MATERIAL

Pipetas
Reactivo 1
Reactivo 2
Orina
Bao mara
Espectrmetro
Tubos de ensayo
METODOLOGIA

El test de la urea es un anlisis que se realiza por separado o en una peticin

general de bioqumico en la sangre. Mide la cantidad (concentracin) de urea o
nitrgeno ureico presente en la sangre.
La urea es el resultado final del metabolismo de las protenas. Se forma en el
hgado a partir de la destruccin de las protenas. Durante la digestin las
protenas son separadas en aminocidos, estos contiene nitrgeno que se libera
como in amonio, y el resto de la molcula se utiliza para generar energa en las
clulas y tejidos. El amonio se une a pequeas molculas para producir urea, la
cual aparece en la sangre y es eliminada por la orina. Si el rin no funciona bien
la urea se acumula en la sangre y se eleva su concentracin.

El paciente recolectara su orina dentro de un rango de 24 horas.

De esta manera los envases donde la vaya recolectando sern rotulados

con los siguientes nombres: blanco, estndar y patrn.

Se le aadir 1 ml a los tres tubos de ensayo b reactivo 1, del patrn 25
micro litros al tubo rotulado como patrn y de la muestra 25 micro litros al

tubo rotulado como muestra.

Se mezclaran y se encubara por 1 minuto.
Pasado este tiempo s ele agrega el reactivo 2.
Se le coloca 1 ml a los tubos de la misma manera que con el reactivo 1.
Se incubara por 15 minutos a 37C.
Posteriormente se colocara a bao mara.
Finalmente se medir la absorbancia de los tres tubos para esto es
necesario el espectrmetro a 510 nm.

RESULTADOS
Blanco: 0
Estndar: 0.247
Problema: 0.116
Calculo: 0.247 = 0.460 x 50 = 23.45
Total: 23.45
Normalidad: 20% a 50% mg

DISCUSION
En la prctica se logr observar como para cada anlisis se deben realizar los
procedimientos adecuadamente y de la forma determinada para cada anlisis para
que no tengamos discrepancias en nuestros resultados como ocurri con las
muestras de orina.
CONCLUSION
En esta prctica se logr hacer la determinacin de urea ( la cual es el resultado
final del metabolismo de las protenas)en suero (debido a que si se utiliza la
sangre entera, es decir plasma + suero, en estos hay una gran diferencia de
valores que existe entre el suero y los eritrocitos, por lo que se prefiere el suero o
en su defecto el plasma para esta determinacin)mediante una reaccin
colorimtrica en donde la urea presente en las muestras reaccion con el
oftalaldehido en medio cido (solucin de boratos, que son sales o steres de
cido brico) originando as un complejo coloreado (rosa) que se cuantific
espectrofotomtricamente dando as como producto a la isoindolina, la cual le
proporcion la coloracin a la muestra y de esta manera la intensidad del color
formado por la reaccin fue proporcional a la concentracin de urea en la muestra
ensayada. De esta manera al realizar la lectura en el espectrofotmetro logramos
obtener las absorbancias en el espectro de luz visible en verde (que va de 500
560nm y nuestra lectura fue en 510nm) de urea de cada muestra y con ayuda de
las frmulas para los clculos.

MARCO TEORICO

La urea es uno de los constituyentes nitrogenados no proteicos (NNP) ms abundantes en el

cuerpo. Los dems son la creatinina, el cido rico, el amonio y los aminocidos.
En otros tiempos todos eran medidos juntos (prueba del NNP), pero debido a que
el anlisis de cada componente por separado es bastante sencillo y proporciona
datos ms precisos, las pruebas individuales han sustituido al global casi por
completo. La urea es el principal producto nitrogenado de desecho del
metabolismo de las protenas y slo se sintetiza ene l hgado. Su concentracin es
igual en todos los lquidos corporales, con excepcin de la sangre entera debido a
la diferencia de valores que existe entre el suero y los eritrocitos. Por lo tanto, se
prefiere el suero o plasma a la sangre entera para analizar el nitrgeno de urea.
Las determinaciones de urea y creatinina en suero son dos de los estudios ms
solicitados para detecta la capacidad del rin para excretar desechos
metablicos. La elevacin de estos valores s e emplea, junto con otros, como
indicador de la necesidad de dilisis en pacientes con insuficiencia renal crnica.
La interpretacin de los valores del nitrgeno de urea exige el conocimiento de la
ingestin de protena exgena y de lquidos, y las condiciones que pueden
incrementar la produccin endgena (por ejemplo: la actividad muscular, un
traumatismo, la infeccin de una dieta muy restringida, el ayuno o la inanicin).
Cualquiera de estas variables puede aumentar la concentracin sangunea o
urinaria que en s mismo no es un reflejo real de la depuracin renal de urea.
Pueden usarse dos pruebas, con las debidas precauciones e la interpretacin,
como indicadores aproximados de mejora o deterioro de la funcin renal del
individuo. Aunque las determinaciones de urea es mucho menos especfica que de
la creatinina srica, es de uso comn, particularmente en pediatra, como una
prueba de rutina para la funcin renal y para conocer algo sobre el estado de
hidratacin del individuo. Grados menores de disfuncin renal requieren anlisis
ms sofisticados como las pruebas de depuracin.

Urea como producto final en el ser humano

Un ser humano moderadamente activo que consume cerca de 300 g de
carbohidratos, 100 g de grasa y 100 g de protenas diariamente, debe excretar
aproximadamente 16.5 g de nitrgeno al da, 95% en la orina y 5% en las heces.
Para las personas que consumen dietas occidentales, la urea sintetizada ene
l hgado, liberada hacia la sangre y depurada por los riones, constituye de 8090% del nitrgeno excretado.
Formacin de la urea
La sntesis de un mol de urea requiere de tres moles de ATP, un mol de amoniaco
y el nitrgeno de alfa amino del aspartato. Enzimas que catalizan las reacciones:1.
Carbamoil

fostafo

sintasa

I2.

Orinitin transcabamoilasa3.

Arginasa4. Argininosuccinasa5. Acido argininosuccnico sintasa. De los seis

aminocidos participantes el N-acetilglutamato funciona nicamente como un
activador enzimtico. Los dems sirven como portadores de tomos que en ltima
instancia se convierten en urea. En los mamferos, la funcin principal de la
ornitina, la citrulina y al argininosucinato est en la sntesis de urea. La biosntesis
de urea es un proceso cclico. La ornitina consumida en la reaccin es degenerada
en

la

reaccin5

no

hay

prdida

ni

ganancia

total

de

ornitina,

citrulina, argininosuccinatoo arginina. Sin embargo el ion amonio, CO

2 y ATP y aspartato s se consumen, algunas reacciones de la sntesis de urea
tiene lugar en la matriz mitocondrial en tanto que otras se realizan en el citosol.