UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS
ASIGNATURA BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR

PRCTICA N 04
PERMEABILIDAD DE MEMBRANAS CELULARES
Y FRAGILIDAD OSMTICA

I. COMPETENCIA
Reconoce los procesos de smosis en clulas animales y vegetales.
Determina la fragilidad osmtica de los eritrocitos para demostrar el fenmeno de osmosis.
Diferencia el fenmeno de crenacin y hemlisis en los eritrocitos.
Reconoce la plasmlisis en clulas vegetales.
Valora la importancia de la concentracin de sales en las soluciones y su influencia
estructura y forma celular.

sobre la

II. GENERALIDADES
La osmosis es un fenmeno fsico, es un proceso especial de difusin que se refiere a la
difusin del solvente a travs de una membrana
semipermeable. En la smosis, se produce el
paso o difusin del agua de un lugar de mayor
concentracin a otro de menor concentracin a
travs de la membrana citoplasmtica, la cual
permite el paso del disolvente pero no el del
soluto. La capacidad que tiene el agua de
atravesar
la
membrana
plasmtica
semipermeable, depende de la diferencia de
concentracin entre los lquidos extracelular e
intracelular y est determinada por la presencia
de sales minerales y molculas orgnicas
disueltas. La entrada de agua por smosis en la
clula se denomina endsmosis; y la salida del
agua de la clula se denomina exsmosis.
Los medios acuosos separados por membranas semipermeables pueden tener diferentes
concentraciones, y se denominan:

Hipertnicos, los que tienen una elevada concentracin de solutos con respecto a otros en los
que la concentracin es inferior

Hipotnicos, los que contienen una concentracin de solutos baja con respecto a otros que la
tienen superior.

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Las molculas de agua difunden desde los

medios hipotnicos hacia los hipertnicos
provocando un aumento de la presin sobre la
cara de la membrana del comportamiento
hipotnico, denominada presin osmtica.
Como consecuencia del proceso osmtico se
puede alcanzar el equilibrio, igualndose las
concentraciones, y entonces los medios sern
isotnicos, es decir que tienen la misma
concentracin. Las clulas vivas actan como
osmmetros, ya que funcionan como sistemas
que alcanzan el equilibrio por agua.
Plasmlisis, cuando el medio extracelular es hipertnico con respecto al medio intracelular,
sale el agua del interior de la clula por smosis y se produce la plasmlisis, que en el caso de las
clulas vegetales provoca la rotura de la clula al desprenderse la membrana plasmtica de la pared
celular.
Turgencia, cuando el medio extracelular es hipotnico con respecto al medio intracelular, se
produce la entrada de agua en la clula, lo que ocasiona un aumento del volumen celular, que en el
caso de las clulas animales, especialmente en los glbulos rojos provocara su estallido o hemlisis,
mientras que en los vegetales se producir un hinchamiento o turgencia.

FRAGILIDAD OSMTICA
La prueba de fragilidad osmtica es una medida de la resistencia del eritrocito, a la hemlisis por
estrs osmtico, la cual depende principalmente del
volumen de la clula, del rea de su superficie y de la
funcin de su membrana. Los eritrocitos se incuban en
solucin hipotnica de NaCl, los eritrocitos absorben
agua en un esfuerzo para conservar o para lograr el
equilibrio osmtico, y las clulas se hinchan hasta que se
forma un esferocito. La captacin adicional del agua
produce una membrana porosa que permite la liberacin
de hemoglobina (hemlisis). Las clulas normales
comienzan a hemolizar a concentraciones de NaCl
cercanas a 0.50% y la hemlisis es completa a una
concentracin aproximadamente de 0.30 % de NaCl.
Debido a la disminucin en la proporcin de superficie a volumen, los esferocitos son incapaces de
expandirse tanto como las clulas normales de forma discoidal. Se necesita absorber muy poco lquido
antes que las clulas hemolicen. Los esferocitos tambin tienen un aumento en la permeabilidad de la
membrana, la cual contribuye al aumento de su fragilidad. En el caso de los glbulos rojos, la forma
de disco bicncavo del eritrocito normal, implica un exceso de extensin superficial con relacin a su
volumen, lo que le proporciona una gran capacidad de deformabilidad. Como la membrana eritrocitaria
es semipermeable, cuando los eritrocitos son colocados en una solucin hipotnica, el agua entra
osmticamente haciendo que aumente el volumen y adquiera la forma esfrica. Con ello, la superficie
disminuye respecto a su volumen dando a la clula cierto grado de rigidez que interfiere con el paso de
la misma a travs de pequeas aberturas, por lo que fcilmente se rompe. Otro fenmeno adicional es
la salida de hemoglobina, que es permitida por el estiramiento de la membrana eritrocitaria.
En esta prctica se prepararn diluciones crecientes de NaCl en las que se colocarn eritrocitos,
para valorar la concentracin de NaCl que produce la hemlisis.

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EXPERIMENTO 01
FRAGILIDAD OSMTICA EN ERITROCITOS
I.

MATERIALES

MATERIAL DE VIDRIO, EQUIPOS, OTROS:

Centrfuga.
Gradilla.
16 tubos de ensayo de 13 x 100 mm.
Equipo de venopuncin.
Papel parafilm.
Pipetas graduadas de 5 ml.
Pipeta graduada de 0.2 ml.
EDTA.
Solucin salina al 1% tamponada (pH 7.4).
Detergente
Escobilla lavatubos
-

MUESTRAS (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

MATERIAL GRUPAL:
5 AGUJAS N 21 (para extraccin de sangre fresca obtenida con
EDTA)
1 Liga para brazo (para extraccin de sangre)
2 Tubos con anticoagulante (EDTA- tubo Lila)
Fsforo
- MATERIAL PERSONAL
Gorro
Mascarilla
Guantes
Marcador indeleble
GUIA DE PRCTICA
-

II. PROCEDIMIENTO
-

1. Obtener 5 ml de sangre venosa y mezclar con cuidado con el anticoagulante EDTA.

2. Colocar 16 tubos de ensayo en una gradilla y enumerarlos (del 1 al 16) de izquierda a

derecha.

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3. Montar la prueba de la siguiente manera:

- 4. Mezclar cuidadosamente el contenido de los tubos.

-

5. Agregar a cada tubo 0.2 ml de sangre. Invertir cuidadosamente cada tubo con papel parafilm,
para asegurar la mezcla.

- 6. Las gradillas que contienen los tubos se dejan reposar a temperatura ambiente durante 30
minutos.
- 7. Transcurrido el tiempo indicado se mezcla cuidadosamente su contenido y se centrifugan los
tubos a 2000 rpm durante 5 minutos.
- 8. Examinar los tubos observando macroscpicamente en que punto comienza la hemlisis y en que
punto es completa. El menor indicio de color rojo en el lquido sobrenadante indica el inicio de la
hemlisis de los glbulos menos resistentes; la hemlisis completa queda indicada por una solucin
rojo claro y ausencia de eritrocitos residuales en el fondo del tubo o enturbiamiento al agitar el tubo
ligeramente.

III. RESULTADOS Y DISCUCIN

IV. CONCLUSIONES

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EXPERIMENTO 02
-

I. MATERIALES

PLASMLISIS EN CLULAS DE HOJA DE ELODEA

Reactivos: NaCl al 10 %, agua destilada.

Material de vidrio: Porta y cubre objetos,
Equipos: Microscopio compuesto.
-

MUESTRAS (Bajo responsabilidad de los estudiantes)

MATERIAL GRUPAL:
HOJAS DE ELODEA (mximo 10 hojas)
Pinza de metal (cosmtica)
5 Vasos descartables
5 goteros simples de plstico o vidrio
- MATERIAL PERSONAL
Gorro
Mascarilla
Guantes
Marcador indeleble

II. PROCEDIMIENTO

1. Rotular 3 vasos descartables ( vaso 1= solucin isotnica, vaso 2= solucin hipertnica y vaso 3 =
solucin hipotnica)
2. Cortar una ramita de ELODEA que se encuentra en su agua normal e introducirlo al vaso n 1 (sol.
Isotnica).
3. Adicionar al vaso n 1, 20 ml de agua normal que contena la ELODEA.
4. Cortar una ramita de ELODEA que se encuentra en su agua normal e introducirlo al vaso n 2 (sol.
hipertnica).
5. Adicionar al vaso n 2, 20 ml NaCl al 10 %, dejar reposar mnimo 10 minutos.
6. Cortar una ramita de ELODEA que se encuentra en su agua normal e introducirlo al vaso n 3 (sol.
hipotnica).
7. Adicionar al vaso n 3, 20 ml de agua destilada, dejar reposar mnimo 10 minutos.
8. En el centro de un portaobjetos limpio, colocar una gota de agua del vaso n 1 y luego una hoja de
Elodea, colocar el cubreobjetos. Observe al microscopio las caractersticas morfolgicas de las
clulas a mediano y mayor aumento, y esquematice.
9. Repetir la misma situacin con el vaso n 2 y n 3
10. Compare las 3 observaciones de hojas de ELODEA en diferentes soluciones
11. Analice, esquematice y explique.
-

III. RESULTADOS Y DISCUCIN

IV. CONCLUSIONES
-

CUESTIONARIO

1. Establezca las diferencias entre: difusin, dilisis y smosis.

2. Qu importancia tiene el proceso difusin en los seres vivos?
3. Qu es fragilidad osmtica?
4. Qu importancia clnica tiene la fragilidad osmtica?
5. Qu es la esferocitosis hereditaria?
6. Qu diferencia existe entre una membrana semipermeable y una membrana selectivamente
permeable?
7. Defina los siguientes trminos: Plasmlisis, hemlisis, presin de turgencia y presin osmtica.