UNIVERSIDAD SAN LUIS GONZAGA DE

ICA
FACULTAD DE INGENIERA DE MINAS Y
METALURGIA
INFORME N 001 2015 FIMM PMM NASCA

AL

: INGENIERO GUSTAVO DAVALOS CALDERN

Docente del curso Metalografa y Microscopia Electrnica

DE

: LOAYZA MERINO JASN JEAN PIERRE

Estudiante del VI ciclo de Ingeniera Metalrgica de la FIMM

ASUNTO

: Microscopio electrnico, partes y funcionamiento modelo NMM- 800

RTF.

FECHA

: 6 de octubre del 2015.

Que habiendo ingresado al laboratorio el da 22-09-2015.
Se nos dej el trabajo de investigacin acerca del microscopio
electrnico modelo NMM-800 TRF

Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formacin de imgenes
pticas aumentadas a travs de lentes convergentes, permiten la observacin de
pequeos detalles de una muestra dada que a simple vista no se percibiran .En el
presente informe se hablara del microscopio compuesto sus partes, su correcto uso,
cuidado y conservacin

1.

Historia

Este instrumento fue inventado en Alemania por el fsico Ruska en 1931. La

ptica electrnica haba sido construida por el fsico alemn Busch en 1924.
El microscopio se patent en 1932, un ao ms tarde Ruska y Knoll obtenan
aumentos de 12.000 con una resolucin de 40 nanmetros. Estos modelos
experimentales eran an muy imperfectos, y slo despus de la II Guerra
Mundial se superaron los problemas tcnicos del microscopio y de los cortes
de tejido. El microscopio electrnico de fines del siglo XX tiene una resolucin
del orden de 1.000 veces la del microscopio de luz (0,2 y 200 nanmetros,
respectivamente).

2.

Funcionamiento

Un microscopio electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar de

fotones o luz visible para formar imgenes de objetos diminutos. Los
microscopios electrnicos permiten alcanzar una capacidad de aumento muy
superior a los microscopios convencionales (hasta 500.000 aumentos
comparados con los 1000 de los mejores microscopios pticos) debido a que
la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones.
Un microscopio electrnico funciona con un haz de electrones generados por
un can electrnico, acelerados por un alto voltaje y focalizados por medio
de lentes magnticas (todo ello al alto vaco ya que los electrones son
absorbidos por el aire). Los electrones atraviesan la muestra (debidamente
deshidratada) y la amplificacin se produce por un conjunto de lentes
magnticas que forman una imagen sobre una placa fotogrfica o sobre una
pantalla sensible al impacto de los electrones que transfiere la imagen
formada a la pantalla de un ordenador. Los microscopios electrnicos slo se
pueden ver en blanco y negro, puesto que no utilizan la luz, pero se le
pueden dar colores en el ordenador. Como se puede apreciar, su
funcionamiento es semejante a un monitor monocromtico

3.

Limitaciones del microscopio electrnico

El limitado dimetro de la apertura no permite que la informacin

detallada alcance la imagen, limitando de este modo la resolucin.
El contraste de amplitud (que radica en la naturaleza corpuscular de los
electrones) se debe al contraste de difraccin, provocado por la prdida

de electrones del rayo. Es un contraste dominante en especmenes

gruesos.
El contraste de fase (que radica en la naturaleza ondulatoria de los
electrones) se debe al contraste de interferencia provocado por los
desplazamientos en las fases relativas de las porciones del rayo. Es un
contraste dominante en especmenes finos.
Para muestras pequeas como complejos macromoleculares se utilizan
las siguientes tcnicas:

La tincin negativa:
Los agentes de tincin ms usados son el molibdato amnico, el
fosfotungstato sdico y sales de uranio como acetato y formiato.
Todos ellos presentan las siguientes propiedades: interactan
mnimamente con la muestra y son estables en la interaccin con los
electrones, son altamente solubles en agua, presentan una alta
densidad que favorece el contraste, tienen un punto alto de fusin,
tienen un tamao de grano pequeo.
La rplica metlica: para construir la rplica metlica se evapora el
metal (estao), que se deposita sobre la muestra a la vez que esta, por
el vaco, se disuelve.

4.

Tipos de microscopio electrnico

Existen dos tipos principales de microscopios electrnicos: el microscopio

electrnico de transmisin y el microscopio electrnico de barrido.

1. Microscopio electrnico de transmisin

El microscopio electrnico de transmisin emite un haz de electrones dirigido
hacia el objeto cuya imagen se desea aumentar. Una parte de los electrones
rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una
imagen aumentada de la muestra. Para utilizar un microscopio electrnico de
transmisin debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores de unos
2000 ngstroms. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden
aumentar la imagen de un objeto hasta un milln de veces.

1.1.
Ventajas y desventajas.
Los elevados costos de los equipos y la debida adecuacin de una
infraestructura para el buen
funcionamiento hacen que esta
tcnica , se
convierten en acceso de
investigadores privilegiados.
Los costos de reactivos tambin
dan un
factor decisivo para la eleccin
de esta
tcnica. Aun cuando este
proceso de
investigacin sea costoso ,
proporciona
resultados muy precisos de
amplia
resolucin y magnificacin.
La tcnica de preparacin de
las muestras
cumple con protocolos
establecidos,
pero son vulnerables y variados al tipo de investigacin que se realice,
contando ms con la experiencia del investigador.

La complejidad de los equipos , lo hacen susceptibles a la des

calibracin. Nuevamente encontrar las condiciones ptimas requiere de
un proceso tedioso y prolongado.
La manipulacin de reactivos
se torna
peligroso por la elevada
condicin toxica
de los mismos.
Las imgenes obtenidas son
monocromticas
y planas siendo necesario, en
algunos casos, un
tratamiento posterior
mediante anlisis
de imgenes con un software
especializado.

2. Microscopio de barrido
En el microscopio electrnico de
barrido, un campo
magnetico permite enfocar los rayos catdicos (electrones) y obtener una
imagen tridimensional, por el examen de la superficie de las estructuras,
permitiendo la observacin y la caracterizacin de materiales orgnicos e
inorgnicos, proporciona aumentos de 200.000 dimetros.
1)

Descripcin del Equipo

2) Mediante el microscopio electrnico de

barrido se estudia:

Morfologa superficial de minerales, catalizadores, etc.

Electro depsitos
Adherencia fibra-matriz en
polmeros.
Cambios morfolgicos de
materiales
sometidos a tratamientos
qumicos. Formas
de cristalizacin de minerales.
Control de calidad de
catalizadores
industriales.
Morfologa superficial interna
de partculas
polimricas.
Estudio de molculas
Reconocimiento de fsil

3)
Ventajas y Desventajas

Mayor resolucin.

Mayor nmero de seales, mayor informacin.

Imagen de detalles profundos de la superficie de la muestra: 3D

No da informacin acerca de viabilidad celular.

Costos

Destruccin de la muestra: fijacin y secado.

Personal especializado.

5.
Partes del microscopio electrnico NMM800TRF
I.
El
pie:
Constituye la
base sobre la
que se apoya
el
microscopio y
tiene por lo
general
forma de Y o
bien es
rectangular.

II. La
columna
o brazo:
Llamada
tambin asa,
es una pieza

en forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante una charnela,

permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la captacin de luz cuando
se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por el
extremo inferior se adapta al pie.

III. El tuvo:
Tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente para evitar las
molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se
colocan los oculares y en extremo inferior el revlver de objetivos. El tubo se
encuentra unido a la parte superior de la columna mediante un sistema de
cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.

IV.

El tornillo macro mtrico:

Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio,

deslizndose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos
largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.

V. El tornillo

micromtrico:

Mediante el movimiento casi

imperceptible que
produce al deslizar el tubo o la
platina, se logra el
enfoque exacto y ntido de la
preparacin. Lleva
acoplado un tambor
graduado en
divisiones de 0,001 mm., que se
utiliza para precisar
sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

VI. La platina:
Es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que
se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite
el paso delos rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en
cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir,

mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos

circulares.

VII.

Las pinzas:

Son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se

encuentran en la platina.

VIII.

Carro mvil:

Es un dispositivo que consta de dos tornillos y est colocado sobre la platina,

que permite deslizar la preparacin con movimiento ortogonal de adelante
hacia atrs y de derecha a izquierda.

IX. El revlver:
Es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los
objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se
colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo
fija.

1. Sistema de iluminacin
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal
manera que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el
microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

2. Fuente de iluminacin:
Se trata generalmente de una lmpara incandescente de tungsteno sobre
voltada. Por delante de
ella se sita un
condensador (una lente
convergente) e,
idealmente, un
diafragma de
campo, que permite
controlar el
dimetro de la parte de
la preparacin
que queda iluminada.

3. El espejo:
Necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del
microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los
microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana.
Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea

de preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para iluminacin natural

(luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara
que cumple la misma funcin que el espejo.

4. Diafragma:
El condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura
para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para
aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si
se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.

6.
MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICO
COMPUESTO
Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la
platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en
el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas
metlicas.
Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o
colocar el de 10aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.
Para realizar el enfoque:
Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el
tornillo macro mtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a
travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la
preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el
objetivo dela preparacin con el macro mtrico y, cuando se observe

algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque

fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y
suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el
enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la
imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir
la operacin desde el paso.
El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por
ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la
preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo
con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc
con el objetivo de inmersin.
Empleo del objetivo de inmersin:
Bajar totalmente la platina.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz
que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el
aceite .
Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio
camino entre ste y el de x40.d.Colocar una gota mnima de aceite de
inmersin sobre el crculo de luz.
Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo
de inmersin
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que
la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota
ascendiera y se adosara a la lente.

7. PRECAUCIONES
Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor
aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte
mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo
cubierto con su funda.
Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo
cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si
no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro
de un armario para protegerlo del polvo.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas
muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de
ptica.
No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando
el microscopio.

 Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite

que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con
papel de filtro (menos recomendable).
El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre
la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la
muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del
mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular.
Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre
ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite,
limpiarla con un pao humedecido en xilol.
Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la
sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y
revisin general de los mismos.

8. Bibliografa
http://www.kingdak.com/microscope/601.html
http://es.slideshare.net/yaneeeee/microscopio-electrnico28251634?qid=237a65c8-2756-4ee9-885005cffc87268d&v=default&b=&from_search=6
http://njleochang.en.made-in-china.com/product/IBlmxHWyXhkc/China-HighQuality-Laboratory-Transmitted-Reflected-Metallurgical-Microscope-MV6100NMM-800TRF-.html
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celul
ar/microelectrans.htm
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celul
ar/melecbarrido.htm