcico). La casena representa cerca del
77% al 82% de las protenas presentes en la leche y el 2,7% en composicin de la leche lquida.
La conformacin de la casena es similar a las protenas desnaturalizadas globulares.
Followers El alto nmero de residuos de prolina en la casena causa un especial plegamiento en la cadena de
protena e inhibe la formacin de una fuerte y ordenada estructura secundaria. La casena no contiene
puentes disulfuro. De igual manera la falta de estructura secundaria es importante para la estabilidad
Seguidores (7) de la casena frente a la desnaturalizacin por calor. La carencia Fsico-Qumica de Biomolculas
Licenciatura en Biotecnologa de estructura terciaria facilita la situacin al exterior de los residuos
hidrofbicos lo que facilita la unin entre unidades proteicas y la convierte en prcticamente insoluble
en agua. En cambio es fcilmente dispersable en lcalis diluidas y en soluciones salinas tales como
oxalato sdico y acetato sdico.
PUNTO ISOELCTRICO
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Todas las macromolculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una
caracterstica de las protenas y otros biopolmeros es que la carga total que adquieren depende del pH
del medio.

BIOQUMICA As, todas las protenas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren
y de los aminocidos que la componen, as como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre
unido a la protena de forma covalente (irreversible).

Debido a la composicin en aminocidos de la protena, los radicales libres pueden existir en tres
formas dependiendo del pH del medio: catinicos, neutros y aninicos. Cualquier protena tendra una
carga neta positiva si se encuentra en un medio lo suficientemente cido debido a que los grupos
COOH de los aminocidos asprtico y glutmico estaran en su forma neutra pero los grupos amino de
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Arginina y lisina estn protonados (-NH3+).

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De igual forma si la protena se encuentra en un medio con un pH muy alto estara cargada
negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo estaran desprotonados (COO-) y los grupos
amino estaran en su forma neutra (NH2).

De lo anterior se deduce que las protenas tienen un pH caracterstico al cual su carga neta es cero. A
este pH se le denomina punto isoelctrico (pI).

En el punto isoelctrico (pI), se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas por lo que la
protena presenta su mxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su
agregacin.
3. Procedimiento
Dar click sobre el video para observa el procedimiento:

4. Resultados y Discusin
4.1 Resultado prctico:

Obtuvimos una valor de 4,76 correspondiente al pH del punto isoelectrico de la proteina presente en la
leche, la casena
4.2 Discusin:
Verificamos que el cido actico contenido en el vinagre desnaturaliza las protenas de la leche
y por accin de la centrifugacin separa la parte slida de la lquida. Al colocar el cido actico
en la caseina, esta se torna insoluble en el agua sin embargo al colocar hidrxido a la misma la
reaccin se torna reversible; es decir se solubiliza en agua.

5. Conclusiones
Se realiz la precipitacin de la casena por efecto del Punto Isoelctrico, adicionando cido
actico.
La casena al ser una protena se desnaturalizo ya que perdi su estructura nativa por efecto de la
variacin del pH ya que pas de un pH de 6.4 que es el de la leche a un pHI de 4.6 que es el de la
casena.
Se obtuvo un valor de 4,76 correspondiente al pH del punto isoelctrico de la protena presente en
la leche, la casena.
6. Bibliografa
Casena
http://www.quiminet.com/articulos/caseina-una-proteina-de-la-leche-13367.htm
2014/07/06
Punto Isoelctrico
http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/biotec_FQbiomol/Practica3FQB.pdf
2014/07/06

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