INTRODUCCIN

La espectrofotometra es un mtodo de anlisis ptico muy usado en las investigaciones

qumicas y ms frecuentemente biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento de
laboratorio, fcil de maniobrar, que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida
por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.
A partir de dicho instrumento podemos obtener la transmitancia y la absorbancia de
diferentes sustancias que nos permiten principalmente hallar la concentracin de una
solucin, tambin permite determinar la estructura molecular y unidad estructural
especficos.

RESUMEN

El principal objetivo en el presente informe es la determinacin de la concentracin de

manganeso en una muestra de acero en ppm a travs del mtodo espectrofotomtrico. Para
obtener dicho resultado se oxida el Mn+2 hasta formar MnO4-2 que puede absorber la luz
visible. Para determinar la concentracin del Mn se emple la tcnica de curva de
calibracin que consiste en preparar solucin con concentracin del analito en forma
creciente y tomando lectura de la absorbancia de estas para luego graficar absorbancia VS.
Concentracin, luego de obtener dicha curva (recta), se proceder a obtener la
concentracin de Mn en la muestra de hierro utilizando su absorbancia obtenida a travs del
espectrofotmetro.
 PRINCIPIOS TERICOS

ESPECTROSCOPA MOLECULAR UV-VIS (ULTRAVIOLETA-VISIBLE)

Es un mtodo analtico que mide la

absorcin de la luz, dependiente de las
longitudes de onda, en la regin visible o
ultravioleta.

Una muestra en solucin es irradiada en el

rango del UV-Visible. Ciertas longitudes de
onda son selectivamente absorbidas por la
muestra produciendo un patrn espectral
caracterstico, el cual puede ayudar a
identificar el material.

Para la determinacin en la regin ultravioleta es necesario emplear porta muestras de

cuarzo que no absorba en esta zona del espectro.

Los componentes bsicos de los espectrofotmetros son similares a los de un colormetro

pero con mejoras y ampliaciones que les permitan una mayor precisin en las medidas.

Se distinguen dos tipos fundamentales: los de chorro simple y los de chorro doble. Estos
ltimos son ms prcticos ya que permiten obtener directamente la absorcin relativa de la
muestra respecto a la referencia en todo el intervalo de longitudes.

Fundamento de la tcnica:

Cuando un haz de luz atraviesa una disolucin con un soluto absorbente, la intensidad de
este haz se disminuye debido a la absorcin de una parte de la energa radiante de una
frecuencia caracterstica por parte de molculas o de iones del soluto cuando se excitan a
niveles energticos superiores.
En general podemos decir que:

Yo=Ya+It+ir

Donde Y o es la intensidad de luz incidente, Y a es la intensidad de luz absorbida, Y t es la

intensidad de la luz transmitida y I r puede ser eliminada.

Nuestros ojos detectan longitudes de onda de la luz visible no absorbida, es decir, la luz que
transmitida. Las medidas de la cantidad de luz transmitida se pueden hacer con un
instrumento llamado espectrofotmetro, un esquema del que se muestra en la figura y que
consta fundamentalmente de una fuente de luz, un selector de longitud de onda, una cubeta
de material transparente a la radiacin y un detector.

La absorbancia (A) de la sustancia se relaciona con la intensidad de la luz incidente y de la

luz transmitida segn la ecuacin conocida como ley de BOUGIES-Lambert-Beer:

P
A = log T = log (P ) = b c
0

Dnde:
A = absorbancia

T = transmitancia

= absortividad molar; es una constante de proporcionalidad que depende de la sustancia y

de la longitud de onda. (Unidades: mol -1)

P = intensidad de la luz transmitida

P0= intensidad de luz incidente

b = espesor de la celda o paso de luz (unidades: cm)

c = concentracin de la sustancia que absorbe (unidades: mol/L)

 REACCIONES IMPORTANTES

Tratamiento de la muestra de Acero para determinacin de Mn:

Dilucin de la muestra con los cidos H3PO4 + HNO3 + Agua:

Fe 2 HNO3 Fe 3 NO2 NO
MnO HNO3 Mn 2 NO2 NO

Al realizar la disolucin de la muestra, la mezcla de cidos H3PO4 + HNO3: acta sobre los
componentes dejndolos en estados inicos, donde el cido ntrico acta tanto en la muestra de
acero como en el de manganeso y el cido fosfrico va a acomplejar al in frrico dando un
complejo incoloro, cuya reaccin es la siguiente:

2PO 43 Fe 3 Fe(PO 4 )2
3

Complejo incoloro

Agregacin de Sal de Mohr: ( NH4 )2 Fe(SO4 )2 6H 2O

La adicin de sal de Mohr es para dar las mismas condiciones a la muestra patrn con el fin de
igualar el contenido de hierro de los patrones con el hierro contenido en la muestra de acero a
determinar. Oxidacin del Mn con la adicin de peryodato de potasio.

2Mn 2 5IO4 3H2O 2MnO 4 5IO 3 6H

Reacciones en el equipo de espectrofotometra:

En el proceso de absorcin de radiacin electromagntica una especie, en un medio
transparente, capta selectivamente ciertas frecuencias de la radiacin electromagntica. El
fotn absorbido hace pasar la especie M a un estado excitado M*:
M + h M*
Tras un corto periodo, se pierde la energa de excitacin, generalmente en forma de calor, y la
especie vuelve a su estado fundamental:
M* M + Calor
 DETALLES EXPERIMENTALES

Materiales

Propipeta y pipetas volumtricas de 1, 2, 3, 5 y 10ml

Fiolas de 250, 150 y 50ml
Vasos de 250, 150 y 50ml
Pisetas

Reactivos

Mezcla de cidos (partes iguales de cido ntrico, cido fosfrico y agua)

cido Fosfrico
Agua
Sal de Mohr QP
Peryodato de Potasio ( KIO4 )
Solucin patrn de Manganeso. Se disuelve 0.1540g de MnSO4.H2Oy se lleva a enrase
en fiola de 250Ml.

Equipos

Balanza analtica
Espectrofotmetro visible GENESYS

Procedimiento experimental

Calibracin del espectrofotmetro GENESIS

Se calibr el espectrofotmetro usando el CoCl2.6H2O y la solucin de HCl al 1%

como blanco. Con la solucin de CoCl2 en HCl al 1% se hacen medidas de la
transmitancia entere el rango de 450 nm a 700nm, hallando de esta manera el
 mximo, el cual al coincidir con el valor indicado con el catlogo indicara que la
calibracin es correcta.

Determinacin mxima del mximo del permanganato

Se utiliza el blanco y el patrn 2. Con ello se determin el mximo para el

permanganato mediante la grfica N3. Se determin que el mximo es 530 nm, el
cual se encuentra en la tabla N3.

Determinacin cuantitativa del manganeso en el acero

Para la muestra
Pesar 0.12g aprox. de la muestra de acero, colocar la muestra en vasos de 250ml.
Anotar el peso y etiquetar cada vaso para diferenciarlos. Luego aadir 20 ml de la
mezcla de acidos, tapar con la luna de reloj y colocar sobre la plancha; llevar a
ebullicion y retirar cuando todos los oxidos de nitrogeno hayan sido expulsados.
Enfriar unos minutos, seguidamente lavar con agua destilada la luna de reloj haciendo
que el agua se reciba dentro del vaso diluir hasta unos 50ml con agua destilada,
seguidamente aadir 0.1000g de KIO4 y hervir hasta oxidar el manganeso , tomara
una coloracion violeta. Luego enfriar la solucion y llevar a fiola de 250 ml hasta el
enrase.
Seleccionamos en el equipo la longitud maxima que hallamos para el permanganto, y
medimos la transmitancia de las cuatro muestras.
Para los estandares
Pesar por triplicado 0.2000 g de sal de mohr y se lleva a vasos de 250 ml , agrgar a
cada vaso 20 ml de la mezcla de acidos. Tapar con la luna de reloj y colocar sobre la
plancha electrica . llevar a ebullicion y retirar cuando todos los oxidos de nitrogeno
hayan sido expulsados. Sacar de la plancha y enfriar , lavar las lunas de reloj en la
misma forma como se hizo con la muestra ,luego aadir con pipetas volumetricas 2ml,
5 ml y 10ml de solucion patron de sulfato de manganeso monohidratado a los tres
vasos respectivamente. Seguidamente diluir hasta cerca de 50ml con agua destilada y
cuidadosamente agregar 0.1000 g de KIO4 en los cuatro vasos. Hervir por unos tres
minutos, para oxidar el mangameso. Luego enfriar y llevar a fiola a 100ml. Luego
medir las transmitancia de los tres estandares .
Finalmente con las transmitancias obtenidas en las muestras y los estandares hallar sus
respectivas absorvancias . con los datos obtenidos de los estandares hacer una curva de
trabajo Absorvancia vs concentracion que nos servira para hallar la concentracion de la
Mn de la muestra a partir de las absorbancias obtenidas por interpolacion.
Luego calculamos el porcentaje de Mn en la muestra de acero.
 CLCULOS

A) Calibracin del espectrofotmetro SPECTRONIC C-20 GENESIS

Para la grfica de %T vsy Absorbancia vs. del CoCl2 en HCl 1% en el rango de 450 a

700nm se utiliza:

%T
A = log( )
100

Para calcular la absorbancia del cloruro de Cobalto a 450 nm. Se lee del espectrofotmetro
un valor de %T igual a 47.4%:

47.4
A = log( )
100

A = 0.324

La absorbancia se presenta en la tabla 2

B) Determinacin del max del KMnO4

Escoger el que tiene la mayor absorbancia o menor transmitancia de la tabla 3.

C) Determinacin cuantitativa de manganeso en acero

Se calcula la concentracin del Mn en cada uno de los patrones

-PATRN 1:
0.1590 g MnSO4. H2O PA Mn
W(g) Mn250mL = x
250mL PF MnSO4H2O

0.1590g 54.94g/mol
C(gmL)Mn = = 2.0683x104 g/mL
250mL 168.94g/mol
 mg 1000mL
C(gmL)Mn = 0.20683 = 206.83 mgL
mL 1L

CMn = 206.83ppm

Ahora se calcula la concentracin para 2mL del patrn diluidos en 100mL

2mL
P1 = 206.83 mgL
100mL

P1 = 4.1366 mgL

Se repiten los clculos para los patrones P2 y P3

5mL
P2 = 206.83 mgL = 10.3415 mgL
100mL

10mL
P3 = 206.83 mgL = 20.6830 mgL
100mL

MUESTRAS (M):

Se calcula la concentracin total de la muestra en base al peso de dicha muestra diluido en

100mL.

CMtotal = 0.1200g100mL = 1.2 103 mgL

Del grfico N 3 se obtienen las concentraciones de manganeso (Mn) en la muestra.

 CM = 9.1572 mgL

Determinacin del % de Mn en cada muestra de acero

Se utiliza la siguiente frmula:

CM
%Mn = x100%
CMtotal

9.1572 mgL
%Mn = 100% = 0.7631% 0.76%
1.2 103 mgL
 Tabulacin de datos y resultados experimentales
1. Concentracin de Mn en Patrones

Patrn Concentracin de Mn(mg/L)

1 4.1366
2 10.3415
3 20.6830
Tabla 1

2. Verificacin de la calibracin del espectrofotmetro con cocl2 en HCl al 1%.

(nm) T(%T) A
450 47.4 0.324
460 36.5 0.438
470 30.4 0.517
480 26.1 0.583
490 22.9 0.640
500 19.2 0.717
510 17.3 0.762
520 18.2 0.740
530 22.6 0.646
540 31.8 0.498
550 44.7 0.350
560 59.9 0.223
570 73.3 0.135
580 80.6 0.094
590 86.8 0.061
600 88.5 0.053
610 88.5 0.053
620 86.3 0.064
630 90.8 0.042
640 90.3 0.044
650 92.4 0.034
660 93 0.032
670 94.3 0.025
680 95.1 0.022
690 96 0.018
700 97.3 0.012
 Tabla 2

3. Determinacin de la longitud de onda mxima ( mx) del Mn

(nm) A
480 0.173
490 0.251
500 0.327
510 0.412
520 0.486
530 0.514
540 0.486
550 0.476
Tabla 3

4. Absorbancia de las soluciones patrones y muestras.

Patrn Absorbancia
1 0.224
2 0.510
3 1.011
Muestra 0.460
Tabla 4

TABLA DE RESULTADOS

1.-Pocentaje de Mn en muestra de acero.

Concentracin total Concentracin de Mn % de Mn en

de la muestra (mg/L) en la muestra (mg/L) la muestra
Muestra 1.2 103 mgL 9.1572 mgL 0.76
Tabla 5
GRFICAS EXPERIMENTALES

A) VERIFICACIN DE LA CALIBRACIN DEL ESPECTROFOTMETRO CON CoCl2 en HCl al 1%.

(nm) T(%T) A
450 47.4 0.324
460 36.5 0.438
470 30.4 0.517
480 26.1 0.583
490 22.9 0.640
500 19.2 0.717
510 17.3 0.762
520 18.2 0.740
530 22.6 0.646
540 31.8 0.498
550 44.7 0.350
560 59.9 0.223
570 73.3 0.135
580 80.6 0.094
590 86.8 0.061
600 88.5 0.053
610 88.5 0.053
620 86.3 0.064
630 90.8 0.042
640 90.3 0.044
650 92.4 0.034
660 93 0.032
670 94.3 0.025
680 95.1 0.022
690 96 0.018
700 97.3 0.012
Tabla 2
 Grfica 1
vs %T

120

100
%Transmitancia

80

60

40

20

0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Longitud de Onda(nm)

Grfica 2
vs A

0.900
0.800
0.700
0.600
Absorbancia

0.500
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Longitud de Onda(nm)
B) DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA MXIMA DEL KMnO4 ( mx)

(nm) A
480 0.173
490 0.251
500 0.327
510 0.412
520 0.486
530 0.514
540 0.486
550 0.476
Tabla 3

Grfica 3
vs A

0.6

0.5

0.4
Absorbancia

0.3

0.2

0.1

0
470 480 490 500 510 520 530 540 550 560
Longitud de onde (nm)
C) Determinacin cuantitativa de manganeso en acero

Patrn Concentracin(mg/L) Absorbancia

1 4.1366 0.224
2 10.3415 0.510
3 20.6830 1.011
Muestra 9.1572 0.46

Grfica 4
Concentracin vs A

1.200

1.000

0.800
Absorbancia

0.600

0.400
y = 0.0477x + 0.0232
R = 0.9998
0.200

0.000
0 5 10 15 20 25
Concentracin(mg/L)
 RESULTADOS Y DISCUSIN
Se hall la longitud de onda mximo del COCl2.6H2O en la calibracin del instrumento,
la cual nos resulta 510 nm.
La grfica absorbancia vs. concentracin nos da muy aproximadamente una recta (cumple
con la ley de Beer) ya que se prepar bien las soluciones para la curva de calibracin.
El porcentaje de manganeso obtenido en el experimento fue de 0.76% y ya que l %de
Mn en el acero oscila entre 0,25- 0,4%, podemos decir que tuvimos un resultado
satisfactorio

CONCLUSIONES
El fundamento de espectrometria de absorcion es la absorcion de radiacion por un atomo
o molecula. En este caso el ion del manganeso absorve y observamos una relacion entre el
cambio de concentracion y la transmitancia obtenida.
El Blanco debe contener todos los reactivos utilizados en la preparacin de la disolucin
coloreada, pero nada de la sustancia que se est analizando, en este caso el Manganeso
(morado).
 RECOMENDACIONES

Las ventanas de las celdas de absorcin se deben mantenerse escrupulosamente limpias,

pues tanto las huellas digitales como rastros muestras anteriores pueden ser causa de error
considerable en determinaciones cuantitativas.
La utilizacin de este mtodo es muy bueno ya que se puede determinar partes por milln
de muchas sustancias, o inclusos de cantidades menores, de este modo la sensibilidad de
este mtodo es muy buena.

BIBLIOGRAFA

Skoog, D.A. y West, D.M. 1984. Anlisis Instrumental. 2a edicin. Ed. Interamericana.
Rubinson, K. A., Rubinson, J. F. Anlisis Instrumental. Pearson Educacin, S.A. Madrid,
Espaa, 2001.

GUIA DE LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL, UNMSM, 2017.