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Prctica 6.

Vas de Administracin
Objetivo
El alumno observar la influencia de las diferentes vas de administracin, utilizando
animales de laboratorio y una solucin que permitir apreciar la llegada de los compuestos
administrados a diferentes rganos y tejidos.
Competencia
Aplica los conceptos tericos en el manejo de los animales de laboratorio para la
administracin de la solucin que alcanzar distintos rganos deduciendo las ventajas y
desventajas que tienen las diferentes vas de administracin.
Introduccin
Existen diversos medios por los que el medicamento puede introducirse en el organismo. Es
posible que un mismo medicamento est preparado para utilizar ms de una va, del mismo
modo que existen frmacos diseados para acceder al organismo por un nico camino.
Existen varias vas de administracin para los medicamentos como la oral, sublingual, bucal,
tpica, transdrmica, inhalacin, instilacin ocular, rectal, vaginal o parenteral (subcutnea,
intramuscular, intravenosa). Cada medicamento est preparado para ser administrado por va
determinada y que ejerza su accin de la forma ms conveniente. Para cada va de
administracin existen diferentes formas farmacuticas. Por ejemplo, para la va oral se
preparan cpsulas, comprimidos, comprimidos recubiertos, comprimidos efervescentes,
comprimidos masticables, suspensiones, soluciones, jarabes, elixires, etc.
La eleccin depende de diversas variables. Algunas son: el tipo de medicamento, es decir,
sus particularidades. La absorcin del mismo: en qu lugar del organismo (estmago,
duodeno, piel, etc.) conviene que se produzca y a qu velocidad. El propio paciente; hay que
tener en cuenta los condicionantes fisiolgicos (como el estado de su aparato digestivo,
necesidad de una accin ms o menos rpida, etc.) y condicionantes psicolgicos (es
frecuente que a los nios les entre mejor un jarabe que una grageas).
Procedimiento
1. Pesar las ratas y calcular para cada una el volumen de anestsico a administrar de
acuerdo al peso del animal y a una dosis ponderada de 15mg/100gr de peso.
2. Anestesiar las ratas administrando el volumen total de anestsico por va
intraperitoneal (IP), dejar reposar 10 minutos.
3. Administrar azul de metileno al 0.01%, utilizar una rata para cada va de
administracin de acuerdo a la siguiente tabla:

Va de Administracin
Intravenosa (IV)
Intramuscular (IM)
Intraperitoneal (IP)
Subcutnea (SC)
Oral (PO)

Volumen a Administrar
(ml)
0.5
1-2
5-10
5-10
1-2

4. Dejar reposar 20 minutos y hacer la diseccin de cavidad abdominal.


5. Llevar a cabo una exploracin fsica interna y por observacin buscar azul de
metileno en rganos y tejidos.
6. Anotar tus datos en la tabla de resultados.
Cuestionario Complementario
1. Cuales son las principales vas de administracin de frmacos?
2. Explique ventajas y desventajas en la teraputica con frmacos en las siguientes vas
de administracin: oral, sublingual, rectal, inhalacin, subcutnea, intravenosa,
intratecal y tpica.
3. Define administracin parenteral y menciona todos los tipos que conozcas.
4. Mencione dos frmacos que se apliquen por cada va de administracin.

Prctica 7.
Distribucin de Frmacos
Objetivo
Por medio del anlisis cualitativo y cuantitativo determinar la distribucin de un frmaco en
los diferentes compartimentos del organismo.
Introduccin
La distribucin es un proceso farmacocintica en el que tiene lugar el transporte del frmaco
desde su lugar de absorcin hasta el rgano donde va a ejercer su efecto. No obstante, es
importante considerar que una vez absorbido el frmaco es distribuido no solo hasta el sitio
donde va a actuar, si no que al mismo tiempo llega a otros rganos en donde va a ser
eliminado, metabolizado o acumulado.
La mayora de los frmacos se unen a protenas plasmticas para circular en el organismo.
La albmina es la principal de estas protenas acarreadoras; tiene dos sitios de unin para
frmacos, uno para frmacos de carcter cido, y otro para frmacos de carcter bsico. Los
esteroides corticales y algunos otros frmacos de carcter bsico se unen tambin a las alfa1-globulinas.
La unin de los frmacos a las protenas depende esencialmente de la afinidad que tengan los
frmacos, y constituye una cifra estable para cada frmaco. Esta unin es reversible,
encontrndose siempre un determinado porcentaje libre y cuando ste se elimina del plasma
una nueva cantidad de frmaco se desprende de su unin a protenas y toma su lugar, de tal
modo que las fracciones libre y unida a protenas permanecen constantes. Ocasionalmente,
cuando se sobrepase la capacidad de fijacin de la albmina, aumenta la fraccin libre.
Solamente el frmaco libre es activo, puesto que es el nico capaz de atravesar barreras y
difundir a los tejidos.
Una vez que el frmaco se encuentra en plasma, la concentracin que alcanza en los
diferentes tejidos depende esencialmente de dos factores: el flujo sanguneo regional, y la
salida del frmaco del interior vascular.
La unin del frmaco a las protenas y la salida del frmaco del interior vascular condicionan
un parmetro que conocemos con el nombre de volumen de distribucin (Vd). Se define
como Vd el volumen de agua corporal en el que el frmaco se encuentra realmente disuelto.
Pero este parmetro de Vd real no es fcilmente medible, por lo que recurrimos al Vd
aparente que corresponde a:

Vd =

DOSIS
Cp

Decimos que este volumen de distribucin es aparente por que no refleja con exactitud donde
se encuentra el frmaco. Por ejemplo, Si la Cp es muy baja el Vd ser muy alto, indicndonos
que esta acumulado en algn tejido; por el contrario, si el frmaco est muy unido a protenas
la Cp ser alta y el Vd ser bajo. A pesar de ello nos sirve para conocer la distribucin
corporal de un frmaco:
Vd
Vd
Vd

3 Litros
12 Litros
40 Litros

-------------------------------------------------------------

Frmaco en plasma
Frmaco en plasma + intersticio
Frmaco en plasma + intersticio + clulas

Material y Equipo
Espectrofotmetro UV-VIS
Balanza analtica
Balanza granataria
Balanza para roedores
Mesa de ciruga para roedores
Equipo de diseccin completo
Jaula metablica
Centrfuga
Agitador Vortex
Portaobjetos (6)
Jeringa de 1cc (2)
Tubo de ensaye 16x100 con tapn de rosca (10)
Tubo de ensaye 16x125 con tapn de rosca (10)

Matraz volumtrico de 500 cc (1)


Matraz volumtrico de 100 cc (1)
Matraz volumtrico de 25 cc (8)
Matraz volumtrico de 10 cc (5)
Pipeta volumtrica 0.5 cc (1)
Pipeta volumtrica 1 cc (3)
Pipeta volumtrica 2 cc (1)
Pipeta volumtrica 3 cc (1)
Pipeta volumtrica 5 cc (1)
Pipeta graduada 20 cc (1)
Pipeta graduada de 10 cc (2)
Pipeta graduada 5 cc (1)
Pipeta graduada 1 cc (1)

Soluciones y Reactivos
Pentobarbital sdico
cido tricloroactico (TCA)
Nitrito de Sodio
Sulfacetamida
Cloroformo
Hidrxido de sodio
Alfa-naftiletilendiamina
Sulfamato de amonio
cido clorhdrico

Sulfacetamida 4 mg/cc (10cc)


Hidrxido de sodio 0.1 N ( 60cc)
cido tricloroactico 15% (25cc)
cido clorhdrico 4 N (10 cc)
Nitrito de sodio 0.1% (10cc)
Sulfamato de amonio 0.5% (10cc)
Alfa-naftiletilendiamina 0.1% (10cc)

Procedimiento
Sesin 1 (primera parte)
1. Se administra a la rata sulfacetamida en dosis de 10 mg/Kg de peso.
2. Se coloca el animal en una jaula metablica por espacio de 30 minutos.
3. Si no se ha colectado orina en este intervalo de tiempo, induzca al animal
presionndole levemente la parte inferior del abdomen.

4. Anestesie al animal y preprelo en la mesa de ciruga. Abra la cavidad abdominal (en


este momento puede obtener orina por insicin directa en la vejiga, si no se logro
anteriormente).
5. Abra adems la cavidad torxico y craneana. Obtenga 1cc de sangre por puncin
directa al corazn del animal.
6. Obtenga tambin muestras de 0.5-1.0 gr de los siguientes rganos: hgado, rin,
intestino, corazn, cerebro y msculo de la regin gltea.
7. Coloque las muestras obtenidas en un portaobjetos y pselo, despus de esto proceda
a desmenuzarlas con la ayuda de una navaja de bistur y transfiralas a un tubo de
ensaye que contenga 10cc de NaOH 0.1 N, lave el portaobjetos y pselo de nuevo por
diferencia conocer el peso de la muestra.
8. Procese cada una de las muestras de acuerdo al procedimiento indicado.
Procesamiento de las muestras:
Sangre: Lleve 1cc de sangre a un tubo que contenga 9cc de agua y agite en vortex. Tome
1cc de esta dilucin y transfirala a otro tubo, adicione 12cc de agua y agite de nuevo.
Agregue 4cc de ATC al 15% y agite por 1 minuto. Centrifugue a 3,000 rpm por 3 min. Del
sobrenadante tome una muestra de 5cc y psela a un tubo limpio. Etiquetar el tubo
especificando fecha, laboratorio, nmero de equipo y contenido. Guardar en congelacin para
la segunda parte de esta prctica.
Orina: Tome 100 mcl de orina y agregue a un tubo que contenga 1.9cc de agua. Agite y tome
1cc de esta orina diluida y transfirala a otro tubo conteniendo 11cc de agua. Adicione 4cc
de TCA al 15% agite y centrifugue a 3,000 rpm por 3 minutos. Del sobrenadante tome una
muestra de 5cc y psela a un tubo limpio. Etiquetar el tubo especificando fecha, laboratorio,
nmero de equipo y contenido. Guardar en congelacin para la segunda parte de esta prctica.
Tejidos y rganos: En el tubo que contiene la muestra y la solucin de NaOH deber
agitarse en vortex por 1 minuto en 3 ocasiones, en un perodo de 10 minutos. Despus se
dejar reposar por 15 minutos. Se toman 2cc del sobrenadante y se adicionan 2cc de TCA al
15%, agitar por 30 seg. Adicionar 6cc de agua y agitar de nuevo. Centrifugar por 5 minutos
a 3,000 rpm. Tomar del sobrenadante una muestra de 5cc y pasar a un tubo limpio. Etiquetar
el tubo especificando fecha, laboratorio, nmero de equipo y contenido. Guardar en
congelacin para la segunda parte de esta prctica.

Sesin 2 (segunda parte)


Para iniciar con esta sesin, permita que las muestras se descongelen a temperatura ambiente,
o en bao de agua a temperatura ambiente.

Cuantificacin de Sulfacetamida por la tcnica analtica de Bratton-Marshal

1. A 5cc del sobrenadante se le adicionan 1cc de HCl 4N, 1cc de Nitrito de sodio al 01%
y se agita en vortex por 5 minutos.
2. Posteriormente agregar 1cc de Sulfamato de amonio al 0.5% y agite de nuevo por 3
minutos, manualmente de manera vigorosa.
3. Por ultimo adicione 1cc de alfa-naftiletilendiamina al 0.1%, agite y repose en la
oscuridad por 10 minutos.
4. Lea la absorbancia en espectrofotmetro a una longitud de onda de 546 nm.
5. Hacer exactamente este mismo procedimiento a un blanco que consiste en 5cc de
agua, que se trata a la par con las muestras..

Curva patrn de sulfacetamida:


Solucin patron de Sulfacetamida (100 mcg/cc): Pesar en balanza analtica 50mg de
Sulfacetamida, colocarla en un matraz volumetrico de 500cc. Llevar al aforo con agua.
Soluciones estndar de Sulfacetamida: Tomar la alcuota necesaria de la solucin patrn
de sulfacetamida y preparar 25 cc de cada una de las concentraciones descritas a
continuacin: 1, 2, 4, 6, 8, 12 y 16 mcg/cc.
Tomar 5 ml de cada una de las soluciones estndar de sulfacetamida y colocar en un tubo de
ensaye y proceder de acuerdo a la tcnica de Bratton-Marshal. Hacer este procedimiento por
duplicado para cada una de las concentraciones. Incluir un blanco con 5cc de agua.

Resultados
Con los resultados de la curva estndar calcular el promedio, desviacin estndar y el
coeficiente de variacin de las absorbancias obtenidas para cada concentracin.
Elaborar una grfica de concentracin de sulfacetamida (mcg/ml) vs Absorbancia promedio;
calcular por mnimos cuadrados el coeficiente de correlacin.
Con la grfica obtenida hacer interpolaciones con los valores de absorbancias de las muestras
y calcular las concentraciones de sulfacetamida en sangre, orina y en los diferentes rganos
y tejidos.
Reporte sus resultados en una tabla donde se especifiquen los valores de absorbancia y
concentraciones obtenidas, y la grfica correspondiente.
Elabora tus conclusiones.
Cuestionario Complementario
1. Que propiedades deber tener un frmaco para poder encontrarse en el eritrocito?
2. Cual es el componente proteico ms importante en la distribucin de frmacos.
3. La distribucin ser un proceso reversible?

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