1. 1.

cOMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS<br />FUENTE DE CARBONO:

<br /><ul><li>Pueden ser CO2 o compuestos carbonados orgnicos.
2. 11. Se utilizan en la construccin de innumerables molculas necesarias para la
clula.
3. 12. Los hidratos de carbono se consideran fuente de carbono y
energa.</li></li></ul><li>COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS<br
/>FUENTE DE NITRGENO<br /><ul><li>Es metabolizado para proveer protenas,
cidos nucleicos y polmeros de pared.
4. 13. Algunos microorganismos pueden incorporar nitrgeno en forma de aminocidos,
bases purnicas o pirimidnicas.
5. 14. En ciertos medios de cultivo, el aporte de nitrgeno es realizado por las
peptonas</li></li></ul><li>COMPOSICIN QUMICA - MACROELEMENTOS<br
/>FUENTE DE AZUFRE<br /><ul><li>Se adiciona como SO4, cistena o metionina.
6. 15. En la clula se incorpora a aminocidos y diferentes coenzimas.</li></ul>FUENTE
DE FSFORO<br /><ul><li>Se agrega fosfatos de sodio o potasio.
7. 16. El fsforo se incorpora a cidos nucleicos, fosfolpidos, polmeros de membrana,
ATP, y sustancias de reserva.</li></li></ul><li>COMPOSICIN QUMICA MACROELEMENTOS<br />FUENTE DE K+ , Mg2+ , Ca2+<br /><ul><li>Son cationes
que estabilizan macromolculas aninicas.
8. 17. K+ acta como coenzima y estabilizador de RNA.
9. 18. Mg2+ se integra a la clorofila en organismos fotosintticos.
10. 19. Ca2+ abunda en esporas como dipicolinato de calcio. </li></ul>FUENTE DE Na<br
/><ul><li>Contribuye a equilibrar la presin osmtica del medio extracelular.
11. 20. Se suele suministrar como NaCl.

2. No se autoclavan caldos o medios de cultivo que tengan sustancias que se degraden con el
calor, como vitaminas, antibiticos o algunos carbohidratos. En su defecto, esterilizas por autoclave
el medio de cultivo y luego en condiciones de esterilidad le agregas las vitaminas o los compuestos
termolbiles por medio de filtracin con filtros Millipore, ya que el medio est lo suficientemente
fro.no se pueden autoclavar aquellos medios que contienen componentes que son termolbiles, es
decir que se destruyen con el calor, como por ejemplo algunas vitaminas, antibiticos, o azcares

3. Dada la variabilidad debida a pequeos errores en la preparacin de los

medios de cultivo, tanto los generales como los selectivos, es preciso hacer
controles peridicos que permitan comprobar que las bacterias buscadas
crecen incluso a partir de clulas aisladas (colonias aisladas), adems, que las
bacterias de la flora general son satisfactoriamente inhibidas (no crecen salvo
cuando se siembra un gran volumen). Este tipo de control de los medios de
cultivo se denomina economtrico.
Son preparados necesarios para el crecimiento e identificacin de
microorganismos. Deben ser preparados de acuerdo a procedimientos escritos
(POE) y apropiadamente rotulados. Deben ser controlados para verificar la
promocin de desarrollo del medio de cultivo.

REQUISITO: Manejo de los medios de cultivo: 1. El laboratorio debe registrar la

fecha de recepcin, de apertura del envase, de caducidad 2. El
almacenamiento debe realizarse en las condiciones apropiadas. Envases:
deben estar hermticamente cerrados. (especialmente en medios
deshidratados No deben utilizarse medios deshidratados que presenten
apelmazamiento o un cambio de color. 3. Se debe verificar (siempre que sea
necesario) que los medios de cultivo y diluyentes tengan caractersticas
adecuadas con respecto a: Recuperacin o supervivencia de los
microorganismos de inters (productividad) Inhibicin o supresin de
microorganismos no deseados (selectividad)

1. El Nmero ms probable (NMP).-El mtodo del Nmero ms probable

(NMP) (Most probable number - MPN - eningls), tambin conocido como
el mtodo de los ceros de Poisson, es una formade obtener datos
cuantitativos en concentraciones de elementos discretos a partirde
datos de incidencia positiva/negativa. Es una estrategia eficiente para
estimardensidades de poblacin que se emplea cuando una evaluacin
cuantitativa deelementos individuales no es factible.El mtodo se basa
en determinar la presencia o ausencia (positivo o negativo) deatributos
especficos de microorganismos en copias obtenidas por
dilucionesconsecutivas a partir de muestras de suelo u otros ambientes.
Se basa en elprincipio de que una nica clula viva puede desarrollarse y
producir un cultivoturbio. El mtodo requiere la realizacin de una serie
de diluciones en serie de lamuestra de cultivo, en un medio lquido
adecuado para el crecimiento de dichoorganismo de un volumen diez
veces mayor. Luego, se incuban las muestras deesos tubos y, pasado un
tiempo, se examinan los tubos. Aquellos tubos querecibieron una o ms
clulas microbianas procedentes de la muestra, se pondrnturbios,
mientras que los tubos que no recibieron ninguna clula
permanecerntransparentes
2. Modo de expresar las concentraciones
Ya sabemos que la concentracin de las soluciones es la cantidad de soluto contenido en una
cantidad determinada de solvente o solucin. Tambin debemos aclarar que los trminos
diluida o concentrada expresan concentraciones relativas.
Las unidades de concentracin en que se expresa una solucin o disolucin pueden
clasificarse en unidades fsicas y en unidades qumicas .

Unidades fsicas de concentracin

Las unidades fsicas de concentracin estn expresadas en funcin del peso y
del volumen, en forma porcentual, y son las siguientes:
a) Tanto por ciento peso/peso %P/P = (cantidad de gramos de soluto) / (100 gramos de
solucin)

b) Tanto por ciento volumen/volumen %V/V = (cantidad de cc de soluto) / (100 cc de solucin)

c) Tanto por ciento peso/volumen % P/V =(cantidad de gr de soluto)/ (100 cc de solucin)

3. En general, para preparar diluciones seriadas, se parte de una solucin

concentrada y se preparan series de diluciones al dcimo (1:10) o al
medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones
relacionadas por ejemplo por un factor de dilucin 10 es decir 1/10;
1/100; 1/1000 y as sucesivamente. O la otra serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16;
1/32 etc. Por ejemplo: si partimos de una solucin de 50mg/ml de una
sustancia (Solucin A): - Dilucin 1/10: 1ml de la solucin A + 9 ml de
agua= una solucin de 5 mg/ml (dilucin 1:10). - Dilucin 1/2: 5 ml de la
solucin A + 5 ml de agua= una solucin de 25 mg /ml (dilucin 1:2).

Absorbancia
En espectrofotometra, la absorbancia1 (a veces, absorbencia) () se define como:
donde:
es la intensidad de la luz con una longitud de onda especfica tras haber atravesado una
muestra (intensidad de la luz transmitida)
es la intensidad de la luz antes de entrar a la muestra (intensidad de la luz incidente)
El trmino frecuentemente es intercambiable con densidad ptica, si bien este ltimo se
refiere a la absorbancia por unidad de longitud.
La medida de absorbancia se usa con frecuencia en qumica analtica y en bioqumica, ya
que la absorbancia es proporcional al paso optico de la muestra y a la concentracin de la
sustancia en sta, en contraste con la transmitancia I / I0, que vara exponencialmente con
el grosor y con la concentracin.

4.