PROTEINAS TOTALES Y ALBUMINA

USO DEL PRODUCTO

Para la determinacin de Protenas Totales y Albmina en Suero
Mtodo Biuret y Unin a Colorantes
FUNDAMENTO DEL METODO
Determinacin de Protenas Totales: Reaccin del biuret. En
medio alcalino regulado, los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con los iones cpricos del reactivo, dando un
complejo de color azul- violceo cuya intensidad medida fotomtricamente a 540 nm, es proporcional a la concentracin de
protenas totales de la muestra.
Determinacin de Albmina: Unin a colorantes. En el medio
de reaccin tamponado a PH 3,6 y con adecuada fuerza inica,la
albmina presente en la muestra se une especficamente con el
colorante verde de BromoCresol. El cambio en las propiedades
pticas que muestra el complejo albmina colorante traducido
en un incremento de la absorbancia medida a 625 nm respecto de la solucin del colorante libre, permite cuantificar fotomtricamente a la albmina de forma proporcional a su concentracn en la muestra
REACTIVOS (Listos para Usar)
Reactivo cuproalcallno: Proteinas Totales.
La concentracin de los componentes en solucin es:
S04Cu 12 mmol/l; tartrato Na-K 32 mmol/I; IK 6 mmol/I;
NaOH 250 mmol/I.
Conservacin y estabilidad del Reactivo
El Reactivo Cuproalcalino debe conservarse a T.A. (15-25C) en
lugar fresco y al abrigo de la luz.
La estabilidad alcanza la fecha de vencimiento indicada en el
frasco.
Reactivo de VBC: albumina.
Solucin tamponada pH 3,6 de Verde de Bromo Cresol 90
mol/l adicionado con 1% de tensioactivo no inico.
El reactivo est listo para su uso.
Conservacin y estabilidad del Reactivo
El reactivo de VBC debe conservarse a T.A. (15-25C), en lugar
fresco y al abrigo de la luz.
La estabilidad alcanza la fecha de vencimiento indicada en el
frasco.
ESTANDAR DE PT: (NOTA 1)
ESTANDAR DE ALB: (NOTA 1)
REACTIVOS y MATERIAL AUXILIAR NO PROVISTOS
-Bao Mara de 37 C
-Timmer
-Pipetas y micropipetas
-Tubos y Cubetas de Vidrio
-Fotmetro o Espectrofotmetro
Precauciones y advertencias sobre el uso de los reactivos
El Reactivo Cuproalcalino es corrosivo.
Para uso diagnstico IN VITRO.
Indicios de inestabilidad o deterioro De los reactivos
Eventualmente el Reactivo Cuproalcalino puede presentar partculas negras sedimentadas. Esto indica deterioro parcial del
Reactivo por introduccin de agentes reductores de cobre (II).
Para el uso del Reactivo, trabajar con pipetas perfectamente
limpias.

MUESTRAS
Determinacin de P.T.: suero libre de hemlisis.
Determinacin de Alb.: suero libre de hemlisis.
Condiciones de conservacin
Los sueros son estables 48 hs. en refrigerador, o 1 mes
en congelador.
Sustancias interferentes
Para la valoracin de P.T. no interfiere la hemlisis ligera. Valores
de bilirrubina hasta 200 mg/I no alteran los resultados. Sueros
lipmicos con valores de triglicridos hasta 6 g/l, no modifican
significativamente los resultados.
Para la valoracin de Alb, no interfiere la hemlisis moderada,
valores de bilirrubina hasta 200 mg/I, como as tampoco suero
de aspecto lechoso.
Manipulacin y descarte
Las muestras de pacientes deben manipularse considerandolas
potencialmente infecciosas, al igual que el material descartable
y los utilizados en el ensayo, que hayan estado en contacto con
las mismas. Un procedimiento aconsejado para descartartos es
el siguiente: autoclavado a 121 C durante una hora y el tratamiento de los lquidos residuales con hipoclorito de sodiodurante una hora a una concentracin final del 5%.
ENSAYO 1: Determinacin de Protenas Totales. (NOTA 2)
E
Estndar de PT.
Muestra
Rvo. Cuproalcalino

50l

50l

3,5 ml

3,5 ml

Mezclar. Llevar a bao de agua a 37 C e incubar 15 minutos. Leer en espectro fotmetro a 540 nm o fotocolormetro
a 520-560 nm llevando a cero con reactivo de trabajo. Color
estable 30 minutos.
ENSAYO 2: Determinacin de Albmina. (NOTA 2)

Estndar de Alb.
Muestra
Rvo. de VCB

10l

10l

3,5 ml

3,5 ml

Mezclar. Reposar a temperatura ambiente 15 minutos.

Leer en espectrofotmetro a 625 nm o fotocolormetro a
620-650 nm llevando a cero con reactivo de trabajo. Color
estable 30 minutos.
CALCULOS
Determinacin de Protenas Totales
g de PT/dI. de solucin Estndar
Factor de clculo = --------------------------------------------Absorbancia Estndar de PT
g de PT/dl = Absorbancia Desconocido x factor

Determinacin de Albmina
g de PT./ dI. de solucin Estndar
Factor de clculo = ---------------------------------------------Absorbancia Estndar de Alb.
g de Alb./dl = Absorbancia Desconocido x factor

BIBLIOGRAFIA
1. WEICHSELBAUM, TE.: Am. J. Clin. Pathol.,16 Tech-Sec. 40
(2946).
2. GORNAL,A.G.:J.BioI.Chem., 177:751 (1949).
3. WATSON, D.: Advanced Clin. Chem. 8,237 (1965).

CONTROL DE CALIDAD INTERNO

Se recomienda procesar juntamente con las muestras, sueros
control normal y anormal para controlar la performance del ensayo. Se aconseja el uso de Oualiset Sueros Control Nivel 1 y 2
GT Lab (Cdigos 602105- 602205) Cada Laboratorio debe disear su propio sistema de Control de Caldad Interno y establecer
las medidas correctivas si se superan los limites de tolerancia
aceptables.
SISTEMA ANALITICO
1) Ley de Beer: La reaccin colorimtrica para PT sigue la Ley
de Beer hasta 15 g/dI. Para Alb. alcanza 6 g/dI.
2) Sensibilidad: Para PT a 540 nm es de 0,020 g/dI.
Para Alb. a 625 nm de 0,018 g/dI.
4) Precisin:
Protenas Totales:
Intraensayo

Nivel Medio

Rango

D.S

C.V.%

4,5 g/l

4,37-4,59 g/dl

0,02 g/dl

0,5

7,0 g/l

6,85-7,14 g/dl

0,03 g/dl

0,4

Interensayo

Nivel Medio

Rango

D.S

C.V.%

6,9 g/dl

6,58-7,18 g/dl

0,045 g/l

0,6

Nivel Medio

Rango

D.S

C.V.%

2,5 g/l

2,39-2,60 g/dl

0,075 g/dl

2,0

3,5 g/l

3,39-3,63 g/dl

0,070 g/dl

1,7

Nivel Medio

Rango

D.S

C.V.%

3,6 g/dl

3,31-3,91 g/dl

0,075 g/l

2,1

Albmina:
Intraensayo

Interensayo

VALORES DE REFERENCIA
Protenas Totales: 6,5-8,0 g/dl
Albmina: 3,4-4,5 g/dl
NOTAS
1. Puede utilizarse Qualiset calibradores GT Lab, cdigos 601105
(Nivel 1) y 601205 (Nivel 2)
2. Los vlumenes de muestra y reactivo de Trabajo a utilizar,
pueden disminuir o aumentar siempre que se mantengan las
proporciones establecidas en el procedimiento.
Adaptaciones para autoanalizadores se encuentran disponibles.
PRESENTACION
Protenas Totales y Albmina
Cdigo 531350 (2x500ml)

INDICACIONES AL CONSUMIDOR
Garanta de Calidad del Producto
GT Laboratorio elabora y comercializa productos para anlisis uno IN VITRO siguiendo normas GMP, ISO 9001:2008 e ISO 13485: 2003. Los trminos y condiciones de
calidad son absolutos dentro de la competencia de responsabilidad, que corresponda
a GT Laboratorio.
Cualquier alteracin en los productos elaborados por GT Lab sern reconocidos sin
cargo de ningn tipo para el usuario. Todo reclamo de calidad deber efectuarse por
escrito debidamente firmado y sellado por el profesional responsable, con el detalle
del desperfecto, acompaando el producto en cuestin para su exanimacin tcnica
por el Departamento de Control de Calidad de Gt Lab. Los reclamos debern ser enviados a travs del Distribuidor que efectu la venta. Las reposiciones y/o respuestas
tcnicas sern cursadas de forma fehaciente al Profesional usuario

INFORMACION PARA CONTACTARSE

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Necochea 3274 (S2001QXL) Rosario Santa Fe Argentina
Tel / Fax: +54 (341) 481-1002 y rot.
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USO PROFESIONAL EXCLUSIVO.
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Elaborado por GT Laboratorio S.R.L.
Establecimiento Inscripto y Habilitado por ANMAT
Industria y Tecnologa Argentina
Dir. Tec: Daniel Gazzola. Bioqumico
Elaborado por: GT Laboratorio s.r.l
Industria y Tecnologa Argentina
Cdigo y Fecha de Revisin: 53190000/14