Cromatografa de gases

Identificacin y cuantificacin de alcoholes en

bebidas alcohlicas.
Objetivos
Conocer el fundamento, las partes de un cromatgrafo de gases, as como su
manejo y cuidados necesarios.
Estudiar los parmetros que afectan la elucin, la resolucin y la eficiencia de los
picos en la cromatografa de gases.
Separar, identificar y cuantificar etanol y metanol en licores comerciales
mediante el mtodo de estndar interno, empleando el factor respuesta.

Introduccin
La cromatografa es bsicamente una tcnica de separacin, su gran capacidad para
resolver muestras complejas ha conducido a utilizarla cada vez ms como tcnica
analtica. Esta utilizacin, ha conducido al desarrollo de una instrumentacin, que
utilizando siempre la separacin por elucin, puede operar en continuo, con mayor
eficacia en la separacin y con un mayor control de las condiciones cromatograficas
para incrementar la reproducibilidad de los resultados.
Entre las tcnicas cromatograficas utilizadas con fines analticos, la cromatografa de
gases es probablemente la tcnica de ms amplia utilizacin; ninguna tcnica analtica
puede ofrecer su capacidad de separacin o su sensibilidad a la hora de analizar
compuestos voltiles. Por otra parte, el hecho de que con esta tcnica las mezclas
sean separadas en fase gaseosa, establece los lmites de su utilizacin que estarn
marcados fundamentalmente por la estabilidad trmica de los compuestos a separar.
Por lo general, la utilizacin de la cromatografa de gases est restringida a la
separacin de compuestos con un peso molecular menor de 1000 a una temperatura
mxima de trabajo de aproximadamente 400 C; dentro de estos lmites, como ya se ha
mencionado, la nica limitacin existente ser la estabilidad trmica de la muestra.
Para realizar una separacin mediante cromatografa de gases, se inyecta una
pequea cantidad de la muestra a separar en una corriente de un gas inerte a elevar
temperatura; esta corriente de gas, atraviesa una columna cromatografica que separa
los componentes de la mezcla por medio de un mecanismo de particin (cromatografa
gas lquido), de adsorcin (cromatografa gas solido) o, en muchos casos, por medio de
una mezcla de ambos. Los componentes separados, emergern de la columna a
intervalos discretos y pasaran a travs de algn sistema de deteccin adecuado, o bien
sern dirigidos hacia un dispositivo de recogida de muestras.

Metodologa

Observaciones
El volumen inyectado para el anlisis de cada analito por separado fue de 0.2
L.
El volumen inyectado para realizar los cromatogramas de la mezcla de alcoholes
estndares fue de 0.5 L.
El cromatograma con gradiente de temperatura se inici a 60 C con una rampa
de 20 C, hasta 200 C y Hold 5
El volumen de muestra inyectado para la cuantificacin de etanol fue de 5 L
Las concentraciones de los estndares y las muestras estn expresadas en
molaridad (M)
En el cromatograma isotrmico del estndar n-amlico se obtienen 2 picos el
cual el ltimo corresponde a este.

Resultados
Tabla 1.- Anlisis isotrmico 100 C de cada muestra
Analito
MeOH
EtOH
npropan
ol
nbutanol
namlico

tR
(min)
2.95
3.166
3.683

W 1/2

rea

18
72
14

96014.019
1008.368
84786.663

4.666

44

6.566

36

250336.29
4
212997.55

Tabla 2.-Anlisis isotrmico 200 C de la mezcla de alcoholes

Analito

W 1/2

rea

MeOH

tR
(min)
3.116

35

EtOH

3.116

35

npropan
ol
nbutanol
namlico

3.116

35

229644.02
8
229644.02
8
229644.02
8

3.116

35

3.116

35

229644.02
8
229644.02
8

Tabla 3.- Comparacin de separacin de alcoholes mediante anlisis isotrmico y con

gradiente de temperatura
Analito
MeOH
EtOH
npropano
l
nbutanol
namlico

100 C
tR

200 C
tR

100 C
W

200 C
W

gradiente
W

3.116
3.116
3.116

gradient
e
tR
4.133
4.65
6.35

3.083
3.083
3.716

44
44
56

255
255
255

26
65
59

4.666

3.116

8.116

51

255

41

6.583

3.116

9.733

156

255

101

Tabla 4.-Calculo de la resolucin en los diferentes anlisis trmicos

( t r 2t r 1 )
100
C

200
C

gradient
e

0.5(W 2+W 1)
100 C

200 C

gradient
e

Rs =

100 C

( t r 2 tr 1)
0.5 ( W 2+W 1 )

200 C

gradiente

0
0.633
0.950
1.917

0
0
0
0

0.517
1.700
1.766
1.617

44
50
53.5
103.5

255
255
255
255

45.5
62
50
71

0
0.013
0.018
0.019

0
0
0
0

0.011
0.027
0.035
0.023

Cuantificacin de Etanol y metano en una muestra destilada de

mezcal y tequila Vrtigo
Se prepararon los sistemas como se muestran en la tabla:

Std`s
Prob MeOH
Prob EtOH

MeOH
(L)
200
-

EtOH
(L)
200
-

Prop (L)

Vproblema
(mL)
10
0.24

100
100
100

Vaforo
(mL)
10
10
10

La concentracin se calcul de la siguiente manera:

[ M ]=

V an xxE
x 105
V aforo xPM

Experimentalmente se obtuvieron los siguientes datos para la obtencin de las F met y

FEt.

rea

met
et
pro

[M]

58172.06 0.511348
7
31
74394.41 0.342963
75
04
63412.98 0.131786
35
94

area
[X]/[E.I]
an/area
E.I
0.917352 3.880113
63
59
1.173173 2.602405
27
31
1
1

0.236424
17
0.450803
44
1

Los factores respuesta se calcularon de la siguiente manera

Area Analito
Area E . I
F=
[ Analito ]
[E. I ]
En este caso el estndar interno es el propanol (E.I), el metanol y etanol son los
analitos.
Ahora se procede a calcular el contenido de etanol y metanol contenido en las
muestras con los datos de los cromatogramas

Met
Et

rea
analito

rea E.I

[E.I]

[Analito]

0.2364

area
an/area
e.I
7.2961

179980.85
1
380921.43
7

24667.802

0.1317

260582.87
8

0.1317

0.4508

1.4618

0.4273

4.067

La concentracin de las muestras se obtuvo con el siguiente despeje.

Area analito
x[ E.I ]
Area E . I
[ Analito ] =
F
Se procede a calcular el % de alcohol contenido en las muestras para comparar con el
marbete
X mL Met =0.01 Lx
%Met

V
( )
V

1.5891ml x 100
=15.89
10 ml

X mL Et =0.01 Lx
%Et

V
( )
V

4.067 mol 32.04 g 1 mL

x
x
=1.5891 mL
1L
1 mol 0.82 g

0.4273 mol 46 g 1mL

x
x
=0.2488 mL
1L
1 mol 0.79 g

0.2488 ml x 100
=103.33
0.24 ml

Anlisis de resultados
Al inicio de la actividad experimental se coloc una pequea cantidad de cada estndar
para observar cual sera el orden de elucin de cada alcohol (Tabla 1) el cual fue
metanol, etanol, propanol, butanol, n-amlico este orden corresponde a l orden
creciente de sus puntos de ebullicin ya que al tener una cadena hidrocarbonada ms
grande el punto de ebullicin incrementa.
Una vez obtenido este resultado se procedi a realizar una mezcla de todos los
estndares y separarlos mediante un anlisis isotrmico a 100 C, en el cromatograma
se esperaba obtener 6 picos pero solo se obtuvieron 5 lo que nos indicaba que dos
estndares haban sido ledos casi al mismo tiempo que no se poda apreciar el pico de
cada uno, los alcoholes que estaban traslapados eran el metanol y etanol, esto tiene
sentido puesto que la diferencia de puntos de ebullicin es ms baja con respecto a los
dems, adems al calcular la resolucin de los picos esta es igual a cero (Tabla 4).
Para lograr separar estos dos analitos se decidi aumentar la temperatura pero paso
todo lo contrario puesto que se observ un solo pico en el cromatograma indicando que
todos los alcoholes se haban evaporado casi al mismo tiempo esto debido a la alta
temperatura de trabajo, al realizar el clculo de la resolucin este da un valor de cero
(Tabla 4).
Se decide realizar un anlisis con rampa iniciando con 60 C y aumentar 20 C cada 2
minutos hasta llegar a 200 C en este anlisis se logra separar cada estar de los
diferentes alcoholes e inclusive se puede apreciar que los picos que quedan ms
resueltos son entre el butanol y propanol con una R s=0.035 seguidos de etanolpropanol Rs=0.027 (Tabla 4).
Al analizar y observar cada uno de los cromatogramas con anlisis isotrmicos y con
gradiente de temperatura este ltimo resulto ser la mejor opcin de separacin ya que
los dos primeros alcoholes al tener una temperatura programada (60 C) por debajo de
su punto de ebullicin y con una tiempo de fondo de 5 minutos estos tardaron 4.133 y
4.65 min en ser eluidos los otros alcoholes se pudieron separar sin mayor problemas,
como ocurri en el anlisis isotrmico a 100 C.
Una vez obtenido el mejor programa trmico para la separacin de alcoholes se inyecta
una mezcla de metanol, etanol y propanol este ltimo se inyectara a las muestras como
patrn interno, obtenido el cromatograma de los estndares se procede a calcular los
factores respuesta del metanol y etanol (F MetOH, FEtOH) una vez calculados estos factores
se calcul la concentracin de los analitos.
Metanol.
La concentracin que se obtuvo de metanol en el licor vrtigo fue de 4.067 M o
15.89% de metanol contenido en la botella, lo cual nos indica que tiene un alto
contenido de metanol y posiblemente este es un licor adulterado.
Etanol
La concentracin que se obtuvo de etanol en la muestra fue de 0.4273 M obteniendo
un porcentaje de 103.33% de etanol en la muestra esto se debi a que se utiliz una
muestra de mezcal que fue destilada previamente lo cual nos indica que el destilado
obtena etanol con un alto grado de pureza pero aunque este fue extremadamente puro
no se debi obtener un porcentaje mayor del 100% esto se debi a que se inyecto una
gran cantidad de muestra ya que se tena que inyectar un volumen de 0.5 L y por error
del operador se inyecto 5 L lo cual es un volumen 10 veces mayor.

Conclusiones
Al trmino de la experimentacin se puede concluir que la cromatografa de gases es
un mtodo de cuantificacin eficaz y certera puesto que al tener una muestra compleja
esta puede separarse y cuantificar solo con conocer el tiempo de retencin de los
componentes a ciertas condiciones.
Adems se puede decir que la temperatura, el volumen de inyeccin y la concentracin
de los analitos son parmetros que afectan la elucin de las muestras y la resolucin
de los picos, ya que si se incrementa demasiado la temperatura todos los componentes
de la muestra se analizaran al mismo tiempo, si se inyecta mayor volumen los picos se
ensanchan pero si la muestra est muy concentrada el pico se hace ms largo y como
consecuencia de estos fenmenos los picos se traslapan y la resolucin disminuye.
La identificacin de metanol y etanol se pudo realizar de manera satisfactoria para el
licor Vrtigo y para el destilado de mezcal este ltimo con el inconveniente de que la
muestra ya haba sido destilada y el etanol se encontraba puro.
Bibliografa