Captulo IV.

Toxicologa ambiental
Qumica Ambiental

Enero 2013
Toxicologa ambiental

Es un campo de estudio inter-disciplinario que

examina los mecanismos biolgicos y qumicos
mediante el cual los xenobiticos interactuan con la
biosfera (incluyendo a los humanos).

Xenobitico es una substancia que es extraa al ambiente,

generalmente una sustancia txica. Tambin se refiere a sustancias
que estn presentes en concentraciones por arriba de lo normal.
Toxicologa ambiental
Principales grupos

Carcingenos:

Capaces de generar crecimiento celular sin control (cancer), ya sea por

ellos mismos o en combinacin con otras substancias.

Mutagnicos:

Capaces de inducir cambios genticos (e.g. mutaciones)

Teratognicos:

Capaces de generar malformaciones en el feto en desarrollo

Carcingenos

Evaluados en base a pruebas de campo (en seres humanos y animales).

Generalmente clasificados de acuerdo a su potencial carcinognico (dada la

cantidad de datos limitados)
Formaldehdo (Clase B1)

Clasificado por la EPA de los Estados

Unidos como probablemente
cancergeno (Clase B1) para el ser
humano bajo condiciones de elevada
concentracin o prolongada exposicin.

An a bajas concentraciones (aprox. 0.1

ppm) y en cortos tiempos de exposicin
puede originar irritacin en el tracto
respiratorio.
Rutas de exposicin y mecanismos de accin

Los xenobiticos pueden ser absorbidos por

el ser humano en funcin de:

La ruta de exposicin.

La concentracin de la sustancia.

Las propiedades fsicas y qumicas de la

sustancia.
Rutas de exposicin a contaminantes

Dermal - Ingestin - Inhalacin - Inyeccin

Factores influyendo la toxicidad

La toxicidad de un sustancia !
depender de:

Metabolismo

La forma y la actividad qumica

intrnseca

Distribucin en el cuerpo y
rganos directamente afectados

La relacin dosis-respuesta

Excrecin

La ruta de exposicin

Presencia de otros qumicos

La capacidad de ser absorbido

por el cuerpo

Edad, sexo y grupo tnico

!
Efectos txicos

La toxicidad de un compuesto
puede resultar en:

cambios celulares, bioqumicos

o macromoleculares
Un compuesto txico puede afectar un
rgano especfico o varios sitios del cuerpo
(toxicidad sistmica)
alteraciones al ADN

afectacin de un sistema
enzimtico

alteraciones en la sntesis de
proteinas.
Toxicidad sistmica

Incluye:

Toxicidad aguda

Toxicidad subcrnica

Toxicidad crnica

Toxicidad del desarrollo

Toxicidad gentica
Efectos de
contaminantes

Muy difcil de evaluar el

impacto de los contaminantes
en la poblacin humana.

Persistencia

Bioacumulacin

Biotransformacin

Biodegradacin
Persistencia

Una caracterstica de ciertos compuestos qumicos que son extremadamente

estables en el medio, y pueden tomar aos en descomponerse en
compuestos ms simples mediados por procesos naturales (ej. qumicos,
biolgicos, fotolticos).

Generalmente representados por compuestos sintticos (no encontrados en

la naturaleza) por ejemplo el DDT, as como otros Contaminantes Orgnicos
Persistentes (POPs).

Su inexistencia en el medio contribuye a que las bacterias existentes no

hayan desarrollado la habilidad de poder descomponerlo.
pops.qxd 2/6/02 3:43 PM Page 16
The Dirty Dozen
POP Global Historical Use/Source
aldrin and dieldrin Insecticides used on crops such as
corn and cotton; also used for termite
control.
chlordane Insecticide used on crops, including
vegetables, small grains, potatoes,
sugarcane, sugar beets, fruits, nuts,
citrus, and cotton. Used on home
lawn and garden pests. Also used
extensively to control termites.
DDT Insecticide used on agricultural crops,
primarily cotton, and insects that carry
diseases such as malaria and typhus.
endrin Insecticide used on crops such as
cotton and grains; also used to control
rodents.
mirex Insecticide used to combat fire ants,
termites, and mealybugs.
Also used as a fire retardant in plastics,
rubber, and electrical products.
16
Overview of U.S. Status
Under FIFRA:
No U.S. registrations; most uses canceled in
1969; all uses by 1987.
All tolerances on food crops revoked in 1986.
No production, import, or export.
Priority toxic pollutants (CWA).
Under FIFRA:
No U.S. registrations; most uses canceled in
1978; all uses by 1988.
All tolerances on food crops revoked in 1986.
No production (stopped in 1997), import, or
export.
Regulated as a hazardous air pollutant (CAA).
Priority toxic pollutant (CWA).
Under FIFRA:
No U.S. registrations; most uses canceled in
1972; all uses by 1989.
Tolerances on food crops revoked in 1986.
No U.S. production, import, or export.
DDE (a metabolite of DDT) regulated as a haz-
ardous air pollutant (CAA).
Priority toxic pollutant (CWA).
Under FIFRA, no U.S. registrations; most uses
canceled in 1979; all uses by 1984.
No production, import, or export.
Priority toxic pollutant (CWA).
Under FIFRA, no U.S. registrations; all uses can-
celed in 1977.
No production, import, or export.
POP Global Historical Use/Source
heptachlor Insecticide used primarily against soil
insects and termites. Also used against
some crop pests and to combat malaria.
hexachlorobenzene Fungicide used for seed treatment.
Also an industrial chemical used to make
fireworks, ammunition, synthetic rubber,
and other substances.
Also unintentionally produced during
combustion and the manufacture of
certain chemicals.
Also an impurity in certain pesticides.
PCBs Used for a variety of industrial processes
and purposes, including in electrical
transformers and capacitors, as heat
exchange fluids, as paint additives, in
carbonless copy paper, and in plastics.
Also unintentionally produced during
combustion.
toxaphene Insecticide used to control pests on
crops and livestock, and to kill unwanted
fish in lakes.
dioxins and furans Unintentionally produced during most
forms of combustion, including burning
of municipal and medical wastes, back-
yard burning of trash, and industrial
processes.
Also can be found as trace contaminants
in certain herbicides, wood preservatives,
and in PCB mixtures.
Overview of U.S. Status
Under FIFRA:
Most uses canceled by 1978; registrant voluntarily
canceled use to control fire ants in underground
cable boxes in early 2000.
All pesticide tolerances on food crops revoked
in 1989.
No production, import, or export.
Regulated as a hazardous air pollutant (CAA).
Priority toxic pollutant (CWA).
Under FIFRA, no U.S. registrations; all uses canceled
by 1985.
No production, import, or export as a pesticide.
Manufacture and use for chemical intermediate (as
allowed under the Convention).
Regulated as a hazardous air pollutant (CAA).
Priority toxic pollutant (CWA).
Manufacture and new use prohibited in 1978 (TSCA).
Regulated as a hazardous air pollutant (CAA).
Priority toxic pollutant (CWA).
Under FIFRA: Acronyms:
No U.S. registrations; most uses canceled in 1982;
all uses by 1990. FIFRA:
Federal Insecticide,
All tolerances on food crops revoked in 1993.
Fungicide and
No production, import, or export. Rodenticide Act
Regulated as a hazardous air pollutant (CAA).
TSCA:
Priority toxic pollutant (CWA). Toxic Substances
Control Act
Regulated as hazardous air pollutants (CAA).
CAA:
Dioxin in the form of 2,3,7,8-TCDD is a priority Clean Air Act
toxic pollutant (CWA).
CWA:
Clean Water Act
Bioacumulacin

La bioacumulacin es el incremento de la concentracin de un qumico en el

tejido en comparacin al medio, predominantemente ocurriendo con
materiales que son ms solubles en lpidos que en agua (i.e. lipoflicos)
Biotransformacin

En algunas ocasiones los compuestos txicos (al igual que otros

compuestos) pueden ser transformados por rutas metablicas en otros
compuestos, reduciendo o alterando as su toxicidad en el cuerpo del
individuo.
Biodegradacin

La biodegradacin es el proceso mediante el cual un xenobiotico es

descompuesto a formas ms simples.

Por ejemplo, la biodegradacin de compuestos orgnicos en los seres vivos

resulta en la liberacin de agua y dixido de carbono a la atmsfera.

Este proceso de biodegradacin es hoy en da empleado en los mtodos

biotecnolgicos de remediacin ambiental.
Ensayos de toxicidad
Ensayos de toxicidad

Importante recordar que toxicidad es la propiedad o propiedades de un

material que genera efectos nocivos en un sistema biolgico

Un txico es el material que produce este efecto biolgico

La curva dosis-respuesta

Es claro que el efecto nocivo del txico ser funcin de la dosis a la que el
individuo (o sistema) sea expuesto

Las mayora de compuestos txicos han sido sintetizados por el hombre, sin
embargo existen tambin compuestos txicos que ocurren en el medio de
forma natural (ej. compuestos generados por hongos y algas)

En trminos ambientales, los ensayos buscan determinar la respuesta del

sistema biolgico a diferentes dosis del contaminante.

Por lo tanto, el grfico que describe la respuesta de una enzima, organismo,

poblacin o comunidad biolgica a un rango de concentraciones de un
xenobiotico es lo que se conoce como la curva dosis-respuesta.
La curva dosis-respuesta
An Introduction to Toxicity Testing 33

Table 3.1
Toxicity Data for Compound 1
Dose
0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0

Compound 1
Cumulative toxicity 0.0 2.0 7.0 23.0 78.0 92.0 97.0 100.0 100.0
Percent additional 0.0 2.0 5.0 15.0 55.0 15.0 5.0 3.0 0.0
deaths at each
concentration
Note: All of the toxicity data are given as a percentage of the total organisms at a particular
treatment group. For example, if 7 out of 100 organisms died or expressed other end-
points at a concentration of 2 mg/kg, then the percentage responding would be 7%.

Plot of Toxicity Data Compound 1

100
 deaths at each
concentration
Note: All of the toxicity data are given as a percentage of the total organisms at a particular
treatment group. For example, if 7 out of 100 organisms died or expressed other end-
points at a concentration of 2 mg/kg, then the percentage responding would be 7%.

La curva dosis-respuesta
Plot of Toxicity Data Compound 1

100

80
Total Percent Dead at Each Dose

60

40

20

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.1
Plot of cumulative mortality vs. environmental concentration or dose. The data are plotted as
cumulative number of dead by each dose using the data presented in Table 3.1. The X-axis is in
units of weight to volume (concentration) or weight of toxicant per unit weight of animal (dose).
La curva dosis-respuesta

A partir de la mencionada curva, es posible determinar los siguientes

parmetros:

LD50: La dosis que causa la mortalidad del 50% de los organismos

evaluados, estimado por medios grficos o computacionales

!
LC50: La concentracin que causa la mortalidad del 50% de los
organismos evaluados, estimado por medios grficos o computacionales
La curva dosis-respuesta

A partir de la mencionada curva, es posible determinar los siguientes

parmetros:

EC50: La concentracin que tiene un efecto en el 50% de los organismos

evaluados, estimado por medios grficos o computacionales.
Generalmente empleado para efectos que no son letales.

!
IC50: Concentracin inhibitoria que reduce la respuesta normal de un
organismo en un 50%, estimado por medios grficos o computacionales
(ej. el crecimiento de algas, bacterias)
 Plot of Toxicity Data Compound 1

100

80

Percent Mortality

60

LD50

40

LD20
20

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.3
The sigmoid dose-response curve. Converted from the discontinuous bar graph of Figure 3.2 to
 Comparison of Dose-Response Curves-1

100

80
Percent Mortality

60
Compound 1
Compound 2

40

20

0
0 2 4 6 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.4
Comparison of dose-response curves-1. One of the primary goals of toxicity testing is the com-
An Introduction to Toxicity Testing 37

Comparison of Dose-Response Curves-2

100

80
Percent Mortality

60
LD50 Compound 1
Compound 3

40

LD20
20

0
0 2 4 6 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.5
 Comparison of Dose-Response Curves-3

100

80
Percent Mortality

60
Compound 1
Compound 3

40

20

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.6
An Introduction to Toxicity Testing 39

Comparison of Dose-Response Curves-4

100

80

60
Percent Mortality

Compound 1
LD50
Compound 3

40

LD20
20

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Dose (Concentration) Weight/Weight

Figure 3.7
Comparison of dose-response curves-4. Although the midpoints of the curves for compounds 1
La curva dosis-respuesta

Entre otros parmetros de pueden ser generados estn:

NOEL: Nivel de efectos no observados, determinado por mtodos

estadsticos de prueba de hiptesis.

!
NOAEC: Concentracin de efectos adversos no observados, determinado
por mtodos estadsticos de prueba de hiptesis. El efecto es
generalmente escogido por su potencial impacto en la especie evaluada.
Algunas especies empleadas
El uso de mtodos estndares

A fin de lograr un consenso en torno a la toxicidad de algunos compuestos,

durante los ltimos aos varios mtodos estandarizados han sido propuestos
(ej. ASTM)

Entre sus ventajas:

Los resultados son uniformes y comparables

Permite la replicacin en otros laboratorios

Provee criterios de idoneidad de los resultados para la toma de

decisiones

El uso de mtodos estndares

La logstica se simplifica, con poco o nada de trabajo de desarrollo

Los datos obtenidos pueden ser combinados con los de otros laboratorios
cuando se requiere un anlisis de grandes bases de datos.

Recomendaciones de los peligros y medidas de seguridad son

enunciadas.

Criterios de aceptabilidad son provistos a fin de juzgar la confiabilidad del

ensayo realizado.

Generalmente se proveen varios mtodos para determinar el EC50, LC50,

etc.
Clasificacin de las pruebas
An Introduction to Toxicity Testing
de toxicidad 43

Multispecies
Field Studies
Aquatic Toxicity Study

Mesocosms

Microcosms

Chronic Single Species

Acute

Pre-reproductive Reproduction Interspecific Community level Ecosystem Successional

interactions interactions w/ interactions states
abiotic factors

Proportion of Life Span and System Complexity

Figure 3.9
Classification of toxicity tests in environmental toxicology. Generally the two parameters that are
Parmetros de diseo para pruebas de toxicidad:
experimentos de una sola especie

Escenarios de exposicin:

En el caso de ensayos en organismos acuticos, stos son expuestos a

travs de todo su cuerpo (ingestin, contacto, respiracin, etc.).

En el caso de organismos terrestres una exposicin completa es menos

frecuente, recurriendo a la ingesta, inhalacin, o inyeccin del txico.

En los ensayos es algo que debe ser considerado con cuidado pues otras
rutas de exposicin diferentes a las deseadas podran estar ocurriendo (ej.
deposicin de partculas en la piel)
Parmetros de diseo para pruebas de toxicidad:
experimentos de una sola especie

Organismos para ensayo:

Algunos criterios generales para la seleccin del organismos ms adecuado

para el ensayo pueden ser provistos:

Los organismos para el ensayo deben tener amplia disponibilidad a travs

del cultivo en laboratorio, extraccin de un criadero u otra facilidad de
cultivo, o su recoleccin en el campo

Los organismos deben ser mantenidos exitosamente en condiciones de

laboratorio y estar disponibles en cantidades suficientes

La gentica, la composicin gentica y la historia del cultivo debe ser

conocida.
Parmetros de diseo para pruebas de toxicidad:
experimentos de una sola especie

La sensibilidad relativa de la especie del ensayo a varios tipos de txicos

debe ser conocida, a fin de considerar las concentraciones a ser
evaluadas.

La sensibilidad de la especie debe ser representativa de una clase o filum

en particular que esa especie represente.
Parmetros de diseo para pruebas de toxicidad:
experimentos de una sola especie

Comparacin de los organismos de ensayo:

Diferentes organismos pueden responder de diferentes maneras al ser

expuestos a un determinado txico.

No existe el organismo de prueba ideal para este tipo de ensayos, sino

deber responder a los objetivos del estudio.

An organismos diferentes entre s pueden llegar a presentar una misma

respuesta, pudiendo ser por tanto igualmente sensibles al txico.
Parmetros de diseo para pruebas de toxicidad:
experimentos de una sola especie

Parmetros de diseo estadstico. Siempre es necesario mantener un

compromiso entre el poder estadstico del ensayo y las consideraciones
prcticas del personal y la logstica. Se debe considerar:

Cual es la pregunta especfica a responder?

Cuales son los mtodos estadsticos disponibles?

Que poder estadstico es necesario para responder la pregunta

especfica?

Cuales son las restricciones logsticas del ensayo en particular?

Algunos ejemplos de pruebas de toxicidad
Toxicidad aguda: Daphnia 48h
Toxicidad en el crecimiento: Algas 96h
Otras pruebas de toxicidad aguda con vertebrados
acuticos y macroinvertebrados
Pruebas de toxicidad

Las pruebas de toxicidad conllevan Los resultados sern analizados

el uso de un conjunto de sujetos haciendo uso de mtodos
experimentales que sern estadsticos.
sometidos al contaminante en
estudio a travs de una va de
ingreso a los individuos (eg. oral,
drmica)

Los resultados obtenidos sern

confrontados contra un grupo de
control.

Pruebas de toxicidad

La base de las pruebas de

toxicidad es la relacin dosis-
respuesta.

La variable respuesta generalmente

empleada es la muerte del sujeto
en estudio.

Permiten la obtencin del LC50 y el

LD50.
LD50

Corresponde a la dosis letal media.

Dosis estimada que logra matar al

50% de los individuos del
experimento va oral o dermal.

Reportada como concentracin del

contaminante por peso del animal
en estudio.
LC50

Concentracin letal en el 50% de la

poblacin.

Utilizada generalmente para evaluar

toxicidad de compuestos que
ingresan por inhalacin.

Importante indicar que ambos

valores no evalan los efectos
colaterales (no letales) del
contaminante.