1.

INTRODUCCIN

En la actualidad se busca el aprovechamiento de los residuos agroindustriales como sustratos

en procesos biotecnolgicos para la produccin de productos de alto valor agregado es una
alternativa atractiva ya que estos materiales son abundantes, renovables y de bajo costo. La
bioconversin de estos materiales polimricos requiere un proceso que comprende dos
etapas: hidrlisis cida o enzimtica de los polmeros en monosacridos, seguido de la
bioconversin de los monmeros en un producto de inters industrial. El xilitol fue
originalmente producido para ser usado como edulcorante para personas diabticas. La
produccin qumica y microbiana de xilitol fue reportada por Lohman (1957), Onishi y Suzuki
(1966, 1969); respectivamente. Se ha reportado un mtodo cromatogrfico a escala industrial
para la separacin de diferentes azcares de residuos hemicelulsicos, el cual fue desarrollado
en Finlandia. Este mtodo ha permitido obtener D-xilosa de manera eficiente.

El bagazo de caa de azcar es un residuo lignocelulsico de la industria azucarera, con alto

contenido de xilano que puede ser convertida en xilosa, la cual puede ser utilizada para
obtener xilitol. Por hidrlisis cida la biomasa vegetal es tratada con una solucin cida y
sometida a altas temperaturas, generando un hidrolizado constituido por azcares como
pentosas, hexosas y compuestos txicos a la fermentacin como son los compuestos furnicos,
fenlicos y el cido actico. A escala industrial, el xilitol es convencionalmente producido por
procesos qumicos a travs de la hidrogenacin cataltica de la xilosa pura, obtenida de la
hidrlisis de materiales lignocelulsicos con altas concentraciones de xilano.

La va microbiolgica es una alternativa prometedora debido a que la bioconversin se

produce directamente en el hidrolizado. Adems de esto, el proceso opera con menores
temperaturas y presin, tornndose ms econmico. El proceso fermentativo presenta
limitaciones en cuanto a la productividad, debido principalmente a la presencia de compuestos
inhibidores del metabolismo microbiano en el hidrolizado hemicelulsico usado como
sustrato. Varios tratamientos fisicoqumicos han sido estudiados con el objetivo de minimizar
el efecto txico de estos a la fermentacin tanto por la transformacin de inhibidores en
compuestos inactivos como por la eliminacin de estos. Entre los mtodos ms utilizados, con
buenos resultados, se encuentra la adsorcin con carbn activado (Rodrguez et al., 2001). Un
mtodo novedoso que se est utilizando en la actualidad es el tratamiento de neutralizacin
y/o purificacin con resinas de intercambio inico que remueve eficientemente no solo el
color del hidrolizado, sino tambin compuestos fenlicos, cidos orgnicos e inorgnicos,
compuestos furnicos y metales, que son inhibidores del proceso fermentativo y no presenta
prdidas de xilosa. El objetivo del trabajo es conocer y analizar las materias primas de las
cuales se puede procesar para obtener xilitol.
2. FUNDAMENTO TERICO

2.1 XILITOL

El xilitol (E967) es un azcar natural, un alditol no fermentable utilizado

principalmente en la industria alimentaria como sustituto del azcar desde finales de
1960. El descubrimiento de xilitol, tambin llamado azcar de madera o azcar de
abedul, se atribuye al qumico alemn Emil Fisher (posteriormente premio Nobel de
Qumica) y a su alumno Rudolf Stahel, que a travs del uso de la hidracina, fueron los
primeros en aislar el compuesto, llamando a su invencin Xilitol. Casi al mismo
tiempo, en su investigacin sobre los derivados de la Xilosa, el qumico francs M.G.
Bertrand aisl un jarabe de xilitol con caractersticas similares.

El xilitol no slo se encuentra en la naturaleza en muchas frutas y verduras como la

coliflor, fresas, frambuesas y arndanos, sino tambin en el maz y el abedul, que es de
dnde generalmente se extrae por razones econmicas.

Tras largos estudios cientficos que han hecho muy famosas sus propiedades, el xilitol
se ha convertido en un producto no slo ampliamente utilizado en Escandinavia, sino
tambin en los EE.UU.

Estructura qumica del xilitol

2.1.1 PROPIEDADES Y BENEFICIOS

Debido a que no afecta a la produccin de insulina y afecta mnimamente

a la de la azcar en la sangre, el xilitol est indicado y es apto para
diabticos.
El xilitol se absorbe mucho ms lentamente y no promueve la
hiperglucemia, como ocurre con la sacarosa. Esta caracterstica tambin es
buena para las personas con sndrome metablico, un trastorno comn
que incluye la resistencia a la insulina, la hipertensin, la
hipercolesterolemia y un mayor riesgo de cogulos de sangre.
 Tiene la ventaja de que no provoca caries, porque a diferencia de la
sacarosa, el xilitol no es fermentado en cidos por las bacterias de la boca
y Previene la otitis (infeccin de odos) en nios pequeos.
El xilitol tiene casi el mismo poder edulcorante que la sacarosa, pero posee
un contenido calrico de 2.4 Kcal/g comparado con 4 Kcal/g de la
sacarosa.
En un estudio de 2002, se demostr que en el intestino, el xilitol se une al
calcio para facilitar su absorcin y esto ayuda a aumentar la densidad sea.
Por esta razn, en los Estados Unidos ya se utiliza como una terapia para
combatir la osteoporosis.
El xilitol permanece pasivo en el intestino delgado y al no existir un sistema
de transporte especfico, ste se absorbe lenta y parcialmente. Ms
adelante, es destruido mediante procesos de fermentacin de la flora
bacteriana.
En un informe reciente, se ha sugerido que el consumo de xilitol ayuda a
controlar la infeccin llamado Cndida, en comparacin con la glucosa,
galactosa y sacarosa, que pueden llegar a ser la causa.

2.1.2 USOS DEL XILITOL

El xilitol en la cocina es adecuado para ser utilizado en la preparacin de

postres sanos y en todas las preparaciones a base de azcar. Tambin es
un excelente sustituto del azcar para el caf, el t y las bebidas en la que
normalmente se usa siempre sacarosa. El xilitol es estable a altas
temperaturas y carameliza slo despus de un calentamiento de varios
minutos a temperatura de ebullicin.
El xilitol se utiliza como un sustituto del azcar en dulces tales como
helados, chocolate, caramelos, goma de mascar. Se encuentra en muchos
alimentos de consumo de diabticos como en caramelos para la garganta,
jarabes, suplementos, cremas dentales y enjuagues bucales.

2.2 PRODUCCION DE XILITOL

2.3 PRODUCCIN MICROBIANA DE XILITOL

La produccin microbiana de xilitol utilizando ingeniera metablica en S.cerevisiae ha

sido reportada por Bruinenberg et al. (1983), evaluando el efecto de diferentes
fuentes de carbono y nitrgeno sobre la produccin y consumo de NADPH en Candida
utilis. Ellos concluyeron que durante el metabolismo de la xilosa, la principal fuente de
NADPH es la va de las hexosa monofosfato y la enzima glucosa 6-P deshidrogenasa. En
aos anteriores, fue sugerido que el balance redox entre la xilosa reductasa
dependiente de NADPH y la xilitol deshidrogenasa dependiente de NAD era la principal
razn para la acumulacin del xilitol (Bruinenberg, 1986).Ktter et al. (1990)
construyeron una transformante de S. cerevisiae capaz de utilizar la xilosa. Un ao ms
tarde, Hallborn et al. (1991) reportaron un 95 % de rendimiento en la conversin de
xilosa a xilitol con la cepa transformada de S. cerevisiae. Ktter y Ciriacy (1993)
sugieren que la deficiencia de NADPH es el cuello de botella de la fermentacin de la
xilosa en el metabolismo de S. cerevisiae. Concluyeron que la va de las pentosas
fosfato en S. cerevisiae no puede regenerar suficiente cantidad de NADPH durante el
metabolismo de la xilosa bajo condiciones limitadas de oxgeno (Hallborn et al., 1994).
Desde entonces, el papel del NADPH en el metabolismo de las levaduras ha sido
intensamente estudiado. Han sido estudiadas diferentes estrategias para incrementar
la generacin de NADPH en S. cerevisiae. Los ltimos estudios (Gombert et al., 2001)
se han enfocado en el metabolismo y flujo de la va de las pentosas fosfato y
consecuentemente en la regeneracin del NADPH, la cual ha sido evaluada durante el
metabolismo de la glucosa con diferentes levaduras (Gombert et al., 2001). Durante el
metabolismo de la glucosa en S. cerevisiae, los requerimientos de NADPH son
abastecidos con un incremento del flujo hacia la va de las pentosas fosfato. Sin
embargo, durante el metabolismo de la xilosa no se abastecen los requerimientos de
NADPH.

Para resolver esta situacin se han desarrollado estrategias en la sobre expresin de la

enzima glucosa 6-P deshidrogenasa (Minard et al., 1998) o de la enzima D-
gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa dependiente de NADP (Verho et al., 2003).
Estudios recientes incluyen la remocin de la va de xido reduccin de la xilosa en
xilitol reemplazndola directamente por la isomerizacin de D-xilosa en D-xilulosa
(Kuyper et al., 2003). Con estos trabajos se elimina el cuello de botella en la generacin
de NADPH, permitiendo la captacin de xilosa independientemente de la presencia y
requerimiento de NADPH para la fermentacin a etanol. El otro paso susceptible al
bloqueo; es la captacin de D xilulosa dependiente de ATP, pero esto puede
solucionarse con la multi-expresin de las enzimas de la fase no oxidativa de la va de
las pentosas fosfato (Johansson & Hahn Hagerdal, 2002). Los principales objetivos de
la ingeniera en S. cerevisiae para la produccin industrial de xilitol, captacin de D-
xilosa y regeneracin de NADPH a travs de la va de las pentosas fosfato, son: mejorar
en forma definitiva la produccin de NADPH para las reacciones intracelulares
incrementando el flujo de la va de las pentosas fosfato. La nica forma de aumentar el
flujo de la va de las pentosas fosfato es incrementando la velocidad de crecimiento
durante el metabolismo de la glucosa (Gombert et al., 2001). Sin embargo, la D-xilosa
no es la fuente de carbono preferida por S. cerevisiae, ya que este sustrato no
proporciona la suficiente energa para el crecimiento y metabolismo (Sonderegger et
al., 2004). Se sabe que la D xilosa no induce ni incrementa la recirculacin del flujo de
carbonos a travs de la va de pentosas fosfato. Adems, en una ruta alternativa, la D-
xilulosa puede ser dirigida hacia la va de la pentosas fosfato gracias a la enzima
xilulocinasa o convertida a xilitol por la enzima xilitol deshidrogenasa. Esto puede abrir
nuevas posibilidades para considerarla en la produccin de bioetanol o xilitol
utilizando levaduras.
2.3.1 PRODUCCIN BIOTECNOLGICA DEL XILITOL

Existen varios mtodos para la produccin de xilitol. Puede extraerse de manera

directa de algunos frutos o por medio de la hidrogenacin de la xilosa. Dicha xilosa
puede obtenerse de materiales lignocelulsicos (los cuales deben pasar por un proceso
de hidrlisis previa). La hidrogenacin de la xilosa puede llevarse a cabo por medios
qumicos o biotecnolgicos. Los principales medios biotecnolgicos de hidrogenacin
son los enzimticos y microbiolgicos.

2.3.2 PRODUCCIN DE XILITOL USANDO CLULAS COMPLETAS

Se sabe que el xilitol es producido por bacterias, hongos filamentosos y levaduras. Sin
embargo, la mayor parte de las exploraciones que se han realizado se centran en
levaduras del gnero Candida. La razn de ello es debido a que pocos organismos son
capaces de utilizar la xilosa como fuente de carbono y, por otra parte acumular el
xilitol, evitando que se transforme en D-xilulosa. Las especies que han reportado
mayores productividades y rendimiento son Candida tropicalis, Pachysolen
tannophilus, Pichia stipitis, Candida guillermondii, Debaryomyces hansenii y Candida
parapsilopsis, fluctuando los rendimientos de xilitol respecto a la xilosa entre 0.73-0.88
% y las productividades entre 1.73 y 3.15 g l1 h1 (Gong et al., 1981). En 2002, Kim et
al., lograron incrementar la productividad de C. tropicalis en una mezcla de glucosa y
xilosa. Sreenivas et al. (2006) reportaron modificaciones a la cepa de C. tropicalis
utilizando rayos UV y una serie de mutaciones con N-metil, N-amino, nitrosoguanidina,
obteniendo rendimientos de hasta 0.88 respecto a la xilosa inicial. Lpez et al. (2004),
aislaron una cepa de C. tropicalis en silages de maz, obteniendo rendimientos de 0.91.
Se ha estudiado el metabolismo de la xilosa y del xilitol en Pachysolen tannophilus y se
han realizado modificaciones genticas, sin embargo la mayora ha sido para desviar el
metabolismo de la xilosa hacia etanol o para la comprensin del metabolismo de las
pentosas en las levaduras (Jeffries ,1984). D. hansenii es una levadura osmotolerante
que puede crecer en presencia de hexosas y pentosas, aunque su crecimiento en
presencia de pentosas es mucho ms lento y su rendimiento de xilitol es muy similar
en ambos casos (Nobre et al., 1999). Tambin se han estudiado sus sistemas de
transporte de hexosas y pentosas, encontrando que se trata de mecanismos de
difusin facilitada y siendo simportadores de protones (Nobre et al., 1999). D. hansenii
fue inmovilizada en alginato de calcio por Domnguez (1998) encontrando
productividades elevadas en biomasa, sin embargo las productividades de xilitol
disminuyeron. Sampaio et al. (2005) observaron el crecimiento de D. hansenii
representado en tres fases: una fase caracterizada por el aumento en la biomasa sin
produccin de xilitol, una de baja produccin de xilitol y una tercera de alta produccin
de xilitol con bajo crecimiento celular. Nobre et al., (2002), estudiaron los cambios en
el comportamiento de las enzimas involucradas en la produccin del xilitol en un
quimiostato. Al modificar la velocidad de dilucin, observaron que, a bajas velocidades
de crecimiento, la xilosa deshidrogenasa tiene mayor actividad que la xilosa reductasa,
sin embargo, al incrementarse la velocidad se da mayor actividad en la xilosa
reductasa, indicando un cambio metablico dirigido a satisfacer requerimientos
mayores de NADPH (Naobre et al., 2002). C. parapsilopsis ha sido probada para la
produccin de xilitol a partir de xilosa, mostrando que dicha produccin puede ser
incrementada controlando el potencial redox y la concentracin de glucosa y manosa .

2.4 PRODUCCIN DE XILITOL A PARTIR DE DIFERENTES MATERIAS PRIMAS

Las materias primas para la produccin biotecnolgica de xilitol suelen ser fuentes
ricas en xilosa, principalmente residuos lignocelulsicos. Para la produccin de
xilitol a partir de este tipo de residuos se requiere una etapa de hidrlisis para
liberar los xilanos contenidos en la hemicelulosa (tabla 1).
 Glucosa y xilosa para la produccin de xilitol

El xilitol se produce qumica o biolgicamente por reduccin de la D-xilosa, pero

este proceso es costoso debido a los altos costos del sustrato (D-xilosa). Una gran
variedad de polialcoholes se producen con buenos rendimientos por asimilacin
aerbica de varias pentosas y hexosas a partir de levaduras. En 1969 Onishi y
Suzuki, desarrollaron un mtodo microbiolgico que convierte la glucosa a xilitol
va D-arabitol y D-xilulosa, en el que se involucraron tres pasos secuenciales. De
acuerdo con sus estudios, si una levadura crece bien en D-xilulosa y produce xilitol
con buenos rendimientos, se esperara que el xilitol pudiera obtenerse
eficientemente a partir de la glucosa, a travs del siguiente proceso de
fermentacin secuencial (Onishi & Suzuki, 1969).

D-glucosa D-arabitol D-xilulosa xilitol

Sus resultados sugieren que el xilitol se puede producir a partir de glucosa con un
rendimiento aproximado del 15 al 20 %, con una aplicacin secuencial de tres procesos
de fermentacin, sin el aislamiento y purificacin de los productos intermediarios (D-
arabitol y D-xilulosa), lo que hara a esta tcnica comercialmente muy atractiva (Onishi
& Suzuki, 1969). D. hansenii ATCC 20212 se emple para el primer paso (D-glucosa
Darabitol). Se utiliz un medio modificado A, que contena 15 % de glucosa y 4 % de
licor de hidrolizado de maz concentrado. Cuando la glucosa se consumi casi por
completo y se produjo D-arabitol, se ajust el pH 6.0 del caldo de fermentacin con
NaOH, sin remover las clulas y se esteriliz a 120 C por 15 min. El medio fue luego
enriquecido con los nutrientes que favorecieran el crecimiento de Acetobacter
suboxydans, que oxid casi por completo el D-arabitol a Dxilulosa. Para la reduccin de
la D-xilulosa a xilitol, por C. guilliermondii var. soya (ATCC 20216), fue necesario
agregar una cantidad adicional del 4 % de licor de hidrolizado de maz concentrado al
caldo fermentado por A. suboxydans, para tener un mejor rendimiento. (Onishi &
Suzuki, 1969). Por otro lado, Hickman y Ashwell (1958) reportaron la presencia de un
sistema enzimtico en mitocondrias de hgado de cerdos de guinea capaces de reducir
de forma reversible tanto a la L- xilulosa como a la D-xilulosa hasta un intermediario
comn, el xilitol, proporcionando un mecanismo para la interconversin de los
estereoismeros de esta cetopentosa. Muestran la siguiente secuencia para la
conversin de L-xilulosa a glucosa: DPNH (Difosfonucletido reducido) DPN
(Difosfonucletido oxidado). Como puede observarse, la glucosa puede ser convertida
a D-xilulosa-5-fosfato; sin embargo, no es posible la conversin de Dxilulosa-5-fosfato a
D-xilulosa para la produccin de xilitol. De acuerdo con la Figura 1, la produccin de
xilitol no parece estar directamente asociada al metabolismo de la glucosa (Senac y
Hahn-Hagerdal, 1990). Aerobacter aerogenes PRL-R3 posee enzimas inducibles para el
catabolismo de la D-xilosa y del D-arabitol (Figura 2). La D-xilosa es el inductor de la
isomerasa y de la D-xilulocinasa para su propia conversin. El D-arabitol es el inductor
de la deshidrogenasa del D-arabitol y de una Dxilulocinasa separada (Wilson &
Mortlock, 1973) Senac y Hahn-Hagerdal (1990) compararon la fermentacin de glucosa
y
Fig. 1. Ruta de la asimilacin de pentosas y pentitoles en A. aerogenes (Tomado y
modificado de Mortlock et al., 1965).

xilulosa y la formacin de productos por S. cerevisiae en cultivo batch bajo condiciones

anaerbicas. En ambas fermentaciones se asimilaron cerca de 10 mM de xilosa y se
produjeron pentitoles, indicando la presencia de la enzima xilosa reductasa y
posiblemente tambin de la enzima xilitol deshidrogenasa.

Fig. 2. Rutas del metabolismo del D-arabitol, D-xilosa, xilitol y D-xilulosa por A.
aerogenes (Tomado y modificado de Wilson & Mortlock, 1973).
Las bajas velocidades de consumo de azcar y de produccin de etanol en clulas que
fermentaron xilulosa comparado con las clulas que fermentaron glucosa pudieron ser
causadas por un bloqueo en la ruta (pentose phosphate pathway) PPP, ya que hubo
una acumulacin de S7P en las clulas que fermentaron la xilulosa, lo cual no fue
observado en las clulas que fermentaron glucosa. Por su parte, Van Zyl et al. (1993)
investigaron la influencia de la D-ribosa como cosustrato en la absorcin y
metabolismo de la D-xilosa por S. cerevisiae ATCC 26602, un sustrato que no puede
utilizar para su crecimiento. La presencia de un solo sistema de baja afinidad para el
transporte de xilosa en cultivos frescos y la presencia de ambos sistemas de baja y alta
afinidad en clulas privadas de alimento, indic que la xilosa es transportada por
ambos sistemas de transporte de glucosa. La glucosa inhibe fuertemente el transporte
de xilosa en cultivos frescos creciendo en glucosa, probablemente como resultado de
la competencia de los dos azcares por un acarreador de baja afinidad. La ribosa
tambin inhibe el transporte de baja afinidad de la xilosa, pero en menor grado que la
glucosa. El sistema de alta afinidad, operativo en clulas expuestas a xilosa y ribosa,
fue inhibido de manera similar por la glucosa, pero no fue significativamente inhibido
por la ribosa. El xilitol y ribitol fueron indicadores de que ambos azcares son
reducidos inicialmente a sus correspondientes polioles (Figura 3). La enzima que
cataliza la conversin de xilosa a xilitol es aparentemente constitutiva y no est sujeta
a represin por glucosa, ya que su actividad fue similar, independientemente del
crecimiento en glucosa o etanol (Van Zyl et al., 1993).

Una cepa de S. cerevisiae fue modificada genticamente para que pudiera metabolizar
la xilosa (Walfridsson et al., 1995). Los genes XYL1 y XYL2 de Pichia stipitis CBS 6054,
que codifican para xilosa reductasa y xilitol deshidrogenasa, fueron clonados en S.
cerevisiae. Los productos de estos genes catalizaron las dos etapas iniciales de
utilizacin de la xilosa, de las cuales carece S. cerevisiae. Para incrementar el flujo a
travs de la ruta de las pentosas fosfato, fueron sobre-expresados los genes TKL1 y
TAL1 de S. cerevisiae que codifican para transcetolasa y transaldolasa. La xilosa y
glucosa se consumieron simultneamente, indicando que el transporte de xilosa no es
una etapa limitante. El consumo de xilosa fue ms rpido en presencia de glucosa, en
un rango de 0.14 a 0.43 g l-1 h-1. Despus de consumida la glucosa, la velocidad de
consumo de xilosa se volvi ms lenta. Esto se debi probablemente a que el
transporte de xilosa pudo haberse limitado, debido a su baja concentracin. Se cree
que la xilosa es transportada por los mismos sistemas de transporte de la glucosa, pero
con valores de Km mucho mayores.

La produccin de xilitol comenz hasta que la glucosa se consumi y no se produjo una

cantidad adicional de etanol a partir de xilosa. El hecho de que la produccin de xilitol
comenzara inmediatamente despus de que la glucosa se consumiera, indica que la
fermentacin de xilosa, como nica fuente de carbono, da como resultado
concentraciones de metabolitos intermediarios muy bajas para la induccin de
enzimas etanognicas clave. La xilosa reductasa (XR) de P. stipitis puede utilizar tanto
NADH como NADPH como cosustratos, mientras que la xilitol deshidrogenasa (XDH)
utiliza exclusivamente NAD+. Mediciones in vitro han demostrado que la XR, en cepas
transformadas de S. cerevisiae y en P. stipitis, tiene una preferencia por NADPH. Esto
conduce a la acumulacin de NADH, dando como resultado la oxidacin de xilitol a
xilulosa por la XDH dependiente de NAD+. En ausencia de oxgeno, el NADH no se
puede reoxidar. Como resultado, el xilitol se acumula y es excretado (Walfridsson et
al., 1995).

Como se puede observar en la Figura 3, S. cerevisiae puede utilizar la xilulosa, que es

fosforilada a xilulosa-5-fosfato y canalizada a travs de la ruta de las pentosas fosfato
(PPP) hacia la gluclisis. En base a esta ruta, a partir de xilosa y glucosa se puede
producir etanol, pero slo a partir de la xilosa se puede producir xilitol, no as con
glucosa.

Fig. 3. Rutas metablicas posibles para la utilizacin de xilosa y ribosa por levaduras y
distribucin de la [13C]-D-xilosa o [13C]-D-ribosa; NAD, Nicotinamida
adenindinucletido en su forma oxidada; NADH. H+, Nicotinamida adenindinucletido
en su forma reducida; NADP, Nicotinamida adenindinucletido fosforilado su forma
oxidada; NADPH.H+, Nicotinamida adenindinucletido fosforilado en su forma
reducida (Tomado y modificado de Van Zyl et al., 1993).

2.5 CONVERSIN DE XILOSA A XILITOL

La obtencin de xilitol a partir de xilosa involucra varios tipos de microorganismos y

varias rutas metablicas, una es la fermentacin de la xilosa por Pichia quercuum, para
producir cido xilnico y xilitol al mismo tiempo (Suzuki & Onishi, 1973) (Figura 5), otra
es por medio de la isomerizacin de la xilosa a xilulosa y posteriormente la reduccin
de la xilulosa a xilitol por dos deshidrogenasas ligadas a un nucletido de piridina,
como se mostr en la figura 2.
Fig. 5. Mecanismo probable de oxidacin y reduccin de D-xilosa por Pichia quercuum;
NADP, Nicotinamida adenindinucletido fosforilado su forma oxidada; NADPH. H+,
Nicotinamida adenindinucletido fosforilado en su forma reducida. (Tomado y
modificado de Suzuki & Onishi, 1973).

Isomerizacin de Xilosa a Xilulosa

A. aerogenes PRL-R3 posee enzimas inducibles para el catabolismo de la D-xilosa y del

D-arabitol. La D-xilosa es el inductor de la isomerasa y de la D-xilulokinasa. El
Darabitol es el inductor de la deshidrogenasa del D-arabitol y de una D-xilulokinasa
separada (Figura 2) (Wilson & Mortlock, 1972). Reduccin de la Xilulosa a Xilitol
Hickman y Ashwell (1958) reportaron que la L-xilulosa es convertida a D-xilulosa
por dos deshidrogenasas ligadas a un nucletido de piridina, para producir un
sustrato comn, el xilitol. Las reacciones pueden escribirse como sigue:
 2.6 PRODUCCION DE XILITOL A PARTIR DE BAGAZO

2.6.1 ETAPAS DEL PROCESO TECNOLOGICO

El mismo consta de las siguientes etapas tecnolgicas:

Pretratamiento y almacenamiento del bagazo.

Hidrlisis del bagazo.

Neutralizacin del hidrolizado hemicelulsico de bagazo.

Concentracin del hidrolizado.

Purificacin del licor de xilosa.

PRETRATAMIENTO Y ALMACENAMIENTO DEL BAGAZO.

La caa de azcar es un cultivo de campo, contiene de 5 a 15% de suciedad y cenizas antes

de arribar al ingenio, parte de la cual pasa al bagazo. Estas son mayores cuando se emplea la
mecanizacin, haciendo que la remocin de las mismas sea ms difcil. La slice que contiene el
bagazo hace que sea un material con cierto grado de abrasividad lo cual crea dificultades
adicionales durante el proceso. Por su parte los azcares residuales (sacarosa) en una
proporcin de 2 a 3% crean problemas como es el incremento en peso del material y la
formacin de un sustrato rico para el crecimiento de los microorganismos durante su
almacenamiento, causando la degradacin de los componentes de inters para el proceso.
Por estas razones es necesario realizar el lavado de la fibra. En su composicin morfolgica
(Bagazo, Manual de los Derivados), se encuentran presentes la fibra, el meollo y la fraccin de
finos y solubles. Para su utilizacin en este proceso es necesario utilizar bagazo desmeollado ya
que la granulometra juega un papel importante en las operaciones de impregnacin, secado y
en las caractersticas hidrodinmicas. El meollo posee alto contenido de cenizas que pasan al
licor e interfieren grandemente en el proceso de purificacin. Se propone que el proceso de
desmeollado sea realizado en el propio ingenio como est establecido en el Central Uruguay y
Pablo Noriega, en esta etapa la mdula separada puede unirse con el bagazo integral o la
celolignina residual de este proceso y utilizarse como combustible.

AREA DE PREPARACIN DE BAGAZO.

HIDRLISIS CIDA

Durante la hidrlisis tiene lugar la reaccin de formacin de los azcares. Parte de la

ceniza que aun contiene el bagazo pasa a la solucin as como la lignina soluble, todas
estas sustancias se disuelven en medio cido (Npoles, A.I. y col.,1987) La solucin
obtenida recibe el nombre de hidrolizado, el cual es un lquido amarillo verdoso, sus
principales componentes son los azcares: xilosa, glucosa y arabinosa, otros
componentes que se forman son el furfural, cido actico, y compuestos fenlicos los
cuales son nocivos al proceso de hidrogenacin cataltica de la conversin de xilosa a
xilitol. El otro producto que se obtiene es el residuo llamado celolignina, el cual puede
ser utilizado como combustible del propio proceso. El bagazo es alimentado al reactor
por medio de una tolva la cual se encuentra colocada a la boca de estos. Finalizada la
carga se cierra la tapa superior y se termina de adicionar la solucin cida acorde con
el hidromdulo fijado y a la concentracin de cido establecida. Para ello el cido
sulfrico es transportado desde un tanque a los reactores a travs de una bomba de
desplazamiento positivo, pero antes se debe pasar por el filtro con el objetivo de
eliminar posibles partculas extraas. El agua desmineralizada almacenada en tanques,
proveniente de los evaporadores es bombeada hasta los reactores donde se alimenta
conjuntamente con el cido sulfrico hasta alcanzar el hidromdulo requerido.
Terminada la carga se realiza el calentamiento con vapor saturado de la masa hasta la
temperatura de trabajo. La hidrlisis del bagazo se realiza en fase estacionaria durante
el tiempo establecido y la celolignina residual se lava para recuperar los azcares que
han quedado en ella as como para eliminar el cido residual, la celolignina es
descargada hacia los ciclones.

Neutralizacin del hidrolizado.

El hidrolizado almacenado en tanques intermedios es enviado al proceso de

neutralizacin donde se eleva el pH hasta 5,5 - 6,0. Para esto se utiliza una batera de
columnas rellenas con resinas de intercambio inico dbilmente aninica en forma
OH-, los hidrolizados neutralizados son enviados a tanques y de aqu son enviados
hacia la siguiente etapa.

Concentracin del hidrolizado

La concentracin de los hidrolizados se realiza en evaporadores mltiple

efecto la concentracin es elevada hasta 45-50o Bx, utilizando vapor directo,
el agua extrada es almacenada en tanques y luego es utilizada para el
proceso de hidrlisis, los licores concentrados son almacenados en tanques.
 Purificacin de los hidrolizados

Los licores concentrados son enviados a la etapa de et al.Tecnologa del

Proceso de Obtencin de Licores de Xilosa a partir de Bagazo de Caa, para la
Produccin Biotecnolgica de Xilitol SOLENZAL, A. I. N. Braz. J. Food Technol.,
5 SIPAL, maro, 2005 OF FOOD TECHNOLOGY 60 purificacin, la cual se
realiza mediante columnas rellenas con resinas anionicas y cationicas. Esta es
la ltima etapa, la cual es muy importante ya que es necesario obtener un
sirope de xilosa puro el cual debe cumplir los requisitos para su posterior
bioconversin o hidrogenacin cataltica.

Purificacin del licor de xilosa.

 Tratamiento de la celolignina

Para el tratamiento de la celolignina se necesitan dos ciclones para recibir la

celolignina extrada de los reactores, la cual se descarga a un conductor que
lo lleva hacia la caldera. El soplado de la celolignina se realiza a una presin
de 8 Kg. / cm.2 . Los tubos de entrada al cicln deben ser de acero inoxidable
preferiblemente de 5 mm de espesor. Posee adems en su interior paletas
que arrastran la celolignina por los orificios de salida hacia la banda. El
Tornillo extrusor se encarga del lavado de la celolignina residual con solucin
de sosa, (para neutralizar esta), la celolignina ser mezclada con meollo y
alimentada a la caldera para generar el vapor necesario para el proceso.
 3. CONCLUSIONES

La factibilidad de obtener siropes de xilosa/xilitol a partir de hidrolizados

hemicelulsicos de bagazo abre nuevas posibilidades a la industria de los derivados de
la caa de azcar.
En trminos de la produccin microbiana de xilitol, la prominente o deseada cepa para
la produccin de xilitol debe tener una xilosa reductasa dependiente de NADH, la cual
parcialmente debe de bloquear la regeneracin de NADPH a travs de la va de las
pentosas fosfato.
Con estas nuevas producciones de xilosa/xilitol se crearan fondos exportables ya que
se aprovechan desechos de otras industrias, a la vez se producirn nuevos productos
para la industria qumica y farmacutica.
El xilitol ha sido definido como un azcar extrao y est presente en bajas
concentraciones en la naturaleza. Aunque la productividad microbiana en las
reacciones de reduccin para obtener xilitol puede ser incrementada por diferentes
mtodos de produccin la reduccin qumica puede ser todava competitiva en
relacin a la produccin industrial.
La purificacin de diferentes azcares derivados de residuos hemicelulsicos y su
aplicacin como materia prima para la conversin bioqumica desde un punto de vista
industrial, es un punto de investigacin actual; debido a su aplicacin y escala
industria.
Como se constata todas las materias primas utilizadas en este trabajo proporcionan
hidrolizados hemicelulsicos capaces de ser bioconvertidos en xilitol, con mayor o
menor xito, por la levadura C. guilliermondii FTI 20037. Se deben procurar
alternativas de tratamiento con el objetivo de reducir la prdida de azcares
fermentables, especialmente de glucosa y xilosa.

4. BIBLIOGRAFIA

Produccin y Aplicaciones Biotecnolgicas del Xilitol, Juan Carlos Gonzlez-

Hernndez*, Mariana Alvarez-Navarrete, Luz del Carmen Ornelas Hernndez, Miguel
Angel Zamudio Jaramillo, Laboratorio de Bioqumica del Departamento de Ingeniera
Bioqumica, Instituto Tecnolgico de Morelia; Avenida Tecnolgico 1500. C. P. 58120.
Morelia, Mich, Mxico.

Bagazo. Manual de los Derivados de la Caa de azcar. Segunda Edicin. Coleccin

Geplacea. Serie Diversificacin. p 47 57. 1990.

http://www.tandfonline.com/loi/tcyt19