Aust. J. Chem.

, 1990, 43, 439-45

Los alcaloides de Indica Margaritaria

(Euphorbiaceae). La estructura cristalinay
La configuracin absoluta de la bromhidrato
de (+) -1 5a-metoxi-l4,15-
dihydrophyllochrysine *

Dayar ArbaiqArB Lindsay 1: ~ Yrne Jack, ~ R. CannonsA Lutz M. ~ ~ ngelhardt y

Allan MARIDO. Blanco UN
UN Facultadde Qumica de la Universidad de Australia Occidental, Nedlands, WA
6009. Direccin actual: Jurusan Farmasi, FMIPA, Universitas Andalas,
Padang, Sumatra Barat, Indonesia.

Abstracto
(-) - Phyllochrysine (I), (-) - securinine (2) y un nuevo alcaloide de (+) -
1Sa-metoxi-14,15-dihydrophyllochrysine (3) se han aislado tanto de la
corteza y las races de Margaritaria
indica (Dalz.) L. Webster. La estructura y la configuracin absoluta de (3) seguir de
GRAMO.
su propiedade y su sntesis a partir de (-) - phyllochrysine (1), as como de
espectroscpica s
la estructura cristalina de su bromhidrato, obtenido por difraccin de rayos X. los datos del
difractmetro en 295Kse refinaron mediante tcnicas de mnimos cuadrados a un residual de 0. 05
3 (991 reflexiones 'ob-servido'). Los cristales de15a-metoxi-14, LS-
dihydrophyllochrysinebromhidrato son ortorrmbica, P212121, un 14,324 (3), b 14,194
(3), c 7,240 (2) UN, Z 4.

Introduccin
El gnero Margavitaria pertenece a la familia Euphorbiaceae y comprende 10 o
12 especies que se encuentran en la tr0pics.l El gnero est estrechamente
relacionado con Phyllanthus, y indica Margaritaria (Dalz.) GRAMO.L. Webster era
conocido previamente como Phyllanthus indicus (Dalz.) Muell.-Arg. Bajo el
nombre de este ltimo se ha considerado planta txica asa en el sudeste Asia2
aunque tambin se ha utilizado con fines medicinales, estimulante del asa y
abortivo, en Sumatra Occidental. Es un gran rbol que alcanza una altura de 40
metros y tiene una distribucin dispersa en el bosque montano cerca Sijunjung en
Sumatra Occidental.
Tanto la corteza y las races de M. indica dieron pruebas fuertemente positiva
para alkaloids3 y las bases de petrleo fueron aisladas de cada uno en la forma
habitual. La mezcla de alcaloides obtenido de la corteza se fraccion por
convencional
cromatografa y el alcaloide era identificado como (-) -
importante phyllochrysine
* UN breve resea de algunos este trabajo ha aparecido (Can, J. R., Fitoterapia, 1987, 58,
de
315).
 Willis, JC, 'Un diccionario de las plantas con flores y helechos' octavo Edn (University Press:
Cambridge 1973).
Burkill, I. MARIDO., 'UN Diccionario de los productos de la pennsula de Malasia'(Ministerio
econmicos de
Agricultura y Cooperativas: Kuala Lumpur 1966).
Arbain, D., Cannon, JR, Afriastini, Kartawinata, K., Djamal, R., Bustari, UN., dharma,
UN.,
Rosmawaty, Rivai, MARIDO., Zaherman, Basir, D., Sjaiful, NAWFA, R., y Kosela, S., Econ.
Sjafar, M.,
Bot., 1989, 43, 73.
 Comunicaciones cortas

(1). Esto fue acompaado de cantidades ms pequeas de (-) - securinine (2), y un

nuevo alcaloide que se ha asignado la estructura (+) - 15a-metoxi-14,15-
dihydrophyllochrysine (3). Los mismos tres alcaloides tambin fueron aisladas de las
races de esta especie. La investigacin de otras bases menores presentes en la
corteza contina.

resultados y Discusin
Los alcaloides conocidos (-) - phyllochrysine (1) y (-) - securinine (2) fueron
identificados a partir de sus propiedades fsicas que se compararon con los
registrados en el literat ~ re. ~ ~ ~
El nuevo alcaloide, que se analiz para C14H19N03, se le asign la estructura (+)
-l5oc-metoxi-14,15-dihydrophyllochrysine(3) sobre la base de su
espectroscpica propiedades. El espectro infrarrojo contena una banda fuerte a 1750
cm-I que se atribuy a la presencia de una de cinco miembros una lactona $ insaturado.
Como en el caso de (-) - phyllochrysine (I), el ~ espectro de masas contena un pico
prominente atm / z 84 que fue asignado a C5HloN + e indic la presencia de un sistema
de anillo de piperidina en (3). Otros picos prominentes en el espectro de masas incluan
el ion molecular a m / z 249 (60%) y iones con m / z 234 (100) y 218 (27), que se
atribuy a la prdida de los grupos metilo y metoxi, respectivamente, a partir de el ion
molecular. La presencia de un grupo metoxi en (3)
Tambin fue evidente inspeccin tanto de los espectros de RMN y l H RMN 13C,
en
para estas seales contenidas en 656. 7 2 (q) y 3 - 3 0 (s), respectivamente.
los alto 'H espectro de RMN, despus de emplear extensa
campo desacoplamiento
y experimentos anlisis de los datos por utilizando la acin Karplus eq ~,
entonces ~
LE a estructura (3). En particular, estas datos de activar el grupo metoxi
D
a ser colocado C15 en lugar de C14. Afortunadamente, el bromhidrato de
en
(+) - 15 ~ metoxi-14,15-dihydrophyllochrysinecristales
formados adecuados para una determinacin de la estructura de rayos X de cristal nico
y esta tcnica llevado a la estructura y la configuracin absoluta (3).
La estructura y la configuracin absoluta (3) tambin fue confirmada por sntesis
parcial. (-) - Phyllochrysine (I), como otro compuesto carbonilo conjugado
doblemente insaturado ^, ^ someti a Michael additon en el carbono sp2 terminal;
tratamiento con metanol seco en presencia de metxido de sodio evidentemente
 Parello, J., Melera, A., y Goutarel, R., Bull. Soc. Chim. Fr., 1963, 898. Beutler,J.
UN., y Livant, P., J. Nat. Pinchar., 1984, 47, 677.
Jackman, L. METRO., y Sternhell, S., 'Aplicaciones de la espectroscopia de resonancia magntica
nuclear in Organic Chemistry' 2 Ed (Pergamon Press, Oxford 1969).
Kido, F., Fujishita, T., Tsutsumi, K., y Yoshikoshi, UN.,Chem. Commun., 1975, 337.
Comunicaciones cortas

llevado a atacar desde el lado menos impedido de la molcula para formar 1 5 a -

metoxi-i4,15-dihydrophyllochrysine(3), que result ser idntica a el
producto natural.
La posibilidad de que (+) - I 5a-metoxi-14,15-
dihydrophyllochrysine(3) era un artefacto fue despedido en razn de que
no metanol se haba utilizado en el procedimiento de aislamiento. Adems, en
ausencia de metxido de sodio, una solucin de (-) - phyllochrysine (1) en metanol
dio ningn rastro de (3), incluso cuando se deja reposar a la luz durante varios
meses.
Experimental
Los anlisis se llevaron a cabo por el Servicio de Microanaltica de
Australia, Melbourne. Los puntos de fusin se determinaron utilizando
una platina caliente de Kofler. Las rotaciones pticas se determinaron
con un polarmetro Perkin Elmer 141 usando una clula de micro 1 dm
(1 ml) a temperatura ambiente. Los espectros infrarrojos se
obtuvieron con un Perkin Elmer 283 espectrofotmetro. de masas de
baja resolucin
Los espectros se midieron en un Varian MAT CH7 o un Hewlett Packard 5896 instrumento.
IH y 13c RMN. Los espectros se obtuvieron con un espectrmetro Bruker WP80 operando a 80
y 2 0. 1 MHz, respectivamente. De alta campo 'H RMN y 13c Los espectros de RMN se obtuvieron
con
un instrumento Bruker AM300 que funciona a 3 0 0. 1 3 y 7 5. 5 MHz, respectivamente.
El adsorbente para la cromatografa en capa fina (t.1.c.) era o bien Merck o Fluka Kieselgel GF254.
cido silcico Mallinckrodt (malla 100) o slice Merck gel 60 se utiliz para cromatografa en columna.
La cromatografa radial en una atmsfera de nitrgeno se realiz en placas de Merck Kieselgel PFz54
mediante el uso de un modelo Chromatotron 7924.
ter de petrleo se refiere a una fraccin del intervalo de ebullicin 55-65" . Amonaco
cloroformo
(3,4%) se prepar mediante la adicin de la cantidad calculada de acuosa de NH3 (d 0. 8 8) a
cloroformo,
a continuacin, eliminando el agua con Na2S04 y filtrado. Cupn de especmenes (DA 1) de la planta
el material tiene ha presentado en el Herbario Bogoriense (BO), Bogor, Indonesia.
(A) la Major Alcaloides de M. indica
Aislamiento de
La corteza y las races de M. indica se recogieron cerca de Sijunjung, Sumatra Occidental durante
agosto 1983.

(I) La, corteza secada al aire molida (6. 8 kg) se extrajo tres veces con 3. 4% de cloroformo
amoniacal a temperatura ambiente durante 2 das. Los extractos combinados (39 1.)se evaporaron bajo
presin reducida para c. 11, despus se agit exhaustivamente con H2S04 acuoso al 10%. Los extractos
cidos combinados se basificaron con NH3 acuoso y se vuelven a extraer con cloroformo. Despus de
lavar con agua, la solucin se sec (Na2S04) y se evapor bajo presin reducida para dar las bases de
petrleo como una goma de color marrn oscuro (53. 2 g).
Las bases de petrleo (50 g) se preadsorbidos sobre el cido silcico y se cromatografiaron en una
columna
de la misma adsorbente (500 g) con ter / cloroformo / metanol / dietilamina (85 : 5 : 5 : 5)
como
eluyente. fracciones sucesivas que tenan el mismo comportamiento en t.1.c. se combinaron y
evaporaron a presin reducida. La primera fraccin se cristaliz en ter de petrleo para proporcionar (+)
- I 5a-metoxi-l4,15-dihydrophyllochrysine (3) en forma de agujas (250 mg), pf 141" (Encontrado: C, 6 7
5; H, 7.. 5;.. N, 5 4 C14H19N03 requiere C, 6 7 4;. H, 7 7;. N, 5,6%), [ale + 71,0 (c, 0 6 en metanol) v,
(KBr) 3495.. , 1825, 1750 (br), 1630, 1410, 1295, 1200 cm- '' H RMN
(3 0 0. 1 3 MH ~ CDC13) . 5, 11 HZ, H38; 1. 1 8, ddddd, J 3. 5, 3. 5,
60 * 82, dddd, J 3. 5, 1 2.
5, 12
1 2. 5, 1 2. 5, 1 2. 5 Hz, H . 5, 1 2. 5, 11 Hz, H 5 a; 1 0,50 a 1,65,
4 a; 1. 4 2, ddddd,J3. 5, 3.
5, 1 2
m, H4P, H5P oscurecida . 00, d,J 1 0. 5 Hz, H88; 2. 3 2, dd,J 6,
por H20; 1. 78, m, H 3 a;
2
1 0. 5 Hz, H 8 a; 2. 71, ddd,J 11, 11, 3 H z, H6B; 2. 7 9, d,J1 7. 5 H z, H 1 4 a; 2,93-3,05, m,
H 6 a, H 2, H 14P; 3. 3 0, s, 0CH3; 3. 3 5, dd,J6, 4 Hz, H 7; 3. 5 8, dd, J 6, 4 Hz, H 15; 5,71, d,
J 2 Hz, H12. 13cRMN 0,97, 26,92, todo t, C3, C4, C5; 30. 55,
(75. 5 MHz, CDC13) b
23,97, 24
34 . 72, tanto t, C8, C 14; 51,26, t, C6; 56,72, q, OCH3; 5 8. 7 2, 66. 73, ambos d,
C 7, C2; 79. 6,
re, C 15; 8 9. 8 4, s, C 9; 112. 172,78, s, C 11. Espectro de masas m / z
99, d, C 12; 170. 79, s, C
13;
249 (M, 60%), 235 (16), 234 (loo), 219 (13), 218 (27), 206 (12), 204 (37), 190 (13), 178 (ll),
176 (14), 162 (14), 160 (73), 154 (22), 146 (19), 140 (40), 138 (19), 135 (151, 134 (54), 122
(16), 121 (38), 120 (24), 111 (12), 110 (76), 109 (27), 108 (IS), 107 (ll), 106 (IS), 97 (24),
96 (LO), 95 (19), 94 (LL), 91 (21), 84 (87), 83 (45), 82 (41), 81 (LL), 80 (15), 79 (IS), 78 (14),
77 (17), 71 (32), 69 (12), 68 (17), 67 (27), 56 (20), 55 (53), 54 (20), 45 (14), 41 (28).
 Comunicaciones cortas

Mesa 1. coordenadas atmicas no son de hidrgeno

tomo x Y z tomo x Y z

Mesa 2. Que no son hidrgeno distancias interatmicas (UN)

Br. . .MARIDO contactos <3 UN son a H (1), 2. 15; H (12) (x + $, i - Y, 1 -z), 2. 8; H (6a) (4-x, -Y, $
+ z), 2. 9 A

Mesa 3. Que no son hidrgeno Interbond ngulos (grados)

Los tomos ngulo Los tomos ngulo
C (2) -N (1) -C (6) 113 0,6 (7) C (2) -C (9) -C (13) 116 0,5 (9)
C (2) -N (l) -C (7) 107 0,7 (7) C (8) -C (9) -0 (10) 113,6 (9)
C (6) -N (l) -C (7) 119. 5 (7) C (8) -C (9) -C (13) 108,0 (8)
N (l) -C (2) -C (3) 111 0,7 (9) O (10) -C (9) -C (13) 105,3 (8)
N (l) -C (2) -C (9) 101 0,8 (7) C (9) -O (l0) -C (l1) 109,5 (8)
C (3) -C (2) -C (9) 120 0,0 (8) O (l0) -C (11) -O (l1) 121 0,8
(12)
C (2) -C (3) -C (4) 110 0,3 (9) O (l0) -C (11) -C (L2) 107 0,4
(10)
C (3) -C (4) -C (5) 113 0,1 (10) O (11) -C (l1) -C (L2) 130 0,6
(12)
C (4) -C (5) -C (6) 112 0,7 (9) C (l1) -C (L2) -C (L3) 109,2 (10)
N (l) -C (6) -C (5) L08. 5 (8) C (9) -C (13) -C (12) 108,5 (9)
N (l) -C (7) -C (8) 100 0,9 (8) C (9) -C (13) -C (14) 118,5 (9)
N (1) -C (7) -C (15) 114,3 (8) C (12kC (13) -C (14) 132,8 (9)
C (8) -C (7) -C (15) 111,5 (8) C (13) -C (14) - ~ (15) 113,5 (9)
C (7) -C (8) -C (9) 98,5 (9) C (7) -C (15) -C (14) 111,4 (8)
C (2 (-C (9) -C (8) 102,9 (8) C (7) -C (15) -O (15) 106,1 (8)
C (2) -C (9) -O (10) 110,7 (8) C (14) -C (15) -O (15) 105 0,6 (8)
C (15) -O (15) -C (150) 113 0,7 (8)
Comunicaciones cortas

Higo. 1. contenido de la celda unidad proyectada hacia abajo do. 20% elipsoides trmicos
son mostrado para los tomos que no son hidrgeno.

Higo. 2. proyeccin
Molecular de la presente
estructura (catin); tomos de
hidrgeno tienen un radio
arbitrario de0.1 A.
 Comunicaciones cortas

Una solucin fra de (+) - 15a-metoxi-14,15-dihydrophyllochrysine(3) (5 mg) en acetona (2 ml)

se trat con 50% HBr acuoso (1 gota) y la mezcla se evapor a presin reducida. La cristalizacin
del residuo a partir de metanol / acetona dio el bromhidrato como placas, pf 182-183" .
La evaporacin de la segunda fraccin de la columna de
cromatografa y cristalizacin
de el residuo a partir de metanol dio (-) - securinine (2) como agujas de color amarillo (570 mg),
pf 144"
(Lit.4 146' ), [AID-1035" (do,0. 1 3 en metanol) [ un ]- en metanol). los'MARIDO
1040"~ RMN,
i3c espectros de RMN y de masas de acuerdo con el PECTRA publicada ~. ~, ~
La evaporacin de la tercera fraccin de la columna dio un residuo slido que se recristaliz en
acetato de etilo para dar (-) - (. 11 0 g) phyllochrysine (1) como placas amarillas, pf 136-137" (lit.4
137-138 "), [a] -1000" ~ (c, 0. 1 3 en metanol) (Lk 4 [ELIMINAR -1004" en metanol). La 'H
espectros de RMN y de masas de acuerdo con el PECTRA publicada ~; el ~ 13cEspectro de RMN
(75,5 MHz) tambin estaba de acuerdo con que reported5 excepto por una seal en 6 108. 7 (lit.5 6
110. 6) asignado ado 12.
(Ii) Se extrajeron los, races secadas al aire molidas (2. 70 kg) como se describe anteriormente y
la base bruta (2. 8 g) se separ por cromatografa sobre cido silcico (30 g) como antes. De este
modo(+) - 15a-metoxi-14,15-dihydrophyllochrysine(3) (14 mg; pf y pf mixto
141 ), (-) - securinine (2) (165 mg; pf y pf mixto 143-144" ) y (-) - phyllochrysine (1) (837 mg; pf
y se obtuvieron pf mixto 136" ).

Mesa 4. Que no son hidrgeno ngulos anillo Interbond de torsin (grados)

Los tomos se denotan por slo nmeros; tomos que no son de carbono estn en
cursiva
Los tomos ngulo Los tomos ngulo

(segundo) Sntesis parcial de (4 - 15a-metoxi-l4,15-dihydrophyllochrysine(3)

(-) - Phyllochrysine (1) (217 mg) se disolvi en una solucin preparada a partir de metal
sodio
(46 mg) y metanol seco (15 ml) y despus la mezcla se dej de lado para 1 mes ahabita
 cin
temperatura. Despus, la solucin se diluy con agua y se extrajo con acetato de etilo. La
evaporacin del disolvente y la cromatografa radial (2 mm de placa) del residuo, con ter de
petrleo como eluyente dio(+) - 15 ~ metoxi-14,15-dihydrophyllochryine(3)
que cristaliz en ter de petrleo como agujas (191 mg), pf y pf mixto 141" .
Comunicaciones cortas

Cristalografa
cristal de datos
Ci4H2oBrN03, METRO 330.2, ortorrmbico, grupo espacial P212121 (~ 24, NO. 19), un
14,324 (3), segundo 14,194 (3), c 7,240 (2) UN, T 1472,1 (5) A3,Dc (Z 4) 1. 4 8 g cm-3. F (000)
680. p ~~ 29. 6 cm-L. Muestra: 0. 1 8 por 0. 3 5 por 0. 1 0 mm.

Determinacin de la estructura
los (Hkl) y (h reflexiones eran medido a c. 295K como conjuntos de datos
independientes
dentro el lmite 20max = 50 , mediante el Syntex Pi de cuatro crculos difractmetro que
uso de una operan en
convencional 28/8 esca el modo y con un Mo monocromtica KO: fuente de
near equipado radiacin
(UN 0,71069 A). total de 1516 singular Se midieron las reflexiones; de estos, 991 con
UN
I> 3a (I) se consideraron 'observado' y se utilizaron en la matriz completa de mnimos cuadrados
refinamiento despus de disolucin de la estructura por el mtodo de tomo pesado, y despus de la
absorcin analtico
correccin. se refinaron parmetros trmicos anisotrpicos para el tomos no de hidrgeno;
(x,
Y, z, UISO) ~fueron incluidos en los valores estimados. Derechos en yo en convergencia, R, eran
residuales de autor FI
0, 0 5 3 (h k l), 0. 054 ( Hola yo )y, con la quiralidad invierte, 0. 0 69y 0. 0 6 6, tanto los
datos de
siendo refinado de forma independiente. Ri (hkl; correcta de la mano) era pesos reflexin
conjuntos 0. 052 con
de [a 2 (~ o) + O ~ 0 0 0 5 (~ o) 2Neutral1-1. Se han usado tomo factores de dispersin
complejos; 8 clculo utiliza la RADIOGRAFA programa de 76 systemg implementado por el Dr.
SRPasillo en un equipo Perkin Elmer 3240. Material depositado comprende factor de estructura
amplitudes (hk solamente I), los parmetros trmicos y de tomos de hidrgeno * numeracin de
tomos, que sigue la numeracin convencional de (-) - phyllochrysine (I), y quiralidad se muestra
en las figuras 1 y 2.; importantes resultados se dan en las Tablas 1-4.

Expresiones de gratitud
Este trabajo fue apoyado en parte por el Australiano de Investigacin Grant
Scheme y en parte por la Red para la qumica de los productos naturales
biolgicamente importantes. El apoyo financiero (en DA) del Gobierno de la
Repblica de Indonesia a travs del Proyecto de Educacin Superior del Banco
Mundial IX del Departamento de Educacin y Cultura se agradece. Agradecemos
tambin el Dr. RF Toia para algunos espectros de RMN de alto campo, el Dr.
Kuswata Kartawinata para identificar el material vegetal, y el Dr. S. R. Sala para el
uso de sus programas de ordenador.

Manuscrito recibido 29 de agosto de de

1989
* Las copias de estas tablas estn disponibles en la aplicacin a la Australian Journal of Chemistry, 314
Albert Street, East Melbourne, Vic. 3002.
Ibers, JA, y Hamilton, WC, (Eds) 'Tablas Internacionales para cristalografa de rayos X' Vol. 4
(Kynoch Press: Birmingham 1974).
Stewart, J. M., (Ed.) 'The RADIOGRAFA Sistema-Versin del mes de marzo de 1976' , Informe
Tcnico TR-446, Centro de Ciencias de la Computacin de la Universidad de Maryland, EE.UU.