ndice

Proteomica, bioqumica y la biologa molecular de Eimeria e Isospora.

Conclusiones..
Bibliografia.
Linkografia..

PROTEOMICA, BIOQUMICA Y LA BIOLOGA MOLECULAR

Proteomica ,bioqumica y la biologa molecular, de estos gneros ha sido poco
estudiados, mas actualmente esto ha tomado importancia debido a los avances en
estos campos, pero ms an, puesto que la coccidiosis ,infeccin producida por dos de
los gneros como son Eimeria e Isospora que se estn tratando en el presente trabajo
han provocado prdidas econmicas a nivel mundial , sobre todo en la crianza de aves ,
siendo uno de los motivos por el cual se ha estudiado ms la biologa molecular ,
gentica y otros aspectos

de la especie Eimeria tenella ,que afecta ms a estos

animales tomndose as como organismo modelo de este gnero (Eimeria ) y en caso

del genero Isospora , tenemos a I.belli que tienen como mesonero al hombre . .Sin
embargo los estudios siguen siendo an escasos, por tal motivo corresponde a los
cientficos dedicados a las especialidades mencionadas anteriormente proseguir con
nuevas investigaciones, tomando como base las ya existentes y lograr as nuevos
descubrimientos que permitan llevar a la utilizacin de nuevas tcnicas para bloquear
los mecanismos de infeccin y patogenicidad de tales parsitos.
Se presentan aqu una recopilacin de algunas investigaciones realizados sobre
proteomica, bioqumica, gentica y biologa molecular sobre Eimeria tenella, organismo
modelo en este gnero.
5.1. Proteomica
El papel de la morfologa y microscopa en la investigacin coccidios en
esta era genmica / protemica

El papel vital de la microscopa, microscopa de electrones sobre todo, se puede

inferir a partir del nombre del filo los Apicomplexa. Este nombre se deriva de la
identificacin ultra estructural de un grupo de caractersticas de los orgnulos en
el

extremo

apical

de

las

etapas

infecciosas

Ahora microscopa ptica y electrnica,

junto con tcnicas de genmica y
protemica moderna, juega un papel
fundamental

en

un

enfoque

multidisciplinario para mejorar nuestra

comprensin de los parsitos coccidios

Complejo apical
a) El grupo especfico de organelos que se encuentran en la parte anterior de las
etapas infecciosas que dan lugar al nombre Apicomplexa consiste de tres
estructuras distintas:

Las micronemes (pequeas estructuras en forma de cigarro),

Los rhoptries (estructuras bulbosas con conductos que van al anterior)

Los grnulos densos (estructuras esfricas) que tambin se pueden encontrar en

otras regiones del parsito

En los Coccidios, las etapas infecciosas tambin poseen un orgnulo adicional,

el conoide, que es un cono truncado compuesto por microtbulos.
b) Los nmeros absolutos y relativos de los diversos orgnulos pueden variar entre
las especies e incluso entre las etapas infecciosas en una sola especie. Por
ejemplo, los merozoitos de Eimeria tenella tienen un gran nmero de
micronemes pero pocos grnulos densos en contraste con el taquizotos de
Toxoplasma gondii que tienen numerosos grnulos densos pero pocos
micronemas.
c) Dentro de los Coccidios, este grupo de orgnulos se cree que juegan un papel
coordinado en la infeccin de nuevas clulas husped.

El contenido de los micronemes se liberan primero y estn involucrados

identificacin y la adherencia a las clulas husped adecuadas.

El contenido de los rhoptries se liberan durante el proceso de invasin y algunas

protenas se incorporan en la vacuola.

Finalmente, los grnulos densos son secretadas en y se cree que modificar la

vacuola parasitfora para facilitar el desarrollo del parsito

El uso de tcnicas moleculares, estn siendo continuamente identificaron

numerosas nuevas protenas y mediante el uso de inmuno-microscopa ptica y
electrnica que ha sido posible identificar la ubicacin de algunas de estas
molculas a uno u otro de los orgnulos apicales.

Esto puede ayudar en la comprensin de su funcin biolgica. Por microscopa

inmuno-luz, las molculas se pueden localizar en la regin apical y mediante
microscopa inmuno-electrnica que es posible identificar la posicin exacta del
orgnulo.

Es posible localizar protenas apicales desconocidos para los micronemes

protenas (MIC), las protenas rhoptries (ROP) o los grnulos densos (protenas
GRA). Tambin es posible utilizar un etiquetado doble o triple, para mostrar que
las diferentes protenas se encuentran dentro de los mismos o diferentes
orgnulos. Por ejemplo, se puede confirmar que GRA 2, 4 y 6 se encuentran
dentro de la misma de grnulos densos y tambin es posible diferenciar entre
orgnulos por su contenido de protenas con rhoptries marcados con grnulos
anti-ROP2 y densa por el anti-NTPase ,
una protena de grnulos densos .

Fig 01. b. imagen inmuno-fluorescencia de un

merozoite doble etiquetado de E. tenella mostrando
el etiquetado de la anterior con anti-MIC2 (Mic, rojo)
y el pequeo apicoplast peri-nuclear marcada con
anti-reductasa enoil (A; verde). Ncleos etiquetados
con DAPI (N, azul). Bar es de 1 mm.

Apicoplasto
Ms recientemente, tambin se han encontrado
los parsitos apicomplexos que poseer una segunda caracterstica nica.

Ellos contienen un plstido no fotosinttico, que se ha denominado el apicoplasto. Se

cree que esta residual de plstidos que se deriva de un antiguo adquisicin
endosimbitica secundaria de un alga roja.

Se ha demostrado que el apicoplasto es esencial para la supervivencia y parsitos sin

un apicoplasto son no viables. En la ausencia de un plstido, parsitos muestran un
fenotipo inusual muerte retardada.

Estos hallazgos son muy emocionantes ya que la naturaleza procariota de este

orgnulo puede representar metas nuevas y nicas para la intervencin farmacolgica.

El papel de la apicoplasto est todava no se entiende completamente pero se sabe que

est involucrada en la biosntesis el tipo II de cidos grasos y la biosntesis de
isoprenoides.

Por microscopa electrnica, se demostr que este genoma se encuentra dentro de un

orgnulo que se caracteriza por estar limitado por mltiples membranas.

Este orgnulo se identific por primera vez por microscopa electrnica en la dcada de
1960, aunque su funcin sigue siendo desconocida.

El nmero exacto de las membranas es todava controvertida, pero la presencia de

mltiples membranas permite la identificacin de los orgnulos y lo diferencia del resto
del genoma que contiene otros

orgnulos (el ncleo y la mitocondria) que estn

limitados por dos membranas.

Se ha encontrado que muchas de las protenas especficas de plstidos estn

codificadas por los genes nucleares (transferencia lateral de genes) y estas protenas
tienen que ser dirigida de nuevo a la apicoplasto utilizando una secuencia de direccin
bipartita especfica. Estudios morfolgicos iniciales de la apicoplasto examinados, in
vitro, el desarrollo asexual de los parsitos transfectadas con la protena verde
fluorescente dirigido a la apicoplasto .

Ms recientemente, los estudios in vivo utilizando anticuerpos para una protena

especfica apicoplasto (enoil reductasa) han examinado los cambios en la apicoplasto
tanto durante el desarrollo sexual y asexual en T. gondii (Ferguson et al 2005)
y E. tenella . En la fase

infecciosa (esporozoitos, merozoitos, de taquizoitos y

bradizoto) etapas del apicoplasto est normalmente presente como una sola estructura
esfrica pequea adyacente al ncleo, aunque mltiples plstidos se han observado en
los merozoitos de E. tenella.

Proliferacin (esquizogonia) Resultados asexual en la formacin simultnea de

numerosas hijas. Para garantizar su viabilidad, cada merozoito debe recibir un ncleo y
al menos un apicoplasto y mitocondria. Esto requiere un proceso estrechamente
coordinada de la energa nuclear, mitocondrial y apicoplasto divisin y segregacin. Los
posibles mecanismos estn todava bajo investigacin. Hay observaciones en conflicto
con ciertos estudios que demuestran una estrecha relacin entre la divisin nuclear y
apicoplasto, mientras que otros muestran evidencia de que la divisin nuclear y
apicoplasto son eventos independientes .Sin embargo, orgnulo segregacin de las
hijas puede implicar el polo / centriolar complejo nuclear en todos los casos. Cuando se
examin el desarrollo sexual, no se encontr que era poco cambio en el apicoplasto
durante microgametogonia y los microgametos carecan de un apicoplasto. Por el
contrario existe un marcado aumento en el tamao y la actividad de la apicoplasto
durante macrogametogonia quizs reflejando el aumento de la actividad metablica
.Esto significa que no habr herencia materna del apicoplasto con los esporozoitos,
formados dentro de los ooquistes, que recibe su apicoplasto del macrogameto.

Figura 2 una y b. taquizoitos de T. gondii de (a) y merozoitos de E. tenella (b)

marcado con anti-enoil reductasa que muestra la localizacin perinuclear de
las apicoplastos individuales o mltiples (flechas; verde). Bar es de 1 mm.

c.Alta potencia micrografa electrnica de un apicoplasto en E. tenella que

muestra las cuatro membranas limitantes (puntas de flecha). Bar es 100 nm.

Protemica de Eimeria: un enfoque en la invasin de la clula husped

Para parsitos intracelulares obligados, como el Apicomplexa, las interacciones

moleculares entre parsito y las superficies de la clula husped definen de
forma nica cada relacin husped-parsito. La naturaleza esencial de la clula
husped de reconocimiento, unin e invasin, las rondas repetidas de la
invasin que se producen durante el curso de las infecciones y la accesibilidad
del parsito extracelular hacer estas interacciones objetivos prioritarios de
intervencin.

El proceso de invasin es ms o menos conservadas entre la mayora de

apicomplexas y consta ampliamente de :
(1) en contacto con la clula de parsito
(2) reorientacin de acogida del parsito para hacer contacto apical
(3) de fijacin apretado el pice del parsito a la membrana de la clula husped
(PM)

(4) rpida invasin del parsito acompaado por la deformacin de la PM del

husped para formar una vacuola
(5) pellizcando de la PV de la PM.

El proceso es impulsado por un motor de actina miosina contrctil del parsito

y porque las protenas de superficie de clulas husped estn excluidos de la
membrana PV, parsitos dentro de la PV permanecen aislados de la va
endoctica de la clula husped.

En los ltimos aos, una hiptesis sobre la invasin apicomplejo dice que ha
evolucionado en los que estn implicados cuatro clases de protenas del
parsito, adems de las protenas motoras. Estos son los antgenos de
superficie unidas a GPI y una variedad de protenas solubles y unidas a
membrana derivadas de la microneme (MIC), rhoptry (ROP) y grnulos densos
(GRA) orgnulos secretores. Sin embargo, como con el proceso de invasin
misma hay muchas paradojas que permanecen para ser explorado en relacin
orgnulos secretores apicomplexa. El principal de stos es el hecho de que el
nmero y el tipo de orgnulos varan enormemente entre los parsitos, y entre
diferentes etapas de desarrollo del mismo parsito, e incluso pueden estar
ausentes.

Esporozoitos de Eimeria tipo se adhiere a la superficie de

una clula del epitelio intestinal .
( otras etapas mviles son merozoitos - con apical complejo
- y microgametos - con 'perforatorium (Scholtyseck)').
Encontramos contenido de micronems (ver esporozoito) en
el espacio intercelular.

El 'complejo apical' es responsable de la invasin de la

clula husped .

Esporozoitos
entra
en
la
clula
husped. Citoesqueleto se desintegra y el parsito
forma un bolsillo en el citoplasma de la clula
husped llamado la vacuola (pV). El contenido de los
rhoptries (?) (Grnulos densos) se descarga en el
PV.

Esporozoito ha entrado en la clula husped

encerrado por la vacuola .
Un cuerpo refrctil desaparecer y el esporozoito se
transforma en un trophozoite en el que la
multiplicacin de los ncleos, se iniciar.
Finamente los merozoitos de la primera generacin
se desarrollar por injerto de un cuerpo residual
multinucleadas grandes.

Fig.03. Invasin de la clula anfitriona por parsitos

coccidios

En conclusin, muchas nuevas protenas de E. tenella se han identificado a

travs de los anlisis protemicos de fracciones subcelulares de parsitos
enriquecidos, ya sea para microneme u orgnulos secretores rhoptry. La
naturaleza relativamente compleja de estos orgnulos es fcilmente evidente y el
anlisis de proteomas orgnulo-especficos de un parsito puede conducir a la
identificacin de homlogos previamente desconocidas en otros parsitos. .

Nuevas funciones para la proteasas en biologa de las infecciones provocada por

protozoos de genero eimeria .
Eimeria resistencia a los medicamentos o la tolerancia es un problema constante en
las instalaciones de produccin de aves de corral.
Invasin celular es una propiedad nica y esencial de parsitos coccidios que ha
recibido

particular

atencin

intensa

debido

sus

caractersticas

dramticas. Normalmente completa dentro de 10 a 20 segundos, zotos coccidios

potencia su camino en las clulas huspedes susceptibles con una forma nica de
locomocin, motilidad de deslizamiento.Interrogatorios moleculares de deslizamiento
motilidad y la invasin de clulas husped han revelado recientemente que las
proteasas juegan papeles centrales varios aspectos distintos de estos procesos

5.2. Bioqumica
Los avances recientes en biologa y inmunobiologa de especies Eimeria y en el
diagnstico y control de la infeccin por estos parsitos coccidios de aves de
corral

Los mecanismos bioqumicos y genticos que controlan el desarrollo de Eimeria spp.

dentro de las clulas husped no se conocen. Sin embargo, a travs del estudio de las
lneas precoces y resistentes a los medicamentos de E. tenella, dos grupos de
vinculacin asociados con estos rasgos se han identificado y cartografiado
cromosomas 1 y 2 del parasito.

Esta informacin puede ayudar a identificar otros loci genticos implicados en la

regulacin del ciclo de vida de E.tenella .

Otros investigadores han identificado recientemente un gen (ets3a) cuya expresin est
regulada por el desarrollo y que puede ser importante en el control del ciclo de vida de
E. tenella.

El metabolismo de Eimeria spp ha sido objeto de un nuevo escrutinio con el aumento de

nuestros esfuerzos para definir antgenos protectores para su uso en vacunas y para
orientar las rutas metablicas para la quimioterapia. Por ejemplo, un ciclo de manitol se
ha caracterizado en E. tenella que proporciona al parecer manitol como fuente de
energa para la esporulacin. Esta va puede ser generalizada en Eimeria spp. Enzimas
recientemente descritas en E. tenella y E. mximos se han reportado tambin, as como
una lista de las actividades enzimticas reportados previamente en Eimeria aviar.

5.4. Gentica y biologa molecular

Secuenciacin y anlisis del cromosoma 1 de Eimeria tenella revela una
organizacin segmentaria nica.
Antecedentes:

El trabajo pionero de Tyzzer (1929) estableci E. tenella como especie modelo

favorecidas para el estudio, y ofrece muchas ventajas, incluyendo la ubicuidad
en el campo, de alta virulencia y replicacin en el husped, una buena
accesibilidad tanto de su etapas invasivas (zotos) de transmisin (oocistos) y,
un sistema gentico manejable.

La cepa Houghton (H) de E. tenella , aislado en el Reino Unido en 1949 y

primero clonado en 1986, es uno de un pequeo nmero de cepas de referencia
definidos utilizados para estudios de laboratorio .

Por qu se us esta especie?

Segn lo anterior y agregando que esta es la nica Eimeria de pollo que se puede
propagar in vitro.

Caractersticas:
Del genoma:

El genoma es de aproximadamente 60 MB de tamao, con un contenido de GC de

aproximadamente 53%. Hay 14 cromosomas que varan en tamao de 1Mb a>
6Mb.Dos grandes grupos de ADN ribosomal, que representan alrededor del 2,5% del
tamao del genoma, se han mapeado como series en tndem en el cromosoma 12 (140
copias de una unidad de 8 Kb 18S-5.8S-28S) y el cromosoma 10 (500 copias de un
730bp 5S unidad).
Primer cromosoma de E. tenella :

Un cromosoma cree que llevar a loci asociados con resistencia a los

medicamentos y sabe que difieren entre las cepas virulentas y atenuadas del
parsito.

El cromosoma-que parece ser representativa del genoma es-gen-densa y rica en

secuencias de repeticiones de simples, muchas de las cuales parecen dar lugar
a repetitivas extensiones de aminocidos en las protenas predichas.

Lo ms sorprendente es la segmentacin del cromosoma en las regiones ricas

en repeticin salpicada con elementos de tipo transposn y repite los telmeroscomo, alternando con regiones de repeticin-libres.

Estructura segmentaria del cromosoma

Genes predichos difieren en carcter entre los dos tipos de segmento, y las
regiones de repeticin ricas en parecen estar asociados con la variacin de la
cepa-a-cepa.
Incluso un examen somero revela que el cromosoma se organiza en dos tipos de
secuencia, que difieren notablemente en sus caractersticas. Definimos estos
dos tipos de secuencia rica en caractersticas (R) y la funcin de los pobres (P)
segmentos. Identificamos tres grandes segmentos R de entre aproximadamente
140 y 370 kb de longitud y un total de 854 kb (63% del conjunto), separados y
flanqueado por cuatro P-segmentos de entre aproximadamente 40 y 200 kb,
siendo los ms cercanos los extremos cromosmicos el ms grande.
Una caracterstica notable del cromosoma es la abundancia de largas
repeticiones en tndem de la trinucletido CAG y de la AGGGTTT heptmero.
Ambos estn presentes casi exclusivamente en los segmentos de R-, donde
juntos representan ~ 14% de la secuencia Repeticiones de CAG se encuentran
preferentemente en los exones predichos de las R-segmentos, donde se
producen alrededor de una vez cada 200 pb en promedio.

El cromosoma tambin tiene 57 regiones con una importante similitud con

transposones lnea conocida, exclusivamente en la R-segmentos. Hay algunos
indicios de la agrupacin, especialmente de elementos estrechamente
relacionados, y con elementos adyacentes tienden a estar en la misma
orientacin. La mayor parte de estas regiones son pequeas, y no parecen
codificar genes funcionales.

Fig.04. Contenido hexanucletido de R y P-regiones. Para el segmento de secuencia R-( A ) y la

secuencia de P-segmento ( B ), los grficos muestran las frecuencias relativas (ejes verticales) de
cada hexanucleotide posible. Secuencias hexanucleotide estn dispuestos en el plano horizontal,
con los homopolmeros (T) 6 , (A) 6 , (C) 6 , y (G) 6 en las esquinas del plano como se indica. Las
secuencias de los hexmeros ms abundantes en la secuencia R-segmento (todas las
permutaciones circulares de CAGCAG o su complemento) se indican en A , el pico llamado "Tel" y
otros de similar altura son hexmeros del motivo telmero-como AGGGTTT, su complementar y
permutaciones circulares de los mismos.

Motivo Apicomplexa especfica octamero palindrmico

El palindrmico octmero TGCATGCA se ha encontrado como un motivo abundante

no slo en el genoma de E. tenella,
En E. tenella cromosoma 1, el octmero se produce 157 veces.
La mayora de estos octameros se encuentran en la R-segmentos, y son ms
abundantes en la secuencia intergnica que dentro de intrones o exones.
Este motivo aparece hasta el momento de ser nico para los Apicomplexa.

El cromosoma 1 es conocido por los polimorfismos. El polimorfismo en varios

cromosomas tambin se ha detectado en un panel de parsitos de tipo salvaje
incluyendo el Weybridge y cepas de Wisconsin, lo que sugiere que el genoma es
marcadamente plstico.

La caracterstica ms llamativa del cromosoma es su organizacin segmentada, que

se refleja en todos los aspectos de su contenido. Alrededor de la mitad del

cromosoma est en R-segmentos, que son ricas en repeticiones de varios tipos, y el

resto est en P-segmentos, que son relativamente sin rasgos distintivos. Una
cuestin importante es si esta organizacin segmentaria es tpica del resto del
genoma o peculiar de esto, el cromosoma ms pequeo. Nos encontramos (datos
no mostrados) una segmentacin muy similar en Chr2: un montaje preliminar revela
dos R segmentos, cada uno de ~ 280 kb, dividido y flanqueado por P-segmentos de
entre aproximadamente 120 y 260 kb. Los mayores contigs de la asamblea
escopeta del genoma completo curso tambin muestran este carcter bipartito,
aunque, por supuesto, que no revelan el orden de largo alcance de P y R
segmentos. Por tanto, estamos seguros de que la segmentacin se encuentra en
Chr1 es tpica del resto del genoma.

Se tiene la sospecha de que la organizacin del genoma inusual puede servir para
facilitar la rpida evolucin y diversificacin, una estrategia de beneficio para un
parsito. Los reordenamientos dentro de R segmentos pueden ser facilitados por las
abundantes repeticiones CAG entre y dentro de los genes. E.tenella su Chr1 no
tiene ninguna de las regiones subtelomricas caractersticos que, en los parsitos
tales como P. falciparum y Trypanosoma brucei , puerto poblaciones dinmicas de
los genes involucrados en la evasin del sistema inmune del husped. Sin embargo,
las repeticiones de los telmeros similares que salpican las R-segmentos de
Eimeria pueden reflejar un proceso anlogo de genoma revolver.

En apoyo de este modelo, una fuerte evidencia de la plasticidad del genoma

proviene

de

polimorfismos

de

tamao

conocidas

entre

diferentes

cepas

de E.tenella . Hemos demostrado que, en Chr1, polimorfismos de longitud de

fragmentos de restriccin entre las cepas se asocian exclusivamente con el Rsegmentos, al menos en todos los casos que hemos probado.

Los genes R-segmentos se predice con mayor fuerza, y sus protenas son notables
en la contencin de numerosas extensiones de aminocidos repetitivos derivados de
repeticiones de CAG dentro de los exones. . A pesar de repeticiones de
aminocidos son raros en las protenas de vertebrados (y a menudo estn
asociados con la enfermedad) que son comunes en varios eucariotas inferiores,
incluyendo Dictyostelium discoideum. En todos los casos, los aminocidos que
repite surgen de repeticiones de nucletidos que son caractersticos del genoma en
cuestin, y tienden a ser conservados a nivel de aminocidos, incluso cuando la
repeticin de nucletidos original de degenera. La funcin (si la hay) de protenas se
repite en estos genomas sigue siendo un misterio. Ellos pueden contribuir a la
plasticidad del genoma. Tambin se ha sugerido que tales repeticiones en las
protenas de Plasmodium y otros protozoos pueden proporcionar una "cortina de

humo inmunolgica" para ayudar a la evasin inmune de acogida sistema. Aunque

esta teora de "cortina de humo" es atractiva para los parsitos del torrente
sanguneo, no es tan atractivo para los parsitos intestinales, como Eimeria

En conclusin, la organizacin segmentaria y repetir-la riqueza de este cromosoma

(y, al parecer, del resto del genoma) plantea muchas preguntas, algunas de las
cuales slo pueden ser respondidas tentativamente. Comparacin con otros
aislados de E. tenella o con otros miembros del gnero pueden revelar si esta
organizacin se asocia con un genoma adaptables dinmico como postulamos.

Por qu se estudi el cromosoma?

Como complemento de la secuencia del genoma escopeta-ancho, proyectos paralelos

se han llevado a cabo para generar la secuencia completa de los cromosomas 1 (~ 1
Mb) y 2 (~ 1.2 Mb), que llevan marcadores genticos asociados con la resistencia a la
droga anticoccidial arprinocid y con precoz desarrollo, respectivamente
Caracterizacin molecular y anlisis comparativo de los genomas mitocondriales
de eimeria spp.
Con el fin de caracterizar los genomas mitocondriales de Eimeria . spp, se ha
determinado las secuencias de ADNmt completos de los siete especies de
Eimeria que infectan a las aves de corral, adems de dos especies de conejo
domstico: E. coecicola y E.flavescens. Adems, los genomas mitocondriales de cinco
cepas distintas de E.tenella tambin se secuenciaron.
Resultados:

Todas las secuencias de ADN mitocondrial mostr un tamao de alrededor de 6

kb y contena los genes citocromo reportados para otros parsitos apicomplexos.

Una comparacin de los genomas mitocondriales de Eimeria spp. y otros

parsitos apicomplexos mostraron una conservacin del orden de los genes y la
orientacin entre las diferentes especies, pero no a travs de gneros
distintos. Estos eventos "barajar" podran estar relacionados con el mecanismo
de replicacin de estos genomas, basado principalmente en los eventos de
recombinacin y la actividad de crculo rodante.

Otro hallazgo interesante fue el alto contenido de AT, de alrededor de 65%, con
un uso de codones altamente conservada, fuertemente sesgada hacia el uso de
bases A / T en la tercera posicin.

En cuanto a la variabilidad intraespecfica, los cinco E. tenella cepas mostraron

una conservacin alto, con slo dos timinas consecutivos se eliminan en las

cepas MC (brasileo) y Wisconsin (Amrica del Norte), en comparacin con las

cepas H, TA y Wey (aislado en el Reino Unido).

Una reconstruccin filogentica de los diferentes Eimeria especies, el uso de

ambas secuencias de nucletidos y 18S rRNA mitocondriales, mostr una buena
concordancia entre estos marcadores. Utilizando secuencias de citocromo b en
un anlisis filogentico de los Apicomplexa, las clases Coccidia, Piroplasmida y
Haemosporida fueron claramente agrupados en clados, como cabra esperar en
funcin de su taxonoma.

El progreso en el desarrollo de la transfeccin estable en Eimeria tenella

Es de esperarse que a partir de los estudios genticos sobre Eimeriaprotozoario
causante de la coccidiosisevolucionen mtodos ms sencillos y efectivos para proteger
a las aves contra esta enfermedad, predijo el profesor Martin Shirley, director del
Instituto de Salud Animal (IAH), que es la institucin ms grande de investigacin de las
enfermedades

de

los

animales

domsticos

en

el

Reino

Unido.

Los investigadores quieren descubrir qu es lo que hace que el parsito Eimeria

estimule a los pollos para que desarrollen una respuesta inmune protectora. Tambin
estn estudiando la tecnologa conocida como "transfeccin" que permite que ciertos
trozos del cido desoxirribonucleico (DNA) puedan pasar de un parsito a otro. Esta
tecnologa puede hacer posible el desarrollo de una vacuna multivalente, usando un
parsito que podra proteger contra todas las especies de Eimeria.

Isospora belli
La estructura del genoma

Isospora belli tiene ADN lineal que consta de 3049 pares de bases.

El nmero de cromosomas en la I. belli an no se ha determinado como los

cromosomas no se condensan durante la mitosis.

Muchos organismos en el phylum Apicomplexa, incluyendo el Toxoplasma gondii

muy relacionados, tienen una pieza circular de 35 kb de ADN, adems de los
cromosomas lineales.

Este ADN circular se llama apicoplasto y se cree que se origin a partir de un

plasto.

Otro organismo relacionado, Cryptosporidium parvum, no tiene

apicoplasto.

Un estudio reciente determin que C. parvum ms probable es que tiene ocho

cromosomas tambin encontr una molcula pequea densidad molecular que
podra estar relacionado con la apicoplasto.

No se sabe si I. belli tiene un apicoplasto adems de su ADN lineal.

El anlisis de secuencia del gen 18S ARN de Isospora belli y la identificacin de

los ooquistes como Caryospora

Isospora belli es un protozoario importante coccidios que parasita a los

pacientes,

tanto

inmunocompetentes

como

inmunocomprometidos,

especialmente el VIH-1 los pacientes infectados con bajos recuentos de

linfocitos CD4 +.

Durante 2002-2004, 38 pacientes infectados por I. belli se identificaron mediante

anlisis de 78.743 muestras de heces enviadas al laboratorio de parasitologa
del Hospital King Chulalongkorn Memorial en Bangkok.

Pacientes isosporiasis componen 35 tailandeses de diversas regiones del pas y

3 inmigrantes recientes procedentes de Camboya, Laos y Pakistn.

De estos, 30 eran VIH-positivos, 3 recibieron tratamiento prolongado con

corticoides para otras enfermedades y 5 individuos inmunocompetentes.

Con el fin de verificar si la heterogeneidad gentica o especies crpticas que se

producen en Isospora que

infectan a los seres humanos, se determin la

morfometra de los oocistos de todos los pacientes y se realiz el anlisis de

secuenciacin de la subunidad ribosmica pequea del gen de ARN (SSU rDNA,

18S ARN) que abarca 1680 pares de bases a partir de 26 aislamientos .

Estudio morfomtrico de ooquistes revel que dimensin de oocistos en este

estudio entre 17 y 37 (28,3 3,0) mm de longitud, de 8 a 21 (13,5 1,9) mm de
ancho y el ndice de forma (longitud por anchura) 1.3 a 3.3 (2.1 0,3).

Las secuencias de SSU rDNA revelaron variacin de la secuencia que contiene

un mnimo de 2 tipos de secuencias. Por lo tanto, no se observ correlacin
entre la cepa distinta belli I. y gravedad de la enfermedad. rbol filogentico
mostr que I. belli en este estudio fue dentro del mismo clado como I. ohioensis,
I. suis, I. orlovi, I. felis, Toxoplasma gondii y Sarcocystis sp.

En conclusin, a diferencia de Cryptosporidium que infectan a los seres

humanos que comprende tanto especies zoonticas y antropontica, nuestro
estudio demostr que isosporiasis humana es causada por una sola especie
pertenecientes a I. belli basada en evidencias morfolgicas y moleculares.

Conclusiones

Acerca de los mecanismos moleculares, gentica, bioqumica especficos de las

especies tratadas tanto en el gnero Eimeria como Isospora son escasos y
recientes, solo encontrndose de la especies E.tenella e Isospora belli como
organismos modelos de estos gneros.

Los estudios realizados tanto en gentica , proteomica , biologa molecular y

bioqumica permitir idear nuevas tcnicas como frmacos y deucbrir putnos
dbiles de estos microorganismos , para combatir la coccidiosis provada por
protozoos del genero Eimeria e Isospora ,

VII.Bibliografia ( SE POEN EN ORDEN ALFABETICO )

VIII. Linkografia

IXth INTERNATIONAL COCCIDIOSI CONFERENCE .Genome sequence of the

avian coccidiosis-causing agent, Eimeria tenella. [citado 20 de mayo de
2013]Disponible en :
http://www.coccidia.icb.usp.br/icc9/proceedings/palestras/palestra02.html

IXth INTERNATIONAL COCCIDIOSI CONFERENCE .Proteomics of Eimeria : a

focus on host cell invasion. [citado 20 de mayo de 2013]Disponible en :
http://www.coccidia.icb.usp.br/icc9/proceedings/palestras/palestra03.html

IXth INTERNATIONAL COCCIDIOSI CONFERENCE. Sequence analysis of the

18S RNA gene of Isospora belli and identification of Caryospora-like oocysts.
[citado 20 de mayo de 2013]Disponible en :
http://www.coccidia.icb.usp.br/icc9/proceedings/institucional.html

IXth INTERNATIONAL COCCIDIOSI CONFERENCE .Proteomics of Eimeria : a

focus on host cell invasion. The role of morphology and microscopy in coccidian
research in this genomic/proteomic age. [citado 20 de mayo de 2013]Disponible
en :
http://www.coccidia.icb.usp.br/icc9/proceedings/palestras/palestra04.html

<frog-tag> <saxonet.de> : Life Cycle Eimeria. http://www.saxonet.de/

CDC Parasites & Health: Isosporiasis

http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/isosporiasis.htm

NCBI Core Nucleotide: Isospora belli [citado 20 de mayo de 2013] Disponible en

: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.fcgi?db=nuccore&id=129566148