UNIVERSIDAD TECNOLGICA DE ALTAMIRA

TSU en Qumica rea Industrial

IDENTIFICACION DE FLAVONOIDES EN HOJA DE CHACLOCO (HAMELIA
PATENS)
Bernal Aguilar Benito Israel
Carrillo Hernndez Fernando Sayek
Luitin Esteban Javier Alejandro

Metodologa
Diseo Experimental:
a) Identificacin del mejor solvente de extraccin de flavonoides para H.
patens
La preparacin de la materia prima de hojas de Chacloco (H. patens) se realiz a
travs de la colecta de la planta en el campo, por la tarde. Para determinar el
mejor extracto de las antocianinas en la planta, se us cuatro solventes diferentes.
Preparacin de muestra 1.
Se colocaron 5 gr de hojas de Chacloco en un matraz Erlenmeyer de 100ml y se
aadieron 50ml de etanol. Se sell y se dej en reposo por una semana.
Preparacin de muestra 2.
Se colocaron 5 gr de hojas de la planta en un matraz Erlenmeyer de 100 ml y se
aadieron 50 ml de acetona grado reactivo. Se sell y se dej en reposo por una
semana.
Preparacin de muestra 3.
Se colocaron 5 gr de hojas de la planta en un matraz Erlenmeyer de 100 ml y se
aadieron 50 ml de xileno. Se sell y se dej en reposo por una semana.
Preparacin de muestra 4.
Se colocaron 5 gr de hojas de la planta en un matraz Erlenmeyer de 100 ml y se
aadieron 50 ml de tolueno. Se sell y se dejo en reposo por una semana.
Se determino que el etanol era el mejor solvente para el extracto de flavonoides de
la planta Chacloco.
b) Obtencin del extracto etanolico de H.patens
Preparacin de la muestra: Las hojas se secaron en mufla a 300C por 10 minutos
y se molieron con licuadora.
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Se procedi a concentrar los compuestos de la hoja con extractor Soxhlet, usando
etanol como solvente. Se realizaron cuatro lavados con el etanol recuperado hasta
obtener un extracto color verde negro. El extracto obtenido es el que se usa para
todos los anlisis. Posteriormente se midio el pH del extracto el cual resulto ser de
6.
c) Identificacin de flavonoides en el extracto etanolico de H.patens
Se realizaron las siguientes pruebas cualitativas al extracto para poder identificar
flavonoides, en especial antocianinas:
El extracto etanolico se extrae con hexano para separar los colores del extracto y
poder apreciar mejor el color en las pruebas cualitativas. La fase etanolica se filtro
y es la que se uso en las pruebas.
Se colocaron 2 ml de filtrado en 4 tubos de ensayo y se realizo las siguientes
pruebas:
Tubo 1: Se agrego a la solucin gota a gota NaOH 2M. Un cambio color
azul-verdoso que se desvanece con el tiempo, indica la presencia de
antocianinas. Un cambio a color amarillo indica la presencia de
betacianinas.
Tubo 2: Prueba de Shinoda. Se agrego a la solucion virutas de aluminio y
unas pocas gotas de acido clorhidrido concentrado. Si la solucion produce
colores rojos, es seal de la presencia de flavonoles, flavononas,
flavononoles, y xantonas. Las chalconas y auronas dan colores rojos
inmediatamente al agregar el cido. Los colores verdes o azules son
caractersticas de las flavanonas y flavononoles. Las 4-fenilcumarinas
forman soluciones inicialmente verdes, que cambian a rojo.
Tubo 3: Prueba de cianidinas. Se agregaron unas gotas de HCl
concentrado y magnesio a la solucion. En caso de que aparezca un color
definido despues de 10 minutos se agrega un ml de Octanol, se agita y se
observa la separacion de las capas y su color. Si existe un cambio de color
indica la presencia de cianidinas.
Tubo 4 : Se agrega a la solucion H 2SO4 concentrado. Un color amarillo
indica la presencia de flavononas y flavononoles; las flavononas dan un
color anaranjado o guinda.
d) Anlisis por cromatografa de lquidos
Se identific la polaridad de nuestro analito para determinar qu tipo de
cromatografa de lquidos aplicarle; el analito es de naturaleza no polar, por ende
se especifico realizar un anlisis de HPLC en fase reversa.
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Una vez conocido lo anterior se elimin cualquier rastro de humedad en el analito,
dando un tratamiento de filtracin con sulfato de sodio anhdrido. Se prepar
previamente los disolventes y dems componentes de la cromatografa. Se filtr el
analito para introducir en un vial, se filtr con un poro de 40 L (micro litros),
esto con el fin de eliminar cualquier tipo de partculas que pueda contener y que
pueda hacer ruido en el cromatograma.
Una vez preparada la muestra e introducida en el vial, esta se coloc dentro del
cromatografo y se prepararon las especificaciones del anlisis:

Tiempo de anlisis 15 minutos

Velocidad volumtrica de flujo 0.5 ml/min
Combinacin de solventes 65% agua y 35% etanol

Se program el detector de UV en una lectura de 280

Resultados
Pruebas cualitativas para flavonoides
Prueba
Tubo 1

Reactivos
NaOH 2M

Tubo 2 (Prueba de
Shinoda)

HCl concentrado y Al

Tubo 3 (Prueba de
cianidinas)

HCl, Mg y Octanol

Tubo 4

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H2SO4 concentrado

Observaciones
Cambio a color amarillo tenuo.
Presencia de betacianinas
Presento colores rojos.
Presencia de flavonoles,
flavononas, flavononoles y
xantonas.
Aparecio un color definido
(incoloro) con efervescencia. Se
presentaron 2 capas (una de
amarillo opaco y otra gris)
Cambio a color amarillo.
Presencia de flavononas y
flavononoles

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Las pruebas arrojaron la presencia de betacianinas, flavonoles, flavononas,
flavononas, flavononoles, xantonas y cianidinas en el extracto etanolico de
H.patens, compuestos pertenecientes a la familia de los flavonoides los cuales han
adquirido notoriedad pblica a raz de su actividad biolgica en el hombre, que los
consume con los vegetales.

Cromatografia de liquidos
El anlisis arrojo un cromatograma con diferentes picos, lo que indica que nuestro
extracto contiene diferentes compuestos pero debe realizarse un anlisis ms
profundo para determinar que compuestos son; o en su defecto realizar una
prueba en un cromatografo de masas.

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Conclusiones
El aislamiento de flavonoides de Hamelia patens a partir de etanol nos ha ayudado
a establecer un mtodo para poder, en un futuro, sintetizar estos componentes en
un producto medicinal que ayude en el tratamiento de enfermedades de la piel, ya
que los flavonoides poseen propiedades teraputicas como antioxidantes,
antitumorales y antiinflamatorios.

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