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Universitat Autnoma de Barcelona

Servei de Biblioteques

1500411008 ,

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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE BARCELONA

FACULTAD DE CIENCIAS

CTEDRA DE FISIOLOGIA VEGETAL

"Efectos del Cromo sobre la nutricin y relaciones hdricas de Phaseolus vulgaris"

VS. Bs.

Los directores de la Tesis

Dr. Juan Barcel Coll

Dra. Charlotte Poschenrieder

Tesis presentada por D. Benito Guns

Forcadell para optar al grado de Doctor en Ciencias.

Bellaterra, Marzo de 1.987

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. -

JUAN BARC3L COLL, CATEDRTICO DE FISIOLOGIA VEGETAL DE LA FACULTAD DE CIENCIAS

DE LA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE BARCELONA

C E R T I F I C A :

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1

Que el presente trabajo titulado "Efectos

del cromo sobre la nutricin y las relaciones hdricas de' Phase o lus vulgaris"
ha sido realizado en la ctedra de Fisiologia Vegetal, bajo mi direccin y la codireccin de la Dra. Charlotte Poschenrieder, Prof. Titular de Fisiologia Vegetal, por D. Benito Guns Forcadell y
constituye su tesis para optar al grado
de Doctor.
Para que as conste a efectos acadmicos, firmo el presente certificado en
Bellaterra a trece de marzo de mil novecientos ochenta y siete.

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Agradezco sinceramente al Prof. Dr. Joan Barcel Coll, catedrtico de Fisiologa Vegetal de la Facultad de Ciencias de la Universi_
dad Autnoma de Barcelona y a la Dra. Charlotte Poschenrieder, profes
ra Titular de esta misma Facultad, ambos directores del presente trab
jo, su gran ayuda y constante estmulo a la vez que la confianza depos
tada en m al haberme permitido iniciar este trabajo.
Asimismo, qdero expresar mi gratitud al Dr. Jaume Terrades,
catedrtico de Ecologa de esta misma Facultad por haber permitido desinteresadamente la realizacin de las medidas de potencial hdrico y
rea foliar en su laboratorio.
Tambin quisiera agradecer al Dr. Oriol Marf yal Dr. Robert
Save del Servei d'investigacions agrries de la Generalitad de Catalunya
la ayuda prestada en la determinacin del potencial osmtico, realizada en dico Centro.
Mi agradecimiento tambin es para la Dra. Rosa Flos, catedrtica de Fisiologa Animal, por las determinaciones espectrofotomtri_
cas, as como al servei d 'espectroscopia de la Universitat de Barcelona,
Al Departamento de cristalografa de la Seccin de Geologa
de esta misma Facultat quiero expresar mi agradecimiento por su colabo_
racin en las medidas mediante espectrofotometra de absorcin atmica, as como al departamento de Microbiologa de la Facultad de Veteri^
naria de esta Universidad por haber permitido la realizacin de las
fotografas mediante microscopa ptica en su Departamento.
Quisiera tambin dar las gracias a todos los miembros de la
Ctedra de Fisiologa Vegetal y Edafologa por la ayuda prestada a lo
largo de este trabajo.
Finalmete, quisiera tener un recuerdo para todos aquellos ami^
gos que, de una forma u otra, se han interesado por mi trabajo.

MIS

P A D R E S

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I N D I C E

Pgina

LLLL2JLUULJL2
1.1 Metales pesados: definicin y su relacin con-el
medio ambiente y los vegetales ............. ....
1 . 2 Propiedades qumicas del cromo ............... ...
1.3 Presencia del cromo en el medio ambiente, fuentes,
estado y contenidos de cromo en el medio
........
1.3.1

El cromo en el suelo

l'.3.2

El cromo en el agua y los sedimetos

1.3.3

El cromo en la atmsfera..

7
7

.....

...............

10

11

1.4.1

Esencialidad ............... .......... ...

1.4.2

Toxicidad ........... ........ ............ 12

1.5 El cromo y los vegetales: esencialidad y fitotxici_

dad
..............................................
1.5.1

Absorcin y transporte

1.5.2

Efectos fisiolgicos: esencialidad

1.5.3

Efectos f itotxicos

1.6.1

....................

1.4 Esencialidad y toxicidad del cromo para los animales

.............................................

1 .6 Relaciones hdricas

...................

11

14

14

.......

15

......................

16

..............................

19

Parmetros que miden las relaciones hdricas

19

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I

1.6.2

Elasticidad y plasticidad de la pared celular

1.6.3

Variaciones de los distintos parmetros de*

21

las relaciones hdricas

22

1.6.4
:.:.

Significado fisiolgico de los parmetros h_

dricos

23

1.6.5

Metales pesados y relaciones hdricas

26

3.1

Condicines de cultivo y tipo de tratamientos

3.1.1

Experiencia I: Medida de niveles de nutrientes

3.1.2

Experiencia II: Medida de parmetros hdricos

(Potenciales y elesticidad)

3.1.3

3.2 Determinaciones analticas

Digestin de las muestra para determinaciones

analticas

31

32

...............

......................

.............

34
37
37

38

Determinacin de Na y K por fotometra de llama............................. .............. 38

3.2.4

Determinacin de elementos mediante espectrofoto_

metra de absorcin atmica

I
3.2.5

..........................

3.2.2

.................

Determinacin del crecimiento

3.2.3

.........

3.2.1

.................

31

Experiencia III: Medida de transpiracin y apertura estomtica

........

...................

Determinacin del Mo mediante plasma

..........

39
40

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1
[i

3.2.6

Determinacin espectrofotomtrica del P

41

3.2.7

Determinacin del potencial hdrico ...

41

328

Medida del potencial osmtico

42

3.2.9

Medicin del contenido hdrico relativo

43
43

3.2.11

44

1
'

Obtencinde tplicas de la epidermis fo_

liar y medicin del grado de apertura y

4}

3.2.12 Medida del gradude apertura y densidad :.

estomticas

45

3.2.13 Anlisis estadstico

45

RESALTADOS

DISCUSIN

46

4.1.1

Curso del crecimiento y desarrollo ......

46 .
47

1
^B

4.1.3

4.1.2.1

Raices

47

4.1.2.2

Parte area

47

Efectos sobre el contenido en cromo

4.1.4 Efectos sobre los diferentes nutrientes ...

48
51

4.1.4.1

Efectos sobre el P

51

4.1.4.2

Efectos sobre el K

53

4.1.4.3

Efectos sobre el Na

55

'

4.1.4.4

Efectos sobre la relacin K/Na . .

55

1
1

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Efectos sobre el Ca

4.1.4.6

Efectos sobre el Mg ...

4.1,4.7

Efectos sobre la relacin Na/P .

58

4.1.4.8

Efectos sobre la relacin K/P ..

58

4.1.4.9

Efectos sobre la relacin Ca/P .

59

I
I
I

..........

"

56
57

4.1.4.10 Efectos sobre la relacin Mg/P .

4.1.4.11 Efectos sobre el Fe

59
60

4.1.4.12 Efectos sobre el Mn

62

4.1.4.13 Efectos sobre la relacin Fe/Mn .

63

4.1.4.14 Efectos sobre el Zn

64

4.1.4.15 Efectos sobre el Cu

65

4.1.4.16 Efectos obre el Mo

65
106

4.2.1

Curso del crecimiento y desarrollo

106

4.2.2

Efectos sobre el crecimiento

109

4.2.3

Efectos del cromo sobre el contenido hdrico

relativo, potencial hdrico, potencial osmtico
y potencial de presin bajo suministro hdrico
adecuado.
117

4.2.4

Efecto del dficit hdrico sobre las palntas

sometidas a los diferentes tratamientos con
cromo en el medio

4.3 Experiencia III

............

4.2 Experiencia II

4.1.4.5

118
144

4.3.1 Curso del crecimiento y desarrollo

144

4.3.2 Efecto sobre el crecimiento

145

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1

I
I
I
i1

4.3.3

Efectos sobre el contenido hdrico relativo, potencial hdrico, potencial osmtico y potencial de presin bajo
condiciones de suministro hdrico adecuado y moderado stress osmtico

4.3.4

Efectos sobre la densidad estomtica, gr

do de apertura estomtica y transpiracin

147

150

5)

C O N C L U S I N: E'S' '.V.

185

6)

B I B L I O G R A F A

188

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-1-

I=:========LL=1=B=2==1=="=2=C-===2==
1.1

Metales pesados; definicin y su relacin con el medio ambiente y

los vegetales
Se define con el trmino "metal pesado" a todo aqul cuya densidad

supera los 5 g/cm3 en su forma elemental (55). Las plantas, dentro de sus re_
querimientos nutritivos, necesitan de algunos de estos metales pesados, como el Fe, Mn, Cu, Zn y Mo (108) y, con toda probabilidad, el Ni

(28).

Las funciones de los metales pesados esenciales pueden resumirse

en la siguiente forma (108):
-Fe: interviene en las cadenas de transporte electrnico y ciertos
enzimas como la peroxidasa y algunas deshidrogenasas, actuantambin en la sntesis de clorofilas en la probable formacin
de un ferroporfirina como compuesto intermedio.
-Mn: Capaz de activar algunas proteinas transportadoras de fosfatos. Su importancia en este aspecto an no est claramente d
mostrada pero su papel parece ser importante al no poder ser
substituido enteramente por el Mg o cualquier otro elemento.
Tambin interviene en la fotolisis del agua.
-Cu: Componente de algunos metaloenzimas incluyendo la cido ascor_
bico oxidasa, fenolasa y citocromo oxidasa. Puede actuar como aceptor intermedio en la oxidacin directa de substratos
de origen molecular, debido a su capacidad de oxidacin y rje
duccin reversible.
-Zn: Interviene en la sntesis del Triptfano, precursor de las Au_
xinas.
-Mo: Esencial para la fijacin del Nitrgeno, y para la asimilacin
de los nitratos. Posiblemente interviene en algunas reacciones fosforilativas en las que se forman complejos orgnicos
de P y Mo.

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-2-

Los metales pesados, al igual que el resto de los elementos,

sean o no esenciales, pueden constituir una fuente de interferencias en
el desarrollo del vegetal cuando su concentracin en el medio supera unos
valores lmite, lo cual es ya conocido desde hace mucho tiempo: Klebs,
en 18888 (60) y, posteriormente Koenig, en 1910 (64) ya describieron fjL
totoxicidad debida al cromo. Actualmente, y debido a su incrementada pre_
sencia en el medio ambiente, est creciendo el inters por el estudio
de los efectos fisiolgicos y los mecanismos de absorcin y resistencia
a los metales pesados.
Los metales pesados pueden ser absorbidos por la planta median_
te cualquiera de los mecanismos empleados en la absorcin de nutrientes,
es decir, mediante absorcin pasiva, difusin facilitada o absorcin ac_
tiva y, en el caso de los no esenciales, como parece ser el caso del ero.
mo, del que se ocupa este trabajo, pueden ser coabsorbidos con otros n.
trientes minerales esenciales.
La translocacin de los metales pesados por parte de la plan_
ta es un mecanismo poco conocido; sin embargo, se ha desarrollado un mo_
dlo de equilibrio de quelacin entre cationes y agentes quelantes de
bajo peso molecular (cidos orgnicos y aminocidos) (Al,110,111).
Los sntomas ms generales de la fitotoxicidad por metales pe_
sados consisten en una falta de crecimiento y clorosis. La falta de cre_
cimiento puede ser debida o bien a una toxicidad especfica del metal
en cuestin o bien una inhibicin de la penetracin de la raz en el sue_
lo que impida la absorcin de nutrientes (6,14,20). En cuanto a la clo_
rosis parece estar relacionada con una falta de Fe, probablemente inducida por el metal (49).
Existen diferencias en los sntomas de fitotoxicidad inducida
por metales pesados, tanto en lo que respecta a los distintos metales
como a diferencias enlos sntomas observados en distintas especies pro.

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-3-

vocados por un- mismo metal.

Se ha propuesto que la toxicidad por metales.pesados podra
ser debida a una interferencia en el metabolismo (competicin por absorcin, inactivacin de enzimas, 'desplazamiento de elementos esenciales o alteracin de la estructura del agua (31). Tambin, podran afectar la divisin celular, actuando sobre la replicaciit de los cidos n_u
cleicos (5,92). La sensibilidad a los metales pesados puede variar sig_
nificativamente con la temperatura y la intensidad Imanica (30).
Las plantas presentan mecanismos de defensa frente al exceso de metales pesados como cambios de pH en la zona prxima a la raz
que pueden provocar la.:J.nsolubilizacin de ciertos metales pesados.Cier_
tas variedades de trigo, cebada, arroz y maz pueden incrementar el pH
de su solucin nutritiva y provocar la insolubilizacin y, por tanto,
la precipitacin del Al (19, 32, 48, 61). Por contra, las variedades sej
sibles Al disminuyen o no modifican el-pH de las soluciones nutritivas
y, por tanto, estn expuestas a altas concentraciones de Al durante pro_
longados perodos de tiempo. Tambin existen otros mecanismos como la
inmovilizacin en vacuolas, exclusin activa o la existencia de barreras
que impidan la translocacin desde la raz a la parte area (31).
>
.

.
Aunque poco se sabe sobre la gentica de la resistencia a los
metales pesados, se ha observado qu hay variaciones de sensibilidad en
tre variedades diferentes de vegetales cultivados y parece quela poliploida puede jugar un papel importante a la hora de desarrollar esta
.resistencia (26.66,73). A pesar de la resistencia al Al mencionada anteriormente, las tolerancias observadas entre soja y juda verde no pja
recen relacionadas con cambios diferenciales de pH en las zonas prximas a la raz,(33),

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-4-

1.2

Propiedades qumicas del cromo

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J

El cromo, descubierto en 1.798 por Vauqueln, presenta una

densidad elevada (7,19 g/cm3 a 20 C) , lo cual le confiere la categora
de metal pesado. Este elemento no se halla libre en la naturaleza pero
s se halla combinado. El mineral ms importante del cromo es la cromi_
ta, que contiene de un 15 a un 16% de Gr0.
Segn Woolhouse (123), tanto la agrupacin de los elementos
por su gravedad especfica, a la que hace referencia el trmino de metal pesado, como su situacin relativa en la tabla peridica, no son
adecuadas para el conocimiento de la actividad biolgica de los elemen^
tos. Para l es preferible una clasificacin basada en la capacidad de
formar ligandos, como la propuesta por Nieboer y Richardson (85) segn
la cual el Cr pertenece ala clase "B": cidos o iones metlicos que se
unen preferentemente a ligandos dbiles, aunque otros autores, como Woo
house (123), lo incluyen en la clase "borderline", que incluye aquellos
que pueden formar complejos con una gran variedad de ligandos, no sola
mente los dbiles.
El cromo, en la mayora de las circunstancias, presenta su e
tado de oxidacin ms estable como Cr III. Los compuestos de Cr II son
agentes de reduccin y los compuestos de Cr VI son agentes de oxidacin
fuertes. Los dos estados de oxidacin ms frecuentes en el ambiente, Cr
VI y Cr III son fcilmente interconvertibles, dependiendo la direccin
de esta interconversion fundamentalmente del pH del medio, de la presen^
ca de condiciones aerobias o anaerobias y de la temperatura. En condi
ciones ambientales la forma ms abundante es, con mucho, la de Cr III.
Los compuestos de Cr III frecuentemente slo son solubles en agua a ya_
lores de pH muy bajos y con valores de pH por encima de 5 6 normalme
te precipitan en forma de Cr(OH)3.
Las propiedades cido-bsicas del Cr varan aumentando la ac_

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dez con el nmero de oxidacin. El xido de cromo (CrO) y el hidrxido (Cr(OH) son bsicos, el Cr^O- es anfotero y el CrCLes cido, pudiendo formar cidos complejos o condensades (isopolicidos).
Desde el punto de vista termodinmico, el metal cromo es un
buen agente de reduccin, y cuando est finamente dividido reacciona
rpida y completamente con el oxgeno. En estado masivo, sin embargo,
el cromo se protege por una delgada capa transparente de Cr-CL, y es'ex
tremadamente resistente a la corrosin.
El cromo III es capaz de formar gran cantidad de complejos bas_
tante inertes, que cinticamente hablando, tienen mayor estabilidad c
n'ttica que termodinmica y se pueden aislar como slidao. Los complef *3
^
jos mejor conocidos son aminas (CrAm,_
(HjO) Rm)
' donde Ara es NH
o aminas polidentadas como etilendiamina. R es un ligando cido tal como
haluro, ion nitro o sulfato (82). El Cr III forma complejos polinucleados con puentes de hidrxido o de oxgeno. Ligandos neutros tales como
la etilendiamina se unen muy fuertemente. Sillen y Martell (106) indican las constantes de estabilidad de numerosos complejos orgnicos del
Cr, entre ellos los del EDTA, de la etilendiamina, de la sulfoxina, de
los aminocidos asparagina, serina, <x-alanina y glicina y de los cidos
orgnicos oxlico> succnico y ftico.
Los otros iones di- y tripositivos de los metales de transicin
tambin presentan esta propiedad, pero los complejos del Cr III son pajr
ticularmente estables.
Las soluciones alcalinas del Cr III son fcilmente oxidadas a
Cr VI. Las soluciones de cromato (CrO,~) son de color amarillo brillante. Cuando se acidifican estas soluciones se forma el ion dicromato ','(Cr_072 ), el cual es un agente de oxidacin muy poderoso, lo cual prp_
voca que las soluciones de ion bicromato sean intrnsecamente inestables
con respecto a su descomposicin en Q~ y Cr . Esta reaccin es lenta,
sin embargo, y las soluciones del ion dicromato se pueden mantener lar_
go iempo sin una descomposicin significativa.

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La adicin de sales crmicas al cido sulfrico concentrado

produce una solucin de xido rojo CrO~ que tiene propiedades oxidantes
extremadamente potentes y se emplea para limpiar la grasa de utensilios
qumicos de vidrio.
Finalmente, se puede obtener ion cromoso acuoso reduciendo las
soluciones de Cr 3+ con el Zn. Estas soluciones reaccionan rpida y
cuantitativamente con el oxgeno y se emplean algunas veces para elimi_
nar el oxgeno de una mezcla gaseosa.

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1.3.

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1

Presencia del cromo en el medio ambiente: fuentes, estado y

contenidos de cromo en el medio

El nico mineral de importancia econmica para la produccin

de cromo es la cromita. Grandes cantidades de cromo se usan en la produccin de acero inoxidable, de metales cromados y para la obtencin de
diversas substancias qumicas, que se emplean en la industria textil c
mo pigmentos, mordientes y tintes, y en la industria del cueropara el
curtido de pieles. Tambin se usan en la fabricacin de sacarina como
catalizadores, en la purificacin de aceites y grasas (21) e incluso
como anticorrosivos en aguas de refrigeracin (128) y en sales de impreg_
nacin junto con Cu y F para la proteccin de la madera contra la podr
dumbre (36).
1.3.1

El cromo en el suelo

El contenido de cromo en los suelos superficiales vara graj

demente y depende del tipo de roca madre, oscilando los valores normales de contenido en Cr en suelos entre 5 y 100 ppm (76,91). Como conte_
nido medio a nivel mundial se indican 65 ppm. Los suelos con mayor abuii
dancia en este metal, los llamados suelos serpentinos, son muy poco pro_
ductivos desde el punto de vista agrcol y fesentan una tpica flora de
serpentinofitas (27,89,92). Estos suelos se hallan en muchas zonas del
mundo, como Escocia, Portugal, Los Balcanes, La U.R.S.S., Japn, Cuba,
frica y los E.E.U.U. (114).
El incremento de la actividad industrial o el. aumento de las
grandes aglomeraciones urbanas producen una serie de productos industrial
les ricos en metales pesados, entre ellos el cromo, que en muchas ocasiones se vierten sin tratar y pueden llegar a ser utilizados como aguas
de regado en agricultura, con el consiguiente peligro de contaminacin
que ello comporta. En el caso del cromo provinente de la actividad in-

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trial cabe citar las factoras de lavado de mineral que contiene gan_
gas ricas en metales pesados y la industria del curtido dla piel, que
puede utilizar cromo en su tarea. El contenido de cromo en los fangos
de las curtidoras vara con el mtodo de curtido, desde un 0,97% en
la materia seca en el caso de fangos procedentes de la curticin vegetal, hasta un promedio de un 2,05% en los resultantes de curticin
con Cr (63). En el caso de las aglomeraciones urbanas el problema no
es tanto de cantidad como de concentracin, puesto que todas las aguas.
residuales se vierten en unos mismos emisores, aguas que una vezdep_u
radas rinden unos fangos ricos en materia orgnica que pueden ser ejn
pleados en el abono de tierras de cultivo, con el riesgo que su conte_
nido en metales pesados implica, sobre todo si estos fangos provienen
de fbricas de curtido de pieles* En general, el cromo en fangos de
depuradoras de aguas residuales suele hallarse en forma de Cr III y
se pueden aplicar concentraciones relativamente grandes de estos fan_
gos a suelos agrcolas sin que se produzcan efectos txicos. Sin embargo, se han establecido unas normas para evitar el peligro de tox
cidad en suelos por al aplicacin de famgos de depuradoras. As, segn Seto (102) el contenido mximo tolerable de Cr en suelos de cult
vo es de 12 ppm y la adicin mxima de 220 Kg/Ha. Chaney indica como .
mximo contenido permisible de Cr en fangos para su aplicacin a sue_
los agrcolas 1000 ppm. El cromo tambin puede provenir de los ferti_
lizantes fosfatados, aunque se considera ms importante el aporte de
cadmio que pueden ocasionar, del compost proveniente de basuras y del
uso de combustibles fsiles en centrales elctricas e industrias sidjs
rrgicas, aunque estos aportes son mucho menores que los efectuados
mediante fangos de depuradoras.
El cromo se puede presentar en el suelo en cuatro formas
diferentes: como catin Cr o anin Cr09~ y en dos formas hexavalen_
tes: cromato CrO,2- y dicromato Cr00_/2- . El catin trivalente presen
ta una tendencia a coordinar con ligandos del suelo que presenten

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agua y nitrgeno, muy estables (10). El cromo se mantiene soluble a

pH 5,5 gracias a la presencia de cido ctrico, cido dietilendiamin
pentaactico (DPA), cidos flvicos y materia orgnica soluble en el
agua.
Existen evidencias de que los cidos flvicos juegan un
papel ms importante que los cido hmicos en la quelacin del cromo
(2,51,103,104). Estos cidos orgnicos se pueden encontrar en estir_
col y aguas residuales urbanas e industriales.
La materia orgnica presente en el suelo puede provocar
una reduccin espontanea del Cr VI a Cr III, dado que este ltimo es
raucho ms estable qumicamente, aunque si hay Mn oxidado en el suelo
puede oxidar al Cr, que pasara de Cr III a Cr VI, actuando el Mn co
mo aceptor de electrones. En este caso podran empeorar los problemas
de fitotoxicidad por cromo al aparecer la forma txica de dicho metal.
Dado que el Al adsorbe Cr y que esta adsorcin puede ser
evitada por la presencia de ortofosfto, se supone que el comportamiento del Cr VI en el suelo es parecido al dlos ortofosfatos (10,
51,52). Como consecuencia de la alta capacidad de adsorcin del cromo,
ste suele estar en baja disponibilidad para los vegetales.
1.3.2

El cromo en el agua y los sedimentos

El cromo en los sistemas acuoso superficiales se halla fvrn

damentalmente en los sedimentos o en forma particulada en suspensin,
y muy poco en forma soluble en el agua. Puede hallarse en forma de cojn
piejo orgnico o en forma inorgnica.
Las aguas naturales, no contaminadas, contienen cantidades bajas de cromo soluble (82)
Los dos estados de oxidacin importantes de cromo en aguas

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naturales son Cr III y Cr VI. En aguas bien oxigenadas el Cr VI es

la forma termodinamicamente estable, aunque normalmente es rpidamente reducido a Cr III y adsorbido a partculas en suspensin y sedimentos (88) . En las zonas contaminadas no parece que haya una impor
tante liberacin de Cr soluble desde los sedimetos (93) , como ocurre
con el Cd, Cu, Ni o Zn.
1.3.3

El cromo en la atmsfera

El contenido en cromo en el aire vara ampliamente entre

zonas industriales y zonas no contaminadas, siendo las fuentes principales de contaminacin la combustin de carbn. La emisin de cromo
depende adems de la capacidad de incineracin de las industrias cojn
taminantes y de las instalaciones de control de emisin de contaminan^
tes que posean, as como del tipo de carbn que consuman (34,72).
El cromo emitido en la combustin de carbn se halla en
las partculas de ceniza desprendidas <al aire, que contienen entre
10-1000 ppm Cr/peso seco.
La poblacin no ocupacionalmente expuesta inhala cantid
des relativamente bajas de cromo; normalmente menos de 0,001 mg/da
(4) y se han legislado los mximos permisibles, dependiendo stos de
los distintos paises.

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1

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1

-11-

1.4

Esencialidad y toxicidad del cromo para los animales

1.4.1

Esencialidad

IV

La esencialidad del cromo est bien demostrada en animales (78,79,80,100) y para el hombre (37,42,101), As mismo, pudo ser
observada la induccin de una deficiencia de Cr en pacientes que reci^
bieron una nutricin por va parenteral deficiente en cromo durante
un espacio prolongado de tiempo (56). A .partir de estos datos, dive
sos estudios realizados llevaron a la conclusin de que gran parte de
la poblacin de los E. E. U. U. est subalimentada con respecto al Cr
(56).

^B

El Cr, al contrario que otros metales, como por ejemplo

el Cd, no se acumula en el organismo (44).

"

La forma, biolgicamente activa del cromo es la' trivalente

(80), y acta como un complejo denominado "Factor de Tolerancia a la
Glucosa -GTF-), probablemente un cof actor de la insulina, inicialmente
aislado en ratas (80) y posteriormente de diversas fuentes, tambin
en plantas superiores (50). Este complejo parece contener cido nico
tnico, glicina, cido glutmico y cistena por lo que respecta a los
animales, siendo diferente en los vegetales. Actualmente se han hala_
do complejos sintticos que contienen Cr III biolgicamente activos
para los animales y el hombre.

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IB

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1

La funcin del cromo en el hombre y los animales parece

estrechamente relacionada con el metabolismo glucdico, puesto que tras
la ingestin de glucosa se produce un incremento de Cr en sangre directamente proporcional al nivel de glucosa. Se ha podido demostrar
en experiencias "in vitro" que la adicin de Cr 'potencia la accin de
la insulina, (69) . Experiencias con animales demostraron que la deficiencia de Cr provoca transtornos en la tolerancia a la glucosa , , in-

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-12-

cluso cierta diabetes clnica.

No tan solo el cromo presenta acciones en el metabolismo glu
cdico sino que tambin puede intervenir en el metabolismo lipdico,
inhibiendo el desarrollo de la arteriosclerosis (36,100).
No todo el cromo contenido en los alimentos est disponible
para el organismo humano, por lo que el conocimiento del contenido de
Cr biologicamnete activo enlos alimentos es de gran inters diettico.
Todos estos aspectos hacen que el estudio del cromo en los
vegetales tenga inters no tan solo desde su aspecto de metal contami
nante sino tambin por lo que respecta a su uso en alimentacin, pues_
to que la subalimentacin descrita anteriormente en paises azanzados
(56) ha puesto de manifiesto la necesidad de buscar plantas resistentes a concentraciones elevadas de cromo y que a la vez presenten una
cantidad suficiente disponible para los animales y el hombre en sus t_e_
jidos comestibles; sin embargo, experiencias realizadas en este sent
do no parecen muy esperanzadoras por lo que respecta a su disponibiH
dad, aunque existen diversas fuenes de Cr en plantas superiores, como
la alfalfa, judas y trigo (50), siendo la mayor fuente la levadura de
la cerveza ( Saccharomyces carlsbergensis) .
1.4.2

Toxicidad

El Cr III (sales catinicas puras) prcticamente no es tx

co. Cantidades de 35 a 350 g de Cr2(SO,)o suministrado por va oral
no tienen efecto txico en el hombre 71). Sin embargo, no es as por
lo que respecta al Cr VI, puesto que una nica dosis de 0,5 a Ig de
^CrO, administrada por va oral es mortal para el hombre. A esta ele_
vada toxicidad hay que aadir el riesgo de absorcin por la piel, que
tambin es considreable. Los sntomas de intoxicacin aguda por cromo
consisten principalmente en diarreas, hemorragias estomacales e intes_

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-13-

tinales, lesiones hepticas y renales graves, convulsiones, pup

las dilatadas, transtornos circulatorios, sudores frios y profusos, ap
ricin de ictericia intensa y, finalmente, puede subrevenir la muerte
(12,95).
La gran diferencia de toxicidad entre ambos tipos de iones
parece debida a la facultad del Cr VI para atravesar las membranas bio_
lgicas unida a la fuerte accin oxidantede los cromatos. Dado que en
el ambiente natural el Cr VI es fcilmente reducido a Cr III, el impa
to txico de los residuos contaminados con Cr disminuye altamente.
Los sntomas de intoxicacin crnica por Cr se manifiestan
por irritacin de las mucosas nasales y secrecin de mocos, pudindose
llegar en casos graves a la perforacin del tabique nasal. Tambin son
tpeas la produccin de dermatitis, eczemas en las manos, ulceraciones,
transtornos digestivos y bronquitis crnica (70).
Otro efecto txico del cromo para los animales es su capaci_
dad para producir mutagnesis que puede originar cncer y genotoxicidad. Las sales carcinognicas ms potentes son las fcilmente solubles,
especialmente el cromato calcico.

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1.5

El cromo y los vegetales; esencialidad y fitotoxicidad

1 .5.1

Absorcin y transporte

La absorcin del cromo desde la solucin nutritiva del suelo

es un mecanismo no muy bien conocido hasta el momento. Existen diversos hechos observados que dan una idea general de este mecanismo, pero
todava no se conoce con exactitud cual es el mecanismo concreto de ab_ ,
sorcin. As, se ha observado que la absorcin del cromo es sensible
a la temperatura (16), lo que parece indicar que no se-tratara de un
mecanismo de absorcin de tipo puramente fsico, tal como la difusin
a travs de gradiene. Por otra parte, estudios realizados con inhibido
2_
res parecen indicar que la absorcin de CrO, es activa, mientras que
la de Cr 3+ es pasiva, lo cual parece demostrar la presencia de algn
tipo de transportador implicado en el transporte de este metal, el cual
muestra cierte especificidad o reconocimiento de las formas qumicas
presentes en el medio. Cabe indicar a-este respecto que el transpoprte
de cromato parece ser inhibido por los sulfates (107). Este ltimo he_
cho podra ser indicativo de que no existe un verdadero transportador
de cromato sin que ste aprovecha los transportadores de especies qu_.
micas similares, quiz debido a'la baja especificidad de dichos trans_
portadores.
A pesar de que las plantas acumulan cromo de las soluciones
nutritivas, retienen la mayor parte en las raices. Experimentos llevja
51 ^
dos a cabo con Cr, radiactivo, en forma de complejos d cidos orgj
nicos tanto en forma trivalente como en forma hexavalente no produjeron
un incremento en el paso de la barrera de translocacin a pesar de in_
creraentar la concentracin de cromo en el medio (18,49,50).
Tal y como ya hemos comentado en apartados anteriores, la fqr_
ma qumica ms estable del cromo en el suelo es la trivalente, a pesar de lo cual y pese a la baja tasa de translocacin del cromo de la
raz a la parte area, la mayor parte del cromo que es translocado lo

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-15-

1
lo es en forma de Cr VI, creyndose que la mayor parte del Cr III
es adsorbida por intercambio inico en las paredes de los vasos xilemticos .

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1

'

Existe una estrecha relacin entre el transporte de cromo y

el transporte de hierro., Las plantas o tejidos vegetales con tendencia
a acumular Fe tambin tienen tendencia a acumular Cr, a pesar de que
la absorcin del Cren plantas crecidas en deficiencia de Fe disminuye_
ra mientras que la tasa de translocacin se increment. Otro hecho a
destacar es que el Fe III mejora ms el transporte de Cr VI que el Fe
II, mientras que el EDTA-Fe no lo mejora en absoluto (18,50). Probable^
mente los mecanismos de transporte del cromo y del hierro son iguales
o parecidos.
Existen tambin relaciones entre el cr y otros componentes
del suelo. Una deficiencia de P provoca una mayor absorcin de Cr, p
siblemente debido al dao producido en la raz.
Posiblemente una de las razones de la baja tasa de transpor_
te del Cr sea la compartimentacin vacuolar o la falta de transportado
res especficos, aparte de una inhibicin por sulfates, fuertemente dis_
ponibles en el suelo.

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1.5.2

Efectos fisiolgicos: esencialidad

Aunque la esencialidad del cromo est bien demostrada en los

animales, no es as por lo que respecta a los vegetales (126). Se ha
observado que no es requerido para el normal desarrollo en lechuga (Lctuca sativa L. ssp. longifolia), tomate (Lycopersicon esculentum Mili.),
trigo (Triticum aestivum L.) o juda (Phaseolus vulgaris L.) , por lo
menos cuando estas plantas fueron cultivadas en solucin nutritiva cqn_
-4
tenientdo 3,8 x 10
uM Cr (50). Lemna sp. creci y se reprodujo en
un medio con 3,8 x 10
uM Cr (49), pero estos valores no son indic^

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-16-

tivos^de la esencialidad del cromo puesto que hay valores remanentes

en las soluciones nutritivas e incluso se detect presencia de cromo
en los tejidos de las plantas sometidas a estos tratamientos. ProbabLe
mente parte de este cromo hallado en las plantas fue aportadp por con
taminacin area, ya que los tratamientos no fueron realizados en cnia_
ras con aire filtrado. Estos experimentos muestran que si el Cr fuera
esencial lo sera a niveles inferiores a los del Mo, el elemento esen
cial requerido en menor concentracin hasta el momento.
A pesar de que no ha podido ser demostrada la esencialidad
del Cr para los vegetales, en numerosos estudios se ha observado un es_
tmulo del crecimiento de las plantas por concentraciones bajas de ej
te elemento. En Vitis vinifera se observ que la aplicacin de Cr mediante aerosol provocaba un incremento en el rendimiento y calidad de
los racimos, incrementndose N+P+K+Ca durante el perodo vegetativo,
pero decreciendo en total el porcentaje de Ca. Tambin fue provocada
una reduccin en la relacin Ca/P y (Ca+Mg)/K y un incremento en la re_
lacin Mg/P (23). Sin embargo, no ha podido ser demostrada la partie^
pacin del Cr en ningn proceso vital, pudiendo ser debido este estmulo a a probada actividad antifungica del Cr.
1.5.3

Quien describi primeramente fitotoxicidad debiada al ero.

rao fue Klebs en 1888, seguido por Koenig en 1910 (60,64). La sensibili
dad de las plantas vara segn las especies, lo cual podra ser debido
a una diferencia de absorcin por parte de las diferentes especies.
Los sntomas de fitotoxicidad, por exceso de Cr, manifest^
dos exteriormente, pueden resumirse en la siguiente forma:

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1
1
1

Efectos fitotxicos

";'

- Inhibicin del crecimiento: Tanto de las raices como de

la parte aerea. 5 ppm de Cr VI en solucin nutritiva inh
bn el crecimiento de sola (Glicine max L.) (29). Tambin

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se ha observado en algunos casos un asevera marchitez, sin

embargo, tanto a lo largo de una experiencia anterior (39),
como a lo largo de este trabajo, no nos ha sido posible o_b_
servar sntom alguno de marchitez en la especie estudiada.
- Induccin de clorosia: Debida a una deficiencia de Fe, en
soja (29). Tambin observada en remolacha azucarea y, en
nuestro caso, en judas.
- Inhibicin de la germinacin: Observado en cebada (Hordeum
vulgare L.) y, relacionado con ello, se ha observado una
disminucin en la permeabilidad al agua. En rodajas de patata tratadas con Cr, fue posible observar una notable pr_
dida de agua (84).
Tanto estos sntomas de toxicidad como la fuerte acumulacin
de Cr en las raices, ya comentada por nosotros en anteriores estudios
(7,39), sugieren que el efecto primario del Cr se da en las raices, sien_
do el resto consecuencia ms o menos directa de estos efectos primarios.
Estudios realizados con microscopa electrnica de transmisin muestran que raices tratadas con Cr VI presentan abundantes precipitaciones vacuolares en las zonas ms internas, lo cual habla en a_
vor de la acumulacin de Cr en este compartimento celular (115). En ho_
jas apenas se observaron efectos citotxicos a nivel ultrestructural
y nicamente fueron afectados los cloroplastos de las hojas jvenes,
expuestas desde el inicio de su desarrollo, punto ste que apoya la qb_
servacin de la aparicin de clorosis en las hojas ms jvenes.
El Cr presenta una estrecha relacin con el Fe, tal y como
ya hemos comentado anteriormente, bajando la relacin Fe/Mn en semillas
de espinaca, a pesar de que esta relacin se increment en las partes
vegetativas,lo cual indica que la elevada concentracin de Cr reduce
la translocacin de Fe (17,18). Relacionado con ello est el hecho de
que a pesar de que se acumula ms cromo en hojas inferiores que en su_
periores la fotosntesis se ve.?ms afectada en las hojas superiores,
apareciendo una marcada clorosis en ellas (3).

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No tan solo existe relacin con el Fe, sin que tambin la

hay con otros nutrientes, como ya hemos visto en el caso de Vitis vinifera y en el que fue observada interaccin con N, P, K, Ca y Mg.
Respecto al N existen datos contradictorios. Por una parte,
el contenido en N en Glicin max no fue afectado al ser trarada con Cr
(29),pero enexperiencias con Hordeum vulgare se ha observado una reduje^
cin en el contenido en N en cenizas (43).

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1 .6_

Relaciones hdricas

1.6.1_

Parmetros que miden las relaciones hdricas

Los vegetales no presentan flujos masivos de lquidos en cir

cuito cerrado como los animales , sino que presentan un flujo de agua
abierto desde la raiz hasta las partes aereas que permite el transporte de los nutrientes absorbidos por las raices a las zonas superiores.
Este flujo abierto aprovecha las diferencias de potencial hdrico entre el suelo y la atmsfera para provocar un movimiento del agua a tr
vs de laplanta. , Este flujo de agua es posible gracias al gradiente de
potencial hdrico que seproduce en el sistema suelo-planta-atmsfera,
siendo de los tres componentes la atmsfera el que presenta el potencial ms bajo.
El potencial hdrico ('w) est formado por varios componentes, siendo stos el potencial osmtico (iff), el potencial de presin
y el potencial Matriciel (it). Su expresin es:

Dado que el potencial matriciel normalmente es muy bajo res_

pecto a los otros parmetros, se puede despreciar, pudindose escribir
la ecuacin anterior, a fines prcticos, de la siguiente forma:

f w = fp + m
Los potenciales matriciales fueron originalmente concebidos
como un componente del potencial total resultante de las interacciones entre el agua y la matriz por analoga con un componente matriciel
en el suelo (109). Los potenciales matriciales en el suelo fueron co
siderados como resultantes principalmente de la capilaridad entre los
poros y las "fuerzas de superficie". En un principio se supuso que p_o
tenciales similares podran existir en las paredes celulares y posible^

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mente tambin en el citoplasma. Sin embargo, este potencial se halla

en discusin y su importancia no es tenida muy en cuenta. Su influencia decrece rpidamente con la distancia a la superficie y su valor
puede ser considerado como despreciable en el conteto de un vegetal en_
tero, de proporciones macroscpicas (113).
El potencial osmtico vara segn consideremos una solucin
ideal o no ideal, puesto que la actividad de los solutos vara con la
concentracin debido a las interacciones intermoleculares. En nuestro
caso, por supuesto, tomaremos una solucin no ideal. De esta forma pue_
de escribirse:

f n= -RT x f / x C -R x T x Ns / V
Donde:
fV = potencial osmtico
R = Constante de los gases
T= Temperatura absoluta
f w = densidad del agua. Vara con la temperatura,
pero suele considerarse como la unidad.
Ns = Nmero de osmoles de soluto en la savia celu_
lar de la muestra.
V = Volumen de la solucin.
Warren Wilson (119) propone que todas las desviaciones de la
idealidad en una solucin sean aadidas al potencial matricial debido
a que parte del agua se une a las molculas del soluto.
El potencial de presin suele ser deducido de la expresin:

'

1>P * ?w - fir
Donde:
T p = Potencial de presin
tfw = Potencial hdrico
1T7 = Potencial osmtico

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Parece ser que potenciales de presin negativos nunca se d

sarrollan en clulas vivas, debido a que las clulas sufren plasmolisis al perder agua, momento en que el citoplasma deja de presionar sp_
bre la pared celular y se asume un valor de T p = O, igualndose ento
ees el potencial hdrico al potencial osmtico, a este punto se le dje
nomina punto de prdida de turgencia (107).
1.6.2

Elasticidad y plasticidad de la pared celular

Cuando una fuerza acta sobre un material se produce un esfuerzo. Este esfuerzo o deformacin puede ser elstico, plstico o pajr
ticipar de ambas caractersticas a la vez. Diremos entonces que una de
formacin es plstica cuando no recupera la forma inicial al cesar la
fuerza aplicada, mientras que ser elstica cuando se recupere la for_
ma inicial. Del mismo modo, una deformacin que participe de ambas pro_
piedades recuperar la forma inicial pero no totalmente. Muchos materiales, incluyendo la pared celular presentan ambos tipos de propiedades
(46). Una clula en crecimiento presentar una pared celular ms pljs
tica que una clula madura, a pesar de que incluso las clulas .maduras
presentan considerables propiedades de plasticidad. En una clula viva,
llena de agua, esto se traduce en el hecho de que la elasticidad provo_
ca un incremento grande del potencial de presin con pequeas variaciones de volumen, mientras que la plasticidad produce grandes variaciones de volumen sin que se produzcan variaciones importantes del po_
tencial de presin.
El mdulo de volumen elstico (Cv) describe la cuanta en que
un pequeo cambio de volumen se traduce en un cambio de potencial de
presin (129). Se expresa de la siguiente forma:
P = tv x 4V/V

v = (d?/dV) x V

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Este mdulo, tambin llamado mdulo de elasticidad de Young,

se refiere a esfuerzos unidireccionales, pero en los vegetales la pared celular suele ser anistropa respecto a sus propiedades de elsticidad direccionales, por lo que se usa, con fines prcticos, un mdulo de elasticidad medio para variaciones globales de volumen (116):
= dP/dW x W
Sin embargo, Hv y no son totalmente equivalentes, puesto
que v es definido en trminos de volumen celular y en trminos de
peso del agua simplstica (W), a pesar de que cuantitativamente son s
milares (116,129).
1.6.3

Variaciones de los distintos parmetros de las relaciones hdricas

Los ajustes de % son conocidos desde hace tiempo. Walter,

en 1955 (117) y Kreeb en 1963 (65) ya describieron descenso de ^77 en
respuesta al stress hdrico y salino. En algunos casos, esta respuesta se debe simplemente a una respuesta pasiva a la prdida de agua, $e_
ro recientemente se ha prestado una mayor atencin a lo que parece ser
una osmorregulacin o ajuste osmtico (124), cuya consecuencia es el
mantenimiento de un potencial de presin positivo que permite el mante
nimiento de la turgencia.
Han sido observadas oscilaciones diurnas de jf entre 0,4 y
1,6 MPa en plantas superiores que pueden afectar a vas metablicas o
bombas inicas (25,129).
Un bajo TT? permite que la planta siga absorbiendo agua , in_
cluso en condiciones de stress salino (124). Tambin es posible mante_
ner la turgencia por encima de O, de forma que se permite que los esto_
mas se mantengan abiertos, con la consiguiente elevada conductancia e
temtica y tasa fotosinttica (48,73). Finalmente, el mantenimiento de

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la turgencia permite que no se detenga el crecimiento.

En el caso de" , ste es parcialmente responsable de la tasa
en que variaciones de turgencia relacionen Vw y Tp. En un tejido rgido,
las variaciones de c afectarn poco a T p y viceversa. Un tejido ms elstico presentar ms turgencia que uno menos elstico (121) por lo que
un i pequeo cotribuir al mantenimiento dla turgencia mejor que un
grande. De lo expuesto anteriormente se desprende que el mantenimiento
de la turgencia depende tanto de n como de .
1.6.4

Significado fisiolgico de los parmetros hdricos

Quienes primeramente expresaron matemticamente la relacin

de la presin de turgencia con otros parmetros de las relaciones hdri^
cas celulares fueron Renner en 1915 y Ursprung y Blum en 1916 (107).
El primer clculo de un mdulo de elasticidad para las paredes celulares fue realizado por Boyer en 1952 (107). El desarrollo de
mtodos de estudio de las relaciones hdricas de la planta (Cmara de
presin de Scholander, psicrometra, etc...) ha hecho posible el estudio fcil de las relaciones hdricas de tejidos u rganos enteros.
Sir. tenemos- en cuenta la ley de Boyle-Mariotte-Van Hoff en el
caso de una clula vegetal:
Presin osmtica x volumen de la vacuola = constante
que puede transformarse en:
Potencial osmtico x contenido hdrico relativo = constante
Si representamos esta relacin usando el inverso del conten^
do hdrico relativo (CHR ) frente al potencial hdrico obtendremos una
lnea recta (diagrama de Richter), siempre que el potencial de presin
sea nulo, es decir, que el potencial hdrico dependa exclusivamente del
potencial osmtico, lo cual se consigue cuando las clulas de los te-

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-24-

jidos estudiados han entrado en plasmolisis, debido a que el citoplasma se ha separado de la pared celular y no presiona contra ella.
Para derivar la relacin entre el potencial de presin y el
contenido hdrico relativo se usa una funcin exponencial, que puede

ser expresada
|

de la siguiente forma:

^fp = ^p(mx) x e'3x ^CHR

~^

(1)

Esta expresin puede ser transformada en una funcin lineal

que nos permita realizar un anlisis de regresin y as calcular ^ y
^P (Max).

Infp - In^ptmx) = > x (CHR'1 - 1)

de donde
In ^p = /3 x (CHR"1 - 1) + Infp (mx)

Si tomamos

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1
1

M,-*,y
(CHR"1 - 1) = CHR'
puesto que T p (max) y & son constantes, obtendremos:
f p 1 = u CHR' + In^p (mx)
Por otra parte, el coeficiente de elasticidad puede ser cal^
culado de la ecuacin propuesta por Broyer en 1952 (107):
v = dfp/dV/V o bien

v = d < Pp/d(CHR)/CHR = CHR x dfp/dCHR (2)

De la ecuacin (1) se sigue:

dfp/dCHR ;: -*p (mx) x u x 1/CHRJ x e

Substituyendo en la ecuacin (2) obtenemos:

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Cv = -fy (max) x p x 1/CHR x eP(CHR

"J) = -fp xux 1/CHR

[

El conocimiento de rp (max) y de v nos permitir conocer el

comportamiento celular o, en nuestro caso, de todo un rgano o tejido
frente a condiciones de stress hdrico. Para ello procederemos primera_
1
mente a la representacin grfica de <TW frente a CHR , de forma que ob
tendremos dos zonas diferenciadas:
- Una zona exponencial, en la cual T w = Tp +T/f , cuyo carcter
exponencial viene determinado por la existencia de una tur
gencia que provocar la existencia de un potencial de presin.
- Una zona lineal, en la cual el tejido habr entrado en pla_s
molisis, en cuyo caso el potencial de presin ser nulo y
el potencial hdrico depender exclusivamente del potencial
osmico.
Determinando qu puntos pertenencen a cada una de las zonas
y aplicando el anlisis de regresin podemos llegar a conocer todos los
parmetros que nos interesan. :
El significado fisiolgico de estos parmetros deriva del he_
cho de que la elasticidad de la pared celular es inversamente proporci
nal al valor de Cv. rganos con un 6 v menor que otros, para un mismo CHR
presentarn una mayor resistencia a las condiciones d -stress osmtico
o hdrico, lo cual se traducir en una prdida de turgencia a valores
de CHR ms bajos, pues las paredes celulares podrn adaptar su volumen
mejor a las condiciones cambiantes de CHR que se producen por la prd
da de aguay, consecuentemente, de volumen.
En cuanto al significado de (3 , nos indica la velocidad de p
dida de presin de turgenciarespecto a la variacin de CHR. Si i/a es muy
bajo, esta prdida ser muy rpida y, por lo tanto, v ser alto.
. ' - ' ' '

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<fp (max) nos permite calcular (3 y, consecuentemente, f v. Por

otra parte, T p (mx) nos indica el estado de turgencia que presentan los
tejidos u rganos cuando el CHR es mximo (100 %), obtenido por extrapo
lacin lineal a partir de los datos de la zona lineal. De esta forma,
tejidos con un T p (mx) ms elevado que otros presentarn una mayor tu
gencia en condiciones de saturacin hdrica.
1.6.5

Metales pesados y relaciones hdricas

A pesar de la escasa informacin existente sobre los efectos

que los metales pesados pueden tener sobre las relaciones hdricas, exis_
ten algunos trabajos que tratan de los efectos de los metales pesados
sobre distintas especies vegetales.
Se ha observado que el Cd provoca una progresiva marchitez en
las plantas tratadas con este metal, a la vez que se ha observado una
relacin entre el Cd y la transpiracin en hojas de maiz (35,39,68). Tain
bien se han comunicado efectos sobre el peso seco y el crecimiento. Po_
siblemente el Cd disminuye la conductividad hdrica en el tallo puesto
que se ha observado que disminuye el xilema disponible para la translo_
.cacin y Fuhrer et al. (35) observaron la aparicin de un complejo auto_
fluorescente de la pared alrededor de los vasos del xilema. Por otra
parte, se ha observado que el Cd presenta efectos distintos segn sea
su concentracin: a concentraciones bajas provoca un incremento en el r p
y la tasa de transpiracin y disminuye la resistencia estomtica, mie
tras que a concentraciones ms elevadas ocurre lo contrario (59), lo cual
podra estar relacionado con el hecho, observado por otros autores (11,
40), de que el Cr a bajas concentraciones estimula el crecimiento de pla
tas tratadas con este metal.
El Cr tambin puede disminuir la permeabilidad al agua en semillas e inhibir la germinacin. En rodajas de patata tratadas con Cr

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fue posible apreciar una notable prdida de agua (84). Relacionado con
ello, Watendorf (120) habla de una prdida de la semipermeabilidad en
las membranas celulares de Elodea tratadas con Cr, que incluso llegaron a perder su capacidad de ser plasmolisadas.
Respecto a los otros metales, Klimashevskii y Delov encontra_
ron que el Al provocaba una disminucin de la plasticidad e incluso p
da inhibir completamente el crecimiento de la raiz (61,62), postulando
Matsumoto que podra tener relacin con la pared celular, especialmente
con el grado de metilacin del cido galacturnico (74), sugiriendo Kli_
mashevskii t al. (61,62)que el Al daa la pared celular por activacin
de la poligalacturonasa, que hidroliza las pectinas.

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II

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El presente trabajo se inscribe dentro de una lnea de inves_

tigacin iniciada por el profesor Dr. D. Joan Barcel Coll, catedrtico de Fisiologa Vegetal, y por la Dra. Charlotte Poschenrieder, profe_
sor titular, ambos de esta Facultad, sobre la fitotoxicidad de los metales pesados.
El vegetal, como cualquier ser vivo, presenta para su desarrja
lio normal, un equilibrio entre determinados parmetros fisiolgicos,
bioqumicos, etc... que regulan su crecimiento y cuyo desequilibrio pue
de dar lugar a un desarrollo anormal que incluso puede llegar a la mue
te del organismo en los casos ms graves. Por otra parte, desequilibrios
exgenos pueden dar lugar a daos ecolgicos que, segn el nivel de la
escala trfica en el que se produzcan pueden ser ms o menos importantes
para la comunidad estudiada. Finalmente, hay que considerar los perju
cios econmicos o sanitarios qu la rotura del equilibrio nutricional
en los niveles trficos ms bajos puede producir, bien sea por la baja
productividad de los cultivos (tanto para alimentacin humana como fp_
rrajeros), bien sea por la incorporacin y/o acumulacin de elementos
extraos y potencialmente txicos para los consumidores como el hombre,
de forma directa a travs del consumo de vegetales contaminados o ind
recta a travs de la ingestin de carnes cuya alimentacin se haya pro_
ducido con vegetales expuestos al contaminante.
El Cr, como hemos mencionado en la introduccin, no es un me_
tal que se presente frecuentemente de forma espontnea en niveles txi_
eos; nicamente aparece de forma natural en ciertas zonas constituidas
por rocas ultrabsicas y muy localizadas desde el punto de vista geogr^
fico. Su importancia ha empezado a ser tenida en cuenta a raiz del desa_
rrollo del proceso de industrializacin, que ha incrementado en el medio ambiente substancias hasta ahora presentes en niveles no txicos.
Aunque la cantidad global de dichas sustancias se mantenga, no es as
por lo que respecta a su concentracin local, que en algunos puntos pue_

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den llegar a alcanzar valores peligrosos.

Este trabajo se ocupa de los efectos fitotxicos del Cr en una
especie en concreto: una variedad de juda enana (Phaseolus vulgaris L.
cv. Contender de mata baja). La elecccin de esta especie est condici
nada por varias razones: la corta duracin de su ciclo vital y su redu^
cido tamao la hacen ideal para el cultivo en cmara de cultivo cerrada
que permite mantener unas condiciones controladas, imposibles de alcan_
zar en el campo o de muy difcil consecucin en invernadero. Por otra
parte, sta es una especie ampliamente cultivada a lo largo de nuestra
geografa, por lo que se ve expuesta a condiciones desfavorables de to_
do tipo, entre las cuales se hallan la presencia de metales pesados y
el dficit hdrico.
En un trabajo anterior (7,39) habamos iniciado el estudio de
los efectos nutricionales del Cr sobre P__ vulgaris, puesto que tal y co_
rao hemos visto en el apartado 1.5.2 los estudios realizados por diversos equipos de investigacin coinciden en sealar que el Cr a concentr*
ciones txicas afecta fuertemente el crecimiento y rendimiento de las
plantas, y que esta disminucin va acompaada de diversos transtornos
metablicos, entre los que podemos destacar cambios a nivel de los pi
mentos fotosintticos (clorosis), a nivel de la absorcin y translocacin de nutrientes inorgnicos y cambios en la economa hdrica de las
plantas. Como continuacin a ello planteamos la primera experiencia de
este trabajo,en la que se realizar unamedicin ms detallada de los ni^
veles de nutrientes en los distintos rganos por separado a la vez que
se ampliar el nmero de elementos a determinar.
Una parte muy importante de este trabajo se centrar en las
relaciones hdricas de las plantas tratadas con Cr (dos de las 3 experiencias planteadas estn referidas a ello). Esto es debido a que, a pe_
sar de que diversos autores coinciden en sealar la influencia del Cr
sobre las relaciones hdricas de las plantas, son escasos los estudios

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que cuantifiquen estas relaciones en trminos de potencial hdrico o

que relaciones los efectos que sobre la elasticidad de las paredes celulares pueda tener el Cr, que pueden estar relacionados con la importante reduccin del crecimiento observada, especialmente dado el impor_
tante papel que juega el potencial hdrico en el proceso de crecimiento
por elongacin celular. Por otra parte, la elasticidad de las paredes
celulares influye sobre la resistencia al dficit hdrico y creemos que
sera muy interesante calcular la variacin que esta elasticidad (cono_
cida a partir del mdulo de elasticidad de Young - v -) pueda sufrir
al ser sometidas las plantas a tratamientos con cromo.
Las experiencias relacionadas con los parmetros hdricos se
dividirn en dos partes. Una es la ya mencionada en la que intentaremos
calcular la relacin del cromo con la elasticidad de la pared celular
y sus implicaciones con la variacin del potencial de presin. En ella
ser utilizado sustrato slido inerte puesto que su gradual desecacin
provoca la entrada en marchitez de las plantas de forma lenta pero coj
tinuada, pudiendo as obtener registros a lo largo de todo el proceso
de desecacin que nos permitan construir curvas de presin - volumen a
partir de las cuales calcular los coeficientes que relacionan los cambios de^p con la variacin en el CHR.
En la segunda experiencia se utilizar cultivo hdropnico l_
quido al que se aadir polietilenglicol (PEG) para alcanzar un in adecua_
do para someter a las plantas a un moderado stress osmtico sin provocar su entrada en marchitez. Estas condiciones deben realizarse de fqr_
ma muy controlada y el desecado de uns sustrato slido poroso como la
perlita no permite un control muy exacto de las condiciones de dficit
hdrico.
Del conjunto de resultados de estas experiencias esperamos o_b_
tener datos concretos acerca de la influencia del cromo sobre las rela_
cienes nutritivas e hdricas de las plantas que posiblemente nos perrai^
tan relacionar estos fenmenos con las anomalas de crecimiento observadas en plantas con toxicidad de Cr.

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1

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1
PARTE

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1

EXPERIMENTAL

3.

MATERIAL

MTODOS

3.1

,
Condiciones de cultivo y tipo de tratamientos

3.1.1

Experiencia I: Medida de niveles de nutrientes

En esta primera experiencia se procedi a la medicin de los

niveles de nutrientes por separado en raz, tallo, hojas inferiores y
primera hoja trifoliada.
Tanto en esta experiencia como en las siguientes se utiliz
como material de experimentacin plantas de juda (Phaseolus vulgaris L.
cv. Contender de mata baja), cuyas semillas fueron suministradas por la
casa Ramn Batlle S.A. de Barcelona.
En esta experiencia el cultivo se realiz en cubetas de pls_
tico de 25 x 25 x 16 cm, de 10 1 de capacidad, empleando como material
de soporte inerte perlita del tipo A-13 suministrada por la casa Dical
te Espaola S.A. de Rub (Barcelona). Se plantaron 20 jardineras repartidas en 5 lotes distribuidos de forma que en cada uno hubiera por lo
menos una jardinera con cada una de las concentraciones de Cr utilizadas en la expereiencia. En cada jardinera se sembraron 23 semillas pre_
viaraente esterilizadas con HgCl.0 al 0,2 % durante 5 minutos con posterior lavado con agua destilada hasta la no reaccin con AgNO.,. A los 5
das de haberse producido la germinacin se seleccionaron las plntulas
para obtener plantas de tamao uniforme.
Como fuente de cromo se emple cromato sdico de grado anal
tico. Se escogieron 4 concentraciones txicas de Cr (1, 2.5, 5 y 10
ppm) adems de un control sin tratar con el metal.

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-32-

La solucin nutritiva empleada fue la de Long-Ashton modificada por Poschenrieder y Barcel (90). Cada da se reg cada lote con
300 mi de solucin nutritiva y posteriormente se dren para eliminar el
exceso de solucin. La solucin nutritiva se mantuvo a un valor de pH
de 6 _+ 0,1 para mentener el cromato sdico en su mxima solubilidad y
as conseguir una disponibilidad mxima de Cr VI para las plantas.
Para realizar el cultivo se utiliz una cmara de cultivo con
iluminacin por fluorescentes blancos. El fotoperodo fue de 12 h y la
temperatura oscil entre 18C en la fase oscura y 26C en la fase lurnj^
nica, mientras que la humedad relativa del air oscil entre el 85% y
el 70% respectivamente. Dentro de la cmara, la posicin de los diferentes lotes de la plantacin se intercambi siguiendo una rotacin pa_
ra paliar al mximo las diferencias en el ambiente de la cmara.
Las muestras se recogieron a los 21 das de edad de las plan
tas (contados a partir del da de la germinacin) .
Los parmetros determinados y las tcnicas empleadas en esta
experiencia fueron:
- Determinacin del crecimiento
-Digestin de las muestras para determinaciones analticas.
- Determinacin de nutrientes mediante espectrofotometra de
absorcin atmica
t
- Determinacin de Mo por emisin en plasma
- Determinacin de Na y K por fotometra de llama
- Determinacin espectrofotomtrica del P
- Anlisis estadstico de los datos (regresin y anlisi de
la varianza).

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1
3.1.2

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1

Experiencia II: Medida de parmetros hdricos (Potenciales

y elasticidad)

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Como material de experimentacin se emple el mismo que en la

experiencia anterior, plantas de P. vulgaris L. cv. Contender de mata
baja, siendo el mismo el soporte inerte empleado (perlita del tipo A-13).
La solucin nutritiva utilizada tambin fue la misma de la experiencia
anterior y las concentraciones de Cr VI utilizadas fueron iguales. Como
fuente de cromo se utiliz Na^Cr^O-j^R^O de grado analtico* Las cond
cienes de plantacin fueron las mismas que en la experiencia anterior,
salvo la temperatura, que fue incrementada, y la humedad relativa del
aire, que fue disminuida, todo ello encaminado a mantener una evapotrans_
piracin relativamente elevada que nos permitiera alcanzar rpidamente
las condiciones de stress hdrico. La temperatura oscil entre los 26C
durante la fase lumnica del fotoperiodo (12 h) y 21C durante la fase
obscura, mientras que la humedad relativa oscil entre el 65% y el 80%
respectivamente.
Veintin das despus de la germinacin (da O del perodo de
stress hdrico), cuando las hojas inferiores y la primera hoja trifolia^
da de las plantas control estuvieron completamente expandidas, se inte
rrumpi el suministro de solucin nutritiva, a la vez que las jardineras fueron drenadas exhaustivamente y la humedad relativa del aire fue
disminuida hasta un 25% y 50% respectivamente durante el perodo lumn
co y el perodo obscuro. En este da se determin el crecimiento, potej
cial hdrico, potencial osmtico y contenido hdrico relativo para cada
tratamiento. A partir de este momento, las plantas fueron expuestas a
dficit hdrico que fue mantenido durante 35 das, tomndose medidas de
fw, vn y CHR a diversos intervalos durante la duracin del perodo.
Estas determinaciones se llevaron a cabo separadamente en hojas inferio_
res y primera hoja trifoliada.
Las determinaciones fueron llevadas a cabo en los da O, 7 y
14 del perode de dficit hdrico para las plantas control y las trat
das con 1 y 2,5 ppm Cr VI. Mediciones adicionales se efectuaron los das

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1

-34-

18 y 21 en plantas tratadas con 5 y 10 ppm Cr VI. Una ltima dterra^

nacin en las hojas trifoliadas de las plantas tratadas con 10 ppm Cr
VI se llev a cabo el da 36.
Los parmetros determinados y las tcnicas empleadas en esta
experiencia son:
-

1
1
1
^B

3.1.3

1
1
i

J?,... , .,-..->--,-... . .... ,>.....

Determinacin del crecimiento

Determinacin de i w.
Determinacin de *
Determinacin del CHR
Anlisis estadstico (Regresin y anlisis de la varianza)
Clculo de los parmetros de elasticidad y relaciones hdri,
cas.

Experiencia III: Medida de transpiracin y apertura estomtica

Como material vegetal de experimentacin se emple el mismo

que en las anteriores experiencias.
En esta experiencia se modific la tcnica de cultivo, las se_
millas fueron germinadas en perlita, igual que en las experiencias ante_
riores, sindoles suministrada agua destilada para mantener la humedad
del substrato. Las plntulas germinadas de esta manera se seleccionaron
a la semana de la siembra (4 das despus de la germinacin), de forma
que las plntulas que haban desplegado las hojas inferiores y comenz
ban a extenderlas fueron transferidas a cubetas cilindricas opacas de
5 litros de capacidad , llenas de solucin nutritiva con buena aireacin
y manteniendo las raices en contacto directo con la solucin nutritiva.
Las condiciones de iluminacin y humedad relativa del aire
fueron las mismas que en la experiencia anterior, hasta la primera toma de muestras. La solucin nutritiva se cambi dos veces por semana pa_

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ra evitar el agotamiento de los nutrientes y cambios de pH por variacin en el contenido salino dla solucin.
Como fuente de Cr VI se emple Na^CrpCL^^O. Dado que la dis_
ponibilidad del cromo en esta forma de cultivo es mayor que en el caso
del cultivo en soporte de perlita, se procedi previamente a determinar
las concentraciones ms adecuadas para efectuar la experiencia, obtenindose que una concentracin de Cr VI en el medio de 1,5 ppm provoca^
ba una reduccin del crecimiento y unos sntomas visuales parecidos a
los que provocaba una concentracin de 10 ppm en el cultivo con perli_
ta. As pues, se procedi a realizar el experimento empleando como cqn_
centraciones txicas de Cr VI 0,2, 1 y 1,5 ppm.
A los 21 das contados a partir de la siembra se procedi a
tomar la primera muestra de crecimiento, potencial hdrico y potencial
osmtico, as como a obtener la primera rplica de la epidermis foliar
inferior, todo ello en hojas inferiores y primera hopja trifoliada por
separado. En este momento se aadi PEG 4000 a la solucin nutritiva
a una concentracin de 3 g/1, que en pruebas anteriores habamos encoj
trado que provocaba un ligero stress osmtico sin llegar a marchitar
las plantas. Una vez provocado este stress osmtico se procedi a tomar una segunda muestra al cabo de una semana de haber aadido el PEG
a la solucin nutritiva, tomndose medidas de los mismos parmetros que
en la toma de muestras anterior.
Las determinaciones analticas y tcnicas empleadas en esta
experiencia son:
-

Determinacin del crecimiento

Medida de iw
Medida de **
Medida de CHR
Medicin de la transpiracin
Obtencin de rplicas de la epidermis foliar y medida del
grado de apertura estomtica.

I
I

Solucin nutritiva empleada en todas las experiencias

MACRQNUTRIENTES

KNO~

Concentraci6n(g/l)
0,505

Ca(N03)2.AH20

1,181

NaH2P04.2H20

0,208

MgS04.7H0
MICRONUTRIENTES

MnS04.H0

0,369

'//-,%
Concentracin(mg/1)
,1,692

| HB03

2,177

ZnS04.7H20

0,286

(NH4)6Mo?024.4H20

0,035

CuS04.5H20

0,251

i
I
I
I
I
I
I

EDDHA Fe

8,350

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3.2

Determinaciones analticas

3.2.1

Determinacin del crecimiento

En todas las experiencias realizadas se determinaron los s

guientes parmetros de crecimiento por separado en raices, tallo, hojas
inferiores y primera hoja trifoliada: peso fresco, peso seco y rea fo_
liar.
La determinacin del crecimiento en todos los tipos de medi_
ciones fue hecha en plantas escogidas al azoar en cada tipo de tratamiento. En el caso de las determinaciones de crecimiento de las raices,
cuando la experiencia sellev a cabo con perlita como substrato inerte,
los valores obtenidos son ms bajos que en el caso del cultivo hidrop
nico lquido, lo cual debe interpretarse por el hecho de que las raices
presentan una gran adhesin al substrato slido poroso que es laperlita
que impeda su separacin completa, con la consiguiente prdida de materia vegetal.
El peso fresco fue determinado inmediatamente despus de la
recogida de las muestras para evitar prdidas de humedad que se traduc
ran enprdidas de peso. Las determinaciones fueron hechas mediante una
balanza SARTORIOS, digital, con precisin de hasta la diezmilsima de
gramo. Una vez efectuadas las mediciones de peso fresco se introdujeron
las muestras en una estufa a la temperatura de 105C hasta obtener peso
constante (24 h), momento en que se midi el peso seco, procurando evi^
tar ganancias de peso debidas a la absorcin de agua del vapor atmosf
rico, para lo cual las muestras se dejaron enfriar en un desecador,cerra
do.
La medicin del rea foliar fue realizada con un planmetro
LI-COR modelo 3100. Cuando la extensin de la hoja rebasaba los lmites de medicin del aparato se procedi a dividirla en porciones que no

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excediesen dichos lmites, sumando las reas de todos ellos. Todas las
mediciones de rea foliar fueron hechas sin tener en cuenta el peciolo.
3.2.2

Digestin de las muestras para determinaciones analticas

Basada en el mtodo de Schaumloffel

(94)

Se lleva a un matraz Kjeldhal de fondo plano y cuello normal

de 50 mi, 1 g de material seco y se aaden unos 10 mi de una mezcla de
HNO,., H2SO, y HC10, de grado analtico en la proporcin 10:1:1 respectivamente. Se deja reaccionar durante toda una noche para evitar la for^
macin excesiva de humos y se calienta moderadamente sobre una placa ca^
lefactora. Se ha de observar la formacin de vapor de HNOo, de color in
bar. Cuando desaparezca la espuma formada en esta fase se sube la temperatura a un valor elevado y se espera a que todo el HNO-, se evapore.
La destruccin de la materia orgnica nicamente es completa cuando s
lamente queda cido sulfrico, si se mantiene algn color es seal de
que queda materia orgnica sin digerir y es necesario aadir unas gotas
de HC10, al 60% o de toda la mezcla si el color es muy intenso, y se re_
pite el proceso. Una vez digerida la muestra se contina calentando hajs
ta que se evapore el HC10,. se deja enfriar a temperatura ambiente y se
aaden 10 mi de agua destilada. Posteriormente se filtra en un matraz
aforado de 50 ral, lavando el matraz Kjeldhal, as como el embudo y el
papel de filtro y finalmente se enrasa.
Todos los recipientes han de ser de vidrio lavado con HNO- cojt
centrado y agua destilada. No se puede emplear mezcla crmica puesto que
los restos de cromo podran enmascarar las determinaciones de este metal.
3.2.3

Determinacin de Na y K por fotometra de llama

Se parte del digerido realizado segn el mtodo de Schaumloffel.

Para medir ambos elementos se emple un fotmetro de llama "CORNING-EEL

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^1

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-39-

con escala de 0 a 100, empleando unmargen de concentraciones para realizar Ia recta patrn entre 0 y 20 ppra, con cloruro de arabos metales,
de grado analtico. El blanco, correspondiente al 0 de la escala se
realiz con el mismo agua destilada empleada para realizar las dilucio_
nes del digerido cido. La fuente de calor empleada para la ionizacin de los cloruros fue una llama de aire-butano.
3.2.4

Determinacin de elementos mediante espectrofotometra de ab-

sorcin atmica

1
1

Se parte del digerido realizado segn elmtodo de Schaumloffel.

Se emple un espectrofotmetro de absorcin atmica PERKIN-ELMER modelo
703, utilizando como fuente de excitacin una llama de aire-acetileno.

Los parmetros empleados para realizar las medidas fueron:

Elemento

Longitud de onda (nm)

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1

i
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1
1
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1
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Ca
Cr
Cu
Fe
Mg
Mn
Zn

422,7
357,9
324,8
248,3
285,2
279,5
213,9

Linearidad de respuesta
(ppm)
0-r- 5

0-5
0-5
0-5

0 - 0,5
0-3

0 -1

Para la determinacin de Ca y Mg se diluyeron las muestras en LaCla fin de evitar interferencias con otros elementos, principalmente el
P.

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-40-

3.2.5

Determinacin del Mo mediante plasma

Se parte del digerido realizado anteriormente. Mediante esta tcnica se consiguen resoluciones muy elevadas, del orden de las ppb, siendo
su linearidad de respuesta muy elevada.
Para la determinacin del Mo se emple la tcnica del plasma acopla
do inductivamente, que provoca la emisin de los tomos del elemento a
determinar mediante su excitacin por un gas muy caliente y altamente
ionizado (plasma), que permite que pequeas fracciones del elemento que
no seran detectadas por otra tcnica presenten la suficiente energa
como para ser medidas, previo aislamiento de las condiciones que prov
can una menor interferencia con otros elementos presentes enla muestra.
Los parmetros utilizados en la determinacin del Mo son:
-Aparato: Jobin Yvon VHR 38
- Fuente de plasma:
Gas interior: Argn
Flujo: 0,35 1/min
Gas exterior: Argn
Flujo 18 1/min
Gas nebulizador: Argn Flujo: 0,2 1/min
- Presin de nebulizacin 56 Psi
Flujo de nebulizacin (muestra): 1 1/min

- Red de difraccin: 3400 surcos/mm

- Longitud de onda: 202,030 nm

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I

- Slit: 30 um entrada.
40 um salida

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3.2.6

Determinacin espectrofotomtrica del P

Realizado segn el mtodo descrito por Alien (1) y Chapman.

Se parte del digerido descrito anteriormente.
Se preparan los siguientes reactivos:
- Solucin A: 6,333 g de molibdato ammico en loo mi de agua
destilada caliente.
- Solucin B: 316 mg de Metavanadato (monovanadato) amnico
en 300 mi de agua destilada hirviendo.
Se mezclan ambas soluciones en un vaso de precipitados de 1
litro de capacidad que contenga 400 mi de agua destilada fra. Se aaden
28 mi de H^SO, concentrado de grado analtico y se afora a 1 litro con
agua destilada.

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1

Para realizar las determinaciones se aaden 4 mi de patrn o

muestr a 15 ral de reactivo y se lee a 440 nm teniendo cuidado de esperar por lo menos 30 minutos para dar tiempo . a realizarse completamente
la reaccin.
Todos los recipientes utilizados han de ser lavados con HC1
y agua destilada abundante. No se pueden emplear detergentes puesto que
contienen fosfatos.
3.2.7

Determinacin del potencial hdrico

La determinacin del potencial hdrico se realiz mediante el

mtodo de cmara de presin descrito por Scholander (96,97,98,118).
La medicin del potencial hdrico se realiz sobre las plantas en la fase del fotoperodo correspondiente al medioda. Para la rea
~*
lizacin de las mediciones se emple una cmara de presin SOIL MOISTU
RE modelo 3000 utilizando aire no respirable comprimido como gas a pre
..

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,_

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sin, realizando las mediciones a temperatura ambiente.

Las medidas de potencial hdrico se realizaron por separado
en hojas inferiores y primera hoja trifoliada, para lo cual se separaron de la planta cortndolas con una cuchilla muy afilada a pocos mil_
metros del peciolo. Posteriormente la hoja se introdujo en la cmara de
presin procurando que salieran al exterior unos pocos milmetros del
extremo del peciolo cortado. Se aument la presin en la cmara a una
velocidad de aproximadamente 0,15 MPa cada 30 segundos y se observ con
una lente de aumento la formacin de pequeas gotas en el extremo del
peciolo. Debido a que los tallos de la especie empleada contienen cier_
ta cantidad de aire, la primera aparicin de gotas en el extremo libre
del peciolo en muchas ocasiones era debida a la expulsin de aire y no
a la etrusin de savia, debido a lo cual fue necesario proceder a la eli_
minacin de estas burbujas con papel secante para poder observar la ve
dadera aparicin de savia.
3.2.8

Medida del potencial osmtico

Las hojas utilizadas para la medida del potencial hdrico fue_

ron introducidas inmediatamente despus de su lectura en una bolsa her_
mtica y sumergidas en una mezcla de acetona y nieve carbnica, prepara^
da introduciendo nieve carbnica en acetona previamente enfriada a -20C
hasta que se dejara de producir ebullicin violenta. Las muestras conge_
ladas a -70C fueron guardadas en un congelador a -20C hasta la lect_u
ra del potencial osmtico.
Para proceder a la lectura del potencial osmtico se desconge_
laron las muestras y se procedi a extraer la savia mediante una peque^
a prensa de mano y con ella se humedeci un papel de filtro que fue rn_
troducido en la cmara de lectura, la cual se dej estabilizar y se en_
fri hasta el punto de roco, midiendo la resistencia de un termopar a
dicha temperatura y refirindola a una escala patrn realizada con di-

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-43-

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1

ferentes soluciones de molaridad conocida.

Las lecturas fueron efectuadas con un Psicrmetro WESCOR HR-33T
DEW POINT MICROVOLTMETER.

1
^B

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1

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1
1

3.2.9

Medicin del contenido hdrico relativo

El CHR fue determinado en las hojas inferiores y primera hoja

trifoliada siguiendo el mtodo de Barrs y Weatherley (8), segn la mod
ficacin propuesta por Kim y Lee Stadelman (58) en una hoja de la misma
edad y tamao que la utilizada para la medicin del potencial osmtico
e hdrico. Fueron extrados 5 discos de 9 ram de dimetro de la lmina
foliar, excluyendo la nerviacin principal, los cuales fueron depositja
dos en un pesasubstancias, Despus de proceder al pesaje de los discos,
stos se introdujeron en una solucin que contena aproximadamente 2,0
mol/m3 Ca2+, 1,3 mol/m3 Mg2+, 0,6 mol/m3 Na"1" y 0,15 mol/m1 K"1" a 25C ba.
jo tnue iluminacin proporcionada por lmparas fluorescentes. Los discos se mantuvieron en estas condiciones durante 4 h al cabo de las cua
les fueron secados con papel de filtro y pesados de nuevo, tras lo cual
fueron desecados en una estufa a 80C durante por lo menos 15 h, momento en que se determin el peso seco. El CHR fue calculado de la forma
siguiente:
CHR = (Peso fresco - Peso seco) / (Peso turgente - Peso seco)

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1
1
1
1
1
1

3.2.10

Medida de la transpiracin

Realizada por el mtodo de pesada. Para realizar la medida de

tranpiracin se procedi a separar la planta del substrato e introducir^
la en un depsito tarado previamente con solucin nutritiva. La planta
se mantuvo en la balanza iluminada convenientemente para evitar el cierre de los estomas, durante 15 minutos, anotando cada minuto el peso del
conjunto. Previamente se realiz un ajuste del tiempo calculando la li
nearidad de la respuesta y seobserv que en el tiempo utilizado la line
,_ * ..
T* "i f\ *

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1
1
1
1
1
1

-44-

ridad era perfecta. Tiempos ms cortos hubieran podido falsear los

datos por desviaciones en la pendiente, mientras que tiempos ms largos
hubieran entrado enla fase de cierre de los estomas.
Las medidas de transpiracin fueron expresadas en relacin al
. -1
peso de la planta, en forma de mg FLO g-1 min
3.2.11

1
1

1
1
1
1

Obtencin de rplicas de la epidermis foliar y medicin del

grado de apertura y densidad estomticas

Diferentes tipos de material han sido usados para realizar mi^

croimpresiones de la superficie foliar. En 1901, Buscalloni y Pollaci
describieron el uso de colodin (al 4% en una solucin peso/volumen de
nitrocelulosa en una mezcla de etanol y dietil ter (122)) para estudiar
la transpiracin mediante la observacin de reducciones locales en la
transparencia de la impresin basadas en la presencia de vapor de agua.
Gloser (38) experiment en 1967 con soluciones de Perspex (Metil-metacrilato) en cloroformo y Jones, en 1983 , describi el uso de laca para
uas (soluciones variables generalmente basadas en una mezcla de disol^
ventes orgnicos) (54). En nuestro caso se emple gelatina fotogrfica
disuelta en cloroformo, provienente de pelculas fotogrficas de blanco
y negro no expuestas y sometidas a un proceso de revelado y fijado m>r_
males, el cual elimin todas las sales de plata que pudieran reducir la
transparencia de la pelcula. Una vez disueltala gelatina se procedi
a retirar los soportes no solubles y se filtr la solucin resultante,
dejndose concentrar por evaporacin hasta alcanzar la consistencia de_
seada.
Para la realizacin de la rplica de la epidermis foliar se
procedi a depositar una pequea cantidad de la solucin sobre la epidermis inferior de la hoja mediante un pincel de pelo fino y se dej ev
porar. Una vez evaporado el cloroformo se separ la pelcula formada so
bre la hoja mediante unas pinzas finas. Las pelculas as obtenidas se

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1
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. . . .... -.-*--.-..-.-. -;:;-;-. .- -*-.-._..

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-45-

depositaron sobre un cristal portaobjetos que se cubri con un cubreo

jetos y se sellel conjunto bajo presin de forma que la pelcula quedara plana para su posterior observacin microscpica.
3.2.12

Medida del grado de apertura y densidad esomticas

La medicin del grado de apertura y densidad estomticcas fue

realizada utilizando las preparaciones obtenidas por el mtodo anterior,
utilizando un microscopio Zeiss con objetivo de 40 X en aire y ocular
de 12 X.
Se midi la superficie del campo cubierto por el objetivo me_
diant un portaobjetos graduado, precedindose posteriormente al recueji_
to del nmero de estomas presentes en cada campo, los cuales fueron separados en abiertos y cerrados sin distincin del grado de apertura. Es_
ta distincin se realiz considerando abiertos aquellos estomas que cla_
ramente presentaban los bordes de sus clulas guarda separados, prese_n
tando una abertura elipsoidal, mientras que el resto se consider cerra^
do.
Las mediciones se efectuaron en por lo menos tres campos, lle_
gndose a 10 en el caso dlas preparaciones ms perfectas.
3.2.13

Anlisis estadstico

En todas las experiencias se utilizaron los mtodos clsicos

de regresin lineal por el mtodo de los mnimos cuadrados de Gauss, re_
gresin polinomial de 2e y 3er. grado y anlisis de la varianza con un
solo factor de variacin, que por ser de uso generalizado en cualquier
estudio no discutiremos en profundidad en este trabajo.
En todas las tablas, las medias seguidas de distinta letra in_
dican diferencias significativas al 5%.

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-46-

4.1_

Experiencia I

4.1.1_

Curso del crecimiento y desarrollo

Tanto las plantas crecidas en ausencia de cromo como las tra_

tadas con las diferentes concentraciones del metal alcanzaron el mismo
porcentaje de germinacin (90%).
Por lo que respecta al crecimiento, las primeras diferencias
claras aparecieron a los ocho das de haberse efectuado la siembra, qb_
servndose una graduacin en l desarrollo de la planta y sus hojas in
feriores, que en este momento son las nicas que han aparecido, desde
los controles , que ya las haban desarrollado plenamente, hasta el tra^
tamiento con 10 ppm Cr VI, en el que empezaban su desarrollo todava.
El crecimiento longitudinal tambin era ms desarrollado en las plantas
control que en los distintos tratamientos.
La extensin de las hojas juveniles empez el da noveno
de la siembra, observndose ya en este estadio que las hojas juveniles
de las concentraciones ms elevadas de Cr VI (2.5, 5 y 10 ppm) eran ms
pequeas que las tratadas con concentraciones inferiores y los controles
sin cromo. La diferencia en el crecimiento longitudinal fue marcndose
a medida que transcurra la experiencia.
La primera hoja trifoliada apareci en los controles a los 9-10
das contados a partir de la siembra, tardando ms las plantas tratadas
con cromo. A partir de 2,5 ppm Cr VI en el medio se pudo observar que
estas hojas presentaban una clorosis que contrastaba con el verde ms
intenso de las hojas juveniles y que se fue acentuando alo largo de la
experiencia.

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^47-

A los veintin das de edad, momento de la recogida de las

muestras para el anlisis del crecimiento y contenido mineral, las plar^
tas presentaban el siguiente aspecto:
- Disminucin en el crecimiento longitudinal proporcional al
suministro de cromo
- Mayor debilidad del tallo a mayor concentracin de cromo en
el medio
- Incremento en la intensidad del color verde dlas hojas j^i
venues (inferiores)
- Clorosis proporcionalmente ms cacusada a mayor concentracin de cromo en el medio en las hojas trifoliadas.
4.1.2

Efectos sobre el crecimiento

4.1.2.1

Raices

Se observa una fuerte reduccin en el crecimiento (tablas 1

y 2 y grficos 1 y 2), especialmente para las concentraciones de 1 y 2,5
ppm Cr VI en el medio, llegndose a una zona asinttica en la que apenas hay reduccin del crecimiento al incrementarse la concentracin de
Cr VI en el medio.
El tratamiento con cromo afecta tambin negativamente al cre_
cimiento longitudinal, como pudimos observar visualmente.
Teniendo en cuenta los valores de reduccin porcentual se de_
tecta una mayor disminucin en el peso seco respecto al peso fresco.
4.1.2.2

Parte area

Tambin es afectado el crecimiento en la parte area en todos

los parmetros estudiados, disminuyendo en forma exponencial inversamen^

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I
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-48-

te con el incremento en la concentracin en Cr VI suministrada, lo cual

indica que se alcanza, al igual que en la raz, una concentracin cuyo
efecto es mximo y a partir de la cual no se producen efectos posterio
res sobre el crecimiento.
4.1.3

Efectos sobre el contenido en cromo

El principal hecho observado es que, al igual que en la expe_

riencia anterior (7), la relacin entre el cromo suministrado y el cqn_
tenido interno en cromo es lineal en la mayor parte de los rganos y con_
centraciones estudiados (tabla 2 y figura 2). An siendo conocido que
la absorcin del cromo puede variar con diversos factores, siendo el ms
importante de ellos la temperatura (16), ste no ha sido nuestro caso,
puesto que todos los tratamientos estuvieron expuestos a las mismas coj
diciones ambientales, siendo la concentracin de Cr VI en el medio el
nico facto de variacin al que fueron sometidos los tratamientos, por
lo que podemos decir que el contenido en cromo es funcin de su suminis
tro, aunque, como veremos por los resultados obtenidos en experiencias
posteriores en las que lasplantas fueron sometidas a cultivo en contacto
directo con la solucin nutritiva (Experiencia III), no es funcin exac_
ta del suministro sin que tambin lo es de la disponibilidad de cromo
en el medio, puesto que en la experiencia anteriormentemencionada idn_
ticos sntomas visuales aparecieron a concentraciones de cromo en la so_
lucin nutritiva unas 10 veces menores que en esta experiencia. Tambin
fue posible observar una mayor concentracin de cromo en las raices que
en la parte area. As,mientras que las plantas control presentaban una
relacin Cr raz/Cr parte area de aproximadamente nicamente 2, para
las diferentes concentraciones de cromo en los tratamientos, esta rela_
cin es muy superior, lo cual indica que siempre la concentracin de Cr
en las raices es muy superior que en la parte area, hecho relacionado
con la presencia de una especie de barrera para la translocacin de cro_

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-49-

mo anloga a la observada por otros autores para otros metales pesados

(18, 50). Relacionado con la existencia de esta hipottica barrera y res
pecto al experimento realizado con anterioridad y que dio lugar a la
Tesina de licenciatura hay que resaltar un nuevo hecho observado al suministrar una concentracin de cromo doblemente superior a la mxima utilizada en la anterior experiencia: la aparicin de indicios de saturacin en la concentracin de cromo interno en la planta, saturacin
que nicamente se ha producido de forma clara en raz, y, en menor grado en el tallo y hojas.
La explicacin de la saturacin observada est en el hecho,
observado por otros autores (105) de que el cromo suministrado aparece
en su mayor parte en vacuolas en la raz y, del resto, la mayor parte
se halla ligado a la pared celular. Teniendo en cuenta este efecto y cojn
binndolo con la mencionada barrera de translocacin obtendremos un cuj
dro anlogo al obtenido en esta experiencia. Primeramente el cromo incre_
menta su concentracin en la raz proporcionalmente al cromo disponible
en el medio, translocndose a su vez proporcionalmente a su concentracin en raz, de forma que el incremento en la concentracin de cromo
en todos los rganos es lineal y depende, en ltimo trmino, de la concentracin de cromo en el medio. Sin embargo, una vez la raz comienza
a saturarse ce cromo, no se produce un incremento proporcional a la dis_
ponibilidad de cromo en el medio sin que la acumulacin se hace ms 1
lentamente y se acerca a un valor mximo, perdindose de esta forma la
linearidad seguida hasta entonces. A pesar de ello, no se han alcanzado
todaa las concentraciones de saturacin en la parte area, puesto que
la barrera de translocacin impide que todo el cromo presente en la raiz se transloque a la parte area, y se producira una ligera reduccin
en el incrmento de la concentracin de cromo en el tallo como consecuen_
cia de la disminucin en el incremento de la concentracin de cromo en
la raz. Segn este modelo, los datos de concentracin esperada en las
distintas partes estudiadas debieran ser:

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-50-

Raiz )} Tallo> Hojas inferiores ^ 1a Hoja trifoliada

Sin embargo, no ha sido as y los valores observados han sido:
Raz 2> Hojas inferiores > Tallo > 1a Hoja trifoliada
Este hecho podra ser explicado si las hojas inferiores actua_
ran como sumidero de las substancias translocadas, de forma que fueran
acumuladas por ellas, lo cual hara posible que su concentracin fuera
mayor que en el tallo. Respecto a la primera hoja trifoliada juegan otros factores que evitan que se conviertan en sumideros de substancias
translocadas y es debido ello a los efectos del cromo, lo cual no es a_
s para las hojas inferiores que ya se encuentran preformadas en las sje
millas, de forma que resultan menos afectadas en su metabolismo que la
primera hoja trifoliada ( en muchos de los nutrientes estudiados en esta experiencia se presentan concentraciones menores en las hojas trifoliadas que en las inferiores).
Estos datos posiblemente indican que la translocacin del Cr
desde la raz hacia la parte area es un mecanismo pasivo, desarrollado conjuntamente con los flujos de masas de los diferentes nutrientes
por la va del xilema, actuando normalmente las hojas activas como sumideros de estos nutrientes.
Nuestros datos obtenidos en P, vulgaris son parecidos a los
obtenidos por Har et al. en plantas de Brassica sativa Clav. (45), de
forma que ambas especies tienen una sensibilidad parecida, y acusada,
frente al cromo.
Al igual que en la experiencia anterior hay que destacar que
se observ la presencia de cromo en las plantas control a pesar del cui_
dado tomado para evitar posibles contaminaciones. Existen dos explica^
ciones a este fenmeno, que son:
- El cromo proviene de impurezas en las sales empleadas, res_
tos fijados en el material utilizado y en el sustrato. .

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.

-51-

- El cromo proviene de la deposicin del polvo atmosfrico.

En nuestro caso nos inclinamos por una combinacin de ambas,
teniendo un gran peso especfico la segunda, como corrobora el hecho de
que la relacin Cr raz/Cr parte area sea ms baja enlos controles que
en el resto de tratamientos.
Finalmente, dada la concentracin de cromo en las plantas en
relacin con las del medio, podemos concluir que P. vulgaris es una es_
pecie acumuladora de cromo.
A.1.4

Efectos sobre los diferentes nutrientes

A.1.4.1

Efectos sobre el P

Se observa una relacin polinomial cuadrtica entre el conte_

nido en P en la raz y el suministro de cromo (tabla 4 y figura 4), mien^
tras que en la parte area las relaciones no son tan claras (tabla 4 y
figura 4) , salvo en el tallo, en el que es posible observar un incremej
to en la concentracin de P al incrementarse la concentracin de cromo
en el medio, aunque sin seguir una relacin definida. Por lo que respec^
ta a las hojas, no se detectan pautas de ningn tipo, salvo en la prime_
ra hoja trifoliada en la que se produce una brusca disminucin en el COT
tenido do P a partir de un suministro de Cr VI de 2,5 ppm.
Cuando se analizan las relaciones entre el P y el contenido
interno en cromo de las diferentes plantas se observa que las relaciones
son las mismas que en el caso del suministro, hecho ya esperado dada la
estricta dependencia lineal entre el suministro de cromo y los conten,
dos internos en dicho metal.
Existe un comportamiento en el contenido en P que, al igual
como ser comentado ms adelante para otros nutrientes, puede ser dividido en dos zonas. En el caso de la raz estas dos zonas seran:

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-52-

- Una primera zona de incremento en la concentrain de P ha

ta 2,5 ppm Cr VI en el medio, que se corresponde con datos
obtenidos anteriormente (7,38).
- Una segunda zona de disminucin en el contenido en P para
las concentraciones ms elevadas de cromo (5 y 10 ppm), que
no se corresponde con los datos obtenidos anteriormente (7,
38), en los cuales el P se increment hasta la mxima concej
tracin de cromo suministrada (5 ppm).
,
Este comportamiento diferencial en las dos zonas puede ser e
plicado por el hecho de que probablemente el Cr no afecta plenamente a
las plantas hasta alcanzar determinadas concentraciones, en nuestro ca_
so 5 ppm, de forma que estos datos estaran de acuerdo con el trabajo
previo mencionado ya que los efectos detectados en aqul para un suministro de 5 ppm de cromo visualmente son parecidos a los obtenidos en
ste para un suministro de 2,5 ppm Cr VI. A concentraciones ms bajas,
probablemente el metabolismo a pesar de estar afectado el crecimiento,
no se dae muy seriamente, mientras que a concentraciones ms elevadas
deben jugar otros factores un papel muy importante en el metabolismo.
El incrmento en el contenido en P en la raz no se traduce en
un incremento similar en la parte area, por lo que podemos pensar que
la translocacin del P de la raz a la parte area se ve afectada por
el cromo. Para el incremento del contenido en P en la raz podran da
se varias explicaciones. Una de ellas sera que este incremento fuera
debido nicamente a un efecto de concentracin al ser afectado el crecimiento y no la absorcin, mientras que la disminucin en el contenido
podra ser debida a un efecto ms severo sobre el transporte que sobre
el crecimiento. Sin embargo, hay que tener en cuenta que otros autores
han observado una estrecha relacin entre el Cr y el P (17,50). Dichos
autores han observado que plantas crecidas con defieciencia de P abso
ben ms cromo y sugieren que posiblemente el Cr y el P comparten un mis_
mo tipo de tranportador.

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1
1
1

1
1
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^B

-53-

Otra posible explicacin del incremento de P en las raices de

las plantas tratadas con bajas concentraciones de Cr VI sera la de que
el Cr, al ser absorbido, pudiera inducir la formacin de nuevos puntos
de unin para el Cr que tambin fueran utilizados por el P, lo cual in_
crementara la absorcin de ambos elementos, mientras que concentracip_
nes mayores de Cr provocaran una toxicidad tal que los efectos sobre
el metabolismo impediran la induccin de nuevos puntos de fijacin y,
al ser la relacin Cr/P elevada tendiria a entrar ms Cr que P. Que cier_
tos metales pesados son capaces de inducir nuevos puntos de unin e ,in_
crementar as su propia absorcin en las raices fue encontrado en 1978
por Petit (87) para el Cd. Si ste puede ser el caso de otros metales,
como el Cr, requiere una mayor comprobacin. Sin embargo , la sugerencia
2_
hecha por Shewry y Peterson (105) de que el CrO,H puede ser absorbido
por un mecanismo bi o multifsico de forma que el incremento en la con
centracin de Cr en el medio incrementara su absoercin , refuerza esta
interpretacin .
Una tercera posibilidad sera una interaccin P-Cr no en el
mecanismo de absorcin sin en la disponibilidad de P en el substrato.
A favor de esta hiptesis est la observacin hecha por Turner y Rust
en plantas de soia (Glicine max) (112) de que el contendo en P de pla
tas tratadas con Cr aumenta en experiencias en suelo pero no en cult
vo hidropnico lquido. En nuestro caso el cultivo fue realizado sobre
un substrato que presenta cierta capacidad de intercambio, lo cual le
da una cierta semejanza al suelo, por lo que podran haberse dado este
tipo de interacciones.

4.1.4.2

Se observa, en general, una disminucin en el contenido en K

en todas las partes estudiadas (Tabla 5, figura 5). Sin embargo, en la
raz de las plantas control el valor mnimo observado ms parece debido

1
1
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Efectos sobre el K

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-54-

a un error de medicin que a un verdadero valor de contenido interno.

Por lo que respecta a los incrementos registrados en el tallo y las hojas inferiores de lasplantas tratadas con 1 y 2,5 ppra Cr VI,
no es significativo. El rgano que presenta una tendencia ms clara es
la primera hoja trifoliada. Esta relacin se produce en el sentido de
una disminucin en el contenido en X respecto al suministro de Cr.
Dado que el Cr afecta de forma similar tanto a la raz como a la
parte area, no podemos concluir que haya sido afectada la translocacin,
aunque s parece haberlo sido la absorcin, lo cual se halla plenamente
de acuerdo con el trabajo realizado anteriormente (7, 39) y con los dja
tos reportados zaccheo et al acerca del efecto inhibitorio del Cr sobre
la absorcin de K en segmentos de raices demaiz (126,127).
La absorcin y translocacin del K parece estar ligada a una
ATPasa localizada en muchas clulas y que requiere Mg
, siendo activada por el K . jouany et al., en 1982, en estudios realizados en el a
ga Chlorella vulgaris pudieron demostrar que el Cr VI a 300 ug/ml red_u
ce en un plazo rpido de nicamente dos horas el contenido en ATP en un
25% y que la reduccin aumentaba con la concentracin de cromo en el me_
dio y el tiempo. Sin embargo, la disminucin en la concentracin en K
en las raices no parece directamente ligada a una falta de ATP necesario para su absorcin,por lo menos por lo que respecta a las concentra_
ciones bajas de Cf (2,5 ppm o menor) pues, como veremos ms adelante,
el contenido en Na en las raices se ve ms disminuido que el K a pesar
de que las plantas tratadas con Cr VI reciben ms Na en la solucin n_u
tritiva ya que se emple Na^CrO, como sal de cromo y el Na penetra en .
las raices mediante absorcin pasiva (a favor de gradiente) y, general^
ment, es bombeado activamente fuera de las raices, proceso que requie
re de ATP para ser realizado, puesto que realiza un trabajo en contra
de gradiente, de aqu que la falta d ATP resultara en un incremento
en la concentracin de Na. Esta evidencia indirecta acerca de que la n_

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hibicin de la absorcin de K no viene causada por un efecto inhibitorio del Cr sobre las bombas inicas viene apoyada por los resultados ej<
perimentales de Zaccheo et al(126).
Sera necesario un estudio ms profundo de los niveles de K
en diferentes compartimentos celulares para observar realmente los efec^
tos metablicos a que puede dar lugar esta disminucin en los niveles
del metal. As, la concentracin de K a elevados suministros de Cr VI
disminuye en las cluals guarda estomticas y podram darse un cierrre
de los estomas, lo cual, de hecho, fue observado en experiencias poste_
riores (Experiencias II y III), aunque en estos resultados podra jugar un papel importante un cierre hidroactivo por incremento en la con^
cetracin de cido abscsico, lo cual podra ser motivo de posteriores
estudios.
4.1.4.3

Efectos sobre el Na

El Na no sigue una relacin clara respecto al suministro de

cromo en ninguno de los rganos estudiados (tabla 6, figura 6), salvo
en el tallo (figura 6 B), en el que se observa una tendencia a bajar su
concentracin a medida que se incrementa el suministro de cr VI. En la
hoja inferior y en la primera hoja trifoliada tambin se presenta esta
tendencia aunque de forma menso definida. Estos resultados probablemej^
te indican que es afectada la translocacin, probablemente ms que la
absorcin.
4.1.A.A

Efectos sobre la relacin K/Na

La relacin K/Na en raices pone de manifiesto

traciones bajas de Cr en el medio el Na es ms afectado
bla 7 y figura 7 ^ , pesto que se observa un incremento
A concentraciones mayores de 2,5 ppm Cr VI en el medio,

que a concenque el K (taen la relacin.

esta relacin

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-56-

tiende a disminuir, indicando un mayor efecto sobre el K que sobre el

Na. Este comportamiento, comparado con los valores obtenidos para el
K y el Na indica que en la raz el elemento verdaderamente afectado es
el K, puesto que la relacin K/Na sigue la pauta de comportamiento del
K, lo que probablemente sea indicativo de un efecto del Cr sobre la absorcin del K.
Respecto a la parte area el efecto es totalmente contrario,
puesto que en el tallo (figura 7 _B la relacin K/Na se incrementa a nie_
dida que se incrementa el suministro de Cr VI, aunque en las hojas esta
relacin no es clara (figura 7 C_ y I)). probablemente este hecho sea indicadtivo de efectos sobre la translocacin de ambos metales, principal^
mente del Na, cuyos niveles tienden a disminuir en todos los rganos de
la parte area estudiados.
4.1.4.5

Efectos sobre el Ca

El comportamiento del Ca respecto al suministro de Cr es igual

en todos los rganos estudiados (tabla 8 y figura 8). En todos ellos se
produce un incremento el el contenido en Ca seguido de una disminucin
a suministros elevados, hecho indicativo de que la translocacin del Ca
no ha sido tan afectada como su absorcin.
Shewry y Peterson (105) han indicado que el Ca favorece la a_b_
sorcin, no tan solo de ortofosfato sin tambin de cromato. Tambin Tujr
ner y Rust (112) observaron en plantas de soja (Glicine max L.) una interaccin Cr-Ca. Al igual que ellos observaron en cultivo en suelo un
incrmento significativo en el contenido en Ca en las partes areas, en
nuestro caso, para las menores concentraciones de Cr VI suministradas
(menos de 2,5 ppm) hemos observado tambin un incremento en el conten^
do en Ca en todos los rganos estudiados salvo en la primera hoja trifoliada.

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-57-

Dada la interaccin Cr-Ca , una probable explicacin de la acu

sada disminucin del contenido en Ca para las concentraciones ms elevadas de Cr podra ser que el alcance de concentraciones suficientemente elevadas de cromo como para provocar una saturacin en la capacidad
de intercambio catinico en los vasos del xilema se hubiera realizado
y el Ca hallara imposible su fijacin para su posterior translocacin.
En el caso de la raz la no fijacin del Ca provocara una disminucin
en la concentracin de Ca observada.
Sabemos que no solo la capacidad de intercambio en los vasos
del xilema y en el apoplasto influye en la translocacin de Ca, sin
que una elevada tasa de transpiracin favorece de forma importante la
translocacin de este elemento (75).

El Cr tambin puede influir en la transpiracin, como de hecho observamos en experiencias posteriores (Experiencias II y III), de
forma que a mayor suministro de Cr se produce una menor tasa de transpiraciny, por lo tanto, una menor translocacin, conjuntada con los
fectos que el Cr pueda tener sobre el metabolismo, reduciendo la absor_
cin (Va activa o difusin facilitada) , no tan solo del Ca sin tambin
de otros elementos, obtenindose as una drstica reduccin en los conte_
nidos a medida que nos alejamos de la raz (el efecto ms patente se o_b_
serva en las hojas trifoliadas). Relacionado con ello, est el hecho de
que incrementos en la concentracin de Ca en la solucinutritiva dism
nuyen las diferencias de tolerancia al Al entre lneas puras de maz.
A. 1.4. 6

Efectos sobre el Ma

Al igual que en el caso del Ca existe una relacin inversa

entre el suministro de Cr y el contenido en Mg de las diferentes partes
estudiadas (tabla 9 y figura 9), obtenindose un efecto mayor en raices
y un efecto menor en la primera hoja trifoliada, en la que incluso se
incrementa el contenido en Mg, de forma significativa, para un suminis_

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-58-

tro de 1 ppm Cr VI.

El Mg es ms afectado en la raz que en la parte aerea, segn

se desprende de los datos obtenidos; a bajas concentraciones de Cr se
produce un marcado descenso en los niveles de Mg en la raz, mientras
que a medida que se incrementa la concentracin de Cr se produce una
cierta estabilizacin. De este hecho podemos deducir que es ms afecta^
da la absorcin que la translocacin, supuesto que viene apoyado por el
significativo incrmento en el contenido en Mg en la primera hoja trifoliada.
Aunque el hecho de ser menos afectada la parte area que la
raz podra ser debido a un efecto de concentracin debido a que el cre_
cimiento tambin es afectado, esta hiptesis no parece probable ya que
la raz tambin ve afectado su crecimiento y, sin embargo, no seproduce
concentracin del Mg en ella.
4.1.4.7

Efectos sobre la relacin Na/P

Aunque la raz no sigue una pauta muy definida, es posible '

observar una tendencia a la disminucin en la relacin Na/P que se observa claramente en el tallo (tabla 11 y figura 11), no observndose en
las hojas inferiores ninguna tendencia clara, pareciendo haber incluso
en la primera hoja trifoliada una cierta tendencia a incrementarse esta
relacin a medida que se incrementa la concentracin de Cr VI en el me_
dio, por lo que a partir de estos datos es difcil conocer cul de ambos elementos resulta ms afectado por el tratamiento con cromo en el
medio.
4.1.4.8

Efectos sobre la relacin K/P

Igualmente que en el caso del Na es posible observar que no

existe una clara tendencia en la relacin K/P~en raz ni primera hoja

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-59-

trifoliada, aunque en el tallo y las hojas inferiores se observa una cla_

ra tendencia a la disminucin en la relacin K/P (tabla 10 y figura 10).
El comportamiento en la raz y la primera hoja trifoliada es explicable
debido a los comportamientos antagnicos del P y el K, mientras que en
el tallo y las hojas inferiores el comportamiento tendente a la disminucin en esta relacin viene explicado por la disminucin en la concen^
tracin interna del K a medida que se incrementa el suministro de Cr VI,
mientras que la concentracin interna de P no sigue una pauta clara, lo '
cual podra indicar un mayor efecto del Cr sobre el K que sobre el P.
4.1.4.9

Efectos sobre la relacin Ca/P

Al igual que en el caso del K, los nicos datos que siguen ju

na tendencia clara son los pertenecientes al tallo y hojas inferiores
(tabla 12 y figura 12). En ellos existe una tendencia al incremento en
la relacin Ca/P seguida de una disminucin en esta relacin para los
suministros de Cr VI ms elevados empleados (10 ppm), lo cual indica que
el comportamiento viene determinado por el Ca ms que por el P, siendo
as probable que el Ca haya sido ms afectado que el P.
A.1.4.10 Efectos sobre la relacin Mg/P
Tanto en la raz como en el tallo y las hojas inferiores es posible o_b
servar una disminucin en la relacin Mg/P a medida que se incrementa
el suministro de Cr VI (tabla 13 y figura 13). En la raz es posible o_b_
servar un incremento no significativo en la relacin Mg/P para un sun
nistro de cromo de 10 ppm, aunque probablemente sea debido a la conjugacin de mltiples efectos del cromo sobre las plantas tratadas con ele_
vadas concentraciones de cromo, al igual que hemos discutido ya para jo
tros elementos (entre ellos el P, en el apartado 4.1.4.1) y que se repetir en sucesivos nutrientes.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-60-

Al igual que hemos observado en nutrientes ya comentados ante_

riormente y como tambin observaremos al comentar los nutrientes sucesivos, la primera hoja trifoliada presenta un comportamientos diferente
respecto al del resto de las partes estudiadas, probablemente debido a
que dichas hojas estn ms afectadas que el resto de la planta puesto
que se hallan expuestas al Cr desde el inicio de su formacin, lo cual
posibilita que el Cr ejerza sus efectos tanto a nivel replicativo como
a nivel metatlico.
De los datos obtenidos es posible llegar a la conclusin de
que el Mg es ms afectado que el P por el Cr, puesto que la relacin
Mg/P, al disminuir claramente, indica un menor contenido en Mg que en
P a medida que se incrementa el suministro de Cr VI.
4.1.4.11 Efectos sobre el Fe
Se observa una disminucin en el contenido en Fe en la raz
hasta un suministro de Cr de 2,5 ppm (el bajo valor del control parece
debido a un error ms que a un valor real) (tabla 14 y figura 14). A
5 ppm Cr VI se produce un incremento no significativo en el nivel de Fe
respecto al nivel de 2,5 ppm Cr VI, siendo para un suministro de 10 ppm
Cr VI este incremento significativo respecto al valor mximo alcanzado
por el suministro de 2,5 ppm Cr VI, aunque todos estos valores son si
nificativamente inferiores a los observados para un suministro de 1 ppm
Cr VI.
Tanto en el tallo como en las hojas inferiores se observa el
"mismo comportamiento que en la raz, es deci, una disminucin en el con_
tenido en Fe hasta un suministro de Cr VI de 2,5 ppm seguido de un incremento en los niveles de Fe para los mayores suministros de Cr VI que,
sin embargo,mantienen sus niveles de Fe significativamente inferiores
a los de las plantas no tratadas con cromo.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-61-

En la primera hoja trifoliada esta disminucin es progresiva

a medida que se incrementa el suministro de Cr VI.
Nuestros resultados concuerdan parcialmente con los obtenidos
por otros autores. As, Turner y Rust (112) observan, al igual que nosotros, una disminucin en la concentracin de Fe en raices y partes a_
reas en plantas de soja (G. max) tratadas con Cr en cultivo hidropnico,
mientras que en cultivo en suelo no se observan diferencias significat^
vas en las concentraciones de Fe. Por el contrario, Misra y Jaiswal (81)
observan en espinaca (Spinacea olercea) una correlacin positiva signi^
ficativa entre la concentracin de cromo en las raices y tallos + pecio_
los respecto a su concentracin en Fe. Cary et al. (18) encontraron que
la ausencia de Fe en la solucin nutritiva inhiba fuertemente la absqr_
cin de Cr, y estos autores, despus de un estudio con diferentes espe_
cies alimenticias, consideran que plantas que son capaces de translocar
grandes cantidades de Fe tambin son capaces de translocar bien el Cr.
Otros metales, as el Mn, tambin son capaces de provocar una deficiejn
cia de Fe.
En nuestro caso, la translocacin del Fe no ha sido claramen^
te inhibida por el cromo; sin e,bargo, la drstica reduccin en el co
tenido en Fe en la primera hoja trifoliada junto con el incremento en
P en lamsma est de acuerdo con la clorosis observada y con la observai
cin hecha por Austenfeld de que aunque se acumula ms Cr en las hojas
inferiores, es ms afectada la fotosntesis en las hojas superiores (3).
Diversos autores han observado que tejidos clorticos presentan, en general, unincremento en la relacin P/Fe respecto a los no clo_
rticos (15,22,57). La concentracin de Fe es de poca utilidad por s
misma en los estudios sobre clorosis y los niveles de Fe en tejidos co
rticos incluso pueden ser superiores a los de tejidos no clorticos
(76), lo cual es indicativo de una inactivacin del Fe. Dekock et al.
sostienen el punto de vista de que la relacin P/Fe es una medida de la
relacin Fe3+ /Fe2+ en la clula (22). Una relacin P/Fe elevada indica_

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-62-

ra una derivacin hacia Fe III, que podra unirse a fosfoprotenas y

ser inactivado biolgicamente.
En nustro estudio hemos observado que la relacin P/Fe se in_
crementa con el suministro de Cr (tabla 15 y figura 15).en raices y, es_
pecialmente tallo, por lo que podemos suponer que en estos rganos hay
menos Fe biolgicamente activo. No se produce, sin embargo, incremento
en esta relacin en hojas inferiores ni en la primera hoja trifoliada,
%
an cuando disminuye el contenido en Fe. En las hojas inferiores la dis_
minucin es menor que en las hojas trifoliadas, lo cual podra dar lugar a la no aparicin de clorosis en las hojas inferiores, mientras que
en la primera hoja trifoliada la no inactivacin del Fe no podra suplir
la drstica disminucin en el contenido en Fe que, conjuntamente con
tros efectos del cromo sobre el metabolismo, dara lugar a la aparicin
de la observada clorosis.
4.1.4.12 Efectos sobre el Mn
En raz se observan diferencias significativas en el conten^
do en Mn a lo largo del tratamiento. Existe una tendencia a aumentar el
contenido en Mn hasta un suministro de Cr VI de 2,5 a 5 ppm. mientras
que a 10 ppm se produce una disminucin no significativa (tabla 16 y fi^
gura 16).
En la parte area el comportamiento es complejo y similar en
los tres rganos estudiados, teniendo que recurrirse a un polinomio de
tercer grado para hallar un buen ajuste entre el contenido en Mn y el
suministro de cromo. En estos rganos pueden distinguirse tres partes:
- Incremento en el contenido en Mn hasta un suministro de Cr
de 1 ppm.
- Disminucin en el contenido en Mn hasta un suministro de Cr
5 ppm.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-63-

- Nuevo incremento para un suministro de 10 ppm.

La primera zona es explicable por un comportamiento anmalo
que ocurre a bajas concentraciones de Cr y que no tan solo potencia los
niveles de algunos nutrientes sin que, como veremos ms adelante, incluso puede llegar amodificar el crecimiento y las relaciones hdricas,
as como la transpiracin, logrndose de esta forma una serie de efectos ligados que provocan que las plantas tratadas con bajas concentra^
ciones de cromo presenten un comportamiento anmalo respecto a la tn
ca general del resto de tratamientos.
La segunda zona es explicable como una inhibicin de la tran
locacin, puesto que, a peasr de que existe un incrmento en los niveles
de Mn en la raz, se produce una disminucin en los niveles de Mn en to_
da la parte area.
Finalmente, la tercera zona se explicara como un mayor efe_c_
to sobre el crecimiento que sobre el contenido en Mn que provocara una
concentracin pasiva de dicho elemento.
j.. 1.4.13. Efectos sobre la relacin Fe/Mn
Nuestros datos se hallan parcialmente de acuerdo con los de
Misra y Jaiswal (81), quienes encontraron que en Spinacea olercea xis_
ta una correlacin lineal positiva entre el nivel interno de Cr y la
relacin Fe/Mn, tanto en raices como en parte area. En nuestro caso \
nicamente se ha producido un incremento en esta relacin para los ms
elevados suministros de Cr VI. Sin embarg, hay que sealar que el Al
provoca un incrmento en esta relacin, por lo que no se puede hablar de
efectos generales de los metales pesados sobre la misma (31,32).
De los datos obtenidos (tabla 17 y figura 17) podemos deducir
que el Cr, a bajas concentraciones, afecta de forma directa y negativa
la relacin entre ambos elementos, comportndose, al igual que en el trji

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-64-

bajo realizado anteriormente (7,39), de forma opuesta a como se compo

ta S. olercea segn Misra y Jaiswal. A concentraciones elevadas de Cr
deben existir factores que provocan el incremento en esta relacin.
Nuevamente el comportamiento diferencial en la primera hoja
trifoliada respecto al resto derganos indica un diferente efecto sobre
la misma, probablemente, como ya ha sido comentado, debido a las diferentes condiciones de exposicin al Cr.
4.1.4.14 Efectos sobre el Zn
No se observa una tendencia clara en el contenido en Zn en la
raz, si exceptuamos el elevado valor que dicho contenido alcanza para
un suminisro de 1 ppm Cr VI (tabla 18 y figura 18), que podra hacer pen_
sar en un error en la medicin del control pero que se repite en el ta_
lio y, no tan acusadamente en las hojas inferiores.
Tanto en el tallo como en las hojas inferiores se produce una
tendencia al incremento en el contenido en Zn para el mayor suministro
de Cr VI empleado, lo cual probablemente sea debido a un mayor efecto
sobre el nutriente en cuestin. La primera hoja trifoliada presenta un
comportamiento diferencial respecto al resto derganos estudiados, reso_l
vindose en un descenso en el contenido en Zn a medida que se incrementa el suministro de Cr VI, lo cual es indicativo de que ha sido ms afec_
tada que el resto de rganos.
De los dadtos obtenidos no podemos concluir que haya sido ms
afectada la translocacin del Zn de la raz hacia la parte area, pues
el comportamiento de ambas partes es muy parecido, aunque probablemente
s haya sido ms afectada la translocacin hacia la primera hoja trifo_
liada.
El incremento en el contenido en Zn para el tratamiento con
1 ppm Cr VI en el medio es difcil de explicar, pero podra deberse a

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-65-

los efectos estimulantes del Cr a bajas concentraciones ya observado por

otros autores (11,40).
4.1.4.15 Efectos sobre el Cu
Se presenta una elevada dispersin de los datos al estudiar
la raz, el tallo y la primera hoja trifoliada, no siendo asi para las
hojas inferiores (tabla 19 y figura 19). En todos los casos los conten^ .
dos en Cu son similares en raz y parte area, lo cual, juntamente con
el hecho de que las hojas inferiores presenten un comoprtaminto difere
cial, podra indicar unos efectos tanto sobre la absorcin como sobre
la translocacin (aunque exista una clara tendencia a disminuir el cojn
tenido en la raz y tallo, se produce un incremento clar y significat^
vo en los niveles de Cu en las hojas inferiores).
El incrmento en hojas inferiores podra ser debido a un efe_c
to estimulante del Cu por el Cr, an difcil de discutir debido a la
escasa informacin acerca de los mecanismos de translocacin del Cu.
A.1.4.16 Efectos sobre el Mo
En todos los rganos estudiados se produce una clara tendencia a la disminucin de los niveles de Mo, principlamente en la raz
(tabla 20 y figura 20). Este claro efecto sobre el Mo en la raz va
siendo diluido a medida que nos alejamos de ella, lo cual probablemente sea debido a un mayor efecto sobre la absorcin que sobre la translocacin. .
Hemos de resaltar que se produce un incremento significativo
en los niveles de Mo en lasplantas tratadas con 1 ppm Cr VI en el medio
en el tallo, lo cual probablemente sea debido a los efectos estimulantes del Gr, que, sin embargo, no se han traducido en efectos visuales
ni de crecimiento patentes en esta experiencia, aunque s en una experiencia posterior (experiencia III).

2,748a

R.ri.

2 ,5
0,956
1,445
1,838

5
1,115
0,963
1,166

10

0,442

n.i3

0.332 0.23fi

0.142

0.741

n.inn

1,052a

0,853cd 0,712d

0,929

3,018a 2,573a 1,638b

0
0,914
1,131
1,081

2 ,5

2,798 1,830
2,728 1,372
2,192 1,714

1
0,554
0,778
0,806

2,916
2,957
3,180

0,085

0,668c

2 ,5

0,070
0,097
0,105

n .T3Q n

?6Q

n fil R

0,722b 0,401 be 0,090e

0,866 0,712
0,590 o,138
0,7086 0,677

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,194

0,281

0,584
1,047

0,105

1,395b
0,246

0,758
1,386

1 ,770a

0,590
0,657

1,646
1, 155

l ,967
l ,762
1 ,578

2,,5

TALLO

2,057a

1,740
2,160
2,272

10

HOJAS INFERIORES

0,550 0,354

2,621a 2,225ab l,413bc 1,081e

2,844 2,457
3,026 1,818
1,994 2,392

.s.d. 0,189

2,578
2,951
2,716

RAZ

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

Siferentes tratamientos

10

0,119

0,706c

0,759
0,788

0,570

10

Tabla 1; Peso fresco, expresado en g de las distintas partes de las plantas sometidas a los

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-67-

-. FIGURA 1 .Peso fresco en la experiencia I

2.5

8.5

ie

A_: RAZ
y 2,7065 e-'0998x
r= -0,88

: TALLO
y- 1,8107 e'0'1152
r= -0,85

8.3

0.5

C: HOJAS INFERIORES
y- 2,6072 e'0'1512 x
r= -0,90

1): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y- 1.116 e'0'4998 x
r^ -0,94

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio

ie

0,117

0,148

0,251a

0.001

s.rl.

0,251

0,252

0,250

0,072

0,169
o,137
0,207

O.D71

0,126b

o.osi

0,229abO,175b

O.OS4

0.021

0,105e

0,177

0,122

0,112

0,082

10

o,189

0,167

0,255

0,074

0,128

2,5

0,012

0,185
0,265 0,151

0,042

HOJAS INFERIORES

0,040 0,171

2,5

0,093abO ,053bc 0,015c

n n?i n .nn n m s

0,128a
n.nnq

0,017

0,016

0,011

0,088

0,092

0,057
0,075 0,012
0,117

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,031

0,013

0,092c

0,158adO ,147b

0,021

0,107

0,154

0,124

0,086

0,164 0,124

5
0,082

2,5

0,186 0,163

TALLO

0,138

0,120

0,127

0,023

0,164a

0,176

0,180

0,084

0,108

0,137

0,093

10

0,145ab 0,098b

0,116

O.16

2,5

0,162a 0,171a

0,193

0,181

0,164a

0,176

0,162

s.d. 0,016

RAZ

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

diferentes tratamientos

10

0,020

0,101e

0.114

0,110

0,078

10

Tabla 2; Peso seco, expresado en g, de las distintas partes de las plantas sometidas a los

CO

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-69-

-, FIGURA 2 .Peso seco en la experiencia I

8.2

8.15
8.15

8.85

a.as

le

A.: RAZ
y. 0,1696 e-0,0613 *
r= -0,71

B.: TALLO
y- 0,15714 e -'05653
r= -0,72

8.25

8.2

8.85

8.1

8.05

C: HOJAS INFERIORES
y- 0,23032 e"0'0909 x
r= -0,81

18

I): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

, on: e-0,4454
x
y= 1,3116
'
r= -0,88

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppra)

18

19,80
20,10

1,26
2,16

1,71a

517c
3,54

33,33
30,25

2,5

9,73

19,95b 31,79c

0,22

861d
72,61

850

873

1,38

62,15d

61,17
63,13

5_

HOJAS INFERIORES

264b
1,41

3,45a

515

265

s.d. 0,64

x
s.d.

520

263

3,45

2.5

RAZ

24,09

141, 20d

124,2
158,2

10

2,23a

1190e
14,14

2,17

4,74a

3,21
6,28

1,37

1,26

3,20

1180

1200

10

1,24

13,25c

14,12

12,17

2,5

TALLO

0,53

29,07d

29,44

28,69

19, .20
'

10,20
11,08

19,20d

5
2,5

9,13bc 10,64c
0,62
3,29

6,81
11,46

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

9,57b
0,37

9,31
9,83

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

tes partes de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

45,96e
3,74

42,31
48,61

10

Tabla 3; Concentracin de Cr respecto a la materia seca, expresada en mg/Kg, en las diferen-

o
I

I
I
I
I
I
I
I

-71-

-. FIGURA 3 .-r
Contenido en cromo

1288

248

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

18

18

A_: RAZ

J3: TALLO
5065

y= 335,59 x '
r= 0,997

128

C: HOJAS INFERIORES
y= 0,787 + 13,668 x
r= 0,984

y= 4,014 + 4,298 x
r= 0,986

15

]): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 5,175 + 2,668 x
r* 0,924

Ordenadas: Contenido en cromo (mg/Kg)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

x
0,36a
s.d. o.ll

0
0,27
o,44

0,55
0,59

2,5

2,5
0,77
1,50

0,35a l,14b
0,10 0,52

1
0,28
0,42

0,29
0,13

0,62
0,37

0,26a 0,77b
0,05
0,10

0,22
0,30

5
10
0,71
0,83

0,49bc 0,21b
0,18 0,12

10

HOJAS INFERIORES

0,28b 0,57c
0,14 0,02

0,18
0,38

0,24

x
0,24a
s.d.

RAZ

0,43ab
0,06

0,39
0,47

0,53ab
0,48

0,19
0,89

0,24a
0,01

0,30b
0,001

0,65b
0,12

0,53
0,84

0,15

0,1 5ab 0,15b

0,10

0,22
0,009

2,5

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,25a
0,001

0,23
0,25

0,30
0,29

0,24
0,25

2,5

TALLO
1

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

10

0,66c
0,16

0,55
0,78

10

Tabla 4; Contenido en P, expresado en % respecto a la materia seca, en las diferentes partes

de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-73-

-.:. FIGURA 4 .Contenido en fsforo

e.e
8.8

8.5
8.4
e. 3

e.2
e.i

A: RAZ

ie

B: TALLO

e.75
e.e
e. 45
e. s

8.3

C: HOJAS INFERIORES

la

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Contenido en fsforo (%)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

18

0,14

0,13

2,96c

3,27b
0,12

2,88

3,37

2,81

0,15

3,05

3,17

2,85

2,83a

2,5

0,04

2,10d

2,13

2,07

HOJAS INFERIORES

0,23

2,32c

2,74b

2,60b

1,75a

2,49

2,64

2,69

s,d, 0,03

s,d,

2,16

2,83

2,51

1,75
_

1
2,5

RAZ

0,35

2,33d

2,57

2,08

10

0,29

2,17a

1,96

2,37

10

0,12

3,94a

4,02

3,86

2,11

4,06a

5,55

2,65

1,03

3,35a

4,08

2,62

2,5

TALLO

0,11

l,60b

1,68

1,52

0,12

3,57b

3,50

3,68

0,02

2,87c

2,90

2,86

2,5

2,74c

2,74

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,02

3,12a

3,10

3,14

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

0,10

l,50b

1,57

1,43

10

Tabla 5: Contenido en K, expresado en % respecto a la materia seca, en las diferentes partes

I
-~4
.C

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-75-

-. FIGURA 5 .Contenido en potasio

2.7

.5

2.3
2.3

3.5

2.1
2.5
1.3
1.7

ie

1.5

A: RAIZ

le

IB

B: TALLO

3.5

3.2

2.9

2.6

2.3

2.5

C: HOJAS INFERIORES

j): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Contenido en potasio (%)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,86

0,44

0,39

0,08

l,02b

0,97

0,23

1,15a

0,99

1,32

0,25

0,46a

0,28

0,63

2,5

0,11

0,46a

0,38

0,53

HOJAS INFERIORES

0,59a

0,32

0,40

0,06

1,13a

1 ,1i71

0,42a

2,5

1,09 1,08

1,10a

s.d. 0,02

s.d.

- x

1,10

RAZ

o,30ab
0,11

0,37a
0,02

0,22

0,38

0,14b
0,03

0,14

1,15a

1,05

1,25

2,5

TALLO

0.03

0,12c

0,14

0,10

0,07

O.llbc

0,28

0,063

2,5

0,18c

0,18

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,03

0,67b

0,69

0,65

0,38

0,36

0,18

0,96a

1,09

0,83

0,16

0,12

10

0,14

1,05a

0,95

1,15

10

Contenido en cromo en el medio (ppm)

de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

0,02

0,07d

0,06

0,08

10

Tabla 6; Contenido en Na, expresado en % respecto a la materia seca, en las diferentes partes

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-77-

-. FIGURA 6 .Contenido en sodio

i
1.25

a.e
8.6

8.4

i.es
8.2

8.35

A: RAIZ

B: TALLO

e. 3

e.?
e.s
e. 3

8.1

C: HOJAS INFERIORES

te

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Contenido en sodio (%)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

18

0,45

s.d.

4,33

6,96a

3,90

6,41

6,73a

10,02

0,01

0,08

2,67c

0,62

5,09

6,65a

10,25

3,05

2,5

1,19

4,74a

5,58

3,90

1,14

17,20b

16 ,29

18 ,00

10

0 ,01

0,19

10,60a

10,46

10,73

1,36

A, 15a

5,11

3,18

2 ,07
2 ,06

10

2,086bd2 ,07d

HOJAS INFERIORES

2,31b

2,52

2,73

2,30

5
1,64

2,5

RAZ

1,84

18,02

42,01

4,21

16,96

12,64ab 30,02c

15,62

9,66

2,5

9,70b

9,70

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

1,27

13,30c

3,00b

2,31b
0,01

12,0

14,6

3,90

2,10

2,5

TALLO

2,30

2,31

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

2,31 2,61

7,05

1,61a

s.d.

1,61

tamientos

10

5,91

21,33d

25,51

17,15

10

Tabla 7; Relacin K/Na en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

i
--4
0
0
1

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-79-

-. FIGURA 7 .Relacin K/Na

2.7S

22

2.5

2.25

12

1.75

l.S

A: RAZ

1 "

B: TALLO

13

ie

C: HOJAS INFERIORES

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin K/Na

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,03

s.d.

0,84

0,36

0,50

0,30

0,83b

0,62

1,04

0,67

1,02

2,5

0,26

0,09

10

0,13

0,32a

0,23

0,41

10

0,23

0,69bc 0,09d

0,53

0,85

HOJAS INFERIORES

0,20

l,23b

l,12b 0,84c

1,56

0,40

0,38a

0,08

0,38a

0,43

0,37a

1,37

0,32

0,37

s.d.

1,10

2,5

RAZ

0,19

0,32a

0,19

0,45

0,17

0,42a

0,54

0,30

0,11

0,10

0,47a

0,54

0,47
0,55a

0,40

0,62

2,5

TALLO

0,09

0,39a

0,53ab

0,17

0,46

0,33

2,5

0,40

0,65

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,14

0,52ab

0,62

0,42

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

0,02

0,04b

0,02

0,05

10

00
O
I

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-81-

-. FIGURA 8 .Contenido en calcio

l.S

e. es

B.SS
e.9
e.e
8.3S

8.3

8.25

18

.A: RAZ

ie

JJ: TALLO

y. 0,337 + 0,2826 x - 0,0288 x

r'= 0,559

y= 0,4412 + 0,06113 x - 0,01018 x 2

r a = 0,820

8.55

e. 8

8.Z5

-1

18

C: HOJAS INFERIORES
y= 0,6717 + 0,1271 x -0,0193 x:
r 2 = 0,516

I): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 0,353 + 0,1444 x - 0,0437 x:
r'= 0,661

Ordenadas: Contenido en calcio (%)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,001

0,01

0,03

s.d.

0,002

0,01

0,02

0,15d

0,001

0,17

0,14

10

0,08

0,16

0,16d

0,25

0,16

0,24

0,25c

0,22

0,36

2,5

HOJAS INFERIORES

0,22b

0,22

0,31

0,34a

0,00

0,03

0,09e

0,10d

0,13c

0,22b

1,18a

s.d.

0,10

0,13

0,22

0,09

0,11

0,14

1,18

0,22

10

2,5

RAZ

0,004

0,19a

0,19

0,19

0,03

0,18ab

0,16

0,21

0,03

0,17b

0,19

0,15

2,5

TALLO

0,00

0,09c

0,09

0,09

0,01.

0,25b

0,25

0,24

0,01

0,19a

0,19

0,18

2,5

0,14c

0,14

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,01

0,20a

0,21

0,20

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

de las plantas sometidas a los distintos tratamientos

.,

10

0,001

0,09c

0,08

0,09

10

Tabla 9; Contenido en Mg, expresado en % respecto a la materia seca, en las diferentes partes

I
00

i
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-83-

-. FIGURA 9 .Contenido en magnesio

8. 75

e.is

8.5

e.)

e.25

e. es

A.: RAZ
-0,1546 x
y= 0,3068 e

: TALLO

r= -0,706

r= -0,926

-0,1098 x
y 0,1961 e

e. 25

8.1

e.2

8.85

i e-is
e.e

r-

C: HOJAS INFERIORES
y- 0,2846 e'0'0747 x
r= -0,867

18

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y- 0,2118 e'0'0698 x
r= -0,749

Ordenadas: Contenido en magnesio (%)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

9 79

8,08

6,43

o A

11,41

10,28

9 T.S.

9,75a

8,36a

0,43

5,31

2,33

1 AA

2,93b

1,91

3,94

2,5

3,02b

n no

i sfi

3,08

2,95

8,29a

7,19

9,39

5
10

ll,93b

15,68

8,17

10

5,13c

6,77

3,48

HOJAS INFERIORES

4,58

10,38b 4,81c

4,50

7,14

7,33ab

5,11

13,62

7,33

s.d.

2,5

1
5

9,19a
n Ql

8,54

9,83

4,58

5,54

0,43

4,81b

4,50

5,11

2,5

TALLO

2,33

5,13b

6,77

3,48

5,55b
i QE;

4,17

6,93

24,47c
i s Q9

35,71

13,20

2,5

18,14c

18,14

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

10,38a

10,31a

7,14

13,62

14,22
6,39

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

RAZ

tamientos

10

5,31

11,93a

15,68

8,17

10

Tabla 10; Relacin K/P en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

I
co
ti

-85-

-. FIGURA 10 .Relacin K/P

15

A RAZ

B: TALLO

C HOJAS INFERIORES

se

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin K/P

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

ie

1,34

2,07

1,46

1,00

0,81

0,82

2.5

1,71a 0,82b
0,52 0,01

1 ,85a
0 ,79

0,18c
0,03

0,16
0,20

2 ,41
1 ,29

10

5,78a
2,60

0,87a
0,07

0,92
0,82

0,01

2,28

t
3,90a
0,43

3,59

4,20

2,5

TALLO

0,08

0,51c

0,45
0,56

0,31
1,98

2,5

0,50b", 1,1 5ab

0,32
1,18

0,72
0,27

l,21c

1,21

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

2,72b

2,86ab

2,72
2,72

4,47
1,25

3,94
7,62

2 ,12
2 ,69
2 ,41c
0 ,40

10

HOJAS INFERIORES

4,50a 2,32b
1,98 0,52

4,53a

1,95
1,65

5,90
3,10

A, 53

x
1,23a
s.d. 0,33

x
s.d.

2,5

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

RAZ

tamientos

10

0,05

0,1 2d

0,15
0,08

10

Tabla 11; Relacin Na/P en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

I
00

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-87-

-. FIGURA 11 .
Relacin Na/P

S.5

2.5

A: RAIZ

J.5

le

B: TALLO

1.2

e.e
8.5

C: HOJAS INFERIORES

8.4

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin Na/P

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,43

s,d.

2,02

0,82

2,53

0,39

0,01

1,47

0,62

1,80

0,44

2,84b

3,88

1,32

0,88a

2,5

HOJAS INFERIORES

3,81b

5,60

1,43

1,13a

0,42

l,45bc 2,07d

l,69c

1,69

2,34

1,15

l,53ab

s.d.

1,68

1,97

1,53

1,75

RAZ

0,08

0,06c

0,00

0,12

0,33

l,85b

1,62

2,08

2,5

TALLO

0,31

l,95b

2,17

1,73

0,85a
0,52

0,74

0,48

1,22

2,92

3,60b

O.OOc

0,000

1,53
5,66

5
2,5

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,93a

0,40

1,45

0,69

0,28

10

2,09b

1,11a

l,60ac
0,50

2,44

1,73

0,62

1,59

1,80

1,40

10

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

2,5

tamientos

10

0,05

0,07c

0,03

0,10

10

Tabla 12; Relacin Ca/P en las diferentes partes de las plantas sometidas, a los distintos tra-

00
00

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-89-

-. FIGURA 12 .Relacin Ca/P

2.5

2.2

1.3

l.S

1.3

e.s
4

A: RAIZ

18

ie

B: TALLO

3.fi
2.4

2.4

1.2

1.2

C: HOJAS INFERIORES

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin Ca/P

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,22c
0,06

0,01

0,22

s.d.

0,61

0,82

0,17

0,29

2,5

0,18

0,08

0,74ab 0,23c

0,86

1,13

0,98ab

0,20d

0,01

0,13

0,20

0,19

10

0,24

0,49d

0,66

0,32

10

0,63b

0,53

0,72

HOJAS INFERIORES

0,78

l,13b

0,24c

4,88a

s.d.

0,26

0,23

0,57

_^3

0,17

0,25

1,68

4,88

2,5

RAZ

0,36

0,38d
0,02

0,65

0,57c
0,11

0,15

0,06

1,10

l,6lb

2,38

0,24

0,35a

0,83

2.5

0,45

0,45a

0,40

0,49

0,39

0,49

2,5

TALLO

0,91c

0,91

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,00

0,81b

0,64a
0,65

0,81

0,81

1,10
0,18

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

tamientos

10

0,03

0,11

0,09

0,13

10

Tabla 13; Relacin Mg/P en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-91-

-. FIGURA 13 .Relacin Mg/P

ie

A: RAZ

B: TALLO

&.S

j.s

e.?
0.5

e.s

C: HOJAS INFERIORES

6.5

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin Mg/P

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

x
s.d.

x
s.d.

2,5

2,5

130,1 109,5
129,7 110,7

106,22
144,14

64,8
114,9

113,0c 148,7ab
8,14 28,8

107,2 128,3
118,8 169,1

5
10

89,8ac63,41ac
35,4
8,54

10

HOJAS INFERIORES

229,9b 74,96c
21,25 5,84

214,9 70,8
244,9 79,1

154,7a 130,Ob 110,lc

5,83
0,28 6,81

150,9
158,5

113,4a

113,4

RAZ

115,8
141,5
128,6b
18,2

183,8a
42,1

1
154,0
213,6

44, 5c
9,75

45,0
43,9

2,5

TALLO

96,6c
0,42

96,9
96,3

2,5

57,4
69,4

10

164,6d

164,6

__

10

49, 5c 63,4bc
6,54
8,54

44,8
54,1

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

68, Ib
6,18

63,7
72,4

77,7
89,3
83,0a
7,45

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

Tabla 14; Contenido en Fe, expresado en mg/KG/de materia seca, en las diferentes partes de las
plantas sometidas a los distintos tratamientos

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-93-

-. FIGURA IS .Contenido en hierro

248

285
J 78

68
se

180

65

IB

A: RAIZ

18

: TALLO
y= 79,820 - 13,316 x + 1,183 x 2
r 2 = 0,7608

135

178
145

128

35

18

C_: HOJAS INFERIORES

y= 148,46 - 15,535 x + 1,3796 x 2

I): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

r3=

r= -0,965

0,819

n/ er -0,2467 x
y= 174,56 e

Ordenadas: Contenido en hierro (mg/Kg)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

;e

0,36bc 0,76ab
0,37

1,31c
0,13

0,13

s.d.

0,31

0,36

0,11

0,39a

0,47

0,54

0,45a

5
0,49
0,40

0,45a
0,06

2,5
0,14
0,07

0,12b
0,05

HOJAS INFERIORES

0,37

0,91b

0,47a

s.d.

0,62

1,40

0,65

0,01

0,19c

0,20

0,18

10

0,55

1,15

0,37

0,10

0,47

1,22

10

1,17

RAZ

0,29

0,26

0,04

0,42a

0,45

0,39

0,23

0,00

0,15b

0,15

0,15

2,5

TALLO

0,02

0,21c

0,22

0,19

0,04

0,20b

0,17

0,22

0,53

0,83ab

1 , 20

0,45

2,5

0,34c

0,34

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,02

0,26abcd 0,28a

0,10

0,42

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

2,5

tamientos

__
.

10

0,00

O.lOd

0,10
0,10

10

Tabla 15: Relacin Fe/P en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-95*

-. FIGURA 15 .Relacin Fe/P

8.3

8.2

ie

A: RAZ

B: TALLO

8.6
8.5

e. 4
8.72

8.3
.8.48

8.2
B. 24

8.1

C HOJAS INFERIORES

j): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin Fe/P

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

18

x
s.d.

x
s.d.

124,6a
7,2

119,5
129,7

138,1a

138,1

2,5

184,3b 125,1a
0,71
4,83

183 ,8 128,6
184 ,8 121,1

1
65,9
84,5

10

64,02c 75,21c
2,15 13,17

63,5
62,5

HOJAS INFERIORES

150,9abl91,02b
30,18 39,14

218,7
163,3

10

150 ,3b 165, 9b

4 ,84 18,9

5
129,6
172,3

2,5

146 ,8 152,6
153 ,7 179,2

RAZ

35,7a
2,77

117,8b 84,3c
5,6
3,43

95,17a
7,54

86,7
81,9

2,5

115,8
107,8

1
89,9
100,5

40, 3b
1,55

34,9a
4,13

33,7
37,7

2,5

TALLO

218,7
163,3

10

54,9d

54,9

10

17,98c 191, 02d

0,06
39,14

17,9
18,0

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

39,2
41,4

32,0
37,8

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

Tabla 16; Contenido en Mn, expresado en mg/Kg de materia seca, en las diferentes partes de las
plantas sometidas a los distintos tratamientos

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-97-

-. FIGURA 16 .Contenido en manganeso

isa

35

178
23
1S8

ie

A_: RAZ

le

B.: TALLO

y= 140,89 + 9,769 x - 0,4802 x

y= 35,23 + 7,68 x - 3,585 x 2 + 0,27 x 3

r'= 0,559

r'= 0,960

188

118.

158

35

68

A.
18

Ci HOJAS INFERIORES

18

y= 135,72 + 38,74 x - 17,20 x + 1,27 x

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 95,17 + 38,41 x - 24,9 x 2 + 3,12

r'= 0,856

r'= 0,958

Ordenadas: Contenido en manganeso (mg/Kg)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

0,03

s.d.

0,70

1,22

0,01

10
0,49
0,88
0,69d
0,28

0,50
0,67
0,59d
0,12

0,46
0,44

0,01

0,45c

2,5

RAZ

1,92a
0,29

1,95
2,00

l,98e
0,04

1,63
1,90

l,77d
0,19

0,85
0,90

0,88c
0,04

2,12

1,71

10

2,5

0,07

2,38a

2,33

2,43

0,11

0,35

2,75d

3,00

.1,17
l,25c

2,50

1,33

2,5

TALLO

0,22

l,16b

1,31

1,00

0,04

l,15b

1,18

1,12

2,5

0,93c

0,93

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,08

l,69b

1,75

1,63

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

0,71b

0,71

1,26

1,24a

0,09

l,53b

1,59

0,82a

1,46

0,82

s.d.

tamientos

10

0,08

2,95d

3,00

2,89

10

Tabla 17; Relacin Fe/Mn en las diferentes partes de las plantas sometidas a los distintos tra-

00
i

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-99-

-. FIGURA 17 .Relacin Fe/Mn

i.e
1.4
1.2

2.2

1
l.S

e.8
1.4

e.e

e. 4

ie

ie

A: RAZ

B: TALLO

1.4

l.S

8.8

e. s

C: HOJAS INFERIORES

~i
4

1
6

'r
e

2: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Relacin Fe/Mn

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

1
ie

0,35

43,45

35,30

s.d.

38,46

34,80
32,46

35,71

2,5

3,53

2,30

40,96b 34,08c

35,05a

8,23

15,88

49,36

39,19

10

5,37

18,15

7,19

47,79ab44,28b

35,00

34,95

HOJAS INFERIORES

21,08

268, Ob 69,57a

46,96

39,37

10

57,96a 43,16c

81,36

75,39

222,9

5
54,36

2,5

193,1 63,75

68,05a

s.d.

68,05

RAZ

0,24

34,67a

34,84

34,39

2,5

TALLO

15,88

57,96c

81,36

54,36

6,24

9,15

61,32

84,17

65,73b

70,14

71,23

77,70a

0,15

48,07c

48,17

47,96

2,5

36,40d

36,40

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

1,66

1,30

43,08b

44,25

36,58

35,7a

41,90

34,75

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

5,37

43,16b

46,96

39,37

10

Tabla 18; Contenido en Zn, expresado en mg/Kg de materia seca, en las diferentes partes de las

o
o
i

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-101-

-. FIGURA 18 .Contenido en zinc

285

163
33

125
36

es

33

ie

A: RAIZ

B: TALLO

12

38

45

C: HOJAS INFERIORES
1

y= 36,58 + 1,46 x - 0,70 x + 0,064 x

r'= 0,708

: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 75,86 e"0'158 x
r= -0,965

Ordenadas: Contenido en zinc (mg/Kg)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

IB

s.d.

s.d.

22,62

19,46

12,58

14,14

1,29

22,13

23,81

2,5

2,24

1,18

21,04b 22,97b

13,49a

0,75

20,42

24,99

10

5,03

10

2,44

6,62

29,53c 35,89d

31,25 40,57

27,80 31,22

3,24

25,16b 22,71b

28,71

21,60

HOJAS INFERIORES

3,51

31,14b 32,16c

21,63

33,62

14,79a

32,69

28,65

14,79

2,5

RAZ

4,15

22,19a

25,13

19,25

2,45

10,88a

0,92

11,90a

22,55

0,20

27,10b

26,95

27,24

0,81

19,84a

19,27

20,41

2,5

13,89

10,76

10

2,16

27,44c

27,44

10

2,22

10,49ab 12,32a

12,02

8,97

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,58

15, lib

15,53

11,24

14,70

9,14
12,61

2,5

TALLO

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

plantas sometidas a los distintos tratamientos

Tabla 19; Contenido en Cu, expresado en mg/Kg de materia seca, en las diferentes partes de las

N3
I

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-103-

-. FIGURA 19 .Contenido en cobre

15

25

I"
'. 15

ie

ie

A: RAZ

T-

B: TALLO

35

se

24

25

21

2e

ie

15

ie
8

C: HOJAS INFERIORES
y= 17,032 + 2,041 x
r=0,912

10

2: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 22,19 +11,74 x - 8,01 x 2 + 1,17 x 3
r 2 = 0,894

10,68a

0,33

s.d.

6,71

2,5

7,25

11,68a
3,47

9,17a

16,17

17,87

10

2,10

5,00

4,75

10

2,04

0,18

5,83ab 4,88b

4,38

7,27

1,20

29,34c 17,02d

27,85

30,82

HOJAS INFERIORES

3,42

6,55 11,62

16,80

10,44

10,91

3,11

44,10b 31,52c

47,73a

29,10

46,30

s.d.

33,94

41,90

43,73

2,5

RAZ

17,75

34,69ab

47,04

22,14

0,72

52,98a

52,47

53,49

0,81

44,08c

43,50

44,65

2,5

TALLO

0,18

12,73d

12,86

12,60

15,54

29,17a

40,16

18,18

2,63

10,18c

12,04

8,32

2,5

18,35b

18,35

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,01

60,34b

60,34

60,33

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

plantas sometidas a los distintos tratamientos

10

0,03

ll,59e

11,57

11,61

10

Tabla 20; Contenido en Mot expresado en mg/Kg de materia seca, en las diferentes partes de las

I
I
I
I
I
I
1
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-105-

-. FIGURA 20 .Contenido en molibdeno

38

35

25
28

IB

A.: RAZ

E: TALLO
0995

y= 45,85 e -'
r= 0,938

y= 61,92 - 11,24 x + 0,61 x 3

r 2 = 0,932

35

18

25

IS

18

C: HOJAS INFERIORES

J): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Contenido en molibdeno (mg/Kg)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-106-

4.2

Experiencia II

4.2.1

Curso del crecimiento y desarrollo

El curso de la germinacin aconteci igual que en la experieri^

cia anterior (apartado 4.1.1).
Las primeras diferencias entre las plantas control, sin cromo
y las tratadas con cromo aparecieron a los 8 das a partir de la siembra, momento en que las plantas no tratadas con cromo empezaron a desplegar los cotiledones. Las hojas trifoliadas en los controles comenza_
ron a aparecer a los 13 das desde la siembra, llegando a su completo
desarrollo a los 21 das, los sntomas visuales de la fitotoxicidad por
cromo aparecieron igualmente que en la experiencia anterior y se carac_
terizaron por las mismas manifestaciones externas: falta de crecimiento, clorosis ecentuada en las hojas trifoliadas y color verde ms inten_
so en las hojas inferiores, hecho ste que parece indicar que el cromo
acta de la misma forma independientemente del tipo de sal empleado pa_
ra realizar el tratamiento, siempre que se halle en forma de Cr VI.
Las plantas, cesadas en su suministro hdrico a los 23 das
contados a partir de la siembra, siguieron su curso de diferente forma
en los distintos tratamientos, incrementndose el tiempo necesario para
alcanzar la marchitez a medida que se incrementaba la concentracin de
cromo en el medio (tabla 21). La secuencia de acontecimientos que tuvo
lugar durante el perodo de dficit hdrico fue la siguiente:
- Cada de las hojas inferiores en los controles entre los
7 y 9 das despus de comenzar el dficit hdrico, mientras
que las hojas trifoliadas se mantuvieron hasta el da 16.
- Cada de las hojas inferiores del tratamiento con 1 ppm Cr
VI entre los das 16 y 18 ( el da 16 presentaban una'sev
ra marchitez que permiti establecer la zona lineal del da
grama de Richter). Las hojas trifoliadas no cayeron hasta

I
I
I
I
I
I

-107-

el da 18.

- Cada de las hojas inferiores del tratamiento con 2,5 ppm

Cr VI entre los das 18 y 20. El da 16 ya presentaban potenciales hdricos y CHR dentro de la zona lineal. Las hojas trifoliadas se mantuvieron hasta el da 21 sin alcanzar
dicha zona.
- Las plantas tratadas con 5 y 10 ppm Cr VI se mantuvieron rtm
cho ms tiempo que las tratadas con menor concentracin de

Cr VI. Las plantas tratadas con 5 ppm se agotaron el da 21

y no nos fue posible conocer cul hubiera sido su resitencia, sin embargo, las hojas trifoliadas ya presentaban una

clara zona lineal en el diagrama de Richter que no se traduca en sntomas externos de marchitez. Las plantas trata_

das con 10 ppm Cr VI resistieron sin marchitarse hasta el

da 36, momento en que empezaron a entrar en la zona lineal

del citado diagrama.

Hay que resaltar un hecho observado en esta experiencia y que

hasta este momento no habamos observado: las plantas tratadas con 10

ppm Cr VI, una vez retirado el cromo de la solucin nutritiva, fueron

I
I
I
I
I
I
I
I
I

capaces de crecer,

florecer y fructificar con un mes de retraso res-

pecto a las plantas no tratadas con cromo (controles).

I
-108-

I
I
_
I

Tabla 21; Das sin suministro hdrico necesarios para alcanzar una completa
marchitez en las hojas inferiores y las primeras hojas trifoliadas

I
I
_

Hojas inferiores

1^ Hoja trifoliada

Control

1,0 ppm

7-9

16-18

16

18

2,5 ppm _

5 ppm

10 ppm

18-20

21

21

21

21

>36

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

i ,..,

...

,1 :

1
1
1

-109-

1
1

4.2.2

Efectos sobre el crecimiento

Comb en la experiencia anterior y el trabajo previo realizado (7, 39), existe una clara tendencia a la disminucin del crecimie
to a medida que se incrmenta la concentracin de cromo en el medio, si.
guiendo pautas parecidas, alcanzando valores mnimos a 10 ppm Cr en el
medio (tablas 22, 23 y 24 y figuras 21, 22 y 23).
No se observa un claro estmulo del crecimiento en ninguno de
los parmetros estudiados para ninguna de las concentraciones de cromo
empleadas aunque las concentraciones de hasta 2,5 ppm Cr VI presentan
una disminucin en peso menor que el resto de tratamientos (5 y 10 ppm
Cr), llegando incluso en el caso de 2,5 ppm Cr a ser superior que el de
1 ppm.

1
1

El rea foliar presenta el mismo comportamiento que el crecimiento en peso, pero se manifiesta una diferencia de comportamiento
entre las hojas inferiores y la primera hoja trifoliada, presentando u
mayor disminucin porcentual en el rea foliar las hojas trifoliadas
que las hojas inferiores para una misma concentracin de cromo, ello
en todos los tratamientos.

1
^B

Si comparamos el crecimiento en peso y el crecimiento longitju

dinal de las raices tratadas con cromo observamos que se produce la mxima reduccin del crecimiento hasta concentraciones de 2,5 ppm Cr VI
en el medio, mientras que en el caso de 5 y 10 ppm esta disminucin pa_
rece detenerse y apenas se produce efecto al pasar de la concentracin
de 5 ppra Cr VI a 10 ppra. La presencia de un estmulo observado en el cre_
cimiento longitudinal de las raices a la coentracin de 10 ppm Cr VI
puede ser debido al hecho de que el cromo presente su mximo efecto S
bre el desarrollo a concentraciones inferiores y a partir de ellas las
fluctuaciones observadas sean debidas al azar. Puesto que el cromo pre_
senta, al igual que la mayora de los otros metales pesados, una barre_
ra de translocacin, este efecto no se traduce en la misma forma en la

1
1

1
1
1
1
1

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-110-

parte area,puesto que su concentracin en ella es mucho menor, este he_

cho podra explicar muy bien que mientras que las raices no son apenas
afectadas en su crecimiento por concentraciones elevadas de cromo, las
partes areas todava lo son, puesto que, una vez realizado el efecto
mximo sobre el metabolismo y el crecimientp de las raices, el cromo se
acumulara de forma pasiva en ellas, siendo su translocacin hacia la
parte area directamente proporcional a su concentracin en el medio
(excluyendo una posible saturacin), ejerciendo su mayor influjo en ella a medida que su concentracin interna se incrementara, a este respecto cabe sealar que Shewry y Peterson (105) observaron que 2/3 del
cromo interno en raices se presenta en vacuolas en forma soluble, mien_
tras que la mayor parte del resto se halla asociado a lasparedes celulares. Si tenemos en cuenta que a las mayores concentraciones empleadas
las clulas de la raz deben encontrarse saturadas de cromo, como ya di
cutimos en el apartado 4.1.3, el transporte de cromo a la parte area
no se incrementara de forma lineal y por lo tanto tampoco lo haran sus
efectos, de forma que nos encontraramos con efectos menores sobre el
crecimiento a mayores concentraciones de cromo que se traduciran en fun_
ciones de tipo exponencial como las obtenidas por nosotros en este tra^
bajo y en el que le precedi (7,39).
Existe adems un hecho que podra hacer parecer el razonamien_
to anterior si no como carente de valor, cuando menos como de poco peso,
y es el que las hojas trifoliadas se vean ms afectadas en su reduccin
en el crecimiento que las hojas inferiores, efecto que tambin se hace
patente al observar otros parmetros como la reduccin en la fotosnte_
sis ya observada por Austenfeld (3) y que se manifiesta en grado ms ele_
vado en las hojas superiores que en las inferiores a pesar que stas pre
sentan un contenido en cromo mayor que las primeras; sin embargo, ello
se debe a las diferentes condiciones de exposicin al cromo a lo largo
de su desarrollo.

3,01
4,31
3,39

4,09

2,49
2,61

1,61
4,15
2,21

x
s.d.

8,96ab
2,19

8,45

7,06
11,36

7,65b
0,42

7,89
7,91
7,17

10,17 8,64
7,08 10,57
8,68
9,59

8,64ab 9,59a
1,54 0,96

3,27b
0,34

4,44a
0,72

3,65
4,59
5,07

10

2, Ole
0,75

1,69
2,23
2,63

3,66
3,12
3,02

10

2,5

TOTAL

x
2,65ab 3,06ab 3,57ab
s-d. 1,33
0,89
0,67

2,5

RAZ

5,58ab
0,86

0,88

4,59
6,07

6,08

'1

2,53

5,70ab

6,25
5,20

5,63

2,5

PARTE AEREA

6,30ab

7,21
6,24

5,46

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

diferentes tratamientos

0,35

4,39ab

4,79
4,14

4,23

0,26

2,26b

2,37
2,44

1,95

10

Tabla 22; Peso fresco, expresado en g, de las distintas partes de las plantas sometidas a los

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-112-

-. FIGURA 21 .Peso fresco en la experiencia II

4.3

4
3.5

3
2.5

}, 5

18

A: RAIZ
C. j

1:
y=
r=

PARTE AEREA
, ,.,,, e -0,1016 x
6,6144
-0,943

C.: TOTAL
y= 9,8122 e-0.0717X
r= -0,830

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppra)

0,39
0,47

0,95
0,54

x
s.d.

0,98a
0,61

1,67a
0,24

1,50a
0,20

1,68
1,29
1,52

0,43
0,88
1,64

1,92
1,44
1,63

2,5

TOTAL

0,47a
0,11

0,41a
0,16

1,43
1,76
1,56
1,57a
0,18

1,96
1,52
1,64
1,70a
0,23

10

0,53a
0,07

0,48

0,48

0,36

0,31
0,32

10

0,50
0,61

5
0,58

0,59

2.5

0,47a
0,07

0..54

0,04

x
0,28a
s.d. 0.>25

RAZ

0,76a
0,36

1,10

0,63

0,40

l,20ab
0,17

l,09ab
0,11

1,20

1,17

1,04

1,09
0,98

2.5

PARTE AEREA

1,38

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

diferentes tratamientos

l,23b
0,13

1,16

1,16

1,37

l,04c
0,12

1,03

1,16

0,93

10

Tabla 23; Peso seco, expresado en g, d las distintas partes de las plantas sometidas a los

i
t1
i"
w
i

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-114-

-. FIGURA 22 .Peso seco en la experiencia II

e.e

1.5

e.s

1.3

8.4

1.1

e.3

8.3

e.2

8.7

e.i

e.s

e.3
18

A: RAZ

18

E: PARTE AEREA

1.6

1.2

8.8

e.4

C: TOTAL

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

x
s.d.

x
s.d.

136,6
174,2
152,7
160,5

150,7

207,0
263,1
300,3
200,3

2oo,8abl56,0b
36,6
15,7

223,9

196,5
231,7

2,5

TOTAL

242,7a
47,6

101,0
69,4
92,8
111,1

117,4

56,1

77,5

48,1

79,5
48,7

67,6
72,4

10

103,8c 67,le
15,6 13,2

115,9

111,7
81,1
106,4

86,2a
25,1

83,0
88,5

64,0
63,2

10

149,7a 121, 2ab 93,6bc 63,2c

10,2
25,5
17,8
12,0

107,9
124,6
120,1
132,3

134,1
124,5
180,9
159,5

124,8
174,6
182,9
144,2

156,4a
27,3

2,5

50,9ab
24,5

64,4

50,8

16,6
72,0

34, 8b
10,1

28,2

32,6

28,6
49,6

2,5

10, 2c
3,8

4,8

13,6

10,8
11,7

PRIMERA HOJA TRIFOLIA

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

tos

3,9c
3,8

0,7

2,0

3,6
9,3

10

Tabla 24; Area foliar, expresada en cm 2 , de las plantas sometidas a los diferentes tratamien-

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-116-

-. FIGURA 23 .Area foliar en la experiencia III

isa
175

iea

188
MS

se
115

se

168
85

25

?.

55

48.
4

A_: HOJAS INFERIORES

y- 155,36 e'0'0939 x
r= -0,91

B.: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

y= 70,933 e"0'3577 x
r= -0,922

238
248

18

C: TOTAL
y=- 221,693 e~'128 x
r= -0,937
Ordenadas: Area foliar (cm3)
Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

1
1
1
1

1
1
1
1
1

1
1

1
1
1

-117-

4.2.3

Efectos del cromo sobre el contenido hdrico relativo, potencial hdricOj^ potencial osmtico y potencial de presin bajo
suministro hdrico adecuado

Las plantas tratadas y las plantas control mostraron un compor_

tamiento distinto en sus relaciones hdricas, presentando adems un cojm
portamiento distinto las hojas inferiores y la primera hoja trifoliada
dentro de cada tipo de tratamiento (tablas 25,31 y 37 y figura 24).
En las hojas inferiores todas las concetraciones de cromo ejn
pleadas provocaron una reduccin en el potencial osmtico y a la vez un
incremento en el potencial de presin. Tambin disminuy el potencial
hdrico en las hojas inferiores a la vez que se incrementaba el contenido en Cr en el medio, salvo para la concentracin de 1 ppm Cr VI, que
presentaba el potencial hdrico superior al del resto de tratamientos,
e incluso al del control. Por lo que respecta al CHR tambin disminuy
al incrementarse la concentracin de cromo en el medio, presentando ta
bien una anomala en el caso de 1 ppm Cr VI , cuyo CHR es ms bajo que
en el tratamiento con 2,5 ppm Cr VI.
En las hojas trifoliadas tambin disminuy el potencial osm_
tico, aunque las diferencias no fueron significativas entre el control
y 2,5 ppm Cr VI o ms. Tambin se present un comportamiento anmalo en
el caso del tratamiento con 1 ppm Cr VI , en el que sepuede observar un
incremento en el potencial osmtico tanto respecto al control como re
pecto al resto de tratamientos. Lo mismo, pero de forma inversa, ocurre
para el potencial de presin. En el caso del potencial hdrico es pos
ble observar que, si bien presenta una tendencia a disminuir a medida
que aumenta la concentracin de cromo en el medio, esta disminucin es
muy acusada para el caso de 1 y 2,5 ppm y vuelve a disminuir, aunque con
un valor no significativamente menor que el control, a 5 ppm, disminuyen
do finalmente a un valor significativamente menor que el del control a

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-118-

10 ppra Cr VI. El CHR disminuye a medida que se incrementa la concentra_

cin de cromo en elmedio.
Los efectos contrapuestos observados en el comportamiento de
las relaciones hdrics entre las hojas inferiores yla primera hoja trj^
foliada no se detienen aqu, y se manifiestan mucho ms claramente en
el comportamiento de ambos tipos de hojas frente al stress hdrico, de
forma que el comentario al comportamiento de las relaciones hdrics de
las plantas sometidas a diferentes tratamientos con cromo en el medio
se realizar en el apartado siguiente, conjuntamente con el comentario
al comportamiento frente a las condiciones de dficit hdrico.
4.2.A

Efecto del dficit hdrico sobre las plantas sometidas a los

diferentes tratamientos con cromo en el medio

A medida que se incrementaba la concentracin de cromo en el

medio las plantas requirieron mayor tiempo de dficit hdrico para entrar
en marchitez permenente. Dentro del comportamiento diferencial entre las
hojas inferiores y las primeras hojas trifoliadas cabe destacar que estas ltimas fueron las que ms tiempo necesitaron para marchitarse completamente (tabla 21).
Los diagramas de Richter realizados para las hojas inferiores
y primera hoja trifoliada de cada tratamiento (salvo para las hojas inf_e_
riores de las plantas tratadas con 5 ppm Cr VI debido al nmero insuficiente de datos) nos permiten observar el comportamiento diferencial de
ambos tipos de hojas frente al dficit hdrico: mientras que en las hojas inferiores de todos los tratamientos es posible calcular el punto de
prdida de turgencia (figura 25) o punto que determina el CHR al que el
p se hace nulo y a partir del cual el 'Pw depender nicamente del% ,
no ocurre as en la primera hoja trifoliada (figura 26), en las que un
camente es posible calcular este punto para las concentraciones de O y
1 ppm Cr VI (tabla 42) debido a que no se presenta interseccin entre la

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-119-

zona lineal y la zona exponencial del diagrama de Richter calculado segn

el mtodo propuesto por Stadelmann (107). Incluso para 5 ppm de cromo o
mayores el coeficiente de regresin 6 se hace positivo. Teniendo en cue_n_
ta que v se define como v = dV/dP, ste nunca puede ser negativo. Tarn
bien parece falso el ^ p mximo negativo obtenido para las hojas trifola_
das de las plantas tratadas con 10 ppm Cr VI (tabla 42), tal y como indi_
ca Tyree (113).
Otro dato a observar es que el punto de prdida de turgancia,
tanto para las hojas inferiores como para la primera hoja trifoliada es
menor a medida que se incrementa la concentracin de cromo en el medio
(tabla 42), lo cual es indicativo de una mayor tolerancia al dficit h_
drico de las plantas tratadas con cromo. El potencial de presin mxima
para las hojas inferiores se incrmenta a medida que se incrementa la con
centracin de cromo en el medio, indicando una mayor turgencia de las
plantas tratadas. Relacionado con ello es posible observar que el coef_
ciente de elasticidad de las hojas inferiores de las plantas tratadas con
1 ppm Cr VI es mucho ms bajo que en los controles, indicando una mayor
elasticidad de la pared celular de lasplantas tratadas con esta concentracin de cromo en el medio, lo cual tambin es cierto para el resto de
tratamientos e incluso para las hojas trifoliadas.
Tal y como hemos visto anteriormente, todas las concentraciones
de cromo suministradas afectaron las relaciones hdricas de las plantas
tratadas, presentando claras diferencias enlo que respecta al comportamiento de las hojas inferiores respecto de las primeras hojas trifoliadas. Bajo condiciones de suministro hdrico normal,la concentracin de
1 ppm Cr VI provoc un mayor potencial de presin e hdrico enlas hojas
inferiores, mientras que en las hojas trifoliadas fue al contrario. Kir_
kham (59) encontr que concentraciones de Cd que no provocaban reduccin
del crecimiento incrementaban el fp en hojas de crisantemo y sugiere que
el estmulo del crecimiento en estas hojas provocada por elementos tales

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

como el Cd pueden ser debidos a este fenmeno. A este respecto cabe men_
cionar que aunque en esta experiencia no hemos observado un estmulo sig_
nificativo del crecimiento, s que se manifest en una experiencia poste_
rior (experiencia III) y ser discutido en el apartado correspondiente.
El incremento observado en el T p podra ser debido a un incr
ment en los solutos presentes en los tejidos de plantas tratadas con Cr
y, aunque existe poca informacin al respecto, Lahouti y Peterson (67)
ponen de manifiesto que ms dla mitad del cromo suministrado como Cr V
encontrado en coliflor, trigo y rbano se presenta en forma soluble. Se_
gn Shewry y Peterson (105), en estudios con raices de trigo,ms de las
dos terceras partes del Cr interno se presentaba en vacuolas, mientras
que la mayor parte del resto lo haca en las paredes celulares. Esta acu_
mulacin de cromo en las vacuolas podra ser la responsable de la dism
nucin del'Pw observada en las hojas inferiores en esta experiencia, mie
tras que el incremento del TTJ en las hojas trifoliadas de las plantas
tratadas con 1 ppm Cr VI podra ser debido a una interferencia del cromo
en el transporte de substancias osmticamente activas como cidos orgnicos o iones inorgnicos como K y Na (7), mientras que el mantenimien_
to de la turgencia a elevadas concentraciones de Cr podra ser debida a
una disminucin del %. El efecto del Cr sobre las relaciones hdricas
es altamente dependiente de la concentracin.
De los resultados obtenidos en esta experiencia se deduce una
menor resistencia al dficit hdrico por parte de las hojas inferiores,
al igual que en el trabajo efectuado por Lee-Stadelmann (58), siendo las
diferencias observadas probablemente debidas a la diferencia en la varie^
dad empleada y las diferentes condiciones de cultivo.
La reduccim en el mdulo de elasticidad de las plantas trata.
das con 1 ppm Cr VI no se debe seguramente a una reduccin en el tamao celular, puesto que apenas existen diferencias de crecimiento entre
estas plantas y las control (tablas 22 y 24 y figuras 21 y 23), pero al.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-121 -

gunos autores han observado la presencia de pequeos granulos electroden_

sos depositados en la pared celular de raices de coliflor tratadas con
Cr VI que podran tener relacin con una capacidad de reforzamiento de
las uniones entre los componentes de la pared celular que dieran lugar
a una mayor elasticidad. Klimashevskii y Delov encontraron que el Al pro_
duca una disminucin de laplasticidad en segmentos de melocotn en elo^
gacin e incluso inhiba completamente el crecimiento celular en la raz.
Matsumoto et al. (74) especulan que las diferencias estructurales en la
pared celular, perticularmente enla extensin de la metilacin del cido
galacturnico podran explicar la diferencia en la tolerancia de los ve_
getales al Al; sin embargo, no se ha encontrado interaccin significat^
va positiva entre el Al y cidos urnicos en raices de melocotn tratj
das con Al. El Al s acumul preferentemente en el ncleo y la pared ce_
lular (74). Klimashevskii et al. (61,62) concluyeron que el Al daa la
pared celular por activacin de la poligalacturonasa, que hidroliza pec_
tinas y,por lo tanto, provoca una ms rpida penetracin del Al.
Finalmente, la diferencia de comportamiento entre las hojas
inferiores y las trifoliadas pueden ser debidas a las diferencias en las
condiciones en que se vieron afectadas por el cromo. Las hojas inferio_
res recibieron el cromo cuando los cotiledones se desplegaron, momento
en que la divisin celular est casi completamente completada y el crecimiento producido posteriormente es por extensin principalmente, mien_
tras que en las hojas trifoliadas, por el contrario, la exposicin al
cromo, al menos a bajas concentraciones, se produjo desde el inicio de
su desarrollo, por lo que su maquinaria metablica y replicativa y, por
lo tanto, su crecimiento, pudieron ser afectados grandemente.
Por lo que respecta al dficit hdrico, pueden jugar dos facto_
res: por un lado est el hecho de que estas hojas son tejidos ms jvenes que las hojas inferiores y, por lo tanto, presentan unas paredes celu
lares ms elsticas que aqullas, lo que les permite adaptarse mejor a
condiciones que exijan cambios en el volumen celular, como un dficit h_

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-122-

drico ( su v es menor para cualquier CHR que en las hojas inferiores

en todos los tratamientos). Por otro lado est la posible relacin,mencionada anteriormente, del cromo con las paredes celulares, puesto que
cuando las hojas trifoliadas realizan su crecimiento ya se hallan expues_
tas almetal, que puede asa pasar a dormar parte del material dla pared
celular, no ocurriendo as en las hojas inferiores que cuando son expues_
tas al cromo ya tienen prcticamente formada su pared celular.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-123-

Tabla 25: Potencial hidrico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=0 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

x
s.d.

2,5

-0,06
-0,14
-0,16
-0,18

-0,02
-0,04
-0,06
-0,10

-0,18
-0,18
-0,18
-0,20

-0,10
-0,18
-0,20
-0,20

-0,12
-0,16
-0,24
-0,32

-0,14a
0,053

-0,061b
0,034

-0,19c
0,010

-0,17
0,050

-0,21
0,089

10

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

10

-0,04
-0,06
-0,06
-0,10

-0,06
-0,12
-0,14
-0,16

-0,02
-0,04
-0,18
-0,20

-0,02
-0,04
-0,04
-0,16

-0,04
-0,10
-0,20
-0,30

-0,07
0,025

-0,12
0,043

-0,11
0,093

-0,065
0,064

-0,16
0,110

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-124-

Tabla 26: Potencial hdrico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=7 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

x
s.d.

2,5

10

-0,10
-0,16
-0,26
-0,36

-0,10
-0,10
-0,18
-0,22

-0,08
-0,14
-0,18
-0,26

-0,16
-0,30
-0,32
-0,40

-0,20
-0,20
-0,32
-0,40

-0,22
0,11

-0,15
0,06

-0,17
0,08

-0,30
0,10

-0,40
0,10

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

-0,20
-0,20
-0,24
-0,24

-0,08
-0,12
-0,12
-0,22

-0,04
-0,04
-0,06
-0,10

-0,10
-0,16
-0,18
-0,24

-0,06
-0,12
-0,18
-0,34

-0,22
0,23

-0,14
0,60

-0,06
0,03

-0,17
0,06

-0,18
0,12

10

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

125-

Tabla 27; Potencial hdrico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=16 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
O

x
s.d.

x
s.d.

-1,00
-1,02
-1,04
-1,20
-1,26

-0,92
0,253

10

-0,74

-0,70

-0,30

-0,38

-0,80

-0,80

-0,40

-0,46

-0,90

-0,97

-0,54

-1,20

-1,10

-0,60

_o,91
0,20

-0,93
0,17

-0,46
0,140

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

1
2,5
5

-0,40
-0,50
-0,80
-0,88
-0,92
-1,00

2,5

-0,42
0,057

10

I
I
I
I
I
I
I

-126-

Tabla 28; Potencial hdrico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=18 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

s.d.

2,5

-0,40

-0,40

-0,46

-0,70

-0,60

-0,74

-0,55a

-0,50a

-0,60a

2,12

0,14

0,20

10

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

_Q_

x
s.d.

1
-0,40
-0,60
-0,60
-1,02

2,5
-0,40
-0,50
-0,70
-0,86

5
-0,52
-0,60

_o,66
0,26

-0,62
0,21

-0,56
0,06

10
-0,16
-0,17

-0,17
0,01

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-127-

Tabla 29: Potencial hdrico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los diferentes tratamientos. T=21 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

10

-0,40
-0,50

-0,14
-0,40
_0,42

-0,45

-0,32

0,07

0,16

2,5

x
s.d,

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

J_

x
s.d.

2,5

-0,72
-0,74
-0,74

-0,40
-0,40
-0,56

-0,52
-0,52
-0,74

_0,73

-0,45

-0,59

0,01

0,09

0,21

10

I
I
I
I

-128-

Tabla 30; Potencial hdrico, expresado en MPa, en las plantas tratadas

con 10 ppm Cr VI en el medio a tiempos superiores a 21 das

I
I

HOJAS INFERIORES

I
m

T=22

T=30

T=36

-0,40
-0,42
-0,44

-0,50
-0,60
-0,70
-0,70

-0,50
-0,98
-1,00
-1,00

-0,42
0,03

-0,63
0,096

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

x
s.d.

-1,18
-1,20
-1,32
-1,40
-1,07
0,28

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-129-

Tabla 31; Contenido hdrico relativo, expresado en %, en las plantas sometidas a los diferentes tratamientos. T=0 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

x
s.d.

2,5

10

100,00
99,41
98,32
93,82

97,35
97,04
96,29
94,95

100,00
97,64
97,42
95,04

96,57
95,40
94,79
94,46

96,63
95,54
93,18
76,68

97,89
2,80

96,41
1,07

97,53
2,03

95,36
0,93

90,51
9,33

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

10

98,73
96,69
94,26
90,08

97,64
94,89
94,72
90,81

92,05
93,88
93,44
88,76

96,21
91,46
89,74
88,02

86,99
86,11
85,23
88,00

94,74
3,72

94,54
2,77

92,53
2,53

91,36
3,53

84,58
3,14

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-130-

Tabla 32: Contenido hdrico relativo, expresado en %, en las plantas sometidas a los distintos tratamientos. T=7 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
O

x
s,d.

2.5

10

97,14
96,75
96,46
94,05

100,00
99,60
98,82
97,46

99,16
98,17
97,00
96,02

99,57
98,61
97,79
96,60

95,64
95,06
95,73
93,25

96,10
1,39

98,97
1,12

97,81
1,31

98,14
1,26

94,42
1,11

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

10

96,24
94,44
92,71
90,74

98,47
96,89
96,74
89,46

95,39
93,69
91,47
88,49

94,23
93,58
91,98
88,03

89,51
84,15
84,05
80,28

93,53
2,36

95,39
4,03

92,26
2,98

91,96
2,78

84,50
3,80

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-131-

Tabla 33: Contenido hdrico relativo, expresado en %, en las plantas sometidas a los distintos tratamientos. T=16 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
JL

x
s.d.

I
I
I
I

10

83,74
71,75
64,79
56,91

94,04
92,54
90,33
81,82
67,63

97,19
96,03
95,55
93,75

93,74
93,32

69,30
11,38

85,27
10,94

95,62
1,44

93,53
0,30

100,00 83,26
88,18 82,55

2,5

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

I!

84.82

76,72

83.83

70,84

83,20

65,55

80,40

s.d.

10,22

2,5

10

I
I
I

-132

Tabla 34; Contenido hi drico relativo, expresado en %, en las plantas sometidas a los distintos tratamientos. T=18 das

I
Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
O

x
s.d.

2,5

10

88,25
87,25

93,64
89,00

90,97
90,08

87,75
.0,70

91,32
3,28

90,52
0,63

I
PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

I
O
I

I
I
I
I
I

x
s.d.

9,59

2,5

10

87,44
86,02
85,80
67,30

95,68
93,43
92,23
84,74

97,57
92,16

97,57
92,16

81,64
4,74

91,52
4,74

91,52
3,83

84,86

I
I
I
I

-133-

Tabla 35; Contenido hdrico relativo, expresado en %, en las plantas sometidas a los distintos tratamientos. T=21 das

I
Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
O

10

95,10
92,49

93,60
93,28
86,12

93,79
1,85

91,00
4,23

2,5

x
s.d.

I
PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

I
I
I
I
I
I
I
I

x
s.d.

2,5

10

95,59

97j95

88>63

89,84
87>32

97,48
92,46

87,86
83,16

90,92

95,96

86,55

4,24

3,04

2,96

I
I
I

-134-

Tabla 36: Contenidohdrico relativo, expresado en %, en las plantas tratadas con 10 ppm Cr VI en el medio a tiempos superiores a 21
das

I
I

HOJAS INFERIORAS

T=22

T=30

T=36

^
I

100,00
93,12

100,00
93,28

85,40
83,03

78,51
72,76

92,62
92,38

82,73
81,84

68,45
60,87

88,138
I

x
s.d.

I
I
I
I
I
I
I

I
I
I

93,75

94,57

70,15

5,96

3,64

7,43

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-135-

Tabla 37; Potencial osmtico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=0

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

x
s.d.

2,5

-0,195
-0,149
-0,179
-0,386

-0,47
-0,545
-0,514
-0,507

-0,24
-0,370
-0,454
-1,096

-0,213
-0,240
-0,574
-0,900

-0,515
-0,545
-0,551
-0,600

-0,227
0,108

-0,509
0,031

-0,540
0,381

-0,482
0,324

-0,553
0,035

10

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

-0,653
-1,083
-0,495
-0,575

-0,026
-0,351
-0,452
-0,530

-0,340
-0,546
-0,649
-1,172

-0,449
-0,694
-0,818
-0,936

-0,530
-0,693
-0,794
-1,172

-0,34
0,226

-0,68
0,335

-0,724
0,208

-0,797
0,272

-0,702
0,262

10

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-136-

Tabla 38: Potencial osmtico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los distintos tratamientos. T=7 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES

x
s.d.

2,5

-0,411
-0,575
-0,490
-0,256

-0,50
-0,531
-0,590
-0,806

-0,344
-0,401
-0,530
-0,560

-0,47
-0,550
-0,59
-0,635

-0,747
-0,778
-0,844
-0,904

-0,433
0,136

-0,607
0,138

-0,459
0,103

-0,562
0,070

-0,818
0,070

10

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

-0,653
-1,083
-0,495
-0,575

-0,260
-0,350
-0,450
-0,530

-0,260
-0,323
-0,653
-1,555

-0,411
-0,575
-1,124
-1,173

-1,527

-0,702
0,262

-,340
0,261

-0,698
0,597

-0,821
0,385

-1,517

10

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-13"

Tabla 39: Potencial osmtico, expresado en MPa, en las plantas sometidas

a los diferentes tratamientos. T=16 das

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

HOJAS INFERIORES
O

2,5

x
s.d.

10

-0,539
-0,653
-0,694

-1,402
-1,123

-0,635

-1,120

0,069

0,248

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

x
s.d.

2,5

-0,102
-0,545
-0,721

-0,637
-0,721
-0,947

-0,500
-0,612
-1,154

-0,590
-0,485
-0,857
-1,083

-0,694
-0,745

-0,762
o,240

-0,768
0,160

-0,792
0,333

-0,786
0,232

-0,507
0,292

10

-0,103

10 ppm Cr

5 ppm Cr

2,5 ppm

1 ppm Cr

CONTROL

-0,61

Yo (MPa)

-0,28

^w (MPa) -0,21

CHR ( % ) 90,5

*n (MPa)

94,4

-0,82

98,1

CHR ( % ) 95,30

0,53

n f\L

-0,56

Yn (MPa) -0,48

93,5

1
9
l ,1 i.

-0,42

95,6

-0,46

-0,30

f*/ (MPa) -0,17

CHR ( /a

85,30

-4,590

n (MPa) -0,540

-0,93

97,80

-0,165

^ w (MPa) -0,185

69,30

-0,91

T=16

97,50

98,90

CHiv \ 7o ) 96,40;

0,51

-0,15

96,10

4V (MPa) -0,055

97,90

-0,43

Yo (MPa) -0,230

(jHK \ *v }

-0,22

T=7

Y w (MPa) -0,135

T=0

90,5

-0,60

91,3

-0,45

T=18

76,6

-1,07

T=36

corresponden a las medias de los valores detallados en las tablas anteriores

Tabla 40; Resumen de los diferentes parmetros hdricos en las hojas inferiores. Los valores

LO
00
I

0,69
92,30

0,68
92,50
-0,065
-0,72
91,40

-0,16
-0,80
84,60

CHR ( % )

H1 w (MPa)
5 ppm Cr Y U (MPa)
CHR ( % )

f w (MPa)
10 ppm Cr f n (MPa)

CHR ( % )

2,5 ppm

84,50

-0,18

-0,82
92,00
^

-0,06

0,11

Tu/ (MPa)
V (MPa)

-0,17

81,60

-0,66
-0,77

-0,14
-0,31
95,40

-0,12
-0,34
94,50

CHR ( % )

f w (MPa)
1 ppm Cr Vf? (MPa)
CHR ( % )

CONTROL

-0,92
-0,76
80,40

-0,22
-0,45
93,50

-0,065
-0,70
94,90

T=16

T=7

*w (MPa)
f * (MPa)

T=0

OQ

95,10

O ,ci
Jl

_0,17

QA

n sfi
n 7Q

91,50

n 7Q
u,
/y

n 69

T=18

86,60

-0,59

QA QQ

n s

90,90

n ~T\

T=21

Tabla Al; Resumen de los diferentes parmetros hidricos en las hojas trifoliadas. Los valores
corresponden a las medias de los valores detallados en las tablas anteriores

*-
^

r/i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i
i

-140-

Tabla 42 : Parmetros hidricos calculados segn el mtodo propuesto por

Stadelmann
HOJAS INFERIORES
fy(CHR.100%)

^p(max) (MPa)

CONTROL
1 ppm Cr
2,5 ppm Cr
5 ppm Cr
10 ppm Cr

PPT (% CHR)

76,90

-6,910

8,978
1,601
5,795

63,90

-5,520

5,495

66,00

7,492
1,315
0,3401
-2,4471

73,70
63,10

0,864

10,39

0,420

-3,81

0,839

0,995

63,30

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

CONTROL
1 ppra Cr

0,743
0,386
2,5 ppm Cr 0,522
0,3411
5 ppm Cr
10 ppm Cr -0,090

-10,08
-3,41
-0,652
7,174

eu" -

HO
O

H
O.

3"

H01

ro
3
n

T
O
rt

n
o

H-

CO

o
rt
n>
3
n
H o

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

10

S-9

O)
W
HO

fD

o.

n>
p
n

HO
O

1-1

H
CL

3-

CL
fD
H>
HO
H-

CL
fD

H
O
CL
O

rt
O
W

HO)

0)
rt
0>

H01
rt
H3
rt
O
U)

Cfl

en
oi

3
fD
rt
HCL
01

co
o

O)
3
rt
01
O

01

en

fD
3

HO
O

X)
(D

H
CL

n
o
en
=r

fD
rt

Ois

CL
fD

CL
H
01

fD
3

>

X)

I-H

-Pt*
I

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-142-

-. FIGURA 25 .Diagramas de Richter correspondientes a las hojas inferiores de las plantas sometidas a los diferentes tratamientos con cnomo.
Potencial hdrico (MPa)

u
P.

U
CN

CNI

Cu

ex
ex
O
H
J-l

co

CD

O
U

H
U

O
H
X

H
QJ
4-1

O
U

I-,
U

E
O.

o,
CN

Potencial hdrico
Potencial osmtico

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-143-. FIGURA 26 .Diagramas de Richter correspondientes a la primera hoja trifoliada de las

plantas sometidas a los diferentes tratamientos con cromo.
Potencial hdrico (MPa)

co
rH
O

o
o

H
>-i
O
H

H
C
(U
4J
C

o
u

Potencial hdrico
Potencial osmtico

1
1
i
M

-144-

4.3

Experiencia III

4.3.1

Curso del crecimiento y desarrollo

'

1
1

El curso y porcentaje de la germinacin result igual que en

las dos experiencias anteriores, dado que las condiciones de germinacin
fueron las mismas que en ellas.
Al cabo de 3-4 das de haber germiando las semillas (7 das des_
pues de la siembra) las plantas fueron transplantadas a las soluciones
conteniendo las diferentes concentraciones de cromo, puesto que hasta en_
toces las plantas nicamente haban estado en contacto con el sustrato de germinacin (perlita) y agua destilada.
El primer efecto manifestado por las plantas tratadas con cr
mo fue el delretraso en el crecimiento de las plantas tratadas con las
mximas concentraciones del metal (1 y 1,5 ppm Cr VI en el medio), mien_
tras que las plantas tratadas con 0,2 ppm Cr VI no manifestaron sntoma alguno de toxicidad en la parte area.

1
1

1
-

1
1
1
1

A pesar de que las plantas tratadas con 0,2 ppm Cr VI no mani_

festaron ningn sntoma externo en la parte area, no fue as en sus ra.
ees, en las que a pesar de no ser detenido de forma visible el crecimiej
to, s que manifestaban una coloracin ms oscura.. .; -: Las raices de las
plantas tratadas con concentraciones ms elevadas de romo tambin prese
taron esta coloracin ms oscura, a la vez que una formacin de raices
laterales mucho mayor que las plantas control o en las tratadas con 0,2
ppm Cr VI en el medio. Estas raices laterales eran d un color ms claro
que en el resto de la raz y se hallaban presentes en todas las raices
de la planta, creciendo perpendicularmente a la raz madre y no alcanzaj
do en ningn caso una longitud mayor a 0, 5 cm, no dando a su vez lugar a la formacin de ninguna raicilla lateral. Este efecto empezado a
manifestar a partir de los 7 das de estar las plantas en la solucin n_u

1
1

-145-

1
1
1

tritiva

conteniendo el cromo, se mantuvo e increment a lo largo del

tratamiento.
En la parte area los sntomas de fitotoxicidad fueron los mis_
mos que en las anteriores experiencias, aunque se manifestaban a concentraciones de cromo en el medio aproximadamente 10 veces menores que
en ellos, prueba de que la disponibilidad del cromo en cultivo en perli
ta es mucho ms baja que en la solucin nutritiva, lo cual es indicati_
vo de que la perlita no es un sustrato totalmente inerte.
s

La secuencia temporal de manifestacin de sntomas en el crec

miento de la paerte area fue la misma que en las experiencias anteriores.

1
1
1

A los 23 das desde la germinacin las plantas fueron sometidas

a un moderado dficit hdrico provocado por stress osmtico, durante tres
das, lo cual provoc la aparicin de sntomas de stress en las palntas
que menos sntomas de toxicidad presentaban (control y 0, 2 ppm Cr VI en
el medio), siendo menos apreciables en las plantas tratadas con las ma_
yores concentraciones de cromo (1 y 1,5 ppm), lo cual est de acuerdo
con los resultados de la experiencia anterior, en la que lasplantas tra_
tadas con las mayores concentraciones de cromo resultaron ser las ms
resistentes al dficit hdrico.
Los sntomas presentados por las plantas que los manifestaron
fueron una prdida de turgencia que no lleg a la marchitez, tanto en las
hojas inferiores como en la primera hoja trifoliada. Por lo que respecta
a las raices.no manifestaron sntoma alguno nuevo durante el perodo de
stress osmtico.
4.3.2

Efecto sobre el crecimiento

Al igual que en todas las experiencias realizadas hasta ahora,

el Cr VI ha tenido efectos negativos sobre el crecimiento en todos los
rganos estudiados, observndose una graduacin desde la raz hasta las

1
1

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-146-

ms jvenes hojas trifoliadas estudiadas. Mientras que en estas ltimas

el efecto fue negativo y patente, sin observarse en ningn momento un in_
cremento en el peso de ninguna de ellas, en el resto de rganos el comportamiento es bien distinto (tablas 43,44 y 45 y figuras 27,28 y 29).
En la raz, tallo y hojas inferiores es posible observar un incremento,
aunque no significativo, en el peso fresco de todos los rganos estudiados salvo la 3a y 4a hojas trifoliadas. Por otra parte, parece existir un incrmento en el peso fresco en todos los rganos estudiados salvo a partir de la 2a hoja trifoliada inclusive, en lo que respecta a la
ms elevada concentracin de cromo empleada (1,5 ppm Cr VI).
Por lo que respecta al rea foliar, se obseerva un incremento
parecido en el crecimiento de las hojas inferiores para las concentraciones ms bajas de Cr en el medio, mientras que en la priemera hoja tri_
foliada no aparece dicho efecto ya (tabla 45 y figura 29). La reduccin
porcentual es mayor en la primera hoja trifoliada, indicando claramente
un mayor efecto del cromo sobre el crecimiento de stas ltimas.
Tal y como hemos podido comprobar, los dos tipos de hojas difieren en su comportamiento, tal y como ya habamos visto en anteriores
experiencias. A lo largo de este trabajo es posible constatar una difere
ca de comportamiento entre los distintos tipos de hojas, tanto si se
trata de crecimiento como el resto de los parmetros estudiados, como n_u
tricin mineral o relaciones hdricas. Estos no son los nicos casos que
es posible encontrar. As el incremento en el crecimiento a dosis bajas
de Cr ya fue descrito por Bertrand y Haas (11,40). En esta misma experiencia volveremos a encontrar ejemplos de comportamiento diferencial
entre los distintos tipos de hojas presentes en la planta.
Otro de los efectos observados, el incremento en peso y rea
folialr para las bajas concentraciones de cromo en el medio parece estar
ligado con comportamientos anmalos de otros parmetros debido a excesos
de Cr que pueden provocar desequilibrios en el estado nutritivo y funcio_

1
1
1
1
1
1

I
1
1

IH

1
1
1

"

1
1
1
1

-147-

nal de la planta sin daar seriamente su funcionamiento. Incluso pudiera

ser que el nivel ptimo de cromo se halle en estos valores normales y
que en condiciones control las plantas se encuentre en un estado defici_
tario de este metal.
4.3.3

Efectos sobre el contenido hdrico relativo, potencial hdrico , potencial osmtico y potencial de presin bajo condiciones de suministro hdrico adecuado y moderado stress osmtico

Al igual que en todos los apartados anteriores, las plantas

control y las plantas tratadas con las distintas concentraciones de Cr
VI en el medio, mostraron un comportamiento distinto, presentando adems diferencias entre las hojas juveniles y la primera hoja trifoliada.
En esta experiencia fue posible observar un claro estmulo del crecimiej
to a bajas concentraciones de cromo en el medio, las cuales no provocaron
sntomas visibles de toxicidad. Junto a esta observacin es posible cojn
probar que se produce una marcada disminucin en el potencial de presin
a la vez que el potencial osmtico se incrementa en la primera hoja tr
foliada. A pesar de ello el^Pw y el CHR disminuyen con la concentracin
de cromo en el medio (tablas 46 a 49 y figuras 30 y 31), hecho indicat
vo de que aunque el potencial osmtico se incremente, la disminucin del
fp compensa con creces este incremento. Este hecho, junto con la observa
cin del incremento del crecimiento hace pensar que la planta ha seguido creciendo, pero al mantener una tasa de transpiracin elevada (tabla
54 y figura 34) ha disminuido el CHR a la vez que ha disminuido elfp.
No se puede hablar en este caso de un ajuste osmtico puesto que en l,
segn propone Wynn Jones (124), se producira una disminucin del poten_
cial osmtico que permitira mantener un potencial de presin suficientemente elevado como para mantener los estomas abiertos y as continuar
con una elevada tasa de intercambio gaseoso que permitira mantener una
elevada tasa fotosinttica y productividad, a la vez que el crecimiento

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-US'

tambin se mantendra. En nuestiwcaso, hemos observado el mantenimiej

to de una elevada traspiracin y un alto grado de apertura estomtica.
Esto, sumado a los efectos que sobre la elesticidad de la pared celular parece tener el cromo, incrementndola a bajas concentraciones del
metal, podra haber dado lugar al incremento del crecimiento observado.
Cuando estas plantas fueron sometidas a un moderado stress osmtico se
mantuvo el potencial de presin mientras que disminuyeron el i w y el r/7,
pudndose hablar en este caso de un ajuste osmtico, aunque no fuera
igual para los dos tipos de hojas estudiados puesto que mientras que
este comportamiento se produjo en las hojas inferiores, no fue a s pa_
ra la primera hoja trifoliada, la cual siempre ha demostrado ser ms
afectada por el cromo al ser expuesta al metal ya desde los inicios
de su desarrollo, cosa que no ocurre en las hojas inferiores.
En el resto de tratamientos, el cromo provoca una disminucin de ir e incremnto de Tp entre los distintos tratamientos y las plaj
tas control, en las hojas inferiores. Estas diferencias son significa_
tivas entre el control y los distintos tratamientos, pero no en stos
entre s. Tambin es posible observar una disminucin en el i w y del
CHR en la primera hoja trifoliada. Todos los tratamientos, excepto el
de mayor concentracin de Cr VI en el medio, tienen un valor de ' w sja
perior al control en las hojas inferiores y el mismo comportamiento se
da en las hojas trifoliadas en las que, adems, hay una reduccin del
^p significativa y un incremento del Vi respecto del valor mostrado por
el control para la ms baja concentracin de cromo empleada. El alto
valor del T p (mayor que el control en el tratamiento con mayor concen^
tracin de cromo en el medio) parece indicar la presencia de una mayor
turgencia en las hojas de las plantas tratadas respecto a las no tratadas. Sin embargo, al ser sometidas a un moderado stress osmtico se
produjo una disminucin de la turgencia,hecho que parece relacionado
con el mayor grado de apertura estomtica y transpiracin mostrado por
estas plantas bajo condiciones hdricas adecuadas. En ambos tipos de

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-149-

de hojas el CHR disminuye a medida que se incrementa la concentracin

de cromo en el medio.
Cuando las plantas fueron sometidas a un moderado stress o
mtico se produjeron cambios sustanciales en el comportamiento de las
relaciones hdricas. Es posible observar que se produce un comportamiej
to parecido entre las hojas inferiores y la primera hoja trifoliada
(tablas 48 y 49 y figuras 30 y 31). En las hojas inferiores apenas hay
variacin del potencial osmtico, mientras que en la primera hoja tri_
foliada se produce una disminucin seguida de un incremento no signify
cativo a medida que se incrementa la concentracin de cromo en el medio. En condiciones de stress osmtico se siguen produciendo anomalas
de comportamiento para las menores concentraciones de cromo empleadas,
al igual que ocurra en ausencia del mismo y en anteriores experiencias
(experiencia II). El CHR se comporta de distintamanera en las hojas in
feriores y la primera hoja trifoliada, aunque en este caso, las varia_
ciones observadas no son significativas, de ah que el tipo de evolucin parezca un comportamiento al azar. Se ha producido un proceso de
estabilizacin que tambin se produce en otros parmetros estudiados
(tablas 50 a 54 y figuras 32 a 34).
De los datos obtenidos en esta experiencia y en experiencias
anteriores podemos considerar la hiptesis de que el cromo acta de diferente forma segn la concentracin a que se halle en el medio. A bajas
concentraciones el Cr no provoca sntomas de toxicidad e incluso estimu_
la el crecimiento y determinados procesos fisiolgicos. A altas concentraciones se producen efectos claramente fitotxicos ms o menos caracte_
rsticos, todos ellos ya descritos anteriormente. Sin embargo, podra exis_
tir una tercera zona de efectos, en los que, a pesar de que podramos
hablar de fitotoxicidad, tambin se manifiesta una suspensin del desarro_
lio, recuperable, en la que no se desarrollan nuevos rganos pero se man_
tienen los ya formados. Este es el caso de la experiencia anterior (experiencia II)en la que las plantas tratadas con 10 ppm Cr VI al ser trans_

1
1
1
1
1
.
1
i
1
1

1
I

1
1
1
1
1

-150-

plantadas a una solucin nutritiva control, sin cromo, reanudaron su de_

sarrollo normal y completaron su ciclo vital con un retraso de un mes
respecto a las plantas no tratadas y sembradas a la vez.
4.3.4

Efectos sobre la densidad estomtica, grado de apertura estomtica y transpiracin

Tanto en las hojas juveniles como enla primera hoja trifoliada

es posible observar un incremento en la densidad estomtica, siendo mayor el incremnto en la primera hoja trifoliada, hecho relacionado con el
mayor efecto sobre el crecimiento (tablas 50 a 53 y figuras 32 y 33). Co_
mo era de esperar, los valores son muy parecidos tanto en las plantas an_
tes de ser sometidas a stress osmtico como cuando son sometidas a dicho
stress para un mismo tratamiento de Cr en el medio, este hecho es explicable porque las hojas ya son maduras al efectuarse dicho tratamiento
y no se ha producido ni nueva diferenciacin de estomas ni una reduccin
significativa en el rea foliar al .ser sometidas las plantas a stress qs_
mtico. Un hecho interesante a observar es el tipo de comportamiento de
la densidad estomtica, que tiende hacia valores constantes. Esta obse
vacin es explicable por dos causas: la primera de ellas es que la redu
cin del rea fooliar disminuye de forma exponencial, llegndose a valo_
res mnimos a partir de los cuales la disminucin se hace mnima aunque
aumentemos considerablemente la concentracin de cromo en el medio. El
segundo hecho es la observacin de efectos sobre la diferenciacin est
mtica para las mayores concentraciones de cromo (fotgrafas 7 y 8) , es_
pecialmente por lo que respecta a la primera hoja trifoliada. A la mayor
cocnetracin de cromo empleada es posible observar estomas en estados pr_
marios de diferenciacin estomtica. Este hecho ha sido confirmado por
observaciones con microscopa electrnica de barrido por la Dra. M.D.
Vzquez en nuestro mismo laboratorio (comunicacin personal), en plantas
tratadas con cromo. Esto explicara la reduccin en la densidad estom_

.. -

- -.--

-- - *- -- -

''

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-151-

tica para las mayores concentraciones de cromo en el medio, especialmen_

te en la primera hoja trifoliada, la cual es ms afectada por el cromo
en todos los aspectos.
Donde s es posible observar diferencias es en el grado de aper_
tura estomtica, medido, a falta de un mtodo mejor y ms fiable, a par_
tir de la proporcin de estomas claramente abiertos frente al nmero to
tal de etomas. Hay varios hechos observables. En primer lugar se observa
que hay un comportamiento diferencial entre las hojas inferiores y la ..
primera hoja trifoliada. En las hojas inferiores se observa una reduccin
en la proporcin de estomas abiertos a medida .que se incrementa la cocen_
tracin de cromo en el medio, mientras que en la primera hoja trifoliada,
si bien hay una disminucin inicial respecto al control, se produce un
cierto incrmento, aunque no significativo.
Tanto la disminucin como el incremento no son significativos,
al contrario de lo que ocurre en las hojas inferiores, mantenindose el
grado de apertura estomtica en unos valores parecidos a lo largo de los
distintos tratamientos con cromo. Diversos autores (24,25,47) han obser_
vado una relacin directa entre el grado de apertura estomtica y el p,
siendo ste tambin nuestro caso, en donde las plantas control presentan
un p .ms alto que las tratadas y tambin un grado de apertura estomti_
ca mayor que stas. Sin embargo, cuando las plantas fueron sometidas a
un moderado stress osmtico no se aprecia claramente, aunque ello podra
ser debido a que las diferencias de apertura estomtica son bajas, a la
vez que las fluctuaciones en el p medio tambin son elevadas, no siendo las diferencias significativas entre los tratamientos de cromo, lo
cual est relacionado con el que las diferencias en la transpiracin tien_
dan a ser menores al ser sometidas las plantas a stress osmtico, tal y
como observ < Henson (47) en Penisetum americanum resistente a la sequa y que. presentaban una resistencia estomtica mayor que plantas no
tratadas. Estas plantas resistentes a la sequa mantuvieron valores el_e_

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-152-

vados y suficientes de transpiracin e intercambio gaseoso respecto a las

plantas no resistentes, que sufrieron un incremento mayor que ellas en
la resistencia estomtica al ser sometidas a dficit hdrico. Este hecho
podra estar relacionado con algn tipo de estrategia de evitacin en el que
que se minimizar el rea transpirable y el metabolismo en favor de una
menor prdida de agua, lo cual explicara el incremento de la turgencia,
tanto en esta experiencia como en la expereiencia anterior (experiencia
II) de las plantas tratadas con Cr VI, por lo que podramos reconsiderar
la afirmacin hecha por otros autores y nosotros mismos en un anterior
trabajo (7, 39) de que P. vulgaris es una especie sendible al Cr, mxime
cuando plantas tratadas con elevadas concentraciones de Cr VI en el medio fueron capaces de continuar su desarrollo normalmete al ser transfe_
ridas a condiciones similares a las de los controles, no tratados con
cromo.
Al ser sometidas las plantas a stress osmtico, el comportamieii
to tiende a ser parecido en ambos tipos de hojas, se produce una disminuci en el grado de apertura estomtica, siendo ms grande la disminucin cuanto mayor es el grado de apertura estomtica antes de ser someti_
das a dicho stress. Se observa un fenmeno por el cual el grado de ape
tura estomtica pasa a ser igual en prcticamente todos los tratamientos
con Cr VI en el medio. nicamente las hojas inferiores presentan una dis_
minucin respecto al control en todos los tratamientos sometidos al stress,
aunque dicha disminucin no sea significativa. En ambos tipos de hojas
el grado de apertura estomtica se sita entre un 40-70%, no sobrepasar^
dose este lmite, tanto superior como inferior, probablemete de bid a
que nos encontramos cerca del lmite provocado directamente por el stress
osmtico. Quiz con un stress osmtico superior se hubieran obtenido va_
lores ms bajos, aunque, con toda probabilidad se.hubiera sometido a la
palnta a un shock osmtico que hubiera provocado su marchitamiento irre_
versible, lo cual no era nuestra intencin en esta experiencia.

1
1

-153-

1
1
^B

Respecto a la morfologa de las clulas epidrmicas y estomticas, determinado mediante la tcnica descrita en el apartado 3.2.11,
es posible observar:
HOJAS INFERIORES

1
1
B

- Control (fotografas 1 y 9): Presentan clulas epidrmicas

lobuladas. Todos los estomas presentan la misma morfologa,
con clulas guarda rrionadas tpicas de las dicotiledneas.
La disposicin de los estomas es de tipo paractico o rubij
ceo. Es posible distinguir claramente entre estomas abiertos
y cerrados. Se observan tricomas unicelulares rodeados por
seis clulas en la base, tambin lobuladas al igual que el
resto de las clulas epidrmicas. Tambin es posible obsejr
var tricomas secretore.
- 0,2 ppm (fotografas 2 y 10): No se observan diferencias mo
folgicas con el control.
- 1 ppm (fotografas 3 y 11): La morfologa se mantiene parecida al control. Las cluals guarda estomticas son ms redondeadas que las del control y las clulas que rodean a los
tricomas son proporcionalmente mayores.
1,5 ppm (fotografas 4 y 12): Sigue mantenindose una estructu_
ra parecida a la anterior.
PRIMERA HOJA TRIFOLIADA:

1
1
1

- Control (fotografas 5 y 13): La morfologa es parecida a la

de las hojas inferiores, aunque parece haber una mayor proprocin de estomas cerrados.
- 0,2 ppm (fotografas 6 y 14): Morfologa parecida a la anterior. Empiezan a aparecer diferencias, sin embargo. Las cl_u
las guarda empiezan a redondearse y las lobulaciones de las
clulas epidrmicas se hacen ms suaves.

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-154-

- 1 ppm (fotografas 7 y 15): Las clulas epidrmicas son ms

pequeas que en los anteriores tratamientos. Aparecen clulas triangulares no lobuladas que parecen estomas en fase
de diferenciacin.
- 1,5 ppm (fotografas 8 y 16): Las diferencias obseervadas con
el control en el tratamiento anterior se acentan. Las c lu
las son ms pequeas y la; densidad estomtica aumenta, a la
vez que lo hace el nmero de tricomas.
Una vez sometidas las plantas a stress osmtico no se produje^
ron cambios en la morfologa.
Relaciones entre la morfologa y la tasa de transpiracin han
sido observados por otros autores (130)en plantas tratadas con Zn. En es_
ta misma experiencia observaron que se producen cambios morfolgicos en
las clulas epidrmicas y en el parnquima en empalizada, sugiriendo que
la disminucin de la transpiracin puede estar relacionada con estos caja
bios.

x
s.d.

x
s.d.

2,107
3,078

2,488

2,161

2,660
1,953
2,640b
0,677

2,220b
0,153

2 , 276a
0,329

2,109
2,163
2,647

1,742
2,320
1,547

1,869a
0,402

0,2

1,484
1,460

1,799
0,822

1,008
1,286
0,811

l,035b
0,239

0,502

1 ,069
1,085
0,885b
0,332

0,547

1,453a

1,735

1,5

0,326
0,247
0,508

0,765

0,220
0,205
0,066

0,164ab

0,617
0,721
0,448

0,595b

0,138

0,546
0,976

0,761ab
0,304

0,085

1,5

1
0,2

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

l,261b
l,303b

2,507a

0,887

1,413

1,018

1,429

1,5

3,022a

HOJAS INFERIORES

4,471a
1,320

7,409a
2,040

5,058
8,714

3,399
4,068

2,335

2,622

3,307

8,455
2,045
2,280
2,326

0,2

TALLO

1,5

5,955

'"'

0,2-

RAZ

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

diferentes tratamientos

t
Ln

0,085

0,097

0,099

0,049

0,341

0,381

0,287b

s.d.

0,164c

1,408a

0,118e

l,261b

1,922a

0,066

0,315

1,484

1,797

0,071

t
t*
Ul

0,179

1,338

0,115

0,832

1,619

0,205

0,367

1,478

0,220

0,168

1,5

1,333

2,350

0.2

1,5

0,2

TERCERA Y CUARTA HOJAS TRIFOLIADAS

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

SEGUNDA HOJA TRIFOLIADA

Tabla 43 (Continuacin)

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-157-

-. FIGURA 27 .Peso fresco en la experiencia III

2.5

1.5

3.5
8.5
1.5

B: TALLO
y= 2.422 + 1,21 x - 4,34 x 2 + 2,01 x 3
r'= 0,814

A: RAIZ
2
3
y= 4,47 + 22,5 x - 42,63 x + 17,87 x
2
= 0,797

2.5
1.5

1.3

e.s

-i

e.s

C: HOJAS INFERIORES ' V

y= 1,87 + 3,50 x - 8,05 x 2 + 3,56 x 3
r 2 = 0,820

8.5

E): PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

1,34 - 1,80 x + 0,97 x 2
r 2 = 0,500

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppra)

l.S

0,022

s.d.

0,089a
0,036

0,014

0,048
0,116
0,104

0,192b

0,202

0,150
0,114

0,140a

0,183

0,154

0,002

0,120b

HOJAS INFERIORES
0,2

0,055

s.d.

0,294a
0,071

0,181a

0,176

0,113a
0,036

0,079

0,130
0,137

1,5

0,140a
0,015

0,156
0,133
0,130

0,118

0,306
0,217
0,357

0,239
0,120

0,121
0,122

1,5

0,2

RAZ

0,182ab
0,029

0,128a
0,044

0,249

0,171
0,129
0,084

0,010

0,242b

0,236

0,2.

0,078a
0,002

0,075
0,079
0,079

0,074a
0,044

0,105
0,043

1,5

0,151b
0,034

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,620a
0,018

0,180
0,212

0,187
0,222

0,257
0,210
0,271a
0,070

0,166

0,154

0,210

0,347

0,175
0,112

1,5

0,2

TALLO

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

distintos tratamientos

Tabla 44: Peso seco, expresado en R, de las diferentes partes de las plantas sometidas a los

Ul
CO

0,2

0,118
0,314
0,153

0,195a
n.ins

0,258

0,133

0,150

0,180a
n . nfift
0,113a
n.197

0,203

0,023

0,136a
n . non

0,072

0,199

1,5

0,157a
ft ft9fi

O OA6

0,175
0,139

n noA

O OA1

0,2

1,5

TERCERA Y CUARTA HOJAS TRIFOLIADAS

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

SEGUNDA HOJA TRIFOLIADA

Tabla 44; (Continuacin)

I
t_n

-160-

-. FIGURA 28 .Peso seco en la experiencia III

B.3

e. 25
8.23

e.2

e.is

e.is
e.s

i.s

A: RAZ

B.5

1.5

B: TALLO

e. is

8.1

e.as

e.s

C: HOJAS INFERIORES

-F1.5

1.5

D: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: Peso (g)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

s.d.

x
o H

89,11a

107,16a
An LL

54,71b

in nfi

45,58b
IR AS

124,27a
91 Afi

6,12

6,73

1,5

102,26

0,2

Q 69

34,91b

24,14

TERCERA HOJA TRIFOLIADA

12537

131,36
118,08

126,66

SEGUNDA HOJA TRIFOLIADA

96,66a
97 sn

RA R7

186,38

60,82

44,72

52,29

148,95

69,82

37,93

46,74

133,34

64,83

57,36

109,82

124,78

54,57

42,66

24,08

114,04

95,38

34,21

0
125,31

0,2
1

1,5

PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

0,2

HOJAS INFERIORES

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

tos

1,5

1,5

Tabla 45; Area foliar, expresada en cm a , de las plantas sometidas a los diferentes tratamien-

-162-

-. FIGURA 29 .Area foliar en la experiencia III

58

i.s

e.s

A: HOJAS INFERIORES

iee

188

68

e.s

B: PRIMERA HOJA TRIFOLIADA

Ordenadas: rea foliar (cm2)

Abscisas: Concentracin de cromo en el medio (ppm)

1.5

x
s.d.

x
s.d.

0,510a
0,151

0,48
0,52
0,40
0,467a
0,061

0,24

0,353a
0,115

0,35
0,47

0,65
0,53
0,35

0,2

fp (MPa)

-0,22a
0,04

-0,25a
0,05

-0,30
-0,24

-0,24

-0,26a
0,09

-0,20

-0,24

-0,36
-0,20
-0,22
-0,18

0,2

f w (MPa)

0,447a
0,047

0,50
0,43
0,41

1,5

-0,27a
0,03

-0,28

-0,30
-0,24

1,5

97,64a
4.09

100,00
100,00
92,92

-0,61a
0,07

-0,69

-0,60
-0,55

Vl

95,44a
2,77

92,54
98,07
95,70

0,2

CHR

-0,69a
. 0,10

-0,72
-0,76
-0,58

0,2

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

92,34
92,34a

95,18
96,12
85,71

d)

-0,76a
0,15

-0,59

-0,85
-0,83

(MPa)

89,06a
89,06a

82,003
93,46
91,72

1,5

-0,72a
0,07

-0,69

-0,80
-0,67

1.5

Tabla 46: Parmetros hdricos en las hojas inferiores de las plantas sometidas a los distintos tratamientos bajo suministro hdrico ptimo

LO
i

0.2

0,30
0,31
0,31b
0,007

0,50

0,52

0,51a

0,014

s.d.
0,099

0,37b

0,44

0,30

T p (MPa)

0,03

0,014

s.d.

0,00

-0,26

-0,22

-0,24a

-0,22

-0,22

-0,22a

-0,20

-0,22

-0,21a

0,2

V w (MPa)

0,007

0,64c

0,64

0,63

1.5

0,04

-0,29b

-0,32

-0,26

1,5

2,30

98,02a

95,49

98,57

1,91

93,93a

93,26

96,09

0,2

0,021

-0,515b

-0,73a
0,014

-0,53

-0,50

0,2

6,99

92,39ab

100,00

86,26

CHR (%)

0,13

-0,61b

-0,70

-0,52

fn (MPa)

-0,74

-0,72

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

distintos tratamientos balo suministro hdrico ptimo

3,77

86,87b

88,21

82,61

1,5.

0,05

-0,93c

-0,96

-0,89

1.5

Tabla 47: Parmetros hdricos en la primera hoja trifoliada de las plantas sometidas a los

ii
.pi

0,276

0,17

0,56a

0,16
0,25b

s.d.

0,61

0,15

0,23

0,43ab

0,66

0,44

0,62

0.2

0,13

iV P (MPa)

0,012

0,04

0,03

s.d.

-0,29a

-0,35a

-0,29a

-0,32

-0,30

-0,38

0,26

-0,30

-0,28

-0,30

-0,28

0,19
0,44b

0,44

1.5

0,02

-0,30a

-0,28

-0,28

-0,36

1.5

-0,32

0,2

1w (MPa)

0,16

0 ,29

98,23

88,76

0,2

2,53

6,04

96,47
100,00
97,19ab 95 ,66a b

100,00

95,09

0,31

88,42
93,07b
4,65

1 ,62

93,07

87,71

1,5

99 ,04
97 ,47a

97 ,56

95 ,80

CHR (%)

-0,63b

-0 ,75a

-0,60b

-0,60ab

0,18

-0,51

-0,34

-0,74

-0 ,89

-0,45
n ^4

-0,51

-0 ,94

-0,80

1.5

-0,94

(MPa)

0.2

*f-n

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

tos tratamientos,, bajo stress osmtico

Tabla 48; Parmetros hdricos en las hojas inferiores de las plantas sometidas a los distin-

s.d.

s.d.

-0,34

-0,26

0,67

0,63d
0,057

0,60

0,61c
0,014

0,37a
0,05

0,33b

0,36

0,59

0,62

0,29

0,37

1,5

p (MPa)

0,2

0,00

0,06

-0,18b

-0,34a

-0,18

-0,38

0,07

-0,18

1,5

-0,30

W (MPa)

0,09

-0,30a

-0,24

-0,38

-0,32a

0,2

-0,81d
0,06

-0 ,95c

0,04

-0 ,62b

0 ,12

92,81a

93 ,63a
2,38
6,03

89,34a

2 ,29

1,68

93,79

93 ,96

100 ,00
96,29

97 ,91a

90,87

95 ,83
98 ,26
85,63

86,09

93,76

1.5
95 ,47

_0,2

CHR (X)

-0,85

-0 ,70

-0,77

-0 ,92
-0 ,98

_0 ,53

1,5

0,2

V* (MPa)

!_
91 ,10
0

0,00

-0,63a

-0,63

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

distintos tratamientos, baio stress osmtico

Tabla 49; Parmetros hdrico en la primera hoja trifoliada de las plantas sometidas a los

1
1
1
1
'

-167-

-. FIGURA 30 .Parmetros hdricos en la experiencia III

(Hojas inferiores)

._

Fl

'

1
^

O O ~ "
.
3 3 K) l\)

l * 1 *
lia
S"

en en

."_"

~-~

"_""_

:-:>i-

*^*^

3
<-*

7 "D T) TI TI TI TI
O 13 TI D T" 13 T)
- 3 3 3 3 3 3

."_
-~:-

EE
=

>:: EE ---

\ j dJ OJ
Q

:-::

V.

V.

3 KJ M
<-*

zz

EE

\ - -0,40
"-"-

"-"-

EE
%.

:-::
: - 0
V.

en en

O O "0 "D "D T) "0 TI

3 3 3 3 3 3

A.: POTENCIAL HIDRICO (MPa)

E=

EE

:-:-~.
:-:-

er

zz:

zs >::
:-:=
-:-:
-~
- -0,18
' ' v.ir. z= -~-" -~:
.- >:- = ;-: El
^z :-: ~-_ :-:- = -i-i E= ---:
0
o O CS> O " , .

- -0,80

- -0,35
~_~_

JB: POTENCIAL OSMTICO (MPa)

i- 0 , 6 0

'

- 100

I
I
!

I
I
I

:- 0^,30

m
r-"

>0 , 5 0

.-:

?L"-*1

i- o
o o - 3

hO NJ

en en

" > T) T) T) T3 TI T)
0 0 T) TI TI TI TI TI
3 3 3 3 3 3

C: POTENCIAL DE PRESIN (MPa)

O O - 3 3 hO M

en en

"5->T)TIT>T)TiTI
O OT3TI"DT1TITI
3 3 3 3 3 3

D: CONTENIDO HIDRICO RELATIVO (7,}

Sin stress
B a j o stress

I
i
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-168-

-. FIGURA 31 .Parmetros hdricos en la experiencia III

(Primera hoja trifoliada)
1- -1,0

- -0,34

EE

F3

EE

:-:-

- -0,16

EE
EE

O
O

O
O

C*

f*

CD GD >- "

3 M M

"5 7
O O

o o - -

UI OI

13 13 T) T) T) TI
TI"D13TIT)Ti
3 3 3 3 3 3

K) NO

;-;-

en en

0 0 ~ D " D T I " D " D " 0

- 3 3 3 3 3 3

A.: POTENCIAL HIDRICO (MPa)

E: POTENCIAL OSMOTICO(MPa)

0,70

-100

:-:- 50

. 0,35

O
O O O C D

<*

r*

K) K)

"''

Ul Ul

" ' J T J T I ' D X I T l ' D

O O T I T I T I T I T ) T )
3 3 3 3 3 3

: POTENCIAL DE PRESIN (MPa)

o o
3 3 M NO

en en

J -j Tl "D 13 13 "O T)
O O"D13T1X1"DT)
- 3 3 3 3 3 3

I): CONTENIDO HIDRICO RELATIVO (%)

Sin stress
B a j o stress

s.d.

x
s.d.

217,2
217,2

135,8
326,2
326,2

345,8

23,89

292,33e

283,9
283,9

273,8

1,5

9,48

9,40a

11,0

16,1
2,7

13,43ab
7,00

7,65

21,0
7,2
12,1

15,47ab

11,1
24,3

0,2

1,83

22,03b

21,4

20,6
24,1

1,5

Porcentaje de estomas cerrados

194, 93b 326, 9c

40,40
18,56

219,3

125,8

130,8a
7,07

0.2

Densidad estomtica (estomas /mma)

90,50a
9,48

83,8
97,2

86,47a
7,00

87,8

75,8

84,50a
7,53

78,9
92,7

88,9
88,8

0,2

63,40b
6,12

56,7

68,7
64,8

1,5

Porcentaje de estomas abiertos

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

Tabla 50: Apertura y densidad estomticas en las hojas inferiores de las plantas sometidas a
los diferentes tratamientos bajo condiciones ptimas

I
cr>
i
t"

;.d.

231,2b
2,76

174,4a
19,63

47,95a
i 9n

36,37a
i? a

32,7

25,1

0,2

47,1
48,8

51,3

46,5a

46,5

36,6a

36,6

1.5

Porcentaje de estomas cerrados

466,3c

466,3

63,53a
13,48

229,2
233,1
397,4d

48,6
67,2
74,8
55,95b
4,45

52,8
59,1

53,4b

53,4

63,3a

68,3

1,5

397,4

197,4
164,6
162,3

0,2

1.5

0,2

Porcentaje de estomas abiertos

Densidad estomtica (estomas/rom2)

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

diferentes tratamientos bajo condiciones ptimas

Tabla 51; Apertura y densidad estomticas en la primera hoja trifoliada de las plantas some-

o
i

24,4
9,4

186, 8b

193,4

180,1

95,5

343, le

410,6

275,5

1,5

12,73

10,32

s.d.

51,3

26,0
42,3a

33,3

40,6

33,3a

0,2

52,8

39,3

2,5

17,89

40,2a

27,5

42,8

41,1a

1 .5

Porcentaje de estomas cerrados

7,5

207, 9b

190,7

172,2

166,9a

225,2

161,6

s.d.

0,2

Densidad estomtica (estomas/mm3)

10,3

66,6a

73,9

59,3

12,7

57,6a

48,6

66,6

0,2

2,47

58,9a

60,6

57,1

17,9

59,8a

47,1

72,4

1,5

Porcentaje de estomas abiertos

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

los diferentes tratamientos balo stress osmtico

Tabla 52; Apertura y densidad estomicas en las hojas inferiores de las plantas sometidas a

x
s.d.

s.d.

211,9

221,9b

211,9
219,9

215,9a
.5,7

243,7b
29,9

222,5
264,9

381,5c

381,5

1,5

51,70b

51,7

43,0
71,9

57,45a
20,44

0.2

54,75ab
7,42

49,5
60,0

63,00a

63,0

1,5

Porcentaje de estomas cerrados

0,2

Densidad estomtica (estomas/mm2)

42,45ab
20,4

56,9
28,0

0_

48,2a

48,2

0,2

36, 9b

36,9

50,4
40,0
45,2a
7,4

1.5

Porcentaje de estomas abiertos

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

tidas a los diferentes tratamientos bajo stress osmtico

Tabla 53; Apertura y densidad estomticas en la primera hoja trifoliada de las plantas some-

1
1
1
I

-173-

-. FIGURA 32,.Datos estomticos (Hojas inferiores)

- 350

=
--

1
;-;

f-ar-s

;-:-

:-:-

-._
._
._

--

._
_
--

._

-_

:-:-

= ;-:- - 175

-:-:

~~

-"
- - .

- - - - -

- 0

o n o s - -'^
o3 o3 -w ~M
~en "en

<-> r*
-J "5 T) T) T) TI "0 T)
O O T > T I T I T ) " O T I
3 3 3 3 3 3

1
= Sin stress
gg B a j o s t r e s s

P=

A:

DENSIDAD ESTOMTICA (EST/mm 2 )

1
1-90

1
1

=
=

-:-

1
1

-- -

~_~_

= S:>:-

___

45

z^
---- o

O (~~) Q O >* !
O O " "
" ~
3 3 M l\)
OI UI
<-*

->:

r*-

1 7T)T)TIT3TITI
O O T ) - D - a T 3 T i - D
3 3 3 3 3 3

B. : GRADO DE APERTURA ESTOMTICA (%)

1
1
1

>

-,...-.-

.-.-, .-.-.-.x>-.-v-vuv-.-vo.--<;ggj!-^ie^a:

1
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-174-

-. FIGURA 33 .Datos estomticos (primera hoja trifoliada)

-500

h 250

o o - 3<-* o-3 M M

en en

O O TI ~0 T) "O "O "O

3 3 3 3 3 3

Sin stress
B a j o stress

A: DENSIDAD ESTOMTICA (EST/mm 3 )

/u

EE

pr

= :-;-

=
prr

= ---_

:-:- =

:-: = -:-;
:

o o ^ "
3 3 M M
r*

<+

:-:-

- .35

- 0

- N"
en en

"5 7 X) T3 T3 t) "D TI
O O - a - D T D - D - O T I
3 3 3 3 3 3

B: GRADO DE APERTURA ESTOMTICA (%)

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-175-

Tabla 54; Valores de transpiracin total, expresados en mgHpO/gPF x min,

en las plantas sometidas a los distintos tratamientos

Concentracin de cromo en el medio (ppm)

CONDICIONES PTIMAS
O

0,2

1,5

3,195
2,483
1,483

3,782
2,405
3,921

0,521
1,652
0,515

1,936
1,236
2,047

3,369a
0,838

0,896b
0,655

l,740c
0,440

x
2,387ac
s.d. 0,860

BAJO STRESS OSMTICO

x
s.d.

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1.5

1,802
1,622
1,502

0,971
1,038
1,040

1,410
1,253
1,222

0,712
0,617
0,649

1,642a
0,151

l,014b
0,036

l,295c
0,101

0,659d
0,048

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-176-

-. FIGURA 34 .-

Transpiracin total (mg HJ3/g PF x min)

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Bajo stress

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-177-

FOTOGRAFA 1.- Hoja inferior control bajo condiciones ptimas.

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FOTOGRAFIA 2.- Hoja inferior del tratamiento con 0,2 ppm Cr VI,
bajo condiciones hdricas ptimas.

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-178-

FOTOGRAFIA 3.- Hoja inferior del tratamiento con 1 ppm Cr VI, bajo
condiciones hdricas ptimas

FOTOGRAFA 4.- Hoja inferior del tratamiento con 1,5 ppm Cr VI bajo
condiciones hdricas ptimas.

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-179-

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FOTOGRAFIA 5.- Hoja trifoliada control bajo condiciones hdricas pt

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FOTOGRAFA 6.- Hoja trifoliada del tratamiento con 0,2 ppm Cr VI bajo
condiciones hdricas ptimas.

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-180-

FOTOGRAFIA 7.- Hoja trifoliada del tratamiento con 1 ppm Cr VI bajo

condiciones hdricas ptimas.

FOTOGRAFA 8.- Hoja trifoliada del tratamiento con 1,5 ppm Cr VI bajo
condiciones hdricas ptimas.

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-181-

FOTOGRAFIA 9.- Hoja inferior control bajo moderado stress osmtico

FOTOGRAFIA 10.- Hoja inferior del tratamiento con 0,2 ppm Cr VI bajo
moderado stress osmtico.

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-182-

FOTOGRAFIA 11.-Hoja inferior del tratamiento con 1 ppm Cr VI bajo mode_

rado stress osmtico.

FOTOGRAFIA 12.- Hoja inferior del tratamiento con 1,5 ppm Cr VI bajo
moderado stress osmtico.

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-183-

FOTOGRAFIA 13.- Hoja trifoliada control bajo moderado stress osmtico

FOTOGRAFIA 14.- Hoja trifoliada del tratamiento con 0,2 ppm Cr VI

bajo moderado stress osmtico.

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FOTOGRAFA 15.- Hoja trifoliada del tratamiento con 1 ppm Cr VI baja

moderado stress osmtico.

FOTOGRAFIA 16.- Hoja trifoliada del tratamiento con 1,5 ppm Cr VI bajo moderado stress osmtico.

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I

-185-

1.- Se ha considerado con un carcter terico general la to_

xicidad del cromo para los vegetales y su relacin con el crecimiento y las relaciones hdricas.
2.- ..Se ha medido los niveles de nutrientes en diferentes rganos de
Phaseolus. vulgaris L. con la intencin de relacionar los transtornos del crecimiento con los desrdenes en la nutricin de- esta
especie.
3.- El Cr provoca transtornos del crecimiento a elevadas concentraci
ns, reducindose la productividad de las plantas tratadas con es_
te metal, tanto en las raices como en la parte area.
A.- Existe una relacin lineal positiva entre el suministro de Cr y
el contenido en el mismo en las plantas tratadas con este metal.
P. vulgaris, puede, por tanto, considerarse una especie acumuladora de cromo.
5.- Es posible observar la presencia de una especie de barrera de trans_
locacin del cromo desde la raz hacia la pacte area, manifestada por la elevada relacin Cr raz/Cr parte area.
6.- Las hojas inferiores de las plantas tratadas con cromo parecen a
tuar como sumideros del mismo, puesto que su contenido en el metal
es mayor que en el tallo.
7.- Los efectos conjuntos del cromo sobre el P y el Fe, manifestados
por una drstica reduccin en el contenido en Fe en la primera ho_
ja trifoliada y una disminucin en la relacin Fe/P estn de acue
do con la clorosis observada en la primera hoja trifoliada de las
plantas tratadas con cromo.
8.- El cromo parece presentar efectos sobre la translocacin de P, Na,
Ca y Mn, sobre la absorcin de K, Fe y Mo y no parece presentar
efectos sobre el Mg, Zn y Cu.

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I
I
I
I
I
I
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I
I
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I
I
I
I
I
I

-186-

9.- El cromo afecta tanto al i w, ' p y 'H como al CHR, producindose

diferencias de comportamiento entre las hojas inferiores y la pri_
mera hoja trifoliada.
10.- Otro^ parmetro., afectado: por el cromo es la elasticidad de las
paredes celulares, tambin de distinta forma en las hojas inferiores y la primera hoja trifoliada. Mientras que en las primeras
se produce una disminucin enla elasticidad, en la segunda se pro
duce un incrmento.
11.- En relacin con los cambios de elasticidad, el punto de prdida
de turgencia se modifica de tal manera que llega a ser imposible
de calcular en la primera hoja trifoliada con los mtodos empleados enesta experiencia.
12.- Las diferencias observadas en los dos tipos de hojas estudiados
podran ser debidos a diferentes condiciones de exposicin al cr
mo. Mientras que las hojas inferiores ya se hallan desarrolladas
antes de ser expuestas al metal, la primera hoja trifoliada est
expuesta al mismo desde el inicio de su desarrollo.
13.- El efecto del cromo es distinto segn el tipo de cultivo empleado,
debindose ello a la capacidad de adsorcin de los distintos sustratos y siendo el efecto ms fuerte en cultivo hidropnico lqu
do.
>
14.- El cromo, a bajas concentraciones, puede provocar un estmulo del
crecimiento probablemente debido a un incremento en los solutos
en la vacuola que incrementaran el f p, relacionado con el crecirmiento por elongacin.
15.- Tambin es afectada la transpiracin por el cromo, disminuyendo
al incrementarse la concentracin de cromo en el medio. Relaciona^
do con ello disminuye el grado de apertura estomtica, que puede
relacionarse con los efectos sobre el K y sobre la morfologa y
diferenciacin estomticas.

-187-

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I
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I
I

16.- El cromo provoca un retraso enla diferenciacin de las clulas,

tanto epidrmicas como estomticas en las hojas trifoliadas de las
plantas tratadas con este metal, el cual no es irreversible como
pudo comprobarse por el reinicio del desrrollo acometido por pla_n
tas tratadas con elevadas concentraciones de cromo y pasadas a
condiciones ptimas, sin el metal.
17.- Como consecuencia del punto anterior, creemos que sera rvisable
la afirmacin de que P. vulgaris sea una especie sensible al cromo,
puesto que a elevadas concentraciones del metal entra en un
do de no desrrollo reversible.

1
1
1

-188-

B I B L I O G R A F A

1)

ALLEN, S.E..GRIMSHAW, H.M., PARKINSON, J. A.: Chemical analysis of

ecological materials. Blackwell, Oxford (1974)

2)

ANDRZJEWSKI, M.: Effect of chromium application on yields of several

plants species and on the chromium content of soil. Roznik Nauk Roln
czych 7 A, 75-97. (1971)

3)

AUSTENFELD, F.A.: The effect of Ni, Co and Cr on net photosyntesis of

primary and secondary leaves of Phaseolus vulgaris L. Photosynthetica, 13: 434-38 (1979)

4)

BAETJER, A.M.: Chromium. National Academy of Sciences. Washington D.

C., 155 pp. (1974)

5)

BARANOWSKA, H., EJCHART, A., PUTRAMENT, A.: Manganese mutagenesis in

yeast. V. On mutation an conversion induction in nuclear DNA. Mutt.
Res. 42: 343-45 (1977)

6)

BARBER, S.A.: Influence of the plant root on the ion movement in soil.
In "The plant root and its environement" . E.W. Carson (d.), 525-64.
Charlottesville Univ. Press. Virginia (1974).

7)

BARCEL, J., POSCHENRIEDER , CH., GUNSE, B.: Effect of Cr VI on mineral element composition of bush beans. J. Plant Nut. j8_ (3), 211-17
(1985)

8)

BARRS, H.D., WEATHERLEY, P.E.: A reexamination of relative turgidity

technique for estimating water deficit in leaves, Australian J. of
Biol.,Sci. 5: 413-28 (1962)

9)

BARTLETT, R.J., KIMBLE, J.M.: Behaviour of chromium in soils: I. Tri^

valent forms. J. Environ. Qual. 5. (4), 379-88 (1976)

10)

BARTLETT, R.J., BRUCE, J.: Behaviour of cromium in soils: III. Oxida^

tion. J. Environ. Qual. 8.(1), 31-35 (1979)

1
i

^m

1
1
1
1

1
1
1
1
1
1
1
.

-189-

11)

BERTRAND, D., WOLF, DE A.: Ncessit de 1' oligo-lment chrom pour la

culture de la pomme de terre. Compte rendu hebdomadaire des sances
de l'Acadmie des Sciences. Srie D, Paris, 266: 1494-1495 (1968).

12)

BLAS, L.: Qumica toxicolgica moderna. Ed. Aguilar S.A. Madrid (1955)

13)

BOYER, J.S.: Leaf enlargement and metabolic rates in corn, soybean and
sunflower at various leaf water potentials. Plant Physiol. 46; 233-35
(1970)

14) BRAMS, E. A., FISKELL, J.A.: Copper accumulation in citrus roots and
desorption with acid. Soil Sci. Soc. Am. Proc. 35, 772-75 (1971)
15)

BROWN; J.C., HOLMES, R.S., TIFFIN, L.O.: Hypothesis concerning iron

chlorosis. Soil Sci. Soc. Am. Proc. 23: 231-34 (1959)

16)

CAPONE, W., MASCIA, C., PORCU, M,, TAGLIASACCHI MSALA, L.: Uptake of
lead and chromium by primary producers and consumers in a polluted la
goon. Marine Pollution Bulletin, 14, 97-102 (1983)

17)

GARY, E.E., ALLAWAY, W.H.: Determination of chromium in plants and JD

ther biological materials. J. Agrie. Food Chem. 19; 1159-61 (1971)

18)

GARY, E.E., ALLAWAY, W.H., OLSON, O.E.: Control of chromium concentra

tion in food plants, 1. Absorption and translocation of chromium by
plants. J. Agrie. Food Chem. 25: 300-304 (1977)

"

1
1

19)

'

CLARKSON, D.T.: The effect of aluminium and some trivalent metal .cationson cell division in the root apices of Allium cepa. Ann. Bot.:
22: 309-51 (1965)

20)

DANIELS, R.R., STRUCKMEYER, B.E., PETERSON, L.A.: Copper toxicity in

Phaseolus vulgaris L. as influenced by iron nutrition. I. An anatomi
cal study. J. Ann. Soc. Hortic. Sci. 97; 249-54 (1972)

21)

DARRIN, M.: Chromium chemicals-their industrial use. In: Chromium, Vol

I, Chemistry of chromium and its compounds, pp. 251-261. Reinhold Pu_
blishing Corp., New York (1956)

22)

DECOCK, D.C., HALL, A., Mac DONALD, M.: A relation between phosphorus to iron and potassium to calcium in mustard leaves. Plant and
Soil \2_'

128

(I960)

1
1

. " . ' - -

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I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-190-

23)

DOBROLYUBSKII, O.K., VIKTOROVA, G.M.: The effect of chromium on the

chemical composition of the grape-vine. Agrokhimiya 10: 135-40 (1974)

24)

EAMUS, D., FENTON, R., WILSON, J.M.: Stomatal behaviour and water relations of chilled Phaseolus vulgaris and Pisum sativum L. Journal
of Experimental Botany ,_34(141): 434-41 (1983)

25)

EDWARDS, M., MEIDNER, H.: Direct measurements of turgor pressure pote

tials. IV. Naturally occurring pressures in guard cells and their relation to solute and matric potentials in the epidermis. J. Exp. Bot.
30: 829-37 (1979)

26)

EENIK, A.H., GARRETSEN, G.: Inheritance of intensivity of lettuce to

a.surplus of exangeable manganese in steam sterilized soils. Euphitica
26_, 47-53 (1977)

27)

ERNST, W.: Schwermetallvegetation des Erde. Gustav Fischer Verlag. Stutt

gart (1974)

28) ESKEW, D.C., WELCH, R.M., CARY, E.E.: Nickel as an essential element for
legumes and probably all higher plants. Science 222 (4624): 621-22
(1983)
29) FOROUGHI, M., HOFFMANN, G., TEICNER, K., VENTER, P.: The effect of incre
asing levels of cadmium, chromium or nickel in tomatoes in nutrient sp_
lution. In Stand und Leistung Agriculturchemischer und Agrobiologischer Forschung XXX (Kangrssband, 1979)
30)

FOY, C.D.: Manganese and plants. In Manganese, pp 51-76, Washington D.

L. Nati. Acad Sci., Nat Res. Counc. 191 pp (1973)

31)

FOY, C.D., CHANEY, R.L., WHITE, M.C.: The physiology of metal toxicity
in plants. Ann. Rev. Plant Physiol. 29, 511-66 (1978)

32)

FOY, C.D., FLEMING, A.L.: The physiology of plant tolerance to excess

available aluminium and manganese in acid soils. Presented at Symp.
on Crop Tolernace to Sub-Optimal Land Conditions. ASA Meet., Houston,
1976 (1978)

1
1
1

;
-191-

33) FOY , C. D., FLEMING, A.L., GERLOFF, G. C.: Differential aluminium tolerance in

two snapbean varieties. Agron. J. 65: 123-26 (1973)

34)

FREEDMAN, B.f HUTCHINSON, T.C.: Sources of metal and elemental contamination of terrestrial environements. In: Effect of heavy metal pollu
tion on plants. Vol. II: Metals in the environment, pp 35-94; N.W.
Lepp (ed). Applied Science Publ., London, New Jersey (1981)

35)

FUHRER, J.: Cadmium-induced change in water economy in leaf tissues of

beans: Involment of ethylene formation. Plant Physiol. 67; 3-55 (1981)

36)

GAUGLHOFFER, J.: Chrom. En Metalle in der Unwelt. E. Merian (ed), pp.

409-421. Verlag Chemie Weinheim (1984)

37) GLINSMANN, W.H., FELDMAN, F.J., MERTZ, W.: Plasma chromium after glucose administration. Science 152: 1243-1245 (1966)

38)

GLOSER, J.: Some problems of the determination of stomatal aperture by

the microrelief method. Biologia Plantarum : 28-33 (1967)

39)

GUNSE, B.: Estudi d'alguns efectes fitotxics del crom en Phaseolus

vulgaris. Tesina de Licenciatura. 167 pp. Bellaterra (1984)

40)

HAAS, A. R. C., BRUSKA, J. N.: Effects of chromium on citrus and avocado

grown in nutrient solutions. California Agriculture 15: 10-11 (1961)

41)

HALVORSEN, A.D., LINDSAY, W.L.: Equilibrium relationships of metal chie

lates in hydroponic solutions. Soil Sci. Soc. Am. Proc. 36; 755-61
(1972)
HAMBIDGE, K.M., ROGERDSON, D.O.: Comparison of the hair chromium levels of nulliparous and parous women. Amer. J. Obstet. Gynecol. 103:
320-27 (1969)

42)

43)
44)

1
1

1
1

HANS, J.: Following the effects of chromium III on young plants of

barley (Hordeum vulgare L.). Pol'nohospodrstro 26, 13-19 (1980)
HAPKE, H.J.: Metallobelastung von Futter-und lebensmitteln akkumulatio
nen in der nahrungskatte. En: Metalle in der Umwelt, E. Merian (ed.)
pp 35-43; Verlag Chemie Weinheim (1984)

I
I

I
I
I
I
I
I
I
I
I
i
I
I
I

-192-

45)

46) HAUGHTON, P.M., SELLEN, D.B., PRESTON, R.D.: Dynamic mechanical properties
of the cell wall of Nitella opaca. J. Exp. Bot. j^: 1-12 (1968)
47)

HENSON, I.E., ALAGARSWAMY, G., MAHALAKSHMI, V., BIDINGER, F.R.: Stomatal response to water stress and its relationship to bulk leaf water
status and osmotic adjustment in pearl millet (Penisetum americanum
[Li Leeke). J. Exp. Bot. 34 (141): 442-50 (1983)

48)

HINCKLEY, T.M., DUHME, F., HINCKLEY, A.R., RICHTER, H.: Water relations
of drought hardy shrubs: osmotic potential and stomatal reactivity.
Plant cell Environ. 3_: 131-40 (1980)

48)

HOWELER; R.H., CADAVID, L.F.: Screening of rice cultivars for tolerance to Al-toxicity in nutrient solutions as compared with a field scree_
ning method. Agron. J. 8: 551-55 (1976)

49)

HUFFMAN, E.W.D., Jr., ALLAWAY, W.H.: Chromium in plants: Distribution

in tissues, organelles and extracts, and availability of bean leaf chro_
mium to animals. J. Agrie. Food Chem. 21; 982 (1973)

50)

HUFFAMN, E.W.D., Jr., ALLAWAY, W.H.: Growth of plants in solution cul

ture containing low levels of chromium. Plant Physiol. 52, 72-75 (1973)

51)

JAMES, B.R., BARTLETT, R.J.: Behaviour of chromium in soils: V. Fate

and organically complexed Cr (III) added to soil. J. Environ. Qual. 12
(2), 169-72 (1983)

52)

JAMES, B.R., BARTLETT, R.J.: Behaviour of chromium in soils: VI. Interactions between oxidation-reduction and organic complexation. J.
Environ. Qual. .12.(2): 173-76 (1983)
JAMES, B.R., and BARTLETT, R.J.: Behaviour of chromium in soila: VII.
Adsorption and reduction of hexavalent forms. J. Environ. Qual. 12 (2):
177-81 (1983)

I
I
I
I
I

HAR, T., SONADA, Y..IWAY, I.: Growth response of cabbage plants to

transition elements under water culture conditions. I. Titanium, vanadium, chromium, manganese and iron. Soil Sci. and Plant Nutr. 22;
307-15 (1976)

53)

1
1
1
1
1

1
1
1
1

-193..'-.'

54)

JONES, H. G.: Plants and microclimate. Cambridge University Press, Can

bridge (1983)

55)

JONES, L.P.H.: The fate of heavy metals. In: The chemistry of soil pro.
cesses, pp. 593-620. D.J. Greenland, M.B.H. Hayes, John Willey & Sons.
Avon (1981)

56)

57)

1
1
1
1
1
1
1
i
1
1
1
1

JORMA KUMPULAINEN: Chromium in food and diets. Proceedings of a Nordic Symposium on Soil-Plant-Animal-Man Interrelationships and Implic_a
;
tions to Human Health. Part I. 263-78 Helsinki (1981)
;;
KASHIRAD, A., MARSCHNER, H.: Iron nutrition of sunflowers and corn plants ;.
in mono and mixed culture. Plant and Soil. 41, 91-101 (1974)

58)

KIM, J.H., LEE-STADELMANN, O.Y.: Water relations and cell wall elasti
city quantities in Phaseolus vulgaris leaves. J. Exp. Bot., 35, 841-58
(1984)

59)

KIRKHAM, M.B.: Water relations of cadmium treated plants. J. of Environ.

Qual. T., 334-36 (1978)

60)

KLEBS, G.: Beitrage zur physiologie der pflanzenzelle. Vinters. Botan.

Inst. Tubingen (Pfeffer) 2,: 558 (1988). Citado en

61)

KLIMASHEVSKII. E.L., BEREZOVSKII, K.K.: Genetic resistance of plants

to ionic toxicity in the root zone. Sov. Plant. Physiol. 20; 51-54 .
(1973)

62)

KLIMASHEVSKII, E.L., BERNATSKAYA, M.L.: Activity of ATPase and acid

phosphatase in growth zones of the roots of two varieties of peas having different sensitivity to Al-ion toxicity. Sov. Plant Physiol. 20;
201-4 (1973)

63)

KOC, J., KREFFT, L., MAZUR, T.: Investigations into the fertilizing va_
lue of tannery sludges. I. Chemico-physical characteristics of sludges. Rozniki Gleboznawere 27; 107-22 (1976)

64)

KOENIG, P.: Studien uber die stimulierenden und toxischen wirkungen der
verschiedernwertigen. Chromverbindungen auf die Pflanzen. Landwirtsch
Jahrb. 3; 775-916 (1910)

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
I

-194-

0S)

KREEB, K.: Hydrature and plant .production. In: Whitehead F.W., Rutten, A.J. (eds.). The water relations of plants. Blackwell, Oxford,
pp 272-88 (1963)

66)

LAFEVER, H.M., CAMPBELL, L.G., FOY, C.D.: Differential response of wheat

cultivars to Al. Agron. J. 69: 563-68 (1977)

67)

LAHOUTI, M., and PETERSON, P.J.: Chromium accumulation and distribution

in crop plants. J. of the Sci. of Food and Agrie. 30; 136-42 (1979)

68)

LAMOREAUX, R.J.: Growth and water movement in silver maple seedlings

affected by cadmium. J. Environ. Qual. (2): 201-5 (1977)

69)

LANG, K.: Wasser, mineralstoffe, superenelemente. Dietrich Skinkopff

Verlag, Darmstadt, UTB Serie 341, 138 pp. (1974)

70)

LNGARO, S., NORSETH, T.: Chromium. En: L. Friberg, G.F. Nordberg y V.

B. Vouk (eds). Handbook of the toxicology of metals, pp 283-397. Else_
vier/North Holland, Biochemical. Press, Amsterdam (1979)

71)

LEWIS, R.J., TATKEN, R.L. (eds.): Registry of toxic effects of chemical substances 1979. Vol. 1. p. 426. Nati. Institute for Occupational
Safety and Health. Washington D.C. (1980)

72)

LIM, M.y.: Trace elements from coal combustion atmosfric emissions.

Report nQ ICTIS/TROS; Intern Energy Agency Coal Research, London (1979)

73)

LOPEZ, A., METZGLER, R., KONZAK, W.E., MOORE, O.P.: Reactions of diffe.
rential levels of aluminium concentrations in wheat, rye and their contributions to the tolerance in triticale. Crop Sci. Abstr. Wheat Soc.
11 (1976)

73)

LUDLOW, H.M.: Adaptive significance of stomatal response to water stress.

In: Turner, N.C., Kramer, P.J. (eds.). Adaptation of plants to water
and high temperature stress. Wiley and Sons, New York, pp. 123-38 (1980)

74)

MATSUMOTO, H., MORIMURA, S., TAKAHASHI, E.: Less involvement of pectin

in the precipitation of aluminium in pea root. Plant Physiol. 18; 32535 (1977)

1
1
1
1

-195-

75)

MARSCHNER, H. En Inorganic Plant Nutrition. Encyclopedia of Plant Physiology. Nero Series. Vol 15A, pp. 23-29 (1983)

76)

MENGEL,k., KIRKBY, E. A.: Chromium. In: Principles of plant nutrition,

d. International Potash Institute, Berna, Suiza, 514-515 (1979)

77)

MERTZ, W.: Chromium occurence and function in biological systems.

Physiol. Rev. 4: 163-239 (1969)

78)

MERTZ, W: Biological role of chromium. Fed. Proc. 26; 186-193 (1967)

79)

MERTZ, W., ROGINSKI, E.E.: Effects of chromium (III) supplementationon growth and survival under stress in rats fed low protein diets. J.
Nutr. 97: 531-536 (1969)

80)

MERTZ, W., SCHWARTZ, K.: Relation of glucose tolerance factor to impaired glucose tolernace factor in rats on stock diets. Ann. J. Physiol.
196; 614-18 (1959)

81)

MISRA-, S.G., JAISWAL, P.C.: Absorption of Fe by spinach on chromium (VI)

treated soil. J. Plant Nutrition J5 (4-7): 755-60 (1982)

82)

MOORE, J.W., RAMAMOORTHY, S.: Heavy metals in natural waters. Chromium,

pp 58-76. Springer Verlag, Berlin, Heildelberg, New York (1984)

83)

MUGWIRA, L.M., PATEL, S.Y.,: Root zone pH changes and ion uptake by tri.
ticale , wheat and ryce. Agron. J. 69; 719-22 (1977)

84)

MUKHERJI, S., ROY, B.K.: Toxic effects of chromium on germinating seed

lings and potato tuber slices. Biochemie und Physiologie der Pflanzen,
171. 235-238 (1977)

85)

NIEBOER, E., RICHARDSON', D.H.S.: The replacementof thenondescript term

"heavy metals" by a biologically and chemically significant classifies
tion of metal ion. Environ. Pollut. Ser. B l_: 3-26 (1980)

86)

OMASA, K., ONOE, M.: Measurement of stomatal aperture by digital image

processing. Plant & Cell Physiol. 25_ (8): 1379-88 (1984)

87)

PETIT, C.M., RUGOET, A., MITTENAERE, C.: Stimulation of Cd uptaje in

relation to the Cd contnet of plants. Plant Physiol. 62, 554-557 (1978)

1
1
1

1
1
1
1
1
1
1

1
1
1
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1
1
1
1
1
1
1

1
1
1

' .G

-196i

88)

PFEIFFERS W. C., FISZMAN, M., CARBONELL, N.: Fate of chromium in a tributary of the Iraja river, Rio de Janeiro. Environ. Pollut.
Srie B J,: 117-126 (1980)

89)

PICH-SERMOLI , R.: Flora e vegetazione delle serpentine e delle altri ofioliti dell'alta valle del Tevere (Toscana)= Webbia, .6: 380 (1948)

90)

POSCHENRIEDER , CH.: Aspectos fisiolgicos de la fitotoxicidad por ma

ganeso en Phaseolus vulgaris. Tesis doctoral. Servicio de reprografa
de la Universidad Complutense de Madrid . Madrid (1981)

91)

PRATT, P. F.: Chromium. In: Diagnostic criteria for plants and soils.
Ed. H.D. Chapman. University of California, Riverside, pp. 136-41 (1966)

92)

PROCTOR, J., WODELL, S.R.J.: The plant ecology of serpentine III. The
influence of high magnesium/calcium ratio and high nickel and chromium
levels in some British and Swedish serpentine soils. J. Ecol. 59;
827-42 (1971)

92)

PUTRAMENI, H., BARANOWSKA, H., EJCHART, A., JACHYMCZYK, W.: Manganese

mutagenesis in yeast. VI. Mn uptake, mitochondrial DNA replication
and E induction, comparison with other divalent cations. Mol. Gen.
Genet. 151: 69-76 (1977)

93)

ROHATGI, N.K., CHEN, K.Y.: Transport of trace metals by suspended pajr

ticulates on mixing with seawater. J. Water Pollut. Control Fed. 47;
2298-2316 (1975)

94)

SCHAUMLFFEL, E.: ber die colorimetrische beistmung der micronhrstro.

ffe kupfer, zink, kobalt, mangan, eisen und molybden aus einer aschen^
losung durch fraktionerke extraktion. Landw. Forsch. 13; 278 (1965)

95)

SCHLATTER, C., KISSLING, U. Beitrage gerichts medizin 30: 382-88 (1973)

96)

SCHOLANDER, P.F., BRADSTREET, E.D., HAMMEL, H.T.; HEMMINGTON, E.A.:

Sap concentration in halophites and other plants . Plant Physiol. 41 ;
529-32 (1966)

97)

SCHOLANDER, P=f=, HAMMEL, H. T., BRADSTREET, E.D.. HEMINGSEN, E.A.:

Sap pressure in vascular plants. Science 148: 339-46 (1965)

1
1

;;?**! <;..,

"-

"

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_,

. .. _

Il

-197-

1
1
1
1
1
1

1
1
1
1

98)

SCHOLANDER, P. F., HAMMEL, H. T., HEMINGSEN, E.A., BRADSTREET, E.D.:

Hydrostatic pressure and osmotic potential in leaves of mangroves and
some other plants. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA
5_2; 119-25 (196A)

99)

SCHROEDER, H.A.: The role of chromium in mammmalian nutrition. Amer.

J. Clin. Nutr. 2l: 230-44 (1968)

100)

SCHROEDER, H. A.: The trace elements and nutrition. Faber & Faber. Lon_
don (1976)

101)

SCHROEDER, H.A., NANASON, A. P., TIPTON, I.H.: Chromium deficiency as

a factor of artherosclerosis. J. Chron. Dis. 23: 123-42 (1970)

102)

SETO, P., DEANGELIS, P.: Concepts of sludge utilization on agricultural land. In Sludge utilization and disposal conference. Proceedings
n3 6, Environment Canada, Ottawa, pp. 138-55 (1978)

103)

SILVA, S., BEGHI, B.: Problems nutrient in the use of organic fertili_
sers containing chromium. Annali della Facolta de Agraria dell'Unive
sit Cattollica del Sacro Cuore (1): 31-45 (1978)

104) SILVA, S. BEGHI, B.: The use of chromium containig organic manures in
rice fields. RISO 28 (2): 105-13 (1979)
105)

SHEWRY, P.R., PETERSON, P.J.: The uptake of chromium by barley seedlings (Hordeum vulgare L.). J. Exp. Bot. 25; 785-97 (1974)

106)

SILLEN, L.G., MARTELL, A. E.: Stability of ion complexes. Supplement ne

1, Special publication ns 25. The chemical Society. London (1971)

107) SKEFFINGTON, R.A., SHEWRY, P.R., PETERSON, P.J.: Chromium uptake and
transport in barley seedlings (Hordeum vulgar e L.) Planta 132: 209-214
(1976)
107)

STADELMANN, E.J.: The derivation of the cell wall elasticity function

from the cell turgor potential. J. Exp. Bot. 35; 859-68 (1984)

108)

SUTCLIFFE, J.F., BAKER, D.A.: Las plantas y las sales minerales. Ed.
Omega S.A. Barcelona (1979)

f
I
I

I
I
I
1
I
I
I
I
I
1
I
I
I
I
i
1
I

"-*=*=

-198-

109)

TAYLOR, S.A., SLATYER, R.O.: Proposals for a unified, terminology in

studies of plant-soil water relationships. Proceedings of 'the Madrid
Symposium on Plant-Water Relationships in Arid and Semiarid conditions,
Arid Zone Res. Jj3: 339-49 (1961)

110)

TIFFIN, L.O.: Translocation of micronutrients in plants. 199-229. In

Micronutrients in agriculture. Soil Sci. America Inc. Madison (1972)

111) TIFFIN, L.O.: The form and distribution of metals in plants: An overvuew. In Biological implications of metals in the environment, pp.
315-34. Proc. 15th. Ann. Hanford Life Sci. Symp. ER-DA-TIC-Conf . No.
750929. Oak Ridge. Tenn. (1977)
112)

TURNER, M.A., RUST. R.H.: Effects of chromium on growth and mineral n_u
trition of soybeans. Soil Sci. Soc. Amer. Proc. J35: 755-58 (1971)

113) TYREE, M.T., JARVIS, P.G. : Water in tissues and cells. In Encyclopedia of Plant Physiology New Series. Volume 12B. 0. Lange, P. S. Nobel,
C.B. Osmond, H.Ziegler Ed. Springer Verlag. Berlin, New York (1982)
pp. 36-77
114)

VANSELOW, A. P.: Nickel. In Diagnostic criteria for plants and soils.

pp. 302-9. H.D. Chapman ed. Univ. of Calif. Div. of Agrie. Sci., Riverside (1966)

115)

VAZQUEZ, M.D., POSCHENRIEDER , Ch., BARCEL, J.: Chromium vinculated

structural and ultrastructural changes in bush bean plants (Phasolus
vulgaris L.). Annals of Botany (En prensa)

116)

VINTERS, H., DAINTY, J. , TYREE, M.T.: Cell wall elastic properties of

Chara corallina. Can. J. Bot. 55: 1933-39 (1977)

117)

WALTER, H.: Water economy and the hydrature of plants. Annu. Rev. Physiol. : 239-52 (1955)

118)

WARING, R.H., CLEARY, B.D.: Plant moisture stress: evaluation by pre

sure bomb. Science JL5J5: 1248-54 (1967)

119)

WARREN WILSON, J.: The components of leaf water potential I. Osmotic

and matric potentials. Aust. J. Biol. Sci. 20: 329-47 (1967)

T
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