LABORATORIO DE FISIOLOGA VEGETAL. Prof. Jorge Alonso Leyva Rojas MSc, Dr.rer.

nat 1

UNIVERSIDAD DEL ATLANTICO

FACULTAD DE CIENCIAS
PROGRAMA DE BIOLOGA
PRACTICA DE LABORATORIO DE FISIOLOGA VEGETAL No. 1
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS EN CELULAS VEGETALES

Objetivos:
- Comprobar la presencia de algunas biomolculas como polisacridos, protenas y lpidos en
tejidos vegetales y semillas
- Asociar estructura y funcin de macromolculas en las clulas y tejidos vegetales

Marco Terico:

1. AZCARES SIMPLES:

2. POLISACRIDOS:
Los polisacridos caractersticos de las plantas son el almidn y la celulosa.

La celulosa es el componente principal de la pared celular de los vegetales. La celulosa es un

polisacrido insoluble, que contiene desde varios cientos hasta varios miles de unidades de
glucosa.
La celulosa tiene una estructura lineal o fibrosa, en la que se establecen mltiples puentes de
hidrgeno entre los grupos hidroxilo de distintas cadenas yuxtapuestas de glucosa, hacindolas
impenetrables al agua, lo que hace que sea insoluble en agua, y originando fibras compactas que
constituyen la pared celular de las clulas vegetales.

La funcin de la celulosa: es un polisacrido estructural en las plantas ya que forma parte de los
tejidos de sostn.

El almidn es un polisacrido de reserva alimenticia predominante en las plantas. El almidn

se diferencia de todos los dems carbohidratos en que, en la naturaleza se presenta como
complejas partculas discretas (grnulos)..

3. LPIDOS: En las clulas los lpidos tienen tres funciones bsicas: ser componentes
estructurales bsicos de las membranas biolgicas, almacn de energa y actuar como molculas
sealizadoras, es decir, transportadoras de informacin.

-Los glicerolpidos: son los lpidos ms abundantes (ms del 70 % ) de las membranas
celulares. tienen un papel relevante en su estructura bilaminar y en sus propiedades fsicas.
-Cloroplatos: Este orgnulo es el principal centro de produccin de cadenas de cidos grasos
de las clulas vegetales. Estos cidos grasos se exportan al retculo endoplasmtico, donde se
 utilizan para la sntesis de otros lpidos. Los cloroplastos tienen una composicin particular de
lpidos, entre los que se encuentran los galacto glicerolpidos, los cuales slo se sintetizan y se
encuentran en los cloroplastos.

4. PROTENAS

5. SUDAN III: La tcnica del sudn III es un mtodo utilizado generalmente para demostrar la
presencia de grasas mediante tincin de triglicridos, aunque tambin tie otros lpidos.

6. EOSINA: compuesto cido cuya propiedad est basada en su polaridad negativa, lo que le
permite enlazarse con constituyentes celulares de carga positiva. Por ello colorea componentes
y orgnulos citoplasmticos, pero no los ncleos (que son bsicamente cidos nucleicos y estn
cargados negativamente).

La coloracin resultante de la tincin con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas.

La eosina es un colorante muy usado en tinciones de vitalidad. Al ser un colorante aninico

(carga negativa) no penetra en el interior celular a no ser que la membrana sea permeable.

7. LUGOL: Se emplea para detectar la presencia de almidn en alimentos

Materiales y mtodos:

1 encendedor
1 papa REACTIVOS
1 Cebolla cabezona Eosina al 1%
pequea Sudan III
5-10 frijoles frescos con Reactivo de Lugol
dos das de
germinacin, 5-10
semillas de man fresco
sin cascara
elodea

15 portaobjetos con
cubreobjetos
1 Pinza de diseccin
1 Bistur
2 Cuchillas de afeitar
1 Aguja de diseccin
1 Microscopio ptico

1. Identificacin de azcares estructurales (Pared celular)

A. Realizar con un bistur cortes de 1cm2 en la cebolla cabezona

B. Separar la epidermis adherida a la superficie de la cebolla con ayuda de pinzas y aguja de
diseccin

C. En un porta objetos se extiende la epidermis cuidadosamente, se agrega 1 gota de lugol y se

deja actuar por 5 mins. Se retira el exceso de reactivo con ayuda de papel absorbente, se coloca
una gota de agua y se coloca el cubre objetos

D. Se coloca la muestra en el microscopio y se hace la identificacin de las estructuras coloreadas

(10x,40x,100x)
2. Identificacin de azcares de almacenamiento (Almidn) en clulas de papa

A. Se toma una papa, se hace un corte y con una de las partes se vuelve a realizar un corte pero
este debe ser delgado

B. Se hace el montaje en el porta-cubre objetos

C. Se debe verificar la observacin de: clulas del tubrculo

D. Cuando se observen las clulas se retira el cubreobjetos y se adiciona una gota de lugol y se
hace el montaje de nuevamente.

E. Al observar en el microscocpio se deben identificar los granulos de almidon- estructuras

coloreadas (10x,40x,100x)

F. Diferencias entre montaje 1 y 2

3. Identificacin de protenas en frijol

A. Se toma un grano de frijol, se separa cuidadosamente con una cuchilla la cutcula que cubre
el cotiledn del semilla

B. Se extiende el tejido aislado en un porta objetos

C. Se le agrega 1 gota de solucin alcohlica de eosina al 1%

D. Se deja actuar por 10 mins

E. Se quita el exceso de colorante con agua y se le coloca el cubre objetos

F. Se hace la observacin de las clulas de la cutcula (10x-40x)

4. Identificacin de lpidos en semillas de Man

A. Se corta uno de los granos de mani por la mitad y se realizan cortes finos con la cuchilla de
afeitar

B. Se coloca en el porta objetos y se le adiciona 1 o 2 gotas de sudan iii

C. Se deja actuar por 10 mins

D. Se lava el exceso del colorante y se hace el montaje porta-cubreobjetos

E. Se hace la observacin en elmicroscopio (10x,40x)

Segn las caractersticas del reactivo sudan iii que tipos de lpidos son reconocidos
Bibliografa: Se citan los textos consultados para la realizacin del informe, en orden alfabtico de
los autores; segn normas ICONTEC 2015/2016 que pueden encontrar en el siguiente link:
http://normas-icontec.com/referencias-bibliograficas-en-normas-icontec/
Para Libros:
STEWART, James. Clculo Multivariable. Cuarta Edicin. Traducido por Jorge Humberto Romo
Ciudad de Mxico. Thomson Learning , 2002. p 25-28.
Murray R. K. et al. Bioqumica de Harper. 15 Edicin. Mxico: Editorial El Manual Moderno,
2001. p 96-115.
Para artculos:
MARTIN, Ren. As va la campaa presidencial en Venezuela. En: Revista Semana, 27 de Agosto
de 2012 Vol 8, no. 2, p 14-17.