Biosíntesis de porfirinas (Hemo)

Síntesis de ác. δ-amino levulínico

a) En mamíferos. b) en plantas, algas y algunas bacterias

Regulación: Inhibición por hemo libre.

 8 moléculas de δ-amino levulinato generan el grupo hemo en una serie de reacciones
mitocondriales y citosólicas

(1), (6) y (7) en mitocondrias; (2) a (5) en citosol.

hidroximetilbilano
La reacción de decarboxilación está acoplada al transporte a mitocondria
Porfirias: deficiencias
genéticas en la síntesis
de hemo
Catabolismo del hemo
Degradación de la hemoglobina: esquema general
Reacción de la hemooxigenasa
Características de la hemooxigenasa

- - Dos isoenzimas: HO-1 (inducible por hemo) y HO-2

(constitutiva)
- - Etapa
Et limitante
li it t en la
l formación
f ió de
d bilirrubina
bili bi
- - Unica fuente endógena conocida de CO
- - El CO (como el NO) participa en la reacción
inflamatoria mediada por cGMP
- - Donor de electrones: NADPH citocromo P450 reductasa
- - Inhibida competitivamente por Sn
Sn-Hemo
Hemo
La biliverdina es fácilmente excretada por el hígado, y es
el producto final en aves, anfibios y muchos peces. En la
mayoría de los mamíferos, en cambio es convertida a
bilirrubina.

Características de la biliverdina reductasa:

- Requiere NADPH o NADH
- Tres isoformas descriptas de 70 kDa
- Amplia especificidad de sustrato
Reacción catalizada por la biliverdina reductasa
Puentes de hidrógeno intramoleculares y fotoisomerización de
bilirrubina

La fotoisomerización rompe los puentes de H intramoleculares e

incrementa la solubilidad
Conjugación de bilirrubina con glucuronato
ABC-transporters are responsible for primary bile formation

Anionic Bile salts

conjugates Mrp2 Mdr1a
Bsep

Md 2
Mdr2
GSH Cholesterol?
Mdr1b

Abca1

M 2000
Abca2?
PC

©MM
Abca3
Abcc6
Abcg2

Sem.Liver Dis. 2000; 20:323-337.

 Mecanismos bioquímicos de la toxicidad de bilirrubina

Cuando la concentración de bilirrubina supera la capacidad de

ligado de la albúmina (25-30 mg/dl) se acumula en las células
donde:
-Inhibe síntesis de RNA y proteínas (DNA en ciertas células)
-Inhibe
hib metabolismo
b li de
d glúcidos
lú id y desacopla
d l la
l fosforilación
f f il ió
oxidativa en cerebro
- Inhibe
I hib enzimas
i hidrolíticas,
hid líti deshidrogenasas,
d hid enzimas
i
involucradas en el transporte de electrones y cinasas como PKC y
PKA.
Altos niveles de bilirrubina no conjugada en infantes producen
encefalopatías (quernictero)
Desórdenes no hemolíticos en el metabolismo de bilirrubina

Hiperbilirrubinemia no-conjugada
Neonatal: Por inmadurez hepática, es común un incremento hasta 5-6 mg/dl / que decrece en
unos 10 días.
Sindrome de Crigler-Najjar tipo I: Deficiencia total de UDP-glucuronil transferasa.
Generalmente mueren en el período postnatal por quernictero o lo desarrollan en la infancia.
T d lla bili
Toda bilirrubina
bi (20
(20-50
0 mg/dl)
/dl) es no conjugada
j d y no presentan bili
bilirrubinuria.
bi i
Sindrome de Crigler-Najjar tipo II y Síndrome de Gilbert: Deficiencias parciales en UDP-
glucuronil transferasa (de curso más benigno). La enzima puede ser inducida con fenobarbital
que se usa en el tratamiento de estos casos.

Hiperbilirrubinemia conjugada
Síindromes de Dubin-Johnson y Rotor: Ictericias crónicas de curso benigno. Deficiencias en la
excreción de aniones orgánicos. El primero se debe a mutaciones en MR2.
I t i i obstructivas:
Ictericias b t ti R d
Reducción
ió ddell flflujo
j bili
biliar iintra-
t o extrahepático
t h áti ((colestasis)
l t i ) por
tumores abdominales, cálculos biliares (los pigmentarios son originados por la bilirrubina no
conjugada), hepatitis, cirrosis y otras. Ya que la bilirrubina sérica es mayormente la conjugada
(que es soluble en agua), filtra por riñon y hay hemoglobinuria. Acompañadas por deficiencia
en vitaminas
it i liliposolubles
l bl a menudod manifestadas
if t d como hi hipoprotrombinemia
t bi i ((por ffalta
lt dde
vitamina K) y osteomalacia (por falta de vitamina D). Si el bloqueo es total, no hay urobilina ni
estercobilina.

IIctericias
t i i por hemólisis
h óli i incrementada:
i t d
Hemólisis isoinmune neonatal (eritroblastosis fetalis)
Anemias hemolíticas
Determinación de bilirrubina en líquidos biológicos

La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado generando un pigmento que se mide por su absorción a 530
nm.
La bilirrubina conjugada (o directa) reacciona directamente con el diazoreactivo.
En cambio, la bilirrubina no conjugada (indirecta) reacciona sólo en presencia de un “desarrollador” o “activador” que la libere de la
albúmina (y rompa los puentes de hidrógeno intermoleculares). Metanol, etanol o benzoato de cafeína son usados con este propósito.

Niveles de bilirrubina en condiciones normales y algunas patologías

Valores de bilirrubina en mg/dl de suero

___________________________________________________________
Condición
di i Totall No-conjugada
j d ( indirecta)
i di ) Conjugada
j d (directa)
(di )

Neonatal
1 día 0,2-0,9
3 días 0-6
7 días 0 3 11
0,3-11
Normal (adulto) 0,1-1 0,2-0,7 0,1-0,3
Desórdenes hemolíticos (adultos) 2,2-3,4 2-3 0,2-0,4
Síndrome de Gilbert 1,2-3 (<5) 1,1-2,7 (<5) normal
Síndrome de Crigler-Najjar tipo I 15-48 15-48 despreciable
Síndrome de Crigler-Najjar
g jj tipo
p II 6-22 ((40)) 6-22 ((40)) trazas
Síndrome de Dubin-Johnson 2,5-20 <50% del total >50% del total
Colestasis severa 10 1 9
Cirrosis severa 11 5 6
Hepatitis aguda-severa 10 1,5 8,5
Proteínas plasmáticas específicas participan en la retención del hierro en la
hemólisis intravascular:

La transferrina fija el hierro libre permitiendo su reutilización

La hemopexina (β -globulina de 57 kDa) fija un residuo de hemo por molécula y lo

transfiere al hígado para su catabolismo por hemooxigenasa. En hemólisis intensas, la
hemopexina se satura y el hemo puede unirse a albúmina.

La hemoglobina libre oxigenada se disocia en dímeros α,β, los que se unen con gran
afinidad a una familia de α2-glubulinas (las haptoglobinas) que los transportan a las
células reticuloendoteliales (el complejo completo es captado)
Los niveles de haptoglobina se utilizan como índice del grado de hemólisis intravascular.

Proteínas involucradas en el transporte y almacenamiento de hierro:

Transferrina: transporte de hierro en suero
Receptor de transferrina: participa en la captación celular del hierro
Ferritina: encargada del almacenamiento intracelular del hierro
Lactoferrina: une al hierro en la leche