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8aACIDOS NUCLEICOS 2010 PDF
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CIDOS NUCLEICOS
Los cidos nucleicos estn formados por nucletidos
Los cidos nucleicos, cido desoxirribonucleico DNA y cido ribonucleico RNA, son macromolculas
encargadas de almacenar y transferir la informacin gentica. Ambos estn formados por unidades
llamadas nucletidos, cuya representacin aparece a continuacin.
Al analizar el producto de la hidrlisis total de un nucletido se obtienen siempre tres componentes: una
pentosa, una base nitrogenada y un fosfato. La unin de estas tres molculas en relacin 1:1:1 constituye
un nucletido, unidad bsica o monmero de los cidos nucleicos.
La pentosa puede ser: ribosa o desoxirribosa. La diferencia entre ambas reside en que el grupo hidroxilo
(-OH) del carbono 2 de la ribosa es sustituido por un hidrgeno en la desoxirribosa. Los nucletidos con
ribosa (ribonucletidos) son los constituyentes del RNA, mientras que aquellos que tienen desoxirribosa
(desoxirribonucletidos), constituyen el DNA. Los carbonos (C) de las pentosas se representan como C1
, C2, etc., a diferencia de las bases nitrogenadas que se designan como C1, C2, etc.
Las bases nitrogenadas, son una familia de molculas cclicas derivadas de dos anillos bsicos: purina y
pirimidina. El DNA contiene dos bases pricas, adenina (A) y guanina (G) y dos bases pirimidnicas
citosina (C) y timina (T). Las bases pricas son las mismas en el RNA y DNA, sin embargo en el RNA las
bases pirimidnias, son la citosina y el uracilo (U)
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Los nucletidos pueden contener uno, dos o tres fosfatos, denominndose respectivamente nucletido
mono, di o tri-fosfato.
El ATP es el nucletido ms usado a nivel celular, aunque el UTP, GTP, CTP y TTP se emplean tambin
como donadores de energa en reacciones especficas y en la sntesis de cidos nucleicos.
Otra funcin de los nucletidos es formar parte de las coenzimas.
Muchas coenzimas, como el NAD, NADP y el FAD son dinucletidos que participan en reacciones redox.
Estas molculas las estudiaremos ms adelante. La frmula de la coenzima A aparece abajo.
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Las dos hebras de la hlice se mantienen unidas por los puentes de hidrgeno entre las bases
complementarias: la adenina forma dos puentes de hidrgeno con la timina y la guanina forma
tres con la citosina, como se observa a continuacin.
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Curva de Fusin. La absorbancia a 260nm de una Curvas de Fusin de diferentes DNA con distinto
solucin de DNA aumenta cuando se desnaturaliza. contenido de G+C
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Sin embargo el DNA se debe condensar mucho ms para adaptarse al tamao celular. En la figura se
resumen las sucesivas etapas de condensacin del DNA, desde la doble hlice a los cromosomas. Los
nucleosomas constituyen las unidades bsicas de la cromatina.
Los nucletidos del RNA se denominan ribonucletidos y se unen entre s del mismo modo que se unen
los desoxinucletidos en el DNA: los nucletidos se unen por enlaces fosfodister entre el fosfato C5de
la pentosa y el OH del C 3 de otra pentosa. Las molculas de RNA, en general constan de una cadena
nica polinucleotdica y si bien no adoptan estructura de doble hlice como en el DNA, pueden tener
regiones de apareamiento de bases complementarias en la misma hebra, como se muestra ms adelante
en rRNA.
Si bien en algunos los casos el RNA constituye el material gentico, como en algunos virus, las funciones
del RNA estn asociadas a la sntesis de protenas.
Los principales tipos de RNA son el mensajero (mRNA), el ribosmico (rRNA), el de transferencia (tRNA)
y el nuclear de pequeo tamao (snRNA). En la tabla se resumen las funciones de cada tipo de RNA.
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Observe en la figura que aparece a continuacin las estructuras espaciales complejas que adoptan los
rRNA, donde se ve la alternancia de regiones apareadas y no apareadas en forma de bucles.
Los tRNA son molculas de tamao pequeo que tienen aproximadamente unos 80 nucletidos. Estas
molculas se pliegan formando una estructura tridimensional compleja, presentan 4 segmentos en doble
hlice, que en una representacin sencilla tiene un parecido con una hoja de trbol, segn se ve en la
figura. La forma en hoja de trbol se pliega sobre si misma y adopta una estructura ms compacta y
estable en forma de L, tambin representada en la figura.
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una clula transformada con el gen exgeno se obtiene una planta que se denomina transgnica, que son
clones respecto a la clula original. El proceso se simplificado se representa a continuacin.
Las variedades de maz transgnicos con la protena Bt han demostrado ofrecer un control eficaz de los
taladros de maz, primero en ensayos de campo que se viene realizando desde comienzo de los 90, y
posteriormente en la experiencia comercial, con millones de hectreas cultivadas desde 1997.
Electroforesis de DNA
Cuando se aplica un campo elctrico a molculas con carga neta, stas se desplazarn hacia el polo
contrario a su carga. En este principio se basa la tcnica denominada electroforesis y el desplazamiento
de la molcula en cuestin depende de su carga y su tamao.
Un equipo de electroforesis consta de una fuente de poder que genera el campo elctrico y una cuba,
recipiente con dos compartimentos con un electrodo cada uno. En la foto que aparece abajo se indican
los componentes del sistema.
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Los geles van en la cuba sumergidos en un tampn, con pH superior a 8. De esta forma, las molculas de
DNA o RNA sometidas a electroforesis se desplazarn al polo positivo, porque poseen carga neta
negativa a pH superiores a 5.
Cuando la electroforesis se realiza en un gel, este se comporta como un tamiz y permite separar
molculas segn su tamao y forma. As una mezcla de molculas de DNA de diferente tamao, que
pueden resultar de una reaccin con enzimas de restriccin se separarn en funcin de su tamao. En la
figura que aparece a continuacin se observa un gel de agarosa teido con bromuro de etidio, donde se
visualizan bandas que corresponden a fragmentos de DNA con diferente masa molecular.
Las molculas de DNA de mayor tamao migran menos que las molculas de DNA de menor tamao,
que quedan ms prximas al polo positivo. El empleo de un marcador de masa molecular conocido
permite calcular el tamao de las bandas de DNA.
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