Las

membranas son cruciales para la vida de la clula: encierra la clula, define sus
fronteras y mantiene las diferencias esenciales entre el citosol y el ambiente
extracelular.
En las clulas eucariontes las membranas del RER, aparato de Golgi, mitocondria y
otros organelos: mantienen las diferencias caractersticas entre los contenidos de
cada organelo y el citosol y es lo que se define como BIOMEMBRANA.
En esta clase veremos:
1.1. Lpidos de membrana. Composicin y organizacin. Asimetra de
la distribucin de lpidos. Fluidez de la bicapa.
1.2. Protenas de membrana. Funciones de las protenas de
membrana. Tipos de protenas de membrana. Diseo bsico de
una protena transmembrana.
1.3. Plegamiento de protenas.

FUNCIONES DE LA MEMBRANA CELULAR
- Delimita el entorno y superficie celular (o del organismo), separa ambientes acuosos
de composicin distinta como los compartimientos intracelular y extracelular. La
membrana plasmtica otorga individualidad a cada clula, sin duda la membrana
plasmtica fue la primera estructura formada a lo largo de la evolucin que dio lugar a
la clula. Esta estructura genera una individualidad molecular, ya que delimita un
compartimiento molecular que encierra reacciones metablicas distintas de las
reacciones qumicas que se producen en el exterior. A su vez, esta estructura es el
lmite del espacio celular. Debido a las caractersticas estructurales de la membrana
plasmtica, especficamente a su hidrofobicidad, es que ella puede funcionar como
una estructura separadora de ambientes acuosos.

- La membrana plasmtica acta como una barrera de permeabilidad que permite a la
clula mantener una composicin citoplasmtica muy diferente del medio
extracelular. Una barrera con permeabilidad selectiva significa que las molculas
(solutos) pasan a velocidad variable. Existen diferentes solutos que se transportan a
travs de la membrana como pequeas molculas orgnicas, diferentes iones, agua y
gases, todas las cuales cruzan con permeabilidad selectiva la membrana, esto
contribuye a la generacin de diferencias en el contenido inico tanto dentro como
fuera de la clula.
El gradiente inico a travs de la membrana establecida por la actividad especializada
de protenas de membrana, se puede usar para sintetizar ATP, para manejar el
movimiento transmembrana de solutos seleccionados o como en clulas nerviosas o
musculares, para producir y transmitir seales elctricas.

- A una clula llegan mltiples estmulos y de distinta naturaleza; qumica (hormonas
y neurotransmisores) y fsica (estiramiento y presin). La capacidad de transformar
estos estmulos o seales en una seal interna que termine finalmente en una
respuesta celular, es lo que se denomina transduccin de seales y es la tercera gran
funcin de la membrana plasmtica que no puede dejar de mencionarse. Esta funcin
se logra gracias a la presencia de protenas que actan como sensores de seales
externas, permitiendo a la clula cambiar su comportamiento en respuesta a la gua
ambiental, incluyendo las seales desde otras clulas; esas protenas sensoras o
receptores, transfieren informacin (ms que las molculas) a travs de la membrana.

Entre los aos 1895 y 1959 se formularon diversos modelos que intentaron describir
la morfologa y organizacin de la membrana plasmtica, pero solo en 1970 se
produjeron grandes avances en la bsqueda de tal modelo de membrana gracias a la
aplicacin del concepto termodinmico de interacciones hidrfobas e hidrfilas entre
molculas, enlaces no covalentes como puentes de hidrgeno, e interacciones
electrostticas, para la comprensin de la estabilidad de la membrana. Se lleg a la
conclusin de que las protenas (que tambin tienen grupos polares y no polares)
deban disponerse en la membrana con sus grupos polares en contacto con la fase
acuosa y los no polares queden en el interior de la membrana.
Las tcnicas de microscopa electrnica: contraste negativo y criofractura, fueron de
gran valor en el estudio de las membranas. Con los resultados de estos estudios Singer
y Nicolson (1972) llegaron a proponer el modelo que ha sustituido a todos los
anteriores y que pese al tiempo transcurrido, se encuentra en vigencia y se aplica a
todas las membranas de la clula. Es el modelo del mosaico fluido de membrana, en el
que las protenas, lpidos e hidratos de carbono se sitan en una configuracin estable
de baja energa libre. Los lpidos forman una bicapa en la que se disponen las
protenas configuradas de acuerdo con las interacciones que establecen con las
molculas que las rodean. Hay tambin oligosacridos que se disponen sobre los
lpidos y las protenas de la cara externa de la bicapa.

Si bien todas las membranas biolgicas estn formadas por las mismas molculas, la
proporcin de ellas se modifica en cada tipo celular. Por ejemplo, la membrana
plasmtica del eritrocito de rata tiene 60% de protenas y un 40% de lpidos. Esta
proporcin es similar a la encontrada en las membranas plasmticas de la mayora de
los tipos celulares; por ejemplo, la membrana plasmtica del hepatocito de rata tiene
un 58% de protenas y un 42% de lpidos. No obstante, existen membranas
plasmticas que se alejan mucho de esta proporcin, como la mielina, que tiene un
20% de protenas y un 80% de lpidos.

LPIDOS DE LAS MEMBRANAS
Todos los lpidos de las membranas biolgicas se caracterizan por poseer una
estructura anfiflica; parte de la molcula contiene grupos que le confieren carcter
polar y el resto de la molcula es no polar. Esta caracterstica de los lpidos las hace
muy poco solubles en agua, de tal modo que al superar una concentracin que se
conoce como concentracin micelar crtica, c.m.c., los lpidos se asocian en
estructuras que exponen los grupos polares al medio acuoso, y que permiten las
interacciones de los grupos no polares entre si, evitando su interaccin con el agua. Se
conoce este fenmeno con el nombre de efecto hidrfobo.

Las propiedades hidrofbicas de las colas hidrocarbonadas de los lpidos, son
responsables de la baja permeabilidad de la membrana a sustancias polares (ej. Iones
inorgnicos y no electrolitos polares tales como la sacarosa y la insulina) y para su
correspondientemente gran permeabilidad a substancias no polares (ej. Hormonas
esteroidales).

Las diferencias en el largo y saturacin de las colas de cidos grasos influencia cmo se
empaquetan las molculas de fosfolpidos, mas aun afectando la fluidez de la
membrana.

ESTABILIDAD DE LAS MEMBRANAS
La estructura cerrada de las bicapas lipdicas es estable ya que evita que las colas
hidrofbicas se expongan al agua, lo cual sera energticamente desfavorable.
Este extraordinario comportamiento de las bicapas ha sido fundamental para la
creacin de las clulas vivas, y est dada directamente por la forma y la naturaleza
anfiflica de las molculas de fosfolpidos.

Otra caracterstica fundamental de la bicapa lipdica, que la hace una excelente
estructura para las membranas celulares, es su fluidez, que es crucial para las
mltiples funciones de la membrana.

Para entender por qu la bicapa de fosfolpidos funciona perfectamente como un
lmite celular, tenemos que entender cmo es la interaccin entre molculas
hidrofbicas e hidroflicas y el ambiente acuoso.

Las molculas hidroflicas se disuelven verdaderamente en agua debido a que ellas
contienen grupos cargados o grupos polares no-cargados que forman interacciones
electrostticas favorables unas con otras o puentes de hidrgeno con molculas de
agua. Las molculas hidrofbicas, en contraste, son insolubles en agua debido a que
casi todos sus tomos son no-cargados o no-polares y entonces no pueden formar
interacciones energticamente favorables con el agua. Si las dispersamos en agua, ellas
fuerzan a las molculas de agua adyacentes a reorganizarse en jaulas tipo-hielo que
rodean a la molcula hidrofbica. Debido a que la estructura de jaula es ms ordenada
que el agua que la rodea, su formacin aumenta la energa libre. Este costo energtico
es minimizado, sin embargo, si las molculas hidrofbicas (o las porciones
hidrofbicas de molculas anfiflicas) se agrupan de modo que el menor nmero de
molculas de agua sea afectada.

Las regiones hidrofbicas e hidroflicas de las molculas lipdicas se comportan de esta
misma forma

FLUIDEZ Y MOVIMIENTO DE LPIDOS EN BICAPAS
Una variedad de tcnicas se han usado para demostrar que las molculas lipdicas en
una membrana raramente se mueven de una cara a la otra (flip-flop, una vez por mes),
pero intercambian lugares con molculas adyacentes en una monocapa alrededor de
107 veces por s. Este enrgico intercambio lipdico dentro de una membrana, resulta
en una migracin rpida a lo largo del plano de la membrana, pero no a travs de ella.

Los lpidos presentes en las membranas biolgicas tienen la capacidad de
experimentar movimientos traslacionales y rotacionales en el plano de la bicapa, lo
que hace que la bicapa constituya un fluido bidimensional.

La disipacin de la energa cintica hacia el medio que la rodea es funcin de la fluidez
del medio. En este contexto la definicin de fluidez de una membrana es la propiedad
que indica con qu facilidad es posible el movimiento (traslacional, rotacional y
vibracional) dentro de ella.

La fluidez de la membrana se refiere especficamente a las propiedades de la regin
hidrfoba de la membrana. Por lo tanto, una descripcin cuantitativa de la fluidez
debe comprender los movimientos de los lpidos en cuanto a la velocidad de
movimiento de sus cadenas acil y la orientacin de ellas con respecto al plano de la
bicapa, sin considerar el movimiento de las cabezas polares.

Una membrana muy fluida permite mayor movimiento dentro de ella.
La fluidez de una membrana es una propiedad macroscpica resultante de la suma de
las propiedades individuales de sus componentes y se podra considerar que tiene una
relacin inversa a su viscosidad.

ASIMETRA DE LA BICAPA LIPDICA
La distribucin de las especies lipdicas difiere entre las dos monocapas lipdicas y
sta asimetra es funcionalmente importante.
En la membrana plasmtica del GR, por ejemplo, casi todas las molculas de
fosfolpido que tienen colina en su grupo de cabeza (fosfatidilcolina y esfingomielina),
estn en la monocapa externa, mientras que casi todos los que contienen un grupo
amino primario terminal (fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina), estn en la
monocapa interna.

PROTENAS DE MEMBRANA
Las protenas le confieren a la membrana su funcionalidad, la hacen selectiva al paso
de iones y molculas polares y participan en la transduccin de energa y de
informacin a ese nivel. Se debe a esto que la composicin de la membrana respecto al
tipo de protenas que en ella se encuentran sea tan variable como variables son las
funciones que en ella residen.

Las membranas biolgicas ms simples son aquellas que contienen una o pocas
protenas predominantes, sin embargo la mayora de las membranas poseen
numerosas protenas que les permite llevar a cabo una multiplicidad de funciones.

La presencia de reas hidrfobas e hidroflicas en la misma molcula es caracterstica
de las protenas de membrana. Esta particularidad hace que estas protenas en
general no sean solubles en las soluciones acuosas, haciendo necesaria la presencia de
detergentes para su solubilizacin y posterior estabilidad en soluciones polares.
El tipo de asociacin de una protena con la bicapa depende directamente de la
estructura de la protena. De acuerdo al modelo del mosaico de Singer y Nicolson y
utilizando como criterio el mtodo bioqumico para solubilizarlas, es posible clasificar
las protenas de membrana en dos grandes grupos: protenas integrales o intrnsecas y
protenas perifricas o extrnsecas.

Protenas integrales o intrnsecas
En general las protenas intrnsecas poseen un mayor contenido de regiones
hidrfobas que las protenas extrnsecas, y son ms difciles de extraer desde las
membrana. Su solubilizacin requiere la ruptura de la bicapa y slo es posible con el
uso de detergentes en alta concentracin (varias veces la c.m.c del detergente) o con
solventes orgnicos. Estas protenas al solubilizarse retienen molculas de
fosfolpidos asociados a ellas por interacciones hidrfobas. En ausencia de fosfolpidos
y detergentes ellas tienden a agregarse y a precipitar debido a su alta hidrofobicidad.
Las protenas intrnsecas pueden tener segmentos polares a uno o ambos lados de la
membrana y presentar uno o varios segmentos que atraviesan la bicapa, denominados
segmentos de transmembrana. Otras protenas integrales estn ancladas a la bicapa a
travs de una cola hidrfoba pero mantienen la mayor porcin de su masa fuera de
ella. Por accin de enzimas proteolticas es posible separar la regin hidroflica de la
membrana, la que una vez en solucin acuosa se comporta en forma similar a
cualquier protena hidrosoluble ya que es totalmente hidroflica y estable en
soluciones acuosas.

Conociendo la secuencia primaria de una protena (secuencia aminoacdica) y
utilizando algunos mtodos especficos, es posible hacer un diagrama de
hidropaticidad de la protena y detectar los presuntos segmentos hidrfobos e
hidroflicos y as postular un modelo de la estructura secundaria de la protena, que
puede ser del tipo -hlice u hoja-.

Protenas perifricas o extrnsecas
Al enunciar el modelo de mosaico fluido, Singer y Nicolson describieron el papel de las
protenas perifricas con las siguientes palabras: se supone que solo las protenas
integrales son crticas a la estructura e integridad de las membranas biolgicas. Por lo
tanto, las propiedades e interacciones de las protenas perifricas, aunque interesantes
en si mismas pueden no ser directamente relevantes al problema central de la estructura
de la membrana. Esta visin ha cambiado en forma drstica en los ltimos aos.
Existen numerosas evidencias que indican que las protenas perifricas juegan un
papel central en determinar la estabilidad de las membranas biolgicas. Participan,
adems, a travs del citoesqueleto en el control de la movilidad de las protenas
integrales.
Por definicin las protenas perifricas pueden extraerse de las membranas usando
tratamientos suaves, tales como aumento de la fuerza inica, cambios de pH, adicin
de detergentes en concentraciones bajas (menores que la c.m.c), o agentes caotrpicos
como por ejemplo urea. Estas protenas son primordialmente de naturaleza
hidroflica, por lo tanto estables en soluciones acuosas, y no presentan uniones
covalentes al material lipdico.
Comnmente las protenas perifricas se encuentran interactuando con segmentos
hidroflicos de las protenas integrales a travs de interacciones inicas. Por esta
razn son fcilmente extradas por mtodos que afectan las interacciones inicas.

La naturaleza de las protenas de membrana determina su funcin, as existen
protenas:
Canal: son protenas que actan como poros por los que determinadas sustancias
pueden entrar o salir de la clula.
Transportadoras: son protenas integrales que cambian de forma para dar paso a
determinados solutos.
Receptores: Son protenas integrales que reconocen determinadas molculas a las
que se unen o fijan. Estas protenas pueden identificar una hormona, un
neurotransmisor o un nutriente que sea importante para la funcin celular. La
molcula que se une al receptor se llama ligando.
Enzimas: pueden ser integrales o perifricas y sirven para catalizar reacciones a en la
superficie de la membrana en su cara interna o externa.
Anclajes del citoesqueleto: son protenas perifricas que se encuentran en la cara
citoslica de la membrana y que sirven para fijar los filamentos del citoesqueleto.
Marcadores de la identidad de la clula: son glicoprotenas y glicolpidos
caractersticas de cada individuo y que permiten identificar las clulas provenientes
de otro organismo. Por ejemplo, las clulas sanguneas tienen unos marcadores ABO
que hacen que en una transfusin slo sean compatibles sangres del mismo tipo. Al
estar hacia el exterior las cadenas de carbohidratos de glicoprotenas y glicolpidos
forma una especie de cubierta denominada glicoclix.

HIDRATOS DE CARBONO DE LAS MEMBRANAS
Los hidratos de carbono estn presentes en la membrana plasmtica unidos
covalentemente a protenas (glucoprotenas) o a lpidos (glucolpidos). Se encuentran
del lado externo y son generalmente oligosacridos. La clula queda as cubierta por
una envoltura de material hidrocarbonado, denominado glicoclix.
Las protenas glicosiladas se encuentran siempre en la cara no citoslica de la
membrana.

Una de las principales funciones de la pared de carbohidrato es proteger a la clula
contra el dao mecnico y qumico, como tambin permite mantener protenas
separadas, libres de interaccin. Las secuencias de los oligosacridos (no mas de 15
azcares), determinan el reconocimiento celular.
MOVIMIENTO DE LAS PROTENAS DE MEMBRANA
Es posible determinar la lateralidad de una protena de membrana usando tcnicas de
marcaje de superficie con anticuerpos o con agentes farmacolgicos radiactivos.
Las protenas integrales se desplazan individualmente o asociadas a otras en la
membrana. En principio estas protenas pueden moverse con cierta libertad por
difusin lateral dependiendo de si establecen interacciones con las protenas
citoplasmticas y del citoesqueleto, de la densidad de empaquetamiento de protenas
en la membrana y de la fluidez de la bicapa.
El modelo del mosaico fluido visualiza tanto a los lpidos como a las protenas
efectuando movimientos traslacionales y rotacionales en el plano de la bicapa. Sin
embargo existen protenas que tienen un alto grado de movilidad rotacional, pero
otras una movilidad muy restringida, pero igualmente funcionales.