Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
80
INTRODUCCIN
Los plsticos derivados del petrleo (sintticos, no
biodegradables), han sido utilizados desde la dcada
de los 40s, segn la Enviromental Proteccin Agency [EPA], solo en Estados Unidos en el ao 2009
se generaron 13 millones de toneladas de plsticos
en envases y embalajes, casi 11 millones de toneladas en objetos duraderos, como electrodomsticos, y
alrededor de 7 millones de toneladas en objetos no
duraderos como platos y tazas. En los pases desarrollados se observa un uso mayor de este material; por
ejemplo el consumo per capita en Estados Unidos
es de 80 kg, en Europa 60 Kg, y en pases como
India es de 2 Kg. (Kato, Bao, Kang, Fokui & Doi,
2000), lo que refleja que sin lugar a dudas este material es imprescindible en la poca actual. Situacin
que ha generado acumulacin y que se ha convertido en un grave problema de contaminacin ambiental (Ojumu, Yu & Solomon, 2004).Un Informe del
PNUMA (Programa de Naciones Unidas para el Medio Ambiente) en el 2005 ha sealado que para ese
ao se encontraban ms de 13.000 fragmentos de
desechos plsticos flotando sobre cada kilmetro cuadrado del ocano citado por (Allsopp, Wallers, Santillo & Johnston, 2007). A su vez, en el pas segn la
Armada Nacional de Colombia [ARC], (2004) existen
datos que revelan que en las playas se desechan en
un da 2.875 unidades de plstico. La contaminacin
debido a la acumulacin de plstico es un problema
que ha sido de manera ineficientemente abordada
ya que los mtodos utilizados para la disminucin de
este problema resultan intiles frente a la produccin
desbordada del mismo.
Por lo mencionado es de vital importancia generar
nuevas alternativas que sean competitivas y amigables con el medio ambiente; por tal razn el hombre
ha buscado en la biotecnologa soluciones que son
viables y que brindan soluciones ms eficientes. Es
all donde aparecen los polihidroxialcanoatos (PHAs),
polisteres de hidroxialcanoatos que conservan ca-
ractersticas propias del plstico sinttico, con la ventaja de ser completamente degradados pocos meses
despus de su uso. Los grnulos de PHA son producidos intracelularmente por ms de 300 bacterias diferentes incluyendo Eubacterias y Archeas (Braunegg, Lefebrie & Genser, 1998; Ojumu et al., 2004).
Una vez se conocieron las bondades de este material
biodegradable, las investigaciones apuntan a crear
estrategias que superen la principal desventaja existente y es su alto costo de produccin frente a los
plsticos derivados del petrleo; la utilizacin en el
medio de cultivo de fuentes de carbono econmicas,
y optimizacin en los procesos de fermentacin,
recuperacin y purificacin del biopolmero son las
estrategias ms usadas (Choi, Lee & Han, 1998). A
su vez el empleo de microorganismos recombinantes
como Escherichia coli, ayuda a resolver algunas limitaciones tecnolgicas que se pueden presentar con
los mtodos anteriores ya que permiten manejar a
fondo la parte metablica y cintica del microorganismo, por lo tanto y de manera directa la produccin
de PHAs. (Garca et al., 2004; Hein, Shling, Gottshalk & Steinbchel 1997; Park & Lee, 2002; Sato,
Nomura, Abe, Doi & Tsuge, 2007).
Caractersticas generales de los PHAs
Los grnulos de PHAs sirven como almacenamiento
de energa y carbono cuando en el medio hay abundancia de este y dficit de elementos como nitrgeno,
fsforo, magnesio entre otros (Lee, Choi & Wong,
1999), lo que los hace ms resistentes bajo esta condicin de estrs (Hezayen, Steinbchel, & Rehm,
2002; Rehm & Steinbchel, 1999; Steinbchel &
Eversloh, 2003). Su tamao oscila entre 0.2 - 0.5
m con un nmero aproximado de 8-10 grnulos
por clula y con un peso molecular de 2x105-3x106
daltons (Figura 1), sin embargo esto vara dependiendo de la especie (Ojumu et al., 2004). A su vez pueden acumular biopolmero hasta el 90% de su peso
seco (Reddy & Rashm, 2003; Sudesch, Abe & Doi,
2000).
3VHXGRPRQDVDHUXJLQRVD
3RO\HVWHUJUDQXOXP
Figura 1. ,PDJHQ SRU PLFURVFRSLD HOHFWUyQLFD GRQGH VH PXHVWUD OD
DFXPXODFLyQGH3+$VSRU3VHXGRPRQDVDHUXJLQRVD5HKP
Sntesis de PHAs
La composicin monomrica de los biopolmeros de
PHAs es muy variada, depende de las rutas metablicas por las cuales fueron sintetizados y por la fuente
de carbono externa que se usa como materia prima
para dicha ruta. Provienen bsicamente de tres vas
metablicas: la degradacin de azucares mediante la
obtencin de Acetil CoA, la degradacin de cidos
grasos (-oxidacin) y/o biosntesis de cidos grasos
(Aldor & Keasling, 2003).
Clasificacin de PHAs
Los polihidroxialcanoatos se clasifican de acuerdo
con la naturaleza de sus unidades monmeras, si el
polmero est formado por solo un tipo de unidades
se denomina homopolmero (Anderson & Dawes,
1990; Chung et al., 2001). A su vez, si est integrado por monmeros con distinta longitud de tomos
de carbono en el mismo granulo se refiere entonces
a un copolmero (Zhao & Chen, 2007). Del mismo
modo si los monmeros que forman el polmero poseen cada uno de 3-5 tomos de carbono se conocen
como PHAs de cadena corta (scl - PHA), y PHAs
Clase
Subunidad
81
Especies
Sustrato
+$6&/&R$
3KD&
5DLVWRQLDHXWURSKD
aN'D
3KD&
II
aN'D
III
IV
3KD&
3KD(
aN'DaN'D
3KD&
3KD5
aN'DaN'D
3VHXGRPRQDV
DHUXJLQRVD
&&
+$6&/&R$
+$6&/&R$+$6&/&R$
+$0&/&R$
&
+$6&/&R$
$OORFKURPDWLXP
YLQRVXP
+$0&/&R$>&&@
+$&R$+$&R$
%DFLOOXVPHJDWHULXP
+$6&/&R$
Las PHA sintasas clase I tienen como microorganismo modelo Ralstonia eutropha, estn compuestas de una sola clase de subunidad (PhaC), y actan
sobre tiosteres CoA de varios 3 hidroxialcanoatos
de cadena corta (Eversloh, Bergander, Luftmann &
Steinbchel, 2001; Rehm, 2003). Las PHA sintasas
Clase II tambin se componen de una sola subunidad
(PhaC) y son activas sobre tiosteres CoA de varios
3-hidroxialcanoatos pero en este caso de cadena
media (preferencialmente cidos grasos 3-hidroxi), el
PHA resultante de la produccin de un microorganismo que posee esta clase de enzima tiene muchas
82
dependiendo del microorganismo y con diferente orden; sin embargo el gen de la PHA sintasa (phaC) se
encuentra presente en todos los cluster independientemente del microorganismo, lo que sugiere que es
una enzima crucial en todas las rutas de sntesis de
PHA (Anderson & Dawes, 1990; Madison & Huisman, 1999; Rehm & Steinbchel, 1999) (Figura 3).
Se habla con detalle de la organizacin del cluster
productor de PHAs de cadena media producidos por
sintasa tipo II ya que han cobrado gran inters debido
a su propiedad de elastmeros y gran similitud con el
ltex. El cluster de este tipo de PHA est conformado por 6 genes en su orden (phaC1, phaZ, phaC2,
phaD, phaF y phaI) y se han descrito principalmente
en el gnero Pseudomonas (Rehm, 2003).
SKD$
SKD%
E=UDPLJHUD
SKD&
SKD$
SKD%
F&YLQRVXP
SKD&
SKD(
SKD$
SKD)
SKD%
G$FDYLDH
SKD3
SKD&
SKD-
H3ROHRYRUDQV
SKD&
SKD=
SKD&
SKD'
SKD)
SKD,
I3DXUHRIDFLHQV
SKD&
SKD=
SKD&
SKD'
SKD)
SKD-
miento general de esta protena, uno de los ms representativos es el realizado por Rehm & Steinbchel
en 1999, donde realizaron un alineamiento mltiple
utilizando las estructuras primarias de 59 sintasas
no solo de clase II sino tambin de las clases I, III y
IV. All, demostraron la presencia de seis regiones
de secuencias de aminocidos conservados y ocho
residuos idnticos en todas las secuencias (Rehm &
Steinbchel, 1999). En el caso de las sintasas tipo
II la PhaC1 posee una longitud de 559 aminocidos y la PhaC2 de 560. Los ocho residuos conservados varan ligeramente en cuanto a su posicin
entre la PhaC1 y PhaC2, en la PhaC1 se ubican de
la siguiente manera: serina (S) en la posicin 238,
cistena (C) en la 296, glicina (G) en la 299, acido
Depolimerasa phaZ
El gen que codifica esta protena (phaZ) se encuentra en medio de las sintasas y su producto cumple
una funcin fundamental, ya que como se mencion
anteriormente los grnulos de PHA se forman en la
clula como reserva de carbono y energa de esta
manera cuando se necesita en los procesos celulares
es fundamental la presencia de una enzima que degrade esta inclusin y es ah donde la protena PhaZ
aparece. Esta protena se conoce con el nombre de
depolimerasa y est relacionada estructuralmente
con la familia de las esterasas. Estas enzimas catalizan la liberacin de (R)-3-hidroxi-acil /aril -CoA derivados de polmeros intracelulares (De Eugenio et al.,
transcription
phaC1
phaZ
phaC2
phaD
phaF
phaI
Depolymerase
Phasins
PHA polymerases
PHA
granule
Uknown
Proteins
83
CoA
(R)-3-hydroxyacyl-CoA
CoA
Monolayer
phospholipid
membrane
84
Degradacin de PHAs
La principal ventaja de los polihidroxialcanoatos es
su biodegradabilidad y esto lo logran ya que los grnulos son hidrolizados por microorganismo que buscan en ellos fuentes de carbono y energa; lo hacen
por medio de depolimerasas que son secretadas de
las clulas y se adhieren a la superficie del polmero
convirtindola en unidades de monmeros independientes. El tiempo que demora la degradacin depende de la naturaleza propia del polmero as como
tambin las condiciones ambientales a las que sean
expuestos, se ha observado degradacin de los PHAs
en gran cantidad de ambientes incluyendo aerobios,
anaerobios, salinos, marinos y otros (Ojumu, Yu &
Solomon, 2004) (Figura 5).
Aplicaciones de PHAs
Se han reportado cerca de 150 monmeros diferentes formadores de PHAs, esto indica no solo que son
ricos estructuralmente sino adems que pueden tener
aplicaciones variadas, razn por la cual se pueden
encontrar en empaques (envolturas de elementos de
aseo y alimentos, en general envases de plsticos
desechables o de larga duracin); al ser biocompatibles tambin se utilizan en medicina como en injertos,
reemplazando parte de tejidos, o como materia prima de implementos mdicos, tambin en productos
de higiene y en biocombustibles (Lee, et al, 1999).
CONCLUSIONES
En este artculo se describe otra manera de combatir
la acumulacin y actualmente contaminacin debida
al uso desenfrenado del plstico de origen petroqumico; se hace nfasis en el uso de microorganismos
para la produccin de polihidroxialcanoatos (PHAs);
material con caractersticas similares al plstico y totalmente biodegradable, tienen aplicaciones variadas
como en empaques, matera prima para productos
de higiene y biocombustibles y gracias a su biocompatibilidad tiene gran aplicacin en el campo de la
medicina. Los PHAs son polmeros formados por
monmeros que son unidos gracias a la accin de
una enzima denominada PHA sintasa. Existen varias
clases de esta enzima, sin embargo la PHA sintasa
clase II llama es de inters ya que produce grnulos