2 - Formato Anexo A - DOCTORADO

1.
TTULO DEL PROTOCOLO DE INVESTIGACIN OBSERVACIONAL

Niveles de acetilcolinesterasa eritrocitaria en agricultores de cultivos de arroz expuestos
a plaguicidas organofosforados y carbamatos de los distritos de Habana y calzada de la
provincia de Moyobamba - Regin San Martin-Per.
2. NDICE DEL PROTOCOLO DE INVESTIGACIN
Citar las secciones con el correspondiente nmero de pgina. Ej.:
Pg.
RESUMEN..4
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
DESCRIPCION DEL PROBLEMA DE INVESTIGACION.5
JUSTIFICACION Y RELEVANCIA.6
LIMITACIONES Y VIABILIDAD DE LA INVESTIGACION.7
MARCO TEORICO
ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACION7
OBJETIVOS..8
METODOLOGIA
POBLACION DE ESTUDIO8
MARCO MUESTRAL...8
DISEO MUESTRAL Y SELECCIN DE LA MUESTRA.9
MUESTRA ..10
CRITERIOS DE ELEGIBILIDAD..10
VARIABLES........10
OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES...11
DESCRIPCIN DE LOS PROCEDIMIENTOS A REALIZAR....13
ANLISIS Y PROCESAMIENTO DE LOS DATOS..14
ASPECTOS ADMINISTRATIVOS
ORGANIZACIN Y RESPONSABILIDADES15
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES..15
PRESUPUESTO15
ASPECTOS ETICOS...17
BIBLIOGRAFIA.20
ANEXOS22
Ttulo del Protocolo: Niveles de acetilcolinesterasa eritrocitaria en agricultores de cultivos de arroz expuestos a plaguicidas organofosforados y
carbamatos de los distritos de Habana y calzada de la provincia de Moyobamba - Regin San Martin-Per .
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3. RESUMEN
.
La exposicin crnica a plaguicidas organofosforados en personas dedicadas a la actividad agrcola

produce una serie de trastornos neurolgicos, endocrinos como la diabetes, y problemas
inmunolgicos como el cncer, convirtindose en un problema relacionado a la salud ocupacional.
En pases como Estados Unidos, Espaa, Chile se realiza actividades de vigilancia sanitaria a travs
de anlisis de biomarcadores de efecto como la acetilcolinesterasa eritrocitaria, por el mtodo de
Ellman Modificado, que utiliza el espectro ultravioleta.
La personas expuestas a plaguicidas organofosforados y carbamatos, utilizados en plagas que atacan
los cultivos de arroz, inhiben la enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria.
El objetivo de la presente investigacin es medir actividad de la enzima acetilcolinesterasa en
agricultores de arroz de los distritos de Habana y Calzado, de la provincia de Moyobamba en la
regin San Martn y compararlos con personas no expuestas a plaguicidas.
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1. Problema a investigar
Per, crece ao tras ao en su produccin agrcola, para ello hace uso de
plaguicidas, estos utilizados en altas concentraciones producen serios daos al
suelo, agua, y en la poblacin agrcola, que da a da est expuesta a plaguicidas
que estn relacionados a trastornos neurodegenerativos como
Enfermedad de
Parkinson, Enfermedad de Alzheimer, Diabetes, obesidad, cncer y otros.

La regin San Martn es la principal productora de arroz del Per, este cultivo utiliza
grandes cantidades de plaguicidas organofosforados y carbamatos, para evidenciar
el efecto perjudicial en la salud humana, se determina la inhibicin de las enzima
acetilcolinesterasa eritrocitaria y colinesterasa plasmtica.
El objetivo del presente trabajo es determinar los niveles de la enzima
acetilcolinesterasa eritrocitaria como indicador del dao de estos plaguicidas en los
agricultores de cultivos de arroz expuestos de los distritos de Habana y Calzada de
la regin San Martn, Per.
2. Justificacin y relevancia
Para el presente estudio se tomar en cuenta la regin San Martn, principal
productora de arroz del pas, segn datos del ltimo censo agrario (2012) e
informacin publicada en la pgina web del Ministerio de Agricultura; este cultivo
utiliza grandes cantidades de plaguicidas organofosforados y carbamatos,
plaguicidas inhibidores de la colinesterasa, estos a su vez producen serios daos
en la salud humana, que slo son evidenciados por dosis altas en intoxicaciones
agudas, pero en la actividad agrcola la exposicin diaria produce intoxicacin
crnica que est relacionada con Enfermedad Alzheimer, Enfermedad de
Parkinson, obesidad, diabetes, hipertensin arterial, cncer entre otras.
La exposicin crnica a plaguicidas organofosforados y carbamatos, produce
inhibicin
de
la
actividad
de
las
enzimas
colinesterasa
plasmtica
acetilcolinesterasa eritrocitaria, en caso de personas expuestas ocupacionalmente

a plaguicidas organofosforados y carbamatos es monitorizada por la actividad de la
acetilcolinesterasa eritrocitaria.
Determinar si la actividad de la enzima aceticolinesterasa eritrocitaria est fuera del
rango normal comparado con personas no expuestas, consideradas como control
de la misma rea geogrfica, nos permitir evidenciar el dao que se produce en
las personas expuestas, agricultores, y en ese sentido tener evidencia para que las
autoridades competentes tomen las medidas pertinentes para prevenir y evitar que
ms agricultores estn expuestos a estos plaguicidas.
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3. Objetivo(s):
Determinar los niveles de acetilcolinesterasa eritrocitaria en agricultores de cultivos
de arroz expuestos a plaguicidas organofosforados y carbamatos de la provincia
de Habana y Calzada de la provincia de Moyobamba regin San Martn-Per.
4. Metodologa:
Estudio descriptivo de corte transversal. Se aleatorizarn sujetos en proporcin a la
densidad poblacional y grupos etarios, de diferentes
distritos y se tomarn
muestras de sangre. Adicionalmente, mediante una entrevista personal con la

persona se recolectar datos socio-demogrficos como sexo, edad, grado de
instruccin y estado civil de los habitantes; as como exploracin mdica.
4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

A. DESCRIPCIN DEL PROBLEMA DE INVESTIGACIN (mximo 3 pginas)
Describir el problema que genera la investigacin, evaluando crticamente su magnitud, efectos y causas
existentes.
En el Per, segn informe del Ministerio de Trabajo (2012), la poblacin agrcola

alcanza aproximadamente 3.5 millones de personas, que utilizan plaguicidas para
mejorar la produccin de sus cultivos, el uso de estos plaguicidas producen
intoxicacin aguda y crnica en las personas expuestas y no expuestas
ocupacionalmente.
Andreia (2012), en el programa de monitoreo
para residuos de pesticidas en
alimentos del ao 2001 al 2010, Brasil, indica que los anlisis de arroz presentan
plaguicidas ditiocarbamatos, carbamatos y plaguicidas organofosforados, este
ltimo en un alto porcentaje (43%), adems de presencia de plaguicidas prohibidos
26
La toxicidad de los plaguicidas organofosforados y carbamatos, estn relacionadas

con la actividad
de la enzima colinesterasa plasmtica y acetilcolinesterasa
eritrocitaria, comparadas con las personas no expuestas de la regin. La exposicin

a plaguicidas en agricultores est relacionada con las actividades diarias del campo,
es decir estamos frente a una intoxicacin crnica. En la exposicin crnica a
plaguicidas inhibidores de la
colinesterasa como los organofosforados y
carbamatos, los signos y sntomas pasan desapercibidos para el agricultor

expuesto, a diferencia de las
intoxicaciones agudas, sin embargo estn
relacionados a enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de

Alzheimer, Parkinson, y enfermedades crnicas como hipertensin arterial, diabetes,
obesidad, cncer 21- 25.
Segn Ibarra (2012), afirma que la determinacin de la acetilcolinesterasa
eritrocitaria debe realizarse antes, durante y despus de la jornada laboral, para
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saber si los plaguicidas son los responsables de la inhibicin de la enzima pero que,
ante la ausencia de tales valores, se han de utilizar entonces los valores normales,
obtenidos en una muestra lo ms representativa posible en un territorio dado de
sujetos
sanos
sin
exposicin
conocida
los
contaminantes
ambientales
27
correspondientes .
Segn el informe de la Direccin General de Competitividad Agraria del Ministerio
de agricultura (Marzo 2013), la Regin San Martn, produce la mayor cantidad de
arroz del pas, este cultivo utiliza grandes cantidades de reas de terreno. segn
fuente de Instituto Nacional de Estadstica e Informtica (INEI), la superficie
sembrada de arroz en la temporada 2011-2012 alcanz las 387, 677 hectreas,
donde laboraron un aproximado de 187,000 agricultores entre los 15 y 65 aos de
edad.
Segn la respuesta enviada por el Ministerio de Salud por solicitud N 15-001506,
menciona que durante el 2012 en el Per hubo 2047 personas intoxicadas por algn
tipo de plaguicidas; y en la regin San Martn hubieron 60 personas, en su mayora
por plaguicidas organofosforados y carbamatos.
Por lo tanto, se debe determinar la actividad de la enzima acetilcolinesterasa
eritrocitaria, en agricultores expuestos a fin de prevenir los posibles riesgos para la
salud resultado de la exposicin a plaguicidas organofosforados y carbamatos,
B. JUSTIFICACIN Y RELEVANCIA
La exposicin a plaguicidas organofosforados y carbamatos alteran la actividad de las
enzimas colinesterasas como la colinesterasa plasmtica y acetilcolinesterasa
eritrocitaria. La colinesterasa plasmtica es una enzima cuya actividad es rpidamente
recuperada ante la exposicin de plaguicidas inhibidores de acetilcolinesterasa, en el
caso de la acetilcolinesterasa eritrocitaria su actividad tarda ms tiempo para
recuperarse, es por esta razn que la colinesterasa plasmtica estara indicada para
evaluar intoxicaciones agudas y la acetilcolinesterasa eritrocitaria en intoxicaciones
crnicas.
Los estudios o investigaciones en nuestro pas, acerca de la evaluacin de la
colinesterasa eritrocitaria son escasas, pese a ser recomendado por autoridades
internacionales de vigilancia sanitaria ocupacional, como el Instituto Nacional de
Seguridad e Higiene en el trabajo de Espaa.
En caso de obtener resultados significativos, la acetilcolinesterasa eritrocitaria sera de
utilidad para:
La evaluacin de riesgo txico por exposicin a plaguicidas inhibidores de la

colinesterasa, adems que la tcnica para determinar su actividad es
econmica, rpida y confiable.
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Establecer un programa de Vigilancia de la Salud en agricultores expuestos a

plaguicidas inhibidores de la colinesterasa, para la prevencin de riesgos
txicos a largo plazo.
Relacionar la actividad enzimtica de la acetilcolinesterasa eritrocitaria con la

presencia de sntomas clnicos relacionados con la exposicin crnica a
plaguicidas,
historia
previa
de
intoxicaciones,
diversas
variables
ocupacionales como utilizacin de elementos de proteccin personal (EPP),

durante la preparacin de mezclas y aplicacin de plaguicidas.
C. LIMITACIONES Y VIABILIDAD DE LA INVESTIGACION

5. MARCO TERICO
A. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACION
Incluir los antecedentes del protocolo, en lo posible resultados de proyectos locales, nacionales y/o
extranjeros relacionados al tema a investigar (incluyendo hallazgos anteriores del investigador principal)
Los plaguicidas rganofosforados y carbamatos, inhiben las enzimas colinesterasas

como la colinesterasa plasmtica y la acetilcolinesterasa eritrocitaria (16), Cuando el
trabajador se ha visto sometido a una prolongada exposicin a plaguicidas inhibidores
de la colinesterasa, se recomienda medir la enzima eritrocitaria; en cambio, si la
exposicin ha sido aguda se prefiere medir la enzima plasmtica
(11, 12)
. Saryender
(2011), describi la inhibicin de la actividad de la acetilcolinesterasa eritrocitaria en 70

trabajadores agrcolas aplicadores de plaguicidas organofosforados en la india del
norte 14.
Catano y cols (2008), indica en su estudio que trabajadores agrcolas de los valles en
Per, la actividad de la enzima colinesterasa plasmtica present inhibicin con
respecto al grupo control considerado en el estudio, y que adems presentas sntomas
de intoxicacin por exposicin a plaguicidas organofosforados 15.
El cultivo de arroz en la regin San Martn-Per, utiliza grandes cantidades de
plaguicidas, un promedio de 572,000 litros de fungicidas, insecticidas y herbicidas
(17,18)
En el ao 2006, se realiz un estudio interdisciplinario realizado sobre el uso de

plaguicidas en los cultivos de arroz en la cuenca baja de Shupishia, regin de San
Martn, orientado en medir concentraciones de diferentes tipos de plaguicidas en la
sangre de los agricultores expuestos, se report la presencia de Hexaclorobenceno, en
el 96% de muestras de sangre de agricultores (19). Otro estudio en el departamento de
San Martn (1995), menciona el uso de pesticidas extremadamente y altamente txicos
(Ia y Ib), de una manera deficiente e insegura, dicho estudio menciona que la mayora
de los entrevistados ha tenido sntomas de intoxicacin por plaguicidas 20.
En Per, Existe muy poca o casi nula publicaciones, acerca de la determinacin de la
actividad de la acetilcolinesterasa eritrocitaria, como referencia para el monitoreo de
trabajadores expuestos a plaguicidas inhibidores de la enzima colinesterasa, en ese
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sentido nuestro objetivo es determinar la actividad de la enzima acetilcolinesterasa

eritrocitaria, en personas expuestas a plaguicidas organofosforados y carbamatos,
como son los cultivadores de arroz de la regin San Martn.
B. DEFINICIONES CONCEPTUALES
Plaguicidas
Sustancia qumica de origen natural o sinttico u organismo vivo, sus substancias y/o
subproductos, que se utilizan solas, combinadas o en mezclas para la proteccin
(combatir o destruir, repeler o mitigar: virus, bacterias, hongos, nemtodos, caros,
moluscos, insectos, plantas no deseadas, roedores, otros) de los cultivos y productos
agrcolas. Igualmente cualquier sustancia o mezcla de substancias que se las use
como desfoliantes, desecantes, reguladores de crecimiento, y las que se aplican a los
cultivos antes o despus de la cosecha para proteger el producto 1.
Clasificacin de Plaguicidas
se pueden clasificar segn2, 3:
a. Segn el tipo de organismo que se desea controlar: Insecticidas, acaricidas,
fungicidas, herbicidas, nematicidas, molusquicidas, rodenticidas, avicidas.
b. Segn grupo qumico del principio activo: Compuestos organofosforados,
compuestos carbamatos, compuestos organoclorados, piretroides, derivados del
bipiridilo, triazinas, tiocarbamatos, derivados del cido fenoxiactico, derivados de la
cumarina, derivados del cloronitrofenol, compuestos organomercuriales, entre otros.
c. Segn su persistencia al medio ambiente: Persistentes, poco persistentes, no
persistentes.
d. Segn su toxicidad aguda (O.M.S.): Esta se basa principalmente en la toxicidad por
va oral en ratas y ratones. Usualmente la dosis se registra como el valor DL50 (Dosis
Letal Media) que es la dosis requerida para matar al 50% de la poblacin de animales
de prueba y se expresa en trminos de mg/kg del peso del cuerpo del animal
(CUADRO N 01).
Cuadro N 01 Clasificacin de los plaguicidas segn toxicidad aguda expresada en DL50
(2)
Clase
Ia Sumamente
txico
Por va oral
Slidos
Lquidos
5
20 menos
menos
Por va drmica
Slidos
Lquidos
10
40 menos
menos
Ib Muy txico
5 50
20 200
10 - 100
40 - 400
II
Moderadamente
txico
50 - 500
200 - 2000
100 - 1000
400 - 4000
III Poco txico
Ms de
500
Ms de
2000
Ms de
1000
Ms de
4000
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Enzima colinesterasa
La colinesterasa es una enzima que produce la hidrlisis de la colina y de varios de sus
steres, entre ellos la acetilcolina, que es un mediador de la conduccin del impulso
nervioso. La colinesterasa eritrocitaria (EC 3.1.1.7), tambin denominada verdadera,
especfica o de tipo e, se encuentra exclusivamente en las neuronas, en las sinapsis
ganglionares de la estructura neuromuscular del organismo y en los eritrocitos. La
colinesterasa plasmtica o srica (EC 3.1.1.8), tambin llamada seudocolinesterasa,
colinesteras nespecfica, butirilcolinesterasa o de tipo s, est presente en el plasma y en
casi todos los tejidos (principalmente en el hgado), aunque se encuentra en bajas
concentraciones en el sistema nervioso (Ambas clases de enzimas difieren marcadamente
entre s en cuanto a su origen y estructura, as como por la especificidad de sus sustratos y
su funcin biolgica. 4,5,6
Plaguicidas inhibidores de la colinesterasa:
Dentro de este grupo tenemos a los organofosforados y a los carbamatos que constituyen el
grupo con mayor presencia en el mercado mundial. Estos plaguicidas inhiben
especficamente
la
acetilcolinesterasa
nivel
de
la
sinapsis 7.
La toxicidad aguda de la gran mayora de estos plaguicidas es muy alta y los casos de
intoxicaciones humanas son frecuentes, adems de las intoxicaciones agudas, los
organofosforados tambin pueden causar efectos a largo plazo, en actividades laborales
como la agrcola. (2).
Mecanismos de accin de los plaguicidas inhibidores de la colinesterasa.
Los compuestos organofosforados y carbamatos reaccionan con la enzima de manera
similar a la acetilcolina es decir inhiben competitivamente la actividad colinestersica
comportndose como sustancias anticolinestersicas (permitiendo as que la acetilcolina
siga
ejerciendo
su
actividad).
La enzima acetilcolinesterasa es la responsable de la destruccin y terminacin de la

actividad biolgica del neurotransmisor acetilcolina, al estar esta enzima inhibida se
acumula acetilcolina en el espacio sinptico alterando el funcionamiento normal del impulso
nervioso. La acumulacin de acetilcolina se produce en las uniones colinrgicas
neuroefectoras (efectos muscarnicos), en las uniones mioneurales del esqueleto y los
ganglios autnomos (efectos nicotnicos) as como en el sistema nervioso central
8,9
Seguidamente se muestra de qu manera los plaguicidas de tipo organofosforados y

carbamatos actan sobre el organismo humano.
Paso 1:
AB + acetilcolinesterasa ------> B + acetilcolinesterasa modificada (A)
Paso 2:
Acetilcolinesterasa modificada (A) + H2O ------> A + Acetilcolinesterasa
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Donde AB representa la molcula del organofosforado o carbamato.

En el primer paso, la parte cida (A) del plaguicida se incorpora covalentemente en el sitio
activo
de
la
enzima,
mientras
que
se
libera
su
fraccin
alcohlica
(B).
En el segundo paso, una molcula de agua libera la parte cida (A) del plaguicida, dejando
la enzima libre y, por lo tanto, reactivada. Este proceso de reactivacin dura menos tiempo
con los carbamatos, mientras que con los organofosforados puede ser mucho ms
prolongado e incluso llegar a ser irreversible2,10 .
C. OBJETIVOS
Objetivo General:
Determinar la actividad de la enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria en agricultores
expuestos a plaguicidas organofosforados y carbamatos de los distritos de Habana y
Calzada de la Regin San Martn.
Objetivos Especficos: (Deben estar relacionados al objetivo general)
Determinar la actividad de la colinesterasa eritrocitaria por espectrofotometra UV-Vis,
en agricultores de plaguicidas en cultivos de arroz de los distritos de la Habana y
Calzada de la provincia de Moyobamba de la Regin San Martn.
D. HIPTESIS (s el proyecto lo amerita)
Proporciona supuestos que tratan de explicar ciertos hechos, y da posibles soluciones al problema de
investigacin
6. METODOLOGA (mximo 6 pginas)

A. POBLACIN DE ESTUDIO
Dentro del grupo de las colinesterasas se incluyen la acetilcolinesterasa (E.C.3.1.1.7) o
colinesterasa eritroctica y la acilcolina acilhidrolasa (E.C.3.1.1.8) o colinesterasa plasmtica
La evaluacin de la exposicin a plaguicidas inhibidores la actividad de la colinesterasa ser
realizada mediante la determinacin de la actividad de las enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria
en agricultores a plaguicidas organofosforados y carbamatos, y poblacin no expuesta de los
distritos de la Habana y Calzada de la regin San Martn.
Otro aspecto de la evaluacin de la exposicin ser el uso de la encuestas como herramienta,
para evidenciar la exposicin, si tienen alguna condicin fsica o de salud que pueda afectar los
niveles de actividad de la enzima colinesterasa y conocimientos para reconocer una probable
intoxicacin por plaguicidas.
Antes de la toma de muestra se explicar y se har firmar un consentimiento informado y
asentimiento informado segn corresponda.
B. MARCO MUESTRAL
Se considerarn personas mayores de 14 aos, dedicadas a la actividad agrcola en el cultivo de
arroz, considerando 2 grupos aquellos que estn realizando labores agrcolas y aquellas
personas que no estn relacionados a labores agrcolas.
DISEO MUESTRAL Y SELECCIN DE LA MUESTRA

Se aplicar un diseo descriptivo, transversal, las muestras se obtendrn considerando lo
siguiente:
AGRICULTORES
Se tomarn muestras sanguneas de agricultores en cultivos de arroz, mayores de 14 aos de
edad, de los distritos de Habana, calzada de la provincia de Moyobamba de la regin San
Martn.
PERSONAS NO EXPUESTAS A PLAGUICIDAS
Fecha: 18/03/2014
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Se tomarn muestras sanguneas en personas cuya actividad ocupacional no sea la agrcola

mayores de 14 aos de edad, de los distritos de Habana, calzada de la provincia de
Moyobamba de la regin San Martn o no haya tenido relacin con la actividad agrcola en los
ltimos 6 meses.
C. MUESTRA
Conjunto de unidades mustrales seleccionadas para la aplicacin de la tcnica.
Segn la regin escogida para el desarrollo del protocolo se escogieron de la regin San Martn segn se
detalla en el siguiente cuadro:
De acuerdo al teorema del Limite Central e Intervalos Confiables se determinar un tamao de

muestra de 392 participantes de acuerdo a la siguiente formula:
Donde:
n : Tamao de la muestra
Z : Factor para un nivel de confianza del 95%, valor : 1,96.
P : Proporcin poblacional de individuos con niveles de actividad de la acetilcolinesterasa
eritrocitaria disminuidos. Como no se tiene valores anteriormente determinados para la poblacin
en estudio se tomara el valor de 0,5 para obtener el mayor tamao de muestra posible.
(1-P) : Proporcin poblacional de individuos con niveles de actividad de colinesterasa
srica normales. El valor seria de 0,5.
D : Precisin elegida para el calculo es de 0,09 (9 %).
Aplicando la formula con los valores anteriores tendremos que n = 191
Luego aplicamos el factor de correccin poblacional para la muestra con la siguiente formula:
Donde:
n' : Tamao de muestra a considerar.
n : Tamao de muestra sin correccin.
N : Tamao de la poblacin.
Aplicando la formula con los valores anteriores tendremos que n' = xxx.
Se tomaron al azar xxx muestras (3 ms que el tamao de muestra ptimo calculado) de
agricultores de ambos sexos para lo cual se tuvo en cuenta los siguientes criterios de seleccin:
Individuos mayores de 14 aos que declararon haber trabajado con plaguicidas.
No se considerar personas con anemia
Se han seleccionado personas de los localidades mencionadas anteriormente

considerando datos estadsticos del INEI 2012 de la regin San Martn:
PROVINCI
A
DISTRITO
MOYOBAM CALZADA
PERSONA
CANTIDA
S
D DE
DEDICAD
MUESTRA
AS A
en
LABORES agricultor
AGRICOL
es
AS
571
98
CANTIDA
D DE
MUESTR
A en
personas
no
expuesta
sa
plaguicid
as
98
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BA
HABANA
TOTAL
547
1118
98
196
98
196
Nmero de participantes: 1172

Frmula y software usado para hallar el tamao de la muestra
D. CRITERIOS DE ELEGIBILIDAD
Criterios de inclusin
Se refiere a las caractersticas que hacen que una unidad de anlisis sea parte de la muestra de
proyecto.
Personas de ambos sexos mayores de 14 aos.
Participantes que estn de acuerdo con las condiciones de estudio y firmen el consentimiento
informado.
Criterios de exclusin
Identifica las caractersticas cuya presencia hace que una unidad de anlisis no sea parte de la muestra de
proyecto.
-personas con anemia
E. VARIABLES
Lista las variables.
Si el protocolo es analtico especificar las variables: Independiente, Dependiente e Interviniente.

VARIABLE INDEPENDIENTE:
Exposicin a plaguicidas, organofosforado y carbamatos,

VARIABLE DEPENDIENTE:
Actividad de la enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria

VARIABLE INTERVINIENTE:
Patologas que aumenten los niveles de la enzima colinesterasa.
F. OPERACIONALIZACIN DE LAS VARIABLES

Seguir el modelo de la siguiente tabla:
G. VARIABLES
Lista las variables.
Si el protocolo es analtico especificar las variables: Independiente, Dependiente e Interviniente.
a. Variables de Inters:
i. Inhibicin de la enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria por plaguicidas
organofosforados y carbamatos
b. Variables Secundarias Candidatas:
i. Edad
ii. Sexo
iii. Estado civil
iv. Ocupacin
v. Tiempo de exposicin a plaguicidas
vi. Realiza actividades de fumigacin.
vii. Lugares de almacenamiento de plaguicidas
viii. Uso de implementos de fumigacin
ix. Conocimientos de la intoxicacin por plaguicidas inhibidores de la
colinesterasa.
H. OPERACIONALIZACIN DE LAS VARIABLES
Variable
Indicador
Categoras
Criterios de
medicin de
las
categoras
Tipo
Escala de
Medicin
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Exposicin a
plaguicidas
Edad
Sexo
Estado Civil
Ocupacin
Tiempo
exposicin
plaguicidas
Altura
Inhibicin de la
enzima
colinesterasa
eritrocitaria
nmero de das
desde
nacimiento hasta
la fecha de
entrevista
(Nmero de das
de vida/365)
Se tomar el
sexo que se
encuentre
consignado en el
DNI, de tener
DNI disponible
se
har
de
manera
autoreportada o de
acuerdo
lo
reportado por el
entrevistado
Se tomar el
estado
civil
reportado por la
persona
entrevistada
Como lo reporte
la
persona
entrevistada. En
caso de tenga
ms
de
una
ocupacin
se
solicitar
que
reporte
aquel
que el individuo
dedica la mayor
cantidad
de
tiempo
nmero de aos
de que el sujeto de
estudio
est
expuesto
a
plaguicidas
Esta
variable
ser medida en
metros, con el
si
Inhibicin
cuantitativa
continua
Cuantitativa
Continua
Femenino
Masculino
Cualitativa
Binomial
Cualitativa
Politmica
Cualitativa
Politmica
Cuantitativa
Continua
Cuantitativa
Continua
Soltero
Casado
Conviviente
Divorciado
Viudo
Ninguna
Estudiante
Agricultor/gan
adero
Transportista
Comerciante
(viaja)
Comerciante
(tienda)
Minero
Pescador
Profesional
Otro trabajo
dependiente
Otro trabajo
independiente
Ama de casa.
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Peso
Usos de
implementos de
proteccin en
actividades de
fumigacin
Conocimientos
de la intoxicacin
por plaguicidas
inhibidores de la
enzima
acetilcolinesteras
a eritrocitaria
I.
sujeto descalzo
utilizando
un
tallmetro
calibrado
y
certificado.
Ser medida en
gramos, tomada
con la persona
en ropa ligera y
sin
zapatos
utilizando
una
balanza
calibrada
y
certificada.
Ser medida
basada en el
nmero de
implementos
usados
Cuantitativa
Continua
Cuantitativa
Continua
Se considerar
las
respuestas
emitidas en la
entrevista
cualitativa
Politomica
DESCRIPCIN DE LOS PROCEDIMIENTOS A REALIZAR

Describir las actividades y tareas detalladamente en el orden como van a ejecutarse. Describir brevemente el
proceso que se emplear para el reclutamiento de los participantes. Incluir los lugares de enrolamiento o
captacin de los participantes. Describir los procedimientos necesarios que aseguren la calidad de la
recoleccin de datos y de las actividades relacionados con el protocolo (Entrevistas, exmenes de
laboratorio, biopsias, procedimientos, entre otros).
1.
2.
3.
4.
5.
Estudios preliminares
Toma de muestras
Procesamiento de datos
Resultado
Interpretacin de datos
1. Estudios Preliminares
Debemos considerar la verificacin de los datos emitidos por el Instituto Nacional de Estadstica
e informtica. (INEI), en los lugares propuestos para el estudio, y establecer los contactos
claves para realizar la recoleccin de datos, difusin a nivel comunitario, toma de muestra.
Para ello se debe realizar:
Entrenamiento de Personal de Campo
De preferencia se deber contar con el apoyo de personal propio de las localidades que
puedan tener mayor facilidad de acceso a la poblacin, por ejemplo, personal de apoyo de las
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instituciones de salud como trabajadores comunitarios de salud, enfermeras, etc. El personal

recibir entrenamiento tanto en buenas prcticas en investigacin como en la aplicacin de los
instrumentos de recoleccin de datos.
Procedimiento de Recoleccin de Datos
a. Identificacin de las sujetos de estudio:
o Responsable: Coordinador de Campo y Coordinador de Estudio
o Procedimiento: El coordinador de campo deber hacer un mapa del
conglomerado previo a la visita. Luego de esto, se enumerar la
representacin de las viviendas en nmeros consecutivos. El total de viviendas
identificadas ser enviado por mensaje de texto al telfono celular del
coordinador del estudio, quien har la aleatorizacin utilizando el programa
Microsoft Excel. Se enviar al coordinador de campo 10 nmeros aleatorios de
las viviendas seleccionadas; adems de 10 nmeros de remplazo, los cuales
deben ser utilizados de manera consecutiva en caso haya rechazo de las
originalmente elegidas.
b. Aproximacin a las viviendas
o Responsable: Coordinador de Campo (CC).
c. Procedimiento: El CC deber acercarse a la vivienda que ha sido elegida y tocar la
puerta hasta por tres veces con un intervalo no menor de dos minutos. En caso no
haya respuesta, se dejar una nota explicando el motivo de la visita y explicando que
los recolectores de datos podran regresar. En esta comunicacin adems se incluir
nmeros de telfono de contacto del CC en caso la persona desee comunicarse para
mayor informacin. En caso haya respuesta el CC solicitar conversar con la persona
encargada del hogar, de no estar presente se solicitar informacin acerca de la mejor
hora y fecha para poder encontrar al encargado del hogar y se dejar la nota descrita
anteriormente. De encontrarse el encargado del hogar el CC proceder a presentarse
de manera completa y explicar el motivo de la visita, as como invitar a la persona a
participar en el estudio. De aceptar la persona, el CC presentar a la encargada del
hogar a un empleado de recoleccin de datos (RD) informando que esa persona le
explicar con mayor detalle el propsito y procedimiento del estudio, y de aceptar har
algunas preguntas as como muestras de orina. De negarse la persona, el CC
preguntar de manera amable si es que fuera posible regresar en otro momento. De
negarse el responsable del hogar, no se intentar hacer ms intentos de reclutamiento.
d. Recoleccin de Datos
o Responsable: Empleado de Recoleccin de Datos (RD)
o Procedimiento: Luego de haber sido presentada a la persona encargada del
hogar, el RD iniciar el proceso de consentimiento informado. De ser aceptado
solicitar al participante que firme el formato de consentimiento informado
como seal de que ha aceptado participar en el estudio. Luego de esto se
proceder a completar el cuestionario y a la evaluacin fsica del sujeto de
estudio.
2. Toma de Muestra:
Se colectar muestras de sangre venosa a cada persona participante en el estudio, previa
entrevista y firma del consentimiento y/o asentimiento informado.
En la regin San Martn se consider los siguientes lugares:
Provincia de Moyobamba en los distritos de Calzada, Habana.
3. Mtodo Analtico
La determinacin de la actividad de la aceticolinesterasa eritrocitaria en muestras de sangre
se realizar por espectrofotometra UV-Vis Mtodo Ellman modificado.
J. ANLISIS Y PROCESAMIENTO DE LOS DATOS
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Describir el software en que se ingresar y analizar los datos. Sealar las pruebas estadsticas a usar si
corresponde. Presentar las tablas tentativas mostrando los principales resultados del protocolo.
Se realizarn anlisis estadstico descriptivo de las variables del estudio, pruebas de comparacin de
medias (t-Student, ANOVA), pruebas de correlacin (Pearson o Spearman) y anlisis multivariada.
Todas las pruebas sern realizadas con los programas SPSS versin 17.0.
7. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS
A. ORGANIZACIN Y RESPONSABILIDADES
Definir en forma clara las responsabilidades de las personas clave en el desarrollo del
investigacin.
protocolo de
Ha seguido curso de
Institucin Responsable de: tica en Investigacin
Si
No
Q.F. Guillermo Fernando CensopasInvestigacin
X
Villa Gonzales
INS
Nombre del Investigador
EL PERSONAL
HUAMANI PACSI CARLOS
B. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
El cronograma ser completado para cada ao de ejecucin y ser dividido por fases segn meses, tomando
como ejemplo la siguiente tabla.
Ver anexo 2
C. PRESUPUESTO
El presupuesto programado debe contener la descripcin de los bienes y/o servicios, de acuerdo con las
especficas de gasto, de acuerdo a la tabla de presupuesto programado.
Se tomarn en cuenta los siguientes puntos:
Contratos eventuales de personal de apoyo, si es justificado.
Materiales e insumos: incluyen tiles de oficina, materiales e insumos de laboratorio.
Movilidad local.
Otros costos directos como servicios, fotocopias, etc.

Dentro del presupuesto NO se considerar:
Gastos de equipamiento ni gastos corrientes de las instituciones participantes.
Viajes al exterior.
Honorarios de investigadores.
Compra de bienes de capital.

En caso de protocolos colaborativos, mencionar los montos de colaboracin econmica que cada
institucin involucrada aportar.
Ver anexo 3
TABLA DE PRESUPUESTO PROGRAMADO MENSUALIZADO
Presentar el presupuesto en forma detallada y mensualizada, segn Tabla de presupuesto programado
mensualizado.
Ver anexo 4
8. ASPECTOS TICOS
A. PARTICIPACIN DE SERES HUMANOS. MARCAR CON X:
Proporciona informacin si en el proyecto se utilizaran muestras biolgicas de seres humanos o la participacin
de seres humanos.
La investigacin NO involucra la participacin de seres humanos (ni muestras

biolgicas).
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La investigacin involucra la participacin de seres humanos o sus muestras biolgicas.

B. PARTICIPANTES:
Indique cuntos participantes espera incluir en el protocolo, el nmero de participantes

en esta institucin y el nmero total de participantes en el proyecto (para los casos en
los que intervengan varias instituciones).
Indique el rango de edades y el grado de competencia (especialmente si incluye nios).

Especifique si existe alguna clase especial de sujetos vulnerables elegibles para
participar en el proyecto (nios, prisioneros, personas mentalmente deterioradas,
gestantes, fetos, productos de fertilizacin in vitro, etc.).
PARTICIPANTES
Nmero de participantes por grupo:
Nmero en su institucin:
Nmero en cada institucin:
Nmero total en el protocolo:
Rango de edades:
Competencia (para el consentimiento):
Existe alguna clase especial de sujetos vulnerables
elegibles para participar en el estudio?
NMERO
396
396
14-65 aos
No / S: Especifique
C. RECLUTAMIENTO DE LOS PARTICIPANTES:

Describa brevemente el proceso que se emplear para el reclutamiento de los participantes. Incluya el
nombre y calificacin de la persona encargada, el lugar de enrolamiento y los criterios de inclusin y
exclusin.
Proceso de reclutamiento:
El reclutamiento se realizar durante X meses en las localidades de la Regin San
Martn a cargo de personal entrenado y especializado.
Criterios de inclusin
Se refiere a las caractersticas que hacen que una unidad de anlisis sea parte de la muestra de
proyecto.
Personas de ambos sexos de 15 aos a ms, cuya ocupacin sea agricultor o no, en cultivos
de arroz (al menos las ltimas 4 semanas).
Personas que sean aplicadores de plaguicidas.
Participantes que estn de acuerdo con las condiciones de estudio y firmen el consentimiento
informado.
Criterios de exclusin
Identifica las caractersticas cuya presencia hace que una unidad de anlisis no sea parte de la muestra de
proyecto.
Personas cuya hemoglobina est por debajo de los valores normales.
Persona encargada del contacto:

Coordinadora de la Estrategia nacional de metales pesado y otras sustancias qumicas
de la regin San Martn. O Direccin ambiental y salud ocupacional.
Lugares de enrolamiento:
Segn el censo de poblacin y vivienda del ao 2007, la regin San Martn presenta 728,808
habitantes, se tomarn en consideracin personas no expuestas ocupacionalmente a plaguicidas
de la Regin para grupo control de las enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria y personas
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ocupacionalmente expuestas es decir agricultores de los distritos de Calzada y Habana

pertenecientes a la provincia de Moyobamba.
Sobre discriminacin de los Participantes:
Describa las medidas que sern tomadas para evitar la discriminacin de participantes. En el caso de que
algn grupo de participantes sea discriminado (gestantes, nios, estratos socio-econmicos, etc.), explique y
justifique los motivos de esta discriminacin.
Para evitar la discriminacin de pacientes sern sometidos a una encuesta para determinar el grado de
exposicin a plaguicidas por parte de las personas expuestas .
Ninguna
Sobre coaccin de los Participantes:

Describa las medidas que sern tomadas para evitar la coaccin de los participantes al momento del
reclutamiento y/o al momento de firmar el consentimiento informado.
Los participantes leern detenidamente el consentimiento informado, el encargado de

tomar el consentimiento absolver todas las dudas que tenga, se tomarn el tiempo
necesario para la misma.
D. CONSECUENCIAS DE LA PARTICIPACIN EN LA INVESTIGACION:
Ninguna
E. PAGO A LOS PARTICIPANTES:

No.
F. INFORME DE LOS AVANCES A LOS PARTICIPANTES:
Indique si los participantes del proyecto tendrn acceso a la informacin de sus resultados y de los
avances realizados.
Indique si se entregarn informes peridicos o un informe final.
Esta informacin deber constar adems en el Consentimiento Informado.
Se realizarn informes peridicos para los participantes?

Se realizar un informe final para los participantes?
S / No
S / No
Si la respuesta es afirmativa, especifique el contenido del informe.

Si su respuesta es negativa, especifique las razones.
Se informar si los niveles de actividad de la enzima colinesterasa plasmtica y

acetilcolinestersa eritrocitaria en sangre estn en la categora de inhibicin o no
comparados con los valores referenciales de la poblacin no expuesta de la regin san
Martn obtenidos en el presente estudio.
G. INFORME AL PBLICO:
Ser la informacin de este protocolo, accesible pblicamente al final del mismo?
S / No
Los resultados sern publicados en una revista indexada.
H. OTROS PUNTOS DE RELEVANCIA TICA RESPECTO A LOS PARTICIPANTES:
Ninguna
I.
CONFIDENCIALIDAD DE LA INFORMACIN OBTENIDA:
La informacin ir codificada en un banco de datos de identidades? S / No

Explique:
La identidad ir codificada y los datos se manejarn con cdigos de identificacin.
Estar este banco de datos separado de la informacin obtenida? S / No
Explique:
Las identidades se almacenarn en un banco de datos separado para evitar la

identificacin de los datos codificados.
Tendrn otro acceso a informacin que identifique al participante? S / No
Explique:
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No ninguna
Cmo sern almacenados y protegidos los documentos y resultados?
Se almacenarn por 5 aos en un lugar de acceso restringido.

Colocar una copia del Consentimiento Informado u otra informacin del protocolo en la historia
clnica del participante? S / No
Si su respuesta es afirmativa, explique:
Si su respuesta es afirmativa, explique: Dado que no contaremos con una fotocopiadora en el
domicilio de los participantes, se firmar la copia y original del CI, quedando un ejemplar con el
participante.
J. CONSENTIMIENTO INFORMADO:
Adjunte 02 copias del consentimiento informado que se utilizar en el protocolo de investigacin.
Asegrese que en el documento conste el nmero de la versin y la fecha.
Ver anexo
9. BIBLIOGRAFIA O REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. ALBERT, Lilia A.: Plaguicidas en INTRODUCCIN A LA TOXICOLOGA

AMBIENTAL. Mxico. Centro Panamericano de Ecologa Humana y Salud.
Divisin de Salud y Ambiente. OPS y OMS. 1997, pp.366-370; 371-376.
2. HENAO H., Samuel y COREY O., Germn: Plaguicidas inhibidores de las
colinesterasas. Mxico. Centro Panamericano de Ecologa Humana y Salud.
3. Programa de Salud Ambiental. OPS y OMS. 1991, pp.4-5; 18, 20. Ministry of
Agriculture, Fisheries and Food, Pesticides Branch: Pesticides Safety
Precautions Scheme. London, United Kingdom, Ministry of Agriculture,1979.
4. Whittaker M. Cholinesterase. New York: Karger; 1986. (Monographs in Human
Genetics No. 11).
5. Guyton AK. Tratado de fisiologa mdica. 10.a ed. Mxico, D.F.:
Interamericana-Mc Graw Hill; 2000.
6. Schwarz M, Glick D, Lowenstein Y, Soreq H. Engineering of human
cholinesterases explains and predicts diverse consequences of administration of
various drugs and poisons. Pharmacol Ther 1995;67(2):283322
7. JEYARATNAM L.; MARONI M.: Toxicology 2da Edicin. Ediciones
Panamericana. Mxico 1994. pp.17,91.
Fecha: 18/03/2014
Versin: 01
Pgina 18
8. GISBERT CALABUIG, S.A.: Medicina legal y Toxicologa. Barcelona.

Editorial Masson S.A. 5ta. Edicin. 1998. pp.807.
9. DUEAS, A.; CASTRODEZA, J. y LOZANO; R.: Organofosforados. En
Intoxicaciones agudas en medicina de urgencia y cuidados crticos. Barcelona
MASSON S.A., 1999, pp.326.
10. INCAP/PLAGSDALUD/OPS.: Plaguicidas de tipo organofosforado y
carbamato. Curso a distancia sobre diagnstico, tratamiento y prevencin de
intoxicaciones agudas causadas por plaguicida. 1996. pp.3, 5.
11. Magnotti RA Jr, Eberly JP, Quarm DEA, McConell RS. Measurement of
acetylcholinesterase in erythrocytes in the field. Clin Chem 1987;33:17311735.
12. Magnotti RA Jr, Dowling K, Eberly JP, McConell RS. Field measurement of
plasma and erythrocyte cholinesterases. Clin Chem Acta 1988;176(3):315332.
13. Carlock LL, Chen WL, Gordon EB, Killeen JC, Manley A, Meyer LS, et al.
Regulating and assessing risks of cholinesterase-inhibiting pesticides: divergent
approaches and interpretation. J Toxicol Environ Health B Crit Rev
1999;2(2):105160
14. Satyender Singh, Vivek Kumar, Sachin Thakur. DNA damage and cholinesterase
activity in occupational workers exposed to pesticides. Environmental
Toxicology and Pharmacology Volume 31, Issue 2, March 2011, Pages 278285.
15. H.C. Catano, E. Carranza, C. Huamani, A.F. Hernandez. Plasma cholinesterase
levels and health symptoms in Peruvian farm workers exposed to
organophosphate pesticides. Arch. Environ. Contam. Toxicol., 55 (1) (2008), pp.
153159.
16. S. Jintana, K. Sming, Y. Krongtong, S. Thanyachai. Cholinesterase activity,
pesticide exposure and health impact in a population exposed to
organophosphates Int. Arch. Occup. Environ. Health, 82 (7) (2009), pp. 833842
17. CHAPPA S.M.; C.E. 2007 Estudio de sistemas de produccin practicado por
pequeos agricultores del Bosque Seco tropical en la Selva Alta Peruana. Tesis
de maestria por sustentar en la Universidad de Chile. (54 pp.)
18. CHAPPA S.M.; SEPIA XII PERU: El problema agrario en debate. Mesa
Regional Sistemas productivos en la Regon San Martn Tarapoto. 13 al 16
agosto 2007.
19. LANGE, G. Pesticide use in Rice cultivation in Tarapoto, Peru. Pesticide
residues in blood of farmers, usage behaviour, and health care practices.
Masters thesis. Gun Lange. (20 pp.) Department of Environmental Assessment.
Swedish University of Agricultural Sciences. Box 7050. SE-750 07 Uppsala.
Sweden. Peru. 2006.
20. ANDERSSON, Agneta. MILK WITH SODA. A Minor Field Study on the
Chemical Companies and Distributors Role in the Usage of Pesticides in the
Rice Cultivation, (59 pp.) Tarapoto, Per. 1995.
21. Juan F. Muniz. Biomarkers of oxidative stress and DNA damage in agricultural
workers: A pilot studyToxicology and Applied Pharmacology 227 (2008) 97
107.
22. Alaa A. Mecdad, Manal H. Ahmed b, Manal E.A. ElHalwagy Mostafa M.M.
AfifyA study on oxidative stress biomarkers and immunomodulatory effects of
pesticides in pesticide-sprayers. Egyptian Journal of Forensic Sciences.2011. 1,
9398.
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Versin: 01
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23. Marina Lacasaa. Inmaculada Lpez-Flores. Miguel Rodrguez-Barranco

Association between organophosphate pesticides exposure and thyroid
hormones in floriculture workersToxicology and Applied Pharmacology.2010.
243: 1926
24. Mohammad Abdollahi, Roja Rahimi, A review on the mechanisms involved in
hyperglycemia induced by organophosphorus pesticides. Pesticide Biochemistry
and Physiology Volume 88, Issue 2, June 2007, Pages 115121
25. Diane S. Rohlman, W. Kent Anger, Pamela J. Lein. Correlating neurobehavioral
performance with biomarkers of organophosphorous pesticide exposure.
NeuroToxicology 32 (2011) 268276.
26. Andreia N.O Jardim, Eloisa D. Caldas. Brazilian monitoring programs for
pesticide residues in food- Results from 2001 to 2010. Journal Food Control .
2012; 25 607-616
27. Ibarra Enrique, Linares Tomasa. La inhibicin de la actividad colinestersica
sangunea como biomarcador de exposicin a compuestos organofosforados y
carbamatos. Una revisin crtica Blood cholinesterase activity as a biomarker of
exposure to organophosphorus compounds and carbamates. A critical review.
Revista Cubana de Salud y Trabajo 2012; 13 (3): 59-65.
ANEXOS 1
HOJA DE ENCUESTA
I. DATOS GENERALES
Nombres y apellidos _________________________________________________
Edad ________ aos.
Sexo ________
Peso ________ Kg.
Talla ________ m.
Direccin _________________________________________________
II. HISTORIA LABORAL
2.1. Nivel de instruccin
a) superior b) Primaria b) Secundaria c) Ninguna
2.2. Qu ocupacin tiene actualmente? ____________________________
a) Fumiga b) No fumiga c) Otros ____________________________
2.3. Hace cunto tiempo fumiga?
_______________________________________________________________
2.5. Qu tipo de equipo utiliza para fumigar
a) Mochila b) Motobomba c) otros
______________________________________________________________
2.6. En qu estado se encuentra su equipo de fumigacin?
a) Bien
b) Regular
c) Mal
2.7. Seale si realiza las siguientes actividades:
Actividades Si ( ) No ( X )
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( ) Prepara la mezcla del producto

( ) Reutiliza envases
( ) Compra y transporta
2.8. Dnde almacena los plaguicidas
a) Dentro del hogar b) Fuera del hogar
2.9. Dnde y cmo desecha los envases de plaguicida?
______________________________________________________________________
2.10. Durante la aplicacin se moja alguna parte de su cuerpo?
a) Si b) No comentario
___________________________________________________________
2.11. Qu implementos de proteccin utiliza cuando fumiga?
Implementos Si ( ) No ( X )
( ) Sombrero o gorra
( ) Pauelo
( ) Mascara y protector de ojos
( ) Zapatos o botas
( ) Guantes
( ) Delantal
( ) Espaldar
( ) Camisa o polo
( ) Pantaln
( ) Sandalias
III. HISTORIA DE MODO Y ESTILO DE VIDA
3.1. Al final de la jornada de trabajo acostumbra usted a baarse
( ) Si
( ) No
3.2. S fumiga dos o tres das usa la misma ropa?
( ) Si
( ) No
3.3. Consume alimentos, fuma y/o toma bebidas alcohlicas en el mismo lugar de trabajo
( ) Si ( ) No
IV. CONOCIMIENTOS
4.1. Usted ha recibido asesora tcnica alguna vez?
( ) Si ( ) No
4.2. Sabe usted como auxiliar a un intoxicado al no contar con un mdico? Por ejemplo.
_________________________________________________________________________
4.3. Sabe reconocer una intoxicacin por plaguicidas?
________________________________________________________________________
4.4. Conoce la va de intoxicacin?
a) Olfato b) Oral c) Drmica
4.5. Conoce usted los efectos dainos que producen los plaguicidas?
( ) Si ( ) No
V. SALUD
5.1. Tuvo Ud. antecedente de Intoxicacin a Plaguicidas?
( ) Si ( ) No
5.4. Ha recibido tratamiento mdico por algn problema de salud relacionado a plaguicidas?
( ) Si ( ) No
5.5. Qu medicamentos est tomando actualmente?
__________________________________________________________________
5.6. Seale Ud. si presenta algunas molestias con relacin a la labor agrcola que realiza
Efectos Muscarnicos
Efectos Nicotnicos
Efectos Neurolgicos
Visin borrosa ( )
Mareos ( )
Ansiedad ( )
Miosis ( )
Cefalea ( )
Depresin ( )
Hiperemia conjuntival
Palidez ( )
Perturbacin mental ( )
Rinorrea ( )
Hipertensin arterial ( )
Somnolencia ( )
Hiperemia de Mucosas ( )
Calambres ( )
Calambres ( )
Disnea ( )
Mialgias ( )
Depresin Central
Respiratoria y Circulatoria ( )
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Dolor torcico ( )
Tos ( )
Cianosis ( )
Bronco constriccin ( )
Anorexia ( )
Nuseas ( )
Clicos ( )
Tenesmo ( )
Sialorrea ( )
Diarrea ( )
Bradicardia ( )
Miccin involuntaria ( )
Disuria ( )
Hipersecrecin ( )
Sudoracin ( )
Debilidad general ( )
Parlisis Flcida ( )
Fasciculaciones ( )
5.7. Ha sido diagnosticado por un mdico de:

Enfermedad Si / No
( ) Alergias
( ) Antecedentes de intoxicacin alcohlica
( ) Cncer de piel
( ) Derrame o trombosis cerebral
( ) Diabetes
( ) Enfermedades mentales
( ) Hepatitis
( ) Leucemia
( ) Neumona
( ) Prdidas auditivas
( ) Tuberculosis
(
(
(
(
(
(
(
(
(
(
(
Confusin ( )
Coma ( )
Convulsin ( )
Ataxia ( )
) Anemia crnica
) Bronquitis, sinusitis
) Cirrosis
) Desnutricin
) Enfermedad neurolgica
) Epilepsia
) Hgado grande
) Meningitis
) Prdida de la visin
) Presin alta
) lcera de estmago
NIVEL DE ACTIVIDAD DE LA COLINESTERASA SRICA:_____________ mU/ml

ANEXO 2
INSTITUCION:
INVESTIGADORES:
ESTUDIO:
Centro Nacional de Salud Ocupacional y Proteccin del Ambiente para la

Salud Instituto Nacional de Salud
Guillermo Fernando Villa Gonzales, Carlos Huaman, Blanca Rosado
Protocolo XXX: Niveles de acetilcolinesterasa eritrocitaria en
agricultores de cultivos de arroz expuestos a plaguicidas organofosforados
y carbamatos de los distritos de Habana y calzada de la provincia de
Moyobamba - Regin San Martin, Per
CONSENTIMIENTO INFORMADO (Adultos - Mayores de 18 aos)
ASENTIMIENTO INFORMADO (15 a 17 aos)
PROPOSITO DEL PROYECTO

Nosotros estamos invitndolo a usted a participar en un estudio realizado por investigadores del Centro
Nacional de Salud Ocupacional y Proteccin del ambiente para la Salud Instituto Nacional de Salud y
de la Direccin Regional de Tacna. En este estudio participarn alrededor de 500 personas, la finalidad
del estudio es conocer los niveles de actividad de la acetilcolinesterasa plasmtica. No estn obligados a
participar en este estudio de investigacin, su participacin es completamente libre y voluntaria. Este
estudio no es necesario para el cuidado mdico de ustedes, este es hecho con fines solamente de
investigacin. Nosotros le proporcionaremos una copia de este documento.
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Antes de que usted sea incluido en el estudio, nosotros queremos que lea este consentimiento. Este
documento puede tener algunas palabras tcnicas que no conozca y necesite de explicacin. Por favor
pdale a su mdico o cualquiera de los responsables del estudio para que le explique sobre alguna palabra
o informacin que no estn completamente claras. Por favor haga todas las preguntas que necesite para
que usted entienda claramente las implicancias de su participacin. Nosotros le daremos una copia de este
documento.
Luego de haber respondido al cuestionario de nuestro colaborador (colector de datos), requerimos pase a
evaluacin mdica por nuestros mdicos del estudio. Su participacin es totalmente voluntaria.
PROCEDIMIENTOS
Si usted decide participar un personal de salud del estudio lo entrevistar y realizar un exmen fsico
completo, as mismo el personal le proceder a sacar una muestra de sangre venosa.
RIESGOS Y MOLESTIAS
La evaluacin mdica ser realizada por un mdico entrenado, este procedimiento no implicar ningn
dao a su integridad ni salud fsica, no les ocasionar gasto alguno.
BENEFICIOS
Usted recibir evaluaciones y diagnstico gratuitos. Todas las evaluaciones mdicas y Exmenes
auxiliares son parte del estudio y sern proporcionados gratuitamente durante su participacin: el dosaje
de sangre venosa para determinar los niveles de colinesterasa eritrocitaria . La sociedad se beneficiar
porque se determinar cuantas personas presentan inhibicin de la actividad de la colinesterasa
eritrocitaria, esto permitir la mejora en el monitoreo de pacientes expuestos a plaguicidas
organofosforados y carbamatos.
COMPENSACION
No se dar ninguna compensacin econmica por su participacin en este estudio.
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CONFIDENCIALIDAD
Nosotros guardaremos sus respuestas a las preguntas y los formatos con cdigos y no con nombres.
Slo la persona que le hace las preguntas, y los investigadores que desarrollan el estudio, tendrn acceso a
su nombre. Todos los documentos con informacin personal se guardarn bajo llave en las oficinas del
estudio. Si se publican los resultados de este estudio, no se nombrarn o identificarn a las personas que
participaron en el estudio. Los datos de su participacin en este estudio no se harn disponibles a ninguna
persona ajena al estudio sin su consentimiento. Sin embargo, sus archivos pueden ser revisados por
personal que supervisa el protocolo para asegurar la seguridad y la conduccin adecuada del estudio y los
archivos tambin estn sujetos a la supervisin de la agencia reguladora.
Al finalizar el estudio, los resultados sern reportados y entregados a la DIRESA-SAN MARTIN, para ser
entregados a los participantes del estudio y se les haga el monitoreo individualizado.
PREGUNTAS
Si despus, usted tiene alguna pregunta sobre este estudio, por favor contacte a la investigadora
responsable del estudio Q.F. Guillermo Fernando Villa Gonzales (telfono 986907373). Si ustedes tienen
alguna pregunta sobre los aspectos ticos de este estudio, o si ustedes piensan que han sido perjudicados o
no se les ha tratado justamente por favor contacte al presidente del Comit Institucional de tica del
Insituto Nacional de Salud, Med. Elias Wilfredo Salinas Castro (wsalinas@ins.gob.pe Telf. : (51-1) 6176200 Anexo 2175 2179).
CONSENTIMIENTO
Yo he ledo el formato de consentimiento /asentimiento informado y se me ha dado la oportunidad de
discutirlo y hacer preguntas. YO, por medio de este documento, consiento participar en este estudio. Yo
recibir una copia firmada de este formato de consentimiento.
________________________________________________________________________________
Nombre del paciente (Letra imprenta)
________________________________________
Firma
__________________________
Fecha
________________________________________________________________________________
Nombre del testigo (Letra imprenta)
(Solo si el participante es iletrado)
________________________________________
Firma
__________________________
Fecha
___________________________________________________________________________
Nombre del Investigador (Letra imprenta)
________________________________________
Firma
__________________________
Fecha
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ANEXO 2: Cronograma de Actividades

Actividad / Mes
10
11
12
13
14
15
16
Adaptacin de Protocolo, Ficha de

1
Recoleccin de Datos, Manual para

Personal de Campo y Consentimiento
Informado
2
Revisin tica y Autorizacin Institucional
Establecimiento de Local de Investigacin
Entrenamiento Investigadores y de
Personal de Campo
Seleccin de Conglomerados de Viviendas y
Mapeo
Contacto con Comunidades, Trabajo de

6
Comunicacin (Difusin a nivel
comunitario)
7
Recoleccin de Datos
Entrada de Datos
Anlisis de Datos
10
Preparacin de Informe Final
11
Preparacin de Publicaciones
12
Cierre de Estudio
X
X
X
X
Ttulo del Protocolo: Niveles de acetilcolinesterasa eritrocitaria en agricultores de cultivos de arroz expuestos a plaguicidas organofosforados y carbamatos de los distritos de Habana y calzada de la provincia de Moyobamba - Regin San Martin-Per .
Fecha: 18/03/2014
Versin: 01
Pgina 25
ANEXO 2: PRESUPUESTO
PARTE I: PERSONAL
Cargo
Asistente de
Investigacin
Coordinador
de Campo
Recolectores
de Datos
Choferes
Viticos
personal
Entrada de
Datos
Total solicitado
para personal
PARTE I: PERSONAL
Sueldo
Base
Nmero
Sueldo
Mensu
Sueldo
de
Total
al
Total
Meses
Individu
Nmer (Soles Benefici Mensu Contrata
al por
o
)
os
al
do
Estudio
2
1500
600
2100
12
25200
1500
600
2100
12600
10
750
300
1050
6300
750
300
1050
6300
10
330
3300
3300
1500
600
2100
14700
Monto Total
Solicitado
S/.
50,400.00
S/.
25,200.00
S/.
63,000.00
S/.
12,600.00
33,000.00
S/.
29,400.00
S/. 213, 600.00
Fecha: 18/03/2014
Versin: 01
Pgina 26
PRESUPUESTO
Anlisis de Laboratorio
Precio
Individual
Insumo
(S/.)
Nmero
Determinacin de acetilcolinesterasa
35
500
eritrocitaria
Material de Oficina
Precio
Individu
Insumo
al (S/.)
Material de Oficina Varios (Papel,
8000
lapiceros, etc)
Material de Campo
Precio
Individu
al (S/.)
Total (S/.)
17500
Nmero
Total (S/.)
8000
Nme
ro
Total (S/.)
450
900
Tanque de Nitrgeno Lquido

COSTO TRANSPORTE A LABORATORIOS
DE CENSOPAS (semanal)
3000
6000
400
24
9600
GASOLINA (Semanal)
2000
24
48000
Insumo
Tubos toma muestra sanguinea
Total solicitado para insumos
S/.
82,000.00
Fecha: 18/03/2014
Versin: 01
Pgina 27

2 - Formato Anexo A - DOCTORADO

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1.

TTULO DEL PROTOCOLO DE INVESTIGACIN OBSERVACIONAL

La exposicin crnica a plaguicidas organofosforados en personas dedicadas a la actividad agrcola

Parkinson, Enfermedad de Alzheimer, Diabetes, obesidad, cncer y otros.

acetilcolinesterasa eritrocitaria, en caso de personas expuestas ocupacionalmente

muestras de sangre. Adicionalmente, mediante una entrevista personal con la

4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

En el Per, segn informe del Ministerio de Trabajo (2012), la poblacin agrcola

para residuos de pesticidas en

La toxicidad de los plaguicidas organofosforados y carbamatos, estn relacionadas

de la enzima colinesterasa plasmtica y acetilcolinesterasa

eritrocitaria, comparadas con las personas no expuestas de la regin. La exposicin

colinesterasa como los organofosforados y

carbamatos, los signos y sntomas pasan desapercibidos para el agricultor

intoxicaciones agudas, sin embargo estn

relacionados a enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de

La evaluacin de riesgo txico por exposicin a plaguicidas inhibidores de la

Establecer un programa de Vigilancia de la Salud en agricultores expuestos a

Relacionar la actividad enzimtica de la acetilcolinesterasa eritrocitaria con la

ocupacionales como utilizacin de elementos de proteccin personal (EPP),

C. LIMITACIONES Y VIABILIDAD DE LA INVESTIGACION

Los plaguicidas rganofosforados y carbamatos, inhiben las enzimas colinesterasas

(2011), describi la inhibicin de la actividad de la acetilcolinesterasa eritrocitaria en 70

En el ao 2006, se realiz un estudio interdisciplinario realizado sobre el uso de

sentido nuestro objetivo es determinar la actividad de la enzima acetilcolinesterasa

III Poco txico

La enzima acetilcolinesterasa es la responsable de la destruccin y terminacin de la

Seguidamente se muestra de qu manera los plaguicidas de tipo organofosforados y

Donde AB representa la molcula del organofosforado o carbamato.

6. METODOLOGA (mximo 6 pginas)

DISEO MUESTRAL Y SELECCIN DE LA MUESTRA

Se tomarn muestras sanguneas en personas cuya actividad ocupacional no sea la agrcola

De acuerdo al teorema del Limite Central e Intervalos Confiables se determinar un tamao de

Se han seleccionado personas de los localidades mencionadas anteriormente

Nmero de participantes: 1172

-personas con anemia

Si el protocolo es analtico especificar las variables: Independiente, Dependiente e Interviniente.

Exposicin a plaguicidas, organofosforado y carbamatos,

Actividad de la enzima acetilcolinesterasa eritrocitaria

F. OPERACIONALIZACIN DE LAS VARIABLES

DESCRIPCIN DE LOS PROCEDIMIENTOS A REALIZAR

instituciones de salud como trabajadores comunitarios de salud, enfermeras, etc. El personal

Contratos eventuales de personal de apoyo, si es justificado.

Materiales e insumos: incluyen tiles de oficina, materiales e insumos de laboratorio.

Otros costos directos como servicios, fotocopias, etc.

Gastos de equipamiento ni gastos corrientes de las instituciones participantes.

Compra de bienes de capital.

La investigacin NO involucra la participacin de seres humanos (ni muestras

La investigacin involucra la participacin de seres humanos o sus muestras biolgicas.

Indique cuntos participantes espera incluir en el protocolo, el nmero de participantes

Indique el rango de edades y el grado de competencia (especialmente si incluye nios).

C. RECLUTAMIENTO DE LOS PARTICIPANTES:

Personas cuya hemoglobina est por debajo de los valores normales.

Persona encargada del contacto:

ocupacionalmente expuestas es decir agricultores de los distritos de Calzada y Habana

Sobre coaccin de los Participantes:

Los participantes leern detenidamente el consentimiento informado, el encargado de

E. PAGO A LOS PARTICIPANTES:

Se realizarn informes peridicos para los participantes?

Si la respuesta es afirmativa, especifique el contenido del informe.

Se informar si los niveles de actividad de la enzima colinesterasa plasmtica y

CONFIDENCIALIDAD DE LA INFORMACIN OBTENIDA:

La informacin ir codificada en un banco de datos de identidades? S / No