Ctedra de Anatoma e Histologa

FFyB UBA

Entrenamiento para Exmenes Regulatorios

Actividades TP 1

1) Usted recibe una muestra para la determinacin de distintos tipos de macromolculas. Complete el
siguiente cuadro indicando en cada caso qu colorante utilizara, a qu tipo de tcnica corresponde,
y qu color predominante observar en la muestra.

MACROMOLCULA COLOR PREDOMINANTE

COLORANTE TIPO DE TCNICA
A DETERMINAR OBSERVADO

Hidratos de carbono

Lpidos

Protenas

ADN

2) Usted est siguiendo un protocolo para realizar la tcnica histolgica convencional, y se enfrenta a
ciertos inconvenientes. Una con flechas indicando cul/es podra/n ser las posibles causas de cada
uno de los problemas. Justifique en todos los casos.

PROBLEMA POSIBLE CAUSA

La hematoxilina y eosina
a. No se puede cortar la
no se solubilizaron en la
muestra con micrtomo.
muestra
En el paso previo a la
coloracin utiliz xilol en lugar
de agua destilada.

Invirti el orden de los

b. El cubre objetos no adhiri
al portaobjetos ni a la muestra.
alcoholes de hidratacin.
La muestra no se incluy
bien en parafina
Invirti el orden de los
alcoholes de deshidratacin.

c. Al ver los preparados al MO,

El blsamo de Canad no Olvid el paso de aclaracin
observa que casi no tenan
se peg a la muestra con xilol.
color.
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JUSTIFICACIN:

a. __________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________

b. __________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________

c. __________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________

3) Usted recibe un preparado histolgico para diagnosticar. Para cada una de las siguientes situaciones,
indique las posibles causas del problema y justifique cmo lo solucionara.

a. Est enfocando el preparado y al observar por los oculares ve todo negro.

_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
b. Sin darse cuenta rompe el preparado histolgico contra la lente objetivo.

_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
c. Luego de observar el preparado con un objetivo de 10X, desea pasar a 40x y no logra enfocarlo.

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_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________

4) Usted trabaja en un laboratorio de tcnica histolgica que se divide en cuatro reas, cada una
encargada de analizar distintos aspectos de los tejidos:
Ultraestructura celular
Superficie de las clulas
Tejidos muertos teidos con hematoxilina y eosina
Tejidos vivos teidos con azul de metileno
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Le encargaron la tarea de comprar un microscopio para cada una de las reas, y para ello dispone de un
catlogo con las siguientes opciones:
a. Microscopio ptico de campo claro con oculares de 10X, objetivos con aumentos entre 4X y
100X, y una apertura numrica (AN) de 0.60 en la lente de 40X.
b. Microscopio ptico de campo claro con oculares de 10X, objetivos con aumentos entre 4X y
100X, y una apertura numrica (AN) de 0.40en la lente de 40X.
c. Microscopio ptico de campo claro con oculares de 10X y 20X, objetivos con aumentos entre
4X y 100X, y una apertura numrica (AN) de 0.60en la lente de 40X.
d. Microscopio ptico de fluorescencia con oculares de 10X, y el objetivo 40X con una apertura
numrica (AN) de 0.40.
e. Microscopio electrnico de transmisin.
f. Microscopio electrnico de barrido.

Decida qu microscopio es el ms adecuado para cada rea y justifique.

Ultraestructura celular

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_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
Superficie de las clulas

_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________
Tejidos muertos teidos con hematoxilina y eosina

_____________________________________________________________________________________
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Tejidos vivos teidos con azul de metileno

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Ayuda

1) Opciones para completar en el cuadro:

COLOR PREDOMINANTE
COLORANTE TIPO DE TCNICA
OBSERVADO
cido perydico + Rtvo de Schiff Histolgica convencional Azul
cido clorhdrico + Rtvo de Schiff Histoqumica Violeta
Sudan Inmunohistoqumica Fucsia
Alcian Blue Con metales pesados para ME Negro
Orange G Naranja
Tetrxido de osmio
Sales de plata
Hematoxilina
Eosina

2) Tenga en cuenta la secuencia de pasos de la tcnica histolgica convencional.

Cul es el objetivo de los pasos de hidratacin, deshidratacin y aclaracin? Qu
consecuencias trae olvidarse esos pasos?

3) Tenga en cuenta la secuencia de pasos para enfocar un preparado histolgico al MO.

Posibles problemas:
El MO esta desenchufado.
Est intentando enfocar el preparado histolgico con la lente objetivo de 40x.
La platina con el preparado se encuentra alejada de la lente objetivo.
El revlver se encuentra torcido y no hay ninguna lente objetivo seleccionada.
Us el tornillo macromtrico con el objetivo de 40x.
El haz de luz no se encuentra atravesando el corte de tejido en el preparado histolgico.
Us el tornillo macromtrico para subir la platina mirando por los oculares.
La fuente de luz del MO no est encendida.
El preparado se encuentra con el cubre hacia abajo.

4) Tenga en cuenta la utilidad de cada tipo de microscopio.

Para microscopa ptica:

LR = 0.62 * / AN
AN = sen* n