Introduccin

La determinacin de grupos sanguneos del sistema Rh se efecta enfrentando glbulos

rojos problema con anticuerpos de especificidad conocida. El grupo Rh (D) se determina
por la presencia o ausencia del antgeno D sobre los glbulos rojos, el cual puede ser
detectado por una prueba de aglutinacin directa con un suero clasificador anti-D. Una
persona que posee en sus glbulos rojos el antgeno D, se conoce como Rh positivo,
mientras que la ausencia del antgeno D denota a una persona Rh negativo. (Aburto
Almonacid, 2013).
El antgeno D es altamente inmunognico, lo cual le confiere la caracterstica de ser el de
mayor importancia clnica despus de los antgenos del sistema ABO. Se estima que
entre 30-85 % de las personas Rh D negativo que reciben una transfusin Rh D positivo
producen anticuerpos anti-D causantes de enfermedad hemoltica fetoneonatal (en el
caso de embarazadas), anemias hemolticas autoinmunes y reacciones transfusionales.
El factor Rh es una protena de la membrana que est presente en todas las clulas.
Bsicamente funciona como un antgeno que el cuerpo reconoce como propio, la cual
puede ser detectada por una prueba de aglutinacin directa con suero clasificar anti-D.
(Aburto Almonacid, 2013).
Las observaciones de Levine y Stetson en 1939 y de Landsteiner y Wiener en 1940
establecieron las bases para el conocimiento actual de la importancia clnica en la
deteccin de los anticuerpos anti-D. Aproximadamente el 15% de los individuos de raza
blanca y el 8% de los individuos de raza negra carecen del antgeno D y son fcilmente
estimulados cuando reciben este antgeno, ya sea por transfusin o durante el parto,
produciendo anti-D. (S.A.I.C, 2000).
Algunos individuos presentan una disminucin cuantitativa en la expresin de su antgeno
D, llamados D dbiles. Otros, en cambio, presentan una variacin cualitativa en la
expresin de dicho antgeno, denominados como D parcial. El antgeno D es altamente
inmunognico siendo responsable de severas reacciones post-transfusionales y de la
enfermedad hemoltica del recin nacido. Existen ms de 40 antgenos diferentes
identificados dentro del sistema Rh. Sin embargo, es el antgeno D, el que posee mayor
importancia en la clnica despus del sistema ABO.(S.A.I.C, 2000).

Objetivo
-

Identificar cual es el propsito de realizar un buen control de calidad de

losreactivosantisueroshemoclasificadores en el banco de sangre (Anti D).

MARCO TEORICO

El factor Rh (factor Rhesus) fue caracterizado en 1939 por Levine y Stetson, quienes
encontraron el anticuerpo en el suero de una madre cuyo nio tubo Enfermedad
hemoltica del recin nacido. La enfermedad hemoltica del recin nacido es causada por
el paso transplacentario de anticuerpos IgG que se unen a los eritrocitos fetales. Cuando
los eritrocitos fetales contienen algn antgeno heredado del padre y que no lo posee la
madre, acceden a la circulacin materna, se forman anticuerpos de clase IgG, stos
atraviesan la placenta y se unen a los hemates fetales, los cuales son destruidos
fundamentalmente en el bazo (macrfagos, linfocitos y Nk). La hemlisis llevar a la
anemia, y por ende a la fisiopatologa de esta enfermedad. (Omeaca Ters, de la
Camara Mendizabal, & Valverde Nuez, 2008)
Existen 3 diferentes propuestas para la terminologa del sistema Rh

(Factor Rh/Du, 2012)

En general se han identificado ms de 45 antgenos del sistema Rh, pero son ms
frecuentes 5 de ellos, los cuales son: D, C, E, c, e. Despus del "D" los antgenos C, E,
c y e son los de mayor importancia en el sistema, estos 5 antgenos son los responsables
de ms del 99% de los problemas clnicos relacionados con este sistema, ya que
algunos individuos que carecen de alguno de ellos, pueden producir anticuerpos contra el
antgeno faltante. . (Baptista Gonzales, 2005)
El principal antgeno Rh es el D y el anticuerpo presente de quienes carecen de antgeno
D es el anti-D. Si el antgeno D est presente el fenotipo es Rh positivo y si D est
ausente es Rh negativo.
La transfusin de sangre de un Rh+ a un Rh induce la formacin de anticuerpos, que en
repetitivas donaciones puede formar cogulos. De ah es donde radica la importancia de
tener en cuenta dicho factor. Los donantes con Rh negativo pueden donar tanto a
receptores negativos como a positivos, y los positivos solamente a los positivos.

Hay tcnicas que se usan en el laboratorio clnico para medir el control de calidad de
sueros hemoclasificadores, y estas son:
Avidez: es una medida de capacidad de unin y la velocidad con el cual el anticuerpo se
combina con su correspondiente antgeno. (Tiempo en el que se demora en actuar el uno
con el otro). (Sanchez).

Especificidad: Es la reactividad selectiva de un anticuerpo con su correspondiente

antgeno, evitando que llegara a reaccionar con otras, por lo que cada antisuero se hace
reaccionar con las diferentes celular y se observa si hubo aglutinacin inespecfica. El
grado de reaccin se califica como fuerte, dbil o negativo. (Sanchez).
Titulacin: se mide como la fuerza del anticuerpo. Se hacen diluciones del antisuero y
hacen reaccionar con glbulos rojos lavados conocidos. El titulo es expresado, como el
reciproco de la dilucin ms alta que produce una reaccin de aglutinacin de una cruz
(1+). (Carbajal, 2012).
Existen normas generales que se deben tener encuenta para el almacenamiento y uso de
los sueros hemoclasificadores
Recepcin de reactivos
Verificar la apariencia fsica del empaque, en el sello de garanta y la caducidad
Verificar caractersticas fsicas del reactivo: color, transparencia, presencia de
hemolisis y volumen.
El almacenamiento debe ser de acorde con las indicaciones del productor.
Leer y almacenar los instructivos hasta terminar el lote.
Control de calidad de los diferentes sueros y clulas reactivo. (Sanchez)

PROCEDIMIENTO DE LA PRCTICA PARA EL Anti-D

TECNICA DE AVIDEZ al 40%

La placa de vidrio se debe calentar

en la lmpara de aglutinoscopio
antes de comenzar la reaccin.

Para hacer la dilucin de la sangre,

se adicionan 600 ul de solucin
salina y 400 ul de la muestra

Se empieza a contabilizar
con el cronmetro desde el
momento que se unen las
gotas hasta que aparezca
una aglutinacin en la placa,
y se informa.

Una vez la placa este caliente, se

le agrega en un extremo una gota
de la dilucin antes realizada, y en
el otro extremo una gota de anti-D

TECNICA DE ESPECIFICIDAD AL 5%

La suspensin al 5% se realiza
tomando 950 ul de solucin salina
y 50 ul de la muestra.

Para la especificidad se utiliza

dos suspensiones al 5%. Una
con Rh+ y otra Rh-

De cada una de las suspensiones se

transfiere 1 gota a un tubo de ensayo
diferente, y despus se le agrega una
gota a cada uno del anti-D

Centrifugar
por
30
segundos y hacer la
lectura

TECNICA DE POTENCIA AL 5%

En la potencia se realiza una

suspensin de la muestra al 5%.

En esta tcnica en vez de solucin

salina, se utiliza albmina; sta se
encuentra a una concentracin de
30% y para utilizarla debe estar al 6%,
para ello se realiza una dilucin

Por cada 2ml de albumina se necesitan

8ml de solucin salina, entonces para
hacerlo en menor cantidad, se toman
0.5ml de albumina y 2ml de solucin
salina, para que quede la dilucin al
6%

5
Se toman 10 tubos de ensayo, a
/0/31
61
2
2
/28
4
1
/11//5
1/2la 11/1
1
todos se le agregan 100 ul de
24
2
46
86
albumina al 6%

Se coloca otro carril de 10 tubos

Al primer tubo (1/2) se le agrega 100 ul de anti-D, de esta marcados igual que el carril anterior,
solucin se extrae 100ul y se transfieren al 2do, y as se extrae 50ul de la dilucin anterior
colocndolos
en
el
tubo
sucesivamente hasta lograr la dilucin del ltimo tubo
correspondiente.

Se pone el segundo carril de

tubos al bao mara durante
10 minutos a 37C

Se le agrega 50 ul de la
suspensin de la muestra
que se realiz al principio
a cada tubo

Pasados los 10 minutos, se

colocan en la centrifuga
durante 30 segundos y se
hace la lectura.

Resultados

En la Avidez nos dio aglutinamiento en 34 segundos.

En la especificidad nos dio en las clulas negativas resultado negativo,
reactividad o y en la clulas positivas nos dio resultados positivos, reactividad 4+.
En la potencia se hicieron diluciones y dio reactivo hasta 1/28.
En 1/2 4+
En 1/4 4+
En 1/8 3+

En 1/16 2+
En 1/32 2+
En 1/64 1+
En 1/128 1+

Conclusiones
Con esta prctica de laboratorio nos dimos cuenta que el suero hemoclasificado
cuenta con un buen tipo de avidez y especificidad, pero la titulacin nos dio muy
diferente a la que debe presentar el antisuero Rh, teniendo en cuenta que la
prueba se repiti para poder confirmar si hubo algn tipo de error. Se cont con
una titulacin de 1: 128 y su ttulo mnimo es 1:64.

 Hay que tener en cuenta que si sus ttulos se pasan o no estn dentro de lo
estipulado como mnimo, nos pueden causar falsos positivos a la hora de realizar
un grupo sanguneo y podemos colocar en peligro la vida de una persona; por eso
es importante revisar detalladamente si el reactivo no presenta una alteracin, su
etiqueta, fecha de vencimiento, su estado de almacenamiento, la forma de pipeteo
o errores humanos que puedan presentarse por descuido nuestro al realizar la
prueba.
Debemos tener en cuenta que igual que el sistema ABO, en el sistema Rh
tampoco se puede trasfundir el antgeno Rh a las personas que no lo tengan (Que
no sean compatibles) ya que se podran originar la produccin de anticuerpos Rh
receptor; en este caso los Rh negativos solo podrn recibir sangre de donantes Rh
negativo e igual para los positivos.

Referencias
Aburto Almonacid, A. (2013). Recomendaciones para la clasificacion sanguinea
RhD. Chile .
Baptista Gonzales, H. A. (2005). El sistema Rh una mirada a findo. Revista
Mdica del IMSS.
Carbajal, E. (2012). Control de Antisueros .

Factor

Rh/Du.
(Noviembre
http://factorrhdu.blogspot.com/

de

2012).

Obtenido

de

Omeaca Ters, F., de la Camara Mendizabal, C., & Valverde Nuez, E. (2008).
Enfermedad hemoltica del recien nacido. Protocolos Diagnstico Teraputicos
de la AEP.
S.A.I.C, W. L. (2000). Anti - D (Rho) monoclonal, Reactivo para la deteccion de
antigeno D.
Rosario , Argentina .
Sanchez, R. W. (s.f.). Control de calidad en sueros hemoclasificadores . Mxico :
Laboratorio de Inmunomatologa .