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MICROBIOLOGA DE SUELOS
INFORME COMPONENTE PRCTICO

PRESENTADO POR

KAREN YISETH MEDRANO MEDRANO

1010065256

PROGRAMA: AGRONOMA
GRUPO: 17

TUTOR DE PRCTICA
PAOLA ALEXANDRA MARTINEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS Y PECUARIAS DEL MEDIO AMBIENTE
(ECAPMA)
CEAD LA DORADA
MAYO 2017
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INTRODUCCIN

La fijacin biolgica del nitrgeno atmosfrico, consistente en la reduccin de N2 a

NH4+ por la enzima nitrogenasa, es, despus de la fotosntesis, la ruta metablica ms
importante para el mantenimiento de la vida en la Biosfera. Curiosamente, este proceso
crucial slo puede ser llevado a cabo por unos pocos grupos de seres vivos, todos ellos
procariotas (Sprent J. y Sprent P., 1990).

Los microorganismos fijadores de nitrgeno no constituyen un grupo taxonmico

homogneo, la nica caracterstica que comparten es la presencia de la enzima
nitrogenasa (Zehr J.P. y col., 1998). Estos organismos pueden realizar la fijacin
biolgica de nitrgeno ya sea independientemente (a excepcin de las rizobiceas) o
estableciendo relaciones simbiticas con otros organismos. Son estas formas
simbiticas, concretamente las establecidas entre las rizobiceas y las leguminosas,
las que antiguamente eran aprovechadas para la renovacin de los suelos mediante la
prctica de la rotacin de cultivos; hoy en da sin embargo, desde la aparicin de la
revolucin verde en agricultura, esta prctica se ha sustituido por la utilizacin de
fertilizantes qumicos a pesar del elevado costo energtico y ambiental que supone.
Para poder disminuir la dependencia a fertilizantes nitrogenados que est adquiriendo
la agricultura mundial se han propuesto varias alternativas que abarcan desde la
modificacin gentica de las plantas a la optimizacin y mejora de la fijacin biolgica
de nitrgeno (Vance C.P., 2001).
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OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Comprobar los beneficios de la Fijacin Biolgica de Nitrgeno atmosfrico y de la

inoculacin del Frijol Calima (Phaseolus Vulgaris).

OBJETIVO ESPECIFICO

Reconocer en campo, los conocimientos adquiridos en el curso de

microbiologa de suelo, en la implementacin de prcticas adecuadas para la
produccin agrcola y la relacin con el medio ambiente.

Identificar y diferenciar las prcticas agrcolas, novedosas como sistemas

de produccin.

Conocer los mtodos y procesos que se cumplen en el proceso de fijacin

de nitrgeno al suelo y la inoculacin del Frijol Calima.

HIPTESIS DE INVESTIGACIN

Trabajaremos con inoculantes elaborados en base a microorganismos los cuales al ser

aplicados a las semillas de frijol nos puede favorecer el aprovechamiento de los
nutrientes en asociacin con una planta y su rizosfera. El cual facilita el crecimiento
vegetal aumentando o manteniendo su rendimiento, con dosis reducidas e inclusive sin
fertilizantes qumicos teniendo en cuenta que este es un problema que nos est
afectando hoy en da debido a la gran cantidad de fertilizantes desperdiciados y los
excesos de nitrgeno y fosfatos que pueden infiltrarse en las aguas subterrneas o ser
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arrastrados a cursos de agua. Adems su principal causa es la prdida de
biodiversidad y degradacin de la tierra. El uso de microorganismos benficos
(bacterias u hongos) promueve la salud de las plantas obtenindose como resultado
una planta de calidad.

MARCO TERICO

La inoculacin es una prctica que busca lograr la adherencia efectiva de un alto

nmero de bacterias fijadoras de Nitrgeno (Azospirillium y Micorrizas) sobre la
superficie de las semillas de leguminosas y gramneas previo a la siembra de las
mismas. Las bacterias infectan las races una vez germinada la semilla y se produce la
formacin de un sistema radicular eficiente, dentro de las cuales se ubican las bacterias
y comienzan a fijar Nitrgeno del aire hacindolo aprovechable para la planta. Este
proceso se denomina Fijacin Biolgica de Nitrgeno.

Para dar solucin al problema planteado se realiz un estudio de caso con el fin de
identificar y argumentar las diferencias encontradas en diferentes tratamientos que
fueron objeto de estudio durante cuatro (4) semanas en las cuales se evidencio las
caractersticas propias de cada tratamiento evaluado.

Para realizar el estudio de caso se establecieron 4 tratamientos cada uno de ellos con
caractersticas propias.

Tratamiento 1

Semillas inoculadas con tierra estril, se sembraron 20 semillas inoculadas en 10

macetas con tierra estril (2 semillas por maceta).

Tratamiento 2

Semillas inoculadas con tierra no estril, se sembraron 20 semillas inoculadas en 10

macetas con tierra no estril (2 semillas por maceta).

Tratamiento 3
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Semillas no inoculadas con tierra estril, se sembraron 20 semillas no inoculadas en
10 macetas con tierra estril (2 semillas por maceta).

Tratamiento 4

Semillas no inoculadas con tierra no estril, se sembraron 20 semillas no inoculadas en

10 macetas con tierra no estril (2 semillas por maceta).

Estos tratamientos fueron establecidos con el fin de observar e identificar los diferentes
ciclos de germinacin de cada una de las plantas, partiendo de un conocimiento previo
para dar respuestas significativas a cada proceso evolutivo.

RESULTADOS QUE SE ESPERAN OBTENER AL MOMENTO DE HACER LA

SIEMBRA

En los tratamientos 1, 2 y 4 las plantas deberan crecer ms que las del tratamiento 3,
debern ser de un color verde ms intenso y presentar ndulos en sus races, debido a
la presencia de bacterias fijadoras de nitrgeno preexistentes en la tierra o por causa
de la aplicacin de inoculantes. Las semillas inoculadas deberan presentar mayor
nmero de ndulos que en el tratamiento sin inoculacin. En el tratamiento 3 no
deberan visualizarse ndulos porque los microorganismos preexistentes deberan
haberse degradado por la esterilizacin.

RESULTADOS OBTENIDOS

Tratamiento 1

Semillas inoculadas con tierra estril

En este proceso se evidencio la germinacin de 6 macetas de las 10 establecidas, de

las cuales se llev un control correspondiente a su estructura vegetativa (altura,
nmero de hojas, presencia de ndulos). Al final del proceso de investigacin se
observa que en algunas de las plantas se inicia la etapa de floracin.

Tratamiento 2
 .
Semillas inoculadas con tierra no estril

En este proceso se observ que todas las macetas germinaron adecuadamente,

teniendo en cuenta que se aplic el inoculante lo que acelero el proceso de
crecimiento en las plantas de frijol, adems se present mayor nmero de hojas,
comparndolas con otros tratamientos sin inocular, de igual manera se evidencio que
en todas las macetas presentaron floracin.

Tratamiento 3

Semillas no inoculadas con tierra estril

En este proceso se evidencio que al plantar las semillas en tierra estril hubo
degradacin de los microorganismos, por lo tanto al no haber los componentes
necesarios para la germinacin se obtuvo un porcentaje de prdida del 90%, cabe
resaltar que una de las macetas germino das despus que nacieron los dems
tratamientos, y la raz se observa en la superficie de la tierra compactada por su estado
de esterilizacin.

Tratamiento 4

Semillas no inoculadas con tierra no estril

En este proceso se evidencio que hubo una germinacin adecuada, presentando un

crecimiento uniforme entre las macetas, obteniendo as un promedio de 73.5 cm de
altura y un 14.1 de N hojas durante las cuatro semanas de seguimiento.

ESTABLECIMIENTO

En el establecimiento de los tratamientos se utilizaron 40 macetas plsticas

transparente para observar el enraizamiento de las plntulas, adems se utiliz tierra
de 2 zonas diferentes para asegurar el xito de su germinacin en sus diferentes
etapas, estas se ubicaron en puntos estratgicos donde no las afectara la radiacin
solar pero a su vez permitirles iniciar su proceso de fototropismo.

Cada maceta se le realiz pequeos orificios para permitir que drene el agua de riego.
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SOSTENIMIENTO

Durante el proceso evolutivo de las plantas de frijol Calima se establecieron unos

parmetros para fijar el proceso de riego a cada una de las plntulas utilizando agua
esterilizada cada 2 das en horas de la maana, para estimular el proceso de absorcin
por parte de la raz pivotante evitando as la saturacin de la tierra.

Luego de la semana dos (2) fue necesario establecer una cuerda a una altura de 1
metro aproximadamente para darle formacin a las plantas de frijol, para su adecuado
crecimiento.

ANALISIS

Se puede determinar que los cuatro tratamiento tuvieron caractersticas distintas en

cuanto altura, numero de hojas, sistema radicular, por ende se concluye que estos
procesos nos brinda un aporte significativo para la aplicacin de inoculantes en la
semilla de frijol, ya que con la fijacin biolgica de nitrgeno podemos evitar utilizar
fertilizantes agroqumicos los cuales con el transcurso del tiempo perjudican la capa
vegetativa del suelo.

Se observan en los tratamientos 1 y 3 primordialmente en el 3 que hay compactacin

de la tierra por lo tanto no hay microorganismo benficos para agilizar el proceso de
germinacin de las plantas, en el momento de riego estas se observan que no hay
filtracin del agua en la tierra estril, cabe resaltar que en el tratamiento 1 hay mayor
porcentaje de germinacin debido a que estas semillas fueron inoculadas con bacterias
fijadoras de nitrgeno, a pesar de que estas se encontraban en tierra estril
compactada.

Se observa que en los tratamientos 2 y 4, con tierra no estril tienen un crecimiento

adecuado con una germinacin del 100%, destacando el tratamiento 2 , ya que las
semillas fueron inoculadas y presento el mayor ndice de altura, N de hojas y floracin.

CUESTIONARIO RESUELTO. CON ARGUMENTACIN ACADMICA MATERIALES

Y MTODO EVIDENCIAS Y RESULTADOS DISCUSIN DE RESULTADOS.
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Qu es una simbiosis. Porque es importante en la agricultura?

La simbiosis es una asociacin ntima y a largo plazo entre organismos de dos

especies diferentes. Las relaciones simbiticas prolongadas pueden dar como
resultado cambios evolutivos profundos en los organismos que intervienen, como en el
caso de los lquenes, una de las simbiosis ms antiguas y ecolgicamente ms
exitosas.

Se considera generalmente que existen tres tipos de relaciones simbiticas: el

parasitismo, el mutualismo y el comensalismo.

Es importante en la agricultura ya que permite que especies como las leguminosas

sean particularmente importantes debido a su habilidad para fijar nitrgeno atmosfrico
en simbiosis con Rhizobium, bacterias que nodulan sus races, as como por su alto
valor nutricional como alimentos para humanos y como forrajes para animales. La
fijacin biolgica de nitrgeno en los cultivos de leguminosas resulta cada vez ms
importante en vista de los esfuerzos para desarrollar una produccin agrcola ms
econmica y sostenible.

Cmo se transforman el nitrgeno atmosfrico las plantas para incorporarlo y

utilizarlo en su metabolismo?

La fuente mayoritaria de nitrgeno es el aire ya que las rocas contienen cantidades

insignificantes de este nutriente.

La fertilizacin, orgnica o inorgnica, constituye, en la prctica, la fuente ms

importante de nitrgeno en la agricultura, aunque tambin se incorpora al suelo por la
lluvia o por la fijacin a travs de numerosos microorganismos y de los vegetales
superiores.

Esta ltima va es la que, de manera natural, proporciona ms nitrgeno a los suelos

cultivados.
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El 90-95% del nitrgeno total del suelo se encuentra en forma orgnica, de modo que
no es directamente asimilable por las plantas, sino que debe sufrir un proceso de
transformacin denominado mineralizacin.

A su vez, el nitrgeno mineral del suelo, se encuentra en forma de amonio, NH4 +, y de

nitrato, NO3 .Ambas formas son asimilables por las plantas, pero la mayor parte del
nitrgeno es absorbido en forma de nitrato. El amonio se encuentra en el suelo
adsorbido en el complejo de cambio, fijado en las redes cristalinas de determinadas
arcillas o en la solucin del suelo.

El amonio fijado en las arcillas no es fcilmente cambiable, pero la accin de ciertos

cationes provoca la expansin de las arcillas, pudiendo liberarse y pasar a la solucin
del suelo.

Por el contrario, el amonio adsorbido en el complejo de cambio, es desplazado por

otros cationes y pasa fcilmente a la solucin del suelo. El nitrato, se encuentra libre en
la solucin del suelo y es asimilado por las plantas y los microorganismos.

Por efecto de la pluviometra o por el exceso de riego puede ser arrastrado a horizontes
profundos del suelo. La cantidad de nitrato que puede ser lixiviado depende de la
intensidad de las lluvias, de la dosis de riego, de la capacidad de retencin de humedad
del suelo, del estado vegetativo del cultivo y de las caractersticas de su sistema
radicular. A su vez, los movimientos ascendentes del agua a la superficie, durante las
estaciones secas, pueden provocar el ascenso de los nitratos a horizontes
superficiales del suelo.

Por qu es necesario menor adicin de fertilizante nitrogenado en algunas

especies de leguminosas?

La fijacin biolgica de nitrgeno (FBN) en las leguminosas contribuye

significativamente a la nutricin nitrogenada y productividad de las praderas. Por lo
tanto, es esencial implementar metodologas apropiadas para su evaluacin. En la
medicin de la FBN de especies leguminosas se han utilizado diferentes metodologas,
tales como diferencias en la acumulacin de N total o el rendimiento de MS entre
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plantas fijadoras y no fijadoras (Vincent, 1982; Hardarson et al., 1984). La tcnica de
reduccin del acetileno (Hardy et al., 1968), que ha probado ser til para detectar
sistemas de fijacin de N, tambin tiene limitaciones debido a que mide la actividad de
la enzima nitrogenasa de manera puntual y en un corto perodo de tiempo.

Cmo los microorganismos asociados inducen el crecimiento de las plantas al

producir sustancias promotoras, protegerlas de la sequa o de los patgenos?

La produccin agrcola actual con problemas en el consumo de agua, fertilizantes y

pesticidas, requiere de estrategias en donde estos insumos se reduzcan, para asegurar
el rendimiento vegetal a un costo relativamente bajo, sin deterioro de la fertilidad del
suelo.

Existe una alternativa que considera al us de rizomicroorganismos, aquellos que

asociados a las races de las plantas: mejoran, estimulan y facilitan, el sano desarrollo
de la planta a dosis inferiores de fertilizante nitrogenado, fosforado u otros necesarios
para un rendimiento rentable.

Es posible que mediante la inoculacin de la semilla a la siembre, se logre mejorar una

adecuada absorcin del fertilizante, tambin proteger a las races del ataque de
fitopatgenos.

En general se reconocen diferentes mecanismos de beneficio de las bacterias

promotoras del crecimiento vegetal (BPCV) para estimular un desarrollo vegetal sano y
obviamente una produccin agrcola sustentable que no solo asegure una ganancia
para el agricultor, sino tambin se mantenga la capacidad productiva del suelo, adems
generar un producto de calidad para el consumidor.

Las ampliamente conocidas BPCV son aquellas que inoculadas a la siembra de la

semilla, inducen su germinacin para luego colonizar la raz, en donde al transformar
sus exudados radicales en sustancias promotoras del crecimiento vegetal, causan un
efecto similar a las fitohormonas aplicadas comercialmente a las semillas y plantas:
como una mayor proliferacin de pelos radicales, que incrementa una mejor y eficiente
absorcin mineral como nitrgeno, fsforo, hierro.
 .
A pesar de que se reduce las dosis del fertilizante nitrogenado y fosforado sin que ello
ponga en riesgo la salud y que no afectan negativamente el rendimiento del cultivo
vegetal. Algunos ejemplos de estas bacterias son: Azotobacter beijerinckii, Azospirillum
brasielense o A. lipoferum Bacillus cereus, Pseudomonas putida, Burkolderia spp. Est
demostrado que estas bacterias al colonizar las races de las plantas que colonizan,
empelan las sustancias de desecho que se liberan durante el crecimiento del sistema
radical, para transformarlos en sustancias promotoras del crecimiento vegetal o
fitohormonas.

La BPCV son una valiosa herramienta en la generacin de gramneas, hortalizas,

leguminosas y otros de inters agrcola. Sin embargo es necesario que tanto
proveedores como usuarios tengan un conocimiento bsico suficiente a favor de
productos del campo sanos para el consumidor, de precios convenientes para el
agricultor y que los recursos naturales se conserven para un manejo sustentable del
sistema de produccin en el campo.

CONCLUSIONES

Se logr identificar en prctica, el proceso de inoculacin de semillas de frijol, mediante

la fijacin biolgica de nitrgeno, la cual facilita el crecimiento vegetal aumentando o
manteniendo su rendimiento.

Adems se evidenciaron los mtodos y procesos que se cumplen en el proceso de

fijacin de nitrgeno al suelo y la inoculacin del Frijol Calima, obteniendo como
resultado plantas con mayor disponibilidad de produccin.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. ANEXOS

Fijacin Biolgica Del Nitrgeno Miguel Redondo-Nieto, Ildefonso Bonilla, Luis

Bolaos.Disponible.https://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/Investigacion/fija
cionN.htm

Diana Victoria Netto. Ecologa. Simbiosis. Fisicanet. Disponible.

http://www.fisicanet.com.ar/biologia/ecologia/ap08_simbiosis.php
 .
Ciclo del nitrgeno en el suelo. Publicado 25 abril, 2013. Disponible.
http://www.tecnicoagricola.es/ciclo-del-nitrogeno-en-el-suelo/

Ricardo Campillo R., Segundo Urquiaga C., Ins Pino N. y Adolfo Montenegro B.
publicado abril de 2013. Estimacin de la fijacin biolgica de nitrgeno en leguminosas
forrajeras.

Disponible

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0365-28072003000200006&script=sci_arttext

Snchez Yez, j.m. Publicado 2005 Bacterias promotoras de crecimiento vegetal

Disponible http://www.monografias.com/trabajos33/crecimiento-vegetal/crecimiento-
vegetal.shtml

ANEXO1. TABLAS DE DATOS SEMANALES SEMANA 1

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ALTURA DE LA PLANTA
35
30 TTO1 Cm
25 TTO2 Cm
20 TTO3 Cm
15 TTO4 Cm
10
5
0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10

N HOJAS
6
5 TTO1 Hojas
4 TTO2 Hojas
TTO3 Hojas
3
TTO4 Hojas
2
1
0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
 .
SEMANA 2

ALTURA DE LA PLANTA
55
52 52
48 47 45 48
4343 45 45
40 40 40 40 40 40 40 42 38
37 38 36
32 33
30
23

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
TTO1 Cm TTO2 Cm TTO3 Cm TTO4 Cm
 .

N HOJAS
11 11 11 11 11

88 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8
7 7
5 5

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
TTO1 Hojas TTO2 Hojas TTO3 Hojas TTO4 Hojas
 .
SEMANA 3

ALTURA DE LA PLANTA
100
80 88
60 70 66 70 68 75 72 76 73 70
62 65 64 62 62
54 54 59 5660 57 60 56
40 50 46 50
20 33
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
TTO1 Cm TTO2 Cm TTO3 Cm TTO4 Cm

N HOJAS
20

15 16 17 17 17
14 14 14 14 14 14 1414 14
13 13
10 12 1212
11 11 11 11
10 10 10 10
9
5
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
TTO1 Hojas TTO2 Hojas TTO3 Hojas TTO4 Hojas
 .

SEMANA 4

ALTURA DE LA PLANTA
95
85 85 87 89
80 78 82 78 79 81 80 82
73 75 74 75 73 75
70 70 68 68
63 64
58
39

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10
TTO1 Cm TTO2 Cm TTO3 Cm TTO4 Cm

N HOJAS 17
0 00 0 00 00 0 0 0 0 0
17
161717 20
17 17 17 20 20
10 12 14 14 1614 1714
1612 1714
1920 17 17
TTO1 Hojas TTO2 Hojas
TTO3 Hojas TTO4 Hojas

ANEXO 2: FOTOGRAFAS SEGUIMIENTO ENSAYO Y COSECHA DE PLANTAS

.