1.7 Regulacin de la accin gnica en procariontes.

Modelos de
control negativo y positivo.
Diferenciacin celular y regulacin gnica en
eucariontes.

Ctedra de Gentica y Mejoramiento Vegetal y Animal

Regulacin de la Accin Gnica en

Procariontes

Dogma central de la biologa molecular

Porque regular la expresin gnica?

Economa de recursos:
Los genes necesarios en el
momento necesario .
E. coli puede producir ms de 1700 enzimas y
otras protenas. Pero la sntesis no ocurre al
mismo tiempo

Respuesta rpida a
cambios ambientales
Ej. Cambios en el ambiente
nutricional
La regulacin de la expresin de los genes
surge de la necesidad de controlar la actividad
de las enzimas o de las protenas en general,
en momentos precisos de la vida de la clula.

Transcripcin
En la clula procariota, la transcripcin y la traduccin tienen lugar en el
mismo sitio por la ausencia de membrana nuclear.

Regulacin gnica

Los mecanismos de regulacin mejor conocidos son los de

las bacterias.
Utilizan una actividad reguladora de conexinconexin-desconexin
mediante el control de la transcripcin.
La regulacin implica interacciones entre el ambiente
qumico de la clula y protenas reguladoras especiales,
codificadas por genes reguladores

Sitios de regulacin en procariotas

Regulacin de la transcripcin:
Modelo del OPERON :
Control Negativo:
Inducible . Ej: Opern LACTOSA
Represible. Ej: Opern TRIPTOFANO
Control Positivo: Ej: CAP- AMPc

Atenuacin: Ej: Opern Triptfano

Regulacin de la traduccin:
EJ: regulacin del sntesis de protenas ribosmicas.

Trascripcin
Traduccin

Regulacin gnica
conjunto de mecanismos que controlan la sntesis de
determinados productos genticos

Regulacin coordinada:
Si varias enzimas actan en secuencia en una va metablica,
o se sintetizan todas o no se sintetiza ninguna de ellas.

Por qu sucede esto?

La regulacin se realiza sobre la sntesis de un nico
ARNm policistrnico que codifica todas las protenas
requeridas en esa ruta metablica y se conoce con el
nombre de regulacin coordinada.
coordinada.

Los ARNm Policistrnicos presentan secuencias de longitud variable que

separan las regiones codificantes o Cistrones, estas se denominan
regiones espaciadoras, usualmente de 10 pb. de longitud. Cada Cistrn
posee un codn de inicio y uno sin sentido.
Espaciadores

Expresin de la informacin gentica - Transcripcin

Promotores:
Regiones de reconocimiento y unin para la ARN polimerasa

David Pribnow, 1975.

*Caja de Pribnow (tambin conocida como Caja de Pribnow-Schaller)(CP); su extremo derecho se encuentra a 5-10
bases antes de la primera base que se transcribe. Posee una secuencia variante de la secuencia bsica TATAATG
(secuencia consenso). Orienta a la ARNpol sobre el sentido de la sntesis y es donde se abre la hlice. Posee una T
conservada entre 6-9 bases antes de la iniciacin del ARNm
*Secuencia -35; es una secuencia de 9 bases ubicada 35 bases antes del sitio de iniciacin de la transcripcin. Es el
sitio de unin de la ARNpol

Mecanismos de regulacin a nivel de la transcripcin

Un medio principal de regulacin gentica en las bacterias es el sistema
opern. Un Opern es grupo de genes estructurales cuya expresin est
regulada por los mismos elementos de control (promotor y operador) y
genes reguladores.

(1920-2013)

(1910-1976)

En 1961 apareci la publicacin de Jacob y Monod (Premio Nobel en

1965) sobre la teora del opern referente a la regulacin de los
genes. Jacob F, Monod J. (1961). Genetic regulatory mechanisms in
the synthesis of proteins. J Mol Biol; 3: pp. 318-356

Estructura de un opern
Opern: conjunto de genes contiguos transcriptos en un
mismo ARNm policistrnico, ms los elementos de
control (promotor y operador) y genes reguladores.
Genes estructurales del opern
opern:: Se trata de los genes cuya
expresin est regulada.
regulada. Codifican un grupo de protenas
funcionalmente relacionadas y se transcriben como una sola
molcula de ARN
ARNm
m policistrnico
policistrnico..

Estructura de un opern
Gen regulador (R): gen que codifica la protena reguladora
(polipeptido que se unir al operador)
operador).. Puede estar localizado a cierta
distancia en el cromosoma bacteriano
bacteriano..
Operador (O): Es una regin del ADN con una secuencia que es
reconocida por la protena reguladora
reguladora.. El operador se sita entre la
regin promotora y los genes estructurales.
estructurales. .
Promotor (P): sitio de unin de la ARN polimerasa en la molcula de
ADN..
ADN

Estructura de un opern
Protena reguladora: protena codificada por el gen regulador. Est
protena se une a la regin del operador.
Inductor/represor: sustrato o compuesto cuya presencia
induce/reprime la expresin de los genes (interacta con la protena
reguladora).

Control negativo:
Se dice que un sistema est bajo control negativo cuando el producto
del gen regulador reprime o impide la expresin de los genes, acta
como un represor.
Opern con control negativo inducible : Opern Lactosa
Opern con control negativo represible: Opern Triptfano
Tanto la induccin como la represin son formas de regulacin negativa.

Control positivo:
Se dice que un sistema est bajo control positivo cuando el producto
del gen regulador activa la expresin de los genes, acta como un
activador.
Activacin del Opern Lactosa por complejo CAP- AMP ciclico

Los operones inducibles y represibles son ambos desconectados

por protenas represoras codificadas por genes reguladores.
reguladores. El
represor se une al ADN en el operador
operador y evita, de esta forma, que
la ARN polimerasa inicie la transcripcin
transcripcin..
Protena represora

Opern con control negativo inducible : Opern Lactosa

El opern lac es un ejemplo de un opern inducible. Pasa de "desconectado"
a "conectado" cuando un inductor se une al represor y lo inactiva. La molcula
del represor es activa, hasta que se combina con el inductor (en este caso,
alolactosa).
En los operones inducibles, el inductor contrarresta el efecto del represor
unindose a l y mantenindolo en una forma inactiva. As, cuando el inductor
est presente, el represor ya no puede unirse al operador y pueden proseguir
la transcripcin y la traduccin

Opern lac
Se requieren dos protenas para el metabolismo
de la lactosa:
-galactosidasa

Lactosa permeasa

Hidroliza la lactosa dando

galactosa y glucosa
(obtencin de energa)

Permite la entrada de
la lactosa en la clula

Opern desconectado

Opern conectado

O
P
E
R

N
I
N
D
U
C
I
B
L
E

Opern con control negativo represible: Opern Triptfano

Pasan de "conectado" a "desconectado" por la accin de un correpresor,
que se une a un represor inactivo. ste activa al represor que se une al
operador. El represor se activa slo cuando se combina con el
correpresor.
Cuando hay altas concentraciones de triptfano en el medio celular,
este mismo es el que se une al represor y no permite de esta manera que
se transcriban los genes que codifican las enzimas responsables de la
sntesis del triptfano. Es decir que cuando disminuye la concentracin de
triptfano, este se libera del represor y comienza la transcripcin.

O
P
E
R

N
R
E
P
R
E
S
I
B
L
E

Control positivo: Sistema CAP-AMPc.

Algunos operones bacterianos poseen promotores que no pueden ser
usados eficientemente por la ARN polimerasa de forma directa para el
inicio de la transcripcin.
Adems, requieren protenas auxiliares activadoras. Es decir, la
transcripcin de estos operones no ocurre (o en todo caso ocurre a un
nivel basal bajo), a no ser que la protena activadora se una a zonas del
ADN cercanas al promotor (normalmente al lado 5' respecto del
promotor).
Control positivo del Opern LAC

Cuando la bacteria E. coli crece en un medio que contiene glucosa,

prefiere este azcar como fuente de energa y como consecuencia los
operones que producen las enzimas necesarias para obtener energa de
otros azcares estn bloqueados.

Control positivo: Sistema CAP-AMPc.

Elementos del circuito regulatorio:
Gen crp: codifica la protena regulatoria: la denominada protena relacionada
con la represin catablica (CRP), tambin conocida como protena activadora por
catabolitos (CAP). Tal como es sintetizada por el gen crp, la protena CAP es inactiva.
Pero cuando la bacteria posee niveles adecuados de AMPc (que acta como
inductor), ste se une a la CAP, lo que conduce a que CAP cambie de conformacin:
en esta nueva configuracin el complejo CAP-AMPc reconoce una secuencia cercana
al promotor del opern lac (hacia su lado 5'), y acta como activador del inicio de
transcripcin de este opern.

Gen cya: codifica la adenilato-ciclasa, enzima que convierte el ATP en AMPc.

Opern lac: a la descripcin que ya dimos, solamente aadir que a la izquierda
(o sea, al lado 5'o "aguas arriba") del promotor existe una secuencia , que como
acabamos de ver es el lugar de reconocimiento del complejo activador CAP-AMPc.

El AMP cclico como regulador

El AMPc es el segundo mensajero usado directamente en la regulacin de la
expresin del opern lac en respuesta a los cambios de concentracin de glucosa.
El AMPc es un co-activador de la protena CAP (CRP).
La concentracin de glucosa afecta la actividad de la enzima adenilato-ciclasa, que es
la responsable de convertir el ATP en AMPc.
Cuando baja la concentracin de glucosa, se eleva la de AMPc y se

estimula la transcripcin con el opern lac. Cuando se eleva la

concentracin de glucosa, cae la de AMPc y deja de activarse la sntesis
del mRNA a partir del opern lac.

Nivel bajo de glucosa

Con concentraciones bajas

de glucosa la Adenilato
ciclasa convierte el ATP en
AMPc.
El AMPc se une a la
protena CAP activndola.
El complejo CAP AMPc
activa la transcripcin del
opern LAC.

Ejemplos de otros operones controlados

positivamente por CAP-AMPc:
opern ara (del catabolismo de la arabinosa)
opern gal (del catabolismo de la galactosa)
opern mal (del catabolismos de la maltosa)

Regulacin de la traduccin
Secuencia de Shine-dalgarno

Regulacin por protenas que "ocultan" el sitio de unin inicial del

ARNm al ribosoma (enmascarando la regin de inicio de la
traduccin, que incluye la secuencia de Shine-Dalgarno);
Regulacin por un ARN regulador antiparalelo que forma un
hbrido de ARN de cadena doble con la porcin 5' del mensajero,
con lo cual igualmente deja oculta la secuencia de Shine-Dalgarno.

Regulacin de la traduccin

Operon NOD (nodulacin) control inducible

Las races de la planta secretan molculas de bajo peso
molecular
(flavonoides)
que
son
reconocidos
especficamente por la protena nod D de la bacteria. Las
cuales responden sintetizando otras seales especficas,
conocidas como factores Nod, codificados los genes nod A,B
y C.
Nod D : gen que codifica para la protena NOD D, encargada
del reconocimiento del flavonide especfico y luego la
activacin del opern.
Nod A B C: genes regulados que codifican para la sntesis
de distintos factores de nodulacin que sern reconocidos
por la planta y desencadenarn una serie de eventos que
culminarn con la nodulacin.
CAJA Nod: secuencia de regulacin altamente conservada
que reconoce el factor de transcripcin Nod D. La unin de
la protena Nod D activa a sta secuencia, posibilita la
transcripcin del opern.

Operon NOD (nodulacin) control inducible

Eso es todo por hoy..!

Atencin
Algunas de las ilustraciones de la presente presentacin son de
dominio pblico en la red. La ctedra no se atribuye ningn derecho
de autor sobre las mismas.
Solo se han utilizado con un propsito didctico, por su utilidad en
temas especficos.
Agradecemos a los autores annimos de las mismas por su
colaboracin.
Ofrecemos esta presentacin en el mismo sentido.