Universidad Industrial de Santander

Facultad de Salud
Escuela de Microbiologa y Bioanlisis
Hematologa II
Gua de Laboratorio
Cecilia Salamanca Ojeda, Martha Lucia Snchez,
Docentes
Ruth Stella Snchez y Wendy Nieto Prez

LAS PLAQUETAS

1. Introduccin:

Las plaquetas son discos de forma elipsoidal y provienen de una clula hematopoytica,
que da lugar a la lnea megacarioctica. En 1906, Wright demostr que estas partculas se
formaban en la mdula sea por la fragmentacin del citoplasma de una clula poliploide,
el megacariocito.

El recuento normal de plaquetas es de 150.000-450.000 x mm 3 y tienen como funcin

principal la de prevencin y detencin de la prdida de sangre del torrente circulatorio.

Se calcula que en un individuo normal 42 x 10 9 plaquetas/L/da aproximadamente se

renuevan de la circulacin, con un tiempo promedio de supervivencia de 8 das, siendo el
bazo el sitio donde se destruyen ya que un tercio de las plaquetas en circulacin se
localizan en l debido al enlentecimiento de la corriente sangunea en las sinusoides
esplnicas.

Para la comprensin del fenmeno de adhesin y agregacin plaquetaria, as como de la

liberacin de sus grnulos es importante comprender las caractersticas estructurales
especiales de las plaquetas.

Las plaquetas participan en la hemostasia primaria su funcin es comenzar el proceso de

formacin de un tapn (cogulo) en respuesta a la lesin de un vaso sanguneo, a fin de
evitar o minimizar las hemorragias. Entre sus funciones estn la adhesin, agregacin,
asociacin con otros elementos celulares se realizan principalmente por la actividad
funcional de las integrinas, las cuales favorecen la unin de las plaquetas al endotelio
vascular (a travs de las protenas adhesivas).

Anomalas en el comportamiento de las integrinas pueden provocar el importante

sndrome de plaquetas gigantes de Bernard-Soulier y la enfermedad de Glanzman, donde
la unin plaqueta -fibringeno se encuentra severamente alterada; su caracterstica
principal es la deficiente retraccin del cogulo. Tanto el sndrome de Bernard-Soulier
como la enfermedad de Glanzman se caracterizan por un tiempo de sangramiento
prolongado.

TROMBOCITOSIS: Aumento de plaquetas. En algunos casos estas plaquetas no

funcionan adecuadamente y provoquen un bloqueo en los vasos sanguneos, conocido
como trombo. Con menos frecuencia, una gran cantidad de plaquetas tambin puede
provocar problemas hemorrgicos.
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Causas TROMBOCITOSIS:
cambios adquiridos (mutaciones) del ADN de una nica clula que produce la
sangre. Esto da como resultado una superproduccin de plaquetas en la mdula
sea.
Anemia por dficit de hierro
Enfermedad de Kawasaki
Sndrome nefrtico
Sndrome post-esplenectoma (tras extraer el bazo)
Traumatismos
Tumores
Trombocitosis primaria

Pruebas y exmenes
Un examen fsico puede mostrar hepatomegalia o esplenomegalia. Puede haber
circulacin anormal en los pies o los dedos de los pies, al igual que dao a la piel causado
por dicho flujo de sangre anormal.

Otros exmenes pueden abarcar:

Aspirado medular y biopsia.
Conteo sanguneo completo.
Pruebas genticas (para buscar un cambio en el gen JAK2).
Nivel de cido rico.
Protena C reactiva

TROMBOCITOPENIA: Disminucin en el nmero de plaquetas que puede estar asociada

con sangrado.

Causas:
1. Produccin insuficiente de plaquetas en la mdula sea:
Anemia aplsica
Cncer en la mdula sea como leucemia
Cirrosis (cicatrizacin del hgado)
Deficiencia de folato
Infecciones en la mdula sea (muy poco comn)
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Sndrome mielodisplsico (la mdula sea no

produce suficientes clulas sanguneas o las produce defectuosas)
Deficiencia de vitamina B12

2. Incremento de la descomposicin de las plaquetas en el torrente sanguneo:

Causado por medicamentos : quimioterapia

3. Incremento de la descomposicin de las plaquetas en el bazo o en el hgado

Coagulacin intravascular diseminada (CID)
Trombocitopenia no inmunitaria inducida por medicamentos
Trombocitopenia inmunitaria inducida por medicamentos
Hiperesplenismo (inflamacin del hgado)
Prpura trombocitopnica inmunitaria (PTI)
Prpura trombocitopnica trombtica

CONCENTRACIN CONCENTRACIN
AUMENTADA DISMINUIDA
PLAQUETAS Despus de Prpura
esplenectoma trombocitopnica
Hemorragia inmunitaria
Anemia por deficiencia Anemia aplsica
de hierro Anemia megaloblstica
Trastornos Sndromes
mieloproliferativos mielodisplsicos
Leucemia aguda

2. METODO DIRECTO:

Materiales:
- Muestra de sangre con EDTA
- Pipeta de glbulos rojos
- Cmara de neubauer
- Laminilla de cuarzo
- Papel filtro
- Caja de petri
- Lminas
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Reactivos
- Oxalato de amonio al 1%
- Aceite de inmersin
- Colorante de Wright
- Agua destilada
- Solucin limpiadora
2.1 RECUENTO CELULAR EN CAMARA DE NEWBAWER O HEMOCITOMETRO

Mtodo directo con dilucin en pipeta de glbulos rojos:

1. Mezcle muy bien la sangre para obtener una muestra homognea
2. Tome la pipeta de glbulos rojos y llnela de sangre hasta la marca de 1, con la
ayuda de una manguerita y jeringa de insulina.
3. Elimine el exceso de sangre que queda en las paredes de la pipeta para no
contaminar el diluyente
4. Complete hasta la marca de 101 con oxalato de amonio al 1% o reactivo de Rees -
Ecker
5. Mezclar la pipeta fuertemente por 3 minutos.
6. Descarte las 3 o 4 primeras gotas y llene la cmara de neubauer
7. Coloque la cmara en ambiente hmedo ( deje la cmara en una caja de petri que
contenga papel absorbente hmedo) por 10 minutos
8. Coloque la cmara sobre el microscopio, con objetivo de 10X ubique la cuadrcula
central, pase a objetivo de 40X y lea las plaquetas en los 25 cuadrantes, las
plaquetas se observan como estructuras pequeas, opacas, redondas o alargadas
a veces con prolongaciones, no olvide descartar las plaquetas que toquen las
lneas que demarcan la cmara y evite contarlas dos veces
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CALCULOS:
El nmero de plaquetas por mm se calcula de acuerdo a:
Volumen del rea contada: 0.1 mm ( 1 X 1 X 0.1)
Dilucin utilizada: 1:100
Numero de clulas contadas

Plaquetas por mm = N de clulas contadas X 1 X dilucin

Plaquetas por mm = N de clulas contadas X 10 X 100

Plaquetas por mm = N de clulas contadas X 1.000

Valores de referencia

El rango normal para el recuento de plaquetas es de:

150.000 450.000 / mm

FUENTES DE ERROR:

Cuando se utilice sangre capilar, utilizar una gota obtenida libremente

Cuando se utilice sangre con EDTA, mezcle bien el espcimen invirtiendo como
mnimo 20 veces el tubo antes de tomar la muestra para el montaje. Nunca agite el
tubo fuertemente, por que produce espuma y dificulta el pipeteado.
Las pipetas utilizadas deben estar limpias y secas. La pipeta debe llenarse
rpidamente y siempre limpiar la punta de la pipeta con un papel absorbente.
Evite la formacin de burbujas en la pipeta de rojos
No contamine el diluyente, siempre limpie la pipeta de rojos con papel absorbente.
Descarte las primeras gotas.
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Un nmero suficiente de clulas deben contarse

para reducir el error debido a la distribucin de las clulas. Como mnimo 100
plaquetas deben ser contadas. Y la diferencia entre conteos no debe ser superior
al 10%
Se debe tener cuidado con las soluciones diluyentes, estas no deben estar
contaminadas porque estas partculas pueden ser confundidas con plaquetas y dar
un falso aumento del recuento
Los lquidos diluyentes deben mantenerse refrigerados y se deben filtrar para no
aumentar los recuentos
La presencia de acmulos plaquetarios evita conteos precisos. Si la muestra tiene
agregados, tome nueva muestra.

2.2 METODO INDIRECTO: RECUENTO DE PLAQUETAS EN LMINA

Fundamento:

Se basa en el conteo de plaquetas en 10 campos con un aumento de 100x, utilizando un

extendido de sangre perifrica coloreado con Wright. Se halla el promedio de plaquetas
por campo y se multiplica por un factor:
Muestra de puncin capilar: 20.000
Muestra recolectada con EDTA: 21.000.

Se debe escoger el campo donde los glbulos rojos apenas se toquen. La lmina debe
ser realizada con sangre sin anticoagulante para poder evaluar la agregabilidad
plaquetaria.
Mtodo indirecto (lmina)

1.Realizar el extendido de sangre perifrica de acuerdo al procedimiento explicado en

clases anteriores
2.Colorear el extendido con wright, una vez coloreado el extendido deje secar
3.Observe con objetivo de 10X para ubicar la zona adecuada para el conteo (zona donde
los glbulos rojos apenas se toquen)
4.Una vez ubicada la zona ideal pase al objetivo de 100X (aceite de inmersin)
5.Contar las plaquetas en 10 campos microscpicos, sumar y dividir el resultado en 10, el
valor obtenido se multiplica por el factor segn el tipo de muestra a analizar.
6. El resultado se da en mm3
7.Si el recuento de plaquetas es muy bajo contar en 20 campos, promediar y multiplicar
por el factor.
8.Este mtodo da un recuento aproximado del valor total de plaquetas
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No. Plaquetas/mm3: Plaquetas contadas en 10 campos X 21.000

10

VALOR NORMAL: 150.000-450.000/mm3

Conclusiones

Cada mtodo para recuento de plaquetas es diferente y cada uno de ellos genera un
margen de error, un recuento manual presenta un error mayor al que se obtiene a travs
de un equipo automatizado, los mtodos indirectos son recuentos aproximados de los
recuentos reales del paciente.

BIBLIOGRAFIA

1. BERRIO, M. et-al El hemograma, anlisis e interpretacin con las tres

generaciones. Editorial Universidad de Antioquia. Medelln, Antioquia 2003.
2. MIALE JB. Hematologia medicina de laboratorio 6 ed. Barcelona: Revert; 1985.
3. LEE GR. Et al. Wintrobes clinical hematology. Filadelfia: Williams & Wilkins; 1999.
4. WILLIAM WJ. Et al. Hematology. 5 ed. Nueva York. San Luis; 1995.
5. VIVES J.L. Manual de Tcnicas de Laboratorio en Hematologa. Editorial Salvat.