ANLISIS EN MICROSCOPIO PTICO DE NO TEJIDO HECHO POR ELECTROESPINNING

DE SOLUCIN DE POLICAPROLACTONA CON DICLOROMETANO Y

DIMETILFORMAMIDA

Juan Pablo Aristizbal Restrepo 1, Angie Tatiana Toro Martnez 1, Samantha Pamela Araujo del Valle 1
1
Ingeniera en Nanotecnologa, Universidad Pontificia Bolivariana, Medelln, Colombia

* juan.aristizabalr@upb.edu.co, angie.toro@upb.edu.co, samantha.araujo@upb.edu.co.

RESUMEN

El anlisis de materiales a escala micro y nanometrica es considerado un estudio importante al momento de

caracterizar materiales de ingeniera por medio del estudio de sus propiedades. El presente informe
comprende el anlisis y revisin del dimetro, longitud y otras caractersticas ingenieriles de las fibras de una
solucin de Policaprolactona (PCL) disuelta con Diclorometano (DCM) y Dimetilformamida (DMF),
obtenida por el proceso de electrospinning en el laboratorio.

Palabras Clave: Electrospinning, Fibras, Longitud, Solucin, Tamao.

ABSTRACT

The analysis of materials at micro and nanometric scale is considered an important study to characterizing
engineering materials by means of the study of their properties. The present paper includes the analysis and
revision of the diameter, length and other engineering characteristics of the fibers of a solution of
Polycaprolactone (PCL) dissolved with Dichloromethane (DCM) and Dimethylformamide (DMF), obtained
by electrospinning process in the laboratory.

Keywords: Electrospinning, Fibers, Length, Solution, Size.

1. INTRODUCCIN

En los ltimos aos el estudio de los materiales a escala microscpica y submicroscpica ha ganado mucha
importancia en el desarrollo de la industria y sus aplicaciones gracias a sus innumerables avances, uno de
estos avances significativos es el estudio de las caractersticas de los materiales, los cuales varan
significativamente dependiendo la escala a que se trabaja. En este informe se busca estudiar el dimetro de
fibras de una determinada seccin de material no tejido obtenido de una solucin previamente preparada por
el proceso de electrospinning.

Como se menciona anteriormente el primer objetivo de este trabajo es conocer una ponderacin del dimetro
de una seccin de las fibras obtenidas por electrospinning de 50 gr de solucin a un 13%w/w de PCL
disuelta con DCM y DMF a (75/25, %), usando un programa de procesamiento digital llamado Image J, que
arroja una media de la caracterstica a estudiar, en este caso el dimetro, de un nmero determinado de fibras
de una seccin tomada del no tejido.

A lo largo de este informe se busca relacionar la solucin utilizada para el proceso de electrospinning con el
dimetro de fibra obtenido luego de haberse realizado el mismo.
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2. ANLISIS EN MICROSCOPIO PTICO DE NO TEJIDO HECHO POR ELECTRO

SPINNING

Las soluciones polimricas son mezclas liquidas que presentan largas cadenas y pequeas molculas de
disolventes, estas son utilizadas para caracterizar las estructuras de mltiples polmeros que a su vez se
encuentran conformados por un gran nmero de macromolculas, es decir, muchas molculas que se
encuentran enlazadas de forma covalente.

2.1. PREPARACIN DE LA SOLUCIN

Se prepara una solucin de PCL disuelta con DCM y DMF, siendo el primero el soluto y los dos ultimo
los solventes de la solucin.

2.1.1. POLICAPROLACTONA (PCL)

La PCL figura 1 es un polmero semicristalino insoluble en agua el cual presenta un punto de fusin
relativamente bajo entre 59 a 64C y una temperatura de transicin vtrea de -60C. Tiene una gran
capacidad para formar mezclas y emulsiones, adems, es biodegradable y biocompatible, tambin presenta
un proceso de degradacin lento y sufre un proceso de prdida de peso molecular significativo del orden
del 80 - 90% en viscosidad relativa [1].

Figura 1. Estructura de la Policaprolactona [1].

2.1.2. DICLOROMETANO (DCM)

Es un compuesto qumico muy utilizado como solvente por la qumica orgnica. A temperatura ambiente
se presenta como un lquido incoloro y voltil con un olor caracterstico. Es ampliamente utilizado como
intermediario en distintas rutas de sntesis orgnica [2]. Se debe tener en cuenta que la eleccin de
disolvente en la fase orgnica tambin juega un papel importante en el control del peso molecular, ya que
la reaccin parece tener lugar en este lado de la interfase. El disolvente debe mantener disuelto el polmero
(PCL) en crecimiento hasta que ste alcance un tamao suficientemente grande como para precipitar. El
DCM precipitan todas las fracciones polimricas.

2.1.3. DIMETILFORMAMIDA (DMF)

Este lquido incoloro es miscible en agua y la mayora de componentes orgnicos. El DMF es utilizado
como disolvente para reacciones qumicas como disolvente de polmeros.

Se debe tener en cuenta que la preparacin de la solucin est dada en unidades de concentracin,
especficamente en porcentaje peso a peso (% P/P), y para hallar algunas cantidades necesarias para la
preparacin de la misma se hace uso de la siguiente ecuacin.

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Electrospinning

gr soluto
%P/ P= x 100 (1)
gr solucin
En donde: gr solucin=(gr soluto+ gr solvente )

2.2. ELECTROSPINNING

El electrospinning o tambin llamado electrohilado es una tcnica que fue plateada por Anton Formhals en
el ao de 1934, en donde se describa una configuracin experimental para la produccin de filamentos de
polmero haciendo uso de fuerzas electrostticas que son utilizadas para girar las fibras y crear un tejido.
El electrospinning es una tcnica que crea nano fibras por medio de un hilo cargado elctricamente de una
solucin polimrica o un polmero fundido, es decir, un polmero termoplstico que es calentado hasta que
este fluya figura 2 [2].

Figura 2. Diagrama sistemtico de proceso de electrospinning [2].

Cuando la gota de polmero rompe la tensin superficial debido al alto voltaje que se le aplica se crea un
hilo que se dobla debido a la carga elctrica, gracias a esto se crea una fibra que se va enrollando en un
colector haciendo que se reduzca su dimetro.

Para la tcnica de electrospinning se deben tener en cuentas las siguientes consideraciones:

Elegir el solvente adecuado para disolver el polmero.
El solvente debe tener una presin de vapor adecuada, es decir, que se evapore lo suficientemente
rpido para que la fibra se mantenga estable mientras se colecta,
pero no demasiado rpido para permitir que la fibra se endurezca antes de alcanzar el rango de
nanmetros.
La viscosidad y la tensin superficial del solvente no deben ser demasiado altas pues esto evita
que el hilo se forme, ni demasiado bajas para que la solucin polimrica se drene libremente de la
pipeta.

3. DESARROLLO EXPERIMENTAL
Para la preparacin de 50 gr de solucin a un 13%w/w de PCL disuelta con DCM y DMF a (75/25, %), en
primer lugar, se determinan los gramos necesarios de PCL utilizando la ecuacin (1).

w gr soluto gr soluto
= x 100= x 100
w gr solucin ( gr soluto+ gr solvente)

Al tener un 100% de solvente de DCM y DMF (75/25, %) y al necesitar preparar 50 gr de solucin, se

obtiene que:

50 gr
gr solvente= x 100=50 gr
100

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Por lo tanto, se tienen 50 gr de solvente. Ahora haciendo uso de la ecuacin (1) y llamando a los
gr soluto x, se tiene

x
13 = x 100
( x+ 50 gr )

13(x +50 gr )=100 x

13 x+650 gr=100 x

650 gr =100 x13 x

650 gr =87 x

650 gr
x=
87

x=7,4 gr

De esta manera se necesitan 7,4 gr de PCL, sin embargo, tambin se deben calcular los gramos de DCM y
DMF que se deben aadir a la solucin a partir de los porcentajes dados (75/25, %), teniendo en cuenta
que:

gr solucin=( gr soluto+ gr solvente )

Y se necesita preparar 50 gr de solucin

50 gr solucin=(gr soluto+ gr solvente)

Si tenemos 7,4 gr de soluto, por ende, el equivalente de gr solvente necesarios ser

gr solvente=50 gr solucin7,4 gr soluto

gr solvente=42,6 gr

Ahora, si se sabe que se necesita 42,6 gr de solvente para obtener 50 gr de solucin, entonces:

42,6 x 75 DM
x= =31,95 gr DCM
100

42,6 x 25 DMF
x= =10,65 gr DMF
100

3.1. PREPARACIN DE LA SOLUCIN

Despus de calcular los datos tericos de la cantidad necesaria de soluto y solvente, se procede al
desarrollo experimental.

PASO 1: Se pesan 7,4 gr de PCL puesto en una capsula de Petri utilizando una balanza electrnica

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PASO 2: Se cubre un corcho de caucho con papel adherente de laboratorio, se hace con el fin de que al
pesar los gramos de solvente necesarios en un Erlenmeyer, este se pueda sellar y por ende el solvente no
se evapore.

PASO 3: Se pone un Erlenmeyer en la balanza electrnica y haciendo uso de un pipeteador se pesan 31 gr

de DCM y 10 gr de DMF . Despus de pesar los gramos de solvente, se sella el Erlenmeyer con el
corcho para evitar que los solventes se evaporen.

PASO 4: Haciendo uso de una plancha de calentamiento a condiciones de temperatura de 45C y de

agitacin de aproximadamente 328 rpm, se pone el Erlenmeyer que contiene el solvente y se le aade la
mitad del soluto antes pesado, al disolverse la cantidad de soluto aadido se agrega la mitad restante.

3.2. ELABORACIN DEL NO TEJIDO A PARTIR DE LA TCNICA DE

ELECTROSPINNING

Para la elaboracin del no tejido que se va a analizar en el microscopio ptico, se lleva la solucin
preparada de PCL con DCM y DMF a electrohilar.

PASO 1: Se deposita la solucin en una jeringa mdica comercial de tipo Luer que tiene rosca en la punta
para conectar de forma segura la aguja, y se usa una aguja de calibre 21G (verde). Despus de depositar la
solucin en la jeringa se procede a sacar el aire que se encuentre en esta.

PASO 2: Se cubre el colector con papel aluminio y se conecta a una fuente de voltaje (nodo).

PASO 3: Se deposita la jeringa en el dispositivo de electrohilado que se encuentra en unas condiciones de

humedad de 49,5% una temperatura de 28,5 C y se conecta el ctodo en la aguja teniendo en cuenta que
esta se encuentra a una distancia aproximada de 15 cm del colector, se comienza a aumentar el voltaje
hasta aproximadamente 15 kV hasta que se da una ruptura de la tensin superficial de la solucin y se
forma un hilo. En el momento en el que se da la ruptura en la tensin superficial de la gota se espera
alrededor de 10 minutos para obtener la cantidad tejido necesario para el anlisis de microcopia.

3.3. ANLISIS DE LA MUESTRA EN EL MICROSCOPIO PTICO

Antes de un anlisis de microscopia se debe realizar una preparacin previa a la muestra que se desea
analizar.

3.3.1. PREPARACIN DE LA MUESTRA

PASO 1: Se toma un portaobjetos y se limpia con etanol.

PASO 2: Despus de limpiar el portaobjetos, se toma cinta doble faz y se corta una porcin del tejido
obtenido. Ahora la muestra se encuentra lista para ser analizada.

3.3.2. RESULTADOS Y DISCUSIN.

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Para hacer el respectivo anlisis de la muestra se implementa un microscopio ptico Leica DM750 el cual
se encuentra previamente calibrado, se toman fotografas en diferentes aumentos como se puede observar
en la figura 3.

Figura 3. Fotografas hechas en microscopio ptico de tejido elaborado por electrohilado, de arriba abajo y de izquierda a
derecha: aumento 10x, aumento 20x, aumento 100x y aumento50x, teniendo que la escala de calibracin es de 50c.

Ahora haciendo uso del programa de procesamiento digital Image J se toman 3 medidas de dimetro a
cada fibra, haciendo finalmente una toma de 60 dimetros con su respectiva desviacin estndar a 20
fibras figura 4, se debe aclarar que este anlisis se realizara con las fotografas obtenidas con una
magnificacin de 500x y 1000x debido a que fueron las que presentaron una mayor resolucin, es decir, se
puede observar una mayor cantidad de fibras.

Figura 4. Medida de tres dimetros a veinte fibras con Image J.

En la figura 4 se puede observar las secciones de fibra a las cuales se les tomaron mediciones de tres
dimetros, y a partir de ello se construye la tabla 1 la cual contiene el dimetro de Feret y la desviacin de

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estndar para cada fibra, se debe tener en cuenta que se tomaron medidas de dimetro a 20 fibras, por esta
razn se encuentran tabulados 60 valores de dimetro y desviacin estndar

Tabla 1. Valores tabulados de dimetro y desviacin estndar para fibras hechas por electrohilado a partir
de solucin de PCL con DCM y DMF.

Con los datos obtenidos en la tabla 1, se presenta el siguiente histograma con los datos de dimetro por
cada fibra figura 5.

Figura 5. Histograma de Dimetro de fibras obtenida a condiciones de concentracin 13%p/p, humedad de 49,5% una
temperatura de 28,5 C, una distancia al colector de 15 cm y una carga elctrica de 15 kV .

De la figura 5 las variaciones en los dimetros de la fibra pueden ser debidas a factores que no se han
podido controlar de forma ptima durante la practica experimental, como puede ser la temperatura, ya que
cuando se estaba preparando la solucin con PCL calentndolo al inicio a aproximadamente 45C , sin

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embargo no haba un sistema para mantener dicha temperatura, por lo que a medida que pasa el tiempo
entre experimentos, la temperatura puede variar, lo que puede influir directamente en la viscosidad del
fluido, parmetros que pueden afectar el experimento. A continuacin, se presenta una tabla con el
dimetro de la fibra y la frecuencia absoluta con las que estos se repiten tabla 2.

Tabla 2. Valores tabulados de frecuencia absoluta para dimetros de fibra.

A partir de los datos obtenidos de la tabla 2, se realiza el siguiente histograma de frecuencia contra
dimetro de fibra figura 6.

Figura 6. Histograma de frecuencia contra dimetro de fibra.

De la tabla 2 y de la figura 6, se puede observar que el dimetro que presenta una mayor frecuencia es
2,106 pues se repite 3 veces. Adems, los valores promedio y la desviacin estndar tomados de la tabla 1
son:

Dimetro=3,444 1571,5

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Se debe tener en cuenta que la informacin que se obtiene del anlisis de la muestra de tejido es muy
variada. Aparentemente se observa informacin muy cualitativa, es decir, puede llegar a ser de segundo
plano. Sin embargo, la informacin que podemos obtener de este anlisis deben de estar de acuerdo con su
forma externa o morfologa.

Se puede decir que la composicin de la solucin que se usa para obtener el no tejido se puede ver
afectada en gran medida por las condiciones del ambiente y las de cada uno de los instrumentos utilizados
durante el proceso de laboratorio, el tipo de solucin y la proporcin de cada uno de los componentes, as
como su concentracin, y a su vez cambiar completamente aspectos relacionados a la longitud, dimetro y
aspecto de la fibra obtenida [3].

4. CONCLUSIONES

La ciencia de las fibras es uno de los campos ms prometedores de la industria nanotecnolgica textil ya
que puede permitir una exploracin ms completa de la nanotecnologa en las distintas disciplinas de los
polmeros. Las nanofibras tienen mltiples aplicaciones en diferentes campos, como los textiles
protectores, la filtracin, la administracin de frmacos, entre otros.

La produccin de nanofibras sigue siendo a nivel de laboratorio mediante la tcnica de electrospinning,

un mtodo econmico y eficiente para la fabricacin de fibras en escala micro y nanomtrica, que permite
ajustar al investigador las caractersticas que se desee obtener en las fibras a travs de modificaciones en
los parmetros, estos parmetros influyen en las caractersticas de las fibras, y a su vez estn ntimamente
relacionados y dependen de las caractersticas intrnsecas del material utilizado, los parmetros del
proceso, el mtodo de obtencin y las caractersticas ambientales. En este caso se hizo uso de soluciones y
materiales especficos, sin embargo, se puede resaltar, que la tcnica de electrospinning puede ser usada
con xito con distintas soluciones a diferentes condiciones, ya que es un mtodo muy verstil.

Ahora teniendo en cuenta el anlisis de resultados se puede terminar diciendo que el mtodo de medidas
de dimetros, es fcil de aplicar si las imgenes obtenidas en el microscopio son ptimas para este
proceso, es decir, se obtengan imgenes con buena resolucin, pero puede tornarse un poco complejo, si
no se obtiene buenas imgenes a las cuales se les pueda hacer la respectiva medida, ah es donde es
necesario jugar con los haces de luz utilizados en el proceso, ya sean transmitidos o reflejados, pues cada
uno de estos brindar distinta informacin que nos sirve en gran medida para realizar el respectivo anlisis
de las estructuras que se desean estudiar.

5. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

[1] Martnez, M.P., Diseo y estudio de una mquina de electrospinning,

[http://upcommons.upc.edu/bitstream/handle/2099.1/7123/03_Mem%C3%B2ria.pdf?sequence=4], Medelln,
aristizabal2601@gmail.com

[2] Bellmunt, S.A, Mezclas de microfibras de polilctida y polietilenglicol: material compuesto con
aplicaciones biomdicas, [https://upcommons.upc.edu/bitstream/handle/2099.1/20969/PFC_Sergi
%20Bellmunt.pdf?sequence=1&isAllowed=y], Medelln, aristizabal2601@gmail.com
[3] Kazutoshi, F, Nanofiber construct and method of preparing thereof,
[https://patents.google.com/patent/US20060154063A1/en?q=electrospinning&q=Polycaprolactone], Medellin,
aristizabal2601@gmail.com

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