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COLORACIN DE GRAM
COLORACIONES DIFERENCIALES
Los procedimientos de coloracin que ponen de manifiesto diferencias entre las clulas o
sus componentes se conocen con tcnicas de coloracin diferencial. En estas se utilizan
siempre dos colorantes: uno conocido como primario y otro conocido como secundario o
contracolorante. La coloracin de Gram es uno de estos mtodos.
COLORACION DE GRAM:
En 1884, el bacterilogo dans Christian Gram desarroll una tcnica de coloracin, con
la cual pudo separar las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas. El
procedimiento se basa en la habilidad de los microorganismos de retener el colorante
cristal violeta durante su decoloracin con alcohol. Las bacterias Gram negativas se
decoloran con alcohol, las bacterias Gram positiva no se decoloran, despus de la
decoloracin con alcohol se una Safranina. Un contracolorante o (colorante de contraste)
de color rojo, el cual imparte color rosado a los organismos Gram negativos.
En este proceso se aplica un mordiente (la solucin de lugol o yodo) durante un minuto,
antes de decolorar con alcohol. El yodo se combina con el cristal violeta formando el
complejo yodo-cristal violeta, fcilmente removible con etanol, de las bacterias Gram
negativas pero no de las Gram positivas.
De todas las tcnicas, la de mayor uso en el diagnstico bacteriolgico es la coloracin
de Gram. la identificacin de una bacteria desconocida se inicia con la tincin de un
montaje mediante este procedimiento.
Prepare extendidos o frotis con cada una de las bacterias que desea examinar, en placas
portaobjetos, fje los frotis pasando la placa por la llama del mechero, cuidando de no
quemarse.
Realice la coloracin de Gram en cada uno de los extendidos de la siguiente manera:
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COLORACIN DE GRAM
Cristal violeta
Solucin de yodo
Etanol 95%
Safranina
T, seg.
20
60
10 - 20
20
RESULTADOS
GRAM + GRAM Prpura
Prpura
Prpura
Prpura
Prpura
Prpura
Incolora
Rosado
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COLORACIN DE GRAM
Elaborada por:
Fecha
07
07
2009
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