UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

II UNIDAD

CURSO:
Inmunologa

APELLIDOS Y NOMBRES:

Bobadilla Pastor Geraldine Ivonne Y.

PRACTICAS:

Reacciones Antgeno- Anticuerpo

Demostracin de accin ltica del complemento
Determinacin de grupo sanguneo ABO y factor Rh
Preparacin de vacunas a germen muerto

PROFESORA:
Dra. Manuelita

SECCION Y MESA:
A mesa 1

TRUJILLO-PERU
2017
 PRACTICA N5

I. INTRODUCCIN:

Cuando un anticuerpo se encuentra con un antgeno las reacciones dependern de las

circunstancias, pudindose dar interacciones: Primarias; donde el anticuerpo slo es
suficiente para neutralizar al antgeno, como ocurre con las toxinas o con los
microorganismos que pretenden ingresar en la clula y son bloqueados por aqul.
Secundarias; tenemos que el anticuerpo dispone de otro aliado para desembarazarse del
antgeno: el sistema del complemento o las clulas fagocticas. Esta colaboracin exalta su
valor en las deficiencias primarias de factores del complemento y de la actividad fagoctica
donde la aparicin de infecciones bacterianas severas es la regla aun en presencia de
anticuerpos especficos. Hay muchas tcnicas para la cuantificacin e identificacin de
antgenos y anticuerpos. Los anticuerpos son una herramienta muy til I para la
identificacin y la cuantificacin de cualquier antgeno o protena. Hay tcnicas basadas en
las interacciones secundarias, donde la cantidad y especificidad de la reaccin se evala
por los cambios fsicos inducidos tras la unin del anticuerpo especfico con su antgeno
correspondiente para formar inmunocomplejos. Las tcnicas basadas en interacciones
secundarias son de dos tipos: tcnicas de aglutinacin y de precipitacin. Se denominan
tcnicas de aglutinacin cuando el antgeno forma parte de una partcula (un grupo
sanguneo de un hemate) o est unido a una partcula (por ejemplo IgG unido a ltex). La
aglutinacin positiva de las partculas causada por incubacin con sueros problema implica
presencia del anticuerpo especfico. Las tcnicas basadas en interacciones secundarias en el
que el antgeno no es una partcula sino una molcula soluble se denominan tcnicas de
precipitacin. Bajo determinadas condiciones (cuando el antgeno y el anticuerpo se
encuentran en proporciones ptimas), los inmunocomplejos precipitan espontneamente. La
localizacin relativa o la cantidad de precipitado pueden medirse y est en relacin directa
con la concentracin del antgeno y el anticuerpo. Existen muchas variantes de este tipo de
tcnicas.

II. OBJETIVOS:

1. Realizar algunas de las aplicaciones prcticas de la reaccin de aglutinacin.

2. Demostrar cualitativamente la reaccin de precipitacin, as como la importancia

de la respuesta inmune.
III. ESQUEMA Y RESULTADOS:

1. Reaccin de Aglutinacin en lmina

2. Reaccin de precipitacin

IV. DISCUSIN:

Las reacciones de aglutinacin y de precipitacin son la base de la mayor parte de las tcnicas
inmunolgicas. Su principio se basa en la reaccin antgeno-anticuerpo. Para comprender lo
anterior es necesario definir qu es un antgeno y un anticuerpo. Antgeno es una sustancia
de alto peso molecular, con cierta rigidez estructural y que tiene la particularidad de ser
parcialmente metabolizado por clulas especializadas llamadas macrfagos, por lo tanto
es capaz de generar una respuesta inmune en un organismo que la detecte como un agente
extrao. Mientras que un anticuerpo es una glicoprotena, producida por linfocitos B
activados, llamados clulas plasmticas, como respuesta a la presencia de un antgeno en el
organismo, a su vez los anticuerpos pueden ser producidos por lneas celulares in vitro, como
es el caso de la produccin de anticuerpos monoclonales. Dichos anticuerpos llamados
tambin inmunoglobulinas, se presentan en cinco clases principales, IgG, IgM, IgA, IgD e
IgE, que se diferencian entre s por sus caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas.1,2,3 La
capacidad inmunognica de distintas partculas, es en orden decreciente la siguiente:
protenas, glicoprotenas, polisacridos, lpidos y azcares. Las reacciones de precipitacin
son medibles en cantidad y son fciles de ejecutar.
Las tcnicas de aglutinacin son slo semicuantitativas y algo ms difciles. La
aglutinacin de los antgenos nativos insolubles o de las partculas recubiertas por el antgeno
puede evaluarse a simple vista con o sin la ayuda del microscopio. Entre las ventajas de las
reacciones de aglutinacin estn su alto grado de sensibilidad y la enorme variedad de
substancias identificables a travs del uso de partculas que estn recubiertas por antgeno o
por anticuerpo. Segn Coombs existen 3 requerimientos principales en las pruebas de
aglutinacin:
1. Disponibilidad de una suspensin estable de clulas o de partculas.
2. Presencia de uno o ms antgenos cercanos a la superficie.
3. Conocimiento de que los anticuerpos "incompletos" o no aglutinables no son localizables
sin modificacin (reacciones antiglobulina).

Clasificacin de las reacciones de aglutinacin:

Aglutinacin directa:
Un antgeno celular o de partculas insolubles es aglutinado directamente por el anticuerpo.
Un ejemplo de esto es la aglutinacin de los eritrocitos del grupo A por antisueros anti- A,
la aglutinacin de los eritrocitos RH positiva por el antisuero anti-D o la aglutinacin del
antgeno brucelar por anticuerpos anti-Brucella. Gran cantidad de partculas como pueden
ser eritrocitos, bacterias, hongos y virus pueden ser aglutinados por anticuerpos sricos,
algunas veces de manera inespecfica y otra muy especfica, siendo sta ltima, respuesta a
una previa inmunizacin del organismo productor de los anticuerpos sricos. Las pruebas
para identificar anticuerpos especficos son llevadas a cabo titulando seriadamente
antisueros en diluciones al doble en presencia de una cantidad constante de antgeno.
Aglutinacin indirecta:
Se refiere a la aglutinacin de las clulas recubiertas de antgeno o a las partculas inertes
que son portadoras pasivas de antgenos solubles. Se tienen ejemplos de lo anterior en la
utilizacin de partculas de gelatina en la bsqueda de anticuerpos contra Treponema
pallidum por aglutinacin pasiva (TPPA), la fijacin del ltex para VDRL en la sfilis y en
la utilizacin de eritrocitos en la prueba de hemaglutinacin indirecta (HAI) en la bsqueda
de anticuerpos contra Tripanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. De
manera alterna, el antgeno puede ser localizado recubriendo partculas de ltex o eritrocitos
con anticuerpo purificado y practicando la llamada aglutinacin inversa
Hemaglutinacin viral:
Otra categora de aglutinacin que involucra la aglutinacin espontnea de los eritrocitos por
ciertos virus, es la reaccin de hemaglutinacin viral, la cual puede inhibirse de manera
especfica en presencia de anticuerpos antivirales. Por lo tanto, la hemaglutinacin viral
puede emplearse para medir la cantidad de virus o para determinar, por inhibicin homloga,
el ttulo de los anticuerpos dirigidos en contra de los virus hemaglutinantes.

Inhibicin de la aglutinacin:
La inhibicin de la aglutinacin, si se arregla de manera cuidadosa con antgenos altamente
purificados, puede ser usada como un indicador sensible de la cantidad del antgeno en
diversos lquidos de los tejidos.

Hemaglutinacin indirecta (pasiva)

Este tipo de aglutinacin se lleva a cabo utilizando eritrocitos recubiertos de antgenos, o
anticuerpos acoplados de manera espontnea (adsorcin pasiva) o mediante un acoplamiento
qumico, utilizando diversas sustancias para este fin, tales como Acido tnico Bencidina
bisdiazoada (BDB), Cloruro crmico (CrCIs), Glutaraldehdo, clorurocianrico entre otros.
Dependiendo de la naturaleza del antgeno y del anticuerpo y de las condiciones de la
reaccin, se pueden observar diferentes tipos de reacciones serolgicas como el de
precipitacin en gel
La reaccin de precipitacin ocurre cuando se combina un anticuerpo, por lo menos
divalente, con un antgeno soluble y esto conlleva a la formacin de agregados que
precipitan. Como las reacciones de precipitacin son fcilmente observables "in vitro", stas
resultan pruebas serolgicas muy tiles, especialmente para medir concentraciones de
anticuerpos. Para que la precipitacin ocurra en forma mxima se necesita que tanto el
antgeno como el anticuerpo estn en concentraciones ptimas, cuando cualquiera de los
reaccionantes estn en exceso no se pueden formar grandes agregados antgeno-anticuerpo.
1. Precipitacin en medios lquidos:

Esta reaccin se produce en dos etapas. En la inicial, que se desarrolla rpidamente y es

influida muy poco por la temperatura y los electrolitos, se forman los complejos Ac/Ag
primarios. A medida que el tiempo transcurre, esos complejos iniciales se agregan,
originando micelas de diferentes tamaos, las que finalmente precipitan. Algunos complejos
no alcanzan a hacerlo y quedan en solucin.
La temperatura acelera esta segunda etapa, siendo adems electrolitodependiente.
Es mucho ms lenta que la inicial, puede durar minutos, e incluso horas, para que se
complete.
La formacin de agregados es una consecuencia de la bivalencia de los anticuerpos y la
multivalencia de los antgenos. Con haptenos monovalentes o antgenos que poseen un solo
determinante antignico por molcula, la precipitacin no se produce.
Un hecho muy particular lo constituyen los anticuerpos monoclonales, que en su mayor parte
no muestran actividad precipitante. Ello se debe a que en muchos casos, especialmente
cuando estn dirigidos contra macromolculas en solucin, reconocen a un nico epitope no
repetido, lo que les impide formar agregados.
La formacin de estos diferentes complejos ha sido explicada mediante la llamada teora del
enrejado, que considera que la composicin del precipitado formado es una consecuencia
del modo en que anticuerpo y antigeno se han unido. Dada la bivalencia del anticuerpo y
multivalencia del antigeno, las posibilidades de combinacin varan segn que en la mezcla
exista exceso de antigeno, exceso de anticuerpos o equivalencia de ambos.
En la zona de exceso de antigeno, los complejos son solubles.
Si bien la precipitacin en medios lquidos es muy til para la identificacin de antgenos y
anticuerpos, teniendo en cuenta lo anteriormente expuesto en lo relativo a la formacin de
los precipitados, la misma puede usarse con fines cuantitativos y constituye un buen mtodo
para la medida de la concentracin de los anticuerpos presentes en un suero. Puede usarse
tambin para medir niveles de antgeno.

2. Precipitacin en medios gelificados

Las macromolculas pueden difundir libremente a travs de geles; dicha difusin esta
limitada por la concentracin del gel. Empleando soportes adecuados, en especial aquellos
que como base tienen agar disuelto en electrolitos, es posible hacer migrar antgenos y
anticuerpos de modo que al encontrarse interaccionen. Pueden utilizarse tambin geles con
base de pectina, alginatos, pliacrilamida y aun tiras de acetato de celulosa gelatinizado.
Los precipitados que se originan se visualizan como ntidas bandas de precipitacin, que
permanecern estables mientras un mayor aflujo de molculas de los reactivos no provoquen
su redisolucin.
Se han descripto numerosas tcnicas cualitativas y cuantitativas basadas en este principio,
entre las que pueden citarse la difusin simple monodimensional, difusin doble
monodimensional, difusin doble bidimensional, difusin radial, etc..

REACCIN DE PRECIPITACIN EN GEL

REACCIN DE PRECIPITACIN

V. CONCLUSIONES:
1. Se realiz algunas aplicaciones prcticas de la realizacin de la reaccin de
aglutinacin as como la tcnica de su ejecucin.

2. Se desarroll correctamente el procedimiento de reaccin antgeno-anticuerpo

por precipitacin.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1.-Rojas, W: Inmunologa. (12, ed.). Ed.Corporacin para investigacin
Biolgicas.Colombia.2001.pp:213 215
2.-Inmunologia [en lnea][fecha de acceso 21 de julio del 2017]disponible en:
http://www.ucv.ve/Farmacia/Micro_web/Catedras02/tema10.pdf
3.-Reaccion antgeno-anticuerpo [en lnea][fecha de acceso 21 de julio del
2017]disponible en:
http://www.anmm.org.mx/gaceta_rev/vol_140/suplementos/n3/2004-140-3-50-52.pdf
 PRCTICA N6

I. INTRODUCCIN:

El complemento es un sistema de Defensa y limpieza, constitutiva por una serie de

protenas solubles, transportadas por la sangre. Puede ser activado por Ag luego de
reaccionar con Ac unidos al Ag, al hacerlo sus protenas se solidifican y adhieren a la
superficie de las clulas, grmenes o molculas que deben ser destruidas liberando
simultneamente molculas y las pequeas que incrementan la fagocitosis amplan los
mecanismos de inflamacin.
Los distintos mecanismos que se ponen en marcha con la activacin del sistema de
complemento, complementan y refuerzan los mecanismos inmunolgicos de defensa. No
obstante, su accin puede ser nociva cuando su activacin tiene lugar en forma
extempornea o cuando se prolonga innecesariamente, como ocurre en enfermedades
autoinmunes.
Los virus como los de la influenza, papera, influenza, etc; tiene la caracterstica de lograr
la aglutinacin de glbulos rojos humanos, de pollo o de caballo. Los adenovirus
aglutinan los eritrocitos de la rata. Un suero que posea los ACS contra algunos de estos
virus tendr la capacidad de bloquearlo o impedir el efecto normal de la aglutinacin de
los eritrocitos. La utilidad de prueba radica en su especificidad.

II. OBJETIVO:

1. Demostrar cualitativamente in vitro la parte final de la accin del complemento en

la reaccin de lisis.

III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS:

Los especificados en la gua de prctica de inmunologa.

 IV. ESQUEMA Y RESULTADOS:

PRUEBA DE FIJACIN DEL C :

0.5 ml hemolisina

1 1
1
0.5 ml sangre 2 2
de carnero 3 3 0.5 ml C 2
4 4 activo 3
5 5 4
6 6 5
7 7 6
7

(-) LISIS

Llevamos a incubar
0.5 ml hemolisina a 37C por 15 - 30

1 1
1
0.5 ml sangre 2 2
de carnero 3 3 0.5 ml C 2
4 4 inactivo 3
5 5 4
6 6 5
7 7 6
7

(+) NO LISIS

V. DISCUSIN:

Una propiedad importante del sistema del complemento es que sus componentes son
enzimticamente alterados durante la reaccin, de modo que no reaccionarn en una
nueva secuencia de reacciones, es decir si el complemento es consumido durante las
reacciones antgeno-anticuerpo, esto es llamado fijacion de complemento y ocurre
cuando un anticuerpo de tipo IgG o IgM reacciona con el antgeno en presencia de
complemento, aun cuando ste no sea requerido en la reaccin.
La prueba de fijacin de complemento se lleva a cabo en dos fases. En la fase primera se
mezclan el suero del cobayo (previamente calentado a 36C) y el antgeno en presencia
de una cantidad determinada de complemento; esta mezcla es generalmente incubada
durante 30 minutos a 37C. Si se forman los complejos antgeno-anticuerpo, el
complemento es fijado. En la segunda fase se aade el sistema indicador que consiste en
glbulos rojos de carnero y anticuerpos contra glbulos rojos de carnero. La ocurrencia
de hemlisis indica que el complemento no fue utilizado por lo tanto, en la fase 1 no se
ha producido una reaccin Ag-Ac especfica. En cambio, la ausencia de hemlisis, indica
que el complemento ha sido fijado y por lo tanto que en la fase 1 se ha producido una
reaccin Ag-Ac, en este caso se considera una reaccin de fijacin del complemento
positiva, mientras que en el primer caso se considera negativa la reaccin de fijacin de
complemento. Utilizando un antgeno conocido, esta tcnica puede ser empleada para
detectar y medir anticuerpos presentes en sueros. Al ocurrir la reaccin del antgeno con
los anticuerpos del suero, sta reaccin Ag-Ac se puede poner de manifiesto mediante
una prueba de fijacin de complemento.
En Inmunologa, el sistema del complemento, uno de los componentes fundamentales
de la respuesta inmunitaria en la defensa, por ejemplo, ante un agente hostil. Consta de
un conjunto de molculas plasmticas implicadas en una danza bioqumica coordinada,
cuya funcin es de potenciar la respuesta inflamatoria, facilitar la fagocitosis y dirigir la
lisis de clulas incluyendo la apoptosis.1 Constituyen un 15% de la fraccin de
inmunoglobulina del suero.

Est formado por 20 glucoprotenas que se encuentran en el suero y otros lquidos

orgnicos de forma inactiva, y que al activarse de forma secuencial, medan una serie de
reacciones con la finalidad de destruir la clula diana. El sistema se activa por tres vas
diferentes

Va clsica:
Denominada as porque se descubri primero. Su activacin es iniciada por
inmunocomplejos formados por IgG (Inmunoglobulina G) e IgM (Inmunoglobulina M).
Esta va inicia con la unin de dos (en el caso de la participacin de IgG) o ms (en el
caso de IgM) molculas de Inmunoglobulinas unidas a los antgenos respectivos.

Va alternativa:
Filogenticamente ms primitiva, su activacin fundamental no es iniciada por
inmunoglobulinas, sino por polisacridos y estructuras polimricas similares
(lipopolisacridos bacterianos, por ejemplo). Esta va constituye un estado de activacin
permanente del componente C3 que genera C3b. En ausencia de microorganismos o
antgenos extraos, la cantidad de C3b producida es inactivada por el Factor I. Cuando
C3 se une a una superficie invasora (evade la accin del Factor I), forma un complejo con
el Factor B, el cual se fragmenta por accin del factor D en presencia de Mg++. El
complejo C3bBb es altamente inestable y la va alterna no contina sin el rol estabilizador
de una protena circulante llamada properdina. Se forma de ese modo la C3 convertasa de
la va alterna (compuesta por C3bBb), la cual acta enzimticamente sobre molculas
adiccionales de C3, amplificando la cascada. Incluso algo de este C3b se puede unir a la
C3 convertasa y formar la C5 convertasa de la va alterna (C3bBb3b) que activara a C6,
convergiendo en los mismos pasos finales de la va clsica.
 Va de las lectinas:
Es una especie de variante de la ruta clsica, sin embargo se activa sin la necesidad de la
presencia de anticuerpos.Se lleva a cabo la activacin por medio de una MBP (manosa
Binding Protein/proteina de unin a manosa) que detecta residuos de este azcar en la
superficie bacteriana,y activa al complejo C1qrs. De otra manera, una segunda esterasa,
la esterasa asociada a MBP acta sobre C4. El resto de la va es similar a la clsica
Estas vas producen una enzima con la misma especificidad: C3; y a partir de la activacin
de este componente siguen una secuencia terminal de activacin comn. El propsito de
este sistema de complemento a travs de sus tres vas es la destruccin de
microorganismos, neutralizacin de ciertos virus y promover la respuesta inflamatoria,
que facilite el acceso de clulas del sistema inmune al sitio de la infeccin.

Las funciones del Sistema del Complemento:

A. Lisis de clulas
El MAC (Membrane Attack Complex/Complejo de ataque a la membrana) puede lisar
bacterias gram-negativas, parsitas, virus encapsulados, eritrocitos y clulas nucleadas.
Las bacterias gram-positivas son bastante resistentes a la accin del complemento.

B. Respuesta inflamatoria
Los pequeos fragmentos que resultan del clivaje de componentes del complemento, C3a,
C4a y C5a, son llamados anafilotoxinas. Estas se unen a receptores en clulas cebadas y
basfilos. La interaccin induce su degranulacin, liberando histamina y otras sustancias
farmacolgicamente activas. Estas sustancias aumentan la permeabilidad y
vasoconstriccin vascular. As mismo, C3a, C5a y C5b67 inducen monocitos y
neutrfilos a adherirse al endotelio para iniciar su extravasacin.

C. Opsonizacin
C3b es la opsonina principal del complemento. Los antgenos recubiertos con C3b se
unen a receptores especficos en clulas fagocticas, y as la fagocitosis es facilitada.

D. La neutralizacin de virus
C3b induce la agregacin de partculas virales formando una capa gruesa que bloquea la
fijacin de los virus a la clula hospedera. Este agregado puede ser fagocitado mediante
la interaccin de receptores del complemento y C3b en clulas fagocticas.

E. Eliminacin de complejos inmunes

Los complejos inmunes (complejos antgeno-anticuerpo circulantes) pueden ser
eliminados de la circulacin si el complejo se une a C3b. Los eritrocitos tienen receptores
del complemento que interactan con los complejos inmunes cubiertos por C3b y los lleva
al hgado y al bazo para su destruccin.
VI. CONCLUSIONES:

1. Se demostr cualitativamente in Vitro la parte final de la accin del

complemento en la reaccin de lisis

2. Se compar el tubo I (complemento activo) y tubo II (complemento inactivo); en

el tubo I se observ la lisis eritrocitaria.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. Roit, B: Inmunologa 4taed.ED.Harcourt Bracee.Espaa.1997

2. Rojas, W: Inmunologa. 12 Ed. Edit. Corporacin para investigacin

Biolgicas.Colombia.2001.pp:96, 216

3. Inmunologa.[en lnea] [fecha de acceso 20 de julio del 2017]disponible en:http://

www.sanidadanimal.info/Inmuno/Septimo1.htm
 PRACTICA N7

I. INTRODUCCIN:

Los glbulos rojos o hemates son clulas sanguneas, por lo tanto todos los tenemos. Sin
embargo, en la membrana de los glbulos rojos pueden existir unas protenas especiales:
son las glucoprotenas A y B. As, un glbulo rojo puede tener protena A, protena B,
tener ambas o no tener ninguna. De manera que un individuo tendr grupo sanguneo A
si sus glbulos rojos tienen la glucoprotena A en su membrana, siguiendo el mismo
criterio para el resto de los grupos (si no existe protena, entonces ser de grupo sanguneo
O).

Estas protenas corresponderan a lo que denominan antgenos. Ahora bien, en el plasma

sanguneo tenemos anticuerpos. Evidentemente, un individuo del grupo A no podr tener
anticuerpos anti-A, pues esto no sera viable (la sangre coagulara).

As:

Los individuos A tendrn anticuerpos anti-B

Los individuos B tendrn anticuerpos anti-A
Los individuos AB no tendrn anticuerpos de este tipo
Los individuos O tienen los dos tipos de anticuerpos.

A B AB O
Grupo
sanguneo
Glbulos
rojos

En la Antgeno No
membrana Antgeno B Antgenos A antgenos
A yB
En el plasma Anti-B Anti-A No anticuerpos Anti-A y
Anti-B

De la misma manera, el factor Rh es otra protena que existe en los glbulos rojos de
algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue descubierta, el macacco rhesus.
El factor Rh positivo es un factor hereditario dominante.
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos visto, un
individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, as que no podr recibir sangre de un
individuo B, pues estos anticuerpos provocaran la coagulacin de la sangre del donante
en los vasos sanguneos de la persona receptora.

En la siguiente tabla vemos las compatibilidades a la hora de donar y recibir sangre.

Como vemos, el grupo AB puede recibir de cualquier otro grupo y de s mismo, as que
se llama "receptor universal". El grupo O ,sin embargo, puede donar a cualquier grupo,
as que se conoce como "donante universal".

RECEPTOR

grupo A grupo B grupo AB grupo O

D
O grupo A SI NO SI NO
N
A grupo B NO SI SI NO
N
T grupo AB NO NO SI NO
E
grupo O SI SI SI SI

Este sistema explica la enfermedad hemoltica del recin nacido. Esta enfermedad, de
aparicin habitual en el segundo hijo, poda incluso llegar a provocar la muerte de ste.
Cuando la madre es Rh negativa, el padre Rh positivo y el beb Rh positivo, ste ltimo
puede estimular la produccin de anticuerpos de la madre, ya que los glbulos rojos del
hijo pasarn por la placenta a la madre. Son los anticuerpos anti-Rh, que podran
reaccionar contra los hemates del hijo.

Esta enfermedad, hoy en da, se puede prevenir mediante la vigilancia sistemtica de las
embarazadas Rh negativas y administrndolas adecuadamente la inmunoglobulina anti-
Rh.
En las transfusiones, tanto el donante como el receptor deben pertenecer al mismo grupo
sanguneo ABO y Rh. Slo excepcionalmente, se puede transfundir sangre de otros
grupos compatibles.

II. OBJETIVOS:

1. Determinar la presencia de antgeno y anticuerpo naturales e introducir al estudiante

en la metdica de la determinacin del grupo sanguneo y factor Rh.
 III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS:

Materiales: Los especificados en la gua de prctica de inmunologa.

Depositamos una gota de suero Mezclamos las gotas en cada

Obtenemos la muestra de anti A (azul) anti B y anti D en una seccin con un palillo en
sangre perifrica por la lmina porta objeto: Situamos una forma de crculo y
puncin cutnea. gota de sangre junto a la gota de esperamos la presencia de
antisuero. aglutinacin.

IV. RESULTADOS:

Reaccin Reaccin Reaccin Grupo Factor Rh

anti A anti B anti D Sanguneo
Alumna - - + O +

V. DISCUSIN:

En laboratorio se tom muestra de un alumno se agreg 3 gotas de sangre sobre una

lmina porta objetos, luego se agreg suero Anti-A, suero Anti-B y suero Anti-D sobre la
muestra de sangre, en la muestra aglutino en el suero con Anti-Ay Anti-B, lo que indica
que es grupo sanguneo AB y con el Anti-D no aglutin que indica el factor Rh (-).
Al mezclar la sangre con los antisueros A, B y D, se produce una aglutinacin, es decir
los hemates se han agrupado, se est produciendo una reaccin antgeno anticuerpo, de
acuerdo al aglutingeno que presenta la sangre.
Se denominan Rh positivos los hemates que son aglutinados por este anticuerpo y tienen,
por tanto, el antgeno Rh en la superficie. Se denominan Rh negativos los que no son
aglutinados y que, por tanto, no poseen el antgeno Rh en su superficie.
De la misma manera que en el sistema ABO, en el sistema Rh no se puede transfundir el
antgeno Rh a las personas que no lo tienen, ya que podra originar la produccin de
anticuerpos Rh en el receptor. Los sujetos Rh negativos slo podrn recibir sangre de
donantes Rh negativos.
Grupo sanguneo es cada uno de los diversos tipos en que se ha clasificado la sangre de
las personas en relacin con la compatibilidad de los hemates y suero de otro individuo
donador de sangre con los hemates y suero de otro individuo que la recibe. La
determinacin de estos grupos, que al principio se limitaban a la seccin de donantes y
receptores para la trasfusin sangunea se ha extendido a la determinacin de la paternidad
y a la identificacin en criminologa.
Estos grupos son cuatro, segn la clasificacin que hizo Landsteiner, clasificacin hoy
universal y se denominan: 0, A, B, AB. Se caracterizan por las diferentes combinaciones
de dos aglutingenos existentes en los glbulos rojos y de dos aglutininas contenidas en
el suero.
El Factor Rh es un aglutingeno encontrado en 1940 por Landsteiner y Weiner, en los
glbulos rojos en uno primates (Macacus rhesus) y que tambin existe normalmente en
el 85% de los humanos, que por esta causa se denomina Rh positivos. La sangre de estos
transfundida a los Rh negativos (15%), provoca en el suero de stos ltimos la formacin
de anticuerpos, que en sucesivas transfusiones pueden destruir los glbulos rojos del
donante Rh +, invalidando as la transfusin y creando efectos adversos. Tambin en el
embarazo un feto Rh + puede provocar en la madre Rh - la produccin de aglutininas que
podrn ser la causa de la enfermedad hemoltica de los recin nacidos.
El factor Rh est constituido por un complejo de seis antgenos fundamentales, formado
por tres pares de genes alelos: Cc, Dd, Ee. El antgeno de mayor poder sensibilizante es
el D, le siguen en importancia el e y el E.
La retroalimentacin por anticuerpos es un ejemplo excelente de autorregulacin porque
las molculas efectoras producidas por la propia respuesta humoral sirven para reducir la
respuesta. Una aplicacin prctica de la retroalimentacin por anticuerpos es evitar la
enfermedad del Rh (la causa principal de la eritroblastocis fetal), que sigue siendo uno
de los ejemplos ms llamativos de intervencin inmunitaria exitosa en una enfermedad
grave.
La enfermedad del Rh afecta a los lactantes nacidos de madres que no expresan antgenos
del grupo sanguneo Rh y de padres que s lo hacen. Los eritrocitos de estos fetos son Rh-
positivos por la herencia de los genes del Rh paternos. La sangre fetal entra en la
circulacin materna en pequeas cantidades durante la gestacin y en cantidades
importantes durante el parto. El sistema inmunitario de la madre Rh negativo reconoce el
Rh fetal como antgeno extrao. Por lo tanto, la madre produce cantidades cada vez
mayores de anticuerpos anti-Rh en cada embarazo sucesivo.
Durante la gestacin, estos anticuerpos maternos atraviesan la placenta, entran en la
circulacin fetal, se unen a los eritrocitos fetales y producen hemlisis, que aumenta en
gravedad en cada embarazo, y puede producir la muerte del feto.
Para evitar esta enfermedad, cuando se detecta una incompatibilidad Rh entre la madre y
el padre, a la madre se le inyecta una dosis de anticuerpos anti- Rh inmediatamente
despus de cada parto.
VI. CONCLUSIONES:

1. Se demostr la presencia de antgeno y anticuerpo naturales en la superficie de la

membrana de los eritrocitos humanos.
2. Se identific los distintos grupos que existen ya sea A, B, AB o O y los
identificamos con los reactivos vistos en la prctica, as como tambin el factor
Rh.
3. Se determin el grupo sanguneo en la voluntaria siendo este O Rh+.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. BELLANTI, J.: Inmunologa. 3 ed. ED. Interamericana. Mxico-1986. pp: 85, 8

2. VILLE A. : Biologa 7 ed. Edit. Mc Graw Hill 1992 Pg. 307 309
3. GRUPOSANGUINEO[en lnea][fecha de acceso 20 de julio del 2017]disponible
en: http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/grupos.htm
 PRCTICA N8

I. INTRODUCCIN:

En los pases desarrollados se ha logrado controlar muchas enfermedades bacterianas y

virales graves en gran medida gracias al uso de antibiticos para tratar las infecciones
bacterianas, de vacunas que protegen contra las enfermedades bacterianas y virales y, ms
recientemente, de un nmero creciente de frmacos antivirales eficaces. Sin embargo,
enfermedades como el sarampin, que ya no constituye una amenaza en los pases ricos,
siguen siendo un serio problema de salud pblica en muchas reas pobres de los pases
en vas de desarrollo, pues las complicaciones son comunes y graves en nios con una
alimentacin deficiente. Todava no se ha desarrollado ninguna vacuna eficaz contra la
principal enfermedad parasitaria tropical, la malaria, aunque avances recientes hacen
pensar que pronto ser una realidad. Las personas que viajan a reas con riesgo de
infeccin disponen de un nmero cada vez mayor de frmacos preventivos profilcticos;
los centros especializados en enfermedades tropicales aconsejan sobre la prescripcin de
esos frmacos. A finales de la dcada de 1970, mediante un programa de vacunacin
masiva llevado a cabo por la Organizacin Mundial de la Salud, se logr una erradicacin
total de la viruela, que fue durante siglos una de las enfermedades ms dainas del mundo.

Al inocular antgeno o anticuerpo el organismo genera antgeno.

ANTGENO ATENUADO: Prdida de la capacidad virulenta, por envejecimientos de

cultivo o por tratamiento con sustancias qumicas entonces el organismo forma
anticuerpos.

Existen las llamadas autovacunas usadas en el tratamiento del acn, extrayendo de las
pstulas pus que luego de ser plaqueadas, se siembran y aislan (staphilococus), as se
tiene la vacuna que se aplica al paciente directamente en la zona de donde procede el
antgeno.

La enfermedad es tan antigua como la propia existencia de los seres vivos. En la doble
vertiente salud-enfermedad el hombre ha intentado controlar los procesos de enfermedad,
para ello ha venido creando a travs de los tiempos una gran cantidad de armas para curar
las enfermedades, pero tambin ha procurado averiguar la manera de cmo prevenirlas.
Entre estos procedimientos contamos en la actualidad con los procesos de higiene e
inmunizacin, es en este ltimo apartado donde se encuentran las vacunas.

El proceso de inmunizacin consiste en aumentar las defensas del organismo ante los
agentes nocivos. Esto se puede lograr mediante dos procedimientos: la inyeccin de
sueros que contienen inmunoglobulinas, es decir, los anticuerpos o defensas que
desarrolla el organismo frente a una enfermedad (inmunizacin pasiva) y la inmunizacin
activa (vacunas).

Las vacunas son preparadas a base del agente que causa la enfermedad. Estas pueden estar
constituidas por: agente causante de la enfermedad vivo, aletargado (es decir, disminuido
en su capacidad de desencadenar la enfermedad), muerto o fracciones (trozos) del agente
productor de la enfermedad.

La palabra vacuna, luego derivada a vacunacin, fue propuesta por el propio Pasteur como
recuerdo de haberse realizado las primeras investigaciones en vacas enfermas de viruela.

Vacunas muertas o inactivadas. Este tipo de vacunas ha sido ampliamente desarrollado,

dando pie a muy diferentes estrategias. As, pueden contener microorganismosenteros,
toxinas modificadas o partculas moleculares. En general provocan una inmunidad menos
intensa y duradera que las vacunas con organismos vivos, necesitando con frecuencia
aadir un adyuvante y administrar varias dosis de primoinfeccin y luego recuerdos
repetidos. La principal ventaja radica en su seguridad y no presentan riesgo de contagio
a convivientes, ni toda la problemtica que conlleva la circulacin de los virus atenuados.

Las vacunas con toxinas inactivadas, ttanos y difteria, son quizs las que conllevan la
metodologa menos sofisticada de todas y, por el contrario, es posible que sean de las ms
eficaces. Adems se pueden utilizar como carriers (portadores) de componentes menos
inmungenos. Por cierto, en estos sistemas debe tenerse muy presente que aunque ocurra
una respuesta colateral frente al toxoide tetnico nunca es suficiente y no disculpa de usar
las pertinentes vacunaciones antitetnicas.

Intervencin de las vacunas sobre el sistema inmunitario. Las vacunas, adems de su

accin especfica, es posible que ejerzan una intervencin global sobre el sistema
inmunitario, concretamente se piensa que puedan modificar el equilibrio funcional de los
linfocitos CD4 o Th (ver ms adelante). Esta accin puede depender de la naturaleza del
componente especfico vacunal, de su dosis, va de administracin o, en algunos casos,
ms intensamente de los adyuvantes.

Parece comprobado que los toxoides, tetnico o diftrico, la vacuna antipertussis acelular
y especialmente los adyuvantes de aluminio exacerban las respuestas de tipo Th2,
tericamente favorecedoras de enfermedades como el lupus o la atopia. Por el contrario,
la BCG, la tos ferina de clulas enteras, los adyuvantes derivados de bacterias o las
saponinas, incrementan una respuesta Th1, tericamente favorecedora de enfermedades
como la diabetes o la artritis reumatoide. A pesar de los temores, no se ha podido probar
que las vacunas modifiquen el equilibrio inmunitario hasta el punto de favorecer otras
enfermedades. Por el contrario, pudiera facilitar la maduracin de la respuesta inmune
(Figura 1).

Figura 1. Las vacunas, adems de ocasionar una respuesta especfica, es posible que
tengan algn tipo de influencia global sobre el sistema inmunitario.

Se sabe que algunas vacunas, como la de BCG, sarampin, pertussis de clula entera, y
coadyuvantes derivados de productos bacterianos, son estimulantes de una respuesta de
tipo Th1 que promueve inmunidad celular retardada y citotoxicidad.

Por el contrario, las vacunas de toxoides, la pertussis acelular y especialmente adyuvantes

conteniendo aluminio son intensos estimulantes de sntesis de anticuerpo mediada por
linfocitos Th2. Se ha especulado tericamente sobre la posible repercusin de las vacunas
sobre la patogenia de enfermedades de base inmunitaria, pero sin ninguna prueba hasta el
momento, o incluso con datos contrarios a los esperados.
II. OBJETIVOS:

1. Realizar los pasos generales de la preparacin de una vacuna a germen muerto de

un cultivo de Staphylococus aureus.

III. PROCEDIMIENTO:

- Se asla el antgeno (estaphylococus aureus) , luego se incuba por 24 horas a 37

C, luego con solucin salina fisiolgica y con solucin fenolada (10ml) al 0.5%,
dejar actuar de 10 a 15 minutos, mover lento para formar una solucin homogna
y luego tamizarlo.

Staphilococus aerus Solucin salina fenolada

Control de esterilidad:
- Sembrar en medios enriquecidos (Tioglicolato, agar sangre), para ver si el germen
est vivo (Por 5,6 7 das).

Realizar la siembra de S. aerus Caldo tioglicolato Agar sangre

 Estandarizacin de la vacuna: Saber cuntas clulas bacterianas estn en cada
ml. cantidad de bacterias muertas.

IV. CONCLUSIONES:

1. Se realiz los pasos generales de la preparacin de una vacuna a germen muerto de

un cultivo de Staphylococus aureus.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFCAS:

1. Rojas,w: Inmuloga. 12ed. ED.Corporacin para investigaciones biolgicas.

Colombia. 2001. pp: 450.
2. Comit Asesor de Vacunas. Manual de Vacunas en Pediatra. 2 ed. AEP Madrid
2002.
3. Guerin N, Ajan N. Vaccinations. Encyclop Med Chir, Pediatrie 1995; 4-002-B-
50.
4. Picazo JJ. Gua prctica de vacunaciones. Centro de Estudios de Ciencias de la
Salud. Madrid 2002.