PRACTICA 5

STAPHYLOCOCCUS
INTRODUCCION
El staphylococcus es una bacteria que pertenece a la familia de los cocos
gram (+) a manera de racimos todos los staphylococcus son positivos
todos, dentro de ellos destaca el staphylococcus aureus como un importante
patgeno humano. Es responsable de una mltiple serie de infecciones
producidas por toxinas como el sndrome del shock txico, la intoxicacin
alimentaria y el sndrome de piel escaldada.
CARACTERISTICAS
-

Son inmviles, no tienen flagelos.

Anaerobios facultativos pueden crecer en tanto en presencia de
oxigeno como en ausencia.
Son fermentadores de glucosa, catalasa +.
En desarrollo medios de cultivo con cloruro de sodio al 10%, su
temperatura optima va desde los 18 a 40 C siendo la ms ptima a
37
En medio de cultivo de manitol salado va a ser selectico para
staphylococco por que contiene cloruro de sodio al 10%

LA IMPORTANCIA CLINICA
Staphylococcus Aureus (coagulasa positiva)
Staphylococcus Epidermidis (coagulasa negativa)
Staphylococcus Saprophyticus (coagulasa negativa)
Staphylococcus Haemolyticus (coagulasa negativa)
Existen otros ms, pero estos son los ms conocidos dentro de la
importancia clnica.
CUADROS CLINICOS
Puede producir
-

Sndrome de la piel escamada

Foliculitis imptigo
Neumona
Endocarditis
Osteomielitis
Meningitis
Sepsis
Intoxicacin alimentaria
Shock toxico

CULTIVO
Se puede cultivar en:
Agar sangre
-

De acuerdo a su composicin es un medio nutritivo, permite el

desarrollo de una amplia gama de microorganismos, dentro de esa
gama est el staphylococcus.
Los staphylococcus en este medio son colonias de mediano tamao
que pueden medir de dos a tres milmetros.
Van a tener B-hemolisis, quiere decir que el medio se va a
transparentar, hay una hemolisis completa.
Si son colonias amarillas se puede sospechar de staphylococcus
aureus, brillantes de bordes enteros.
En el staphylococcus epidermidis no tiene pigmentacin.

DIAGNOSTICO MIBROBIOLOGICO
MUESTRA
-

Contaminada: orina, piel, secrecin farngea, esputo.

No contaminada: LCR, sangre, lquidos biolgicos.

AISLAMIENTO
Se pueden aislar en:
-

Agar Manitol Salado: es selectivo, porque existe un medio que

contiene inhibidores (NaCl al 10%) para que solo pueda crecer
staphylococcus.
Es un medio diferencial, porque en este medio se puede diferenciar
en manitol positivo y negativo.
Agar Sangre: medio enriquecido, que permite el crecimiento del
staphylococcus.

Se siembra esa muestra, e incubamos a 37 C durante 24 horas.

Lo que se va a observar son colonias convexas, lisas, redondas, brillantes,
blancas (staphylococcus no aureus) o amarillas (staphylococcusaureus) de
2-3 mm.
PRUEBAS DIFERENCIALES
Para poder definir la especie se necesitan hacer ms pruebas:
-

Catalasa
DNAasa
Fermentacin manitol
Hemolisis
Coagulasa
Diferenciacin antibitica

FERMENTACION MANITOL
Inicialmente el cultivo de A. Manitol Salado sin preparar es de color rosado.
Su indicador es Rojo de Fenol, que hace que el medio se encuentre a un PH
neutro.
Prueba de Manitol Positiva
En el Medio, luego de fermentar el manitol, el staphylococcus hace que el
medio se acidifique y tornndolo de un color amarillo.
Se contina con la prueba de la coagulasa, existe dos pruebas:
-

En lamina: en una lamina portaobjetos, se usa 2 gotas de plasma +

EDTA, NO con citrato de sodio o cualquier otro anticoagulante
Se coge una colonia y se mezcla.
Si se ven presencia de grumos, indica una prueba de Coagulasa
Positiva (Staphylococcus aureus)

En tubo: en un tubo de ensayo se coloca 2 cc de plasma + EDTA.

Se coge una colonia bien asilada, se introduce el plasma con el EDTA,
se homogeniza y se manda a 37 C por 24 horas.
Se hace una lectura de 24 horas, en el tubo se debe presentar un
coagulo de fibrina, lo que indica que es una prueba de Coagulasa
Positiva (Staphylococcus aureus)
Si no se forma el coagulo se dice que es una prueba de Coagulasa
Negativa (Staphylococcus no aureus)

Prueba de Manitol Negativa

Si no se fermenta el medio mantiene su color rosado.
DIFERENCIACION ANTIBIOTICAS
-

Para esta se estudia mediante el estudio de antibiograma con el

uso del Medio Mueller Hinton.
Para observar si existe resistencia o sensibilidad.

Esterilizacin por

Utilizacin de Agua
Destilada

Se saca una colonia de

Staphylococcus
Epirdermidis

Turbidez:
Escala

Colocar la colonia y
homogenizar

Siembra en el Agar
Muller Hinton

De McFarland
0,5
AZM
Azitromicina
BAC
Bacitracina
MK Amikacina
TE
Tetraciclina
VA

Utilizacin de
Discos de
Antibiticos.
Se manda a incubar a 37 C por 24 horas, se recomienda la separacin de 2
cm por cada disco.
Resistencia Intrnseca: es el tipo de resistencia propio de la bacteria.
Ejm.
-

El
lo
El
El

Staphylococcu siempre va a ser resistente a la Bacitracina. Es con

que nace el staphylococcu.
Streptococcu Beta Hemolitico (SBH) es resistente a la Neomicina.
Staphylococcus Saprophyticus hace resistencia a la Novobiocina.

Resistencia Extrnseca: es aquel tipo de resistencia que adquiere la

bacteria luego de exponerse a un antibitico.

Ejm.
-

El Staphylococcu es sensible a la Neomicina

El Streptococcu Beta Hemolitico A (SBHA) es sensible a la Bacitracina.

TRATAMIENTO
-

Macrolidos
Clindamicina
Aminoglucosidos

Oxacilina
Tetraciclina
Dicloxacilina
Vancomicina

LECTURA DE LA COLONIAS DE LA CLASE PASADA

EJEMPLO
Tres tipos de colonia
Elevacin: plana
Bordes: enteros
Forma: redonda circular
MUESTRA ANALIZADA
Elevacin:
Bordes: Enteros
Forma: Raya
Consistencia: Mucoide
BIBLIOGRAFIA:
http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/Staphylococcus.pdf
http://www.infecto.edu.uy/terapeutica/atbfa/macro/macrolidos.htm