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CAPITULO I

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA


1.1.

Descripcin del Problema


Algunas variedades nativas de papas, presentan sabor amargo perceptible que guarda
estrecha relacin con el contenido de glicoalcaloides, u na familia de compuestos
qumicos derivados

de alcaloides

de

las

cuales

algunos

son

potencialmente txicos, especialmente aquellos que son los venenos que se


encuentran comnmente en las especies de plantas Solanum .Estos compuestos

estn presentes en las hojas, tallos, brotes. Tubrculos inmaduros y verdeados tiene
mayor concentracin de glicoalcaloides.
Los pobladores altoandinos suelen alimentar a sus animales con las hojas de las papas
al terminar con las cosechas, pero si el glicoalcaloides est presente en las hojas, tallos,
brotes, especialmente en las partes verdeadas de los tubrculos, entonces estos

1.2.

animales estn siendo envenenados y por tanto pueden ser afectados en:
Elevada letalidad en embriones
Malformaciones, especialmente a nivel esqueltico
Formulacin del Problema
1.2.1. Pregunta general

Qu efectos causa la toxicidad de los glicoalcaloides de hojas de


Solanum Tuberosum en cuyes preados y no preados?

1.2.2. Pregunta especifico

Qu efectos causa la toxicidad de los glicoalcaloides de distintas


variedades de hojas de Solanum Tuberosum en conejos preados y no
preados?

Segn la concentracin, que efectos causa la toxicidad de los


glicoalcaloides de hojas de Solanum tuberosum en conejos preados y
no preados?

1.3.

Objetivos
1.3.1. General

Identificar los efectos que causa la toxicidad de los glicoalcaloides de hojas de


Solanum Tuberosum en conejos preados y no preados
1.3.2. Especficos

Identificar los efectos que causa la toxicidad de los glicoalcaloides de distintas


variedades de hojas de Solanum Tuberosum en conejos preados y no
preados?

Segn la concentracin, identificar los efectos que causa la toxicidad de los


glicoalcaloides de hojas de Solanum tuberosum en conejos preados y no
preados.

1.4.

Justificacin
Se eligi este trabajo para comprobar la toxicidad de los glicoalcaloides
presentes en las hojas del solanum tuberosum, ya que segn algunas
investigaciones, las hojas verdes en proceso de desarrollo de este tubrculo
tienen mayor concentracin de glicoalcloides, y si la concentracin
ingerida

supera

unos

valores

concretos

pueden influir en la

malformacin del embrin a nivel del sistema nervioso de aquellos que lo


consumen.
La presencia de estos Glicoalcaloides en las patatas se conoce desde
1918, cuando Harris y Cockburn informan sobre intoxicaciones y
muertes de humanos causados por el consumo accidental de patata
con altas concentraciones de estos compuestos. A partir de entonces,
se publican otros artculos donde se desarrollan estudios sobre la
toxicidad en humanos y animales, relacionando su ingesta con casos
de malformaciones en embriones de ratas y malformaciones a nivel
esqueltico (1).

1.5.

Delimitaciones

El objetivo de este trabajo de investigacin es comprobar la toxicidad de


los glicoalcaloides de una sola especie de solanum tuberosum a diferentes
concentraciones. Por tanto este trabajo se limita dentro de este objetivo.
El tema de glicoalcaloides es amplia, ya que otros investigaciones afirman que estos
sustancias toxicas son a la vez anticancergenas en concentraciones adecuadas.
CAPITULO II
MARCO DE REFERENCIAS
2.1. Antecedentes de Estudio
2.1.1. Internacional
2.1.2. Nacional
2.1.3. Local
2.2. Marco Terico
2.6. Definicin de Trminos Bsicos
2.7.
Hiptesis de la investigacin
2.8. Variables de estudio
2.9. Operacionalizacin de Variables
2.10. mbito de Estudio
CAPITULO III
MARCO METODOLOGICO
3.1.

Tipo de Investigacin
Investigacin Aplicada descriptiva, aqu se va a describir todos los hechos tal y
como son observados en nuestro proceso sobre los efectos que causan los
glicoalcaloides presentes en las hojas de solanum tuberosa.

3.2.

Nivel de Investigacin
Nivel aplicativo

3.3.

Mtodo de Investigacin
Proceso formal, con el mtodo inductivo, donde a partir de la observacin
experimental del proceso de tema de investigacin queremos generalizar y
comprobar la teora acerca de los glicoalcaloides presentes en la hoja de la
solanum tuberosa y concluir con nuestra comparacin de resultados.

3.4.

Procedimientos de Recoleccin de Datos

Alimentacion con el jugo


Cuy preado:

Alimentacion con las


hojas de la papa
Cuy preado:

Cuyes controladores
Alimentacion con alfalfa
Cuy preado:

Alimentacin durante 15

Alimentacin durante 15

Alimentacin durante 15

das, 3 veces al da.

das, 3 veces al da.

das, 3 veces al da.

8:00---1k de alfalfa

8:00---1k de alfalfa

8:00---1k de alfalfa

13:001k de alfalfa +

13:001/2k de alfalfa

13:001k de alfalfa

10ml de jugo(por via

+ 1/2k de hojas de

19:00---1k de alfalfa

oral con jeringa)

papa

Cuy normal:

19:00---1k de alfalfa

19:00---1k de alfalfa

Alimentacin durante 15

Cuy normal:

Cuy normal:

das, 3 veces al da.

Alimentacin durante 15

Alimentacin durante 15

8:00---1k de alfalfa

das, 3 veces al da.

das, 3 veces al da.

13:001k de alfalfa

8:00---1k de alfalfa

8:00---1k de alfalfa

19:00---1k de alfalfa

13:001k de alfalfa +

13:001/2k de alfalfa

10ml de jugo(por via

+ 1/2k de hojas de

oral con jeringa)

papa

19:00---1k de alfalfa

19:00---1k de alfalfa

TABLA 1: Proceso de alimentacin con las hojas de solanum tuberosa de forma


natural (hojas) y forma liquida.

3.6.

Diseo, Poblacin, Muestra, Muestreo


Diseo:

TABLA 2: Descripcin la muestra de cuyes

1Cuy preada:

1Cuy normal: Hembra

1Cuy Controlador: (hembra)

Raza: Criollo

Raza: Criollo

Raza: Criollo

Edad: 1ao

Edad: 2ao

Edad: 1ao

Peso: 700gr aprox.

Peso: 600gr aprox.

Peso: 500gr aprox.

Tiempo de gestacin:

2Cuy normal: Hembra

1mes con 2 semanas

2Cuy Controlador: (hembra)

Raza: Criollo

2Cuy preada:
Raza: Criollo

Edad: 3 aos

Raza: Criollo

Peso: 600gr aprox.

Edad: 2 aos

Edad: 2 aos

Peso: 600gr aprox

Peso: 700gr aprox.


Tiempo de gestacin:
1mes
LUGAR DE CRIANZA: Caractersticas de lugar
Region:

Huancavelica

Provincia: Huancavelica
Distrito:

Huancavelica

Barrio:

San Cristobal/ Urb. Ccoripaccha-S/N

Ubicacin exacta: (W 07457"51.8"

/ S 1246"42.9" /3687msnm)

Temperatura promedio: 14C


poca del ao: Otoo
METODO DE CRIANZA DE LOS CUYES

Los cuyes se criaran en una jaula de madera (1.50m x 88cm x 50cm) con
6 divisiones.

Los cuyes sern alimentados con alfalfa durante el tiempo que dure el
trabajo en el laboratorio (el proceso de anlisis de Glicoalcaloides en la
hoja de la papa ) tres veces al dia:
8:00am 1 kilo de alfalfa por cuy
1:00pm 1 kilo de alfalfa por cuy

7:00pm 1 kilo de alfalfa por cuy


DESCRIPCION DE LA HOJA DE SOLANUM TUBEROSA
Genero: Solanum
Orden : Solanales
Especie: S. Tuberosum
Lugar: las hojas de papa se extrajeron de la localidad de chuuranra de la
ciudad de Hvca- distrito de Ascencion.
Latitud: 12 46 49
Longitud: 75 2 10
Altitud: 3860msnm
Poblacin:
Se tiene una poblacin de 12 cuyes del Tipo 1 clasificado segn su pelaje, que
son cuyes de pelo corto, lacio y pegado al cuerpo, son de colores simples claros,
oscuros y combinados, adems por ser el ms difundido y el que caracteriza al
cuy peruano productor de carne.
Muestra:
Nuestra muestra consta de 6 cuyes4 cuyes de prueba a los cuales se les incluir
en proceso de suministro de las hojas de solanum tuberosa, y 2 de ellos que no
estarn incluidas en este proceso y que solo nos servirn de controladores, solo
se les criaran de forma natural (2 cuyes preados, 2 cuyes hembras en
condiciones normales, y 2 cuyes hembras que nos sirvan de controladores)
Muestreo:
Esta dada de manera conveniente (muestreo por conveniencia), se extrajo los
cuyes con este procedimiento por tener un acceso fcil a estos y no dificultarnos
con la seleccin.

3.8.

Tcnicas de Procesamiento y Anlisis de Datos

EXTRACCIN DE LOS GLICOALCALOIDES:


Las hojas sern trasladadas al laboratorio en el cual se lavaran con agua y luego
sern secadas en la estufa a una temperatura no mayor a 45C hasta peso
constante. Las hojas secas se reducirn al tamao de partculas con ayuda de un
mortero y piln.
De la muestra molida se pesara 950 g de la especie y se colocaran en recipientes
adecuados con solucin extractora Etanol: Agua: cido actico (90%:8%:2%)
hasta dos centmetros por encima de la muestra, y se dejara por 15 das en
maceracin, protegido de la luz.
Despus de pasado el tiempo de maceracin se filtrara con algodn, luego con
papel filtro N40 y concentrado a presin reducida en un destilador.
El extracto resultante se llevara a sequedad con ayuda de la estufa a una
temperatura no mayor a 50C.

IDENTIFICACIN DE LOS GLICOALCALOIDES:


Para la determinacin de glicoalcaloides se pueden utilizar una gran variedad de
mtodos como los gravimtricos, en los que se realiza una extraccin con cido
actico diluido, y posterior precipitacin con amoniaco para su posterior
determinacin por pesada, o colorimtricos, en los que se llevan a cabo una
evaluacin de las coloraciones que dan los glicoalcaloides con diferentes
reactivos.
Para el anlisis espectrofotomtrico infrarrojo se trabajara la muestra por el
mtodo empleado por Sanabria, para la purificacin de la muestra, el cual

consiste en resuspender el extracto desecado en cido actico 5%; se centrifuga a


4 000 rpm x 20 min, y se filtra al vaco, se adiciona amoniaco al 25% hasta pH
11, se calienta a 70C x 30 min y se deja en reposo. El precipitado se separa por
centrifugacin a 15 000 rpm, se redisuelve en cido actico al 5% y se repite el
proceso, el slido obtenido es secado a estufa y analizado en el equipo
espectrofotomtrico a una longitud de onda de 350 a 4000 cm-1 y de 800 a 1000
cm-1.
TECNICAS DE ALIMENTACION EN LOSCUYES:
TECNICAS DE EVALUACION DE LOS EFECTOS QUE CAUSARAN EL
SUMINISTRO DE LAS HOJAS DE SOLANUM TUBEROSA EN SUS DOS
CONDICIONES:

CAPITULO IV
ASPECTO ADMINISTRATIVO
4.1.

Recursos Humanos
Para hacer posible este trabajo de investigacin se contara con el apoyo y

asesoramiento de los docentes encargados del rea de Bioqumica de la Facultad de


Ciencias de Ingeniera de la Universidad Nacional de Huancavelica.
Como tambin se contara con el apoyo de cada uno de los 8 integrantes del
grupo de investigacin.

4.2.

Recursos Materiales
Hojas de papa
Equipos de laboratorio:
Materiales de laboratorio. Se usaron filtros de 0.20 m de Nylon de
VWR (Barcelona, Espaa) y 0.45 m GVHP de Millipore (Irlanda) para
el filtrado de los extractos de las muestras y fases mviles
respectivamente. Los cartuchos Sep-Pack SPE (C18 de 6 cc y 200
mg) adquiridos de Waters (Milford, MA, USA) se emplearon para
limpiar las muestras. Se emplearon adems balanzas analticas,
AB204-S y PB602S, para la pesada de patrones y muestra, una
batidora/trituradora Cutter SK-3 suministrada por Sanmic (Azkotia.
Espaa) para el procesado de las muestras y un bao de
ultrasonidos de JP Selecta (Barcelona, Espaa).

Reactivos. Los patrones de -solanina ( 98%) y -chaconina (>


98%) fueron suministrados por Extrasynthese (Lyon Nord, Francia).
El acetonitrilo y el metanol (grado HPLC) fueron suministrados por
Sigma-Aldrich (Madrid, Espaa). El sulfato de magnesio anhidro, el
acetato sdico anhidro, el cido actico (pureza > 97%) y el cido
frmico (pureza >98%) se obtuvieron de Panreac (Barcelona,
Espaa). El cido ascrbico utilizado para evitar la oxidacin de la
patata durante el anlisis es de Fluka (Steinheim, Alemania). El agua
ultrapura fue obtenida de un sistema de agua Milli-Q (Millipore,
Bedford, MA, USA).

4.3.

Presupuesto

4.4.

Financiamiento

4.5.

Cronograma de Actividades

Referencias bibliogrficas
ANEXOS
Anexo 01 .Matriz de consistencia
Instrumentos de recoleccin de datos

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