Batch alimentado

Discontinuo alimentado (fed-

(fed-batch).

F, SR

X
VX
VF S0
V0 VP
 Cuando se utiliza?
* Cuando se usan sustratos que an a bajas concentraciones
inhiben el crecimiento, ej: etanol, metanol, cido actico,
etc.

Etanol Actico

Exceso de etanol produce inhibicin del crecimiento

y de la produccin.
 Cuando se utiliza?
* Cuando se emplean mutantes auxtrofas en las que el
requerimiento nutricional, si es abundante provoca excesivo
crecimiento sin acumulacin del metabolito deseado

H I J
A B C D
E F G

Si se agrega en el medio altas concentraciones de G crece

como cepa salvaje

Si se agrega en forma limitada G es posible

sobreproducir J
 Cuando se utiliza?

* Para la obtencin de cultivos de alta densidad

(~100 g/l).

Qp = qP X

Si el qP esta optimizado

Incrementar la concentracin de biomasa

 Cuando se utiliza?

* Cuando se emplean fuentes de carbono

causantes de represin catablica o inducen una
cambio no deseado del metabolismo celular.

* Para controlar la viscosidad de caldos en los que

el producto modifica las caractersticas reolgicas.
 Clasificacin segn la alimentacin

* alimentacin constante, flujo (F) y

concentracin de sustrato limitante constantes
(Sr).
* alimentacin lineal, flujo o concentracin de
sustratos variables.

* alimentacin exponencial, flujo exponencial y

concentracin de sustrato constante.

* arbitraria.
 Clasificacin de acuerdo al control
de alimentacin

* procesos sin control feed-back en los que la

velocidad de flujo es programada segn un esquema
prefijado.

* procesos con control feed-back en donde la

velocidad de flujo se interactiva con algn
parmetro, pudiendo ser directo ( medida de algn
sustrato o producto) o indirecto ( oxgeno, pH,
cociente respiratorio).
 Discontinuo alimentado (fed-batch).
d(XV)
= X V F1
dt

d(sV) = F SR - X V F2
dt Yxs

d(pV)
= X V YPX F3
dt

Si en F2 reemplazamos V X queda

d(sV) = F SR - d(XV) 1 F4
dt dt YXS
En un sistema de cultivo en batch alimentado deseamos que la
velocidad de crecimiento este regulada por la alimentacin por lo que
s ~ 0 y por lo tanto
d(SV)/dt = 0 o sea que el sustrato es completamente consumido
apenas ingresa en el bioreactor. Entonces considerando un flujo
constante y concentracin de sustrato limitante constante tenemos:

d(XV) = F SR YXS F5
dt
E integrando da

X V = Xo Vo + ( F SR YXS ) t F6

la variacin de volumen con el tiempo es igual a:

V = Vo + F t F7
 si combinamos las ecuaciones (F5) y (F1) resulta:
d(XV)
= F SR YXS
dt

F SR = X V
F8
d(XV)
Yxs = X V
dt

en realidad se puede utilizar cualquier valor de flujo que

sea menor a max.

F SR X V
Yxs F9
 Alimentacin constante

como varia con el tiempo

1 d(XV) F10
=
X V dt
reemplazando en (F10) las ecuaciones (F5) y (F6),

F SR Yxs
= F11
Xo Vo + ( F SR YXS ) t

usando las ecuaciones (F7) y (F6) se llega a saber la

concentracin de biomasa en cada momento,

Xo Vo + ( F SR YXS ) t F12
X=
Vo + F t
 Alimentacin constante

14,0 0,25
biomasa X(g/l), XV (g)

12,0
0,2
10,0

8,0 0,15

, h-1
6,0
0,1

4,0
0,05
2,0

0,0 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16

tiempo, hs

X XV m
Proceso de batch-alimentado a flujo constante. Produccin de
nucletidos por Kluvyveromyces marxianus a partir de suero de
leche.
 Cmo hacer los clculos para un experimento?

por la ecuacin general de rendimiento sabemos que:

(Xf Vf) - (Xo Vo)

YXS =
(SR- sres ) (Vf - Vo) (F13)

donde
SR = concentracin de sustrato en el reservorio de alimentacin
Sres = concentracin de sustrato en el fermentador 0

Ejemplo:
Yx/s = 0.5 g/g; ; X0 =3.125 g/l ; V0 =0.5 l ; Vf = 1 l ; Xf = 20
g/l ; = 0.15 h-1, de la ecuacin (F13) despejamos SR,

SR = Xf Vf - Xo Vo
(F14)
YXS (Vf - Vo)
SR = 73.75 g/l
de la ecuacin (F9) despejamos F,

F = Xo Vo
(F15)
YXS SR

F= 6.35 ml/h
si el V es 500 ml a un F=6.36 ml/h
el proceso tardar 78.6 hs.
 Alimentacin exponencial
d(XV)
= X V (F16)
dt

d(sV) = F SR - X V (F17)
dt Yxs

Integrando F16

(F18)
X V = Xo Vo e t
 Si se reemplaza XV en (F8) queda:

F SR = Xo Vo e t
(F19)

YXS

Para una alimentacin exponencial la variacin de

biomasa y la alimentacin estn dadas por las
ecuaciones anteriores.
 Cmo hacer para realizar los clculos?
las variables a tener en cuenta son idnticas al ejemplo anterior, entonces:
Yx/s = 0.5 g/g; ; X0 =3.125 g/l ; V0 = 0.5 L ; Vf = 1 L ; Xf = 20 g/l ;
= 0.15 h-1 , SR = 67.5 g/l
siendo

F = Fo e t
(F20)
Fo = Xo Vo
(F21)
YXS SR
F0 =6.94 ml/h
Por la ecuacin (F3) es posible calcular el tiempo total del proceso

t = ln X V - ln Xo Vo (F23)

t = 17 hs.
 Ecuaciones considerando el coeficiente de
mantenimiento
Alimentacin constante
MAX X V
F SR + Xo Vo mS
Yxs

(X V) max = F * SR
mS

Alimentacin exponencial

m t
F SR = Xo Vo e m + mS
Y XS
 Cultivos de Alta Densidad (HCDC)

En los procesos de produccin de protenas

recombinantes las productividades obtenidas
dependen QP= qP * X. Como normalmente es qP
aproximadamente del orden de 0.05g protena/ g
de peso seco h-1, la nica forma de aumentar la QP
es un aumento en la biomasa dentro del
fermentador
Ventajas
reduccin del volumen del reactor,menores efuerzos en el
upsttream y downstream processing.

mayores productividades.

facilidades en la separacin celular incrementndolos rendimientos.

reduccin en los volmenes de agua de desecho.

menores costos en los equipos.

Inconvenientes que surgen

Limitacin de oxgeno, con la posible acumulacin de
productos como lactato, acetato, etc.
Perfil de un proceso de HCDC de E. coli expresando el factor de
crecimiento de fibroblastos humano
 Frmula General

F SR X V
Yxs
Alimentacin constante

F SR Yxs
=
Xo Vo + ( F SR YXS ) t

X V = Xo Vo + ( F SR YXS ) t

MAX X V
F SR + Xo Vo mS
Yxs
 Alimentacin exponencial
Alimentacin exponencial

F SR = Xo Vo e t

YXS

X V = Xo Vo e t

m t
F SR = Xo Vo e m + mS
Y XS