2013

QUMICA ANALTICA
Con la disolucin preparada se obtendr el espectro de absorcin como sigue:
a.

Generacin de un mtodo de trabajo con el espectrofotmetro UV-Vis

1.

Encender el equipo y posteriormente el equipo de cmputo; observar que el foco verde y amarillo
del espectrofotmetro se enciendan
Dejar que el equipo se estabilice, observando que el foco amarillo del costado derecho del equipo se
apagu
Entrar al software del equipos, dando click en el icono de UV-vis (Lambda 35), ubicndolo en el
escritorio del monitor
Dar click en Application, y entrar al scan (exploracin) para desarrollar el mtodo adecuado,
seleccionando los parmetros de operacin. Despus de poner a punto el espectrofotmetro, con la
ayuda del profesor, seleccionar una longitud de onda 20 nm por debajo del lmite inferior del
intervalo correspondiente y 20 nm por encima; observando el color purpura de la solucin se podr
predecir la zona del espectro en donde se obtendr la mxima absorbancia. En la seccin de Inst,
seleccionar en la Ordinate mode (ordenada modo) la respuesta en A (absorbancia); seleccionar la
lmpara de UV dando clic en ON; se recomienda que la veolicidad de scan (scan speed)velocidad de
exploracin se mantenga en 240 nm/min, al igual se deben de mantener las condiciones del Slit
(2.00 nm) avertura y Smooth suave (2 nm).

2.
3.
4.

5.

En la seccin de Sample muestra, se mantienen las condiciones de Result filename resultados del
nombre del archivo(Absorban), Calculation factor (Dilution) calculo del factor de disolucin; para
la pestaa de Number of simple, se indica el nmero de muestras que se manejaran en el anlisis,
para que el tabla que se despliega en la parte inferior se identifiquen en la columna de Sample
Identity, las muestras que se introducirn

6.

Llenar una celda con agua destilada para el desarrollo del blanco en la longitud de onda indicada y
colocarla en el portaceldas del equipo (la del fondo para este caso). Dar clic en star para iniciar la
lectura de la absorbancia para la celda de blanco

7.

Llenar la otra celda con una muestra diluida e insertarla en el otro portacelda cuando el equipo lo
solicite. Dar click en star para iniciar la lectura de la absorbancia registrando el valor ms alto para el
desarrollo de la siguiente parte de esta prctica. Si la grafica resultante no es muy clara, diluir ms la
muestra en el caso de su color sea muy fuerte
Nota. La lectura de absorbancia que se busca en esta parte del anlisis, servir para la construccin
de la curva de calibracin.

I)
1.

2.

Obtencin de la recta de calibrado

Siguiendo el procedimiento ya conocido, medir la absorbancia de cada una de las disoluciones patrn
a la longitud de onda seleccionada. Recordar que antes de la medicin se debe de medir la lectura del
blanco.
La medicin de la absorbancia de los tres patrones debe realizarse en orden creciente de
concentraciones y utilizando una misma cubeta. Para ello, despus de cada medida:

Desechar la disolucin patrn ya medida

Limpiar la cubeta con agua destilada varias veces.
Limpiar la cubeta con la nueva disolucin patrn una vez
Llenar la cubeta con la nueva disolucin patrn y medir

Q.F.B. BLANCA LIZZETH PREZ HERNNDEZ

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QUMICA ANALTICA

3.

Medir la absorbancia de la muestra problema

4.

Con las absorbancias anotadas para cada una de las disoluciones patrn, representar grficamente en
una hoja de excel, la curva de calibrado en la forma: A vs. C

5.

Mediante un ajuste de regresin por mnimos cuadrados, calcular la ecuacin de la recta obtenida.

6.

Calcular la concentracin de dicha muestra mediante dos mtodos:

Grficamente, mediante interpolacin del valor de absorbancia obtenido
Matemticamente, mediante la utilizacin de la ecuacin de la recta de calibrado

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