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ADQUISICIN Y TRANSMISIN DE
BIOSEALES
2.1.- INTRODUCCIN
2.1.- INTRODUCCIN
El estado de salud de un paciente va asociado al hecho de que los valores de determinados
parmetros fisiolgicos se encuentren dentro de ciertos lmites. La labor diagnstica del mdico
consiste en determinar el estado de salud a partir, entre otros factores, de las medidas
proporcionadas por los instrumentos que miden esos parmetros.
Para determinar el estado de salud se utiliza una gran variedad de instrumentos, la mayora
de los cuales deben ser capaces de operar en condiciones que se alejan significativamente de
aquellas en las que lo hacen los instrumentos convencionales.
En el captulo anterior se han presentado los distintos tipos de instrumentos que se utilizan
para la realizacin de ese conjunto de medidas que se encuentran en las proximidades de los lmites
tericos. En este tema se van a presentar las tcnicas, instrumentos y precauciones que deben
tenerse en cuenta para llevar a cabo una serie de medidas habituales en aplicaciones clnicas.
Para asegurar la precisin en la medida de las seales proporcionadas por las celdas o
electrodos electroqumicos, las medidas deben llevarse a cabo sin que ello suponga un consumo
significativo de corriente. Por otra parte, la corriente drenada de la celda provocar una cada de
tensin en la resistencia interna del electrodo, lo que puede dar lugar a la polarizacin de la propia
celda. Por lo tanto, se necesitar un voltmetro con una altsima impedancia de entrada, o lo que es
lo mismo, un electrmetro.
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Los electrmetros son utilizados habitualmente para la medida de pH y de la seal generada
por otros electrodos ion-selectivos que permiten determinar la concentracin de ciertos iones. En
este apartado se va a analizar el modo en que debe llevarse a cabo la medida en este tipo de
aplicaciones. Hay que indicar que la realizacin precisa de estas medidas suele exigir un sistema
que permita mantener estable y controlada la temperatura de la muestra durante todo el proceso de
medida.
Hay que destacar el hecho de que los electrodos ion-selectivos usualmente suelen presentar
una mayor impedancia que los electrodos de referencia y deben ser conectados al terminal HI de la
entrada del electrmetro con cable apantallado. La pantalla ser proporcionada por la salida de
Guarda (Preamp) para mejorar la respuesta temporal del sistema. En determinados modelos de
electrmetros esto puede llevarse a cabo mediante una conexin externa a la salida del
Preamplificador o bien activando la seal de guarda existente en el panel frontal.
2.2.3.- Medida de pH
Cualquier sistema de medida que incorpore un electrodo de pH (como el que se representa
en la figura 2.2.3.1), puede ser considerado como una gran resistencia (entre 10 M y 1 G) en
serie con una fuente de tensin. Esta resistencia es la suma de la que presenta la cubierta del
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electrodo ion-selectivo (habitualmente cristal) y la del electrolito, el cual ofrece una baja
movilidad. La medida del potencial en este tipo de sistema no puede llevarse a cabo mediante un
Multmetro Digital ordinario.
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Figura 2.2.3.2.- Tensin de salida del electrodo para diferentes valores de pH
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2.2.4.2.- Cmo funciona?
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2.2.5.- Medida de celdas de conductividad
Al igual que en las medidas de pH, la corriente debe mantenerse tan baja como resulte
posible. Se debe alternar la polaridad para evitar la polarizacin del electrodo.
Los electrodos de la celda deben ser montados rgidamente para evitar las vibraciones y el
movimiento que podran dar lugar a ruidos y perturbaciones. Adems, el apantallamiento y puesta a
tierra de los cables de los electrodos reducir las interferencias.
La estructura de cada celda da lugar a una constante particular, que es funcin del volumen
de la solucin conductiva entre los electrodos. Los electrmetros pueden ser muy tiles cuando se
trabaja con electrodos de muy pequea superficie y/o disoluciones con conductividades muy bajas.
El control de temperatura resulta fundamental para llevar a cabo una medida con garantas.
La conductividad se puede obtener a partir del valor de la corriente (I), la lectura de tensin
(V), y la superficie y separacin entre los electrodos:
I L
V A
Donde: = conductividad (Siemens/cm)
A = Superficie de los electrodos (cm2)
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2.3.- MEDIDAS PTICAS.
2.3.1.- Tubos fotomultiplicadores
2.3.1.1.- Introduccin
Debido a los bajos valores de las intensidades de corriente implicadas en la medida de luz
mediante tubos fotomultiplicadores, es habitual tener que recurrir a la utilizacin de instrumentos de
alta sensibilidad, como pueden ser los picoampermetros.
Un tubo fotomultiplicador (PMT) es un dispositivo que permite convertir las seales
luminosas en seales elctricas. El tubo consta de un ctodo fotosensible que emite un nmero de
electrones proporcional al nmero de fotones que inciden sobre l. Estos electrones emitidos son
acelerados hacia la siguiente etapa y colisionan con el siguiente electrodo (llamado dnodo) dando
lugar a la emisin de un nmero (valores tpicos entre 3 y 6) de electrones secundarios. Este
proceso se repite tantas veces como dnodos haya (valores tpicos entre 6 y 14) en el modelo con
que se est trabajando. De este modo se consiguen ganancias que, en muchos casos, estn muy por
encima de 106.
2.3.1.2.- Descripcin detallada de la operacin
La aceleracin de los electrones se consigue haciendo que la tensin de cada uno de los
dnodos sea superior a la del anterior. La forma ms simple de lograr este efecto es aplicar una
tensin elevada entre los extremos del fotomultiplicador y utilizar un divisor de tensin resistivo
para ajustar la tensin aplicada a cada dnodo, tal como se muestra en la figura 2.3.1.2.1
La tensin aplicada a cada uno de los dnodos depende del diseo del PMT y es especfica
para cada tipo de tubo.
Los valores de las resistencias que forman parte del divisor de tensin deben ajustarse de
forma que la corriente que fluya a travs de ellas sea, al menos, 100 veces mayor que la corriente
esperada en el nodo del tubo fotomultiplicador:
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Tensin nodo/Ctodo
R R R
T 1 2
... R6
100 Corriente de nodo
La mayora de tubos fotomultiplicadores funcionan con tensiones nodo/ctodo que oscilan
entre 1000 y 3000 V. El nodo suele ser el punto de lectura, razn por la cual se suele poner a tierra
dando lugar a que en el fotoctodo se aplique un alto valor de tensin negativa. Hay que encontrar
fuentes capaces de proporcionar altos valores de tensin continua (5000 V ms).
Los rangos de corriente que se miden usualmente en el nodo del fotomultiplicador pueden
oscilar entre algunos picoamperios y 100 A. Estos valores hacen que el picoampermetro sea el
dispositivo ideal para llevar a cabo estas medidas, debido a su gran sensibilidad. La baja cada de
tensin de entrada (tensin burden) que se produce en los picoampermetros hace que el nodo se
encuentre, virtualmente, a potencial de tierra.
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Figura 2.3.1.2.3.- Conexin para la medida de intensidades positivas en un fotomultiplicador
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2.3.2.2.- Descripcin de la medida
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2.3.3.- Aplicaciones de sistemas pticos: Pulsioximetra
2.3.3.1.- Qu es?
Es la medicin no invasiva del oxgeno transportado por la hemoglobina en el interior de los
vasos sanguneos. Se realiza con un aparato llamado pulsioxmetro o saturmetro.
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Fig.2.3.3.2.2. Curva de disociacin de la oxihemoglobina
Hay circunstancias en las que la curva se desva hacia la derecha o hacia la izquierda. Se desplaza
hacia la derecha cuando disminuye el pH, aumenta la PaCO2, aumenta la temperatura, aumenta la
concentracin intraeritrocitaria de 2,3 difosfoglicerato y con el ejercicio intenso (disminuye el pH y
aumenta la temperatura); lo que significa que la afinidad de la hemoglobina para el oxgeno
disminuye. La curva se desplaza hacia la izquierda en las circunstancias contrarias.
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Existe un valor crtico (PaO2 60 mm de Hg) que se corresponde con una saturacin del 90%,
por debajo de la cual, pequeas disminuciones de la PaO2 ocasionan desaturaciones importantes. Por
el contrario, por encima del 95%, grandes aumentos de la PaO2 no suponen incrementos
significativos de la saturacin de oxgeno.
El punto crtico que debe dar la seal de alarma es el de saturaciones inferiores al 95%
(inferiores al 90 92% cuando existe patologa pulmonar crnica previa) estos pacientes deben
recibir tratamiento inmediato.
2.3.3.4.- Indicaciones
Las indicaciones clsicas son las de situaciones que precisan monitorizacin constante
de los gases sanguneos y se circunscribira a las reas de cuidados intensivos, medicina
de urgencias y anestesia.
Indicaciones en Atencin Primaria:
o Evaluacin inicial rpida de los pacientes con patologa respiratoria tanto en la
consulta normal como urgente.
o Monitorizacin continua durante el traslado al hospital de los pacientes inestables
por su situacin respiratorio y/o hemodinmica.
o En la atencin domiciliaria de pacientes neumolgicos.
o Es til, junto a los datos clnicos, para valorar la severidad de una crisis asmtica
y permitir la monitorizacin continua.
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2.3.3.5.- Limitaciones y causas de error
Los aparatos actuales son muy fiables cuando el paciente presenta saturaciones superiores al
80%. Las situaciones que pueden dar lugar a lecturas errneas son:
1. Anemia severa: la hemoglobina debe ser inferior a 5 mg/dl para causar lecturas falsas.
2. Interferencias con otros aparatos elctricos.
3. El movimiento: los movimientos del transductor, que se suele colocar en un dedo de la
mano, afecta a la fiabilidad (por ejemplo el temblor o vibracin de las ambulancias), se
soluciona colocndolo en el lbulo de la oreja o en el dedo del pie o fijndolo con
esparadrapo.
4. Contrastes intravenosos, pueden interferir si absorben luz de una longitud de onda similar
a la de la hemoglobina.
5. Luz ambiental intensa: xenn, infrarrojos, fluorescentes...
6. Mala perfusin perifrica por fro ambiental, disminucin de temperatura corporal,
hipotensin, vasoconstriccin... Es la causa ms frecuente de error ya que, para que
funcione el aparato, es imprescindible que exista flujo pulstil. Puede ser mejorada con
calor, masajes, terapia local vasodilatadora, quitando la ropa ajustada, no colocando el
manguito de la tensin en el mismo lado que el transductor.
7. La ictericia no interfiere.
8. El pulso venoso: fallo cardaco derecho o insuficiencia tricuspdea. El aumento del pulso
venoso puede artefactar la lectura, se debe colocar el dispositivo por encima del corazn.
9. Fstula arteriovenosa. No hay diferencia salvo que la fstula produzca isquemia distal.
10. La hemoglobina fetal no interfiere.
11. Obstculos a la absorcin de la luz: laca de uas (retirar con acetona), pigmentacin de la
piel (utilizar el 5 dedo o el lbulo de la oreja).
12. Dishemoglobinemias: la carboxihemoglobina (intoxicacin por monxido de carbono) y
la metahemoglobina absorben longitudes de onda similares a la oxihemoglobina. Para
estas situaciones son necesarios otros dispositivos como CO-oxmetros.
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La gasometra es una tcnica cruenta, que produce dolor y nerviosismo durante la
extraccin, dando lugar a hiperventilacin, lo que puede llevar a sobreestimacin de la
oxigenacin.
Asequible en Atencin Primaria.
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2.4.- MEDIDA DE TEMPERATURA CON ALTA RESOLUCIN Y
CALORIMETRA.
2.4.1.- Introduccin
Los termistores y termopares son los dos tipos de transductores ms comnmente utilizados
en la termometra diferencial. La eleccin del transductor va a depender de cada aplicacin
microcalorimtrica especfica.
Los termistores son resistencias dependientes de la temperatura con buenas caractersticas de
linealidad y precisin. Este tipo de dispositivo necesita una seal de excitacin, lo que implica que
esta energa se disipe en forma de calor y puede dar lugar a errores en la medida.
Los termopares son los dispositivos sensores de temperatura ms ampliamente utilizados.
Estos dispositivos, robustos y baratos, se construyen a partir de la unin de dos metales distintos.
Existe una gran variedad de modelos que permiten cubrir un amplio rango de temperaturas. La
linealidad de los termopares varia, dependiendo del tipo de termopar y del rango de temperatura.
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Figura 2.4.3.1.- Microcalormetro con medida diferencial de temperatura
La temperatura en el interior del calormetro necesita ser conocida con una moderada
precisin; sin embargo, para medir los pequeos cambios que ocurren durante el experimento,
resulta esencial contar con una enorme precisin y resolucin. La medida de la seal diferencial
entre los termopares, a niveles por debajo del miligrado de resolucin, exige contar con voltmetros
de muy alta sensibilidad. Algunos nanovoltmetros permiten detectar cambios de temperatura en
torno a los 100C, dependiendo del tipo de termopar utilizado. Conviene indicar que cada tipo de
termopar es nico, en cuanto a la variacin de la tensin para un valor dado de incremento de
temperatura.
Los termopares pueden ser calibrados en aparatos externos, o bien pueden estar integrados
como una parte del calormetro y calibrados formando parte de l. La calibracin puede ser llevada
a cabo utilizando un termmetro patrn en un rango de temperaturas prximas a las de operacin o
bien utilizando un punto fijo de referencia (ej. punto de hielo o punto ebullicin del oxgeno).
Antes de poder realizar un ensayo debe determinarse la capacidad calorfica del calormetro.
Esto puede llevarse a cabo midiendo directamente el incremento de temperatura asociado al
suministro de una cantidad de calor conocida. El calor puede ser determinado con precisin
haciendo circular una corriente perfectamente medida a travs de una resistencia conocida. El calor
tambin puede ser suministrado mediante una reaccin qumica estndar.
La medida de pequeas variaciones de temperatura mediante termopares lleva implcita la
medida de bajos niveles de tensin, esto obliga a prestar especial atencin a los efectos
termoelctricos y a la presencia de campos elctricos y magnticos, que pueden afectar
significativamente a la precisin en la medida.
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ruido. Hay que tener precaucin en que la respuesta temporal del filtro no cause errores por el
enmascaramiento de los picos de la curva de calor. Una baja velocidad de respuesta de los filtros
puede eliminar los datos de los picos que puede dar lugar a la prdida de una informacin vital en la
medida de la cintica de la temperatura. La mayora de nanovoltmetros modernos permiten una
amplia seleccin de filtros para optimizar el rechazo al ruido, asegurando, al mismo tiempo, la
deteccin correcta de los picos.
Al inicio del experimento, la temperatura dentro y fuera del calormetro debe ser la misma.
Una diferencia de 0C da lugar a una tensin diferencial de 0V entre los dos termopares. Si aparece
un cambio de temperatura, se asume que ha sido causado por el fenmeno que est siendo estudiado
durante el experimento.
Al finalizar el ensayo, los datos deben hacerse pasar a travs de la curva de calibracin,
deben ser convertidos en temperaturas y finalmente deben ser analizados. En la figura 2.4.4.1 se
muestra una curva tpica de la generacin calorfica en una reaccin qumica. Los resultados finales
suelen representarse en trminos de calor (caloras) o energa (julios).
2.4.5.1.- Qu es?
La Calorimetra de barrido diferencial (del ingls: Differential Scanning
Calorimetry o DSC), es una tcnica termoanaltica en la que la diferencia de calor entre una
muestra y una referencia es medida como una funcin de la temperatura.
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seleccionada de tal modo que la temperatura del portador de muestra aumente linealmente con el
tiempo. La muestra de referencia debera tener una capacidad calorfica perfectamente definida en el
intervalo de temperaturas en que vaya a tener lugar el barrido. El principio bsico subyacente a esta
tcnica es que, cuando la muestra experimenta una transformacin fsica, tal como una transicin de
fase, se necesitar que fluya ms (o menos) calor a la muestra que a la referencia, para mantener
ambas a la misma temperatura. El que fluya ms o menos calor a la muestra depende de si el
proceso es exotrmico o endotrmico. Por ejemplo, en el proceso de fusin de una muestra, que
pasa de slido a lquido, se requerir que fluya ms calor a la muestra para aumentar su temperatura
a la misma velocidad que la de referencia. Esto se debe a la absorcin de calor de la muestra que
presenta el proceso endotrmico de fusin y cambio de fase de slido a lquido. Por el contrario,
cuando la muestra experimenta procesos exotrmicos (tales como una cristalizacin) se requiere
menos calor para alcanzar la temperatura de la muestra. Determinando la diferencia de flujo
calorfico entre la muestra y la referencia, los calormetros DSC son capaces de medir la cantidad de
calor absorbido o eliminado durante tales transiciones.
La DSC puede ser utilizada tambin para determinar cambios de fase ms sutiles tales como
las transiciones vtreas. La DSC es utilizada ampliamente en la Industria como instrumento de
control de calidad debido a su aplicabilidad en valorar la pureza de las muestras y para estudiar el
curado de los polmeros.
Una tcnica alternativa a la DSC es el anlisis trmico diferencial (DTA). En esta tcnica la
magnitud constante no es la temperatura sino el flujo calorfico que se comunica a muestra y
referencia. Cuando muestra y referencia son calentadas de modo idntico, los cambios de fase y
otros procesos trmicos producen una diferencia de temperatura entre muestra y referencia. Ambas
DSC y DTA proporcionan informacin similar. No obstante, la DSC es ms utilizada que la DTA.
H = KA
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2.4.5.4.- Aplicaciones
La calorimetra de barrido diferencial puede ser utilizada para medir varias propiedades
caractersticas de una muestra. Usando esta tcnica es posible caracterizar procesos como la fusin y
la cristalizacin as como temperaturas de transiciones vtreas (Tg). La DSC puede ser tambin
utilizada para estudiar la oxidacin, as como otras reacciones qumicas.
Las transiciones vtreas se presentan cuando se aumenta la temperatura de un slido amorfo.
Estas transiciones aparecen como una alteracin (o peldao) en la lnea base de la seal DSC
registrada. Esto es debido a que la muestra experimenta un cambio en la capacidad calorfica sin
que tenga lugar un cambio de fase formal.
A medida que la temperatura aumenta, un slido amorfo se har menos viscoso. En algn
momento las molculas pueden obtener suficiente libertad de movimiento para disponerse por s
mismas en una forma cristalina. Esto es conocido como temperatura de cristalizacin (Tc). Esta
transicin de slido amorfo a slido cristalino es un proceso exotrmico y da lugar a un pico en la
curva DSC. A medida que la temperatura aumenta, la muestra alcanza eventualmente su
temperatura de fusin (Tm). El proceso de fusin resulta evidenciado por un pico endotrmico en la
curva DSC. La capacidad para determinar temperaturas de transicin y entalpas hace de las curvas
DSC una herramienta valiosa para producir diagramas de fase para diversos sistemas qumicos.
La DSC puede tambin ser utilizada para el estudio de cristales lquidos. En tanto pueden ser
definidos como transiciones entre slidos y lquidos, tambin pueden ser considerados como un
tercer estado, que exhibe propiedades de ambas fases. ste lquido anistropo es conocido como un
lquido cristalino o un estado mesomorfo. Utilizando la DSC, es posible caracterizar los pequeos
cambios energticos que acompaan a las transiciones desde un slido a un cristal lquido y desde
un cristal lquido a un lquido istropo.
La utilizacin de la calorimetra diferencial de barrido para estudiar la estabilidad a la
oxidacin de muestras requiere, generalmente, una cmara de muestra hermtica. Generalmente,
tales ensayos se hacen isotrmicamente (a temperatura constante) cambiando la atmsfera de la
muestra. Primeramente, la muestra es sometida a la temperatura de ensayo deseada bajo una
atmsfera inerte, usualmente nitrgeno. Despus, se adiciona oxgeno al sistema. Cualquier
oxidacin que tenga lugar es observada como desviacin de la lnea base. Tales anlisis pueden ser
utilizados para determinar la estabilidad y las condiciones de almacenamiento ptimo de un
compuesto.
La DSC es de utilizacin frecuente en las industrias farmacuticas y de polmeros. Para la
qumica de polmeros, la DSC es una herramienta comn en el estudio de los procesos de curado,
que permite el ajuste fino de propiedades polimricas. El entrecruzamiento (cross-linking) de
molculas polimricas, que tiene lugar en el proceso de curado, es exotrmico y da lugar a un pico
positivo en la curva DSC, que usualmente aparece sucesivamente a la transicin vtrea. En la
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industria farmacutica es necesario disponer de frmacos y drogas bien caracterizados en orden a
definir parmetros de procesado y a efectos de dosificacin clnica. Por ejemplo, si es necesario
administrar un frmaco en forma amorfa, es deseable procesar el frmaco a temperaturas por debajo
de aquella a la que pueda presentarse la cristalizacin.
En investigacin en la industria alimentaria, la DSC se utiliza, conjuntamente con otras
tcnicas trmicas analticas, para determinar la dinmica del agua. Cambios en la distribucin del
agua pueden ser correlacionados con cambios en la textura. De modo similar a lo que sucede en
ciencia de materiales, tambin puede ser analizado el efecto del curado sobre los productos
preparados. El registro de las curvas DSC encuentra tambin aplicacin en la valoracin de la
pureza de frmacos y polmeros. Esto es posible debido a que el intervalo de temperaturas en que
funde una mezcla de compuestos es dependiente de sus cantidades relativas. Este efecto es debido a
un fenmeno conocido como depresin del punto de congelacin, que se presenta cuando se
adiciona a una solucin un soluto extrao. (La disminucin del punto de congelacin del agua por
adicin de un anticongelante es la que, al evitar la formacin de hielo, hace que funcione el
automvil en invierno). Consecuentemente, los compuestos menos puros exhibirn un
ensanchamiento del pico de fusin que comienza a temperaturas ms bajas que en un compuesto
puro.
Bibliografia
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