Coloracin GIEMSA

Juego de soluciones para la coloracin de GIEMSA para microscopa

MUESTRAS
Se deben usar lminas nuevas y prelavadas con alcohol de 96%
para quitar la grasa.
Se toman dos (2) lminas, una para la gota gruesa y la otra para
el extendido, se limpia el dedo del paciente con Alcohol, y deja
secar.
Se realiza la puncin, la primera gota se descarta y con las
lminas se recoge una sola gota en cada una de ellas. (No se
debe tocar la piel con la lmina). En una de las placas se hacen
movimientos circulares hasta alcanzar un dimetro de 1 cm para
la gota gruesa, en la otra lamina se hace un extendido delgado y
corto.

PRINCIPIO
El tpico color de los ncleos celulares, mayoritariamente rojo
prpura, se basa en la interaccin molecular entre eosina y un
complejo azur B ADN. Ambos colorantes forman el complejo. La
intensidad de la coloracin depende del contenido de azur B y de
la relacin entre azur B y eosina amarilla. El resultado de tincin
puede ser influido por diferentes factores como el valor del pH de
la solucin y de la solucin tampn, las substancias tampn
(amortiguadores), el tiempo de tincin y la fijacin.
CONTENIDOS
COLORANTE DE GIEMSA Listo para su uso
Azur eosina azul de metileno segn Giemsa
Glicerina
Alcohol metlico R.A.

Toda muestra biolgica debe se considerada como

potencialmente infecciosa.

5 g/l
50%
50%

PROCEDIMIENTO

BUFFER FOSFATADO GOTA GRUESA GIEMSA

-Listo para su uso
Di-Sodio hidrogenofosfato 12 H2O
Potasio Di-hidrogenofosfato
Agua desmineralizada tipo II

PROCEDIMIENTO GOTA GRUESA

14.02 g/l
3.522 g/l
cs

1. Se deja secar la lamina durante 20 minutos.

2. Se deshemoglobiniza con Azul de Metileno

Fosfatado,
sumergiendo la lamina por 5 segundos y se lava varias veces
con buffer fosfatado.
3. Se deja secar la lmina.
4. Realizar la Coloracin de Giemsa preparando 1 gota de
Colorante y 1 ml de Buffer (Aprox. 3 ml por cada lamina). Se
colorea la lmina 15 minutos boca abajo.
5. Se lava con agua del chorro y se deja secar.

AZUL DE METILENO FOSFATADO Listo para su uso

Azul de Metileno R.A.
Di-sodio hidrogenofosfato anhidro
Potasio Di-hidrogenofosfato
Agua desmineralizada tipo II

4 g/l
12 g/l
4 g/l
csp

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Las soluciones deben almacenarse entre 15C y 30C y

protegidos de la luz. Despus de abierto el contenido
almacenado entre 15C y 30C y protegidos de la luz es
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

Temperaturas inferiores a 15C puede precipitar co lorantes

de las soluciones colorantes.

Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.

PROCEDIMIENTO DEL EXTENDIDO

1. Se deja secar la lmina durante 10 minutos.
2. Se fija el extendido con alcohol metlico durante 3 a 5 minutos y
se deja secar.
3. Se realiza la Coloracin de Giemsa que se prepara 2 gotas de
Giemsa y 1 ml de Buffer Fosfatado (Aprox. 3 ml por cada
lmina).
4. Se colorea la lmina boca abajo durante 30 minutos y se lava
con agua del chorro y se deja secar.

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

La solucin R1 Colorante de Giemsa y la solucin R3 Azul de

Metileno Fosfatado son irritantes en contacto con piel, ojos y
mucosas.

La solucin R1 Colorante de Giemsa a causa del contenido

en metanol es txico e inflamable, por lo tanto se deben
tomar los cuidados requeridos para el manejo de productos
inflamables en el laboratorio.

Observe la simbologa en los rtulos de las soluciones.

Las soluciones usadas y las caducadas deben eliminarse

como desechos especiales, debiendo cumplir las
regulaciones locales para el desecho de compuestos
peligrosos.

LA GOTA GRUESA SE USA PARA VER LA CONCENTRACIN

DEL PARASITO Y EL EXTENDIDO PARA VER LA ESPECIE.

RESULTADO
Tipo de clula
Parsitos sanguneos
Linfocitos
Monolitos
Granulocitos neutrfilos

MATERIALES
ADICIONALES
SUMINISTRADOS

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cubeta de tincin

REQUERIDOS

NO
Granulocitos eosinfilos

Frasco lavador
Agua
Alcohol metlico
Cronometro y/o timer

Granulocitos basfilos
Trombocitos (Plaquetas)
Eritrocitos

1/1

Resultado
ncleo rojo
citoplasma del protozoario azul
ncleo azul violeta
citoplasma azul
ncleo (lobulado) azul violeta
citoplasma azul claro
ncleo azul oscuro
citoplasma rosa plido
grnulos tono rosado a azul claro
ncleo azul
citoplasma rosa plido
grnulos rojo ladrillo
ncleo purpura a azul oscuro
grnulos azul oscuro-negros
Azul
rojizo

2007-08 Rev. 2

Coloracin GIEMSA

Juego de soluciones para la coloracin de GIEMSA para microscopa

CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad en la microscopia de extendidos sanguneos
depende directamente de la formacin y experiencia del
profesional que validara la calidad de los extendidos, coloracin,
etc.
El control debe realizarse incluyendo en cada proceso un
portaobjetos de control positivo.
NOTAS SOBRE EL EMPLEO

Los procedimientos de tincin indicados en el presente inserto

han dado resultados satisfactorios en nuestros laboratorios.
Las preferencias de color individuales pueden precisar ligeros
ajustes de los tiempos.
Agua altamente clorada puede debilitar la coloracin de
contraste.

BIBLIOGRAFA
1. Hematology: Principles and Procedures, Sixth Edition, Brown AB, Lea & Febiger,Philadelphia
1993 p101
2. Clark, George, Stains and staining (Microscopy), 4th edition, Williams & Wilkins, (1981).

ndice de Smbolos
Producto para
diagnstico
in-vitro

Referencia o
Cdigo

Pruebas
por Kit

Para usar
consulte las
instrucciones

Precaucin
Consultar las
instrucciones

Fabricante

Nmero de Lote

Fecha de
Caducidad

Fecha de
Fabricacin

Limite de
Temperatura

Riesgo Biolgico

ESPECIALIDADES DIAGNOSTICAS IHR Ltda.

PBX: +(2) 552 5444 / Calle 7 A No. 45-07 Santiago de Cali - Colombia
e-mail: servicioalcliente@ihrdiagnostica.com
www.ihrdiagnostica.com

2/2

2007-08 Rev. 2