Prctica de laboratorio sobre Mitosis

Fundamentacin terica
El ciclo celular comprende las etapas de crecimiento, desarrollo, diferenciacin, maduracin y
reproduccin para dar como resultado la formacin de dos clulas hijas, las que a su vez repiten de
nuevo y por separado todo el proceso anterior, de ah el nombre de ciclo celular. Por lo tanto el
ciclo celular abarca dos grandes perodos, el de interfase y el de divisin celular o mitosis.
Mitosis: Una vez duplicado el material nuclear y citoplasmtico, la clula se encuentra ahora
capacitada para repartir su contenido en dos clulas hijas. Dicha reparticin se da en forma
secuencial, comenzando primero a dividirse el ncleo, luego el citoplasma y por ltimo ocurre una
separacin territorial.
La divisin del material nuclear se denomina cariocinesis y se realiza de tal manera que cada
ncleo de las clulas queda con la misma cantidad de material gentico que la clula madre que le
dio origen, o sea con 46 cromosomas que equivale al nmero diploide.
La divisin del contenido citoplasmtico se da en forma equitativa, con el fin de que cada clula
quede con un volumen ms o menos igual de citoplasma y una dotacin bsicas de organelos
celulares; a este fenmeno se le denomina citocinesis. La separacin territorial de las dos clulas
hijas que se estn originando se da por estrangulacin de la membrana citoplasmtica a nivel de la
lnea ecuatorial de las clulas madres, en clulas animales; en las plantas superiores este
fenmeno es diferente ya que ellas se encuentran rodeadas de una pared celular rgida. En vez de
ser estranguladas y divididas en dos por el anillo contrctil, estas clulas se dividen mediante la
formacin de una nueva pared celular y una membrana plasmtica dentro de la clula; a este
fenmeno en ambos casos que permite independizar las dos clulas hijas le denomina
citodiresis.
Todos los fenmenos antes mencionados ocurren de una manera gradual y continua, que para los
efectos didcticos se han agrupado en cuatro etapas que en su orden son : profase, metafase,
anafase, telofase. , sin embargo no es un proceso esttico, sino contino y que puede ser
observado con relativa facilidad en clulas vegetales, sobre todo en tejidos proliferativos como las
races o en los meristemos apicales. Especies como la cebolla y las habas presentan pocos
cromosomas y muy grandes, los que los hace los objetos preferidos para observar y analizar el
fenmeno de la mitosis.
En animales es mucho ms complicado y no existen procedimientos lo suficientemente prcticos
para su visualizacin.
El fenmeno de la mitosis ha sido objeto de estudio desde finales del siglo XVIII y en la actualidad
sigue siendo de inters para muchos investigadores, debido a que, a pesar de el desarrollo de la
biologa molecular, persisten muchas dudas sobre el fenmeno.
Por otro lado el anlisis de la mitosis permite hacer inferencias sobre los efectos que el ambiente
tiene sobre este proceso. Es asi que se han convertido en herramientas de estudio para evaluar los
efectos mutagnicos o genotxicos de las sustancias quimicas, fsicas o bilogicas que se
encuentran en el medio.
OBJETIVOS
Desarrollar adecuadamente las tcnicas de laboratorio necesarias para visualizar las
diferentes etapas de la mitosis.
Observar y caracterizar a travs de dibujos las diferentes fases de la mitosis.

MATERIALES

Microscopio

Papel de filtro

Portaobjetos

Vidrio de reloj

Cubreobjetos

Orcena actica

Cuchilla de afeitar

cido Clorhdrico (1N)

Pinzas

Alcohol 90

Caja de Petri

cido actico

Races de ajo (Allium

sativum)

tijeras

PROCEDIMIENTO
1.-Germinar bulbos de ajo. Para el crecimiento, colocar los bulbos en tubos o frascos con agua de
la llave, evitando que las races toquen el agua, de esta manera crecern ms rpido. Dejar que las
races crezcan durante tres das.
2.-Posteriormente cortar aproximadamente 1 cm de las races y colocarlas en un vidrio de reloj con
aceto-orceina 2%, y con cuidado pasarlas al fuego de una lmpara de alcohol para realizar la
hidrlisis durante 15 minutos. Evite que se seque el colorante agregando cuanto sea necesario.
3.-Transcurridos 15 minutos colocar cada raz en un portaobjetos y con la ayuda de las agujas de
diseccin desprenda las capas de clulas de la raz, cuide de no eliminar los primeros dos
milmetros del extremo de la raz (que corresponde a la regin meristematica).
4.-finalmente coloque el cubreobjetos y realice el extendido de las clulas
(squash) con la finalidad de obtener una sola capa para facilitar la revisin al
microscopio. Para esto las preparaciones se colocan en una superficie plana y con ayuda de un
lpiz nuevo, golpee el cubreobjetos en forma de espiral. Sellar las preparaciones con barniz de
uas transparente.
5.-Observar al microscopio ptico a un aumento de 10X para localizar las zonas que contienen
clulas en mitosis. El anlisis se realiza a 100X, cuantificando el nmero de clulas en mitosis .

Resultados
Observe y dibuje las diferentes fases de mitosis (profase, anafase, metafase, telofase) en ajo
anotando de qu fase se trata
Bibliografa
Peguero, J. cromosoma X Pontifica Universidad Catlica Madre y Maestra
(http://www.pucmmsti.edu.do/cienciasfisiologicas. Febrero de 2009)
Rodrguez, A.
Protocolos de Laboratorio Biologa Celular Universidad del Tolima Francis L 2010.