PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGIA No

1
EL MICROSCOPIO

CIFUENTES BOLAOS MARIA ISABEL

GUERRERO CORAL BAYRON SEBASTIAN

A:
NELSON ROJAS

FACULTAD DE INGENIERIA CIVIL

PROGRAMA INGENIERIA AMBIENTAL
UNIVERSIDAD DEL CAUCA

EJERCICIO 1. EL MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO

1. Observe el poder de aumento y la apertura numrica de los lentes del microscopio

(Nikon). Estos valores estn estampados o pintados en la superficie lateral de los
objetivos. Registre el poder de aumento y apertura numrica de cada uno de los lentes en
el espacio que se muestra a continuacin.
Aumento (x)

4X
10X
20X
40X
100X

Apertura
numrica
(AN)
0.12
0.25
0.50
0.65
1.25

Escriba la apertura numrica del condensador: 090/1.25

Escriba el aumento de los oculares y si son normales o de campo amplio:
WF-10X/18 NORMALES
El mximo de resolucin depender de la apertura numrica mayor
efectiva del sistema. El valor ms alto est dado por el objetivo 100X, o
lentes de aceite de inmersin.
Indique la apertura numrica de los lentes: 100X N.A 1.25
Indique la apertura numrica del condensador: N.A 090/1.25
La apertura numrica para la interfase de aire :
1.0
La apertura numrica para la interfase de aceite:
1.3 1.5
La apertura numrica mxima efectiva es el valor ms bajo de los
enumerados. Depende del ngulo y por lo tanto del mximo
posicionamiento del condensador. Usando el valor de NA ms bajo de los
listados anteriormente como apertura numrica de trabajo, calcule el
lmite de resolucin para su microscopio, asumiendo la luz violeta con
una longitud de onda de 400 nm.
lmite de resolucin

A partir de la ecuacin:
calculado para su microscopio es:
Lmite de resolucin =

0.61 x
N.A

, y por lo tanto, el valor

0.61*400nm
0.12

= 2033.3 nm

Taller microscopa ptica

1. Porqu los objetivos de inmersin tienen mayores aperturas numricas que los
lentes secos (sin aceite)?
a. Se usan ms cercanos al espcimen, por lo tanto sus lentes interceptan luz a
ngulos que los lentes secos la podran perder.
b. El aceite usado con los lentes previene la refraccin de la luz lejos de los
objetivos como se produce con las lentes secas.
c. El aceite usado con los lentes incrementa las diferencias entre los ndices
refractivos del portaobjetos y el medio entre el portaobjetos y los lentes del
objetivo.
d. a y b
e. b y c
2. Qu tipo de luz visible da la mejor resolucin en el microscopio de luz?
a. Rojo
b. Verde
c. Amarillo
d. Naranja
e. Azul
La iluminacin ptima debe ser brillante, sin resplandores y en lo posible debe
dispersarse de manera uniforme en el campo de observacin. Si se emplea luz
visible (fotones) es usual que al microscopio se le denomine fotnico. En sus
inicios, la microscopa se practicaba con iluminacin por reflexin; se utilizaba
un espejo que se orientaba para recoger la luz solar o en su defecto, luz
artificial (la luz de una vela, mechero a gas, lmparas de aceite o petrleo) y la
desviaba hacia la preparacin.
3. Todos los siguientes organismos pueden observarse con el microscopio de campo
claro excepto:
a. Virus
b. Hongos
c. Algas
d. Protozoos
e. Bacterias
Los hongos son los organismos que no se podran ver en el microscopio de
campo claro ya que para ver en este microscopio se necesita de un corte
histolgico o una pequea rodaja de tejido fino para que los haces de luz
puedan atravesarla y de esta manera poder observar la imagen.

4. Cul de los siguientes lentes de microscopio no aumenta la imagen formada?

a. Lentes magnticos
b. Lentes oculares
c. Lentes del objetivo
d. Lentes del condensador
e. Ninguno de los anteriores
Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del
objetivo.
Objetivo: lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
Diafragma o iris: regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su funcin es la
de concentrar la luz generada por la fuente de iluminacin hacia la preparacin.
En el interior del condensador existe un diafragma-iris cuya funcin es limitar el
haz de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado
desviados.
5. Si el mnimo tamao de imagen que puede detectar el ojo humano es 0.1 mm,
cual es el mnimo aumento necesario para hacer un objeto de una m medible?
a. 10X
b. 100X
c. 1000X
d. 10.000X
e. 100.000X
6. Cul de los siguientes es visible con el ojo sin utilizar ninguna clase de aumento?
a. Bacteria gram positiva
b. Bacteria gram negativa
c. Una cpsula
d. Una Colonia
e. Un anticuerpo
La capsula es el nico objeto que posee un gran tamao aceptable o razonable y
la que es perceptible a el 0.1 mn aumento que puede percibir el humano a
comparacin de los otros objetos que a comparacin de la capsula son muchos
ms pequeos y es vital el uso del microscopio.
7. Cul es el aumento total de unos lentes de ocular 10X lentes de objetivo 45X?
a. 15X
b. 45X
c. 150X
d. 450X
Se multiplica el ocular 10X por la lente del objetivo 45X y dara como resultado
450X
8. Cul es la diferencia entre objetivos acromticos, semi-plan y plan?

Los objetivos pueden ser de tres tipos: Acromtico, Semi- Plano y Plano.
Acromtico significa que la lente del objetivo es curvada por lo tanto la imagen
tambin es esfrica y
solamente el centro (aprox. 65%) es plano.
En el caso de un objetivo semi-plano, aproximadamente un 80% de la lente es
plana. La lente de los objetivos planos es totalmente plana y as el 100% de la
imagen que se ve es plana.
9. Describa en trminos de uso las diferencias entre el estreo-microscopio y el
microscopio de luz.
El estereomicroscopio es menos preciso y presenta un nmero menor de
aumentos que el microscopio.
El estereomicroscopio permite visualizar muestras opacas, tridimensionales y
sin ningn tipo de preparacin, mientras que el microscopio se utiliza para la
observacin de muestras transparentes o preparadas mediante un proceso de
tincin (para mejorar el contraste en la imagen vista)
Con el estereomicroscopio se pueden observar mohos, distintas partes del
cuerpo de los insectos, diferentes partes de la estructura de las flores, mientras
que en el microscopio se aumenta el tamao de los objetos bajo estudio, que
son demasiado pequeos para ser estudiados a simple vista
10.Enumere los parmetros que afectan la resolucin de los microscopios pticos.
A. Es producido por el comportamiento de la luz al incidir sobre el objeto en
estudio(difraccion).
B. Es producidos ya sea por defectos propios de las lentes.
C. Producida por las variaciones en los ndices de refraccin de las diversas
frecuencias (colores) que conforman la luz blanca visible.(cromaticas)
11.La resolucin de un microscopio ptico es 300 nm cuando para la iluminacin se usa
la luz de una longitud de onda (= 450 nm). Determine la resolucin del
microscopio si la fuente de luz se remplaza por luz roja con una longitud de onda de
680 nm.
12.Qu significa (NA) apertura numrica inscrita en la parte exterior de un objetivo?
Es la capacidad de recoger la luz de una lente. Cuanto mayor sea la apertura
mayor ser el brillo y la
resolucin de la imagen. Es decir es un rango de
ngulos donde el sistema acepta la luz.
13.Cul es la relacin entre NA y brillo de una imagen?
La relacin es que la apertura numrica caracteriza el rango de ngulos para los
cuales el sistema acepta luz en otras palabras le da la nitidez a la imagen es
decir su brillo y su claridad para que se vea mucho mejor de acuerdo a
nmero adimensional
14.Cul es el significado de profundidad de campo y profundidad de foco?
Profundidad decampo es el rango de movimiento a lo largo del eje ptico que un
objeto o espcimen puede moverse sin afectar la claridad de visin. Esto

significa que la profundidad de campo es la cantidad que el objeto o espcimen

puede moverse y seguir siendo claro.
La profundidad de foco es el opuesto a la profundidad de campo, que tiene lugar
en el lado opuesto del lente. Tambin, la profundidad de foco se mide en
unidades microscpicas de medicin, tales como nanmetros, mientras que la
profundidad de campo se mide en unidades macroscpicas, tales como metros o
pies.

15.Qu son aberraciones esfricas y cromticas?

ABERRACIONES ESFERICAS: son defectos de los espejos y las lentes en el que
los rayos de luz que inciden son paralelas en el eje ptico pero que a cierta
distancia de ste, son llevados a un foco diferente que los rayos prximos al
mismo; este tipo de aberraciones son monocromticas, es decir, que estn
formadas por componentes de un mismo color.

ABERRACIONES CROMATICAS: son desviaciones que se originan debido a que la

luz no es monocromtica, la variedad de colores tiene un foco distinto y
experimentan una desviacin distinta, esto hace que la imagen no se forme en
un nico punto y aparece una distorsin.

16.Utilice las imgenes tomadas durante la prctica y elabore una composicin

utilizando diferentes aumentos.

17.Muestre un ejemplo de procesamiento de imgenes para mejorar la calidad y

presentacin de las mismas.

18.Indique las posibles fallas presentadas en sus imgenes.

a) Falla en la profundidad de campo ya que la imagen no se acomod en un
plano o en una zona donde estuviese enfocado y no se saliera de la nitidez
ni de desenfoque.
b) El Angulo de enfoque era muy bajo ya que es muy complejo lograr un
punto de equilibrio entre el brillo y la nitidez.
c) La incidencia de luminosidad en la profundidad de campo donde no es
ntida y no tiene brillo de la imagen.
19.Cul es el papel del aceite de inmersin cuando se utiliza un objetivo de 100X?
La funcin que cumple el aceite de inmersin cuando se dispone entre el cubre
objetos de vidrio y el lente frontal, adems de evitar el rozamiento entre s, es
la de prevenir que la luz se desve para que esta llegue concentrada hacia la
muestra y de esta manera darle nitidez y enfocar mejor la imagen.

20.Especifique el significado de la informacin que aparece en los objetivos del

microscopio que Ud. Us en la prctica.
1)
4x: Es el factor de imagen a lo que que se va
ampliar
0.10: Es la apertura numrica, cuanto mayor sea la
apertura mayor ser el brillo y la
resolucin
de la imagen.
: Es la distancia mecnica a la que se trabaja.

2)
40x: Es el factor de la imagen es decir se va ampliar
40 veces la imagen.
0.65: Es la apertura numrica a la que puede decirse
ser el brillo y resolucin.
: Distancia mecnica a la que se trabaja.
0.17:Es el grosor del cubre ojos de objetivo.

3)
100x: Es el factor de aumento al que se va a trabajar y en
este aumento se utiliza aceite de inmersin
1.25: Es la apertura numrica a la que se va a trabajar y es
mayor asi que ser la imagen ms clara y brillosa

4)
10x: Es el factor de aumento al que se va a trabajar en que se va a aumentar
la imagen 10 veces

0.25: Es la apertura numrica la que muestra el brillo y la claridad de la

imagen.
: Distancia mecnica a la que se trabaja.
0.17: Grosor que tiene el cubre ojos de ese objetivo.

BIBLIOGRAFIA
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/
moptica.html
http://www.fing.edu.uy/if/cursos/intr_optica/Material/aberraciones.pdf
http://medaflojera.blogspot.com.co/2007/01/practica-1-microbilogia.html
file:///C:/Users/Personal/Contacts/Downloads/1%C2%B0-Gu%C3%ADaActividades-2.pd https://gatodiario.wordpress.com/2008/10/10/el-microscopiode-luz/