Procariotas

rbol filogentico universal

"Lo que ayer crea todo el mundo y lo que Ud. cree hoy, no lo creern maana
ms que los necios"

Sir Francis Crick

Versin simplificada y modificada del rbol filogentico Universal establecido por Carl
Woese y su discpulo Gary Olsen que muestra los tres Dominios. El termino "dominio"
refiere a un nuevo taxn filogentico que incluye tres lneas primarias: Archaea, Bacteria y
Eucaria. En lnea descendente siguen seis Reinos: I-Moneras, II-Arqueobacterias
(obviamente separadas de Moneras), III-Protistos, IV-Hongos, V-Plantas y VI-Animales.

En realidad al ttulo cabra agregarle: "del mundo celular" ya que no incluye a virus,
viriones....
Se incluye en este esquema a LUCA.
El "rbol" de la vida construido a partir de los estudios del ARNr (cido ribonucleico
ribosmico, al rbol se basa en el estudio de las diferencias en las secuencias de ARNr
comunes a todos los "seres vivos"), muestra cercano a su "raz" (all donde se encuentra
LUCA, ltimo antepasado comn universal de las clulas modernas, compartido por todos
los "seres vivos") organismos "hipertermfilos" que viven a temperaturas cercanas a los 115
grados centgrados. Podra pensarse que la vida "transit por la senda de los sistemas
hidrotermales" o, por que no, se origin en ellos.

Pero bien podramos colocar en la base un manojo de races o nube difusa para representar
a la "Comunidad ancestral comn de clulas primitivas" a partir de la cual divergieron
ramas que dieron orgenes a los tres dominios actuales y adems surcar la grafica con
enlaces transversales entre ramas para indicar la existencia de una transferencia horizontal
de genes. Ver Bibliografa. Ver rbol alternativo.
Monera: el Reino Procariota

Las bacterias (del griego bakterion = bastn) son organismos unicelulares que se reproducen
por fisin binaria. Su tamao es del orden de los micrones e implica una relacin superficie
volumen muy alta: aproximadamente 100.000.
Las Bacterias se encuentran prcticamente en todos lo ambientes de la Tierra, desde las
profundas fosas ocenicas o el interior de rocas slidas hasta las camisas refrigerantes de
los reactores nucleares, ni que decir del resto de los hbitats. La mayora de ellas son
capaces de una existencia independiente pero existen especies como Chlamydia y Rickettsia
que son organismos intracelulares obligados.
Se encontraron estructuras semejantes a las bacterias en un meteorito marciano con una
antigedad de 3.000 millones de aos (el llamado ALH84001, encontrado en la Antrtida).
De confirmarse la naturaleza de estas investigaciones, y si la descripcin de lo encontrado
correspondiera realmente a restos fsiles, sera de presumir la existencia simultnea de vida
bacteriana en Marte y la Tierra (en ese entonces?). Hasta el momento, la naturaleza celular
de estas estructura no ha sido establecida. Para una ampliacin de este tema que se
relaciona con el origen de la vida en la Tierra consultar este enlace.

El Reino taxonmico Monera comprende, entre otras, a las eubacterias (las bacterias
"verdaderas" y las cianobacterias, o bacterias fotosintetizadoras).

Los organismos de este grupo no poseen organelas rodeadas por membranas (como las
formas superiores de vida) y se conocen como procariotas.
Procesos bioqumicos que en eucariotas ocurren normalmente en los cloroplastos o
mitocondrias, tienen lugar en la membrana citoplasmtica.
El cromosoma bacteriano esta constituido por ADN circular que se ubica en la regin
denominada nucleoide
Distribuidos en el citoplasma bacteriano se encuentran pequeos lazos de ADN conocidos
como plsmidos.
Los genes bacterianos se encuentran organizados en un sistema conocido como opern.
Su pequeo tamao, velocidad de reproduccin (Escherichia coli se reproduce por fisin
binaria cada 15 o 20 minutos), y la "ocupacin" de diversos hbitats y modos de existencia
hacen de Moneras el Reino ms abundante y diversificado sobre la Tierra.

Una manera de clasificar las bacterias es subdividirlas de acuerdo a la forma en que

adquieren su energa en:
 Son auttrofas, y obtienen energa de la oxidacin de compuestos
Quimiosintetizadoras inorgnicos como el amonio, los nitritos (a nitratos) o los sulfuros (a
sulfatos).
Fotosintetizadoras
Convierten la energa lumnica en energa almacenada en
carbohidratos. El grupo mas importante es el de las cianobacterias.
Probablemente las primitivas cianobacterias formaron el oxgeno
que se liber en la primitiva atmsfera terrestre. Poseen clorofila a y
tambin el pigmento azul ficocianina y el rojo ficoeritrina.

Los miembros de este grupo obtienen su energa de materia

orgnica elaborada por otros organismos. Podemos sealar dos
grandes grupos: las saprofitas y las simbiticas.
Las saprofitas se alimentan de materia muerta o en descomposicin
siendo por lo tanto importantes recicladores de nutrientes.
Muchas de las que entablan relaciones simbiticas lo hacen en
forma mutualstica y colaboran con su husped, ejemplo de ellos
son las bacterias que en la vaca y otros rumiantes convierten la
celulosa en glucosa asimilable por el animal.
Otras entablan una relacin parasitaria y se constituyen en
patgenas para su husped produciendo enfermedades tales como
la fiebre reumtica, clera, gonorrea, sfilis. La patogenicidad puede
Heterotrfas derivar de causas tales como destruccin celular, liberacin de
toxinas o la misma reaccin del cuerpo a la bacteria infectante.
Las infecciones bacterianas pueden ser controladas, entre otros, por
tratamiento con antibiticos. Los antibiticos son productos que
interfieren en algn punto del procesos de divisin de las bacterias,
son producidos por microorganismos tales como los hongos, que
compiten con las bacterias por los recursos disponibles. Sin
embargo el extendido uso de los mismos impuso una presin
evolutiva de una intensidad antes inexistente que llevo, por el
proceso de seleccin natural, a la expansin de cepas resistentes a
los antibiticos. Esto en muchos casos lleva a frecuentes cambios de
tratamiento de las enfermedades y a la necesidad de nuevos
desarrollo de antibiticos.

Las Arqueobacterias

El grupo ms antiguo, las arqueobacterias, constituyen un fascinante grupo de organismos

y por sus especiales caractersticas se considera que conforman un Dominio separado:
Archaea.
Si bien lucen como bacterias poseen caractersticas bioqumicas y genticas que las alejan
de ellas. Por ejemplo:

no poseen paredes celulares con peptidoglicanos;

poseen secuencias nicas en su ARN
 algunas de ellas poseen esteroles en su membrana celular (una caracterstica de
eucariotas),
poseen lpidos de membrana diferentes tanto de las bacterias como de los eucariotas
(incluyendo enlaces ter en lugar de enlaces ester).

Clulas de Sulfolobus acidocaldarius

Corte de Sulfolobus acidocaldarius
adheridas a un cristal de sulfuro,
observado con microscopio electrnico
observadas con microscopia de
de transmisin(85.000 X)
fluorescencia
Imgenes obtenidas de http://www.bact.wisc.edu/Bact303/MajorGroupsOfProkaryotes.

Hoy se encuentran restringidas (bueno lo de restringidas, si se lee mas adelante , ya no parece un

termino aplicable) a hbitats marginales como fuentes termales, depsitos profundos de
petrleo caliente, fumarolas marinas, lagos salinosos (incluso en el mar Muerto...). Por
habitar ambientes "extremos",se las conocen tambin con el nombre de extremfilas.
Existen tres tipos de arqueobacterias:

1. Metanognicas: (generadoras de metano), crecen en condiciones anaerbicas

oxidando el hidrgeno. Para ello utilizan el CO2 como oxidante, en el proceso lo
reducen a metano (CH4). Las metanognicas usan cidos orgnicos simples como el
acetato para sintetizar sus componentes celulares. Estos cidos orgnicos son
producidos por otras bacterias anaerbicas como producto final de la
descomposicin de la celulosa u otros polmeros. Por lo
tanto las metanognicas son abundantes donde existe materia orgnica y
condiciones de anaerobiosis (por ej. rumen de las vacas)
2. Halfilas: desarrollan en ambientes salinos. Requieren una concentracin de al
menos 10% de cloruro de sodio para su crecimiento
3. Termfilas : desarrollan a temperaturas de 80oC y pH extremadamente bajos.

Se considera que las condiciones de crecimiento semejan a las existentes en los primeros
tiempos de la historia de la Tierra por ello a estos organismos se los denomin
arqueobacterias (del griego arkhaios = antiguo).

El grupo ms antiguo, las arqueobacterias, constituyen un fascinante conjunto de

organismos y por sus especiales caractersticas se considera que conforman un Dominio
separado: Archaea.
Fenotpicamente, Archaea son muy parecidos a las Bacterias. La mayora son pequeos
(0.5-5 micras) y con formas de bastones, cocos y espirilos. Las Archaea generalmente se
reproducen por fisin, como la mayora de las Bacterias. Los genomas de Archaea son de
un tamao sobre 2-4 Mbp, similar a la mayora de las Bacterias. Si bien lucen como
bacterias poseen caractersticas bioqumicas y genticas que las alejan de ellas. Por ejemplo:

no poseen paredes celulares con peptidoglicanos

presentan secuencias nicas en la unidad pequea del ARNr
poseen lpidos de membrana diferentes tanto de las bacterias como de los eucariotas
(incluyendo enlaces ter en lugar de enlaces ster).

Hoy se encuentran restringidas (bueno lo de restringidas, si se lee mas adelante, ya no parece un

termino aplicable) a hbitats marginales como fuentes termales, depsitos profundos de
petrleo caliente, fumarolas marinas, lagos salinosos (incluso en el mar Muerto...). Por
habitar ambientes "extremos", se las conocen tambin con el nombre de extremfilas.

Se considera que las condiciones de crecimiento semejan a las existentes en los primeros
tiempos de la historia de la Tierra por ello a estos organismos se los denomin
arqueobacterias (del griego arkhaios = antiguo).

Membranas de las Archeae

Los lpidos presentes en las membranas son nicos desde el punto de vista qumico, a
diferencia de los eucariotas y las bacterias, en que los enlaces ster son los responsables de
la unin entre los c. grasos y glicerol, los lpidos de las Archaea poseen enlaces TER para
la unin del glicerol con cadenas laterales hidrofbicas. En lugar de ac. grasos poseen
cadenas laterales formadas por unidades repetitivas de una molcula hidrocarbonada como
el isopreno.

Los principales tipos de lpidos son los diteres de glicerol. En algunos teres las cadenas
laterales (fentanil) se unen entre s por enlaces covalentes formando una monocapa en
lugar de la bicapa caracterstica de las membranas, siendo ms estables y resistentes, siendo
habituales por lo tanto en las hipertemfilas.

Paredes celulares
Algunas arqueobacterias metanognicas poseen la pared celular formada por un
compuesto similar al peptidoglicano de las bacterias, por lo que denomina
pseudopeptidoglicano, con enlaces glucosdicos 1,3 en lugar de los 1,4 de los
peptidoglicano. En otras archaeas la pared se compone de polisacaridos, glicoprotenas o
protenas.

El tipo de pared ms comn es la capa superficial paracristalina (capa S) formada por

protena o glucoprotena, de simetra hexagonal.

La pared celular impide la lisis celular y le confiere la forma a la clula. Las paredes de las
Archaea son resistentes naturalmente a la lisozima, debido a la ausencia de peptidoglicano.

La nica arqueobacteria que carece de pared es Thermoplasma.

rbol Filogentico de Archaea

Sobre la base del anlisis de la subunidad pequea del ARN, las Archaea consisten en dos
grupos filogenticamente diferentes: Crenarchaeota y Euryarchaeota. Se diferencias por el
tipo particular de ARN que presentan y por el ambiente en que habitan. Las Crenarchaeota
(crenotas) es un grupo fisiolgicamente homogneo de hbitats enteramente termoflicos.
en cambio las Euryarchaeota (euryotas) son un grupo fenotpicamente heterogneo, que
incluye a las metanognicas, halfilas, etc.

Basados en su fisiologa se distinguen:

metanognicas procariotas que producen metano

halofilas extremas viven en regiones con muy alta concentracin de sal (NaCl); requieren
una concentracin de al menos 10% de cloruro de sodio para su crecimiento
extremas (hiper) termfilas viven a temperaturas muy altas.

Adems de las caractersticas unificadoras de las arqueobacterias, (pared celular sin

murena, lpidos de membranas con enlaces ter, etc.), estos procariotas exhiben atributos
bioqumicos que le permiten adaptarse a estos ambientes extremos. Las Crenarchaeota son
principalmente hipertermoflicos dependientes del sulfuro y los Euryarchaeota son
metanognicos y halfilos extremos.

Metanognicas
Son anaerobias obligadas que no toleran ni siquiera breves exposiciones al aire (O2). En
ambientes anaerbicos son muy abundantes, incluyen sedimentos marinos y de agua dulce,
pantanos y suelos profundos, tracto intestinal de animales y plantas de tratamiento de
lquidos cloacales. Las metanognicas tiene un tipo increble de metabolismo que puede
usar el H2 como fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono para su crecimiento.
En el proceso de construccin de material celular desde H2 y CO2, Las metanognicas
producen metano (CH4) en un nico proceso generador de energa. El producto final, gas
metano, se acumula en el ambiente, as se han creado la mayora de las fuentes naturales de
gas natural (combustible fsil) utilizado con fines industriales o domsticos.
 Los procariotas Metanognicos son habitantes normales del rumen de vacas y
rumiantes. Una vaca puede eliminar unos 50 litros de gas metano por da, en el
proceso de eructacin. El metano es un importante gas del efecto invernadero
que se acumula en la atmsfera a velocidad alarmante. Cuando se
destruyen reas verdes y se reemplazan por ganado se produce un doble
impacto en el efecto invernadero ( "double-hit"):

1. menores cantidades de CO2 sern eliminadas debido a la remocin de

las plantas
2. CO2 y CH4 adicionales sern liberados por el metabolismo combinado
del ganado y los procariotas metanognicos.

Por otra parte gran cantidad de gas metano es producido durante el tratamiento de los
lquidos cloacales, sin embargo normalmente es descartado en lugar de ser reciclado.

Methanococcus jannischii

Methanococcus jannischii fue originalmente aislada de

una muestra tomada de una chimenea ( white smoker:
fumarola blanca) a 2.600 metros de profundidad en
el Pacfico Este. Puede crecer en un medio de cultivo
mineral que contenga solo H2 y CO2 como fuente
carbonada y en un rango de temperatura entre 50 -
86 grados. Estas clulas son cocos irregulares
mviles, debido a la presencia de dos haces de
flagelos polares insertos cerca del mismo polo .

Halfilas extremas
Viven en ambientes naturales como el mar Muerto, el Great Salt Lake (Colorado USA), o en
estanques de evaporacin de agua salada, donde la concentracin de sal es muy alta (hasta
5 molar o 25 por ciento de NaCl). Estos procariotas requieren la sal para el crecimiento, sus
paredes celulares, ribosomas y enzimas se estabilizan con el in Na+. Halobacterium
halobium, la especie predominante en Great Salt Lake, se adapta al ambiente altamente
salino por el desarrollo de una "membrana prpura", que toma esta coloracin por la
presencia del pigmento del tipo de rodopsina llamado bacteriorodopsina que reacciona
con la luz formando un gradiente de protones a lo largo de la membrana que permite la
sntesis de ATP. Este es el nico ejemplo en la naturaleza de una fotofosforilacin sin
clorofila. Estos organismos son hetertrofos y aerobios, la alta concentracin de ClNa en el
ambiente limita la disponibilidad de O2 para la respiracin, por lo que usando
bacteriorhodopsina aumentan su capacidad de producir a ATP, convirtindolo a partir de
la energa lumnica.
 Halobacterium salinarium

Halobacterium salinarium es una halofila extrema que crece a 4 - 5

M NaCl y no crece por debajo de 3 M NaCl. La preparacin por
criofractura muestra la estructura de la superficie de la membrana
celular y revela pequeos parches de "membrana prpura" que
contienen el pigmento bacteriorrodopsina embebidas en la
membrana plasmtica, este pigmento expulsa un protn de la clula, creando as un
gradiente de protones que puede ser usado para generar ATP.

Termfilas extremas (Termoacidfilas)

Representan varias lneas filogenticas de Archaea. Estos organismos
requieren temperaturas muy altas (80 - 105 grados) para crecer. Sus membranas y
enzimas son inusualmente estables a estas temperaturas. La mayora de ellas requiere
sulfuro para crecer, algunas son anaerobias y usan el sulfuro como aceptor de electrones en
la respiracin, en reemplazo del oxgeno. Otras son litotrficas y oxidan sulfuro como
fuente de energa, crecen a bajo pH (< pH 2) dado que acidifican su ambiente oxidando Su
(sulfuro) a SO4 (c. sulfrico). Estos hipertermfilos son habitantes de ambientes calientes,
ricos en sulfuro asociados a los volcanes, como los manantiales clientes, giseres y las
fumaroles del Parque National de Yellowstone , en respiraderos termales ("smokers") y en
fracturas del piso ocenico. Sulfolobus fue el primer Archeae hipertermoflicos descubierto
por Thomas D. Brock de la Universidad de Wisconsin en 1970. Su descubrimiento, junto al
de Thermus aquaticus en el Parque Yellowstone, iniciaron el campo de la biologa de los
hipertermfilos. Thermus aquaticus, (fuente de la enzima taq polimerasa usada en la
reaccin en cadena de la polimerasa , PCR), crece a 70 grados. Sulfolobus crece en
ambientes rico en sulfuro, manantiales calientes, 90 grados y pH 1. Thermoplasma, tambin
descubierta por Brock, es un termfilo nico, ya que es el representante exclusivo de una
lnea filogentica de Archaea. Thermoplasma recuerda a las bacterias micoplasmas ya que
carece de pared celular. Thermoplasma crece a 55 grados y pH 2; solo han sido encontradas
en pilas calientes de carbn, los cuales son productos de desecho humanos.

Sulfolobus acidocaldarius (T.D. Brock)

izq: MET X85,000, der: microfotografa por
Parque National de Yellowstone
fluorescencia de clulas adheridas a cristales de
sulfuro
Sulfolobus es un termfilo extremo que se encuentra en manantiales cidos productos de
calentamiento por volcanes, y suelos con temperaturas entre 60 - 95 gradosC, y pH 1 a 5.

Yellowstone National Park, USA, izq: Octopus Spring, der: Obsidian Pool.

A pesar que las Archaea son extremfilos por excelencia, tambin pueden encontrarse
Bacterias, e inclusive algunos eucariotas en estos hbitat. Ninguna bacteria produce
metano, pero existen algunas que creen en estos ambientes. Con respecto a la tolerancia
cida, una bacteria: Thiobacillus, puede crecer a pH 0. Un alga, Cyanidium, tambin puede
crecer a pH 0. En ambiente superclidos ( > de 100 C), los Archaea son exclusivos.
Ninguna bacteria puede crecer en altas concentracin de sales.

Relacin entre los dominios

Archaea Bacteria Eukarya

plantas (celulosa),
pseudopeptidoglicano, o solo por
Pared peptidoglicanos animales (ninguna),
protenas
fungi (quitina)
Lpidos: las cadenas hidrocarbonadas
lpidos: las cadenas de ac. grasos estn
Membrana ramificadas estn unidas al glicerol por
unidas al glicerol por enlaces ester
enlaces ter
ADN fragmentado en
Genoma ADN nico, circular, presencia de plsmidos
cromosomas mltiples

Descubriendo nuevos microbios

En esencia el mtodo consiste en la extraccin de ADN de una muestra del medio ambiente,
separar sus filamentos y mezclarlos con un "cebador" (una secuencia corta de ADN que se
combinar con una secuencia complementaria del ADN de la muestra). Luego utilizando
la el ADN de la muestra ser sintetizado (y amplificado...) comenzando en el punto
donde se peg el cebador y continuando a lo largo de la cadena de ADN.
Si se utiliza como cebador regiones altamente conservadas de los genes que codifican el
ARNr de la (subunidad pequea de los ribosomas), los genes de los ribosomas de la
muestra sern copiados y su secuencia comparada con la de los organismos conocidos.
Toda secuencia nueva de genes representa un nuevo organismo, y puede representarse en
el rbol filogentico construido a partir de la secuencia de los genes de la subunidad
pequea de los ribosomas.
De esta manera se descubrieron nuevos tipos de arqueobacterias en los ambientes marinos.
Parecen ser bastante comunes y la abundancia de su ADN en las aguas superficiales
costeras sugieren que pueden representar hasta el 34% de la biomasa correspondiente a los
procariotas en ciertas pocas del ao.

El registro fsil
La evidencia fsil soporta la idea que el origen de la vida en la Tierra comenz en pocas
tempranas: hace ya 3.500 millones de aos, en notacin cientfica un billn (o mil millones)=
un Giga, Ga abrevia por Giga-aos.
Los fsiles ms antiguos provienen de rocas marinas, como la piedra caliza y la piedra
arenizca, formadas en el antiguo ocano.
J. William Schopf de la Universidad de California, Los ngeles (UCLA) descubri
recientemente posibles procariotas fotosintetizadores en rocas de 3,5 Ga; y son de tal
complejidad que el hecho sugiere que formas primitivas debieron existir antes. De rocas
obtenidas de Groenlandia se obtuvieron posiblemente las ms antiguas clulas 3,8 (?) Ga.
La roca ms antigua conocida en la Tierra tiene 3,96 Ga y proviene de la regin canadiense
del rtico.

Por lo tanto, a partir de estas evidencias podemos suponer que la vida en la Tierra
comenz rpidamente luego del enfriamiento de la corteza y la formacin de la
atmsfera y los ocanos.

Recientes descubrimientos de la existencia de bacterias en las fosas marinas, en las cuales

las placas tectnicas dejan lugar a fisuras. El calor y los materiales resultantes de esta
circunstancia conforman un ambiente particular donde se desarrollan bacterias. Esto
permite presuponer otro lugar donde la vida pudo haberse originado: en estas fosas
marinas donde el calor y la roca derretida aflora a la superficie de la Tierra.

Estromatolitos
El curso de la evolucin puede ser reconstruido estudiando el registro fsil. Los fsiles son
los restos mineralizados de organismos de perodos geolgicos previos, que proporcionan
un registro de la historia geolgica de la tierra.

Los fsiles microbianos se han encontrado en rocas compuestas por finas capas
denominadas estromatolitos, formados por bacterias hetertrofas y fottrofas que vivan en
un tipo de colonias. Las cianobacterias se encuentran en la superficie externa y otras
bacterias fotosintetizadoras (anaerobias) se encuentran inmediatamente por debajo de ellas.
Por debajo de las capas fottrofas se encuentran capas de bacterias hetertrofas. Las capas
de los estromatolitos son alternativamente biognicas y sedimentarias en su origen.

Los estromatolitos se siguen formando todava en la actualidad y son relativamente

comunes en lagunas y aguas termales. Los fsiles microbianos mas antiguos son de hace
unos 3500 millones de aos, casi tan antiguos como las rocas mas antiguas (3800 millones
de aos).

A. Imagen de los estromatolitos de la

Baha de los Tiburones (Sharks Bay),
Australia.
B. Un corte de una de esas estructuras
C. Ampliacin que muestra las
cianobacterias principal constituyentes de esta
pieza. Imagen

Composicin Qumica

La clula bacteriana tiene un contenido en agua del 70 al 85%.

El peso hmedo (masa hmeda) de los seres unicelulares se estima mediante
centrifugacin y separacin de la masa celular de su medio de cultivo.
El peso seco (masa seca) se estima luego de evaporar toda el agua, y estar comprendido
por lo tanto entre el 15 al 30% del peso hmedo.
Si las clulas contienen grandes cantidades de materiales de reserva (es decir, lpidos,
polisacridos, polifosfatos o azufre) el peso seco es proporcionalmente superior.
Los datos de la composicin elemental y la distribucin de los compuestos orgnicos
integrantes del peso seco se dan en las tablas siguientes
Composicin elemental

Elemento Porcentaje
Carbono 50 %
Oxgeno 20 %
Nitrgeno 14 %
Hidrgeno 8%
Fsforo 3%
Azufre 1%
Potasio 1%
Calcio 0,5 %
Magnesio 0,5 %
Hierro 0,2 %

Composicin del peso seco

Polmero Porcentaje
Protenas 50 %
Pared celular 10-20 %
ARN 10-20 %
ADN 3-4 %
Lpidos 10 %

Forma y Tamao
Las bacterias tpicamente tienen una de estas tres formas:

1. cilndrica (bacilos):
2. esfrica (cocos), el dimetro de los micrococos es de solo 0,5 m
3. espiralada (espirilos)

Son unicelulares y a menudo se agrupan formando agregados o filamentos. Generalmente

son muy pequeas su tamao es del orden del micrn.
 Tabla I

Nombre de la bacteria Dimetro Longitud

Pseudomona aeruginosa 0,4-0,5 m 2-3 m
Chromatium okenii 5 m 20 m
Escherichia coli 1 m 5 m
Thiospirillum jenense 3,5 m 50 m
Epulopiscium fishelsoni 250 m
Thiomargarita namibiensis 0,75 mm

Las de forma bacilar generalmente tienen 1 m de dimetro y 5 m de largo, las de 20 o

ms micras de largo se consideran "gigantes". Las bacterias gigantes son de crecimiento
lento, la mayor de ellas es Thiomargarita namibiensis, bacteria esfrica cuyo dimetro puede
alcanzar 0,75 mm.

Obtenida de: http://129.109.136.65/microbook/ch002.htm

Al microscopio los miembros de los gneros Pseudomonas y Bacillus se observan como
varillas (bacilos) rectos.
 El gnero Vibrio aparece como un bacilo curvado o forma de coma
El gnero Corynebacterium tiene forma de maza y tendencia a cambiar de forma
El gnero Mycobacterium presenta ramificaciones incipientes.
El gnero Streptomyces puede formar un micelio

El mtodo usual de divisin en procariotas es la fisin binaria. Tras el alargamiento de la

clula construyen de afuera hacia dentro paredes transversales que van progresando, y las
clulas hijas se separan. Sin embargo muchas de ellas en determinadas condiciones,
permanecen unidas durante un cierto tiempo, dando origen a agrupaciones caractersticas.
Segn el plano y nmero de divisiones pueden encontrarse en bacterias esfricas:

diplococos
estreptococos
estafilococos
sarcinas

2 3

1. Escherichia coli, cepa hemorrgica 0157:H7. Copyright Dennis Kunkel (MEB 22.810x
http://www.pbrc.hawaii.edu/~kunkel/gallery), usada con permiso.
2. Escherichia coli divisin por fisin binaria. Copyright Dennis Kunkel (MET 92.750x
http://www.pbrc.hawaii.edu/~kunkel/gallery), usada con permiso.
3. Esquema de un bacilo

Treponema pallidum, la espiroqueta que causa la sfilis

http://www.bact.wisc.edu/Bact303/MajorGroupsOfProkaryotes.
Diferencias con Eucariotas
Si bien la clula eucariota se describe in extenso es conveniente dejar planteadas aqu sus
principales diferencias con la procariota.

Estructura/Proceso en Eucariotas en Procariotas

Membrana nuclear Presente Ausente
Combinado con protenas
ADN Desnudo y circular
(histonas)
Cromosomas Mltiples nico
Divisin celular Mitosis o Meiosis Fisin binaria
Mitocondria Presentes (con ribosomas 70S)Ausente. Los procesos bioqumicos
equivalentes
Presentes en clulas vegetales
Cloroplasto tienen lugar en la membrana
(con ribosomas 70S)
citoplasmtica.
80S(a 60S y 40S sus
Ribosomas 70S(a 50S y 30S sus subunidades)
subunidades)
Presente en vegetales
Pared celular Presente constituida por murena
constituida por celulosa
Nuclolos Presentes Ausentes
Retculo endoplsmico Presente Ausente
Cilios y flagelos que al corte
rganos de transversal presentan una
Flagelos sin estructura 9+2
locomocin distribucin caracterstica de
microtbulos: 9+ 2

Especie bacteriana
La definicin moderna de especie puede ser aplicada a la mayora de los eucariotas,
incluyendo hongos, algas y protozoos, pero no es aplicable a los procariotas, ya que la
reproduccin y el intercambio gentico no son esenciales en su ciclo de vida.

Dado que los microbilogos necesitan identificar y clasificar las bacterias por diferentes
razones prcticas, una especie puede definirse como una coleccin de cepas similares, que
difieren lo suficiente de otros grupos de cepas para asegurar su reconocimiento como
unidad taxonmica bsica. Para ser exactos. una especie procariota podra definirse de
manera precisa a partir de sus secuencia de ARNr. A pesar de no estar completamente
aceptado, se ha propuesto que dos procariotas cuyo ARNr 16S tenga un 97% o mas de
secuencias idnticas es muy probable que pertenezcan a la misma especie.

Lo usual es que se defina una especie a partir de la caracterizacin de varias cepas o clones.
Siendo CLON una poblacin de clulas genticamente idnticas derivadas de una (1) sola
clula.
 Nucleoide bacteriano
El "ncleo" bacteriano: NUCLEOIDE
Las clulas procariotas y eucariotas se distinguieron desde el principio sobre la siguiente
base estructural: la estructura equivalente al ncleo eucariota (esa compleja estructura
rodeada por membranas) no se observaba en procariotas.
El tamao de las bacterias dificult los estudios acerca del "ncleo" bacteriano, sin embargo
en el curso de las investigaciones destinadas a su esclarecimiento la utilizacin de los
mtodos citoqumicos y la microscopa electrnica demostraron su existencia.
El gran poder de resolucin del microscopio electrnico
no solo amplia la tpica forma bacteriana, sino que
revela claramente la organizacin procariota.

Obtenida de: http://129.109.136.65/microbook/ch002.htm Note la

regin nuclear o nucleoide (n) donde se localiza el ADN y las reas
oscuras del citoplasma de Neisseria gonorrhoeae.

Hoy se conoce que al igual que del resto de seres vivos

(celulares) poseen ADN, y que el mismo no se haya
distribuido al azar en el citoplasma, sino en una zona particular denominada regin nuclear
o nucleoide sin estar separado por una unidad de membrana.

Cromosoma bacteriano
Por microscopa ptica puede constatarse la presencia de ADN por la tincin de Feulgen.
Sin embargo, fueron los mtodos autorradiogrficos los que demostraron en forma
indubitable que el ADN es el material "nuclear" de las bacterias, gracias a una de las
caractersticas que posee esta molcula: es la nica sustancia celular que posee timina.

De los mtodos autorradiogrficos (usando timina tritiada) y bioqumicos tambin surgi el

conocimiento que el ADN se presenta como una doble cadena (de cerca de 1 mm de
longitud), circular y cerrada de manera covalente, que toma el nombre de cromosoma
bacteriano. Esta "gigantesca" molcula circular tiene un peso de 3 X 10 9d (daltons).
Sobre estas bases por lo tanto, el nucleoide es una estructura que contiene un solo
cromosoma.
No posee las histonas del cromosoma eucariota, pero se ha comprobado la existencia de
protenas y poliaminas de bajo peso molecular y de iones magnesio que cumpliran su
funcin.

Desde ya, la sola mencin de la longitud del cromosoma bacteriano del orden del milmetro
hace necesaria una explicacin que concilie con el tamao de la bacteria que est en el
orden de micrones (1 m = 0,001 mm), la microscopa electrnica muestra un cromosoma
bacteriano altamente condensado y ordenado ("supercoiled" o superenrrollado), y que se
encuentra anclado parcialmente a la membrana bacteriana. Este ADN superenrrollado
adopta una forma mucho mas compacta que el circular. En la clula eucariota el
enrollamiento se hace sobre las histonas en los nucleosomas, pero en las procariotas, existe
una enzima: la ADN girasa que que provoca enrollamientos negativos (la torsin se hace de
manera contraria a la direccin de la doble hlice, o sea hacia la izquierda). E. coli puede
presentar hasta unos 50 dominios superenrrollados debido a su asociacin con protenas
estructurales, poliaminas de bajo peso molecular y de iones magnesio que cumpliran la
funcin de las histonas eucariotas.
De la misma forma que la ADN girasa superenrrolla el cromosoma para confinarlo dentro
de la clula, otra enzima, la Topoisomerasa I es capaz de desenrollar y relajarlo para
permitir la replicacin.

Cromosoma de E. coli extendido por shock osmtico

1200 m de long. (Dr. Gopal Murti/Science Photo
Library)

Es interesante como algunos antibiticos (ac. nalixdico y novobiocina) actan inhibiendo la

accin de la ADN girasa.

El esquema supersimplificado de esta figura:

http://www.biosci.uga.edu/almanac/bio_103/notes/may_30.html.Esquematiza el cromosoma
bacteriano y representa los plsmidos.
Plsmidos
Son elementos genticos accesorios extracromosmicos, pequeos fragmentos circulares de
ADN, que estn presentes prcticamente en todas las clulas bacterianas. Contienen de 2 a
30 genes. Algunos tienen la capacidad para incorporarse o salir del cromosoma bacteriano.
Se denomina episoma a un plsmido incorporado al cromosoma bacteriano. Los plsmidos
se replican en manera similar al cromosoma bacteriano. En Escherichia coli se han
reconocido muchos plsmidos, entre ellos el F ("factor sexual") y el R (resistencia a los
antibitico). El plsmido F contiene 25 genes, algunos de los cuales controlan la produccin
de los pilis , "tubos" que se extienden desde la superficie de las clulas bacterianas
"machos"( F+), a la de las clulas bacterianas hembras ( F -).

Conjugacin en una cepa de Escherichia coli (M.E

27.700x)
Dennis Kunkel, usada con permiso.

La resistencia a los antibiticos ha sido encontrada en grmenes patgenos causantes de

enfermedades tales como: tifoidea, meningitis, gonorrea y otras. Actan proporcionando la
informacin necesaria para destruir el antibitico o para circunvalar el bloqueo que
produce el antibitico en la va metablica bacteriana.
El plsmido R confiere, a las clulas que lo poseen, resistencia a los antibiticos o drogas.
Un plsmido R puede llegar a tener hasta 10 genes que confieren resistencia.
Los plsmidos R pueden transferirse a otra bacteria de la misma especie, a virus e
inclusive, a bacterias de diferentes especies.

Tamao genmico

El tamao genmico de las bacterias se diferencia de una especie a otra, en un rango que va
de 0,6 hasta 13.106 pares de bases (pb). La mayora de los genomas bacterianos tienen el
mismo orden de tamao que el de Escherichia coli (esto es 4,6.106 kb).
El nmero de genomas por clula difiere igualmente de una especie a otra y depende de las
condiciones de cultivo.
A efectos comparativos la tabla siguiente muestra el tamao genmico de Escherichia coli y
de una serie de eucariotas.

Organismo Tamao genmico

Escherichia coli 4,6.106 pb
Neurospora crassa 19.106pb
Aspergillus niger 40.106pb
Homo sapiens 2,9.109pb
Zea maiz 7.109pb

Reproduccin Bacteriana
Los datos obtenidos a partir de las autorradiografas del cromosoma de Escherichia coli
(imgenes theta por su similitud al aspecto de dicha letra griega) ya indican la manera en
que se replicara el ADN bacteriano, el esquema y la animacin representan una replicacin
unidireccional, si bien en realidad se ha establecido que la misma es bidireccional y existen
dos horquillas de replicacin que acontecen por la desespiralizacin de la doble cadena.
La duplicacin de la clula va precedida por la duplicacin o replicacin del cromosoma
bacteriano. Primero se replica y luego pega cada copia a una parte diferente de la
membrana celular. Cuando las clulas que se originan comienzan a separarse, tambin se
separa el cromosoma original del replicado.
El nmero de copias por clula del cromosoma depende del estadio del ciclo celular
(replicacin del cromosoma, crecimiento de la clula, separacin de los cromosomas, etc.).
Si bien el mecanismo de separacin de los cromosomas "hermanos" no se ha dilucidado en
su totalidad, todo los modelos coinciden que una de las condiciones es que el cromosoma
permanezca "pegado" a la membrana celular a travs de varios estadios del ciclo de
divisin bacteriano.
Luego de la separacin de las clulas (citocinesis), quedan dos clulas de idntica
composicin gentica (excepto en los raros casos de mutacin espontnea). Ver animacin
abajo

El tiempo necesario para la replicacin del cromosoma de Escherichia coli es de

aproximadamente 40 minutos, sin embargo la duplicacin de la bacteria acontece (en
condiciones optimas) en cerca de 20 minutos, este hecho paradojal se explica por el
descubrimiento que en los cromosomas bacterianos "hijos" se inicia un nuevo ciclo de
divisin antes de que se termine el primero.
El cromosoma procariota es mucho ms fcil de manipular que el de los eucariotas y por lo
tanto se conoce mucho acerca de sus genes y sus mecanismos de control.
Una consecuencia de este mtodo asexual de reproduccin es que todos los organismos de
una colonia son genticamente iguales. Cuando se trata una enfermedad bacteriana, una
droga que mata una bacteria matara todos los otros miembros de este clon (colonia) con los
cuales se ponga en contacto.
Ciertos tipos de bacterias pueden "donar " un pedazo de ADN a una clula receptora. Esta
recombinacin es el equivalente bacteriano de la reproduccin sexual en eucariotas. Debe
notarse que usualmente no se transfiere la totalidad de la molcula de ADN, solo una
pequea parte

Nmero de copias cromosmicas

Las clulas procariotas en crecimiento rpido (fase logartmica o exponencial) tienen la
posibilidad de dividirse ms rpido que lo que permite la maquinaria de replicacin del
ADN. Por ello pueden tener de 2 a 4 copias del cromosoma bacteriano o copias incompletas
del mismo. Para asegurar que exista una copia completa para cada una de las clulas hijas
en la fisin binaria, se inician nuevos ciclos de replicacin del ADN antes que el ltimo
haya terminado.

nicamente en fase estacionaria, cuando las bacterias cesan de dividirse, existe un

cromosoma por clula. Por ello este tipo de organismos son haploides, es decir el genoma
mnimo por clula es una sola copia del cromosoma bacteriano, lo que implica que existe
una sola copia de cada gen.

Verificacin de quorum
Bajo el termino "verificacin de quorum " (quorum sensing ) se describe la manera en que las
bacterias determinan cuantas de ellas se encuentran en la vecindad.
La "verificacin de quorum " (quorum sensing) permite a una poblacin de bacterias
coordinar su expresin gnica y, por lo tanto, su comportamiento colectivo.
Usualmente la "verificacin de quorum " sirve para controlar procesos que son efectivos
cuando un gran numero de bacterias actan en conjunto. Si existe quorum, es decir, si el
numero de ellas es el adecuado, se desencadenara una respuesta colectiva. Por ejemplo

Millones de bacterias bioluminescentes decidirn emitir luz simultneamente a fin de

permitir a su hospedador (un calamar) "encenderse" y utilizar la luz producida, para, por
ejemplo, distraer a un predador...
 Bacterias patgenas como Salmonella esperan a "reunir quorum" antes de liberar las
toxinas que atacaran a su husped. Si la bacteria ataca sola, en vez de hacerlo en conjunto,
el sistema inmunolgico la neutraliza rpidamente.
Las investigaciones respecto a este tema mostraron adems que las bacterias utilizan la
'verificacin de quorum ' en :

el proceso de formacin del viscoso biofilm que forma las placas de los dientes
la regulacin de la divisin
la formacin de esporas.

Investigadores de la Universidad de Princenton identificaron un autoinductor, el AI-2

(AutoInducer 2) que posee la potencialidad de mediar la comunicacin en diferentes
especies bacterianas y postularon la existencia de un mecanismo comn empleado por las
bacterias en ambientes naturales.

La identificacin qumica del AI-2 se realiz mediante cristalografa de Rayos X y llev,

entre otras, a la conclusin de que se trataba de un derivado de 4,5-dihidroxi-2,3-
pentanodiona y que, esto es lo novedoso, en su forma cclica es un sustrato plausible para la
adicin de borato. Los estudios de densidad electrnica del AI-2 indican que se trata de
un furanosil borato diester y representa el primer rol bioqumico definido para el Boro en
sistemas biolgicos.

Citoplasma bacteriano
Membrana plasmtica bacteriana
La estructura de la membrana bacteriana es similar a la de plantas y animales, es por ello
que se habla para ellas de una "membrana elemental ". Puede aislarse utilizando lisozima
mediante shock osmtico.

Esta compuesta primariamente de protenas y fosfolpidos (cerca de 3:1). Realiza numerosas

funciones que incluyen las de transporte, biosntesis y transduccin de energa.

es la barrera osmtica de la clula

es sede de los sistemas de transporte activo y de las permeasas especficas
en la membrana (o junto a ella) se encuentran las enzimas y componentes del transporte
de electrones y fosforilacin oxidativa (recordemos que en eucariotas las mismas estn en
las mitocondrias)
all se realiza la sntesis de componentes de la pared celular y de las cpsulas
lugar de excrecin de exoenzimas
sede del centro de replicacin del ADN
punto de anclaje de los flagelos

Las membranas procariticas, a diferencia de las de eucariotas, carecen de esteroles

(excepto Oxyphotobacteria, ciertas bacterias metilotrofas y los Mollicutes). Pero en cambio,
en muchas bacterias existe una peculiar clase de compuestos policclicos, denominados
hopanoides (triterpenoides pentacclico) que parecen condicionar parte de la rigidez de las
membranas citoplsmicas.
En arqueobacterias, que presentan en lugar de los habituales lpidos a base de steres de
cidos grasos con glicerol, existen lpidos a base de teres de alcoholes de cadena larga
con glicerol (p. ej., difitanil-glicerol-diteres).Los alcoholes suelen ser derivados
poliisoprenoides. Este tipo de membranas son ms rgidas que las de eubacterias.

Citoplasma Bacteriano
Esta limitado por la membrana citoplasmtica, y en el se encuentran las inclusiones
celulares. En un principio considerado una "solucin" homognea de protenas, los
mtodos de fraccionamiento acoplados a los estudios bioqumicos y de microscopa
electrnica mostraron la complejidad del sistema. En realidad esta atravesado por
numerosas membranas que lo compartimentalizan, si bien esta compartimentalizacin no
es tan desarrollada como en eucariotas.

Si se homogeneizan clulas bacterianas y luego se las centrifuga a 100.000 g se separa en el

fondo del tubo de centrifuga una fraccin "particulada" que contiene los ribosomas y las
membranas con los cidos nucleicos, y una fraccin "soluble" que contiene protenas, y los
cidos ribonucleicos solubles ( tARN y mARN).

Neisseria gonorrhoeae (dos clula dividindose,

n=nucleoide)

Membranas intracitoplasmticas

En muchas bacterias la membrana rodea al citoplasma sin pliegues ni invaginaciones, en

otras est invaginada y atraviesa el citoplasma (bacterias fototrofas como Chromatium o
Rhodospirillum).

El crecimiento e invaginacin de la membrana citoplasmtica rellena la luz de las bacterias

fotosintetizadoras originando tubos y vesculas (cuando se rompen las bacterias aparecen
como vesculas aisladas que reciben el nombre de "cromatforos"). En otras bacterias
fotosintetizadoras las vesculas estn aplanadas y se apilan ordenadamente y, al igual que
en las vesculas de los cloroplastos de las plantas verdes, se denominan tilacoides.
Las membranas fotosintetizadoras son similares a la citoplasmtica y en ella se encuentran
las bacterioclorofilas y los carotenoides que intervienen en la fotosntesis. Tambin se
encuentran aqu los componentes del sistema fotosinttico de transportes de electrones y de
la fosforilacin.

Los ribosomas
Los ribosomas son las estructuras celulares donde se sintetizan las protenas. Se encuentran
en el citoplasma bacteriano y al microscopio electrnico se presentan como partculas de
unos 16 x 18 nm. Un ribosomas de E. coli es una ribonucleoproteina con una masa de 2700
kd, un diametro aproximado de 200 . Los 20,000 ribosomas de una clula bacteriana
constituyen cerca de una cuarte parte de todo su volumen. Los ribosomas no disociados
tienen una velocidad de sedimentacin en una ultra centrfuga de 70 S. Los ribosomas
pueden disociarse en una subunidad grande (50S) y una subunidad pequea (30S)que unidas
forman el ribosoma 70 S.

Subunidades ribosmicas (A) 30S, (B) 50S, y (C) 70S

Debe destacarse que los ribosomas de las organelas eucariotas (mitocondrias y

cloroplastos) tienen 70 S, es decir son similares a los de los procariotas. (ver La hiptesis
endosimbitica del origen eucariota).
El nmero de ribosomas depende de la velocidad de crecimiento de la clula ( > velocidad
mas ribosomas) y oscila entre 5.000 a 50.000 / clula.
En la constitucin del ribosoma intervienen protenas y ARNr (r por ribosmico), del 80 al
85% del ARN bacteriano est en los ribosomas. Son la parte principal ("core" ) de los
ribosomas y posiblemente la clave del mecanismo de traduccin de las protenas. Se
conocen tres tipos : 5S y 23S pertenecientes a la unidad 50S y el 16S de la unidad 30S , su
estudio comparativo llev a postulacin de un rbol Filogentico Universal.
Durante la sntesis proteica en las microfotografas electrnicas se observan cadenas de
ribosomas ordenados regularmente. Se trata de ribosomas alineados a lo largo del
filamento de ARNm ( m por mensajero, los polirribosomas o polisomas
Los ribosomas citoplasmticos de los eucariotas tienen una velocidad de sedimentacin mayor: 80
S. Esta diferencia entre los ribosomas de las bacterias (70 S) y de los eucariotas (80 S) constituyen
para ellas (si, nosotros somos eucariotas) un "taln de Aquiles" ya que algunos antibiticos
interfieren en algn punto de la sntesis proteica que procesan los ribosomas 70 S (ver Tabla
siguiente), y no la afectan cuando se trata de ribosomas 80 S.

Inhibicin de la sntesis proteica por antibiticos en procariotas

Antibitico Punto de accin

Eritromicina Funcin de la subunidad 50 S
Tetraciclinas Anclaje del ARNt a los ribosomas
Estreptomicina Unin de los aminocidos
Cloranfenicol Incorporacin de aminocidos a las protenas
La hiptesis endosimbitica del origen eucariota
Posiblemente la simbiosis bacteriana con un eucariota primitivo fue la principal etapa en la
evolucin de la clula eucariota. En 1980, Lynn Margulis propuso la teora de la
endosimbiosis para explicar el origen de la mitocondria y los cloroplastos. De acuerdo a
esta idea un procariota grande o quizs un primitivo eucariota fagocit o rodeo a un
pequeo procariota hace unos 1500 a 700 millones de aos.

Esquema del probable proceso de fagocitosis que dio origen a la endosimbiosis. Modificado
de: http://whfreeman.com/life/update/chap04.html.

En vez de digerir al pequeo organismo el grande y el pequeo entraron en un tipo de

simbiosis conocida como mutualismo en el cual ambos se benefician y ninguno es daando.
El organismo grande gana un excedente de ATP provisto por la "protomitocondria" o un
excedente de azcar provisto por el "protocloroplasto", y provey al recin llegado de un
medio ambiente estable y de material nutritivo para el endosimbionte.
Con el tiempo esta unin se convirti en algo tan estrecho (la funcin regeneradora de ATP
se deleg a los orgnulos celulares) que las clulas eucariotas heterotrficas no pueden
sobrevivir sin mitocondrias ni los eucariotas fotosintticos sin cloroplastos (la membrana
que rodea al protoplasto del eucariota no dispone de los componentes de la cadena de
transporte de electrones), y el endosimbiota no puede sobrevivir fuera de la clula husped.
La divisin de mitocondrias y cloroplastos es muy similar a la de los procariotas. Sin
embargo los orgnulos celulares, tal lo sealado, no son independientes a pesar de contener
su propia molcula de ADN. Una parte de la informacin necesaria para la sntesis de sus
protenas se encuentra en el ncleo del eucariota.
Como ejemplo citemos aqu la ribulosa-bifosfato carboxilasa el enzima clave de la
fotosntesis. Consta de 8 subunidades grandes y de 8 subunidades pequeas. La
informacin de las subunidades grandes se localiza en el ADN del cloroplasto, la de las
pequeas en el ncleo celular.
Resumiendo, segn la hiptesis endosimbitica las mitocondrias proceden de bacterias
aerbicas incoloras y los cloroplastos, de cianobacterias, que entraron en una relacin
endosimbitica con una clula eucariota primitiva.
 La Pared bacteriana
Cubiertas superficiales
Las cubiertas que rodean la clula bacteriana se han identificado por medio de tcnicas de
tincin en microscopa ptica y electrnica, y tcnicas de aislamiento y caracterizacin
bioqumica de los componentes celulares.
Las principales cubiertas son:

cpsulas y limos
la pared celular de las bacterias Gram-positivas
la pared celular de las bacterias Gram-negativas
la membrana plasmtica
los mesosomas (invaginacin de la membrana plasmtica)

La relacin topogrfica entre la pared celular y la membrana plasmtica se observa en la

microfotografa electrnica de Micrococcus lysodeikticus (A) y de Bacteroides melaninogenicus
(B).

A. Microfotografa electrnica de la bacteria Gram positiva Micrococcus lysodeikticus mostrando la gruesa

capa de peptidoglicano que conforma la pared celular (cw), por debajo de ella la membrana
plasmtica (cm), un mesosoma(m), y el nucleoide (n).
B. Clula bacteriana procesada mostrando la lnea de fractura entre la membrana citoplasmtica (m.i.) y
la pared celular (m.e.). Barra = 1 m.

Tanto las bacterias Gram positivas como las Gram negativas poseen una pared celular de
peptidoglicanos que les confieren su forma caracterstica y les provee de proteccin
mecnica.

Dos grupos de bacterias carecen de pared celular:

los Mycoplasma que poseen solamente membrana celular

las formas L derivadas de bacterias que perdieron su habilidad de sintetizar su pared
celular
 La pared celular bacteriana rodea al protoplasto. La pared bacteriana
es permeable a las sales y a muchas sustancias de bajo peso molecular.
No es rgida sino elstica como el "cuero" de una pelota de ftbol, el
protoplasto bacteriano confiere una cierta rigidez al conjunto
protoplasto + pared que lo rodea, derivada de su presin interna o
turgencia (al igual que la cmara hinchada de la pelota).

La presin interna del protoplasto esta determinada osmticamente.

Se debe tener en cuenta que la membrana citoplasmtica es la verdadera barrera osmtica
(es semipermeable y controla la entrada y salida de sustancias a la clula).

La pared celular y la plasmlisis

La semipermeabilidad de la membrana citoplasmtica y la permeabilidad de la pared

celular originan, entre otros, el fenmeno de plasmlisis. Este fenmeno se observa cuando
la tonicidad del medio externo es mayor que la del protoplasto (medio hipertnico) en estas
condiciones el agua sale del protoplasto y este se encoge por lo que la membrana
citoplasmtica se separa de la pared.

La pared celular y la coloracin de Gram

La pared celular es responsable de lo que le sucede al colorante utilizado en la Tincin de
Gram (1884). La propiedad de teirse o no de violeta oscuro (Gram positivas o Gram
negativas) por esta coloracin es un criterio de clasificacin importante correlacionable con
otras propiedades bacterianas. Unos pocos organismos son Gram-variables.

Tanto las Gram-positivas como las Gram-negativas captan la misma cantidad de cristal
violeta (CV) e iodo (I). El complejo CV-I sin embargo es atrapado dentro de la clula Gram
positiva por la deshidratacin y la reduccin del tamao de los poros de la pared resultante
del proceso de lavado con solvente. En contraste en las Gram negativas la fina (y
probablemente discontinua) capa de peptidoglicano no impide la extraccin por el solvente
del complejo.

Avala lo antedicho el hecho que, si despus de su tincin se tratan con lisozima bacterias
Gram positivas, se ve que los protoplastos siguen teidos, pero pierden el colorante si se
los trata con alcohol. Esto indica que el colorante es fijado a nivel del protoplasto, y que la
pared celular de las bacterias Gram positivas es la que impide la extraccin del colorante.
Corroborando esta suposicin se observa que cuando Bacillus subtilis emerge de su espora
su pared celular esta "inmadura" y se comporta como Gram negativa. Cuando la pared
celular adquiere su estructura final pasa a ser Gram positiva.
La pared bacteriana: Estructura Qumica

El esqueleto de la pared celular bacteriana

est constituido por un heteropolmero, el
peptidoglicano murena. El mismo, y las
enzimas que intervienen en su sntesis, son
una caracterstica general de todas las
eubacterias. Las arqueobacterias no
poseen murena.
Esta macromolcula esta formada por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina
(NAG) y el cido N-acetilmurmico (NAM) unidos mediante enlaces -1,4. La cadena es
recta y no ramificada, constituyendo la estructura bsica de la pared celular (su
"backbone").

El cido N-acetilmurmico es un ter resultante de la unin del oxhidrilo del C3 de la

molcula de N-acetil-glucosamina con el oxhidrilo del cido lctico.

El grupo cido del lctico enlaza con una pequea cadena peptdica. Entre los aminocidos
tpicos de esta cadena se encuentran la L-alanina, cido D-glutmico, cido m-
diaminopimlico o la L-lisina o D-alanina.

Los diaminocidos al tener dos grupos amino pueden formar enlaces peptdicos con
aminocidos dicarboxlicos de otra cadena. A travs de estas uniones peptdicas se unen
entre s las cadenas de heteropolmeros formando una molcula gigante, el sculo de
murena.
 Representacin esquemtica de los peptidoglicanos

Debemos destacar lo siguiente:

Las formas D de la Alanina y del cido glutmico no se presentan en las protenas de los
eucariotas. Tampoco en dichas protenas se encuentra el cido m-diaminopimlico. La
secuencia alternante de N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico no se encuentra en
eucariotas Estas caractersticas estructurales hacen que las bacterias (al igual que con la
diferencia en los ribosomas) presenten un "taln de Aquiles" susceptible de ser utilizado en
su contra por los frmacos de la terapia medica. Los agentes teraputicos que actan en el
mbito de la pared celular bacteriana y tienen como "blanco" las enzimas involucradas en
su sntesis son en gran medida inocuos para el organismo eucariota sometido a una
agresin bacteriana (las "balas mgicas" visualizadas por Paul Erlich).
La pared celular de las bacterias Gram positivas

Sus principales caractersticas son:

La red de murena esta muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas

Los aminocidos implicados varan de una especie a otra.
La constitucin del esqueleto es caracterstica de la especie y constituye una buen
parmetro taxonmico
Es frecuente la presencia de los aminocidos L-diaminopimlico o de lisina
Los poliscaridos estn unidos por enlaces covalentes (en el caso de tenerlos) Su
contenido proteico es bajo.
En ella se encuentran cidos teicoicos
La pared celular de las bacterias Gram negativas

La red de murena presenta una sola capa

La constitucin del saco de murena es igual en todas las bacterias Gram negativas.
Contiene siempre nicamente meso-diaminopimlico
Nunca contiene lisina
No se encuentran puentes interpeptdicos.
Se encuentran grandes cantidades de lipoprotenas y lipopolisacridos que representan
hasta el 80 % del peso seco de la pared celular. Para mantener la estabilidad de las capas
de lipopolisacridos es necesario el in Ca++.
En las bacterias Gram negativas la capa de murena puede ser atacada por la lisozima
cuando se las trata con EDTA (Etilen-diamino-tetractico). Este agente, al quelar el Ca++
libera una parte de los lipopolisacridos y permite la accin de la enzima..
Hasta ahora no han podido demostrarse cidos teicoicos.

Accin de la lisozima y la penicilina

Un viejo refrn dice que Dios llama a la puerta de un hombre solo una vez en la vida. No es el
caso de Sir Alexander Fleming a la de l llamo dos veces (o ms), aunque es necesario
coincidir que no es suficiente con el llamado, amn de l, es necesario escuchar y responder.

Segn se cuenta el descubrimiento de la lisozima tuvo lugar cuando las lagrimas de un

nio (que estaba en el laboratorio donde trabajaba Fleming), caen en un tubo y aclaran una
suspensin Micrococcus lysodeikticus, que, hoy se sabe, es la bacteria mas sensible a la
lisozima, ma siii....

Este hecho esta un poco menos difundido que la novelesca historia de la espora de
Penicilium que entro por la ventana del laboratorio de Fleming, cayo en una placa de Petri y
al crecer puso de manifiesto la accin bactericida del antibitico que llamo penicilina....(
Florey y Chain en Oxford la aislaron, dieron las pautas de su produccin industrial y al
hacerlo pusieron en marcha la era de los antibiticos, por ello, Fleming , Florey y Chain
recibieron el premio Nobel en 1945 )

La lisozima descubierta en 1922, es una enzima que rompe el enlace beta glucosdico de la
murena. Se la encuentra en el lquido lagrimal, secreciones nasales y en la clara de huevo.
Tambin se la ha aislado de bacterias y bacterifagos. La accin de la lisozima se pone en
evidencia por un aclaramiento rpido de una suspensin bacteriana, Micrococcus
lysodeikticus ya se lisa con 1 ug de lisozima / ml. Para lisar otras bacterias p.e Bacillus
megaterium se necesitan 50 ug / ml . La capa de murena de muchas bacterias Gram
negativas solo es atacada por la lisozima cuando se aade EDTA (Etilen-diamino-
tetractico).

El mecanismo de lisis es el siguiente: la destruccin de la pared celular deja al protoplasma

de las bacterias rodeado nicamente por la membrana celular ("protoplasto"), lo cual
convierte a la bacteria en un organismo extraordinariamente sensible a las variaciones de
tonicidad del medio, esta es la base del fenmeno de aclaracin que tiene lugar luego de la
accin de la lisozima, cuando la solucin es hipotnica.
Los protoplastos son estables en medios hipertnicos e isotnicos; en medios
hipotnicos, tal lo sealado, estallan y dejan restos de membrana citoplasmtica
llamados "fantasmas" (ghosts).

El proceso de sntesis de la pared celular comienza en el citoplasma bacteriano, a partir

de N-acetilglucosamina-1-fosfato que se une al UDP (uridin difosfato).

El UDP se combina con la N-acetilglucosamina-1-fosfato, para dar UDP-N-

acetilglucosamina que primero forma el ter lctico y luego en sucesivos pasos
enzimticos se unen al mismo los cinco aminocidos para formar el N-acetilmurmico.

En el siguiente paso, que ocurre en el mbito de la membrana citoplasmtica la molcula

que es hidrfila cambia a lipfila, lo cual facilita su transporte, por el cambio del UDP por
undecaprenil-fosfato y el agregado de un pentapptido de glicina a nivel de la L-lisina
 En la siguiente fase, en el mbito de la pared celular, se produce la transglucosidacin y
formacin del enlace beta alargando de esta manera la molcula.
Los enlaces transversales entre molculas del polmero se produce por transpeptidacin,
se libera una D-alanina y el grupo carboxilo se une a un grupo amino de la lisina de otro
oligopptido, tambin se libera el undecaprenil-fosfato.

La penicilina interfiere en este ultimo paso, es decir impide la unin transversal o puente
interpeptdico pero no la elongacin del polmero. De la misma manera actan las
cefalosporinas, vancomicina, bacitracina y cicloserina. Debe notarse que la sntesis de la
pared no se realiza cuando no hay lisina disponible o cuando se impide la racemizacin de
la L-alanina y por lo tanto la disponibilidad de la D-alanina por efecto de la c-clicoserina
(oxamicina).

La membrana externa

En la bacterias Gram negativas se observa por fuera del saco de murena una capa
semejante a la membrana celular por lo que se ha dado en llamarla membrana externa, es
de composicin compleja y en ella intervienen fosfolpidos, protenas y lipopolisacridos.

Cumple funciones mecnicas y fisiolgicas. En esta bicapa lipdica (compuesta por el lpido
A del lipopolisacrido en su parte externa y los fosfolpidos en la interna) se encuentran
protenas que la atraviesan en todo su espesor y que delimitan poros (por eso se denominan
porinas) hidrfilos que permiten el paso de sustancias hidrfilas de bajo peso molecular.
No se encontraron sistemas de transporte activo.
La membrana externa se encuentra unida al peptidoglicano a travs de la protena conocida
como lipoprotena de Braun cuya parte lipdica se encuentra en la membrana y la protena
unida covalentemente a la murena. de la membrana. La membrana externa tiene unos
puntos de contacto con la membrana interna que se denominan uniones de Bayer y que se
supone son importantes en el transporte a travs de la membrana.

ESPACIO PERIPLSMICO

En las bacterias Gram negativas el espacio que va desde membrana plasmtica a membrana
externa (ver figura abajo) se denomina espacio periplsmico, tiene aparentemente una
consistencia gelatinosa.

En numerosas bacterias contiene abundantes enzimas, por ejemplo aquellas que inician la
degradacin de substratos como la glucosa, o la transformacin de compuestos
inorgnicos como los nitratos.
Tambin se encuentran las depolimerasas que actan sobre los biopolmeros (proteasas,
polisacaridasas, nucleasas y otros).
Otras enzimas importantes presentes en el espacio periplsmico son las b-lactamasas
responsables de la destruccin de los antibiticos b-lactmicos y, por tanto, de la
resistencia de ciertas bacterias a ellos.
Asimismo se encuentran all sensores qumicos destinados a detectar variaciones
ambientales.

Algunas de estas enzimas estn libres y otras ligadas a la membrana citoplasmtica.

En las bacterias Gram-positivas no hay, en realidad, espacio periplsmico; pero pareciera

que la parte ms interna del peptidoglicano puede desarrollar una funcin similar
reteniendo mediante fuerzas electrostticas molculas de enzimas equivalentes a las
periplsmicas de las Gram-negativas.

Los lipopolisacridos

Los lipopolisacridos con una estructura caracterstica se encuentran en la capa externa, a

diferencia de la membrana plasmtica los forman:

La parte glucosdica corresponde a dos molcula de N-acetilglucosamina (es, para

ponerlo en un nombre mas largo una glucosaminadisacrido, es la estructura equivalente
al

glicerol de los fosfolpidos) sus grupos hidroxilos estn esterificados por cidos grasos C12,
C16, C18, que al ser hidrofbicos se orientan hacia el interior. Se lo conoce como lpido A
 unida a ellas y proyectndose al exterior se encuentra una cadena glicosdica. Esta cadena
posee una zona central R y a ella le sigue extermamente la cadenas heteropolisacrida O-
especifica que representa a los antgenos somticos.

La funcin del lipopolisacrido en las bacterias es la de incapacitar las defensas del

husped, proporcionar carga negativa a la superficie de la membrana y estabilizarla.

Constituyen una de las endotoxinas ms activas de las bacterias, son fuente de origen de
fiebre, diarrea y provocan una fuerte respuesta inmune, siendo uno de los agentes
responsables del llamado shock endotxi producido cuando las clulas del sistema
inmune entran en contacto con l. Tienen gran importancia en el diagnstico bacteriolgico
y en la identificacin de infecciones.

Distintas cepas se diferencian entre s por las llamadas cadenas laterales O especficas ya
sealadas, hecho que puede ponerse de manifiesto por mtodos inmunolgicos.
Las clulas bacterianas crecen sobre agar generalmente como colonias lisas y brillantes
denominadas formas S (por smooth= lisos); la superficie regular contiene mucha agua
debido a la presencia de las cadenas polisacridas O-especficas.
Estas formas lisas mutan espontneamente a formas que crecen como colonias planas y
rugosas, denominadas formas R (por rough = rugoso).
Cuando invaden un organismo, la presencia de esas cadenas de poliscaridos dan a las
bacterias S una ventaja selectiva al ser ms resistentes a la fagocitosis por los leucocitos y
por ello ms virulentas.
Hasta que el hospedador no forme anticuerpos y stos se unan a los poliscaridos, las
bacterias no son atacables, la gran variedad de polisacridos O-especficos en bacterias
patgenas puede deberse a una seleccin de tipos O-antignicos (mutantes) nuevos cada
vez; tienen por tanto una ventaja en el desarrollo, porque el hospedador no puede
disponer simultneamente de los anticuerpos contra cientos de antgenos.

Apndices superficiales

Flagelos y pili
En ciertas bacterias se pueden reconocer dos tipos de apndices
superficiales: los flagelos que son rganos de locomocin, y los
pili (Latn: cabellos), conocidos tambin como fimbriae (Latn :
flecos). Los flagelos se observan tanto en bacterias Gram positivas
como Gram negativas, generalmente en bacilos y raramente en
cocos. En contraste los pili se observan prcticamente solo en
bacterias Gram negativas y solo escasos organismos Gram-
positivos los poseen. Algunas bacterias poseen tanto flagelos como
pili.
 A. Microscopa electrnica de clulas de Escherichia coli con tincin negativa mostrando flagelos
ondulados y numerosas estructuras, cortas mas finas y mas rgidas, similares a "cabellos", los pili.
B. El largo pili sexual de Escherichia coli claramente distinguible de los pili comunes y ms cortos.

Estructura
La mayora de las bacterias tienen como mecanismo de movimiento los flagelos que
difieren estructuralmente de los flagelos eucariotas.

Segn el tipo de bacteria, los filamentos toman diferentes grosores (del orden de
nanmetros) y longitudes (pueden alcanzar hasta 20 micrones). La flagelina, su protena
estructural esta compuesta por subunidades de bajo peso molecular, ordenadas de forma
helicoidal a lo largo de un tubo axial. El flagelo se mueve por rotacin a lo largo de su eje
axial.

Estructura del Flagelo y la flagelina

Recordemos que en el caso de los eucariotas poseen una distribucin caracterstica de

microtbulos cuando se observan en un corte transversal: 9 + 2. Los elementos motrices de
los procariotas no presentan esta estructura.

En algunos casos se los puede observar en campo oscuro, pero por lo general para verlos se
necesitan mtodos de tincin para microscopa ptica o la observacin en microscopa
electrnica.

Los flagelos pueden eliminarse de la superficie celular sin afectarse la viabilidad de la

bacteria, solo se vuelve temporariamente inmvil pero luego de un tiempo sintetiza nuevos
flagelos. El cloranfenicol, antibitico que bloquea la sntesis proteica, impide la
regeneracin de los flagelos.
El flagelo bacteriano, una organela mtil, es un enorme complejo proteico, compuesto por
unas 25 protenas, que forman parte , ya sea de un anillo o una estructura filamentosa con
decenas de miles de subunidades.

Bacteria politrica monopolar Gancho y filamento flagelar

La estructura emerge desde la cara citoplasmtica de la membrana celular hacia el espacio

extracelular, desde donde el filamento helicoidal crece hasta alcanzar una longitud de unos
15 micrones.
El ensamblaje del filamento procede desde la base a la punta del mismo, en una eficiente y
bien regulada secuencia de eventos. Tal como se observa en el diagrama inferior, la
flagelina es selectivamente exportada desde el citoplasma hacia el estrecho canal central de
flagelo y, desde este punto progresa por el canal hasta el extremo distal donde es
finalmente ensamblada.
La "exportacin" es mediada por un complejo proteico acoplado a la cara citoplasmtica
del motor. Este "aparato exportador de flagelina" utiliza energa derivada de la hidrlisis de
ATP y es homlogo al sistema de secrecin tipo III de las bacterias patgenas (por medio
del cual se inyectan protenas con efectos patognicos a una clula receptora).

Numerosas protenas, llamadas "chaperonas" juegan un importante rol en la

secrecin "pegndose" a las molculas secretoras en el citoplasma bacteriano,
previniendo el plegado de las protenas en conformaciones imposibles de
secretar o, como en Shigella, impidiendo la asociacin de las mismas antes de
secretarse. Por otra parte parecen conducir protenas hacia el aparato de
secrecin.

El flagelo bacteriano existe en numerosas bacterias y tambin en arqueobacterias,

esto ltimo probablemente indica que la existencia del flagelo bacteriano es
anterior al origen de las bacterias Gram negativas (donde por otra parte, fuera
identificado el sistema de secrecin tipo III).
 Esquema del Motor flagelar y flagelo Escala de tamaos

Diagramas basados en imgenes obtenidas del Protonic NanoMachine Group

http://www.fbs.osaka-u.ac.jp/en/seminar/09a.html

Tal como se observa en el diagrama superior el "motor flagelar" se encuentra anclado en la

membrana citoplasmtica y la pared celular. Esta formado esencialmente por dos pares de
discos o anillos, el par externo (anillo L y anillo P) se encuentra a la altura de la pared y
membrana externa. El par interno (anillos S y M que conforman el "rotor") esta a la altura
de la capa externa de la membrana citoplasmtica. Su centro es el punto de partida del
vstago que atraviesa pared celular y membrana externa. Al vstago se acopla una pieza
(gancho) a su vez acoplada al filamento flagelar.

La propulsin de la clula bacteriana esta dada por el giro en sentido contrario a las agujas
del reloj de los discos (anillos) del motor, lo que causa la rotacin del filamento.

Este es el nico caso (por lo menos que yo conozca.....) en que la

naturaleza inventa la rueda y la acopla a movimiento traslativo.
El "motor flagelar" tiene solo de 30 a 40 nm de dimetro y sin embargo puede rotar de
20.000 a 100.000 rpm. Este "motor flagelar" es "alimentado" por el flujo de protones o iones
sodio, que atraviesan un complejo de protenas que conforman un "canal protnico", y que
realizan la alimentacin del motor flagelar. El flujo surge de las diferencias de
concentracin inica existentes a travs de la membrana citoplasmtica (the proton or ion
motive force) y la cantidad de corriente involucrada es de solo algunas decenas de
fentoamperes.

Distribucin de los flagelos

La distribucin de los flagelos es tpica de las eubacterias mviles y tiene valor taxonmico.
En un bacilo el o los flagelos se pueden insertar en uno de los polos (monopolar o
monotrica), en ambos (bipolar o anfitrica) lateralmente, o en todo el contorno (peritrica).

Funcin
Actan a la manera de la hlice de un barco impulsando a la bacteria a travs del medio. Su
movimiento esta originado en los discos anteriormente sealados. La velocidad de rotacin
puede llegar a unas 3000 vueltas/minuto y alcanzar velocidades de desplazamiento tan
altas como 12 milimetros/minuto (Vibrio cholerae).

La capacidad de la bacterias de nadar por la accin de los flagelos provee el mecanismo

para realizar movimientos dirigidos denominados taxias (movimientos en respuesta a
atracciones o repulsas respecto a factores ambientales).

La respuesta a los estmulos involucra a un sofisticado sistema sensorial que incluye

receptores localizados en la superficie celular y la transmisin de la informacin a protenas
aceptoras de metilo que controlan el motor flagelar.

Salmonella typhimurium atrada por el

amino cido serido en l apunta de un
capilar(A) y repelidas por un tubo con
fenol (B). Las fotos se tomaron 5 minutos
despus de que los capilares se
introdujeron en el cultivo bacteriano
Las taxias de acuerdo al factor determinante de la misma se clasifican en:

quimiotaxia, cuando reaccionan a estmulos qumicos y se dirigen al lugar (o al extremo

opuesto) donde se encuentra la sustancia. Las bacterias con esta taxia poseen
quimioreceptores sensibles a la sustancia que la origina.
aerotaxia, cuando se dirigen al lugar con la concentracin de oxigeno adecuada a su
metabolismo
fototaxia, se presenta en las bacterias autotrficas que dependen de la luz para la
obtencin de energa
magnetotaxia, es la capacidad de muchas bacterias de orientarse en un campo magntico
y nadar en la direccin de las lneas de campo, las bacterias con esta propiedad contienen
hierro en la forma de oxido de hierro ferromagntico o magnetita (mezcla de oxido de
hierro II y III, Fe3 O4) y se lo encuentra en forma de grnulos (magnetosomas), cerca del
anclaje de los flagelos. La existencia de magnetita en las "formas bacterianas" obtenidas
del meteorito marciano ALH84001 constituye uno de los argumentos en favor de que las
mismas corresponden a bacterias.

Antgenos O y H
Proteus vulgaris posee una gran capacidad de movimiento que se traduce en la formacin de
una pelcula, en alemn hauch, en una superficie de agar, de all el nombre de formas H; en
contraposicin las cepas inmviles (sin flagelos) no forman pelcula, en alemn ohne
hauch,de all el nombre de formas O. De este fenmeno se generalizaron los trminos de
antgenos H (correspondiente a los flagelos) y de antgeno O (correspondiente al cuerpo, o
somticos) utilizados en mtodos de diagnsticos serolgicos .

Fimbrias y Pili
Los trminos pili y fimbriae usualmente son intercambiables, estos finos apndices con
apariencias de "pelos" estn formados por protenas llamadas pilinas. En apariencia son
mas rgidos que los flagelos y, en algunos organismos (Escherichia coli y las especies de
Shigella) estn profusamente distribuidos en la superficie (hasta 200/clula).

Son considerados factores de colonizacin por su importancia en los fenmenos de

adhesin a la superficie de sus huspedes.

Caractersticas de algunas cepas bacterianas, tales como la Escherichia coli K12, cepa que
posee el factor F (F+, Hrf, del ingles High frecuence of recombination), son unos pili muy
largos (tubos proteicos huecos 0,5 a 10 um de longitud), que intervienen en la
"reproduccin sexual" de las bacterias, (recombinacin).
 Sustancias de reserva e inclusiones celulares
Muchos microorganismos en determinadas circunstancias almacenan como materiales de
reserva sustancias tales como: polisacridos, lpidos, polifosfatos y azufre. Esto sucede
cuando las sustancias de partida se encuentran en el medio, pero el crecimiento est
limitado por la falta de nutrientes determinados o por la presencia de inhibidores.

Los materiales de reserva se encuentran en la clula en forma osmticamente inerte.

Cuando es necesario, vuelven a ser metablicamente activos y sirven como fuente de
carbono y energa, prolongando la vida bacteriana en ausencia de aportes externos o bien
permitiendo la formacin de esporas.

Polisacridos
Entre los polisacridos de reserva se han identificado (por su reaccin con la solucin de
Lugol) molculas de almidn (color azul) y glucgeno (color pardo), recuerde que a
diferencia de los polisacridos de la pared celular el monmero en este caso es alfa-D-
glucosa y los enlaces en el polmero son alfa 1-4 glicosdicos. Una molcula similar al
almidn distribuida en forma de pequeos grnulos se ha encontrado en Clostridium y se la
denomino "granulosa". La presencia de glucgeno se ha demostrado en hongos, (entre ellos
en levaduras), y enterobacterias (Salmonella, Escherichia etc.).

Lpidos
Se presentan como gotitas o grnulos teibles con el colorante Sudan Black B (y toman por
ello el nombre de "sudanfilos"). En muestras sin teir, observando con el microscopio
ptico, se reconocen por su gran refringencia.

En muchas bacterias estn compuestos por un polister: el cido poli-beta-hidroxibutrico

(PHB),entre ellas las aerbicas, las cianobacterias y en las fottrofas anaerbicas.

Se acumula cuando las bacterias entran en la va fermentativa del metabolismo y se

reutiliza como fuente de energa en el metabolismo aerbico.

Se han encontrado, adems, polmeros semejantes en los cuales intervienen tambin el

cido propinico o el beta hidroxivaleriano, estos materiales obtenidos de cultivos de
microorganismos estn siendo utilizados como materia prima en fabricacin de envases
por la caracterstica (a diferencia del polietileno) de ser biodegradables.

Las levaduras y otros hongos almacenan lpidos en forma de grasas neutras, que en
algunos casos (Candida, Rhodoturola) pueden constituir hasta un 80% del peso seco.

Las micobacterias pueden contener hasta un 40% de ceras.

Polifosfatos
Se encuentran en forma de "grnulos" constituidos en su mayor parte por polifosfatos
lineales tipo sal de Graham, las primeras observaciones se realizaron en Spirillum volutans,
de all el nombre de grnulos de volutina, que tambin se conocen como grnulos
metacromticos por el cambio de color en la tincin con colorantes como el azul de
metileno. Estos polifosfatos permiten a la clula dividirse en ausencia de fosfato en el
medio.

Azufre
Muchas bacterias que oxidan sulfuro a sulfato almacenan azufre liquido en forma de
esferas refringentes. El azufre pasa lentamente a la forma ortorrmbica.

Algunas bacterias (Thiobacillus) utilizan como fuente energtica los compuestos reducidos
del azufre llevndolos a sulfatos.

Algunas bacterias que como el Sulfolobus acidocaldarius, crecen en ambientes extremos como
las fuentes termales cidas ( crece a pH entre 2-3 y a temperaturas de 70 a 75 C), son
capaces de oxidar el azufre elemental a cido sulfrico.

S-- + 2 O2-----> SO4 --

S + H2O + 1 1/2 O2------ > SO4 -- + 2 H+

S2O3-- + H2O + 2O2 --------> 2 SO4-- + 2 H+

Las bacteria rojas, fotosintticas y anaerbicas (Chromatium) utilizan SH2 como dador de
hidrogeno.

Tambin se deposita azufre como producto de desintoxicacin del SH2 del medio en las
cianobacterias.

En las profundidades marinas, en los limites entre las placas tectnicas donde aflora agua a
350 C, minerales y abundante SH2; en los lugares donde el afloramiento entra en contacto
con el agua fra del mar pueden crecer bacterias oxidadoras de S o SH 2 que sirven de base
alimentaria a moluscos, helmintos y cangrejos. Un tubcola Riftia pachyptila tiene un rgano
adaptado para que vivan en forma simbitica las bacterias oxidados del SH 2. La sangre
suministra SH2 y oxigeno al rgano y las bacterias los productos de sntesis necesarios para
el tubcola.

Cristales parasporales
En Bacillus thurigensis y especies relacionadas se encuentran cuerpos de inclusin cristalinos
junto a las esporas. Estos cristales parasporales estn construidos por una protoxina, que al
disolverse en el jugo digestivo de insectos sensibles ( oruga de mariposa) libera una toxina
que mata a la oruga. Por ello se los usa en la lucha biolgica contra estos parsitos.

Recientemente (en el siglo pasado...) se obtuvo algodn transgnico por insercin del
gen productor de la toxina (aislado de Bacillus thurigensis) en el genoma del algodn, de
esta manera se pretende reducir la cantidad de insecticidas necesarios para el cultivo.

La utilizacin de tcnicas de recombinacin gentica en plantas destinadas al consumo humano abri

un debate mundial. Estamos ante una opinin pblica altamente sensibilizada, gente preocupada por
el impacto de ellas sobre la salud humana y el medio ambiente pero, hay que hacer notar que, sus
argumentos son utilizados para hacer "el caldo gordo" de grupos que los utilizan
para mantener UNA AGRICULTURA SUBSIDIADA.

Vacuolas de gas
Se las observa en muchas bacterias acuticas a quienes dan la capacidad de modificar su
peso especifico y por ello flotar en una capa determinada de agua, en la que encuentran
condiciones optimas de crecimiento. En cianobacterias estan compuestas de grupos de
cilindros de 75 nm de dimetro por 1 um de longitud. (Microbiological Reviews, Gas
Vesicles, Anthony E. Walsby, Mar. 1994, p 94-144) no puede ser llenada por inflado, por lo
tanto el espacio para el gas debe ser formado a medida que se forma la pared de la vacuola
(que tiene unos 2 nm de espesor y es de naturaleza proteica) y se llena rpidamente de gas
por difusin.

Endsporas y formas de persistencia

Introduccin
Las endsporas bacterianas son formas de perdurabilidad de ciertos grupos de bacterias
frente al calor, la desecacin, la radiacin y las influencias qumicas. Contienen un genoma
y toda la maquinaria metablica esencial.

La termorresistencia de las endsporas es una de sus principales caractersticas. Mientras

que las bacterias o las formas vegetativas de las bacterias esporuladoras sometidas a 80 C
durante diez minutos (pasteurizacin) mueren, las endsporas sobreviven e incluso
soportan un calentamiento superior. Para eliminarlas son necesarias tcnicas de
esterilizacin.

Esta caracterstica permite un fcil mtodo de aislamiento de las bacterias esporuladas,

calentando el material donde se supone que existen esporas a 100 C durante 10 minutos
mueren todas las bacterias y, seguidamente, las esporas sobrevivientes se hacen germinar y
crecer en el medio de cultivo adecuado.

Son formadoras de esporas las bacterias bacilares Gram positivas, entre ellas, las
pertenecientes al genero Bacillus son aerbicas y las del genero Clostridium anaerbicas.
Un aspecto interesante es que el contenido de GC de este tipo de bacterias es bajo, los
clostridios contienen la menor proporcin de GC de los procariotas: 22 al 27 %.

Caractersticas microscpicas
Observadas con microscopa ptica muestran una gran refringencia. Esto es debido al
elevado ndice de refraccin, resultante de las protenas deshidratadas y concentradas en el
pequeo espacio de la espora. Prcticamente toda la materia seca de la bacteria esta en la
espora que posee un volumen igual a la dcima parte de la bacteria que la origino. Se
colorean en caliente con carlbolfucsina y no se decoloran cuando el frotis es lavado con
etanol.
 E: endospora que da al conjunto aspecto de clava o masa

Las bacterias formadoras de esporas se caracterizan por la posicin de la endoespora en la

clula madre antes de ser liberada. La espora pude ser central, terminal o subterminal, y la
clula original puede o no hincharse para acomodar la espora.

Espora de Bacillus megaterium . Cubierta de espora (SC), extremo germinativo (G) capa
externa del cortex: (OCL) cortex: (Cx) pared celular (GCW), membrana plasmtica (PM), y
nucleoid (n)

Esporulacin

Tal como se observa en el esquema, la esporulacin

comprende:

una divisin asimtrica (1), durante la cual el futuro protoplasto de la espora recibe el
material nuclear correspondiente. A diferencia de una divisin comn, el
 estrangulamiento del protoplasto de la clula materna no es seguido por el de la pared
celular entre los dos protoplastos hijos (2).
a posteriori el protoplasto de la futura espora es rodeado por la membrana citoplasmtica
de la otra clula resultante de la divisin, siendo finalmente englobada por la misma (ver
esquema).
el resultado de este englobamiento es que la futura espora esta rodeada por dos
membranas citoplasmticas que intervendrn en la fase final de la espora sintetizando
la membrana del protoplasto de la espora sintetiza hacia el exterior la pared celular
la membrana del protoplasto procedente de la otra clula sintetiza hacia el interior el
cortex de la espora, compuesto de un glucopptido similar a la murena pero con mayor
cantidad de enlaces transversales.
esta otra clula forma en algunos casos el exosporio, que rodea a la espora como una
envoltura suelta.

El material de las envolturas representa casi el 50% del peso seco de la espora madura.
El proceso someramente descrito es uno de los fenmenos de diferenciacin ms complejos
de la clula bacteriana. Entre las transformaciones qumicas y fsicas que acompaan a los
cambios morfolgicos destaquemos:

concentracin del material proteico en la zona de formacin de la espora

en razn de la concentracin de material aumenta el ndice de refraccin de la zona
utilizacin del material de reserva (poli-beta-hidroxibutrico, en anaerobios y
polisacridos en aerobios) para procesos de degradacin y sntesis
sntesis de cido dipicolnico, especifico de las esporas, no se lo encuentra en las clulas
vegetativas. Este cido se combina en forma de quelato con iones Ca ++. Se localiza en el
protoplasto de las esporas termorresistentes.
se liberan por autolisis de las clulas maternas

Propiedades

no presentan actividad metablica

gran resistencia al efecto del calor
gran resistencia al efecto de las radiaciones
gran resistencia al efecto de los productos qumicos

La resistencia a los efectos del calor se atribuye al bajo contenido de agua (aprox. 15%) y al
contenido de cido dipicolnico.
La resistencia al efecto de las radiaciones se atribuye a la presencia de puentes disulfuro,
resultante de la presencia de cistena en las protenas de la cubierta externa.
La resistencia al efecto de los productos qumicos debe atribuirse a la impermeabilidad
que presenta en esos casos la cubierta de la espora.

Induccin
En condiciones favorables los bacilos de las especies esporuladoras se reproducen
indefinidamente en su forma vegetativa, la esporulacin no es una fase obligada del ciclo
de vida de la bacteria.
La formacin de esporas se desencadena cuando faltan nutrientes o se acumula un exceso
de productos del metabolismo celular.

Puede inducirse la esporulacin colocando las clulas en agua destilada, la cual se produce
a expensas de las sustancias de reserva de la clula y, probablemente como consecuencia de
la ausencia de sustrato en el medio. Avalando esta hiptesis, la formacin de esporas no se
produce si dentro de las cinco horas de puestas en agua destilada clulas vegetativas de
Bacillus cereus, se agrega glucosa al medio.

La presencia de manganeso en el agua suele favorecer la esporulacin.

Germinacin
El proceso por el cual las esporas pasan a formar clulas vegetativas se denomina
germinacin. Ocurre cuando se las coloca en el medio adecuado y se requiere en muchos
casos la disponibilidad, entre otros, de glucosa, aminocidos y nuclesidos. Es posible
elevar el porcentaje de esporas que germinan con un shock trmico.

Entre los fenmenos de la germinacin destaquemos:

perdida de la resistencia trmica

aparicin de la respiracin
aparicin de actividad enzimtica
excrecin de cido dipicolnico, pptidos y aminocidos
ruptura de las cubiertas y aparicin del "tubo germinativo"(origen de la clula vegetativa)

A este punto

la pared celular de la clula emergente esta incompleta

la coloracin de Gram por lo tanto no es la definitiva
hay permeabilidad a molculas como el ADN (lo cual facilita fenmenos de
transformacin)

Viabilidad
Cuando se las almacena en tierra seca se ha demostrado que permanecen viables al cabo de
50 aos el 10% de numero original.
Recientes hallazgos parecen indicar que en ciertas arqueobacterias (Bacillus sphaericus,
Bacillus permians) bajo determinadas condiciones (inclusin en mbar o cristales salinos) la
viabilidad de las esporas es tan prolongada, que cabe la posibilidad de plantearse que las
mismas puedan sobrevivir indefinidamente.
 Cpsulas y Limos
Cpsulas
Se las puede visualizar por tincin negativa, por ejemplo suspendiendo las bacterias en
tinta china, como las partculas de carbn no penetran las cpsulas, las mismas aparecen
claras sobre un fondo oscuro, tal como se aprecia en
el siguiente esquema:

Estas cpsulas nos son vitales para las bacterias,

pero le confieren ventajas comparativas ya que las
hacen resistentes a la fagocitosis.

Las delgadas capas de los neumococos se hinchan

hacindose visibles en presencia de anticuerpos
especficos (reaccin de Neufeld o de "hinchamiento"), fenmeno utilizado en su
clasificacin.

En Streptococcus, Xhantomonas y Corynebacterium estn compuestas esencialmente por

polisacridos, que contienen adems de glucosa, ramnosa, cido 2-ceto-3-desoxigalactnico,
cidos urnicos, y los cidos pirvico y actico, en Bacillus por polipptidos (cido
poliglutmico).

Limos
Leuconostoc mesenteroides transforma la sacarosa en dextrano, por un lado es un
contaminante extremadamente molesto en el proceso de fabricacin de azcar donde la
abundante espuma de los lquidos contaminados le vali el apodo de "bacteria del desove
de las ranas" (vea en este clip el aspecto de un autentico desove de rana) y por el otro la
base de la fabricacin de dos productos de alto valor agregado: sustituto del plasma
sanguneo y gel para separaciones cromatogrficas.

La enzima que produce esta transformacin es una exoenzima conocida como

dextransacara (una hexosiltransferasa).

Otra hexosiltransferasa, presente en Streptococcus salivarium y Streptococcus mutans

transforma la sacarosa en levanos (polifructosa), estos se fijan en los dientes y constituyen
la base para la produccin de cidos que favorecen las caries dentales.

Los limos mantienen en grupos a las bacterias (Zooglea) o bien en pelculas superficiales
como en Acetobacter aceti subsp. xylinum, en este caso el producto excretado es celulosa
quien da la consistencia correosa que la llev a ser conocida como "mycoderma aceti".
 Pigmentos
Introduccin
La sntesis de productos coloreados por parte de los microorganismos es una caracterstica
determinada genticamente. Su formacin en muchos microorganismos es dependiente de
la presencia de la luz, composicin del sustrato y la temperatura de incubacin. Son
metabolitos secundarios, algunos tienen propiedades antibiticas y, muchos
microorganismos pigmentados producen antibiticos.
Las especies coloreadas muchas veces son fcilmente reconocibles, por ejemplo: colonias
rojas aisladas de un medio selectivo para Gram negativos lleva de inmediato a pensar en
Serratia marcescens.
Los pigmentos derivan de distintos productos qumicos: carotenoides, pirroles y otros.

Funciones
La presencia de pigmentos en las bacterias que medran en hbitats sometidos a la luz les
confieren un efecto protector frente a la luz visible y el ultravioleta cercano. Los
carotenoides se localizan en la membrana plasmtica y protegen a la clula de la
fotooxidacin, su presencia confiere a las bacterias colores que van desde el tono amarillo al
rojo, entre ellas los gneros Micrococcus, Corynebacterium, Mycobacterium y Nocardia entre las
levaduras los gneros Rhodotorula, Sporobolomyces.
El mecanismo por el cual la luz visible afecta a los microorganismos se basa en el fenmeno
de fotooxidacin, en presencia de oxgeno atmosfrico algunos pigmentos celulares
(flavinas, citocromos) actan como fotosensibilizadores. Es posible explotar este fenmeno
para eliminar bacterias patgenas utilizando colorantes vitales (p.ej. azul de metileno).
La molcula de colorante absorbe energa lumnica y la cede al O2 pasndola de su estado
normal a un estado excitado el cual inicia reacciones de oxidacin en cadena que llevan a la
muerte del microorganismo.
Este tipo de colorantes se suele incorporar a la bebida de animales de los zoolgicos o de
criaderos donde se aprovecha su piel.
En las bacterias fotosintetizadoras los pigmentos absorben luz con fines fotosintticos, los
carotenoides se localizan junto a las bacterioclorofilas en las membranas fotosintticamente
activas de los tilacoides o cromatforos

Ejemplos
Pulquerrimina: pigmento rojo que contiene hierro en su molcula, es sintetizado por
Cndida pulcherrima, levadura aislable de zumos de frutas, flores con nctar y el tracto
gastrointestinal de las abejas.

Prodigiosina: en medios que contengan hidratos de carbono medra frecuentemente una

bacteria que llevaba el nombre de Bacterium prodigiosus o Micrococcus prodigiosus conocida
tambin como " hongo de las hostias". Actualmente se la conoce como Serratia marcescens.
Este pigmento de naturaleza pirrlica es de color rojo oscuro, muy parecido al de la sangre.
Es el origen de una de las mas bellas catedrales y del mito de la profanacin de la hostia (es
largo busque Micrococcus prodigiosus.)

Indigoina: pigmento azul derivado de las azaquinonas, es excretado al medio por

Pseudomonas indigofera entre otros.
Entre los colorantes fenacnicos el mas conocido es la piocianina producido por
Pseudomonas aeruginosa. Los cultivos de Pseudomonas aeruginosa muestran una fluorescencia
amarillo verdosa al ser examinado bajo tubos fluorescentes o lmpara ultravioleta, su
origen esta en las pioverdinas cromopptidos que aparecen cuando hay limitacin de
hierro, actan como sideroforos que sirven para captar y transportar hierro al interior de la
clula.

Nutricin bacteriana
CONCEPTOS BSICOS
Cualquier ser vivo, por su actividad vital (crecimiento, mantenimiento y reproduccin)
requiere continuos aportes de energa para reponer las prdidas y, para que todo el sistema
pueda funcionar. La nutricin es el proceso por el que los seres vivos toman del medio
donde habitan las sustancias qumicas que necesitan para crecer. Dichas sustancias se
denominan nutrientes, y se requieren para los dos objetivos que comprende el
metabolismo:

1. fines energticos o catabolismo (reacciones de mantenimiento)

2. fines biosintticos o anabolismo (reacciones plsticas ).

Las biosntesis de nuevos componentes celulares son procesos que requieren energa
procedente del medio ambiente. Anteriormente sealamos los principales modos de
captacin y obtencin de energa existentes en las bacterias.

El estudio de la nutricin microbiana se puede desglosar en varios apartados: as, podemos

considerar los tipos de nutrientes requeridos, los aspectos cuantitativos, e incluso podemos
abordar los aspectos ambientales (en cuyo caso entramos dentro del campo de la
Ecofisiologa). Igualmente podemos estudiar la aplicacin prctica de la nutricin
bacteriana, que se plasma sobre todo en el diseo de medios de cultivo para manejar los
microorganismos en el laboratorio.

Es importante tener claros desde el principio una serie de conceptos y nomenclaturas

relacionados con los principales tipos de nutricin bacteriana. Puesto que, como acabamos
de ver, la nutricin presenta un aspecto de aprovisionamiento de energa y otro de
suministro de materiales para la sntesis celular, podemos hablar de dos "clasificaciones" de
tipos de nutricin:

Desde el punto de vista de los fines de aprovisionamiento de energa, las bacterias se

pueden dividir en:

1. litotrofas (del griego lithos = piedra): son aquellas que slo requieren sustancias
inorgnicas sencillas (SH2 , S0, NH3, NO2-, Fe, etc.).
2. organotrofas: requieren compuestos orgnicos (hidratos de carbono, hidrocarburos,
lpidos, protenas, ......).

Desde el punto de vista biosinttico (o sea, para sus necesidades plsticas o de

crecimiento), las bacterias se pueden dividir en:

1. auttrofas: crecen sintetizando sus materiales a partir de sustancias inorgnicas

sencillas. Ahora bien, habitualmente el concepto de autotrofa se limita a la
capacidad de utilizar una fuente inorgnica de carbono, a saber, el CO 2.
2. hetertrofas: su fuente de carbono es orgnica (si bien otros elementos distintos del
C pueden ser captados en forma inorgnica).

Otros conceptos:
auttrofas estrictas: son aquellas bacterias incapaces de crecer usando materia orgnica
como fuente de carbono.
mixtrofas son aquellas bacterias con metabolismo energtico littrofo, pero requieren
sustancias orgnicas como nutrientes para su metabolismo biosinttico.

Sean auttrofas o hetertrofas, todas las bacterias necesitan captar una serie de elementos
qumicos, que se pueden clasificar (segn las cantidades en que son requeridos) como

macronutrientes (C, H, O, N, P, S, K, Mg)

micronutrientes o elementos traza (Co, Cu, Zn, Mo...)

En la naturaleza, estos elementos se encuentran combinados, formando parte de sustancias

orgnicas y/o inorgnicas. Algunos de los nutrientes sern incorporados para construir
macromolculas y estructuras celulares; otros solo sirven para la produccin de energa, y
no se incorporan directamente como material celular; finalmente, otros pueden ejercer
ambos papeles.

El mundo bacteriano, como conjunto, exhibe una gigantesca versatilidad metablica de uso
de nutrientes: desde auttrofos que obtienen su carbono por reduccin del CO2 y los dems
elementos a partir de fuentes igualmente inorgnicas, hasta hetertrofos capaces de usar
amplia gama de fuentes orgnicas de carbono.

A su vez, dentro de los hetertrofos, podemos encontrar muchos tipos de nutricin muy
distintos, desde bacterias metilotrofas que slo usan metano o metanol como fuente de
carbono y energa, hasta los muy verstiles Pseudomonas, que pueden recurrir a degradar
ms de 100 tipos de fuentes de C, incluyendo sustancias tan "exticas" como hidrocarburos
alifticos y cclicos. De cualquier modo, entre los hetertrofos, una de las fuentes ms
tpicas de carbono consiste en glucosa.

En los hetertrofos- organotrofos, los sustratos carbonados (con un nivel de oxidacin no

muy distinto del material celular -CH2O-) entran simultneamente al:

metabolismo energtico (o catabolismo, donde la fuente de C se transforma en CO2, o en

CO2 junto con otras sustancias no totalmente oxidadas);
metabolismo plstico (anabolismo = biosntesis de nuevo material celular).

Aunque dentro del mundo de los procariotas se encuentre tanta variedad de nutriciones,
las bacterias que pueden nutrirse solamente de sustancias inorgnicas sencillas (H2O, CO2,
N2, NO3--, NH3, SO4=, fosfatos, etc.) son minora, pero sus procesos metablicos son muy
interesantes. De hecho, existen tipos metablicos que slo han evolucionado en procariotas.

Como paradigma de esto citaremos los microorganismos quimioauttrofos (o

quimiolitoauttrofos): obtienen su energa de la oxidacin de sustancias inorgnicas
sencillas, el carbono procede del CO2, y el resto de elementos a partir de sales inorgnicas,
por lo que pueden vivir en soluciones de sales minerales.

Lo habitual, sin embargo, es que muchas bacterias recurran, siempre que puedan, a tomar
del medio ciertos compuestos ms complejos, ya que carecen de ciertas rutas biosintticas.

CLASES DE NUTRIENTES
Podemos clasificar los nutrientes en las siguientes categoras:

1. universales: agua, CO2, fosfatos y sales minerales;

2. particulares
3. factores de crecimiento

NUTRIENTES UNIVERSALES
El agua

Las bacterias necesitan grandes cantidades de agua. De hecho, salvo excepciones, se

pueden considerar como organismos acuticos. Requieren cierto grado de humedad para
crecer. Desde el punto de vista de sus posibles papeles, el agua es:

el principal constituyente del protoplasto bacteriano;

el medio universal donde ocurren las reacciones biolgicas;
un reactante en exceso (es decir, un producto resultante de algunas reacciones
bioqumicas).

Las fuentes de agua pueden ser:

endgena: procedente de procesos de oxido-reduccin;

exgena (la ms importante): procedente del medio, y que difunde a travs de las
membranas.
Ahora bien, no toda el agua de un ambiente est disponible para la bacteria:

Existen determinadas sustancias y superficies que absorben y adsorben

(respectivamente), de modo ms o menos intenso, molculas de agua, dejndolas
inasequibles a la bacteria.
Los solutos disueltos en agua (p. ej. , sales, azcares) tienen afinidad por las molculas de
H2O que los rodean, por lo que stas tampoco estarn a disposicin del microorganismo.

La disponibilidad de agua se mide por un parmetro llamado actividad de agua o potencial

de agua, indicativo del agua libre, y que se expresa como

aW= PS/PW

donde PS es la presin parcial de vapor de agua en la solucin problema y PW es la presin

parcial de vapor del agua destilada.

Cmo medir el potencial de agua de un medio lquido determinado? Se mide la humedad

relativa del aire que hay encima del medio (en frascos), y este valor se refiere al valor de
100, que es la humedad del aire encima del agua destilada. O sea, la aW = humedad
relativa/100).

Las bacterias tienen valores de aW normalmente entre 0.90 y 0.99.

Bacterias de hbitats oligotrficos (como Caulobacter, Spirillum) tienen aW cercanos a 1.

Bacterias como Escherichia y Streptococcus, que viven en sangre y fluidos corporales, tienen
aW de alrededor de 0.995.
Bacterias marinas como ciertos Vibrio y Pseudomonas encuentran valores de 0.980.
Ciertos bacilos Gram-positivos que resisten mejor la sequedad poseen valores de 0.950.

En el extremo de resistencia encontramos ciertas bacterias xerfilas, capaces de vivir a aW

muy bajos (en torno a 0.75). Muchas de estas bacterias viven de hecho en medios acuosos,
pero donde gran parte del agua no est disponible por las razones arriba citadas:

bacterias halfilas extremas, como la arqueobacteria Halobacterium, que habita lagunas

hipersalinas;
bacterias (y sobre todo, ciertos microorganismos eucariticos como levaduras) sacarfilas,
que viven en jugos y zumos con altas concentraciones de azcares.

El anhdrido carbnico (CO2)

El anhdrido carbnico es requerido por todo tipo de bacterias:

Las auttrofas lo requieren como fuente de carbono, y lo reducen usando como fuente de
energa la luz (en el caso de las fotoauttrofas) u oxidaciones de determinadas sustancias
inorgnicas (los quimioautolitotrofos).
Las arqueobacterias metanognicas pueden usar el CO2 como aceptor de los electrones
procedentes de la oxidacin del H2, proceso por el que obtienen su energa:

CO2 + 4H2 ---------> CH4 + 2H2O ( DG'0<0)

 Los hetertrofos, aunque no usan el CO2 como fuente de C ni como aceptor de electrones,
necesitan pequeas cantidades para las carboxilaciones en determinadas rutas anablicas
y catablicas.

El origen del CO2 puede ser:

endgeno: procedente de descarboxilaciones que ocurren al degradar la fuente orgnica

de carbono;
exgeno: el CO2 de la atmsfera o disuelto en las soluciones acuosas.

Normalmente, las bacterias crecen a la concentracin de CO2 atmosfrico (0.03%), pero

algunas bacterias (Neisseria, Brucella), cuando se aslan por primera vez, requieren
atmsferas enriquecidas, con 5-10% de CO2. Ello parece deberse a que poseen alguna
enzima con baja afinidad hacia el CO2; sin embargo, tras varios subcultivos, suelen
adaptarse a crecer a tensiones normales.

Fsforo
Suele requerirse en forma de fosfatos, sea orgnicos o inorgnicos. Las bacterias que
pueden usar los fosfatos orgnicos (merced a la posesin de fosfatasas) no dependen
absolutamente de ellos, ya que pueden recurrir igualmente a los fosfatos inorgnicos. Los
fosfatos orgnicos son hidrolizados por fosfatasas extracelulares o (en las Gram-negativas)
periplsmicas (p.ej., la fosfatasa alcalina).

El fsforo se usa principalmente para la sntesis de los cidos nucleicos y los fosfolpidos,
pero aparece tambin en coenzimas y en protenas.

Sales minerales
Las sales minerales son la fuente de aniones (p. ej. el Cl -) y de cationes para la clula. Los
siguientes cationes, concretamente, se necesitan en cantidades relativamente grandes: K +,
Mg++, Ca++, Fe++.

El in potasio (K+):

El in potasio interviene en la activacin de una variedad de enzimas, incluyendo las que

participan en la sntesis de protenas.
En Gram-positivas est asociado con los cidos teicoicos de la pared.

El in magnesio (Mg++):

estabiliza ribosomas, membranas y cidos nucleicos;

como cofactor en muchas reacciones, especialmente las que implican transferencia de
grupos fosfato. Por ejemplo, en las reacciones que requieren ATP, el Mg ++ puede unir la
enzima al sustrato durante el mecanismo de accin de la primera.
Participa de las clorofilas y bacterioclorofilas de bacterias fotosintticas.

El in calcio (Ca++): es un cofactor de ciertas enzimas, como proteinasas.

El hierro (principalmente como in ferroso, Fe++) suele estar acomplejado en la naturaleza,
formando sales insolubles. Las bacterias disponen de una serie de molculas, denominadas
siderforos, capaces de captar ese hierro. El hierro:

participa en muchas molculas implicadas en procesos de respiracin, como citocromos y

ferroprotenas no hmicas (protenas con Fe-S);
interviene como cofactor en ciertas enzimas.
forma parte de los magnetosomas, de los cuales depende el comportamiento
magnetotctico capacidad de orientarse en el campo magntico de ciertas bacterias. Se
encuentra bajo la forma de magnetita (xido de hierro ferromagntico) Fe3O4

Aparte de estos iones que se requieren en cantidades relativamente grandes, las bacterias
necesitan minsculas cantidades de otros elementos (oligoelementos), a los que tambin se
denomina como micronutrientes o elementos traza.

El manganeso (Mn++) es un cofactor de ciertas enzimas, y a veces puede sustituir al Mg ++.

El cobalto (Co++) se requiere casi exclusivamente para la vitamina B12 (de hecho, si
suministramos esta vitamina al medio, la bacteria se vuelve independiente del Co++ libre).
El zinc interviene en la estabilizacin de complejos enzimticos como las ADN- y ARN-
polimerasas.
El molibdeno participa en las llamadas molibdoflavoprotenas, implicadas en la
asimilacin de nitratos. Por otro lado, participa como cofactor, junto con el Fe, en el
complejo nitrogenasa de las bacterias fijadoras de N 2 atmosfrico.
El nquel participa en hidrogenasas, enzimas que captan o liberan H 2.

NUTRIENTES PARTICULARES
Se trata de elementos que pueden ser cubiertos de modo muy distinto, dependiendo del
tipo de bacteria que consideremos. Concretamente, los elementos N y S (que requieren
todos los seres vivos) pueden ser captados por las bacterias de modos muy distintos,
dependiendo de sus capacidades biosintticas.

Tanto el N como el S se encuentran en la clula en estado reducido:

el radical -NH2 forma parte de los aminocidos (que a su vez son los sillares de las
protenas) y de las bases nitrogenadas (que participan en los cidos nucleicos y en algunas
coenzimas);
el radical -SH interviene en determinados aminocidos y en coenzimas como la CoA.

En qu formas qumicas entran N y S a las bacterias?

La mayora de bacterias fotosintticas y muchas heterotrofas asimilan estos elementos en

forma combinada inorgnica oxidada:

como NO3--, merced a la actuacin secuencial de nitrato- reductasas y nitrito- reductasas

asimilatorias
como SO4=. Este sulfato se activa con ATP, y luego se reduce hasta sulfito y finalmente
sulfhdrico, que ya tiene el estado de reduccin adecuado para la incorporacin del S.
Muchas bacterias hetertrofas pueden usar alguna forma reducida:

de N inorgnico: amonio (NH4+)

de S inorgnico: sulfuros (S=, SH-)
de N orgnico: aminocidos, pptidos
de S orgnico: cistena.

Muchas de las bacterias que pueden usar amonio como nica fuente de nitrgeno tambin
pueden usar nitratos.

FIJACIN DE NITRGENO
La atmsfera contiene enormes cantidades de nitrgeno no combinado (libre) en estado
gaseoso: el nitrgeno molecular o dinitrgeno (N2), que procede de microorganismos
denitrificantes (vase el captulo 15). Sin embargo, esta gran reserva slo puede servir de
fuente de nitrgeno a ciertos procariotas, las llamadas bacterias fijadoras de nitrgeno o
diazotrofos. Esta notable capacidad bioqumica no ha evolucionado en eucariotas. (Lo ms
a que ha llegado la evolucin es a seleccionar ciertos tipos de asociaciones simbiticas entre
procariotas diazotrofos y ciertos eucariotas). En una poca todo el nitrgeno de los seres
vivos fue procesado por estas bacterias, que toman el nitrgeno atmosfrico (N 2) y lo
modifican en manera tal que pueden ser utilizados por los organismos vivos como nitratos
o amonaco NH3.

Desarrollo de un ndulo en una raz de ciertas plantas (en general

leguminosas) donde viven bacterias en simbiosis con ella
Va metablica que fija el nitrgeno atmosfrico N 2, y lo convierte en amonaco NH3

La fijacin del N2, es un proceso de reduccin que convierte el nitrgeno molecular en

amoniaco, segn la siguiente ecuacin:

N2 + 8H+ + 8e + 18 ATP -->2NH3 + H2 + 18 (ADP + Pi)

Esta reaccin est catalizada por un complejo enzimtico denominado nitrogenasa o
dinitrogenasa, que consta de dos componentes:

Componente I o nitrogenasa propiamente dicha; posee un cofactor de hierro y molibdeno

(FeMoCo) que forma parte del centro activo. Por ello, a este componente tambin se le
conoce como molibdoferroprotena. (En realidad existen dos copias del cofactor, cuya
estequiometra es MoFe7S9-homocitrato)
Componente II o nitrogenasa- reductasa, que posee tomos de Fe acomplejados con S de
determinadas cistenas (por lo que este componente se denomina a veces ferroprotena).

Dos cosas llaman la atencin de la ecuacin anterior:

Obsrvese que la reaccin requiere un gran aporte de energa en forma de al menos 18

ATP (en ocasiones puede llegar a 24 ATP). Ello se debe a que el dinitrgeno (N=N) es una
molcula extremadamente inerte (su energa de disociacin es de 940 kJ), y su reduccin
precisa una gran energa de activacin para transferirle 6 electrones.
Parte de la actividad nitrogenasa (as como ATP y electrones) "se pierden" en reducir dos
iones H+ hasta H2. Se desconoce la razn de este "despilfarro", pero se sabe que es un
efecto intrnseco de este complejo enzimtico.

Los electrones para la reduccin llegan al complejo por medio de una ferredoxina, que los
transfiere al componente II, que queda reducido al tiempo que por cada dos electrones
transferidos se hidroliza una molcula de ATP. La nitrogenasa-reductasa reducida se asocia
entonces con la nitrogenasa (=componente I), y le transfiere los electrones. Una vez
reducida la molibdoferroprotena, sta transfiere los electrones (y los protones) al N2, hasta
convertirlo en dos molculas de amoniaco. (El centro activo es FeMoCo).

Un aspecto muy importante del complejo nitrogenasa es su extrema sensibilidad al

oxgeno, de modo que queda rpida e irreversiblemente inactivado por este gas. Ahora
bien, esto no significa que la capacidad de diazotrofa est relegada a bacterias anaerobias,
ya que, la evolucin ha "inventado" distintas estrategias para proteger a la nitrogenasa en
fijadores aerobios como las cianobacterias que han confinado el sistema al interior de
clulas con gruesas paredes (los heterocistos).

Debido a lo "caro" que resulta fijar nitrgeno, no es extrao comprobar que este proceso
est regulado de forma muy estricta ante la presencia en el medio de fuentes combinadas
de nitrgeno (nitratos, amonio, aminocidos):

la actividad nitrogenasa se ve inhibida ante la presencia de N combinado; ante N

combinado,
se reprime la transcripcin de los genes codificadores de la nitrogenasa y dems
funciones relacionadas (genes nif, fijadores de nitrgeno).

La nitrogenasa es una enzima relativamente "inespecfica", ya que puede reducir otras

pequeas molculas provistas de triples enlaces, como cianuros (N=C-) y acetileno
(HC=CH). La reduccin de acetileno a etileno sirve de base al mtodo ms usual de medir
la actividad nitrogenasa, el llamado ensayo de reduccin del acetileno, que se registra
mediante aparatos de cromatografa gaseosa.

FACTORES DE CRECIMIENTO
Los factores de crecimiento son molculas orgnicas especficas que, en muy pequea
cantidad, algunas bacterias necesitan para crecer. Salvo excepciones no tienen funcin
plstica (no son sillares de macromolculas) ni sirven como fuente de energa. Suelen ser
coenzimas o sus precursores, vitaminas, que determinadas bacterias no pueden fabricar por
s mismas, al carecer de parte o toda de una ruta biosinttica.

Ejemplos:

las bacterias del gnero Brucella requieren como factores de crecimiento en sus medios de
cultivo la biotina, niacina, tiamina y cido pantotnico.
Haemophilus necesita suplementos de grupos hemo y piridn-nucletidos.
En la siguiente tabla se muestran algunas de las vitaminas y cofactores requeridos por
algunas bacterias:

Factor o vitamina Funciones principales

p-aminobenzoico (PABA)
cido flico
Biotina
Cobalamina (vitamina B12)
Niacina (cido nicotnico)
Riboflavina
cido pantotnico
Tiamina (vitamina B1)
Complejo B6 (piridoxal, piridoxamina)
Grupo Vitamina K, quinonas
Precursor del cido flico
Metabolismo de compuestos C1,
transferencia de grupos metilo.
Biosntesis de cidos grasos; fijacin de
CO2
Reduccin y transferencia de
compuestos C1; sntesis de desoxirribosa
Precursor del NAD; transferencia de
electrones en reacciones redox
Precursor de FAD y FMN
Precursor de la CoA
Descarboxilaciones; transcetolasas
Transformaciones de aminocidos y
cetocidos
Transportadores de electrones
(ubiquinonas)

MEDIOS DE CULTIVO Y CONDICIONES DE CRECIMIENTO

El conocimiento de la nutricin microbiana permite el cultivo de los microorganismos en el
laboratorio. Como acabamos de ver, en general, todos los microorganismos tienen
parecidos requerimientos de macro- y micronutrientes, aunque ha quedado claro que la
forma en que cada nutriente es captado puede variar mucho entre unas bacterias y otras,
as como la cantidad relativa de cada nutriente. Los microbilogos, en su trabajo cotidiano,
estn acostumbrados a manejar multitud de "recetas" o frmulas correspondientes a
muchos tipos de medios de cultivo.

Un medio de cultivo es una solucin acuosa (bien como tal, o bien incorporada a un coloide
en estado de gel) en la que estn presentes todas las sustancias necesarias para el
crecimiento de un (os) determinado (s) microorganismo (s). Los medios de cultivo se
pueden clasificar, en primera instancia, en tres grandes tipos:

1) Medios complejos o indefinidos: su composicin qumica exacta se desconoce, ya que

son el producto de realizar infusiones y extractos de materiales naturales complejos:

Ejemplos:

Extracto de carne
Extracto de levadura
Autolizado de levadura
Peptona de carne o de soja
Digeridos de casena (de la leche).
Digeridos de embrin de semilla de algodn

Con ellos se logra un tipo de medio rico nutricionalmente, aunque indefinido

qumicamente. Si lo que pretendemos simplemente es obtener un buen crecimiento
bacteriano, este tipo de medios es ideal, ya que su confeccin es fcil y rpida (basta pesar
una cierta cantidad del extracto desecado, suministrado por casas comerciales, disolverlo
en agua y esterilizar en autoclave, antes de inocular e incubar la bacteria con la que
queramos trabajar). Estos medios contienen fuentes variadas de C y N orgnicos, sales
minerales y micronutrientes. Sin embargo, con ellos no podemos tener un control
nutricional preciso, ya que desconocemos la composicin qumica y proporcin exacta de
los distintos nutrientes.

2) Medios sintticos o definidos: se obtienen disolviendo en agua destilada cantidades

concretas de distintas sustancias qumicas puras, orgnicas y/o inorgnicas. La
composicin concreta de un medio sinttico depender de la bacteria que queramos
cultivar: lgicamente, un medio definido para una bacteria con grandes capacidades
biosintticas ser ms sencillo que el medio definido de otra bacteria con menores
posibilidades biosintticas.

3) En tercer lugar, podemos fabricar un tipo de medio "mezcla" de los anteriores,

denominado medio semisinttico: llevan algunas sustancias qumicas cuya naturaleza y
cantidad conocemos, junto con sustancias de naturaleza y composicin indefinidas.

Cualquiera que sea el tipo de medio, de los tres que acabamos de citar, podemos elaborar
dos tipos de "versiones", segn su estado aparente:

medios lquidos
medios slidos: derivan de los lquidos simplemente aadiendo a la solucin nutritiva un
coloide en estado de gel, que solidifica (da consistencia) a esta solucin.
En los primeros tiempos de la Bacteriologa slo se conoca como sustancia gelificante
incorporable a los medios la gelatina. Sin embargo, presenta muchos inconvenientes, ya
que funde a 25oC (por encima de esta temperatura el medio se licua), y adems, muchas
bacterias presentan gelatinasas que hidrolizan la gelatina.

El gelificante ms usado es el agar-agar, extrado de algas rojas (p. ej. Gelidium), del cual
existen versiones ms o menos purificadas (las ms puras estn ms enriquecidas en el
polisacrido agarosa; son las que se emplean para los medios definidos, con objeto de evitar
la introduccin de sustancias "contaminantes" inadvertidas que falseen las interpretaciones
sobre el comportamiento nutricional de la bacteria).

El agar presenta la gran ventaja de que una vez gelificado, no funde hasta cerca de los 100
oC, lo que permite su uso para la inmensa mayora de bacterias, que son mesfilas.

Para cultivar ciertas bacterias (sobre todo los quimioauttrofos) se suele recurrir a un
gelificante inorgnico, el silicagel o gel de slice.

Finalmente, introduciremos otra serie de conceptos relativos a medios de cultivo, que al

igual que los anteriores, sern tratados con la suficiente amplitud en las sesiones de clases
prcticas:

Concentracin de iones hidrgeno

El establecimiento de un pH inicial ptimo y en muchos casos su mantenimiento durante el

crecimiento es de gran importancia, sobre todo para aquellos microorganismos que a pesar
de producir cidos no los toleran. La mayora de los microorganismos desarrolla a pH 7
(Alcaligenes, Pseudomonas), tan solo unos pocos lo hacen a valores de pH bajos por lo cual se
denominan acido tolerantes (Lactobacillus, Acetobacter) o realmente acidfilas (Thiobacillus,
Sulfolobus, Helicobacter) que medran a pH alrededor de 2, la figura que sigue muestra un
esquema de distribucin de preferencias de algunas
bacterias.
Temperatura: Los microorganismos presentan distintos comportamiento en cuanto a
temperatura requerida para su incubacin. La mayora de las bacterias del agua o del suelo
son mesfilas crecen entre 20 oC y 42 oC. Otros comportamientos en referencia la
temperatura son: psicrfilo, por debajo de 20 oC; termfilo: entre 40 y 70 oC; termfilos
extremos: por encima de los 70 oC; hipertermfilos: por encima de 80 y 100 oC. La figura
muestra algunos ejemplos de bacterias que crecen a diferentes temperaturas.

RELACIONES DE LAS BACTERIAS CON EL OXGENO

Dependen en buena medida de la disponibilidad de las enzimas eliminadoras de perxidos
y superxidos. Veamos los tipos de bacterias segn sus relaciones con el oxgeno:

Bacterias aerobias: Necesitan O2 para crecer, ya que lo usan (al menos en algunas
ocasiones) como aceptor final de electrones para la captacin de energa qumica.

Algunos aerobios requieren para crecer tensiones de oxgeno inferiores a la atmosfrica

(del 2 al 10% de O2, en lugar del 20%). A estas bacterias se las califica como
microaerfilas.
Algunas microaerfilas lo son permanentemente (microaerfilas estrictas).
Otras se comportan como microaerfilas slo cuando crecen usando determinadas
fuentes de energa qumica o de nitrgeno (microaerfilas condicionales).

Bacterias anaerobias: Son aquellas que pueden crecer en ausencia de oxgeno, debido a que
pueden usar aceptores finales distintos del oxgeno, o porque poseen metabolismo
estrictamente fermentativo.

Anaerobias estrictas: El oxgeno les resulta txico ya que carecen de catalasa y

peroxidasa. Por lo tanto, no pueden eliminar los productos nocivos resultantes del
oxgeno. (Por ejemplo, las especies de Clostridium, y las arqueobacterias metanognicas).
Anaerobias aerotolerantes: Al igual que las anteriores, presentan un metabolismo
energtico anaerobio, pero soportan el oxgeno debido a que poseen enzimas
detoxificadores. Ejemplos tpicos son las bacterias del cido lctico, como Streptococcus,
Leuconostoc, Lactobacillus). Tambin se les llama anaerobios indiferentes.
 Anaerobios facultativos: Pueden realizar metabolismo energtico aerobio o anaerobio,
dependiendo del ambiente y la disponibilidad de aceptores finales de electrones.
Ejemplos son las enterobacterias como Escherichia coli.

Algunos tipos de medios de cultivo

Medios selectivos son aquellos que permiten seleccionar un tipo (o unos pocos tipos) de
microorganismos. En el laboratorio se emplean mucho medios selectivos slidos que
incorporan ciertas sustancias que inhiben el crecimiento de ciertas bacterias, pero permiten
el crecimiento de otras. (P. ej. medios que llevan violeta cristal inhiben el crecimiento de
bacterias Gram-positivas).

Medios diferenciales son aquellos que permiten distinguir a simple vista dos o ms tipos de
bacterias en funcin de su distinto comportamiento respecto de algn nutriente del medio.
Ese comportamiento diferencial se traduce normalmente en un viraje de color de una
sustancia indicadora presente en el medio.

Ejemplos:

en el medio EMB (eosina-azul de metileno) ciertos tipos metablicos de bacterias

producen cambios de color y precipitacin de sales cuando producen cidos por
fermentacin de ciertas fuentes de carbono.
El medio llamado agar-sangre lleva un 5% de sangre de caballo o carnero, lo cual revela la
capacidad (y el tipo) de hemlisis de ciertas bacterias.

Algunos medios son simultneamente selectivos y diferenciales.

P. ej., el agar de MacConkey, que el alumno manejar en los prcticos. Se trata de un medio
de color rosado y transparente, que posee, entre otras sustancias, lactosa, peptonas, el
colorante vital rojo neutro, sales biliares y violeta cristal.

Este medio es selectivo contra muchas bacterias Gram-positivas debido al violeta cristal, y
tambin contraselecciona muchas Gram-negativas debido a las sales biliares (que son
agentes tensioactivos que desorganizan muchas membranas externas). En cambio, las
Enterobacterias estn evolutivamente adaptadas a soportar sales biliares en su hbitat
natural (el intestino de vertebrados superiores), y pueden crecer en este medio. En su faceta
de medio diferencial, el agar MacConkey permite visualizar dos tipos de Enterobacterias
segn que puedan o no fermentar la lactosa, con produccin de cidos. Las bacterias
fermentadoras de lactosa (Lac+), excretan al medio gran cantidad de cidos orgnicos, lo
que provoca que sus colonias, y sus alrededores aparezcan de color rojo intenso, debido al
viraje del rojo neutro; adems, se forma un halo turbio a cierta distancia de estas colonias,
fenmeno ocasionado por la precipitacin de las sales biliares inducida por la acidez. En
cambio, las bacterias Lac-, al no poder usar la lactosa, recurren como fuente de C a las
peptonas, a las que desaminan: incorporan el esqueleto carbonado, excretando iones NH4+,
que alcalinizan el medio de cultivo, lo cual se traduce en que el indicador rojo neutro vira a
amarillo.

Cultivos sobre soporte slido inerte

Desde hace un tiempo estamos utilizando en la ctedra un soporte poroso inerte las
"perlitas" material que tiene la caracterstica de ser barato, fcilmente esterilizable y con una
gran capacidad de retencin de lquidos en sus oquedades lo cual permite variados
cultivos.