HISTORIA DEL MICROSCOPIO

Una visin de las

formas microscpicas
Desde el descubrimiento de las lentes de aumento,
el mundo del microscopio no ha dejado de
evolucionar

Las lentes nos ayudan a

compensar nuestras limitaciones
pticas
Se basan en la talla del cristal:

Lentes convergentes: aumentan

imgenes cercanas
Lentes divergentes: enfocan
imgenes lejanas

Las lupas utilizan lentes convergentes

Detalle de las lentes convergentes

Estas lentes tambin enfocan los rayos

de luz (pueden producir fuego)

El ojo humano tiene una visin limitada: una

hormiga ya es demasiado pequea para verla
en detalle

Si intentamos acercarnos para verla mejor

descubriremos que, a partir de cierta distancia
esta se vuelve borrosa

Los nios enfocan objetos a 6 cm

A los 30 aos la distancia aumenta a 15 cm

A partir de los 50 necesitamos

ms de 40 cm de distancia

Los egipcios, griegos y romanos ya conocan las propiedades de las lentes.

En la Edad Media se utilizaba la piedra de lectura un cristal tallado, como el
que muestra la imagen.
Tambin en esta poca aparecieron las primeras gafas, pero pasaran muchos
aos para que las lentes sirvieran para algo ms que para leer u observar
pequeos insectos por pura distraccin.

Tipos de lentes convergentes:

Biconvexa
Plano convexa
Menisco convergente

Hoy en da la lupa normal

tiene de media entre 3X y
5X (incrementada entre 3
y 5 veces el tamao del
objeto

Hans y su hijo, Zacharias Janssen (en la imagen) colocan dos lentes

convergentes en un tubo formado por tres cilindros. De esta forma se
crea el primer microscopio compuesto (de ms de una lente)

1590
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 9X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de un caracol

1590
Hans y su hijo, Zacharias Janssen

Partes del microscopio

El microscopio recoge la luz difuminada por el objeto y proyecta una imagen

ampliada. Los rayos perifricos (representados en verde) no pueden ser
recogidos y por eso la imagen final tiene menos calidad

Cmo funciona?

1590
Hans y su hijo, Zacharias Janssen

El aumento va desde 3X cuando est plegado hasta 9X cuando est extendido,

pero ofrece una imagen borrosa

Galileo parte del telescopio para crear un modelo mejorado del microscopio.
El nombre de este instrumento fue utilizado por primera vez por la
Accademia dei Lincei, una sociedad cientfica de la que formaba parte.

1609
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 35X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de un hamster

1609

Galileo

Partes del microscopio

El sistema de tres lentes ayuda a recoger todos los rayos de luz, de forma
que el resultado sea una imagen ms enfocada

Cmo funciona?

El enfoque se ajusta deslizando el

cilindro superior, que es el que
contiene la lente ocular

1609

Galileo

Parte de la cabeza de una polilla. Microfotografa tomada con un microscopio

Galileo (Museo Galileo-Institute and Museum of the History of Science, Florence)

Avances para la ciencia

Las primeras descripciones de lo que se poda

observar a travs del microscopio llegaron con el
Apiarium de Cesi y Stelluti, tambin miembros de la
Accademia dei Lincei. Este libro es un estudio de las
abejas y lo gorgojos.

1609

Galileo

(Courtesy History of Science

Collections University of
Oklahoma Libraries)

Robert Hooke, fsico empleado de la Royal Society, es considerado el padre

britnico del microscopio. Realiz mejoras en el diseo del mismo y recogi
e ilustr sus observaciones en el libro Micrographia.

1667
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 60X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de un mochuelo.

1667
Robert Hooke

Partes del microscopio

El microscopio de Hooke cuenta con dos lentes biconvexas situadas en los

extremos. Tambin ide un sistema de iluminacin basado en una lmpara
de aceite, un frasco de agua y una lente que enfocaba la luz sobre la
muestra.

Cmo funciona?

Se coloca la muestra en el alfiler (1) y se dispone el

microscopio para obtener el mejor enfoque posible:
se puede deslizar el soporte por un carril (2)
la anilla (3) que sujeta el microscopio se puede
girar para orientar la inclinacin
el microscopio se puede deslizar en sentido
vertical por el soporte (4)

1667
Robert Hooke

Avances para la ciencia

Hooke observ el corcho (imagen de la derecha) y

denomin celdas a las pequeas cavidades que lo
constituan aunque lo que en realidad vio eran las
paredes celulares. Tambin ilustr al detalle insectos
como la pulga de la imagen superior

1667
Robert Hooke

Antoni van Leeuwenhoek, trabajaba en la industria textil, donde las lentes se

utilizaban para cortar hilos. Su magnfica talla del cristal hizo de su
microscopio el de mayor aumento y le convirti en el fundador de la
microbiologa y descubridor de las bacterias.

1675
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 275X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de un dogo.

1675
Se trata de un microscopio simple, compuesto por
una sola lente (1). La muestra se coloca en el alfiler
(2), se desplaza mediante la manivela (3) y se ajusta
el enfoque con el tornillo (4)

Antoni van
Leeuwenhoek

Partes del microscopio

Cmo funciona?

Se coloca el microscopio muy cerca del ojo y se

orienta hacia una fuente de luz. Esto permite
observar imgenes similares a las virtuales (como si
fueran hologramas). La imagen inferior muestra
especies de 0,1 mm de dimetro de forma parecida
a como las veramos a travs de este microscopio

1675
Antoni van
Leeuwenhoek

Avances para la ciencia

1675
Antoni van
Leeuwenhoek

El campo de la anatoma tambin se vali de las mejores

tcnicas. Malpigi fue el primero en describir la circulacin
sangunea, como muestra la imagen.

(Espermatozoides bajo el microscopio. Ilustracin de

Antoni van Leeuwenhoek. Museo Galileo-Institute
and Museum of the History of Science, Florence).
Figure redrawn by Adams in Adams G. Micrographia Illustrata
(1st ed.) London: printed for the author 1747 (pre-1801 Imprint
Collection Library of Congress, as reprinted in Hwa C, Aird WC.
The history of the capillary wall: doctors, discoveries, and
debates. Am J Physiol Heart circ physiol 293:H2667-H2679,
2007) Ilustracin realizada por Adams in Adams G.
Micrographia Illustrata (primera ed.) Londres, impreso por el
autor, 1747 (traduccin no facilitada por la fuente)

Van Leeuwenhoek observ a travs de

su microscopio clulas sanguneas,
pequeos seres vivos en una gota de
agua, pelo humano, pielFue la primera
persona en describir las bacterias

Durante este siglo las mejoras del microscopio se centraron en intentar

aumentar la calidad y resolucin de las imgenes obtenidas. Tambin se
experimentaron cambios formales, como el microscopio compuesto con
diseo trpode del britnico Culpeper, datado en la primera mitad del siglo.

S. XVIII
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 250X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de un guila imperial.

S. XVIII
Culpeper utiliz un sistema compuesto por tres
lentes: ocular, objetivo y lente de campo. En algunos
modelos, la ltima consista en un cilindro con una
lente en cada extremo

Partes del microscopio

Cmo funciona?

Adems de ajustar el enfoque, podemos orientar el

espejo inferior para iluminar la muestra.

S. XVIII

Cmo funciona?

Adems de ajustar el enfoque, podemos orientar el

espejo inferior para iluminar la muestra.

S. XVIII

Continan las investigaciones para conseguir imgenes de mayor

resolucin y acabar con las deformaciones propias de microscopios ms
antiguos.

S. XIX
Estos microscopios tenan un
aumento mximo de 1000X, el
equivalente a ver una pulga del
tamao de una ballena azul.

El microscopio de Lister contaba

con un espejo para aumentar la
iluminacin de la muestra.

Aberracin cromtica

La diferencia de longitud de onda de cada color hace

que, a su paso por la gente, se difracten de forma
distinta. Cada color se enfoca en un punto distinto, y
esa diferencia se transforma en la aberracin
cromtica de la imagen..

S. XIX
Joseph Jackson
lister y Ermst Abbe

En el siglo anterior se descubri que combinando dos tipos de lentes (convergente

y divergente) se resolva la aberracin cromtica, aunque la imagen final segua
siendo imperfecta

Aberracin esfrica

El punto por el que atraviesan la lente los distintos

rayos de luz determina su foco. De esta forma, es
imposible enfocar todo a la vez, y por eso la imagen
resultante es borrosa y parcialmente desenfocada.

S. XIX
Joseph Jackson
lister y Ermst Abbe

La correccin de la aberracin cromtica no impeda el desenfoque esfrico Lister

fue el primero en describir que, adems de combinar las lentes, era necesario
mantener una distancia precisa entre ellas para eliminar las aberraciones.

S. XIX

Teora de Abbe
Un objeto en el plano OO es visible en el plano II
gracias a la luz que pasa por el plano FF.

Incidencia de un rayo

Joseph Jackson
lister y Ermst Abbe

Incidencia de dos rayos

Emst Abbe describi la formacin de las imgenes en el microscopio y elabor una teora
para calcular la mxima resolucin posible:

d=

2nsen

= longitud de onda
= ngulo de refraccin
n = ndice de refraccin

Segn esta formula el tope de resolucin (que no el de aumento) viene determinado por la
longitud de onda. Es posible conseguir, por tanto, una resolucin 10 veces mayor que la
conseguida por Leeuwenhoek

Durante este siglo el microscopio ptico alcanza la mxima resolucin

posible. Tal y como indicaba Abbe en su teora, el tope viene determinado
por la fuente de iluminacin y su longitud de onda. Durante este siglo se
experimentan cambios para mejorar el contraste y conseguir romper esa
barrera

S. XX
Se construyen microscopios
pticos con la mxima de
0,0002 mm, lo que permite
observar clulas en detalle y
bacterias

S. XX
Partes del microscopio
oculares
se pasa de los antiguos
modelos monoculares a
los modernos binoculares

objetivos
cada color es un aumento:
(rojo 4X, amarillo 10X,
azul 40X y blanco 100X
platina
condensador
lentes encargadas de
concentrar la luz
iluminacin

botn de enfoque

Es el esquema ms sencillo, el heredado

directamente de los modelos de 1800. La imagen
que se obtiene tiene poco contraste, por lo que
se recurre a la tincin (primera imagen) o a un
filtro polarizante (segunda imagen).

S. XX
Tipos de microscopio ptico

Microscopio de campo claro

Mediante un condensador especial se consigue

una iluminacin indirecta, por lo que se ve el
espcimen a travs de la luz que ste refleja.
Imita el efecto de las partculas de polvo visibles
en un haz de luz y permite observar sustancias
incoloras o transparentes.

S. XX
Tipos de microscopio ptico

Microscopio de campo oscuro

Se ilumina la muestra con la luz de un lser.

Este tipo de iluminacin produce una imagen de
gran contraste (la muestra en color, el fondo
negro) y perteneciente a un nico plano del
espcimen. Por eso, si se obtienen sucesivas
imgenes de distintos planos se puede
construir una imagen tridimensional.

S. XX
Tipos de microscopio ptico

Microscopio de barrido
confocal

Los anillos dispuestos en objetivo y condensador

filtran la luz y la separan en dos haces: uno central
y uno perifrico. La combinacin de ambos haces
luminosos produce una imagen con reas claras
(correspondientes a partes menos densas del
espcimen) y reas ms oscuras (correspondientes
a partes ms densas del espcimen).

S. XX
Tipos de microscopio ptico

Microscopio de contraste
de fase

La luz ultravioleta se filtra mediante un espejo

dicroico, que slo permite pasar la luz de
determinado rango. Luego llega a la muestra,
donde excita las molculas fluorescentes
(naturales o aadidas). El objetivo recoge la luz
producida por estas molculas y forma una imagen.
A diferencia del microscopio de barrido, el de
fluorescencia no solo recoge la informacin del
plano focal.

S. XX
Tipos de microscopio ptico

Microscopio de fluorescencia

Ernst Ruska y Max Knoll desarrollaron e primer microscopio electrnico

(TEM, microscopio electrnico de transmisin), en el que sustituyen el haz
de luz por un haz de electrones y con en el que se consigue superar el lmite
de resolucin impuesto por el primero.

1931
Con este microscopio es posible
observar el interior del retculo
endoplsmico (alrededor del
ncleo de la clula).

Cmo funciona?
(1) El can de electrones
acta como fuente virtual,
emitiendo una haz de
electrones en lugar de un haz
de luz.
(2) Un conjunto de lentes
condensadores forman el haz y
lo enfocan hacia la muestra. La
apertura del condensador limita
el dimetro del haz eliminando
los electrones de gran ngulo.
(3) El haz atraviesa la muestra.
(4) Los electrones que
atraviesan la muestra forman
un haz que aumenta la lente
objetivo primero y las
intermedias despus.
(5) El haz golpea una pantalla
de fsforo donde se forma la
imagen final, en la que las
reas ms brillantes se
corresponden con las
porciones de la muestra
atravesadas por los electrones.

1931
Ernest Ruska

Avances para la ciencia

Este microscopio posibilita la observacin de objetos

tan pequeos como el dimetro de un tomo. Sin
embargo, no puede mostrar organismos vivos, ya que
no sobreviven a esta tcnica: Por eso, complementan
al ptico, pero no lo sustituyen.

1931
Ernest Ruska

De izquierda a derecha: virus del dengue, del bola y del H1N1 (Fotos:CDC).

Del TEM se llega al SEM (microscopio electrnico de barrido) a partir de una

idea de Max Knoll (inventor del TEM). Vladimir Zworykin y sus colaboradores
lo desarrollaron en 1942, aunque los primeros modelos comerciales no
aparecen hasta 1965.

1942
La resolucin del SEM es un poco
ms baja que la del TEM, pero
tiene ms profundidad de campo
y ofrece representaciones
tridimensionales de la muestra

Cmo funciona?
(1) El SEM tiene un can de
electrones que produce la
corriente necesaria para su
funcionamiento.
(2) Mediante lentes hechas de
imanes, no de cristal,
modelamos el haz de
electrones y lo dirigimos hacia
la muestra.
(3) La lente objetivo enfoca
finalmente el haz hacia la
muestra, que se encuentra
inmvil en un compartimento
slido y aislado.
(4) En ese compartimento se
encuentran distintos detectores
que recogen las interacciones
con la muestra.

1942
Vladimir K. Zworykin

Formacin de la imagen

Los electrones interactan con la muestra y despiden

ms electrones. Distintos detectores o sensores los
recogen segn su tipo (secundarios, rayos X, etc).
La imagen se construye a partir del patrn de interaccin:
cuantos ms electrones incidan en un mismo punto, ms
brillante ser el pixel correspondiente.

1942
Vladimir K. Zworykin

Avances para la ciencia

1942
Vladimir K. Zworykin

Avances para la ciencia

1942
Vladimir K. Zworykin

Avances para la ciencia

1942
Vladimir K. Zworykin

Avances para la ciencia

1942
Vladimir K. Zworykin

Avances para la ciencia

1942
Vladimir K. Zworykin

El microscopio de efecto tnel, desarrollado por Heinrich Rohrer y Gerd

Binnig, trae consigo una revolucin: la posibilidad de observar el mundo
desde una perspectiva atmica.

1981
El STM (microscopio de efecto
tnel) va ms all de la propia
naturaleza del objeto y muestra
su topografa y estructura
elctrica.

Cmo funciona?
Una aguja fina de metal recorre
la superficie de la muestra.
Entre los dos elementos se
produce la llamada corriente
tnel cuyo voltaje vara con la
distancia que separa aguja y
superficie. Mediante controles
externos se mantienen
constantes tanto la distancia
como la corriente.
El registro de la aguja permite
reproducir una imagen
topogrfica de la muestra, su
perfil y, en circunstancias
idneas, la composicin
atmica.

1981
Heinrich Rohrer y
Gerd Binnig

1981
Heinrich Rohrer y
Gerd Binnig

Gracias al desarrollo de STM fue posible estudiar estructuras a una escala

atmica, as como manipular tomos y molculas de forma individual.