MAPEO GENTICO

MAPA DE LIGAMENTO
MAPA DE RESTRICCIN
Integrantes:
Cruz Martnez Nashielly Betsabe
Martnez Flores Gnesis Gabriela
Martnez Jurez Ithayetzi Veniss

Sntibaez Surez Linda Jennifer

Toms Vsquez Sandra Lili

Alfred Henry Sturtevant

Genetista estadounidense
creador del primer mapa gentico de un cromosoma en 1913

principales objetivos
Proyecto del genoma humano
desarrollar nuevas
para identificar herramientas
nuevos genes y
entender su
funcin.

mapeo gentico.

Representacin
esquemtica

Mutaciones

Rasgos
especficos
de un
cromosoma

Posiciones
de los
genes

Mapa
cromosomico

ADN

muestra

ventajas

Deteccin
temprana de
enfermedades.
Prevencin de
enfermedades
genticas.
Informacin
especifica del ADN

Pruebas de paternidad o parentesco

Compatibilidad en la donacin de rganos
Comparacin e identificacin de personas en profesiones de alto
riesgo

Mapeo fsico

Restriccin

ligamiento

Localizacin
fsica de los
cromosomas.

Muestra la
localizacin
relativa de
dianas de
restriccin a lo
largo de un
segmento de
DNA

Se basa en
medir la
frecuencia con
la cual 2 genes
permanecen
juntos
duramente la
miosis

Se utilizan
tcnicas de
biologa
molecular y
PCR

 El establecimiento del mapeo gentico (linkage maps).

Mapas meiticos
Loci se encuentran en
diferentes cromosomas
se separan al azar en
los gametos.

Pero
Los que se encuentran en un mismo cromosoma tienden co-segregar
A menos
que un
evento

de

Recomb
inacin

Rompa la asociacin parental

STE FENMENO DE ENTRECRUZAMIENTO (crossing- over)

SE VISUAIZA
(en los
cromosomas)

QUIASMA

Para desarrollar este tipo de

mapas de ligamiento hace
falta realizar cruzas de
animales

 La probabilidad de que dos genes sean separados por un evento de

recombinacin depender de la distancia que haya entre ellos.
En el caso de dos loci no ligados
50% tipo
parental y
50% tipo
no parental

En el caso de dos loci ligados

Tipo
parentales
ser siempre
mayor al 50%

NUMERO DE
ENTRECRUZAMIENTOS

MAPA DE LIGAMENTO
Es un diagrama de los rearreglos lineales de los genes
localizados en un cromosoma dado.
Diseados a principios del siglo XX.
Thomas H. Morgan y sus discpulos (Alfred H. Sturtevant).

Usando cruzas de la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster) y

fueron aplicados posteriormente a los mamferos.

Para desarrollar este tipo de

mapas es esencial cruzar
animales (generacin parental)

Que tengan alelos diferentes en

dos o ms loci, para poder
estudiar el patrn de segregacin
en la descendencia.

Es por esta razn que los mapas de ligamiento dependen

enormemente de la disponibilidad de polimorfismos (la existencia
de 2 ms alelos en un locus dado).

 Existen un par de puntos a tener en cuenta con respecto a estos mapas:

1. Para establecer el orden de los loci se requiere, por definicin, que al
menos un evento de recombinacin rompa el orden lineal de origen
parental. Esto es poco frecuente si los dos marcadores estn fuertemente
ligados.
2. La densidad de un mapa gentico estar correlacionada con el nmero
de polimorfismos que segregan en una cruza particular, mientras que su
resolucin depende del nmero de gametas (= nmero total de meiosis)
analizadas en la progenie.

MAPAS DE RESTRICCIN

ENZIMAS DE RESTRICCIN
Son protenas que reconocen secuencias particulares
del ADN, unindose a ellas y cortando en sitios
especficos.
Son empleadas en el laboratorio para cortar
molculas de ADN.
Es decir que la
secuencia de
bases leda de 5 a
3 en ambas
hebras es la
misma (fig.1)

Las secuencias reconocidas por las enzimas de

restriccin son generalmente de cuatro o seis pares
de bases y palindrmicas.

 Figura 1. Algunos ejemplos de enzimas de restriccin empleadas en el laboratorio. Las flechas indican
los sitios de corte.
Algunas enzimas de restriccin cortan cada cadena del
ADN en diferente sitio, dando lugar a extremos
pegajosos, mientras otras cortan en el mismo sitio
ambas cadenas, dando lugar a extremos romos (fig.1).

Cada enzima trabaja bajo condiciones

apropiadas de concentracin salina,
pH y temperatura.

Una molcula de ADN cortada por una determinada enzima de

restriccin originar una serie de fragmentos cuyo nmero y tamao
depender de la cantidad y la localizacin de los sitios de
reconocimiento que existan para esa enzima en esa molcula de ADN.

Los fragmentos generados por la digestin con enzimas de

restriccin pueden unirse por la accin de una enzima,
denominada ADN ligasa, que forma enlaces fosfodiester entre
extremos 5 y 3 de los nucletidos.

Los extremos romos pueden unirse independientemente de la

secuencia que contengan, mientras que los extremos pegajosos
slo se unirn si existe complementariedad entre las porciones de
simple cadena.

Las enzimas de
restriccin y las
ADN ligasas son
herramientas
claves para la
clonacin de ADN.

Molcula de
ADN cortada

Una serie de
fragmentos

Enzima
Por

Por medio
Por esta
digestin

Estos fragmentos
generados

Con enzimas de
restriccin

ADN ligasa

Se unirn
Extremos
romos

Independienteme
nte ala secuencia

Enzimas de
restriccin y ADN
ligasa

Clonacin del
ADN

Un fragmento de
ADN

Obtenerse por
una digestin
por un enzima
de restriccin

Si hay
complement
aridad

Agregando
un plsmido
o un vector

Introdccuido en
una clula
huesped

Enlaces de
fosfodiester
Extremos
5y 3 de
los
nucleotidos
Extremos
pegajosos

Replicar y
expresarse

Mapas de
restriccion

Fragmentos
de ADN

electroforesis

Aplicar
corriente
electrica

En geles de
agarosa

ADN con
carga
negativa

migre

Electrodo
positivo

Su velocidad
de migracin

Deltamao del
fragmentos

Concentraciones
altas de agarosa
para ver y separar
fragmentos
pequeos de
ADN.

Concentraciones
bajas de agarosa
cuando se trate
de separar
fragmentos
grandes.

VELOCIDAD DE MOVIMIENTO DE LOS

FRAGMENTOS

CONCENTRACIN

Un factor importante en la electroforesis es

la concentracin de agarosa en gel

 Tras la corrida electrofortica, los distintos fragmentos de ADN

as separados son visualizados por tincin.
Bromuro de etidio el cual se intercala entre las bases del ADN y
fluoresce bajo la luz ultravioleta .

Digestin con
enzimas de
restriccin

La representacin de una
molcula de ADN, ya sea
circular o lineal, donde se
indiquen los sitios de
restriccin que poseen

Electroforesis
en gel

Anlisis de
restriccin

MAPA DE RESTRICCION

Mapa de restriccin del plsmido YIP5 de 5.541 pb. Los nmeros

indicados despus de cada enzima de restriccin indican las
posiciones de los sitios de corte