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UNIVERSIDAD POLITCNICA DE VALENCIA

DEPARTAMENTO DE INGENIERA ELECTRNICA

ADQUISICIN Y TRANSMISIN DE

BIOSEALES

Master en Ingeniera Biomdica

2. TCNICAS PARA LA MEDIDA DE SEALES CLNICAS DE LABORATORIO.


MEDIDAS ELECTROQUMICAS, MEDIDAS PTICAS Y MEDIDAS DE
TEMPERATURA

ANTONIO MOCHOL SALCEDO


VALENCIA, FEBRERO DE 2014
2.- TCNICAS PARA LA MEDIDA DE SEALES CLNICAS DE
LABORATORIO. MEDIDAS ELECTROQUMICAS, MEDIDAS
PTICAS Y MEDIDAS DE TEMPERATURA

2.1.- INTRODUCCIN

2.2.- MEDIDAS ELECTROQUMICAS


2.2.1.- Introduccin
2.2.2.- Medida con electrodos ion-selectivos
2.2.3.- Medida de pH
2.2.4.- Medida de pH en laboratorio: pHmetro
2.2.4.1.- Qu es?
2.2.4.2.- Cmo funciona?
2.2.4.3.- Mantenimiento y calibrado
2.2.4.4.- Precauciones y posibles errores en la medida
2.2.5.- Medida de celdas de conductividad

2.3.- MEDIDAS PTICAS.


2.3.1.- Tubos fotomultiplicadores
2.3.1.1.- Introduccin
2.3.1.2.-Descripcin detallada de la operacin
2.3.2.- Fotodiodos de avalancha (APD)
2.3.2.1.- Introduccin
2.3.2.2.- Descripcin de la medida
2.3.3.- Aplicaciones de sistemas pticos: Pulsioximetra
2.3.3.1.- Qu es?
2.3.3.2.- Cmo funciona?
2.3.3.3.- Interpretacin clnica
2.3.3.4.- Indicaciones
2.3.3.5.- Limitaciones y causas de error
2.3.3.6.- Ventajas respecto a la gasometra
2.3.3.7.- Desventajas respecto a la gasometra

2.4.- MEDIDA DE TEMPERATURA CON ALTA RESOLUCIN Y


CALORIMETRA.
2.4.1.- Introduccin
2.4.2.- Sensores de temperatura
2.4.3.- Descripcin del sistema
2.4.4.- Ejecucin del ensayo
2.4.5.- Aplicaciones termomtricas: Calorimetra de Barrido Diferencial
2.4.5.1.- Qu es?
2.4.5.2.- Cmo funciona?
2.4.5.3.- Curvas DSC
2.4.5.4.- Aplicaciones
2.- TCNICAS PARA LA MEDIDA DE SEALES CLNICAS DE
LABORATORIO. MEDIDAS ELECTROQUMICAS, MEDIDAS
PTICAS Y MEDIDAS DE TEMPERATURA

2.1.- INTRODUCCIN
El estado de salud de un paciente va asociado al hecho de que los valores de determinados
parmetros fisiolgicos se encuentren dentro de ciertos lmites. La labor diagnstica del mdico
consiste en determinar el estado de salud a partir, entre otros factores, de las medidas
proporcionadas por los instrumentos que miden esos parmetros.
Para determinar el estado de salud se utiliza una gran variedad de instrumentos, la mayora
de los cuales deben ser capaces de operar en condiciones que se alejan significativamente de
aquellas en las que lo hacen los instrumentos convencionales.

En el captulo anterior se han presentado los distintos tipos de instrumentos que se utilizan
para la realizacin de ese conjunto de medidas que se encuentran en las proximidades de los lmites
tericos. En este tema se van a presentar las tcnicas, instrumentos y precauciones que deben
tenerse en cuenta para llevar a cabo una serie de medidas habituales en aplicaciones clnicas.

Se estudiarn las medidas electroqumicas proporcionadas por los electrodos ion-selectivos.


Estos elementos proporcionan tensiones muy pequeas y presentan una impedancia de salida
extremadamente alta.
Otro de los sistemas que se analizar ser el de los sistemas fotodetectores, comnmente
usados para las medidas de pulsioximetra, que proporcionan valores de corriente elctrica muy
reducida.
Por ltimo, se estudiarn los sistemas para la medida de pequesimas variaciones de
temperatura, lo que supone disponer de instrumentos capaces de medir variaciones de tensin muy
pequeas.

2.2.- MEDIDAS ELECTROQUMICAS


2.2.1.- Introduccin

Para asegurar la precisin en la medida de las seales proporcionadas por las celdas o
electrodos electroqumicos, las medidas deben llevarse a cabo sin que ello suponga un consumo
significativo de corriente. Por otra parte, la corriente drenada de la celda provocar una cada de
tensin en la resistencia interna del electrodo, lo que puede dar lugar a la polarizacin de la propia
celda. Por lo tanto, se necesitar un voltmetro con una altsima impedancia de entrada, o lo que es
lo mismo, un electrmetro.

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Los electrmetros son utilizados habitualmente para la medida de pH y de la seal generada
por otros electrodos ion-selectivos que permiten determinar la concentracin de ciertos iones. En
este apartado se va a analizar el modo en que debe llevarse a cabo la medida en este tipo de
aplicaciones. Hay que indicar que la realizacin precisa de estas medidas suele exigir un sistema
que permita mantener estable y controlada la temperatura de la muestra durante todo el proceso de
medida.

2.2.2.- Medida con electrodos ion-selectivos


Estas medidas resultan particularmente tiles cuando se quiere tener un registro continuo de
la actividad inica. Ejemplos de ello pueden ser los sistemas de control de los equipos de
hemodilisis.
El potencial de la celda de un electrodo ion-selectivo vara directamente con el logaritmo de
la actividad inica. A temperatura ambiente, el potencial de la mayora de los electrodos ion-
selectivos, suele cambiar en torno a los 57 mV cuando la actividad de un ion equivalente cambia en
un factor diez. Esta respuesta logartmica permite obtener una precisin constante sobre un rango
dinmico de actividad inica por encima de ocho rdenes de magnitud. En la figura 2.2.2.1. se
muestra un circuito tpico de medida.

Hay que destacar el hecho de que los electrodos ion-selectivos usualmente suelen presentar
una mayor impedancia que los electrodos de referencia y deben ser conectados al terminal HI de la
entrada del electrmetro con cable apantallado. La pantalla ser proporcionada por la salida de
Guarda (Preamp) para mejorar la respuesta temporal del sistema. En determinados modelos de
electrmetros esto puede llevarse a cabo mediante una conexin externa a la salida del
Preamplificador o bien activando la seal de guarda existente en el panel frontal.

Figura 2.2.2.1.- Medidas con electrodos ion-selectivos

2.2.3.- Medida de pH
Cualquier sistema de medida que incorpore un electrodo de pH (como el que se representa
en la figura 2.2.3.1), puede ser considerado como una gran resistencia (entre 10 M y 1 G) en
serie con una fuente de tensin. Esta resistencia es la suma de la que presenta la cubierta del

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electrodo ion-selectivo (habitualmente cristal) y la del electrolito, el cual ofrece una baja
movilidad. La medida del potencial en este tipo de sistema no puede llevarse a cabo mediante un
Multmetro Digital ordinario.

Figura 2.2.3.1.- Medidas con electrodos de pH

Si se produce un flujo de corriente, se polariza el electrodo. Por lo tanto se debe medir el


potencial del electrodo mediante un electrmetro, el cual consume una cantidad despreciable de
corriente del electrodo. El electrmetro no debe efectuar la operacin de zero-check mientras est
conectado al electrodo de cristal; cuando se efecta un chequeo de cero en un electrmetro, su
impedancia de entrada, que normalmente tiene un valor prximo a infinito, cae hasta un valor en
torno a los 10 M, lo que da lugar a una corriente que puede polarizar los electrodos.

Si se conocen, aproximadamente, los valores de pH que van a ser medidos, debe


estandarizarse el electrodo, utilizando para ello dos soluciones buffer que permitan calibrar el
sistema en cada uno de los dos extremos de la escala deseada de pH. Este paso resulta necesario
para obtener una mejor precisin. Por ejemplo, para medir entre 6.5 pH (29.6 mV a 25C) y 1 pH
(355 mV a 25C), es aconsejable utilizar una solucin buffer con un pH seis y otra con un pH uno.
Cuando se coloca en la solucin buffer, la lectura de tensin proporcionada por el electrodo
puede diferir del valor terico en algunos cientos de microvoltios. Adems, la tensin es
fuertemente dependiente de la temperatura. Para una celda y una temperatura dadas, la relacin
entre el pH y la tensin es lineal. Por ejemplo, a 25 C, el valor terico de la tensin, con un pH de
4.0 es 177.5 mV, suponiendo que se ha utilizado una celda de calomelano (mercurio, cloruro de
mercurio) como electrodo de referencia. Otros electrodos de referencia, tales como la celda de
plata/cloruro de plata, pueden proporcionar ligeras modificaciones de tensin. La tensin en el
electrodo de referencia no cambia con el pH, por lo tanto, su contribucin puede ser corregida
mediante la medida de las soluciones buffer conocidas.
Las tensiones de los electrodos medidas mediante el electrmetro deben ser transformadas a
pH mediante la utilizacin de los adecuados factores de conversin. En la figura 2.2.3.2 se muestra
una grfica representativa de la diferencia de tensin en milivoltios frente al valor de pH.

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Figura 2.2.3.2.- Tensin de salida del electrodo para diferentes valores de pH

2.2.4.- Medida de pH en Laboratorio: pHmetro


2.2.4.1.- Qu es?
El pHmetro es un sensor utilizado en el mtodo electroqumico para medir el pH de una
disolucin. La determinacin del pH consiste en medir el potencial que se desarrolla a travs de
una fina membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente concentracin de protones.
En consecuencia se conoce muy bien la sensibilidad y la selectividad de las membranas de vidrio
frente al pH.

Figura 2.2.4.1.1.- pHmetro de laboratorio.

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2.2.4.2.- Cmo funciona?

Una celda para la medida de pH consiste en un par de electrodos, uno de calomelano y


otro de vidrio, sumergidos en la disolucin en la que queremos encontrar el pH. La barita de
soporte del electrodo es de vidrio comn y no es conductora, mientras que el bulbo sensible, que
es el extremo sensible del electrodo, est formado por un vidrio polarizable (vidrio sensible al
pH). Se llena el bulbo con una solucin de acido clorhdrico 0.1N saturado con cloruro de plata.
El voltaje en el interior del bulbo es constante, porque se mantiene su pH constante (pH 7) de
manera que la diferencia de potencial solo depende del pH del medio externo. El conductor que
se sumerge en el interior (normalmente Ag/AgCl) permite llevar este potencial hasta la entrada
de un amplificador.

2.2.4.3.- Mantenimiento y calibrado


El electrodo de vidrio es relativamente inmune a las interferencias del color, turbidez,
material coloidal, cloro libre, oxidante y reductor. La medida se ve afectada cuando la superficie
de la membrana de vidrio est sucia de grasa o de material orgnico insoluble en agua, que le
impide el contacto con la muestra, por lo tanto, se recomienda la limpieza escrupulosa de los
electrodos. Entre cada dos muestras los electrodos tienen que ser enjuagados con agua destilada.
No se tienen que secar con un trapo, porque se podran cargar electrostticamente. Luego se
deben colocar suavemente sobre un papel, sin pelusa, para quitar el exceso de agua.
Como los electrodos de vidrio de pH miden la concentracin de H+ relativa a sus
referencias, tienen que ser calibrados peridicamente para asegurar la precisin. Por eso se
utilizan buffers de calibracin (disoluciones reguladoras de pH conocido).

2.2.4.4.- Precauciones y posibles errores en la medida


El electrodo debe mantenerse siempre hmedo. Se recomienda que se guarde en una
solucin 4M de KCl; o en un buffer de solucin de pH 4 7. No se debe guardar el electrodo en
agua destilada, porque eso causara que los iones fluyeran a travs del bulbo de vidrio y el
electrodo se volvera intil.
Los tipos de errores que pueden aparecer en los pHmetros se agrupan en los siguientes
tipos:
- Error Alcalino: Los electrodos de vidrio ordinarios se vuelven sensibles a los
materiales alcalinos con valor de pH mayores a 9.
- Error Acido: En un pH pequeo los valores obtenidos tienden a ser ms altos.
- Deshidratacin: Resultados falsos.
- Temperatura: La medicin de pH varia con la temperatura, esta variacin puede
compensarse.

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2.2.5.- Medida de celdas de conductividad

La medida de la conductividad elctrica de muchas soluciones qumicas resulta difcil si la


concentracin inica es muy baja. En estas circunstancias, para realizar la medida, se puede utilizar
un electrmetro, funcionando como voltmetro, con una fuente de corriente, con una configuracin
tpica como la que se muestra en la figura 2.2.5.1.

La conductividad de una solucin es sensible a la presencia de impurezas, esto hace que su


valor sea ms un ndice de impurezas que una caracterstica constante. Por lo tanto, no es necesario
disponer de una alta precisin y el equipamiento de ensayo no necesita ser muy sofisticado.

Figura 2.2.5.1.- Medidas en una celda de conductividad

Al igual que en las medidas de pH, la corriente debe mantenerse tan baja como resulte
posible. Se debe alternar la polaridad para evitar la polarizacin del electrodo.

Los electrodos de la celda deben ser montados rgidamente para evitar las vibraciones y el
movimiento que podran dar lugar a ruidos y perturbaciones. Adems, el apantallamiento y puesta a
tierra de los cables de los electrodos reducir las interferencias.
La estructura de cada celda da lugar a una constante particular, que es funcin del volumen
de la solucin conductiva entre los electrodos. Los electrmetros pueden ser muy tiles cuando se
trabaja con electrodos de muy pequea superficie y/o disoluciones con conductividades muy bajas.
El control de temperatura resulta fundamental para llevar a cabo una medida con garantas.
La conductividad se puede obtener a partir del valor de la corriente (I), la lectura de tensin
(V), y la superficie y separacin entre los electrodos:
I L

V A
Donde: = conductividad (Siemens/cm)
A = Superficie de los electrodos (cm2)

L = Distancia entre los electrodos (cm)

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2.3.- MEDIDAS PTICAS.
2.3.1.- Tubos fotomultiplicadores
2.3.1.1.- Introduccin
Debido a los bajos valores de las intensidades de corriente implicadas en la medida de luz
mediante tubos fotomultiplicadores, es habitual tener que recurrir a la utilizacin de instrumentos de
alta sensibilidad, como pueden ser los picoampermetros.
Un tubo fotomultiplicador (PMT) es un dispositivo que permite convertir las seales
luminosas en seales elctricas. El tubo consta de un ctodo fotosensible que emite un nmero de
electrones proporcional al nmero de fotones que inciden sobre l. Estos electrones emitidos son
acelerados hacia la siguiente etapa y colisionan con el siguiente electrodo (llamado dnodo) dando
lugar a la emisin de un nmero (valores tpicos entre 3 y 6) de electrones secundarios. Este
proceso se repite tantas veces como dnodos haya (valores tpicos entre 6 y 14) en el modelo con
que se est trabajando. De este modo se consiguen ganancias que, en muchos casos, estn muy por
encima de 106.
2.3.1.2.- Descripcin detallada de la operacin
La aceleracin de los electrones se consigue haciendo que la tensin de cada uno de los
dnodos sea superior a la del anterior. La forma ms simple de lograr este efecto es aplicar una
tensin elevada entre los extremos del fotomultiplicador y utilizar un divisor de tensin resistivo
para ajustar la tensin aplicada a cada dnodo, tal como se muestra en la figura 2.3.1.2.1

Figura 2.3.1.2.1.- Sistema de alimentacin de un tubo fotomultiplicador

La tensin aplicada a cada uno de los dnodos depende del diseo del PMT y es especfica
para cada tipo de tubo.
Los valores de las resistencias que forman parte del divisor de tensin deben ajustarse de
forma que la corriente que fluya a travs de ellas sea, al menos, 100 veces mayor que la corriente
esperada en el nodo del tubo fotomultiplicador:

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Tensin nodo/Ctodo
R R R
T 1 2
... R6
100 Corriente de nodo
La mayora de tubos fotomultiplicadores funcionan con tensiones nodo/ctodo que oscilan
entre 1000 y 3000 V. El nodo suele ser el punto de lectura, razn por la cual se suele poner a tierra
dando lugar a que en el fotoctodo se aplique un alto valor de tensin negativa. Hay que encontrar
fuentes capaces de proporcionar altos valores de tensin continua (5000 V ms).

Los rangos de corriente que se miden usualmente en el nodo del fotomultiplicador pueden
oscilar entre algunos picoamperios y 100 A. Estos valores hacen que el picoampermetro sea el
dispositivo ideal para llevar a cabo estas medidas, debido a su gran sensibilidad. La baja cada de
tensin de entrada (tensin burden) que se produce en los picoampermetros hace que el nodo se
encuentre, virtualmente, a potencial de tierra.

En la figura 2.3.1.2.2 se ofrece el modo tpico de conexin de un sistema para la realizacin


de las medidas mediante el uso de un picoampermetro.

Figura 2.3.1.2.2.- Conexin tpica para la medida de las seales de un fotomultiplicador

Si el modelo de tubo fotomultiplicador con el que se est trabajando no requiere tensiones de


ms de 1000V, se puede utilizar una unidad fuente/medida (electrmetro para la medida de
corrientes y fuente de tensin), puesto que con un solo equipo se puede medir la intensidad de
corriente al mismo tiempo que se aplica la tensin.
Si se utiliza este tipo de conexin, el picoampermetro leer corrientes negativas. En ciertas
ocasiones es necesario que la intensidad se mida con valor positivo. En estos casos, resulta
imprescindible llevar a cabo una modificacin del sistema de medida y aadir una fuente de
alimentacin externa. En la figura 2.3.1.2.3 se ofrece la configuracin utilizada para la medida de
corrientes positivas en el PMT.
El picoampermetro lee la intensidad en el ltimo dnodo, la cual es igual a la del nodo
menos la corriente que fluye en el dnodo anterior. De este modo se sacrifica parte de la ganancia
del fotomultiplicador en aras de conseguir una medida de intensidad de corriente positiva.

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Figura 2.3.1.2.3.- Conexin para la medida de intensidades positivas en un fotomultiplicador

En un fotomultiplicador es usual que exista una pequea intensidad de corriente cuando el


ctodo no se encuentra iluminado. Este fenmeno es conocido como Corriente de Oscuridad y, en
la mayora de los casos, es despreciable. En cualquier otro caso, su efecto puede ser eliminado de la
lectura utilizando la opcin REL (cero) o bien, simplemente cancelndolo mediante el ajuste de
cero, si el instrumento dispone de esta opcin.

2.3.2.- Fotodiodos de avalancha (APD)


2.3.2.1.- Introduccin

Un fotodiodo de avalancha (APD) es un fotodiodo con alta sensibilidad y velocidad de


respuesta, que incorpora un mecanismo de ganancia interna activado por la aplicacin de una
tensin inversa. La ganancia del APD puede ser controlada mediante el valor de la tensin de
polarizacin inversa aplicada. Altos valores de tensin de polarizacin inversa dan lugar a grandes
ganancias.
Los APDs funcionan con un campo elctrico aplicado entre sus terminales, que da lugar a
una multiplicacin por avalancha de los portadores de carga generados como consecuencia de la
incidencia de fotones con la suficiente energa. Los campos de aplicacin de los APD son muy
variados y se encuentran en todos aquellos sistemas que requieran una alta sensibilidad a la luz,
como pueden ser los sistemas con fibras pticas o los detectores de centelleo.
Los datos tpicos que se suelen suministrar con un APD incluyen la tensin de ruptura, la
responsividad y la corriente de polarizacin inversa. El rango mximo de intensidades para un APD
tpico oscila entre 10-4 y 10-2 A, mientras que la corriente de oscuridad puede tener valores tan
bajos como los comprendidos en el rango de 10-12 y 10-13 A.
La mxima tensin de polarizacin inversa puede variar significativamente en funcin del
material con que se haya construido el APD, pero puede ser de ms de 100 V para los APD de
InGaAs y ms de 500 V para los dispositivos de Si.

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2.3.2.2.- Descripcin de la medida

La medida de la corriente inversa de un APD requiere disponer de un instrumento capaz de


medir corriente en un amplio rango, al mismo tiempo que suministra una tensin. Debido a estas
especificaciones, los instrumentos ideales para llevar a cabo las medidas van a ser un
Picoampermetro con Fuente de Tensin o un Sub-Femtoampermetro Fuente/Medida.

En la figura 2.3.2.2.1 se muestra la conexin entre uno de estos instrumentos y el APD. El


fotodiodo es sometido a un campo elctrico en el interior de una cmara oscura. Para aislar las
medidas de sensibilidad de corriente de las interferencias electrostticas, se conecta la cmara
oscura al terminal LO del instrumento de medida.

En la figura 2.3.2.2.2 aparece reflejada la curva de la intensidad frente a la tensin inversa


aplicada en un APD de InGaAs, obtenida mediante un instrumento Fuente/Medida. Es de destacar
el amplio rango de valores de intensidad medida. La regin de avalancha resulta ms pronunciada al
incrementar la iluminacin. La tensin de ruptura puede dar lugar a una generacin de pares
electrn-hueco, y la consiguiente intensidad de corriente, sin necesidad de iluminacin.

Figura 2.3.2.2.1.- APD conectado a un instrumento fuente/medida

Figura 2.3.2.2.2.- Curva de intensidad/tensin inversa en un APD de InGaAs

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2.3.3.- Aplicaciones de sistemas pticos: Pulsioximetra

2.3.3.1.- Qu es?
Es la medicin no invasiva del oxgeno transportado por la hemoglobina en el interior de los
vasos sanguneos. Se realiza con un aparato llamado pulsioxmetro o saturmetro.

2.3.3.2.- Cmo funciona?


El dispositivo emite luz con dos longitudes de onda de 660 nm (roja) y 940 nm (infrarroja)
que son caractersticas respectivamente de la oxihemoglobina y la hemoglobina reducida. La mayor
parte de la luz es absorbida por el tejido conectivo, piel, hueso y sangre venosa en una cantidad
constante, producindose un pequeo incremento de esta absorcin en la sangre arterial con cada
latido, lo que significa que es necesaria la presencia de pulso arterial para que el aparato reconozca
alguna seal. Mediante la comparacin de la luz que absorbe durante la onda pulstil con respecto a
la absorcin basal, se calcula el porcentaje de oxihemoglobina. Slo se mide la absorcin neta
durante una onda de pulso, lo que minimiza la influencia de tejidos, venas y capilares en el
resultado.
El pulsioxmetro mide la saturacin de oxgeno en los tejidos. Para ello tiene un transductor
con dos piezas, un emisor de luz y un fotodetector, generalmente en forma de pinza que se suele
colocar en el dedo de la mano, despus se espera recibir la informacin en la pantalla: la saturacin
de oxgeno, la frecuencia cardaca y la curva de pulso.

Fig 2.3.3.2.1.- Pulsioxmetro y detalle del transductor

La correlacin entre la saturacin de oxgeno y la PaO2 viene determinada por la curva de


disociacin de la oxihemoglobina (figura 2.3.3.2.2).

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Fig.2.3.3.2.2. Curva de disociacin de la oxihemoglobina

Hay circunstancias en las que la curva se desva hacia la derecha o hacia la izquierda. Se desplaza
hacia la derecha cuando disminuye el pH, aumenta la PaCO2, aumenta la temperatura, aumenta la
concentracin intraeritrocitaria de 2,3 difosfoglicerato y con el ejercicio intenso (disminuye el pH y
aumenta la temperatura); lo que significa que la afinidad de la hemoglobina para el oxgeno
disminuye. La curva se desplaza hacia la izquierda en las circunstancias contrarias.

2.3.3.3.- Interpretacin clnica


La pulsioximetra mide la saturacin de oxgeno en la sangre, pero no mide la presin de
oxgeno (PaO2), la presin de dixido de carbono (PaCO2) o el pH. Por tanto, no sustituye a la
gasometra en la valoracin completa de los enfermos respiratorios. Sin embargo supera a la
gasometra en rapidez y en la monitorizacin de estos enfermos. Los aparatos disponibles en la
actualidad son muy fiables para valores entre el 80 y el 100%, pero su fiabilidad disminuye para
valores que se encuentren por debajo de estas cifras.
Relacin entre la Saturacin de
O2 y PaO2
Saturacin de
PaO2 (mmHg)
O2
100 % 677
98,4 % 100
95 % 80
90 % 59
80 % 48
73 % 40
60 % 30
50 % 26
40 % 23
35 % 21
30 % 18

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Existe un valor crtico (PaO2 60 mm de Hg) que se corresponde con una saturacin del 90%,
por debajo de la cual, pequeas disminuciones de la PaO2 ocasionan desaturaciones importantes. Por
el contrario, por encima del 95%, grandes aumentos de la PaO2 no suponen incrementos
significativos de la saturacin de oxgeno.
El punto crtico que debe dar la seal de alarma es el de saturaciones inferiores al 95%
(inferiores al 90 92% cuando existe patologa pulmonar crnica previa) estos pacientes deben
recibir tratamiento inmediato.

Actuacin segn % de Saturacin


% Saturacin Actuacin
> 95 % No actuacin inmediata.
Tratamiento inmediato y monitorizacin de
la respuesta al mismo, segn sta, valorar
95-90 % derivacin al hospital. Los pacientes con
enfermedad respiratoria crnica toleran bien
saturaciones en torno a estos valores.
Enfermo grave. Hipoxia severa.
< 90 % Oxigenoterapia + tratamiento y traslado al
hospital.
< 80 % Valorar intubacin y ventilacin mecnica.
En nios con < 92%: Remitir al hospital aunque presenten
mejora con maniobras iniciales, por ser ms incierta su
respuesta al tratamiento.

2.3.3.4.- Indicaciones

Las indicaciones clsicas son las de situaciones que precisan monitorizacin constante
de los gases sanguneos y se circunscribira a las reas de cuidados intensivos, medicina
de urgencias y anestesia.
Indicaciones en Atencin Primaria:
o Evaluacin inicial rpida de los pacientes con patologa respiratoria tanto en la
consulta normal como urgente.
o Monitorizacin continua durante el traslado al hospital de los pacientes inestables
por su situacin respiratorio y/o hemodinmica.
o En la atencin domiciliaria de pacientes neumolgicos.
o Es til, junto a los datos clnicos, para valorar la severidad de una crisis asmtica
y permitir la monitorizacin continua.

Se ha sugerido la pulsioximetra como la quinta constante vital, junto con la TA, la


frecuencia cardiaca, la frecuencia respiratoria y la temperatura.

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2.3.3.5.- Limitaciones y causas de error
Los aparatos actuales son muy fiables cuando el paciente presenta saturaciones superiores al
80%. Las situaciones que pueden dar lugar a lecturas errneas son:

1. Anemia severa: la hemoglobina debe ser inferior a 5 mg/dl para causar lecturas falsas.
2. Interferencias con otros aparatos elctricos.
3. El movimiento: los movimientos del transductor, que se suele colocar en un dedo de la
mano, afecta a la fiabilidad (por ejemplo el temblor o vibracin de las ambulancias), se
soluciona colocndolo en el lbulo de la oreja o en el dedo del pie o fijndolo con
esparadrapo.
4. Contrastes intravenosos, pueden interferir si absorben luz de una longitud de onda similar
a la de la hemoglobina.
5. Luz ambiental intensa: xenn, infrarrojos, fluorescentes...
6. Mala perfusin perifrica por fro ambiental, disminucin de temperatura corporal,
hipotensin, vasoconstriccin... Es la causa ms frecuente de error ya que, para que
funcione el aparato, es imprescindible que exista flujo pulstil. Puede ser mejorada con
calor, masajes, terapia local vasodilatadora, quitando la ropa ajustada, no colocando el
manguito de la tensin en el mismo lado que el transductor.
7. La ictericia no interfiere.
8. El pulso venoso: fallo cardaco derecho o insuficiencia tricuspdea. El aumento del pulso
venoso puede artefactar la lectura, se debe colocar el dispositivo por encima del corazn.
9. Fstula arteriovenosa. No hay diferencia salvo que la fstula produzca isquemia distal.
10. La hemoglobina fetal no interfiere.
11. Obstculos a la absorcin de la luz: laca de uas (retirar con acetona), pigmentacin de la
piel (utilizar el 5 dedo o el lbulo de la oreja).
12. Dishemoglobinemias: la carboxihemoglobina (intoxicacin por monxido de carbono) y
la metahemoglobina absorben longitudes de onda similares a la oxihemoglobina. Para
estas situaciones son necesarios otros dispositivos como CO-oxmetros.

2.3.3.6.- Ventajas respecto a la gasometra

Proporciona una monitorizacin instantnea, continua y no invasiva.


No requiere de un entrenamiento especial. Es fcil de usar.
Es fiable en el rango de 80-100% de saturacin que es el ms interesante en la prctica
clnica.
Adems informa sobre la frecuencia cardiaca y puede alertar sobre disminuciones en la
perfusin de los tejidos.
Es una tcnica barata y existen aparatos porttiles muy manejables.

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La gasometra es una tcnica cruenta, que produce dolor y nerviosismo durante la
extraccin, dando lugar a hiperventilacin, lo que puede llevar a sobreestimacin de la
oxigenacin.
Asequible en Atencin Primaria.

2.3.3.7.- Desventajas respecto a la gasometra


La pulsioximetra no informa sobre el pH ni PaCO2.
No detecta hiperoxemia.
No detecta hipoventilacin (importante en pacientes respirando aire con concentracin
elevada de O2).
Los enfermos crticos suelen tener mala perfusin perifrica.

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2.4.- MEDIDA DE TEMPERATURA CON ALTA RESOLUCIN Y
CALORIMETRA.

2.4.1.- Introduccin

Las medidas calorimtricas se utilizan para determinar diversas relaciones energticas. La


tcnica de microcalorimetra se necesita frecuentemente cuando se estn llevando a cabo
experimentos con muestras muy pequeas o con bajos niveles de calentamiento. La construccin de
un microcalormetro varia significativamente en funcin de la aplicacin especfica y, en muchos
casos, es preciso llevar a cabo un diseo especfico. Durante la realizacin de los ensayos las
tcnicas termomtricas diferenciales permiten a los usuarios medir pequeas variaciones de
temperatura. Los experimentos de microcalorimetra pueden exigir llevar a cabo medidas de
cambios de temperatura en torno a los 100C. En este apartado se van a mostrar dos tipos distintos
de sensores de temperatura y un sistema de medida microcalorimtrico mediante la utilizacin de
termopares y un nanovoltmetro.

2.4.2.- Sensores de temperatura

Los termistores y termopares son los dos tipos de transductores ms comnmente utilizados
en la termometra diferencial. La eleccin del transductor va a depender de cada aplicacin
microcalorimtrica especfica.
Los termistores son resistencias dependientes de la temperatura con buenas caractersticas de
linealidad y precisin. Este tipo de dispositivo necesita una seal de excitacin, lo que implica que
esta energa se disipe en forma de calor y puede dar lugar a errores en la medida.
Los termopares son los dispositivos sensores de temperatura ms ampliamente utilizados.
Estos dispositivos, robustos y baratos, se construyen a partir de la unin de dos metales distintos.
Existe una gran variedad de modelos que permiten cubrir un amplio rango de temperaturas. La
linealidad de los termopares varia, dependiendo del tipo de termopar y del rango de temperatura.

2.4.3.- Descripcin del sistema


El diseo de un microcalormetro puede variar significativamente en funcin del tipo de
experimento que se quiera llevar a cabo. La aplicacin que se describe a continuacin utiliza un
simple calormetro para llevar a cabo medidas de microcalorimetra. La temperatura se mide
mediante un termmetro diferencial de dos termopares. En la configuracin diferencial, un termopar
se sita en el interior del calormetro y el otro est separado del dispositivo. La diferencia de tensin
es proporcional a la diferencia de temperatura. La sensibilidad de la medida es de aproximadamente
25 mC/V (dependiendo del tipo de termopar). En la figura 2.4.3.1 se muestra el montaje de un
microcalormetro que utiliza un nanovoltmetro para realizar la necesaria medida de tensin.

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Figura 2.4.3.1.- Microcalormetro con medida diferencial de temperatura

La temperatura en el interior del calormetro necesita ser conocida con una moderada
precisin; sin embargo, para medir los pequeos cambios que ocurren durante el experimento,
resulta esencial contar con una enorme precisin y resolucin. La medida de la seal diferencial
entre los termopares, a niveles por debajo del miligrado de resolucin, exige contar con voltmetros
de muy alta sensibilidad. Algunos nanovoltmetros permiten detectar cambios de temperatura en
torno a los 100C, dependiendo del tipo de termopar utilizado. Conviene indicar que cada tipo de
termopar es nico, en cuanto a la variacin de la tensin para un valor dado de incremento de
temperatura.

Los termopares pueden ser calibrados en aparatos externos, o bien pueden estar integrados
como una parte del calormetro y calibrados formando parte de l. La calibracin puede ser llevada
a cabo utilizando un termmetro patrn en un rango de temperaturas prximas a las de operacin o
bien utilizando un punto fijo de referencia (ej. punto de hielo o punto ebullicin del oxgeno).

Antes de poder realizar un ensayo debe determinarse la capacidad calorfica del calormetro.
Esto puede llevarse a cabo midiendo directamente el incremento de temperatura asociado al
suministro de una cantidad de calor conocida. El calor puede ser determinado con precisin
haciendo circular una corriente perfectamente medida a travs de una resistencia conocida. El calor
tambin puede ser suministrado mediante una reaccin qumica estndar.
La medida de pequeas variaciones de temperatura mediante termopares lleva implcita la
medida de bajos niveles de tensin, esto obliga a prestar especial atencin a los efectos
termoelctricos y a la presencia de campos elctricos y magnticos, que pueden afectar
significativamente a la precisin en la medida.

2.4.4.- Ejecucin del ensayo


Para obtener unos buenos resultados en la medida se recomienda seleccionar en el nanovoltmetro el
rango de 10 mV y activar la integracin durante un ciclo de red (1NPLC), lo que permite obtener el
mximo rechazo al ruido correspondiente a la frecuencia de red. Habilitar el filtro puede reducir el

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ruido. Hay que tener precaucin en que la respuesta temporal del filtro no cause errores por el
enmascaramiento de los picos de la curva de calor. Una baja velocidad de respuesta de los filtros
puede eliminar los datos de los picos que puede dar lugar a la prdida de una informacin vital en la
medida de la cintica de la temperatura. La mayora de nanovoltmetros modernos permiten una
amplia seleccin de filtros para optimizar el rechazo al ruido, asegurando, al mismo tiempo, la
deteccin correcta de los picos.
Al inicio del experimento, la temperatura dentro y fuera del calormetro debe ser la misma.
Una diferencia de 0C da lugar a una tensin diferencial de 0V entre los dos termopares. Si aparece
un cambio de temperatura, se asume que ha sido causado por el fenmeno que est siendo estudiado
durante el experimento.
Al finalizar el ensayo, los datos deben hacerse pasar a travs de la curva de calibracin,
deben ser convertidos en temperaturas y finalmente deben ser analizados. En la figura 2.4.4.1 se
muestra una curva tpica de la generacin calorfica en una reaccin qumica. Los resultados finales
suelen representarse en trminos de calor (caloras) o energa (julios).

Figura 2.4.4.1.- Curva tpica de reaccin trmica

2.4.5.- Aplicaciones termomtricas: Calorimetra de Barrido Diferencial

2.4.5.1.- Qu es?
La Calorimetra de barrido diferencial (del ingls: Differential Scanning
Calorimetry o DSC), es una tcnica termoanaltica en la que la diferencia de calor entre una
muestra y una referencia es medida como una funcin de la temperatura.

2.4.5.2.- Cmo funciona?


La muestra y la referencia son mantenidas aproximadamente a la misma temperatura a lo
largo de un ensayo. Generalmente, la evolucin de la temperatura para un anlisis DSC es

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seleccionada de tal modo que la temperatura del portador de muestra aumente linealmente con el
tiempo. La muestra de referencia debera tener una capacidad calorfica perfectamente definida en el
intervalo de temperaturas en que vaya a tener lugar el barrido. El principio bsico subyacente a esta
tcnica es que, cuando la muestra experimenta una transformacin fsica, tal como una transicin de
fase, se necesitar que fluya ms (o menos) calor a la muestra que a la referencia, para mantener
ambas a la misma temperatura. El que fluya ms o menos calor a la muestra depende de si el
proceso es exotrmico o endotrmico. Por ejemplo, en el proceso de fusin de una muestra, que
pasa de slido a lquido, se requerir que fluya ms calor a la muestra para aumentar su temperatura
a la misma velocidad que la de referencia. Esto se debe a la absorcin de calor de la muestra que
presenta el proceso endotrmico de fusin y cambio de fase de slido a lquido. Por el contrario,
cuando la muestra experimenta procesos exotrmicos (tales como una cristalizacin) se requiere
menos calor para alcanzar la temperatura de la muestra. Determinando la diferencia de flujo
calorfico entre la muestra y la referencia, los calormetros DSC son capaces de medir la cantidad de
calor absorbido o eliminado durante tales transiciones.
La DSC puede ser utilizada tambin para determinar cambios de fase ms sutiles tales como
las transiciones vtreas. La DSC es utilizada ampliamente en la Industria como instrumento de
control de calidad debido a su aplicabilidad en valorar la pureza de las muestras y para estudiar el
curado de los polmeros.
Una tcnica alternativa a la DSC es el anlisis trmico diferencial (DTA). En esta tcnica la
magnitud constante no es la temperatura sino el flujo calorfico que se comunica a muestra y
referencia. Cuando muestra y referencia son calentadas de modo idntico, los cambios de fase y
otros procesos trmicos producen una diferencia de temperatura entre muestra y referencia. Ambas
DSC y DTA proporcionan informacin similar. No obstante, la DSC es ms utilizada que la DTA.

2.4.5.3.- Curvas DSC

El resultado de un experimento DSC es una curva de flujo calorfico versus temperatura o


versus tiempo. Existen dos convenciones diferentes al representar los efectos trmicos: las
reacciones exotrmicas que exhibe la muestra pueden ser mostradas como picos positivos o
negativos dependiendo del tipo de tecnologa o de instrumentacin utilizada en la realizacin del
experimento. Los efectos sobre o bajo una curva DSC pueden ser utilizados para calcular entalpas
de transiciones. Este clculo se realiza integrando el pico correspondiente a una transicin dada.
As, la entalpa de la transicin puede ser expresada por la siguiente ecuacin:

H = KA

donde H es la entalpa de la transicin, K es la constante calorimtrica y A es el rea bajo la curva.


La constante calorimtrica variar de instrumento a instrumento, y puede ser determinada
analizando una muestra bien caracterizada con entalpas de transicin conocidas.

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2.4.5.4.- Aplicaciones
La calorimetra de barrido diferencial puede ser utilizada para medir varias propiedades
caractersticas de una muestra. Usando esta tcnica es posible caracterizar procesos como la fusin y
la cristalizacin as como temperaturas de transiciones vtreas (Tg). La DSC puede ser tambin
utilizada para estudiar la oxidacin, as como otras reacciones qumicas.
Las transiciones vtreas se presentan cuando se aumenta la temperatura de un slido amorfo.
Estas transiciones aparecen como una alteracin (o peldao) en la lnea base de la seal DSC
registrada. Esto es debido a que la muestra experimenta un cambio en la capacidad calorfica sin
que tenga lugar un cambio de fase formal.
A medida que la temperatura aumenta, un slido amorfo se har menos viscoso. En algn
momento las molculas pueden obtener suficiente libertad de movimiento para disponerse por s
mismas en una forma cristalina. Esto es conocido como temperatura de cristalizacin (Tc). Esta
transicin de slido amorfo a slido cristalino es un proceso exotrmico y da lugar a un pico en la
curva DSC. A medida que la temperatura aumenta, la muestra alcanza eventualmente su
temperatura de fusin (Tm). El proceso de fusin resulta evidenciado por un pico endotrmico en la
curva DSC. La capacidad para determinar temperaturas de transicin y entalpas hace de las curvas
DSC una herramienta valiosa para producir diagramas de fase para diversos sistemas qumicos.
La DSC puede tambin ser utilizada para el estudio de cristales lquidos. En tanto pueden ser
definidos como transiciones entre slidos y lquidos, tambin pueden ser considerados como un
tercer estado, que exhibe propiedades de ambas fases. ste lquido anistropo es conocido como un
lquido cristalino o un estado mesomorfo. Utilizando la DSC, es posible caracterizar los pequeos
cambios energticos que acompaan a las transiciones desde un slido a un cristal lquido y desde
un cristal lquido a un lquido istropo.
La utilizacin de la calorimetra diferencial de barrido para estudiar la estabilidad a la
oxidacin de muestras requiere, generalmente, una cmara de muestra hermtica. Generalmente,
tales ensayos se hacen isotrmicamente (a temperatura constante) cambiando la atmsfera de la
muestra. Primeramente, la muestra es sometida a la temperatura de ensayo deseada bajo una
atmsfera inerte, usualmente nitrgeno. Despus, se adiciona oxgeno al sistema. Cualquier
oxidacin que tenga lugar es observada como desviacin de la lnea base. Tales anlisis pueden ser
utilizados para determinar la estabilidad y las condiciones de almacenamiento ptimo de un
compuesto.
La DSC es de utilizacin frecuente en las industrias farmacuticas y de polmeros. Para la
qumica de polmeros, la DSC es una herramienta comn en el estudio de los procesos de curado,
que permite el ajuste fino de propiedades polimricas. El entrecruzamiento (cross-linking) de
molculas polimricas, que tiene lugar en el proceso de curado, es exotrmico y da lugar a un pico
positivo en la curva DSC, que usualmente aparece sucesivamente a la transicin vtrea. En la

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industria farmacutica es necesario disponer de frmacos y drogas bien caracterizados en orden a
definir parmetros de procesado y a efectos de dosificacin clnica. Por ejemplo, si es necesario
administrar un frmaco en forma amorfa, es deseable procesar el frmaco a temperaturas por debajo
de aquella a la que pueda presentarse la cristalizacin.
En investigacin en la industria alimentaria, la DSC se utiliza, conjuntamente con otras
tcnicas trmicas analticas, para determinar la dinmica del agua. Cambios en la distribucin del
agua pueden ser correlacionados con cambios en la textura. De modo similar a lo que sucede en
ciencia de materiales, tambin puede ser analizado el efecto del curado sobre los productos
preparados. El registro de las curvas DSC encuentra tambin aplicacin en la valoracin de la
pureza de frmacos y polmeros. Esto es posible debido a que el intervalo de temperaturas en que
funde una mezcla de compuestos es dependiente de sus cantidades relativas. Este efecto es debido a
un fenmeno conocido como depresin del punto de congelacin, que se presenta cuando se
adiciona a una solucin un soluto extrao. (La disminucin del punto de congelacin del agua por
adicin de un anticongelante es la que, al evitar la formacin de hielo, hace que funcione el
automvil en invierno). Consecuentemente, los compuestos menos puros exhibirn un
ensanchamiento del pico de fusin que comienza a temperaturas ms bajas que en un compuesto
puro.

La calorimetra diferencial de barrido ha encontrado aplicaciones en el establecimiento de


rutas metablicas, en taxonoma bacteriana y fngica y en infectividad.
En los ltimos aos esta tecnologa ha sido involucrada en el estudio de materiales
metlicos. La caracterizacin de este tipo de materiales con DSC no es todava fcil debido a la
escasez de bibliografa al respecto. No obstante, es sabido que es posible utilizar DSC para
encontrar temperaturas solidus y liquidus de una aleacin metlica, pero las aplicaciones ms
prometedoras son, por ahora, en el estudio de precipitaciones, zonas Guiner Preston, transiciones de
fase, movimiento de dislocaciones, crecimiento de grano, etc.

Bibliografia

Low Level Measurements. Precision DC Current, Voltage and Resistance Measurements


(5th Edition)
KEITHLEY
www.keithley.com
Application Bulletin 188/3 e. pH measurement technique
Metrohm
http://www.fisterra.com/material/tecnicas/pulsioximetria/pulsio.asp
http://www.telecardiologo.com/descargas/94789.pdf
http://pslc.ws/spanish/dsc.htm
http://www.uco.es/~iq2sagrl/TranspATG.pdf

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