TemasselectosdeCalidadenSerologa

(aplicacinenelbancodesangre)

Validacinyverificacindemtodos
deexamencuantitativos

IgnacioReyesRamrez
entidad mexicana de acreditacin, a.c.
Introduccin

Sedescribirnlospuntosaconsiderarparala
validacinyverificacindelos
procedimientosdeexamencuantitativos,
paraelcumplimientoyevaluacindelpunto
5.5.2 delanormaNMXEC151892008.
 Conformealasdirectricesestablecidasenla
Guaparalavalidacinylaverificacindelos
procedimientosdeexamencuantitativos
empleadosporellaboratorioclnico.
AlcancedelaGua

Ladebenaplicarloslaboratoriosclnicosque
seencuentranenalgunaetapadelprocesode
acreditacinantelaentidadmexicanade
acreditacin,a.c. atodoslosprocedimientos
deexamencuantitativosdelalcancedela
acreditacin
Descripcin

Yaqueexistendiversostipodemtodos
analticos disponiblesenelmercado.
Esimportantequeellaboratorioevale los
diferentesmtodosyseleccioneaquelque
mejorseadecuealasnecesidadesyrecursos.
Validacin

Sedefinecomo:
LaConfirmacinmedianteelsuministrode
evidenciaobjetivadequesehancumplido
losrequisitosdelmtodoparauna
utilizacinoaplicacinespecificaprevista.
(NMXCH152IMNC2005)
 Losdatosdela Linealidad.
validacindelmtodo Precisin.
losinformael Veracidad.
fabricanteensus
instructivosyestos Limitededeteccin.
puedencomprender Selectividad.
porsuaplicacin: Sensibilidadanaltica.
Intervalodetrabajo.
Especificidadanaltica.
Incertidumbre.
 Siseutilizanmtodos Linealidad.
desarrolladosporel Precisin.
laboratoriooalguno Veracidad.
fuemodificado,se
deberealizarla Limitededeteccin.
validacincompletay Selectividad.
presentarlas Sensibilidadanaltica.
evidencias Intervalodetrabajo.
correspondientes.
Especificidadanaltica.
Incertidumbre.
 Lavalidacin compruebalaaptituddelos
procedimientosdeexamen yreflejalas
condicionesrealesdelaaplicacindelos
mismos.
Verificacin

Laconfirmacinmediantelaaportacinde
evidenciaobjetivadequesehancumplidolos
requisitosespecificadosparaunmtodo.
(NMXCC9000IMNC2005)
 Laverificacinconsisteenevaluarel
desempeodelmtodo parademostrarque
cumpleconlosrequisitosparaelusoprevisto,
quefueronespecificadoscomoresultadode
suvalidacin.(NMXCH152IMNC2005)
 VE= Valor Esperado del Reactivo.
VO= Valor Observado del Reactivo.
Parmetrosdedesempeo
Ellaboratoriodebe Linealidad.
realizarlaverificacin Precisin.
delosmtodosy Veracidad.
evidenciarsicumplen
conlascaractersticas Incertidumbre.
dedesempeoenlas
condicionesdel
laboratorio.
EvaluacindelosParmetros
Linealidad Evaluarelintervalo
analticodelmtodo
enellaboratorio.
Elcomportamiento
lineal.
Laverificacindebe
tomarencuentalos
puntosdedecisin
clnica.
 Precisin. Veracidad.
Valordelamagnitud. Concordanciaentrela
Estimacindelvalor mediaaritmticayel
delmensurando. valorverdaderoo
Errordemedida aceptadocomo
(aleatorioy referencia.
sistemtico). Errorsistemtico
(sesgo).
 Errorsistemtico. Mediaqueresultadeun
nmeroinfinitodemedicionesdelmismo
mensurando,efectuadobajocondicionesde
repetibilidad,menosunvalorverdaderodel
mensurando. (NMXZ055IMNC)
 Exactituddemedicin. proximidaddela
concordanciaentreelresultadodeuna
medicin yunvalorverdaderodel
mensurando.(NMXCH152IMNC2005)
 EjemplodeExactituddemedicin.
 EXACTITUD

ERROR DE MEDIDA

ERROR ALEATORIO ERROR SISTEMATICO

PRECISIN VERACIDAD

Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes

conceptos cualitativos
 Incertidumbre. Intervalodentrodelcualseespera
queseencuentrelacantidad
medida,teniendoencuentatodas
lasfuentesdeerror.
Incertidumbreestndar(u).
1DS
Incertidumbreexpandida(U).
U=u xk
IncertidumbreCombinada(Uc).
Errorcuadrticomedio(ECM).
 Incertidumbredemedicin. Parmetro
asociadoalresultadodeunamedicinque
caracterizaladispersindelosvaloresque
podranrazonablemente,seratribuidosal
mensurando.(NMXCH152IMNC2005)
 VRS
O
O O O
O O O
media O O
OO
O
O
VRI

Incertidumbredemedicin.
Aplicacindelaverificacin

Objetivo
Verificareldesempeodelmtodoanaltico
paralacuantificacindeAc.rico enun
equipoautomatizadoconformealo
establecidoenlaGuadeValidacinde
mtodoscuantitativos.
Caractersticasdelreactivo
IntervaloBiolgicodeReferencia:
2,0a7,0mg/dL (hombre).
2,0a5,0mg/dL (mujeres).
Reproducibilidad:
Nivel:3,7mg/dL,DS: 0,23mg/dL,CV%:0,61
Nivel:6,2mg/dL,DS: 0,37mg/dL,CV%:0,60
Nivel:10,0mg/dL,DS: 1,60mg/dL,CV%:1,60
Recuperacin:
Entre97a101%paraunniveldeUricemia de10
mg/dL.
Lmitededeteccin:
Enespectrofotmetroelestndarde10,0mg/dL
proporcionaunalecturaaproximadade0,290
D.O.
Loquesignificaqueelcambiomnimode
concentracindetectableenesascondiciones
para0,001D.O.ser aproximadamentede0,03
mg/dL.
Linealidad:
Lareaccineslinealhasta20mg/dL
Linealidad
VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL
AC. URICO

Concentracin
minima y Valor Valor
maxima obtenido Teorico (X)
No. Dilucin % (mg/dL) mg/dL mg/ dL Sesgo % Error

1 0 20 17.83 20 2.17 0.11

2 25 8.66 10 1.34 0.13

3 50 4.57 5 0.43 0.09

4 75 2.28 2.5 0.22 0.09

5 100 1.25 1.21 1.25 0.04 0.03

Promedio 0.08
 Grafico de Linealidad
[ ] mg/ dL Ac. Urico

20.00
17.83
15.00
10.00
8.66
5.00 4.57
1.21 2.28
0.00
0 20 40 60 80 100 120
Dilucin

Ensayo de Linealidad
Datosdela
Valor obtenido
CorrelacinLineal Regresion Lineal mg/dL

Constante [A] 0.060

coeficiente de
regresion [b] 0.884

coeficiente de
correlacin [r] 0.999

coeficiente critico
de correlacion [r2] 0.999

Ecuacin de la
recta y = (0.884)x + (0.60)

r2 = 0.999
 Grafico de Linealidad

20.00
Valor obtenido [ ] mg/dL

15.00
Ac. Urico

10.00
y = (0.884)x + (0.60)
5.00 r2 = 0.999

0.00
0 5 10 15 20 25
Valor asignado [ ] mg/dL Ac. Urico

Ensayo de Linealidad
Criteriosdeaceptabilidad

Calcularlapendiente(1)ylaordenadaal
origen(0).
Compararelsesgooelporcentajede
errorparacadadilucinycompararcon
elfabricante.
Tomarladecisindeaceptarorechazar.
Decisin

Elmtodoanalticoenlascondicionesdel
optimasdellaboratoriopresentaunrango
linealconfiablede1,12a17,83mg/dL.
Elcoeficientedecorrelacinlineal(r2)de
0,999 loqueindicaqueelintervalo
evaluado,lafuncindecalibracines
lineal.
 VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO

Dilucin
No. % Valor 1 Valor 2 Valor 3 Media DS
1 0 17.50 18.00 18.00 17.83 0.24
2 25 8.50 9.00 8.50 8.66 0.24
3 50 4.50 4.70 4.50 4.57 0.09
4 75 2.30 2.25 2.30 2.28 0.02
5 100 1.25 1.20 1.17 1.21 0.03

Promedi
o 0.08
 Alcompararladesviacinestndardecada
dilucinseobservaunpromediode0,08.
El%Errornosuperael0,08%.
Porloqueelrangoevaluadoparaelmtodo
eslinealsegnloestablecidoporel
fabricante,yaqueaconcentracionesbajas
permiteunadesviacinde 0,23mg/dLy
altasa 1,60mg/dL.
Precisin
SueroControldeAc.
Ac. Urico Ac. Urico
ricode5,25y9,01 (mg/dL) (mg/dL)
No. de Lectura Normal Patologico
mg/dL.
20datoscorrida
intrada. Valor Asignado 5.25 0.91

Secalcula: x 5.1587756 8.98855357

media DS 0.082078268 0.11357817

desviacinestndar
CV% 1.591041645 1.26358669
%delcoeficientede
variacin %Error relativo 1.737607617 0.23802924

%Recobro 98.26239238 99.7619708

 DeacuerdoconCLIAparaimprecisin
intraserialointrada,laDSobtenidadebeser
igualomenora delErrorTotalpermitido.
ParaAc.ricoelerrortotalpermitido 5%.
DSIntrada 0,25ET, 1,25%
Sustituyendo
SueroNormal:0,082 1,25%
SueroPatolgico:0,113 1,25%
Veracidad

Laveracidaddelmtodosepuedeestimarpormediodel
errorrelativo.

%deErrorrelativo=[Valorreal Valordelamedicin ]x100

Valorreal
Criterio:
Elvalordelerrorrelativoseamenoroigualalreportado.

Resultados:
SueroNormal:1,73%
SueroPatolgico:0,23%
La veracidad del mtodo se puede estimar por medio del
calculo del porcentaje de recuperacin.

% Recuperacin = [___Valor obtenido___] x 100

Valor de referencia
Criterio:
El % de recuperacin sean menor o igual al
reportado por el fabricante.

Resultados:
Intervalo del fabricante de 97 al 101 %

Suero Normal: 98,26 %

Suero Patolgico: 99,76 %
Incertidumbre

Mtodoenzimticoparalacuantificacinde
cidoricoespectrofotomtricoconuricasa.
Empleandouncalibradorconunvalorde10
0.005mg/dLconunfactordecoberturak=2
paraunniveldeconfianzadel95%.
Componentesdelaincertidumbre

Variabilidadpremetrolgica.
Incertidumbredelvalordelcalibrador.
Magnitudesinfluyentesendgenas.
Imprecisininterdiaria.
Variabilidadpremetrolgica

Elconjuntodeactividadesrealizadasdesdela
tomadelamuestrahastaquelamuestrade
sueroestalistaparalamedicinprovocaun
coeficientedevariacinpremetrolgicade
0,8%.Estavariabilidadaplicadaalresultado
obtenido(5,25mg/dL)correspondeauna
incertidumbreestandarde0,04mg/dL.
Incertidumbredelvalordelcalibrador

Elvalordelcalibradoresde10mg/dLyla
incertidumbreexpandidaesde0,005mg/dL.
Porlotanto,laincertidumbreestndar
relativadelvalorasignadoalcalibradores
0.05%,queaplicadoalresultadoobtenido
(5,25mg/dL)correspondeauna
incertidumbreestndarde0,002mg/dL.
Magnitudesinfluyentesendgenas

Segnelfabricantedelosreactivoselcriterio
paraaceptarqueunaconcentracinde
bilirrubinas,cidoascrbicoobromurode
hioscinaenelplasmaproduzcaunainterferencia
significativaesquenoaltereelvalordel
mensurandoen 10%.
Losposiblescambiosdelvalorverdaderodel
mensurandoestarnenelintervalo[0%;10%]
[10%;0%],aunqueesmsprobablequeest
mscercade0%quedel10% del0%.
Considerandounadistribucintriangular
rectangular:u=[(ba)2/18]0,5
dondeaybson,respectivamente,loslimites
inferiorysuperiordelintervalo;enestecaso:
u=[(100)2/18]0,5 =2,4%
queaplicadoalresultadode5,25mg/dL,
correspondea0,126mg/dL;ycomoestoes
aplicableatresmagnitudesinfluyentes:
Uc =[3X(0,126mg/dL)2 ]0,5=0,027mg/dL
Imprecisininterdiaria

Esteprocedimientodemedidatieneun
comportamientoheterocedsticoconun
coeficientedevariacinmetrolgico,
aproximadamenteconstantealolargodel
intervalodemedida,igualal1,6%.Esta
imprecisininterdiariaaplicadaalresultado
5,25mg/dLyexpresadacomoincertidumbre
estndar,correspondea0,08mg/dL.
Estimacindelaincertidumbre

uc =(0,042 +0,0022+0,0272 +0,082)0,5=

0,047mg/dL
U=uc xk=0,047mg/dLx2=0,094mg/dL

Resultado:
5,25 0,094mg/dL
Intervalo:
5,15a5,34mg/dL
Datosdelaverificacin

VerificacindelMtodoenzimticode
uricasaparaladeterminacindecidorico.
Linealidad:
Elmtodoeslinealde1,2a17.8mg/dL
Precisin:
SueroNormal:DS=0,08;CV=1,59%
SueroPatolgico:DS=0,11;CV=1,26%
 Veracidad: Incertidumbre:
ErrorRelativo U=0,094mg/dL
SueroNormal:1,73% Resultadodela
SueroPatolgico:0,230 muestra:
% 5,25 0,094mg/dL
Recuperacin Intervalo:
SueroNormal:98,26% 5,15a5,34mg/dL
SueroPatolgico:99,76
%
Criteriosdeevaluacindela
normaNMXEC15189IMNC
2008/ISO15189:2007

MP-FE009-00
Entrada en vigor 2009-05-08
Requisitos tcnicos
Requisitos tcnicos
Requisitos tcnicos
Requisitos tcnicos
MUCHASGRACIAS